http://www.sciencedirect.

com/science/article/pii/0022175979900486 Luminescence immunoassay (LIA): Sebuah immunoassay fase padat dipantau oleh chemiluminescence
Sebuah immunoassay luminescence (LIA) telah dikembangkan memanfaatkan reaksi luminol chemiluminescent dengan heme sebagai katalis. Antibodi kelinci terhadap albumin serum manusia yang secara kuantitatif dalam antigen tabung dilapisi plastik menggunakan kambing tersedia secara komersial anti-kelinci IgG terkonjugasi untuk horseradish peroksidase yang merupakan sumber heme. The terukur berbagai antibodi jauh lebih luas oleh LIA daripada enzim immunoassay. Waktu untuk mengembangkan dan mengukur aktivitas pendek dan konstan yang membuat LIA cocok untuk otomatisasi. Dalam bentuknya yang sekarang, LIA sedikit kurang sensitif tapi memiliki lebih baik dari hari-hari reproduktifitas dibandingkan enzim immunoassay yang sesuai.

Serodiagnosis dan imunoterapi di Penyakit Infeksi http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0888078693900393

Abstrak
Sebuah immunoassay luminescent (LIA) dievaluasi untuk potensi penggunaannya dalam diagnosis bronchopulmonary aspergillosis alergi (ABPA). Bila dibandingkan dengan kromogenik assay enzyme-linked immunosorbent (ELISA), LIA itu ditemukan untuk menjadi lebih sensitif. The LIA bisa mendeteksi sampai 0,19 ng IgG manusia dalam sampel. Batas pendeteksian dari ELISA adalah 1,48 ng. The ELISA absorbansi atau emisi LIA signifikansi diagnostik diperoleh pada pengenceran 1: 400 dengan ELISA dan 1: 2400 oleh LIA dalam sampel ABPA.

Immunoassay luminescent dalam analisis klinis

http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0165993682880229 Abstrak
Immunoassay luminescent adalah metode baru untuk menentukan konsentrasi senyawa organik banyak terdapat di cairan tubuh yang kompleks. Keuntungan atas tes konvensional sangat sensitif, berbagai respon linear, kecepatan analisis dan stabilitas reagen.

1 . Luminescence immuno - test kit terdiri terutama dari antigen atau antibodi berlabel dengan hidrazida ftalat mampu menunjukkan luminescence , antibodi atau antigen dan agen pengoksidasi mendorong pendaran terjadi , dicirikan bahwa zat pengoksidasi adalah solusi pra-fabrikasi katalase dan bahwa inisiator adalah solusi peroksida pra-fabrikasi yang setidaknya 20 menit lama. 2 . Kit menurut klaim 1 dimana solusi katalase distabilkan oleh agen bakteriostatik . 3 . Kit menurut klaim 2 , dicirikan bahwa natrium azida digunakan sebagai agen bakteriostatik . 4 . Kit menurut klaim 1 , dicirikan bahwa peroksida complexed digunakan sebagai peroksida .

5 . Kit menurut klaim 2 , dimana peroksida complexed digunakan sebagai peroksida . 6 . Sebuah kit menurut klaim 1 dimana kata katalase solusi tambahan berisi etanol 1 sampai 10% dan 0,1 sampai 5 g / l EDTA . 7 . Sebuah kit menurut klaim 2 dimana kata katalase solusi tambahan berisi etanol 1 sampai 10% dan 0,1 sampai 5 g / l EDTA . 8 . Metode untuk menyediakan luminescence kit immuno -test stablized dasarnya terdiri dari antigen atau antibodi berlabel dengan hidrazida ftalat mampu menunjukkan luminescence , antibodi atau antigen dan merangsang reagen oksidasi mengatakan luminescence terjadi dimana stabilisasi dilakukan dengan menambahkan kata mengoksidasi reagen dalam bentuk solusi pra-fabrikasi katalase , dan inisiator ditambahkan dalam bentuk larutan peroksida pra-fabrikasi yang setidaknya 20 menit lama. 9 . Metode klaim 8 dimana solusi katalase distabilkan oleh agen bakteriostatik . 10 . Metode menurut klaim 9 , dicirikan bahwa natrium azida digunakan sebagai agen bakteriostatik . 11 . Metode menurut klaim 8 , dicirikan bahwa peroksida complexed digunakan sebagai peroksida . 12 . Metode menurut klaim 10 , dicirikan bahwa peroksida complexed digunakan sebagai peroksida . 13 . Metode menurut klaim 8 dimana kata katalase solusi tambahan berisi etanol 1 sampai 10% dan 0,1 sampai 5 g / l EDTA . 14 . Metode menurut klaim 10 dimana kata katalase solusi tambahan berisi etanol 1 sampai 10% dan 0,1 sampai 5 g / l EDTA . Keterangan : Penemuan ini berhubungan dengan pendaran kit immuno- uji yang mengandung antigen atau antibodi mampu menunjukkan pendaran dan diberi label dengan Hydrazide ftalat , antibodi atau antigen disukai terikat dengan operator dan reagen pengoksidasi menginduksi luminescence terjadi , dan metode untuk stabilisasi reagen dan daripadanya kontrol kualitas . Latar Belakang Penemuan Pendaran immuno - tes pada dasarnya cocok untuk immunoassays seperti pada penanganan hati-hati dan kompeten mereka memenuhi semua persyaratan untuk presisi dan batas pengukuran secara optimal . Namun, sejauh ini metode pengujian tetap terbatas pada beberapa laboratorium khusus , seperti penanganan adalah hasil yang relatif rumit dan dapat diandalkan diperoleh hanya dengan penanganan paling hati-hati dan kompeten . Kerugian lebih lanjut saat pendaran immuno - tes adalah bahwa reagen pengoksidasi memulai luminescence tidak penyimpanan stabil selama periode waktu yang lama dan, dengan demikian , selalu harus baru disiapkan . Ini pada gilirannya membuat kualitas yang diperlukan cek sangat sulit dan mahal . Dengan demikian , itu adalah objek pertama dari penemuan ini untuk membawa sebanyak reagen dan komponen yang diperlukan mungkin ke bentuk stabil cocok untuk digunakan dalam pemeriksaan kualitas sederhana dan dapat diandalkan .

Dalam Pemohon Jerman Permohonan Paten No P 34 39 742 ada telah diusulkan suatu proses untuk memulai emisi cahaya oleh oksidasi Hydrazide ftalat dalam pendaran immuno - tes oleh additon pseudoperoxidase , natrium hidroksida berair dan peroksida encer , dimana pseudoperoxidase tersebut akan ditambahkan ke batch tes sebelum pengukuran dan inisiasi emisi cahaya dipengaruhi oleh penambahan larutan alkali peroksida yang 0,3-10 jam tua . Upaya untuk menstabilkan microperoxidase dalam keadaan terlarut telah gagal , karena enzim ini memiliki kecenderungan untuk membusuk , lebih khusus pada temperatur tinggi ketika dikirim atau disimpan , dan akan kehilangan aktivitasnya . Shroeder dan Yeager ( Analytical Chemistry, Vol . 50 , No 8 , halaman 1114-1120 ) menyelidiki berbagai oksidan dalam studi banding , sehingga temuan bahwa , hematin dan microperoxidase yang baik khususnya cocok sebagai oksidan , kemudian microperoxidase dianggap sebagai katalis dari pilihan pertama . Namun, sayangnya masih diperlukan untuk mempersiapkan solusi baru microperoxidase setidaknya setiap hari dan gunakan sampai habis pada hari yang sama . Investigasi Pemohon menyebabkan hasil yang hemin dan hematin tidak memberikan solusi storage yang stabil , baik . Percobaan dengan peroksidase , dibandingkan dengan microperoxidase , menghasilkan hasil sinyal secara signifikan lebih miskin , sehingga temuan bahwa peroksidase kurang memuaskan untuk penggunaan praktis . Ringkasan Penemuan Hal ini mengejutkan telah ditemukan bahwa enzim katalase , lebih khusus dalam bentuk buffered dan di hadapan sebuah bacteriostat , memberikan solusi yang sangat stabil yang juga memastikan hasil cahaya yang baik akan diperoleh bila digunakan sebagai katalis untuk memulai pendaran dalam tes immuno . Itu sangat mengejutkan bahwa tidak hanya antibiotik, tetapi juga sodium azide dapat digunakan sebagai bacteriostat tersebut . Karena natrium azida telah dikenal untuk menjadi racun enzim , itu tidak berarti bahwa agen mendatang ini akan cocok untuk menstabilkan solusi katalase untuk pendaran immuno - tes . Sebagai buffer untuk solusi katalase ada sangat baik cocok ( a) physiolofical saline ( 0,15 mol / l NaCl ) , ( b ) 0,05 mol / l larutan fosfat ( pH 6 ) , atau keduanya , jika diinginkan , dengan penambahan 10 micromoles / l timol . Dengan demikian , novel luminescence immuno - tes sesuai dengan penemuan ini dicirikan bahwa reagen pengoksidasi adalah solusi pra-fabrikasi katalase , opsional distabilkan oleh bacteriostat , dan inisiator adalah solusi peroksida pra-fabrikasi yang setidaknya 20 menit tua. Uraian Lengkap Peroksida complexed telah terbukti berguna, karena mereka stabil dalam penyimpanan solid state dan dalam larutan alkali , dan ketika disimpan selama paling sedikit 20 menit , mereka cukup stabil selama hari pengukuran . Penuaan selama 20 menit diperlukan karena , selama 20 menit pertama setelah pencampuran peroksida dan alkali , perangkat tambahan sinyal yang signifikan diamati dalam pendaran immuno -test . Sinyal ini menghasilkan peningkatan dalam peningkatan penting dalam sensitivitas , khususnya yang berkaitan dengan batas bawah deteksi . Namun, ini proses pematangan solusi mengarah ke pemalsuan nilai yang terukur . Oleh karena itu, hasil yang optimal diperoleh ketika solusi peroksida alkali adalah dari 20 menit sampai 10 jam tua . Menurut penemuan sekarang mungkin untuk menstabilkan pendaran immuno- tes yang terdiri dari

antigen atau antibodi mampu menunjukkan pendaran dan diberi label dengan Hydrazide ftalat , antibodi atau antigen disukai terikat dengan operator dan reagen pengoksidasi mendorong pendaran terjadi dengan menambahkan reagen pengoksidasi sebagai aa pra -fabrikasi solusi katalase , opsional distabilkan oleh bacteriostat , dan inisiator dalam larutan peroksida pra-fabrikasi yang setidaknya 20 menit lama. Peroksida sangat cocok untuk digunakan dalam penemuan ini , semakin peroksida complexed padat seperti natrium peroksida , natrium percarbonate , natrium perborate , amonium peroxodisulfate dan tablet Perhydrit commercialy tersedia di mana hidrogen peroksida terikat pada urea . Sebagai Hydrazide ftalat cocok maka dapat disebutkan 6 - [ - N - ( 4 - aminobutyl - N - etil ) isoluminol ] hemi - succinamide ( ABEI - H ) serta Hydrazide dijelaskan dalam Paten AS . No 4.363.759 , 4.334.069 , 4.297.273 , 4.225.485 dan 4.331.808 . Selain itu , Hydrazide ftalat yang cocok adalah mereka yang memiliki cincin benzena menyatu seperti Hydrazide naftil . Menurut penemuan sekarang juga memungkinkan untuk lebih sederhana dan cepat melaksanakan kontrol kualitas yang dibutuhkan dari pendaran immuno- tes . Kontrol ini kualitas harus menentukan kondisi unobjectionable dari reagen mendorong pendaran dan kondisi peralatan pengukuran . Telah terbukti bahwa konsep yang berbeda dari luminometers tersedia secara komersial saat ini dapat mengakibatkan deviasi yang cukup besar dan kerusakan tidak dapat diterima . Tergantung pada jenis pengukuran sinyal chemiluminescence , unit sangat berbeda dari pengukuran diperoleh . Dengan demikian, beberapa luminometers mendeteksi sinyal chemiluminescence dalam bentuk fluks foton ( diukur kuantitas = volt ) , sementara yang lain melakukannya dengan merekam peristiwa signle foton ( diukur kuantitas = pulsa atau jumlah ) . Selain itu, telah ditemukan bahwa bahkan dengan penggunaan beberapa bidang aparatur jenis instrumen yang sama dan menggunakan reagen identik penyimpangan dari instrumen ke instrumen lebih dari 20 % yang diamati . Hal ini jelas karena kesulitan kalibrasi photomultipliers digunakan dalam luminometers . Dalam program investigasi komparatif, tidak hanya berbagai reagen tetapi juga instrumen yang berbeda , kini mengejutkan telah mengamati bahwa , pada pengukuran didefinisikan sampel kontrol chemiluminescent , nilai yang diukur dari yang dibedakan dari satu sama lain dengan faktor antara 2 dan 100 , dan lebih disukai antara 5 dan 20 , rasio nilai yang diukur dari kata sampel kontrol adalah konstan dalam margin yang relatif sempit terlepas dari alat ukur yang digunakan . Oleh karena itu, instrumen dan bahan kimia dapat dengan mudah dan andal diperiksa dengan cara hanya dua nilai kontrol I dan II dibedakan satu sama lain dengan faktor didefinisikan ( misalnya, 10) , jika nilai-nilai berikut diukur atau dihitung , masing-masing : ( a) nilai kosong Instrumen ( GLW ) ( b ) nilai kosong Reagen ( RLW ) ( c ) nilai Pengendalian I dan II ( KI dan KII ) ( d ) rasio KII / KI dan ( e ) rasio KI / RLW . Dalam beberapa kasus mungkin dianjurkan untuk menghitung rasio RLW / GLW di samping mantan data. Hal ini dimungkinkan untuk memasukkan kata nilai ke dalam komputer yang dalam kasus penyimpangan dari nilai yang ditetapkan akan langsung menunjukkan sumber-sumber kesalahan .

Terutama mengejutkan adalah temuan bahwa , selain dari menentukan nilai yang terukur di atas dan quotients yang dapat ditentukan hanya sebelum uji, kontrol kualitas dapat dilanjutkan selama rangkaian uji juga, seperti dalam pengukuran aktual sinyal setengah - nilai waktu T1 / 2 adalah mendekati konstan . Setelah pengukuran sinyal ini waktu setengah - nilai dan perbandingan tersebut kepada nilai awal segera setelah kalibrasi instrumen , itu menunjukkan apakah semua parameter masih dalam rangka dan , karena itu , hasil yang dapat diandalkan dapat diharapkan . Sebuah perubahan bertahap atau tiba-tiba sinyal waktu setengah - nilai menunjukkan bahwa baik kesalahan terjadi pada instrumen atau mengenai reagen yang dapat mengganggu keandalan hasil akhir . Instrumen nilai kosong ( GLW ) ditentukan dengan cara pengukuran dilakukan tanpa penambahan reagen . Di sini nilai obtaned harus relatif kecil dan sesuai dengan nilai-nilai empiris yang dilaporkan oleh produsen instrumen . Sebuah kerusakan yang disebabkan oleh cahaya asing yang tidak diinginkan menjadi nyata oleh harga pulsa yang sangat tinggi yang seringkali melebihi batas atas deteksi instrumen . Reagen kosong ( RLW ) nilai ditentukan oleh pertama menyuntikkan larutan katalase ke dalam sel pengukuran , membawa sel pengukuran ke posisi pengukuran , menyuntikkan larutan alkali peroksida ke dalam sel dan kemudian menentukan luminescence . Nilai-nilai diukur masing umumnya lebih tinggi daripada GLW , namun mereka tidak boleh melebihi batas atas ditentukan dari nilai-nilai empiris . Jika dengan GLW benar batas atas ditetapkan untuk RLW yang jelas melebihi , ini menunjukkan bahwa salah satu atau kedua reagen merangsang chemiluminescence yang terkontaminasi dengan zat menghasilkan sinyal chemiluminescence tidak spesifik . Sel pengukuran yang terkontaminasi atau botol mungkin juga faktor penyebab . Namun, jika GLW sama dengan RLW , ini mungkin karena penggunaan reagen telah menjadi tidak dapat digunakan atau sistem injeksi rusak . Rasio KII / KI harus sesuai dengan nilai yang solusi I dan II sebelumnya telah disesuaikan. Rasio KI / RLW harus berada dalam kisaran antara 20 sampai 70 . Dalam rangka untuk memastikan keandalan yang cukup , setiap pengukuran harus dilakukan setidaknya dalam rangkap dua , atau lebih baik dalam rangkap tiga , dan rata-rata dari penentuan ini harus dievaluasi . Jika koefisien variasi dari beberapa analisa adalah lebih dari 5 % , penyebabnya harus ditentukan . Dengan penyimpangan yang signifikan dari hasil bagi dari KII / KI dan KI / RLW , derajat dan jenis penyimpangan menunjukkan kesalahan tertentu telah terjadi sehingga penentuan dapat dibuat sesuai. Karena kenyataan bahwa dengan alat yang tepat dan dengan reagen unobjectionable sinyal setengah nilai waktu T1 / 2 adalah sekitar konstan, pengukuran parameter ini memungkinkan setiap nilai yang diukur individu yang akan diperiksa secara teratur . Hal ini lebih lanjut menunjukkan bahwa pengukuran dan perhitungan , masing-masing, dari data di atas diukur dan perbandingan, dan, khususnya , dari sinyal setengah - nilai waktu , berlaku tidak hanya untuk pendaran immuno- tes sesuai dengan penemuan ini , tetapi dengan cara yang sama juga untuk tes lain di mana antigen acridine -label atau antibodi yang digunakan sebagai sistem bercahaya . Sebagai turunan acridine ada sangat cocok zat dijelaskan dalam Eropa Published Paten EP No - 05 0 082 636 . Dengan demikian , tujuan selanjutnya dari penemuan ini adalah untuk menyediakan metode untuk kontrol kualitas pendaran immuno - tes yang terdiri dari antigen atau antibodi mampu menunjukkan pendaran dan diberi label dengan Hydrazide ftalat atau kelompok acridine , antibodi atau antigen disukai terikat pembawa dan reagen pengoksidasi menginduksi luminescence , metode mana yang dicirikan bahwa reagen pengoksidasi , jika diperlukan , merupakan solusi pra-fabrikasi katalase , opsional distabilkan oleh bacteriostat , dan inisiator adalah solusi peroksida pra-fabrikasi yang setidaknya 20 menit lama , dan bahwa nilai-nilai berikut diukur atau dihitung , masing-masing :

( a) nilai kosong Instrumen ( GLW ) ( b ) nilai kosong Reagen ( RLW ) ( c ) nilai Pengendalian I dan II ( KI dan KII ) ( d ) rasio KII / KI dan ( e ) rasio KI / RLW . Lebih disukai bahwa nilai-nilai diukur atau dihitung dari ( a) sampai ( e ) dimasukkan ke dalam komputer yang , dalam kasus penyimpangan ditentukan pada perbandingan dengan nilai-nilai yang telah ditetapkan masing-masing , menampilkan sumber-sumber kesalahan . Sebaiknya , sinyal setengah - nilai waktu T1 / 2 diukur di samping mantan dan dibandingkan dengan nilai yang telah ditetapkan yang memungkinkan kontrol kualitas tetap harus diselesaikan . Dalam beberapa kasus khusus dan ketika jenis tertentu dari instrumen yang digunakan, mungkin juga berguna untuk menghitung rasio RLW / GLW dalam rangka untuk menarik perhatian beberapa sumber kemungkinan kesalahan dalam kasus penyimpangan mengatakan rasio dari pra - menetapkan nilai . Pendaran kit immuno -test menurut penemuan , metode untuk menstabilkan sama dan metode untuk daripadanya kontrol kualitas lebih lanjut digambarkan dalam contoh-contoh yang tidak membatasi berikut . Contoh 1 Persiapan siap- penggunaan dan penyimpanan solusi catalse stabil : 4-20 106 unit katalase diperoleh dari hati sapi , berat molekul sekitar 240.000 , dilarutkan dalam 1 liter dari 0,15 mol / l larutan NaCl yang mengandung 0,1 % ( b / v ) natrium azida . Satu unit katalase , menurut definisi , adalah jumlah bereaksi 1 micromole hidrogen peroksida per menit pada pH 7,0 dan suhu 25 C. Konsentrasi akhir dalam satuan katalase per liter yang akan dipilih akan tergantung pada kualitas reagen tambahan diperlukan atau digunakan , masing-masing, untuk memulai sinyal chemiluminescence dari Hydrazide ftalat atau turunannya dan dapat disesuaikan sesuai atau dioptimalkan . Solusi yang dijelaskan disini sebelumnya stabil pada suhu 4 C selama 6 bulan dan pada suhu kamar selama 2 bulan . Bahkan pada 37 C. masih memiliki stabilitas penyimpanan 35 hari . Solusi katalase yang sama, bagaimanapun , tanpa penambahan natrium azida , bahkan agak lebih stabil dalam penyimpanan , terutama pada suhu tinggi . Namun sangat rentan terhadap infeksi bakteri . Nilainilai diukur untuk stabilitas lama solusi katalase menurut penemuan yang ditampilkan pada Gambar terlampir. 2 . Dari hasil itu tampak jelas bahwa solusi katalase mungkin siap dikirim dari produsen ke konsumen bahkan selama musim panas tanpa kekhawatiran bahwa solusi akan menjadi tidak dapat digunakan . Karena penambahan natrium azida , tidak ada pertumbuhan bakteri telah diamati bahkan setelah enam bulan . Aktivitas enzim yang memburuk dengan aditif ini hanya untuk tingkat diabaikan . Nilai-nilai diukur ditetapkan dalam Gambar . 2 diperoleh sebagai berikut : 100 ml dari sampel kontrol ( ftalat hydrazide protein derivatif berlabel ) mampu menghasilkan sinyal chemiluminescence

didefinisikan dalam Berthold Luminometer LB 9500 dicampur dengan 300 ml larutan siap digunakan katalase disimpan di bawah persyaratan sebagaimana dimaksud . Sampel ditempatkan pada posisi pengukuran dan reaksi chemiluminscence ini diprakarsai oleh injeksi 300 ml larutan peroksida alkali . Sinyal yang diperoleh dibandingkan dengan yang diperoleh dengan solusi katalase baru disiapkan dan ditunjukkan dalam persen . Contoh 2 Pembuatan larutan alkali peroksida : solusi 100 mg natrium percarbonate ( 2 Na2 CO3 3 H2 O2 ) dilarutkan dalam 100 ml larutan natrium hidroksida 0.2N . Solusi ini dibiarkan pada suhu kamar selama 30 menit . Untuk memulai sinyal chemiluminescence derivatif hidrazida ftalat dan acridinium derivatif , 300 ml larutan ini diinjeksikan ke dalam sel ukur sesuai atau botol ditempatkan pada posisi pengukuran dan mengandung sampel yang akan diuji . Solusinya adalah stabil pada suhu kamar ( 18 C sampai 22 C ) setidaknya selama satu hari dan mengukur pada suhu lemari es ( 4 C ) selama sekitar 7 hari . 100 mg natrium percarbonate mengandung jumlah yang sama oksigen aktif sekitar 80 mg larutan hidrogen peroksida 35 % . solusi B 200 mg sodium perborate ( NaBO2 H2 O2 3 H2 O ) dilarutkan dalam 100 ml 0,2 N larutan natrium hidroksida . Gunakan dibuat sebagai solusi untuk A. Solusi B stabil pada suhu kamar ( 18 C sampai 22 C ) setidaknya selama satu hari dan mengukur pada suhu lemari es ( 4 C ) setidaknya selama 10 hari . 100 mg sodium perborate mengandung jumlah yang sama oksigen aktif sekitar 61 mg dari 35 % larutan peroksida hydrogrn . solusi C Satu tablet ( 1 g) Perhydrit dilarutkan dalam 100 ml larutan natrium hidroksida 1N . Gunakan dibuat sebagai solusi untuk A. Solusi C stabil pada suhu kamar ( 18 C sampai 22 C ) setidaknya selama satu hari dan mengukur pada suhu lemari es ( 4 C ) setidaknya selama 10 hari . 1 tablet ( = 1 g) Perhydrit mengandung jumlah yang sama oksigen aktif sekitar 1 g larutan hidrogen peroksida 35 % . Contoh 3 Pendaran immuno - test kit : Untuk pendaran immuno - tes dua paket terpisah disusun sebagai berikut : Immuno kit ( cukup untuk 100 penentuan ) Dalam termos terpisah , jumlah yang cukup untuk 100 penentuan antibodi carrier- terikat atau antigen dan antibodi atau antigen berlabel dengan derivatif hidrazida ftalat yang dikemas , seperti seri pengenceran standar yang dirancang untuk kalibrasi dan mengandung konsentrasi didefinisikan antigen dan antibodi , masing-masing . Untuk immunotests , misalnya menurut metode sandwich antigen - atau spesies - spesifik antibodi yang sesuai juga disediakan . Kit ini immuno terdiri sehingga sesuai dengan tujuan penggunaannya , namun , mereka sama sekali digunakan dalam kombinasi dengan kit reagen berikut .

Reagen kit (untuk 1.000 sampai 5.000 penentuan ) Dalam reagen kit ada gabungan azida - stabil katalase solusi , peroksida complexed padat dan larutan natrium hidroksida 1N serta solusi kontrol I dan II yang mengandung turunan bercahaya . Untuk aplikasi praktis peroksida dilarutkan dalam larutan natrium hidroksida . Solusi ini siap digunakan setelah 20 menit penuaan dan stabil setidaknya selama seluruh hari pengukuran . Contoh 4 Kontrol kualitas : Untuk sejumlah luminometers berbeda nilai instrumen kosong ( GLW ) , nilai-nilai kosong reagen ( RLW ) , dan nilai kontrol I dan II ( KI dan KII ) diukur , dan quotients dari KII / KI dan KI / RLW dihitung . Inisiasi sinyal chemiluminescence disebabkan oleh diuraikan di atas katalase solusi dan larutan alkali peroksida . Setiap nilai diukur dalam rangkap tiga , dan rata-rata digunakan untuk penilaian. Semua koefisien variasi berada di bawah 5 %

PENDAHULUAN
immunoassay luminescence (LIA) telah dikembangkan memanfaatkan reaksi luminol chemiluminescent dengan heme sebagai katalis. Antibodi kelinci terhadap albumin serum manusia yang secara kuantitatif dalam antigen tabung dilapisi plastik menggunakan kambing tersedia secara komersial anti-kelinci IgG terkonjugasi untuk horseradish peroksidase yang merupakan sumber heme. The terukur berbagai antibodi jauh lebih luas oleh LIA daripada enzim immunoassay. Waktu untuk mengembangkan dan mengukur aktivitas pendek dan konstan yang membuat LIA cocok untuk otomatisasi. Dalam bentuknya yang sekarang, LIA sedikit kurang sensitif tapi memiliki lebih baik dari hari-hari reproduktifitas dibandingkan enzim immunoassay yang sesuai.

UJI PRINSIP Luminescence immunoassay berdasarkan prinsip persaingan. Sebuah jumlah yang tidak diketahui antigen hadir dalam sampel dan jumlah tetap enzim antigen berlabel bersaing untuk situs pengikatan antibodi dilapisi ke sumur. Setelah inkubasi sumur dicuci untuk menghentikan reaksi kompetisi. Setelah penambahan larutan substrat pendaran intensitas pendaran diukur berbanding terbalik dengan jumlah antigen dalam sampel. Hasil sampel dapat ditentukan secara langsung menggunakan kurva standar
LIMIT DETEKSI LIA bisa mendeteksi sampai 0,19 ng IgG manusia dalam sampel.