Manuteno das Cepas ATCC

Marins Dalla Valle Martino

Hospital Israelita Albert Einstein Faculdade de Cincias Mdicas da Santa Casa-SP

 ATCC

American Type Culture Collection http://www.atcc.org/

 ATCC

Reconstituir as cepas de acordo com as orientaes do fabricante

Congelamento a longo prazo

1.repicar a cepa em gar sangue ( ou outro meio em placa no seletivo) 2.incubar overnight em atmosfera adequada 3.repicar novamente*. 4.a partir desta semeadura, fazer um inculo bem pesado em um tubo contendo 10 ml de caldo Brucella com 15% de glicerol*.

Congelamento a longo prazo

5. agitar (15 a 20 s.) 6. Dispensar aproximadamente 1 ml em 10 frascos. 7.congelar a 60 C* ou menos por at 3 anos*.

Congelamento a longo prazo

A. Alguns microrganismos conseguem sobreviver e manter suas caractersticas de sensibilidade antimicrobiana por mais tempo. B.Alguns so mais sensveis ao congelamento (Streptococcus pneumoniae e Neisseria gonorrhoeae ) C. Para alguns necessrio adicionar antimicrobiano: penicilina para N.gonorrhoeae produtora de penicilinase ( 1g/ml).

Recomendaes - NCCLS
Armazenamento prolongado: -20C ou abaixo. (-60 C ou nitrognio lquido) Meios para armazenamento: caldo com soro fetal 50%, TSB com 15% de glicerol, sangue de carneiro desfibrinado ou leite desnatado.

Recomendaes - NCCLS
Meios para controle culturas em uso : TSA ou gar chocolate (fastidiosos), 2-8 C e subcultivada semanalmente por no mais de 3 semanas sucessivas. Cepas congeladas devem ser cultivadas pelo menos por 2 vezes antes do teste

Recomendaes - NCCLS
Cuidados especiais para cepas E.coli ATCC 35218 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Risco para perda de plasmdeos

Descongelamento
Retirar material da superfcie- sem descongelar. Qdo descongelar no retornar o frasco para o freezer
Programar frascos para perodos >s

Recomendaes
Testar pureza da cepa.
Anexar identificao. Identificao adequada.

Opes
Meios Comerciais.

Tempo de preservao
10 a : em freezer -70C Fastidiosos: < tempo -20C: < tempo Frost free: no

 Isemberg HD- Clinical Microbiology Procedures Haandbook- 2.ed, 2004. NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS - Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests.; Approved Standard, Eighth Edition, M2-A8 2003. NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically; Approved Standard, Sixth Edition, M7-A6, 2003