UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN ANTONIO ABAD DEL CUSCO.

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS, FSICAS Y MATEMTICAS. CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA. CURSO DE FARMACOGNOSIA II. DOCENTE MCS Q.F. MAGALY VILLENA TEJADA.

SEMINARIO DE ALCALOIDES QUINOLIZIDNICOS.

INTEGRANTES SEMESTRE 2013=I KRYSTEL QUISPE VILCA JUAN CARLOS CHICCHI HUAMN

ALCALOIDES QUINOLIZIDNICOS
puede formar parte de estructuras ms complejas(protoberberinas, alcaloides indlicos)
DEFINICIN Alcaloides que presentan un ncleo quinolizidnico, que es un heterociclo nitrogenado.

puede constituir las quinolizidinas autnticas, que proviene del metabolismo de la lisina

tricclicos

tetracclico s

Los alcaloides quinolizidnicos pueden ser

Biognesis de los alcaloides quinolizidnicos

descarboxilaci n Transaminacin condensacin La biosntesis tiene lugar en las partes areas de las fabceas, siendo regulada por la luz; no obstante, las semillas son especialmente ricas en alcaloides quinolizidnicos en algunas especies.

Biognesis de los alcaloides quinolizidnicos

I. DISTRIBUCIN
nuphares Cytisus scoparius Link (retama negra)

Fabcea s
Lupinus mutabilis Sweet (tarwi)

Se encuentra en las familias

Lycopodiceas (Lycopodium serratum thunb)

Spartium junceum L.(retama comn)

coccinellides

Quenopodicea s

Rubicea s

Berberidceas

Solanceas

Ranunculceas

II. FUENTE DE LOS ALCALOIDES QUINOLIZIDNICOS

FUENTE
Lupinus mutabilis Sweet (tallos, hojas y principalmente semillas) Cytisus laburnum L (toda la planta)

ALCALOIDES QUINOLIZIDNICOS
Lupanina, anagirina, espartena,4 y 13 hidroxilupanina e isolupanina. Citisina y anagirina.

Cytisus scoparius Link Ormosia wayana

Lycopodium serratum thunb.(H. serrata) Coccinellides (feromonas)

Espartena, lupanina y sus derivado hidroxilados. 3beta.hidroxi13alfa.tiglioxilup anina (piptatina).

Huperzinas A y B. N-oxido de coccinellina.
Cytisus laburnum L

Ejemplos de alcaloides quinolizidnicos

4 hidroxilupanina

13 hidroxilupanina

nufaridina

Propiedades fisicoqumicas de los alcaloides quinolizidnicos

su frmula estructural es C15H24N2O, tiene un peso molecular de 248.36 g/mol, es soluble en agua, cloroformo, ter y alcohol e insoluble en ter de petrleo. Se puede encontrar la d y l-lupanina asi como tambin sus mezclas, puede estar en forma de sales de monhidrocloruro, dehidrocloruro y perclorato. d-lupanina, lquido espeso cristalino , con p.f. de 40 a 44C, p.e.entre 190 y 193C, ndice de refraccin 1.5444. La l-lupanina es un aceite viscoso, con punto de ebullicin entre 183-188C, puede formar sales de monohidroyoduro, perclorato.

Lupanina

Espartena

frmula estructural es C15H28N2, peso molecular de 234 g/mol, Es un liquido oleoso, espeso, incoloro con olor dbil a la anilina y sabor sumamente amargo, peso especfico de 1.02 a 20C y hierve a 311C . Es insoluble en agua, alcohol, ter, y cloroformo.

Importancia farmacolgica
sulfato de espartena
Se utilizaba como antihipertensivo ya que bloquea los canales de calcio del musculo cardiaco, tambin es ganglioplejico, presenta tambin efecto oxitocico. Sin embargo est contraindicado en gestante e hipertensos, hay que tener mucho cuidado con la dosis.

lupanina

actividad bactericida, nematicida actividad antirritmica, hipotensora, y actividad hipoglicemiante.

angustifolina

inhibe el crecimiento bacteriano de bacilo subtilis, bacilus thuringiensis y E. coli.

huperzinas A y B tratamiento de fiebres y estados inflamatorios, ganglioplejico

Importancia farmacognostica
Ramas y sumidades florales del Cytisus scoparius Link Son preparados oficinales designados en farmacopeas, usado principalmente para las afecciones cardiacas. Ya no se emplea en la teraputica, por su toxicidad, tan solo es usado en estudios de metabolismo de frmacos, ya que es un sustrato tipo en la oxidacin dependiente del sistema de citocromo P450. La huperzina A se puede utilizar en el tratamiento de intoxicacin por soman y otros gases de guerra. pacientes con trastornos de memoria, tratamiento de miastemia, tiene mas tiempo de vida que la fisostigmina y no da lugar a efectos secundarios como la tacrina.

Importancia toxicologica

Toxicidad de anagirina especies de lupinos tienen efectos teratognos en los ganados, dosis de 11 a 25 mg/Kg de peso corporal en nios y dosis de 25 a 46 mg/Kg de peso corporal en adultos producen graves intoxicaciones.

Spartium junceum L, toxicidad de sus semillas (que contienen citisina y otras quinilizidinas afines).

Plantas con contenido de alcaloides quinolizidnicos.

Lupinus mutabilis Sweet (tarwi).
Es una leguminosa oriunda de los andes sudamericanos, las semillas desamargadas y en cocimiento son utilizados por el poblador andino como alimento y medicina. se ha encontrado 25 alcaloides quinolizidnicos, de los cuales 19 han sido identificadas hasta el presente.

Lupinus mutabilis Sweet

Cytisus scoparius

Es un arbusto leoso silicicola (50-250 cm), muy comn en toda europa. Se caracteriza por tener ramas erguidas, angulosas, glabras, encima de los cuales se insertan hojas simples y ssiles mientras que en su base llevan hojas pecioladas y trifoliadas. La flor presenta una corola zigomorfa de prefloracin vexilar. Su fruto es en vaina. Alcaloides que presenta: esparteina, lupanina y sus derivados hidroxilados y amodendrina. La espartena es ligeramente ganglioplegico, bloquea la transmisin y bloquea e impide la despolarizacin de la membrana postsinaptica. A nivel cardiaco disminuye la excitabilidad, la conductividad, frecuencia y amplitud de las contracciones

TRABAJOS DE INVESTIGACIN

Evaluacin del Efecto Antiinflamatorio del Extracto Acuoso de las Semillas de Lupinus mutabilis Sweet (Tarwi, Chocho), en Animales de Experimentacin.

En la investigacin realizada en la semilla de Lupinus mutabilis Sweet se ha podido identificar mediante un Screening Fitoqumico los principios activos presentes en el extracto acuoso, determinndose los alcaloides totales. Se ha evaluado la toxicidad aguda (DL50) tanto del extracto acuoso como de los alcaloides totales obtenidos de la semilla.

En el extracto acuoso de las semillas se ha evidenciado la actividad antiinflamatoria (aguda y subcrnica) en modelos experimentales, administrndose el Lupinus por va oral a una dosis de 2000 mg/Kg de peso. La inflamacin fue evaluada por diferentes tcnicas utilizando la tcnica de Granuloma de Pouche con trementina en ratas (Inflamacion sub-crnica) y edema plantar con formol al 1 % y ovoalbmina al 50% (Inflamacin aguda) en ratones, siguiendo las tcnicas estndar, obtenindose el efecto mximo de inhibicin de la inflamacin a los 80 minutos en comparacin con los 60 minutos correspondientes al diclofenaco (30 mg/Kg) mostrando un porcentaje de inhibicin de 66% frente al 100% del frmaco estndar

La DL50 del extracto acuoso por va oral fue de 3500 mg/Kg de peso y de los alcaloides totales administrados por va oral fue de 600 mg/Kg. Los alcaloides han sido identificados por TLC (Cromatografa en capa fina) y HPLC comparndolos con estndar de espartena.

PROCEDIMIENTO de la extraccin y purificacin

Se tom una determinada cantidad de Lupinus pulverizada y se trat con diclorometano. Luego se filtr al vaco, al liquido filtrado se le trat con amoniaco o hidrxido de amonio hasta reaccin alcalina (pH=10). Luego se adicion diclorometano, decantndose posteriormente la solucin y se evapor con la ayuda de un rotavapor hasta sequedad. Mediante Cromatografia en columna se procedi al aislamiento de los alcaloides, determinndose la presencia de cinco fracciones de a1caloides quinozilidnicos. Los alcaloides del Lupinus al ser revelados presentaron las siguientes coloraciones: Azul intenso-----------ALFA ISOLUPANINA Prpura-------LUPANINA Y ANGUSTIFOLINA Azul----------------------HIDROXILUPANINA.

RESULTADOS

En las semillas secas y pulverizadas de L.m.S se ha podido evaluar la presencia de una serie de principios activos entre ellos: alcaloides, taninos, saponinas, esteroides, compuestos fenlicos, aminocidos libres y azcares. Encontrndose un 4.28% de alcaloides totales. En el extracto con actividad farmacolgica se ha podido constatar por HPLC la presencia del alcaloide Espartena en la muestra de Lupinus frente a un Estndar.
La DL50 para el extracto acuoso en cocimiento fu de 3,500 mg/Kg de peso y para los alcaloides totales de 600 mg/Kg de peso, asimismo podemos mencionar que la toxicidad del Lupinus se manifiesta por convulsiones tnicoclnicas intensas que llevaron a la muerte a los animales de experimentacin y asumimos que posiblemente esta toxicidad pueda estar dada por los alcaloides presentes en el Lupinus, sin embargo a dosis menores no se evidenci la muerte de ningn ratn hasta los 7 das.

De acuerdo a la Clasificacin de Williams (DL50=3,500 mg/Kg) esta especie se ubica dentro de plantas ligeramente txicas y la causa de muerte podra deberse a la depresin respiratoria por agotamiento, como sucede con los neuroestimulantes en general. El Extracto acuoso del lupinus mutabilis Sweet (chocho) posee efecto antiinflamatorio menor que el efecto producido por el diclofenaco. Sin embargo podra constituir una medicina alternativa para este tipo de afecciones.

Composicin de alcaloides en semillas de Lupinus mexicanus (fabaceae) y evaluacin antifngica y aleloptica del extracto alcaloideo.

Resumen
Las plantas sintetizan metabolitos secundarios que se pueden aislar y usar en la agricultura como una alternativa para el control de plagas y enfermedades. Se analiz por cromatografa de gases capilarespectrometra de masas la composicin de alcaloides en semillas de Lupinus mexicanus; as mismo se estudi in vitro la actividad antifngica y aleloptica del extracto crudo de alcaloides. La accin antifngica del extracto se evalu con base en la inhibicin del crecimiento micelial de los hongos fitopatgenos Sclerotium rolfsii, Rhizoctonia solani y Fusarium oxysporum, mientras que la actividad aleloptica se evalu sobre la germinacin de semillas de Amaranthus hybridus y Echinochloacrus galli. El anlisis de alcaloides del extracto revel la presencia de lupanina, 3 hidroxilupanina, multiflorinaafilina, epiafilina y isolupanina como compuestos mayoritarios. El extracto, a concentracin de 3 mg mL1, inhibi significativamente el crecimiento micelial de R. solani en 87.7%, mientras que el micelio de S. rolfsii slo se inhibi 72.5% con la concentracin ms alta. Slo la germinacin de semillas de A. hybridus mostr diferencias significativas por efecto del extracto, y la inhibicin de la germinacin fue 80% con la mayor concentracin (1 mg mL1). La lupanina fue el alcaloide ms abundante (76.2%) en el extracto de semillas de L. mexicanus. El extracto mostr actividad inhibitoria del crecimiento micelial de R. solaniy S. rolfsii, y un efecto fitotxico o inhibidor de la germinacin de semillas de A. hybridus.

MATERIALES Y MTODOS
Extraccin de alcaloides para anlisis

Material vegetal

Cromatografa de gases capilar espectrometra de masas

Bioensayos y Anlisis estadstico

Obtencin del extracto crudo de alcaloides para los bioensayos

RESULTADOS Y DISCUSIN
Anlisis de alcaloides

Actividad antifngica
As, al aumentar las concentraciones de extracto, el crecimiento del micelio de R. solani se inhibi con promedio de 81.6, 87.7 y 100% con 3, 4 y 5 mg

Actividad aleloptica
Hubo diferencias significativas entre tratamientos para la germinacin de semillas de A. hybridus, ya que disminuy hasta 80% la germinacin con la concentracin ms alta de extracto
Aunque hay antecedentes de la alta sensibilidad de A. hybridus a la aplicacin de diferentes compuestos naturales como cidos fenlicos y aceites esenciales, ste es el primer reporte de un efecto inhibitorio importante de la germinacin de esta especie de maleza, particularmente es por el efecto de los alcaloides quinolizidnicos.

mL1 S. rolfsii fue menos susceptible que R. solani al extracto alcaloideo de L. mexicanus.
La resistencia de F. oxysporum a los alcaloides de L. mexicanus se ha reportado al usar extractos de L. montanus y L. rotundiflorus. Reportaron porcentajes de inhibicin menores a los encontrados en el presente estudio contra R. solani .

CONCLUSIONES
La lupanina fue el alcaloide ms abundante en las semillas de L. mexicanus. Con la concentracin ms alta de extracto (5 mg mL1), el crecimiento micelial de R. solani se inhibi completamente (100%), mientras que el micelio de S. rolfsii a la misma concentracin mostr una inhibicin de 72.5%. Slo la germinacin de A. hybridus se inhibi significativamente por efecto del extracto.