Agar Plate Count ( APC )

Medio de cultivo solido, de identificacin de organismo heterotrficos (aerobios mezo filos ,) HETEROTROFICOS Son organismos que sobreviven a cambios continuos del ambiente , como cambios leves de temperatura , intensidad luminosa y de nutrientes .que se pueden transportar por muchos medios come el areo , acutico y solidos( sobre los seres vivos, dentro de ellos ,etc)

Aerobios
Se caracteriza por estar principal en presencia en el ambiente. Organismos caracterizados por la necesidad de oxigeno ,para realizar su desarrollo y metabolismo. Su nutricin se basa en la oxidacin de la glucosa y otras sustancias libera mucha ms energa que su utilizacin anaerobia por ejemplo, la fermentacin. La capacidad de realizar el metabolismo aerobio integrando a una bacteria aerobia como orgnulo permanente, la mitocondria (teora de la endosimbiosis). Aerobiosis, es un proceso conocido como respiracin celular, usa el oxgeno para oxidacin del sustrato (por ejemplo azcares y grasas para obtener energa). Un buen ejemplo podra ser la oxidacin de la glucosa (un monosacrido) en la respiracin aerbica. C6H12O6 + 6 O2 -> 6 CO2 + 6 H2O + 38 ATP Aerobios estrictos : aquellos que no sobreviven sin oxigeno Anaerobios : que no requieren oxigeno para subsistir Micro aerobios: que necesitan una mnima cantidad de oxigeno para subsistir

MEZOFILOS Usado sobre todo en el campo de la microbiologa, se refiere a un organismo cuya temperatura de crecimiento ptima est entre los 15 y los 35 C (un rango considerado moderado). Por el contrario, los organismos que prefieren temperaturas fras se

denominan psicrfilos, y los que crecen de forma ptima a altas temperaturas son llamados termfilos. El hbitat de los organismos mesfilos incluye el suelo, el cuerpo de un animal, etc. Su temperatura ptima de crecimiento se encuentra en los 37 C, la temperatura normal de un cuerpo humano.

COMPOCICION DE NUTRIENTES DE MEDIO

NUTRIENTE Concentracin Triptona 5.0g/l Dextrosa 1.0g/l Extracto de levadura 2.5 g/l Agar 12.0g/l Ph final: 7.0 +- 0.2

PREPARACION DEL MEDIO PARA TRABAJO 1. Esterilizar el contenedor donde se agregara el agar APC. 2. Agregar 20.5 g de crudo de APC en el contenedor. 3. Agregar 1L de agua destilada en el contenedor y agitar hasta disolver y homogenizar el medio por apox. 3 minutos. 4. Poner el medio a esterilizar en el autoclave a 7 atm y a 160 C por alrededor treinta minutos corridos . 5. Retirarlo del auto clave y dejar enfriar hasta que se solidifique(no se debe trabajar con el medio directamente despus de ser auto clavado posible de solidificacin. 6. Licuar el medio en agua hirviendo ,asta homogenizar . 7. Esperar que el medio este en una temperatura adecuada y no olvidar homogenizar el medio durante su enfriamiento. 8. Colocar 1ml de la muestra en una placa petry estril . 9. Agregar 3ml aprox. de medio con un mechero a lado y homogenizar formando una cruz para evitar que los microrganismos no se aslen en las paredes de la placa.

10. Dejar reposar la placa boca abajo por 24 horas para la lectura de los organismos aerobios meso filos totales y 24 -48 horas adicionales para el recuento de mohos y levaduras.

RECONOCIMIENTO Y RECUENTO EN PLACAS Placa de 24 horas de incubacin , los mohos y levaduras no tienen una forma tradicional y definida.

Bacilos : se caracterizan por su color amarillento lechoso y en algunas veces de gran extensin Otros A.M. : se caracterizan por ser puntos solitarios y bien de finidos de color mas blancuzco y lechoso de baja extensin. Existe 94 organismos heterotrficos totales. Que segn los LMP como mximo son 500 UFC /ml.

Placa con mas de 48- 62 horas de incubacin , los hongos y mohos se distinguen claramente y se extienden inhibiendo a los otros organismos muchas veces .

Hongos y levaduras: se distinguen por tener un color mas claro , forma esponjosa cono algodn y de mayor extensin en su mayora . Mohos: se distinguen por un color mas oscuro y verdoso, con forma de formacin de su medio a sus lados extendidos homogneamente , mas pequeo que el hongo en su mayora . La tcnica usada en todo los casos es la del NMP(numero mas probable)