Colgio Dr.

Clvis Belivcqua

Patologia Clnica 3 P

MTODOS DIAGNSTICOS PARASITOLGICOS

Os exames parasitolgicos podem ser qualitativos ou quantitativos, apresentando diferentes sensibilidades na deteco de ovos e larvas de helmintos e cistos de protozorios. O sucesso diagnstico das parasitoses depende da coleta das fezes e do nmero de amostras (geralmente trs). recomendado que a amostra seja colhida no laboratrio, num recipiente seco, numa quantidade mnima de 100 gramas, e que seja analisada o mais rpido possvel, para que no ocorra a deteriorao dos parasitas mais frgeis. Quando no possvel se seguir essas especificaes, as amostras devero ser colocadas em recipientes que contenham conservantes, afim de preservar as formas parasitrias existentes. Uma vez no setor tcnico, deve-se empregar os mtodos diagnsticos mais indicados e especficos para a amostra em questo. Os mtodos de concentrao fecal geralmente mais empregados so: Mtodo de Hoffmann (Lutz, Hoffmann, Pons e Janer): sedimentao espontnea, mais indicado para a deteco de ovos pesados (A. lumbricoides infrteis, T. trichiura e S. mansoni) Mtodo de Faust: centrfugo flutuao, mais indicado para a deteco de ovos leves (A. duodenale, N. americanus, A. lumbricoides frteis, H. nana) e cistos de protozorios (G. lamblia e E. histolytica). Deve-se salientar ainda que, o histrico do paciente e o exame macroscpico das fezes so dados importantssimos que participam da escolha do mtodo parasitolgico a ser empregado. A esto descritas algumas das metodologias protoparasitolgicas empregadas em laboratrio clnico.

MTODO DE FAUST E COLABORADORES

Material: bquer pequeno, esptula de madeira, gaze ou tamis, tubo cnico, gua, soluo de sulfato de zinco a 33%, centrfuga, ala de platina, lmina, lugol, lamnula, microscpio tico. Mtodo: Dissolver cerca de 1 a 2 g de fezes em bquer com um pouco de gua. Coar a suspenso em gaze ou tamis, em um tubo cnico, enchendo-o at a marcao de 10mL. Centrifugar o tubo por 1 min a 2500 rpm. Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento. Repetir a lavagem do material por 3 a 4 vezes, sempre ressuspendendo o sedimento antes de cada lavagem. Na ltima lavagem, decantar o sobrenadante, ressuspender o sedimento muito bem, e completar os 10 mL do tubo com soluo de sulfato de zinco a 33%. Centrifugar o tubo por 1 min a 2500 rpm. Com a ala de platina dobrada em L (90), colher o material da superfcie do tubo, passando-o para uma lmina de vidro (2 ou 3 pescadas). Adicionar 01 gota de lugol, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.

MTODO DE CENTRFUGO FLUTUAO (RITCHIE; MIF ou MIFC)

Mtodo de Ritchie

quando as fezes so conservadas em formol a 10%, a tcnica tem o nome de Mtodo de Ritchie ou formolter. Quando as fezes so conservadas em MIF, o nome Mtodo de Blagg ou MIFC. Material: frasco coletador com formol a 10%, gaze ou tamis, tubo cnico, soluo de tersulfrico, centrfuga, basto, algodo, pipeta Pasteur, soluo salina, lugol, lmina, lamnula, microscpio tico. Mtodo: Coletar as fezes recm emitidas em frasco com formol a 10%, homogeneizando bem durante 2 minutos. Filtrar 1 ou 2 mL da suspenso em gaze ou tamis num tubo cnico. Adicionar 4 a 5 mL de ter-sulfrico, arrolhar o tubo e agitar vigorosamente (importante para desengordurar o material). Centrifugar por 1 min a 1500 rpm. Com o auxlio de um basto, retirar a camada de detritos. Desprezar o lquido, e limpar com algodo as paredes do tubo (que deve permanecer de boca para baixo). Acrescentar gotas de salina e/ou lugol ao sedimento. Com o auxlio de uma pipeta, colher uma gota do sedimento, colocar e lmina, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.

MTODO DIRETO
Material: lmina, lamnula, gua, lugol, microscpio tico. Mtodo: Diluir pequena quantidade de fezes (gro de arroz), em 01 gota de gua sobre a lmina. Adicionar 01 gota de lugol, homogeneizar, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.

Mtodo MIF ou MIFC

Material: Coprotest (frasco de coleta que contm conservador MIF), tubo cnico, soluo de acetato de etila ou ter, centrfuga, basto, algodo, pipeta Pasteur, soluo salina, lugol, lmina, lamnula, microscpio tico. Mtodo: Coletar as fezes recm emitidas em frasco Coprotest, homogeneizando bem durante 2 min. Transferir a suspenso para um tubo cnico, e acrescentar 3 mL de acetato de etila ou ter, arrolhar o tubo e agitar vigorosamente. Centrifugar por 3 min a 1500 rpm. Com o auxlio de um basto, retirar a camada de detritos. Desprezar o lquido, e limpar com algodo as paredes do tubo (que deve permanecer de boca para baixo). Acrescentar gotas de salina e/ou lugol ao sedimento. Com o auxlio de uma pipeta, colher uma gota do sedimento, colocar e lmina, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.

MTODO FRESCO
Material: lmina, lamnula, soluo salina a 37C, lugol, microscpio tico Mtodo: Idem ao direto, porm utilizando-se soluo salina a 37C ao invs de gua.

MTODO DE HOFFMANN
Material: bquer pequeno (ou copinho de plstico), esptula de madeira, gaze ou tamis (peneira), taa de sedimentao, pipeta Pasteur (canudinho), lmina, lugol, lamnula, microscpio tico. Mtodo: Dissolver de 2 a 5 g de fezes no bquer com um pouco de gua. Coar a suspenso em gaze ou tamis, em uma taa de sedimentao. Deixar sedimentar por um perodo de 2 a 24 horas. Aps sedimentao, com o auxlio de uma pipeta Pasteur (canudinho), coletar do fundo cnico da taa um pouco do sedimento. Passar o material para uma lmina de vidro, adicionar 01 ou 02 gotas de lugol, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.

MTODO DE KATO-KATZ (para fezes pastosas)

Material: Kit para exame parasitolgico de fezes qualitativo e quantitativo de Kato-Katz (lamnulas confeccionadas em papel celofane preparadas com glicerina + verde de malaquita a 3%, tela metlica com orifcios de 200, cartes plsticos de 0,137 mm de espessura com orifcio no meio de 6 mm de dimetro, palitos de plstico), lminas de vidro. Mtodo: Comprimir a tela metlica contra a superfcie das fezes (pelos orifcio passam os ovos de helmintos e os detritos menores). Com o palito, raspar uma pequena quantidade das fezes passadas pela malha, e preencher o orifcio central do carto de plstico, o qual deve estar colocado sobre a lmina de vidro, nivelando a superfcie com o palito. Retirar cuidadosamente o carto, deixando as fezes sobre a lmina de vidro. Com a lmina de papel celofane preparada, cobrir as fezes, inverter a lmina sobre um folha de papel absorvente e fazer compresso uniforme, para que o material se espalhe sem extravasar. Aguardar 1 ou 2 horas e realizar a leitura em microscpio tico de toda a superfcie da lmina de celofane. O nmero de ovos contados, multiplicado pelo fator 24, corresponder ao nmero de ovos por grama de fezes.
Prof Georgia Winkler

MTODO DE FAUST MODIFICADO

Material: bquer pequeno, esptula de madeira, gaze ou tamis, tubo cnico, gua, centrfuga, pipeta Pasteur, lmina, lugol, lamnula, microscpio tico. Mtodo: Dissolver cerca de 1 a 2 g de fezes em bquer com um pouco de gua. Coar a suspenso em gaze ou tamis, em um tubo cnico, enchendo-o at a marcao de 10mL. Centrifugar o tubo por 1 min a 2500 rpm. Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento. Repetir a lavagem do material por 2 a 3 vezes, sempre ressuspendendo o sedimento antes de cada lavagem. Na ltima lavagem, com a pipeta Pasteur, colher um pouco do sedimento, passando-o para uma lmina de vidro. Adicionar 01 gota de lugol, cobrir com lamnula e realizar leitura em microscpio tico.