A anlise do DNA surgiu como o mais importante instrumento para identificao dos seres humanos desde a utilizao das

impresses digitais. A rpida evoluo das tcnicas e aplicaes da metodologia utilizando-se o DNA est fazendo com que a cincia forense passe por um perodo de enormes transformaes, graas, sobretudo ao poder de discriminao desse exame. Vrias vantagens do DNA do exame de DNA em relao aos mtodos usados anteriormente foram descritas por WEEDN & SWARNEN (1998). A primeira a utilizao de praticamente qualquer fonte de material biolgico, sangue, smen, tecidos orgnicos, clulas descamativas, dentes, ossos, plos ou outros fluidos. A segunda e talvez a mais importante seu grande poder de discriminao. A sensibilidade constitui a terceira grande vantagem. O mtodo da reao em cadeia da polimerase (PCR), pode ser utilizado com o DNA de algumas poucas clulas, de longe superando a sensibilidade dos exames tradicionais. A quarta vantagem sua resistncia aos fatores ambientais. Os exames de DNA, diferentemente dos marcadores sorolgicos tradicionais, podem ser realizados com maior segurana em amostras muito antigas e que estiveram expostas a maiores agresses ambientais. Finalmente, uma quinta vantagem reside na possibilidade de se separar o DNA proveniente dos espermatozides daquele extrado de clulas no-espermticas, o que de grande utilidade em casos de crimes sexuais. As principais aplicaes do exame na rea forense so : identificao de cadveres carbonizados e em decomposio (restos mortais e ossadas), de cadveres mutilados, de partes e rgos; casos de crimes sexuais; anlises de vestgios biolgicos, encontrados em local de crime ou a ele relacionado, para confronto com amostras-referncia de vtima e/ou suspeito; investigao de paternidade nos casos de gravidez resultante de estupro; estudo de vnculo gentico (anulaes de registros civis de nascimento, raptos e seqestros de crianas, trfico de menores e outros);

- identificao de cadveres abandonados nos casos de aborto provocado, em casos de infanticdio e de falta de assistncia ao parto .

Os laboratrios de anlise forense de DNA devem estabelecer procedimentos em relao coleta das amostras e cadeia de custdia, garantir que os testes sejam realizados com reagentes apropriados, por indivduos qualificados e que os resultados sejam interpretados por indivduos experientes.

O sucesso do exame est diretamente ligado manuteno da integridade do local de crime; qualidade da coleta; quantidade e tipo do material; forma de acondicionamento e preservao das amotras.

Os vestgios so classificados como : - amostras-referncia: so amostras de identidade (quanto procedncia) conhecida. amostras questionadas: so aquelas evidncias derivadas do local da infrao penal, de objetos relacionados a ocorrncias criminais ou de quaisquer outros pontos, e cujas origens sejam no-determinadas/conhecidas.

O exame realizado em sete etapas: extrao do DNA, quantificao, amplificao, revelao dos produtos da PCR e anlise comparativa das amostras, clculos estatsticos e elaborao de relatrio. a) Extrao

O que se busca na extrao retirar o DNA do ncleo das clulas e purific-lo. O mtodo qumico utilizado vai depender do tipo da amostra a ser analisada. a etapa mais difcil e trabalhosa, devido escassez e degradao do material , na maior parte das vezes, sujeito exposio da luz solar e intempries ou por se tratar de partes de cadver em decomposio. Nesta etapa so gastos dias, s vezes, semanas ou meses. esta dificuldade que diferencia a anlise realizada em um laboratrio de DNA forense daquelas desenvolvidas em laboratrios particulares, voltadas determinao de paternidade, onde existe abundncia de material e em timo estado de conservao. b) Quantificao na ex tra

O objetivo verificar a quantidade e a qualidade do DNA extrado. t i d o c) Amplificao

So analisadas variabilidades de tamanho em regies STRs , fazendo-se cpias de determinadas regies do DNA (loci), utilizando-se o mtodo da reao em cadeira da polimerase (PCR) . A idia da PCR a seguinte : fazer em tubo uma reao que duplicasse 1 nica molcula de DNA molde em 2 molculas, e ento duplicasse essas duas em 4, e essas 4 em 8, e ento em 16, 32, etc., rapidamente obteria-se uma infinidade de cpias de uma nica molcula original, uma reao em cadeia produzindo pedaos especficos de DNA.

d)

Revelao

Os produtos de amplificao obtidos, so submetidos corrida eletrofortica e evidenciados atravs da deteco por seqenciador automtico, onde se evidenciam picos.

e)

Anlise comparativa das amostras

Uma vez identificados os alelos para os loci estudados, dever ser feita a interpretao, para cada locus, em termos de incluso ou excluso do indivduo pela comparao de seus alelos com os da(s) amostra(s) questionada(s) ou estabelecendo relaes de vnculo gentico entre indivduos.

f)

Clculos Estatsticos

a interpretao do significado estatstico dos dados obtidos, que determina a fora do exame. . LIMITAES DA ANLISE DE DNA No caso de gmeos idnticos serem suspeitos de um crime em que o autor deixou vestgios, o DNA no poderia colaborar para a elucidao do delito, uma vez que no consegue distinguilos por serem geneticamente idnticos, ao passo que a papiloscopia sim, se dentre os vestgios existissem impresses digitais. As condies de preservao do material biolgico de um cadver carbonizado ou de um cadver que tenha ficado por muito tempo submerso no mar, muitas vezes no permitem, atravs da anlise de DNA, que se alcancem dados com significncia estatstica para que se possa afirmar sobre sua identidade, ao passo que o exame de sua arcada dentria possa ser muito mais significativo neste sentido. Outro ponto importante a ser abordado nas limitaes da anlise de DNA, principalmente na rea criminal, diz respeito a peculiaridades da anlise. Caractersticas intrnsecas a cada vestgio biolgico muitas vezes se tornam barreiras intransponveis como, por exemplo, a inibio da reao de PCR para materiais oriundos de algumas vestimentas coloridas com ndigo ou raspados de um cinto de couro e, por isto impregnados de taninos.

A IMPLANTAO DO BANCO NACIONAL DE PERFIS DE DNA CRIMINAL NO BRASIL, COORDENADO PELA SECRETARIA NACIONAL DE SEGURANA PBLICA (SENASP), UTILIZANDO O SISTEMA CODIS (COMBINED DNA INDEX SYSTEM), DO FBI. : Bancos de dados de informaes genticas so sistemas que servem para armazenar e cruzar informaes, sendo ferramentas investigativas eficientes. Atualmente os laboratrios forenses trabalham analisando vestgios encontrados em cenas de crime, comparando-os com material coletado de suspeito(s). Apesar do grande auxlio ao processo de investigao, o exame se limita s situaes onde existe o suspeito. para fornecer o material padro de comparao. Assim, um grande nmero de evidncias no so analisadas. Por outro lado, se ocorre, em um determinado crime a excluso de um suspeito, no existe meio de relacionar as evidncias obtidas com outras evidncias de cenas de crimes diferentes. No banco de DNA criminal, os perfis genticos obtidos a partir de amostras relacionadas a feitos criminais ficam armazenados. As coincidncias encontradas entre o perfil gentico de duas ou mais amostras podem demonstrar a ligao entre cenas de crimes e criminosos, muitas vezes apontando para a ocorrncia de eventos em srie, como assassinatos cometidos por um serial killer. Isto direcionar as aes investigativas, tornando mais gil o processo. Com criao da Rede Integrada de Bancos de Perfis Genticos, cada estado alimentar e gerenciar seu prprio banco de dados, com amostras de DNA de criminosos, suspeitos, vtimas e tambm amostras obtidas em locais onde ocorreram crimes. O banco nacional integrar todos, permitindo comparaes interestaduais. O CODIS um software que proporcionar aos laboratrios integrantes da Rede Nacional de Gentica Forense a participao na implantao da Rede Integrada dos Bancos de Perfis Genticos (RIBPG), no Brasil. Atualmente, o pas ocupa o 2 lugar no ranking mundial em nmeros de laboratrios. Ao todo, so 15 bancos estaduais, um federal e um nacional, ficando atrs apenas dos EUA. O banco de dados de DNA , poderia minimizar a fragilidade do sistema penal brasileiro, no tocante melhoria na eficincia da investigao policial e ao estabelecimento de associao entre crimes relacionados pela autoria delituosa.

.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- BAR, W.; BRINKMANN, B.; BUDOWLE, B; CARRECEDO, A.; GILL, P.; LINCOLN, P.; MAYER, W.; OLAISEN, B. DNA recommendations further report of the DNA Commission of the ISFH regarding the use of short tandem repeat systems. International Society for Forensic Haemogenetics [Editorial]. lnt. J. Forensic Med., v.110, n.4, p.l75-6. 1997.

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4- EVETT, I.W.; WEIR, B.S. Interpreting DNA evidence statistical genetics for forensic scientistis. Sinauer Associates, Inc., Sunderland, MA, U.S.A., 1996. 5- MICHELIN, K. ; PACHECO, A.C. ; BITTENCOURT, E.A.A. ; LIMA, M.J.M. Banco de Dados de Perfis Genticos no Combate aos Crimes Sexuais Rev Percia Federal Ano IX vol 26 p12, 2008

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8- PENA, S. D. J. Segurana Pblica: Determinao de Identidade Gentica Pelo DNA