APLICAES DA BIOCATLISE EM QUMICA ORGNICA

Eugnia Cristina Souza Brenelli Uff 2002

LCOOIS QUIRAIS
Reduo Assimtrica de Cetonas Resoluo Cintica de lcoois Racmicos

lcoois Quirais Funcionalizados

Agroqumicos Medicamentos Feromnios

Ligantes para Catlise

Produtos Naturais

AZIDO LCOOIS COMO PRECURSORES DE SNTESE

NH R
NH2
Ph Ph NHCH3

OH R N3
OH
HO

OH R NH2
OH H N tBu

OH
HO NHCH3

Ligantes
N N N H N O OH Ph H N OH

HO

Efedrina
OH N

Albuterol

OH O

H N

Indinavir

Ubina

Propranolol

HALOIDRINAS OPTICAMENTE ATIVAS NA SNTESE DE DROGAS QUIRAIS

OH Ar X Ar OH NR2 OH H N
O Me

X = Br, Cl, I ou OTs

OH H N HO

O 6

Ph 4

HO

(R)-Denopamina
OH H N

O Me

(R)-Salmeterol
HO OH H N

HO NHCHO

Me

OMe

HO OH

(R)-Formoterol

(R)-Isoproterenol

REDUO ASSIMTRICA DE CETONAS

Regra de Prelog
L O S
Transferncia de Hidreto para a face re

HO L

H S

Microorganismos Enzimas isoladas Oxidoredutases

Fermento de Po Saccharomyces cerevisiae Coenzimas NAD(P)H

Sistema Multienzimtico

Aditivos

RESOLUO CINTICA
Clssica R S Dinmica R kRAC S kR
rpido

kR
rpido

Razo Enantiomrica

P Q

E=

ln[1-c(1+eep)] ln[1-c(1-eep)] Moderada a Boa Excelente

kS
lento

E = 15-30 E = >30

P (100%)
Se

kS
lento

kRAC>> kR kRAC>> kS

kR>kS

ESTRATGIAS PARA EVITAR A REVERSIBILIDADE EM REAES DE TRANSESTERIFICAO

O R1 O O R1

R2 OH

R1 O

OR2

+ +

R 1 CO 2 H

O R1
O R1 O R

SEt

R2 OH
O

EtS H O

R1

OR2

R2 OH

+
OR2
R OH

R1

R = Me, H
O

EtO

OAc

O R2 OH OR2

OEt

APLICAES INDUSTRIAIS
O O

CH3

Bakers Yeast
O

CH3

OH

Trimegestona RU 27987 Tratamento de desordens ps menopausa

Roussel Uclaf

escala multi kg

75% 99% d.e.

Prat, D. et al Organic Process Research Development 1997, 1, 2.

APLICAES INDUSTRIAIS
CH3 O O O O CH3 OH N N N OH CH3 S N F F O CH3 O O F F F F CN

Chirazyme L-2

42-44% 98% e.e.

F F

Zaks, A. Curr. Opin. Chem. Biol. 2001, 5, 130.

Agente antifngico novo Hoffmann La Roche escala multi kg

APLICAES INDUSTRIAIS
Br N Br N H
F 3C

Cl

Br N Br N O

Cl Br N Br N H Cl

LIP-300
O O

H2SO4 refluxo

Em bateladas de 25 kg > 15 reutilizaes

42% 97% e.e.

Br N Br N O

Cl

Agente anti-cncer (nanomolar) inibidor da sntese da proteina farnesil transferase Schering Plough
Reetz, M. T. Curr. Opin. Chem. Biol. 2002, 6, 145. SCH66336

O N NH2

TEMBAMIDA E AEGELINA
Planta medicinal mais til na ndia
rvore bael fruta bael

Propriedades Curativas

Constipao Diarria e Desinteria lcera Pptica Problemas de Ouvido Desordens Respiratrias

NH O R

OH

Aegle marmelos

H3 CO

R = Ph Tembamida R = E-(CH=CH-Ph) Aegelina

http://www.indiangyan.com/books/therapybooks/ Herbs_That_Heal/bael_fruit.shtml

ROTAS BIOCATALTICAS PARA A OBTENO DE PRECURSORES DE SUBSTNCIAS NATURAIS BIOLOGICAMENTE ATIVAS

OH NH H3CO O
H3 CO OH

NH2

Intermedirio Chave

R = Ph Tembamida R = E-(CH=CH-Ph) Aegelina

O N3 H3CO

Reduo Microbial

HO

H N3

Resoluo Enzimtica
H3CO

OH N3 (+)

H3CO

Reduo Microbial
Cl

H3CO

PREPARAO DE -HALO E -AZIDO CETONAS

O
O

Cl NaN 3

N3 R1 R2

DMSO
2a-d

NaN 3 DMSO
MeO Br

Br

R1

1a-d

1e Br2 CHCl3
O

R1 = OMe, Me, Br, Cl

AlCl3 CS2
Cl O Cl

R1 = OMe, Me, Br, Cl R2 = H 2e R1 = OMe R2 = Br

FPI em K 10
HO H N3

R1 = OMe, Me, Br, Cl

R1

R1

3a-d

MeO

R2 R1 = OMe, Me, Br, Cl R2 = H 3e R1 = OMe R2 = Br

RESULTADOS - PREPARAO DE -HALO E AZIDO CETONAS E REDUO MICROBIOLGICA

O X R1 R2 O N3 R1 R2

HO

H N3

1a-e
R1 R2 H H H H Br

2a-e
% 38 40 91 83 17 2a 2b 2c 2d 2e % 76 52 41 68 49

R1 R2

3a-e
%

X Cl Cl Cl Cl Br

1a 1b 1c 1d 1e

CH3O CH3 Br Cl CH3O

3a 3b 3c 3d 3e

2 9 17 28 1

REDUO MICROBIAL DE -AZIDO CETONA

O FPI N3 (+)- 1 N3 syn-2 OH OH + N3 anti-2 OH OH

NH2 Norpseudoefedrina

NH 2 Norefedrina

ADITIVO lcool Allico (AA) Metil Vinil Cetona (MVC) Cloro Acetato de Etila (CLACE) Isopropanol (IP) Cloroacetofenona (CLAF) Nenhum Ciclopentanol (CP) L-Cistena (CYS)

Amostra 24 h ed/% 5 - syn 6 - syn 14 - anti 20 - anti 18 - anti 17 - anti

Total 48 h ed/48 h 15 syn 17 - anti 5 - anti 18 - anti 13 - anti 14 anti 16 - anti 21 - anti

Converso aps 48 h/% 18 52 16 16 10 17

RESULTADOS REDUO MICROBIAL DE -AZIDO CETONA

O N 3 FPI em K 10

HO Aditivo

H N3

MeO

MeO

[] Nenhum MVC L-Cys 5 mmol 2 mmol

Converso/ R.Q./% % 87 3 73 34 82 15

[]D30 (c em CHCl 3) -36,4 (1,1) -13,1 (1,1)

R/S Nd R R

[]D30 -39,0 c 1,1 CHCl3 97% e.e. []D30 -117,4 c 1,3 CHCl3 99% e.e.

Yadav, J. S. et al Tetrahedron:Asymmetry 2001, 12, 63. Cho, B. T. et al Tetrahedron:Asymmetry 2002, 13, 1209.

REGRA DE PRELOG PARA A REDUO ASSIMTRICA DE CETONAS

O L S
O N3

Transferncia de Hidreto para a face re

HO L

H S

OH N3

MeO

MeO

lcool de configurao R

ROTAS BIOCATALTICAS PARA A OBTENO DE PRECURSORES DE SUBSTNCIAS NATURAIS BIOLOGICAMENTE ATIVAS

OH NH H3CO O
H3 CO OH

NH2

Intermedirio Chave

R = Ph Tembamida R = E-(CH=CH-Ph) Aegelina

O N3 H3CO

Reduo Microbial

HO

H N3

Resoluo Enzimtica
H3CO

OH N3 (+)

H3CO

Reduo Microbial
Cl

H3CO

RESULTADOS REDUO MICROBIAL DE -HALO CETONA

O Cl MeO ADITIVO Nenhum Cloroacetona lcool Allico 5 mmol XAD 1180 XAD 1180/Glicose L-cistena 2 mmol Metil vinil cetona 5 mmol Sacarose Sacarose e Metil vinil cetona 5 mmol R.Q./% 43 55 64 55 50 82 45 42

Fermento de Po Aditivo
[]D
30

OH Cl MeO

(c em CHCl3) -15,5 (1,1) +4,6 (2,2) -18,2 (1,1) -21,1 (1,0) -13,5 (2,2 -16,3 (2,2) -33,3 (1,0) Nd

e.e./% 25 18 19 28 20 49 57 53

R/S R S R R R R R R

OH Cl

MeO

[ ]D22 +40,2 c 2,1 CHCl3 91% e.e

Lin, G-Q.et al Tetrahedron 1998, 54, 13059.

REGRA DE PRELOG PARA A REDUO ASSIMTRICA DE CETONAS

O L S
O Cl

Transferncia de Hidreto para a face re

HO L

H S

OH Cl

MeO

MeO

lcool de configurao R

DETERMINAO DO EXCESSO ENANTIOMRICO

OH Cl
O

MeO

(+)

Anidrido Actico DMAP Et3N

CH3 Cl

CH3

Me O

(+)-Eu(hfc)3

DETERMINAO DO EXCESSO ENANTIOMRICO

OH Cl

S
Me O

R [ ]D (-) R
MeO OH Cl

S [ ]D (+) S

Aditivo lcool Allico

(+)-Eu(hfc)3

Aditivo Sacarose

ANTIDEPRESSIVO SERTRALINA
O Cl
OH Cl Cl Cl
OH

Cl Cl
NHMe

Cl Cl Cl

Bakers yeast

95% 41% e.e 88% 99% e.e

Cl Cl

G. candidum 95% 98% e.e

Rhodotorula mucillaginosa

Fantoni, G. P. et al Tetrahedron Asymmetry 1999, 10, 3931.

Zoloft 100 mg Pfizer 14 comp. ~ R$ 67,00

Sertralina [(+)-cis-1S ,4S ]

ROTAS BIOCATALTICAS PARA A OBTENO DE PRECURSORES DE SUBSTNCIAS NATURAIS BIOLOGICAMENTE ATIVAS

OH NH H3CO O
H3 CO OH

NH2

Intermedirio Chave

R = Ph Tembamida R = E-(CH=CH-Ph) Aegelina

O N3 H3CO

Reduo Microbial

HO

H N3

Resoluo Enzimtica
H3CO

OH N3 (+)

H3CO

Reduo Microbial
Cl

H3CO

RESULTADOS RESOLUO ENZIMTICA

O

OH N3

OH
O
O

N3

+
R

N3

(+)
R

Enzima Lipase PS Amano (Pseudomonas cepacia) Lipase PS-C Amano I (Pseudomonas cepacia imobilizada em partculas de cermica) Lipase AK Amano (Pseudomonas fluorescens imobilizada em terra diatomcea) Lipase AY Amano (Candida rugosa) Lipase AY Amano (Candida rugosa) Lipase Sigma tipo VII (Candida rugosa) Protease Sigma (Aspergillus oryzae)

Solvente
ter etlico

Atividade + + + -

ter etlico

ter etlico ter etlico

RESULTADOS RESOLUO ENZIMTICA

(+)-1a R=MeO Mtodoa Tempo/h Conversob/% RQ/%(S)-(+)-2 RQ/%(R)-(-)-1 [ ]30D(S)-(+)-2 eec/%(S)-(+)-2 [ ]30D(R)-(-)-1 eed/%(R)-(-)-1 Ee A 288 37 48 33 +78,6 >95 -56,9 55 68 B 82 42 37 32 +73,0 >95 -30,8 61 80 (+)-1b R=H A 659 29 37 11 +62,9 82 -66,3 84 14 B 62 45 27 22 +50,6 85 -74,5 74 26
R O N3
OH N3 R OH N3 O

(+)

lipase PS
O

+
R

REGRA EMPRICA PARA PREVER O ENANTIMERO QUE REAGE MAIS RPIDO

L

HO M

H L
M
N3

HO

lcoois Secundrios Todas as Lipases

OH N3

Kazlauskas, R. J. et al J. Org. Chem. 1991, 56, 2656.

Enantimero S - preferido pela Lipase PS

DETERMINAO DA CONFIGURAO ABSOLUTA DO STER SINTETIZADO PELA LIPASE PS

O

Lipase PS
MeO

OH N3

Ac2O Et3N DMAP

O N3 MeO

[ ]D30 -56,9 c 1,1 CHCl3

Yadav, J. S. et al Tetrahedron:Asymmetry 2001, 12, 63. Pmies, O; Bckvall, J-E. J. Org. Chem. 2001, 66, 4022.

[ ]D30 -59,7 c 1,3 CHCl3 55% e.e.

O O N3

Lipase PS

[ ]D (+) >99% e.e.

R -ster

MeO

Lipase Candida antarctica B

[ ]D30 +78,6 c 0,98 CHCl3 >95% e.e.

SNTESE RACMICA E QUIRAL DAS HIDRXI AMIDAS NATURAIS TEMBAMIDA E AEGELINA

OH N3 OH OH NH2

+
Me O

H2
MeO

NaOH RCOCl
MeO

NH

R O

Pd/C

+
74%

Tembamida R = Ph 32% Aegelina R = E -CH=CH-Ph 10%

Lipase PS
O O

OH N3

OH

OH NH2

H2
Pd/C
MeO

NaOH RCOCl
MeO

NH O

MeO

61% e.e.

42%

Tembamida Aegelina

80% 48%

PERSPECTIVAS FUTURAS
OH H N

B L O Q U E A D O R E S

A D R E N R G I C O S

Doena Cardiovascular

H3 CSO2 NH

Sotalol
Cl

OH

H N

Cl

OH

H N

Dicloroisoproterenol
OH H N

Asma Bronquite

O2 N

Nifenalol Pronetalol

LABORATRIO DE BIOTRANSFORMAES EM QUMICA ORGNICA LAB. 11

ANTIGO PRDIO DO INSTITUTO DE FSICA

AGRADECIMENTOS
CNPq, Faperj, PROPP-Uff Programa de Ps-graduao em Qumica Orgnica Colegas do GQO Alunos de Iniciao Cientfica J. A. Brenelli Amano Pharmaceutical Co. Rohm & Haas Prof. J. O. Previato - UFRJ