MANUAL DE TECNICAS DE BIOQUIMICA

AMILASA BILIRRUBINAS TOTAL Y FRACCIONADAS LIPASA TEST. DE ADA

ACIDO URICO ALBUMINA EN SUERO CALCIO COLESTEROL CREATININA CPK TOTAL CPK MB DESIDROGENASA LACTICA FOSFORO FOSFATASA ALCALINA FOSFATASA ACIDA PROSTATICA GLUCOSA GAMA GLUTAMIL TRANSFERRASA HIERRO HDL LDL PROTEINAS TOTAL Y FRACCIONADAS PROT. U/LCR TRANSAMINASA TGO TRANSAMINASA TGP TRANSFERRINA TRIGLICERIDOS UREA

ANALITO :

AMILASA

METODO:

PUNTO FINAL

FUNDAMENTO DEL TEST: El sustrato, almidn tamponado, se incuba con la muestra, producindose la hidrlisis enzimtica. Esta se detiene por el agregado de reactivo de iodo, que al mismo tiempo produce color con el remanente de almidn no hidrolizado. La disminucin de color respecto de un sustrato color (sin muestra) es la medida de la actividad enzimtica, que se expresa en Unidades Amilolticas (Smith & Roe) /decilitro (UA/dl), comparables con las Unidades Sacarognicas (Somogyi)/decilitro.

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS:

MATERIALES: Agua destilada Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 2 ml.

EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: Suero u orina Bao de agua a 37 C Equipo espectrofotometro, ( SHEM-7.) Micropipetas automticas 10 ul.

Reactivo sustrato 1 : listo para usar Reactivo de Iodo 2: listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. En dos tubos de fotocolorimetro marcados C (Control) y D (Desconocido) : Agregar 0.5ml de sustrato 1 a los tubos Control y Desconocido Dejar unos minutos en bao de agua a 37C y agregar 10 ul de muestra problema al tubos desconocido. Incubar a 37C.A los 7 minutos y medio exactos, agregar 0.5 ml de reactivo de Iodo 2 a los tubos Control y Desconocido. Mezclar por agitacin suave. Retirar los tubos del bao de agua y agregar 4 ml de agua destilada.

NOTA ::El color de la reaccin es estable durante una hora por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

C-D Amilasa (UA/dl) = --------- x 1000 C

VALORES DE REFERENCIA: CONDICIN CLINICA SUERO (UA/dl) Normal Pancreatitis aguda Pancreatitis crnica Parotiditis Parotiditis c/complicacin Pancretica Procesos abdominales Agudos (sin pancreatitis) Normal Normal Mas de 350 Mas de 750 < 120 300 a 12.000 Hasta 200 200 a 350 < 260 Mas de 900 Mas de 300 350 a 750 ORINA (UA/hora)

ANALITO:

BILIRRUBINAS

METODO: PUNTO FINAL FUNDAMENTO DEL TEST: La bilirrubina reacciona especficamente con el acido sulfanilico diazotado produciendo un pigmento color rojo-violceo (azobilirrubina) que se med fotocolorimetricamente a 530 nm. Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazo reactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso que posibilite su reaccin. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafena al medio de reaccin.

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS, Y REACTIVOS: MATERIALES: Agua destilada Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrios de 2 ml, 5.0 ml. Equipo espectrofotometro ( SHEM-7) MUESTRA: REACTIVOS: Micropipetas automticas 20 ul, 50 ul, 200 ul. Suero, plasma o lquido amniotco. Desarrollador : listo para usar Reactivo sulfanilico: listo para usar Diazo reactivo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar 1 parte de Nitrito de sodio con 21 partes de Reactivo Sulfanilico.

EQUIPOS:

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Identificacin de las muestra a procesar. En tres tubos de fotocolorimetro marcados B (Blanco) D (Directa) T( Total). Agregar 2.5 ml de agua destilada a los tubos Blanco y Directa y 2.5 ml del Reactivo Desarrollador al tubo total. Luego agregar 200 ul muestra problema a los tubos Blanco, Directa y Total. A continuacin agregar 200 ul de Reactivo Sulfanilico al tubo Blanco, 200 ul de Diazorectivo a los tubos Directa y Total. Mezclar de inmediato cada tubo por inversin. Luego de 5 minutos, leer en espectrofotmetro a 546 nm, llevando a cero el aparato con el agua destilada Nota: sueros ictricos debe emplearse la tcnica descripta pero con menores cantidades de muestra de acuerdo a la severidad de la ictericia. De tal forma, en caso de ictericia moderada se usaran 50 ul de suero mientras que frente a una ictericia intensa se requieren solo 20 ul. Multiplicar los resultados obtenidos por 3.79 y 9.38 respectivamente.

NOTA:El color de la reaccin es estable durante 4 y 15 minutos excepto para la bilirrubina directa que debe leerse a los 5 minutos excatos. Si se lee antes, abra subvaloracin de los resultados por la reaccin incompleta. Si se lee despus, abra sobrevaloracin porque comienza a reaccionar la bilirrubina libre..

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

Bilirrubina total ( mg/dl) = ( T B) x F Bilirrubina directa ( mg/dl) = ( D B) x F Bilirrubina libre (indirecta) = B.Total B.Directa

VALORES DE REFERENCIA:

ADULTOS: Directa: hasta 0.25 mg/dl Total: hasta 1.0 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD: suero control liofilizado standatrol es (2 niveles) dentro de las 2 horas de preparacin.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto ( winer lab)

ANALITO:

ADENOSINA DEAMINASA

METODO: PUNTO FINAL MARCA : NEW LAB

FUNDAMENTO DEL TEST: La adenosina deaminasa ADA, reacciona con adenosina para producir inopina + amonaco. ADA Adenosina + H2O --------- Inopina +NH3 Los iones amoniaco que se forman se valoran por el mtodo de Berthelot, donde el amoniaco en presencia de una base reacciona con el fenol e hipoclorito de sodio, formando azul de indofenol.

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS, Y REACTIVOS: MATERIALES: . Agua DestiladA Contenedor De Residuos Biolgicos Puntas Esteriles Cronometro. Cubetas para espectro.

EQUIPOS:

Equipo espectrofotometro ( SHEM-7) Micropipetas automticas 25 ul..

MUESTRA:

Suero, liquido ( pleural, ascitico, pericardico, cefalo raquideo.) ,Previa centrifugacin

REACTIVOS: Buffer fosfato Ph 6.5 : listo para usar Solucin de Adenosina : Listo para usar Standard de sulfato de amonio Reactivo color 1: listo para usar Reactivo color 2: listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. En cuatro tubos de fotocolorimetro marcados b (blanco) s (standard) b.m (blanco de muestra) y m( muestra problema). Agregar 0.5 ml de buffer fosfato al tubo blanco, 0.5 ml standard al tubo standard, 0.5 ml de sol. Adenosina a los tubos blanco de muestra y muestra, agregar 25 ul de agua destilada a los tubos blanco y standard y 25 ul de muestra al tubo de muestra problema Mezclar, tapar los tubos e incubar a 37c por 1 hora. Agregar 1.5 ml de reactivo de color 1 a los tubos blanco, standard, blanco de muestra y a la muestra problema, luego agregar 25 ul de muestra al tubo blanco de muestra, agregar 1.5 ml de reactivo 2 los tubos blanco, standard, blanco de muestra y a la muestra problema. 1. Mezclar e incubar 37c por 30 minutos.

4. 7.

8.

Leer la absorbancias contra agua destilada a 546 nm,.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

Do muestra - Do muestra blanco Actividad ( U/L) = -------------------------------------------------- x 50 Do Standard - Do reactivo blanco

DO = valor de densidad optca.

VALORES DE REFERENCIA:

Suero : Liquido Pleural: Liquido Ascitico: Liquido Pericardio: Liquido Cefalorraqudeo:

13 21 U/L 0 45 U/L 0 40 U/L 0 20 U/L 0 6 U/L

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto

ANALITO :

LIPASA

METODO: PUNTO FINAL MARCA: DIALAB FUNDAMENTO DEL TEST: En la presencia de colipasa y cidos biliares la lipasa fracciona el susutrato sntetico a glicerol y metilresorufinester, los que son espontneamente degradadoa cido gltamico y metilresorufin. La combinacin de la lipasa y de los acidos biliares hace la reaccin especfica para la lipasa pancretica sin interferencia de esterasas y enzimas lipolticas. La medicon de la absorbancia es proporcional a la actividad en la muestra.

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS, Y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos. Puntas esteriles, Cronometro. Tubos de 13 x 100 Cubetas de espectro.

EQUIPOS: -

Micropipeta de 450 ul Micropipeta de 50ul Equipo de espectrofotometro SHEM-7

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, plasma con heparina.

Rvo1 buffer. Rvo. 2 sustrato de color

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Identificacin de las muestra a procesar. El equipo debe estar ya programado para este examen en la concentracin N 5 llevando a cero con el agua destilada. En un tubo de Kant agregar 450 ul de buffer mas 10 ul de calibrador, colocar en bao de agua a37C por 5 minutos. Retirar del bao e agua y agregar 50 ul de Rvo 2 mezclar e invertir en una cubeta y leer. hasta arrogar su resultado y retirar la cubeta. En un tubo de Kant agregar 450 ul de buffer mas 10 ul de Muestra, colocar en bao de agua a37C por 5 minutos. Retirar del bao e agua y agregar 50 ul de Rvo 2 mezclar e invertir en una cubeta y leer. hasta arrogar su resultad

VALORES DE REFERENCIA: Hasta 60 U/L REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto

METODO MANUAL DE

BIOQUIMICA PARA

CORROBORACIN DE

RESULTADOS

ANALITO :

ACIDO URICO

METODO: PUNTO FINAL MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: El esquema de reaccin es la siguiente: UOD Acido rico + 2H2O + O2 alantoina + H2O2 + CO2

POD 2H2O2 + 4-AF + 3,5-DHSl quinonimina roja

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: Agua destilada Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Bao de agua a 37 C Equipo shem-7,BT 3000plus Micropipetas automticas 10 ul. Suero u Plasma. Reactivo buffer 1 : listo para usar Reactivo sustrato 2: listo para usar Standard : listo para usar Rvo de trabajo : mezclar 4 partes de reactivo 1 + 1 parte del reactivo 2.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo de Trabajo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar,10 ul de estndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C en bao maria. Leer la absorbancia en espectrofotometro a 505 mn, llevando el aparato a cero con el agua destilada.

Nota: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

10.0 mg/dl ( concent. de st) cido rico ( mg/l) = D x F donde Factor = ------------------------Ab. Standard

VALORES DE REFERENCIA:

Hombres :2.5 6.0 mg/dl Mujeres : 2.0 5.0 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

ALBUMINA

METODO: PUNTO FINAL MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La albmina reacciona especficamente-sin separacin previa- con la forma aninica de la 3,3,5,5- tetrabromo cresolsulfon ftaleina (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto del blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra. MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 2 ml.

EQUIPOS: -

Equipo shem-7. Micropipetas automticas 5 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero.

Rvo BCF: listo para usar. Standard.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1.75 ml de reactivo de BCF a los tubos blanco, stndard, y desconocido. luego agregar, 5 ul de Stndard al tubo Standard y 5 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar con una varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28C durante 10 minutos. Leer en espectrofotmetro a 625 nm llevando a cero con el blanco de reactivo.

5. NOTA: El color de la reaccin es estable durante 20 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS: 3.4 mg/dl (concent. de st) Albumina (g/dl) = D x F donde Factor = ----------------------------Ab. Standard

VALORES DE REFERENCIA:

3.5 4.8 g/dl.

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

CALCIO

METODO: PUNTO FINAL MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: El calcio reacciona con el arsenazo III, dando un complejo de color azul que se mide fotocolorimtricamente a 650 nm.

MATERIALES, EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS:

Equipo shem-7 Micropipetas automticas 10 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, orina.

Rvo provisto: listo para usar Standard.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar, 10 ul de Stndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 2 minutos a temperatura ambiente (15 25C). Leer la absorbancia en espectrofotmetro a 650 nm llevando a cero con el agua destilada.

5. Nota: El color de la reaccin es estable durante 60 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS:

10 mg/dl (concent. de st) Calcio serico (mg/dl) = D x F donde Factor = ----------------------------Ab. Standard D Calcio urinario ( mg/24 horas) = ----- x 200 mg/24 horas S

VALORES DE REFERENCIA:

Suero: 8,5 10,5 mg/dl Orina: hasta 300 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

COLESTEROL

METODO: ENZIMTICO MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La secuencia reaccional es la siguiente: CHE steres del colestrol colesterol + acido grasos

CHOD colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2

POD H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: -

Bao de agua a 37 C Equipo shem-7, .Micropipetas automticas 10 ul. Suero u Plasma. Reactivo de trabajo: listo para usar Standard : listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo de Trabajo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar,10 ul de estndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido.

6. 7.

Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C en bao maria. Leer la absorbancia en espectrofotometro a 505 mn llevando el aparato a cero con el agua destilada.

NOTA: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS: 200 mg/dl ( concent. de st) colesterol( mg/l) = D x F donde Factor = -----------------Ab. Standard

VALORES DE REFERENCIA:

Deseable: < 200 mg/dl Moderadamente alto: 200 239 mg/dl Elevado: > 240 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

CREATININA

METODO: CINTICO MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reaccin de jaffe) produciendo un cromgeno rojo. La velocidad de esta reaccin, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentracin de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reaccin cintica de primer orden para la creatinina. Por otra parte se a demostrado que los cromgenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las tcnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reaccin. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reaccin, el incremente de color se debe exclusivamente a la creatinina.

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles.Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS: -

Equipo shem-7. Micropipetas automticas 200 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero , Plasma u Orina. Reactivo Acido Pcrico (1) : listo para usar Reactivo B (2): listo para usar Standard : listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo 1 + 1 parte del reactivo 2.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: I.-Tcnica para suero o plasma: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada a 505 nm. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S (estndard), y D (desconocido) .Agregar 1,2 ml de reactivo de Trabajo a los tubos, stndard, y desconocido. luego agregar, 200 ul de estndard al tubo Standard y 200 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente, iniciando al mismo tiempo el cronmetro y proseguir la incubacin. A los 30 segundos exactos medir la absorbancia (S1 y D1) y continuar la incubacin. Medir nuevamente la absorbancia (S2 y D2) a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos despus de la primera lectura).

4.

II.-Tcnica para Orina: Recolectar y preparar la muestra como se describi en Recoleccin, efectuando una dilucin 1:50 de la misma en agua destilada. Aplicar luego la tcnica I.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

2.0 mg/dl (concent. de st) Creatinia en suero ( mg/l) = D x F donde Factor = --------------------------Ab. Standard

D2 - D1 Creatinina en orina (mg/24horas) : ----------- x Volumen. S2 S1

VALORES DE REFERENCIA: Suero o plasma: Hombres: 0.7 1.3 mg/dl Mujeres: 0.6 1.1 mg/dl

Orina: Hombres: 14 26 mg/24 horas Mujeres: 11 - 20 mg/24 horas

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

CPK TOTAL

METODO: CINTICO UV OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La secuencia reaccional es la siguiente: Cretinita kinasa Creatinina fosfato + ADP Creatinina + ATP

hexoquinasa ATP + glucosa ADP + glucosa -6-p

G-6-PDH glucosa-6-P + NADP

+

gluconato-9-P+NADPH +

H+

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS:

Equipo shem-7 Micropipetas automticas 40 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 5 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 23. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 40 ul de suero problema al tubo desconocido.

4.

Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultados.

VALORES DE REFERENCIA: Suero o plasma: Hombres: Hasta 195 U/L Mujeres: Hasta 170 U/L

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

CPK MB

METODO: CINTICO UV OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La secuencia reaccional es la siguiente: Cretinita kinasa Creatinina fosfato + ADP Creatinina + ATP

hexoquinasa ATP + glucosa ADP + glucosa -6-p

G-6-PDH glucosa-6-P + NADP

+

gluconato-9-P+NADPH +

H+

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS: -

Equipo shem-7. Micropipetas automticas 40 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 5 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 5. Identificacin de las muestra a procesar.

6. 7. 8.

Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 23. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 40 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultado.

VALORES DE REFERENCIA: Hasta 16 u/l

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

DESIDROGENASA LACTICA

METODO: CINTICO UV OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: Basado en el siguiente esquema de reaccin. LDH Piruvato + NADH + H
+

L-lactato + NAD

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS: -

Equipo shem-7 Micropipetas automticas 20 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 250. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 20 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultados.

VALORES DE REFERENCIA: Hombres: 160 320 U/L CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer ) ANALITO: FOSFATEMIA

METODO: CINTICO UV MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: El fsforo inorgnico (Pi) reacciona en medio cido con el molibdato para dar un complejo fosfomolbdico que se medi espectrofotomtricamente a 340 nm.

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.

EQUIPOS: -

Equipo shem-7. Micropipetas automticas 10 ul.

MUESTRA: REACTIVO: -

Suero, Plasma u Orina. (orina de 24 horas el frasco debe contener 2 ml de acido clorhdrico) Rvo: listo para usar Standard

PROCEDIMIENTO DEL TEST: Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar, 10 ul de Stndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido. 4. Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (15 25C). Leer la absorbancia en espectrofotmetro a 340 nm llevando a cero con el agua destilada NOTA: La reaccin final es estable 20 minutos, por lo que la absorbancia debe ser leda en ese lapso. 1. 2. 3.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS: Fsforo inorgnico (Pi) (mg/dl) = D x F 4 mg/dl Donde f = ----------S Orina:

D Pi (g/24horas) = -------- x 0,4 x V S VALORES DE REFERENCIA:

Suero o plasma:

Adulto: 2,5 5,6 mg/dl.

Orina:

0,3 1,0 g/24 horas CONTROL DE CALIDAD : SUERO: Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

FOSFATASA ALCALINA

METODO: CINTICO OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La fosfatasa alcalina (ALP o monosteres ortofosfrico fosfohidrolasa, EC.3.1.3.1.) hidroliza al P-nitrofenilfosfato (p- NFF), que es incoloro, produciendo fosfato p-nitrofenol a Ph alcalino. La velocidad de aparicin del anion p- nitrofenolato a 405 nm, es proporcional a la actividad enzimtica de la muestra. La dietanolamina (DEA),regula el PH de la reaccin y acta como aceptor del fosfato liberado por la fosfatasa, observndose como resultado una activacin de la reaccin y capacidad tamponante cuando se emplea p-NFF como sustrato; por tal razn, la DGKC y la SSCC la han seleccionado para el desarrollo de sus mtodos optimizados . MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 10 ul. Suero, Plasma. Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 24. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultado.

VALORES DE REFERENCIA: Adulto 65 300 u/l. Nios hasta 645 u/l. CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

FOSFATASA ACIDA PROSTATICA

METODO: CINTICA MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La FACP hidroliza el alfa nafil fosfato ph 5,2 con liberacin de fosfato y alfa naftol. El naftol reacciona su vez con un diazoreactivo presente en el sistema 4-clorotolueno -1,5-diazo alfa- naftalendisulfonato produciendo un pigmento amarrillo de modo que el aumento de la absorbancia ledo a 405 nm es proporcional a la actividad fosfatasica de la muestra. MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Cronometro gradilla Equipo shem-7 Micropipetas automticas 100 ul. MUESTRA: REACTIVOS: Suero. Buffer citrato : listo para usar Sustrato NF: comprimido Rvo de trabajo: Para cada determinacin disolver un comprimido de sustrato NF en 2 ml de buffer citratado, agitando suavemente hasta lograr disolver completamente.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR en una absorbancia de 405 nm. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido preincubar unos minutos. luego agregar, 100 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y disparar simultneamente un cronometro. A los 4 minutos registrar la D.O. Leer posteriormente la absorbancia cada minuto durante 3 minutos. determinar la diferencia promedio de absorbancia/minuto restando cada lectura de la anterior y promediando los valores. Utilizar este promedio para los clculos.

5.

CALCULOS DE LOR RESULTADOS: Fosfatasa acida prosttica (u/l) = absorbancia promediado /minuto x 853.

VALORES DE REFERENCIA: Adulto: 0 3,7 u/l

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

GLUCOSA

METODO: ENZIMTICO MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La secuencia reaccional es la siguiente: GOD Glucosa + O2 +H2O cido glucnico + H2O2

POD 2 H2O2 + 4-AF + 4-hirdoxibenzoato quinonimina roja

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Gradilla.

EQUIPOS: -

Bao de agua a 37 C Eq Equipo shem-7, Micropipetas automticas 10 ul.

MUESTRA: REACTIVOS: -

Suero, Plasma, L.C.R. Reactivo de trabajo: listo para usar Standard : listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ): agregar 1 ml de reactivo de Trabajo a los tubos, estndard, y desconocido. luego agregar, 10 ul de estndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C en bao mara. Leer la absorbancia en espectrofotmetro a 505 nm llevando el aparato a cero con el agua destilada.

NOTA:El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

100 mg/dl (concent. de st) Glucosa ( mg/l) = D x F donde Factor = -----------------Ab. Standard

VALORES DE REFERENCIA:

Deseable: 70 - 110 mg/dl Moderadamente alto: 200 239 mg/dl Elevado: > 240 mg/dl L.C.R. : 40 74 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

GAMAGLUTAMIL TRANSFERASA

METODO: (Szasz modificado) cintico MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La gamaglutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la siguiente reaccin: Gama-GT L-gama-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina glutamilglicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato L-gama-

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Puntas esteriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 40 ul. MUESTRA: REACTIVOS: Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 25. en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 100 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultado.

VALORES DE REFERENCIA: Hombres: 11 50 U/L Mujeres: 7 32 U/L CONTROL DE CALIDAD :

Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

FER COLOR

METODO: PUNTU FINAL

MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: El hierro srico se libera de la unin con su protena transportadora especifica la transferrina en buffer acetato pH 4,5 y en presencia de un reductor,el acido ascrbico. Posteriormente reacciona Con el reactivo de color,piridil bis fenil triazina sulfanato dando un complejo color magenta.

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVO: Puntas estriles Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Gradilla. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 200 ul. Suero, Plasma u Orina. (orina de 24 horas el frasco debe contener 2 ml de acido clorhdrico) Rvo: listo para usar Standard

PROCEDIMIENTO DEL TEST: Identificacin de las muestra a procesar. en tres tubos de fotocolorimetro marcados B (Blanco), S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar, 200 ul de agua destilada al tubo blanco, 200 ul de Stndard al tubo Standard y 200 ul de suero problema al tubo desconocido. mezclar y leer el tubo desconocido. Luego agregar 200 ul de Rvo de color. Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5 minutos, llevando el aparato a cero con el agua. NOTA:Los tubos deben ser ledos entre 5 y 60 minutos luego de completados los pasos de procedimiento. 1. 2. 3.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS: Corregir la lecturas de S y D, restndoles los blancos correspondientes: S B = S corregida D (B+BS) = D corregida

Fe (ug/dl) = D corregida x f 100 ug/dl Donde f = ----------------S corregida

VALORES DE REFERENCIA: Adulto: 114.6 ug/dl Mujeres: 103.3 ug/dl CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

LDL COLESTEROL

METODO: CINETICO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: Las lipoprotenas de baja densidad (ldl) se separan del suero precipitndolas selectivamente mediante el agregado de polmeros de alto peso molecular. Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las dems lipoprotenas ( HDL y VLDL); el colesterol ligado a las mimas se determina empleando el sistema enzimtico colesterol oxidasa/peroxidasa con colorimetra segn trinder (Fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene el colesterol unido a las LDL. MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biolgico. Puntas estriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Bao de agua a 37 C Equipo shem-7 Micropipetas automticas 100 ul. Suero.

MUESTRA:

REACTIVOS: Reactivo precipitante: listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. Permita que el reactivo alcance la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37C. Identificacin de las muestra a procesar. En un tubo de khan colocar: 200 ul de muestra mas 100 ul de reactivo precipitante homogenizar agitando durante 20 segundos y dejar 15 minutos en un bao de agua a 20 25C.Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m. Separar inmediatamente el sobrenadante. en tres tubos de fotocolorimetro marcados B (blanco) S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 2 ml de reactivo de Trabajo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar,20 ul de estndard al tubo Standard y 20 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C si se usa el reactivo de trabajo de colesterol enzimtico.Retirardel bao y enfriar. Leer en espectrofotometro a 505 nm ,llevando el aparato de absorbancia con el blanco.

5. 6. 7.

NOTA:: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:

LDL colesterol (mg/dl) = Colesterol total (*) ( D x f ) 62.4 F = ---------s VALORES DE REFERENCIA:

Riesgo bajo o nulo : < 129 mg/dl Riesgo moderado a elevado : 130 189 mg/dl Riesgo muy elevado : >= 190.0 mg/dl CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO:

PROTEINAS TOTALES

METODO: PUNTO FINAL MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La albmina reacciona especficamente-sin separacin previa- con la forma aninica de la 3,3,5,5- tetrabromo cresolsulfon ftaleina (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto del blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra. MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles, Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 2 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 5 ul. Suero. Rvo BCF: listo para usar, Standard.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1.75 ml de reactivo de BCF a los tubos blanco, stndard, y desconocido. luego agregar, 25 ul de Stndard al tubo Standard y 25 ul de suero problema al tubo desconocido. 4. Mezclar con una varilla. Incubar 15 minutos a 37 C. leer en espectrofotometro a 540 nm. llevando a cero con el agua destilada. NOTA:: El color de la reaccin es estable durante 12 horas por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso. 1. 2. 3.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS: 4.9 mg/dl (concent. de st) Protenas totales (g/dl) = D x F donde Factor = ----------------------------Ab. Standard VALORES DE REFERENCIA: 6,1 a 7,9 g/dl. CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer ) ANALITO: PROTI U/LCR

METODO: PUNTO FINAL MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: Las proteinas presentes en las muestras reaccionan en medio acdo con el complejo rojo de Pirogalol-Molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica espectrofotomtricamente a 600 nm. MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: . REACTIVOS: Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles. Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml.Gradilla. Bao de agua a 37 C Equipo shem-7 Micropipetas automticas 20 ul. orina, L.C.R. Reactivo de trabajo: listo para usar Standard : listo para usar

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ): agregar 1 ml de reactivo de Trabajo a los tubos, estndard, y desconocido. luego agregar, 20 ul de estndard al tubo Standard y 20 ul de orina problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 10 minutos a 37 C en bao mara. Leer la absorbancia en espectrofotmetro a 600 nm o en fotocolorimetro ( 580-620 nm ) llevando el aparato a cero con el agua destilada.

NOTA: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS: Proteinas en orina de 24 horas: D mg de protenas / 24horas = ---------- x V x 1000

Protenas en orina ocasional:

D Mg/dl protenas : -------- x 1000 S

Protenas en LCR:

D Mg/dl protenas : -------- x 1000 S

VALORES DE REFERENCIA: Orina de 24 horas: 30 140 mg/dl Orina ocasional: 25 mg/dl LCR: 15 -45 mg/dl CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer )

ANALITO: METODO: CINTICO UV OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: Basado en el siguiente esquema reaccionante:

TRANSAMINASA TGO

GOT L-aspartato +2-oxoglutarato oxolacetico+L-glutamato

MDH oxalacetato + NADH + H

+

L-malato + NAD

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Puntas esteriles, Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 0.5 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 50 ul. MUESTRA: REACTIVOS: Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar, Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el equipo a cero con el agua destilada en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 0.5ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido colocando tres minutos en bao maria. luego agregar, 50 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo y esperar unos minutos para el resultados.

4.

VALORES DE REFERENCIA: Hombres: Hasta 38 U/L Mujeres: Hasta 32 U/L CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1

Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer ANALITO: TRANSAMINASA TGP

METODO: CINTICO UV OPTIMIZADO MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: Basado en el siguiente esquema reaccionante: GPT L-alanina +2-oxoglutarato Piruvato + L-glutamato

LDH Piruvato + NADH + H

+

L-lactato + NAD

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: Puntas esteriles, Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 0.5 ml. Equipo shem-7,starfax, selectra2 Micropipetas automticas 50 ul. Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el equipo a cero con el agua destilada . en un tubos de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 0.5ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido colocando tres minutos en bao maria . luego agregar, 50 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo y esperar unos minutos para el resultados.

VALORES DE REFERENCIA: Hombres: Hasta 41 U/L Mujeres: Hasta 31 U/L CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1

Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer ANALITO: TRANSFERRINA

METODO: PUNTO FINAL MARCA : WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: La transferrina o protena transportadora especifica del hierro, se determina por su actividad fisiolgica de captar Fe (III) A PH mayor a 7,2 donde la transferrina se satura en presencia de Fe (III) en exceso, en remanente de Fe (III) no ligado se elimina totalmente por coprecipitacion con carbonato de magnesio. El hierro unido ala transferrina se libera y determina colorimtricamente segn la tcnica de FER-COLOR la cantidad de transferrina se expresa como los microgramos de Fe (III) con que est saturada.

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Agua destilada Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esterilesCronometro.Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 250 ul. Suero . Solucion saturante : listo para usar absorbente 2: listo para usar

MUESTRA: REACTIVOS: -

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en un tubo de fotocolorimetro marcados D ( desconocido ) : agregar 0.5 ml de solucin saturante al tubo desconocido. luego agregar,250 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C en bao maria, luego agregar copita de Rvo absorbente por un lapso de 5 minutos, posteriormente se centrifuga por 15 minutos a 3000 rpm. Sacar muy lentamente sin mezclar y del sobrenadante. en tres tubos de fotocolorimetro marcados B (blanco), S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar,200 ul de agua destilada al blanco, 200 ul de Stndard al tubo Standard y 200 ul de sobrenadante problema al tubo desconocido. mezclar y leer el tubo desconocido. Luego agregar 200 ul de Rvo de color. Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5 minutos, llevando el aparato a cero con el agua. Leer la absorbancia en espectrofotometro a 560 mn o en fotocolorimetro ( 490 - 530 nm ) llevando el aparato a cero con el blanco.

7. 8.

9.

NOTA: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS: Corregir la lecturas de S y D, restndoles los blancos correspondientes:

S B = S corregida D.sobrenanadte (B+BS) = D corregida Fe (ug/dl) = D corregida x f 100 ug/dl Donde f = ----------------S corregida

CALCULOS PARA % DE TRANSFERRINA:

Hiero serico (ug/dl) Saturacin % = --------------------------- X 100 Transferrina (ug/dl)

VALORES DE REFERENCIA: Transferrina:250 400 ug/dl Saturacin de transferrina % : 20 55 % REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer

ANALITO:

TRIGLICERIDOS

METODO: ENZIMTICO MARCA : WIENER

FUNDAMENTO DEL TEST:

La secuencia reaccional es la siguiente:

Lipoprotein lipasa triglicridos glicerol+ cido grasos

glicerol Kinasa glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP

GPO glicerol-1-fosfato + O H2O2 + dihidroxiacetonafosfato

POD 2H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja

MATERIALES , EQUIPOS , MUESTRAS y REACTIVOS:

MATERIALES: EQUIPOS: MUESTRA: REACTIVOS: -

Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biologico. Puntas esteriles Cronometro. Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Bao de agua a 37 C Equipo shem-7 Micropipetas automticas 10 ul. Suero u Plasma. Rvo de buffer: Enzimas:

Standard : listo para usar REACTIVO DE TRABAJO: Agregar 20 ml de buffer en un vial de enzimas, mezclar hasta la disolucon completa de las enzimas. Homogenizar y fechar.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. . NOTA: El color de la reaccin es estable durante 60 minutos por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso. Permita que los reactivos alcancen la temperatura ambiente antes de usarlos (18-30C). Graduar el bao de agua a 37 C. Identificacin de las muestra a procesar. en dos tubos de fotocolorimetro marcados S ( estndard ), y D ( desconocido ) : agregar 1 ml de reactivo de Trabajo a los tubos stndard, y desconocido. luego agregar,10 ul de estndard al tubo Standard y 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C en bao maria. Sacar del bao maria y dejar enfriar unos minutos. Leer la absorbancia en espectrofotometro a 505 mn ,llevando el aparato a cero con agua destilada.

CALCULOS DE LOS RESULTADOS:

200 mg/dl ( concent. de st) trigliceridosl( mg/l) = D x F donde Factor = -----------------Ab. Standard

VALORES DE REFERENCIA:

Deseable: < 150 mg/dl Moderadamente alto: 150 199 mg/dl Elevado: > 200 mg/dl Muy elevado : 500 mg/dl

CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer

ANALITO:

UREA

METODO: CINTICO UV MARCA: WIENER FUNDAMENTO DEL TEST: ureasa urea + H2O 2NH3 + CO2 GLDH NH3 + NADH + H + 2-oxoglutarato
+

La secuencia reaccional es la siguiente:

i-glutamato + NAD H2O

MATERIALES, EQUIPOS, MUESTRAS y REACTIVOS: MATERIALES: EQUIPOS: Puntas esteriles, Cubetas para espectro. Pipetas de vidrio de 1 ml. Equipo shem-7 Micropipetas automticas 10 ul. MUESTRA: REACTIVOS: Suero, Plasma . Reactivo A Buffer : listo para usar Reactivo B Sustrato: listo para usar, Stanadrd: listo para usar Rvo de trabajo: mezclar 4 partes de reactivo A + 1 parte del reactivo B.

PROCEDIMIENTO DEL TEST: 1. 2. 3. Identificacin de las muestra a procesar. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con el agua destilada en el BTR nmero de concentracin es el N 8. en un tubos de fotocolorimetro marcado S (Standard) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 10 ul de standard al tubo stndard, Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultado. Luego en un tubo de fotocolorimetro marcado D (desconocido) .Agregar 1, ml de reactivo de Trabajo al tubo desconocido. luego agregar, 10 ul de suero problema al tubo desconocido. Mezclar inmediatamente e invertir a una cubeta de espectro, colocar al equipo del BTR y esperar unos 8 minutos para el resultado.

4. 5.

VALORES DE REFERENCIA:

Suero o plasma: 10 50 mg/dl. CONTROL DE CALIDAD : Standatrol nivel 1 Standatrol nivel 2

REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS: inserto del producto (winer)