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CUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGIC

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA
PRCTICA 12

DIGESTIN DE MACROMOLCULAS

INTRODUCCIN

La diversidad metablica que existe entre los microorganismos, permite la realizacin de los ciclos biogeoqumicos.

Auxtrofas Clulas Prottrofas

Factores de Crecimiento.

cidos grasos esenciales

Vitaminas

Requerimientos nutricionales y clasificacin fisiolgica Fuente de Proceso fisiolgico

Energa
Carbono

Fsica (luz)
Qumica nicamente CO2 Orgnico

Fototrofa
Quimiotrofa Autotrofa Heterotrofa

Donador inicial de electrones


Aceptor final de electrones

Inorgnico
Orgnico Orgnico Inorgnico

Litotrofa
Organotrofa Fermentacin Respiracin anaerobia

O2
CO2

Respiracin aerobia
Autotrofa, fotosntesis, metanognesis

CELULOSA

Principal componente de la membrana celular de la mayor parte de las plantas. Una clula vegetal joven contiene aproximadamente un 40% de celulosa y la madera un 50 %. El ejemplo ms representativo lo constituye el algodn que contiene ms de 90% de celulosa.

HIDRLISIS DE FOSFOLPIDOS

PROTEINASAS
Son enzimas que catalizan la hidrlisis de las protenas Unas proteasas liberan neurotransmisores y hormonas a partir de ciertos precursores inactivos

OBJETIVO
Montar ensayos de degradacin de polmeros por enzimas extracelulares microbianas.

MTODOS
Hidrlisis de Gelatina - Prueba de licuefaccin de la gelatina

- Prueba de la digestin de la gelatina y la casena en caja.

Hidrlisis de almidn

1.-

2.-

3.- Incubar a 37C Durante 48 horas 4.5.- Resultado. + Bacillus subtilis

HIDRLISIS DE FOSFOLPIDOS

Hemlisis alfa: si el halo es opaco,


indica la hidrlisis de los enlaces ster fosfato con la acumulacin extracelular de di glicridos.

Hemlisis beta: el halo es


translcido, indica la hidrlisis de los enlaces ster y la utilizacin de los productos de los cidos grasos. Hemlisis gamma : ausencia de halo.

Etiquetar y marcar loas placas de agar gelosa sangre y yema de huevo

Observar las placas de agar yema de huevo y gelosa sangre, para determinar la presencia de zonas de hidrlisis.

Sembrar los microorganismos por estra abierta en su sector respectivo.

Incubar los cultivos a 37c durante 48h.

Leche Tornasolada
Principio:
Medio diferencial utilizado para determinar diversas funciones metablicas de un microorganismo: Fermentacin de la lactosa. Reduccin del tornasol. Formacin de un cogulo. Peptonizacin (digestin). Formacin de gas.

Procedimiento

37C

Fermentacin de Lactosa

Lactosa

Lactosa

CO2 + H2

Fermentacin de la lactosa o alcalinizacin.

1. Tubo sin inocular. 2. Acidificacin 3. Alcalinizacin

Reduccin del tornasol.

1. Tubo sin inocular.

2. Reduccin de tornasol

Formacin del cogulo y digestin:

1. Tubo sin inocular. 2. Coagulacin (cida) 3. Coagulacin (alcalina) 4. Digestin

Formacin de gas y fermentacin tormentosa

1. Tubo sin inocular. 2. Fermentacin tormentosa 1 2

Autotrofa. Es la capacidad de ciertos organismos de sintetizar todas las sustancias esenciales a partir de sustancias inorgnicas.

Hydrodictyon reticulatum.

Heterotrofa. Son aquellos organismos que deben alimentarse con las sustancias orgnicas sintetizadas por otros organismos.

Las enzimas extracelulares que rompen protenas se llaman Proteasas, las que rompen polisacridos Amilasas, y las que rompen lpidos son las Lipasas.

Un ejemplo de polisacrido estructural es Celulosa. Un ejemplo de polisacrido nutricional es Glucgeno.

La casena es una protena de origen Animal, la gelatina es de origen Vegetal.

La descomposicin de los alimentos por degradacin de triglicridos provoca Rancidez.

BIBLIOGRAFA:
- MacFaddin, Pruebas Bioqumicas para la Identificacin de Bacterias de Importancia Clnica, Editorial Mdica Panamericana, Tercera edicin, Buenos Aires, 2003. - http://enzymeindia.com/enzymes/cellulase-spanish.asp - http://www2.uah.es/alorente/invest/nucleasas/nucleasas.htm - http://www.ujat.mx/publicaciones/uciencia/diciembre2005/cel ulasa_art6.pdf