Antioksidan dan Aktivitas Antiperoxidative dari Ekstrak encer Hibiscus sabdariffa L.

Calyx diinduksi Alkohol Pada Peroksidasi Lemak Hati dalam Tikus

Tugas Kimia Bioorganik mereview jurnal internasional

disusun oleh : Andy Octavian 4311411027

KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG SEMARANG 2013

BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Konsumsi Alkohol (etanol) merupakan bahaya yang serius bagi kesehatan , merupakan kedua yang paling banyak digunakan sebagai substansi psikoaktif di dunia. Bila alkohol dikonsumsi biasanya akan dimetabolisme oleh hati yang pertama asetaldehida kemudian baru asetat. Akhirnya, asetat dioksidasi menjadi karbon dioksida, asam lemak dan air. Konsumsi alkohol menghasilkan jumlah perubahan fungsi sel dan system oksidan-anti oksidan. Yang mengarah ke generasi reaktif spesies oksigen. Spesies reaktif oksigen jika tidak dihapus dari sistem dapat menyebabkan berbagai jenis toksisitas jaringan termasuk kerusakan hati. Sebagai konsekuensi dari oksidatif konstan, sel telah berevolusi menjadi sistem antioksidan untuk melawan fluks pro-oksidan. Salah satu sistem tersebut adalah enzim antioksidan, yang meliputi katalase (CAT), glutathione peroksidase (GPX ) dan superoksida dismutase (SOD). Hibiscus sabdariffa (rosela) dari family Malvaceae yang tumbuh dominan terutama di daerah tropis dan subtropis. tanaman calyxes telah digunakan untuk berbagai tujuan termasuk minuman , permen dan jelly. Ini adalah obat tradisional untuk abses, disuria, demam, hipertensi dan penyakit kudis. Sifat farmakologi ekstract tanaman calyx termasuk efek antikanker, aktivitas hepatoprotektif terhadap toksisitas karbon tetraklorida, aktivitas nephroprotective, perlindungan terhadap stress karena induksi oksidatif kadmium, Efek saraf. Senyawa bioaktif terdapat di Hibiscus sabdariffa termasuk antosianin, asam sitrat, asam malat, asam tartarat , flavonol glikosida gosypitrin , myricetin , hibicetrin , querceetin , asam protocatechuic dan sterol. Alkohol diketahui menyebabkan kerusakan hati melalui peroksidasi lemak hati. Penelitian ini dilakukan untuk menyelidiki kegiatan antioksidan dan antiperoxidative ekstrak cair kelopak Hibiscus sabdariffa diinduksi alcohol pada peroksidasi lemak hati

Permasalahan Konsumsi alcohol secara berlebihan dapat menyebabkan kerusakan pada hati yang disebabkan oleh induksi alcohol sehingga terjadi peroksidasi lemak hati sehingga mengubah fungsi sel dan system oksidan-anti oksidan. Penelitian ini dilakukan untuk mencegah kerusakan hati karena alcohol yang dapat dilakukan melalui pemberian ekstrak cair dari kelopak Hibiscus sabdariffa. Penamabahan ekstrak ini dapat menghambat induksi alcohol pada peroksidasi lemak hati dan meningkatkan kadar enzim antioksidan. Penghambatan peroksidasi lemak hati adalah salah satu cara yang dapat memberikan perlindungan terhadap hati terhadap toksisitas alcohol. Tinjauan Pustaka Hibiscus sabdariffa tumbuh tegak, sebagian besar bercabang, merupakan semak tahunan . Bunga berwarna merah ke kuningan. Kandungan Calyxes segar kaya riboflavin, asam askorbat, niacin, karoten , kalsium dan besi yang nutrisi penting. Calyxes digunakan untuk membuat minuman dingin dan panas di banyak negara tropis dan sub - tropis dunia . Cairan ini membuat anggur yang sangat berwarna-warni ( Duke , 1983) . di Amerika Serikat , peraturan Food and Drug memungkinkan penggunaan ekstrak ini dalam minuman beralkohol ( Facciola , 1990) . Hibiscus sabdariffa ditemukan mengandung antioksidan seperti flavonoid , polifenol dan anthocyanines . itu keberadaan bahan kimia ini dalam bunga membantu mencegah oksidasi lipoprotein densitas rendah ( Bown , 1995) . Hibiscus anthocyanin adalah pigmen alami fenolik diekstrak dari calyces kering H. sabdariffa . Anthocyanin , subkelompok dari flavonoid , adalah air glikosida larut ( Tsai et al . , 2002) . konsumsi anthocyanin telah ditemukan untuk mengurangi risiko penyakit jantung koroner dan mencegah beberapa kronis penyakit ( Renaud dan De Logeril, 1992) . Penyakit hati karena alkohol adalah penyakit terinduksi alkohol melalui genetik , psikososial dan faktor lingkungan yang mempengaruhi perkembangannya. Penyakit ini sering progresif dan dianggap menjadi penyebab utama stres oksidatif yang terlibat dalam jalan

fisiologi sejumlah besar penyakit atau gangguan yang dimulai dan / atau diperburuk oleh prooksidan seperti berbagai obat termasuk alkohol dan makanan tambahan. Selain itu , alkohol tertelan menghasilkan ketidakseimbangan metabolisme mencolok dalam hati itu mengarah pada pembentukan spesies oksigen reaktif.

Penghilangan oksigen reaktif dapat menyebabkan kerusakan sel karena menyerang membran lipid, protein dan menonaktifkan enzim sehingga mediasi beberapa bentuk kerusakan jaringan. Saat ini, belum ada cara yang efektif untuk pencegahan salah satu atau pengobatan. Penyakit hati karena alkohol meningkat dari hari ke hari khususnya di negara-negara berkembang termasuk India. Penelitian ini direncanakan dengan tujuan untuk menyelidiki kerusakan oksidatif dan efisiensi sistem pertahanan antioksidan pada pasien penyakit hati alkoholik

BAB II METODE 1. Bahan tanaman Kelopak Hibiscus sabdariffa dikumpulkan dari salah satu peternakan di Modibbo Adama University of Technology , Yola . calyx dari tanaman dikeringkan di bawah sinar matahari pada suhu 28 2 , dibuat menjadi bubuk menggunakan mortar dilaboratorium dan diayak dengan saringan Endicott tes 0.3mm ( Endicott Ltd , London) . 2. Penyiapan ekstrak cairan Seratus gram bubuk halus kelopak Hibiscus sabdariffa diencerkan dalam 600 ml air dan diaduk selama 6 jam pada suhu kamar . larutan disaring dan 300 ml air ditambahkan ke residu dan diaduk selama 3 jam . Filtrat dikumpulkan dan diuapkan pada < 40 dilakukan pengurangan tekanan untuk menghasilkan setengah ekstrak padat . Ekstrak ditimbang dan disimpan di kulkas sampai diperlukan . 3. Hewan Tiga puluh ekor tikus jantan albino Wister dengan berat antara 120 - 150 g masingmasing diperoleh dari Penelitian Veteriner Institute Vom , Jos , Plateau State, Nigeria . Hewanhewan yang bertempat di kita ll berventilasi kamar di kandang stainless steel dan makan dengan diet komersial ( pakan Vital , Ulasan Grand Sereal dan Minyak Mill Ltd , Jos ) dan air adlibitum . 4. Desain percobaan

Tikus dibagi menjadi 5 kelompok enam tikus masing-masing dan diperlakukan sebagai berikut : Kelompok I : hanya menerima makanan normal dan air. Kelompok II : menerima alkohol ( 5g/kg bw dari 32 % v / v alcohol solusi ) dalam 12 jam interval 72 jam di samping normal diet . Kelompok III : menerima HSC 250 mg / kg bb selama 5 hari sebelum pemberian alkohol Kelompok IV : menerima HSC 500 mg / kg bb selama 5 hari sebelum pemberian alkohol Kelompok V : menerima HSC 500 mg / kg bb selama 5 hari saja. Dalam semua kelompok larutan alkohol dan ekstrak oral menggunakan Canula dalam lambung . 5. Koleksi Sampel Darah Tikus dikorbankan setelah anestesi eter dan darah dikumpulkan tanpa menggunakan antikoagulan melalui jantung tusuk untuk persiapan serum . Darah dikumpulkan dan didiamkan selama 30 menit sebelum pembiusan pada 2 , 000 rpm selama 10 - 15 menit etelah yang serum dipisahkan dari Plasma menggunakan mikropipet karet dan digunakan untuk analys. 6. Analisis biokimia Serum digunakan untuk menentukan tingkat dan konsentrasi dari parameter biokimia seperti alanine aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST), alkali fosfatase (ALP), kolesterol (CHO) dan trigliserida (TG) menggunakan alat tes Randox ( Randox Ltd , Inggris ) . Antioksidan kit enzim , superoksida dismutase (SOD), glutation peroksidase (GP), glutation reduktase (GR) dari Randox , Ransod ( Randox , Ltd , Inggris ) digunakan untuk menentukan tingkat SOD , GP dan GR dari homogenat hati sambil lipid peroksidasi ( TBARS ) diuji dengan menggunakan metode tersebut. 7. Persiapan Homogenat hati dan Determinasi pada Peroksidasi Lipid dari hati Peroksidasi lipid dalam hati ditentukan oleh Metode reaksi asam thiobarbituric ( TBA ) seperti yang dijelaskan . Sampel hati telah dihilangkan dari tikus yang dikorbankan dan ditempatkan dalam es dingin 0,15 M larutan KCl dalam gelas tertanam di salinized es. Sampel hati dibilas secara menyeluruh dilarutan garam dan kelebihan cairan dihilangkan dengan kertas handuk sebelum menimbang sampel dalam wadah dingin . Satu porsi gram hati dihomogenisasi

dalam 4ml sedingin es 0,15 M larutan KCl menggunakan penghomogen . hati homogenat ( 2 ml ) diperlakukan dengan 1 ml 2 % TCA dan kemudian 2 ml 0,6 % TBA dalam tabung kaca. Kemudian tabung lightlystopper dihangatkan selama 10 minutes dalam bak air mendidih. Campuran disentrifugasi pada 3000 x g selama 10 menit untuk menghilangkan protein yang diendapkan. Absorbansi warna pink dihasilkan oleh reaksi itu dibaca pada 530 nm terhadap air kosong. koefisien Molar dari referensi senyawa malondialdehid adalah 1 .56 x 105 cm2 / Mmol .Hasil dinyatakan sebagai mg malondialdehid / kg hati menggunakan rumus : = Mg malondialdehid / kg hati 8. Analisis Statistik Hasil disajikan sebagai rata-rata standar deviasi ( SD ) selama enam penentuan . Analisis satu arah varians Alat statistik yang digunakan untuk menguji signifikansi antara nilai mean pada P < 0,05 dengan bantuan perangkat lunak SPSS versi 13.

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN Pengaruh penambahan dengan ekstrak air HSC dalam penanda enzim dan non-enzim alkoholinduced pada kerusakan hati seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1.

Tingkat ALT ( 13,18 0.86 ) , AST ( 32.84 1.40 ) , ALP ( 12,53 0.70 ) , CHO ( 28.33 0.91) dan TG ( 16,67 0,45 ) pada tikus yang diobati dengan alkohol saja ( GP II ) meningkat secara signifikan ( P < 0,05 ) bila dibandingkan dengan nilai ALT ( 10.35 0.53) , AST ( 18,20 1,15 ), ALP ( 6.63 0.55 ), CHO ( 17,09 1,38 ) dan TG ( 10.78 0.51 ) tikus tidak diberikan

alkohol (GP I) . Pra - pengobatan tikus dengan 250 dan 500 mg / kg bb ekstrak air HSC (GP masing-masing III dan IV ) selama 5 hari sebelum penambahan alkohol secara signifikan menurun (P <0,05) kadar AST , ALT , ALP , CHO , TG dan LP bila dibandingkan dengan nilainilai tikus diberikan alkohol hanya ( GP II ) . Tabel 2 , merupakan efek dari ekstrak air HSC pada enzim antioksidan dan peroksidasi lipid diukur dengan zat reaktif asam thiobarbituric ( TBARS ) dalam homogenat hati tikus yang mengalami kerusakan hati karena induksi alkohol .

Penambahan alkohol sendiri untuk tikus di GP II nyata (P < 0,05 ) menurunkan tingkat GR ( 125.55 7.48 ) , GPX ( 12,05 0,23 ) dan SOD ( 5.63 7.48 ) tetapi meningkat secara signifikan ( P < 0,05 ) tingkat LP ( 9,45 0,29 ) bila dibandingkan dengan nilai-nilai GR ( 37,5 1,93 ) , GP ( 9.26 0.50 ) , SOD ( 4.53 0.20 ) dan LP ( 9.45 0.29 ) dari tikus tidak diberikan alkohol ( GP I) . pra perlakuan tikus kedua dengan 250 dan 500 mg / kg bb ekstrak air HSC ditemukan keduanya mempertahankan ( P <0,05 ) tingkat signifikan SOD ( 6,03 0,12 dan 5,90 0,15 masing-masing) ketika dibandingkan dengan nilai SOD ( 4,53 0,2 ) pada tikus diberikan alkohol saja ( GP II ) . Tikus perlakuan awal dengan kedua dosis ekstrak air HSC tidak nyata (P < 0,05 ) meningkatkan tingkat GPX bila dibandingkan dengan nilai tikus diberikan alkohol saja. Pretreatment dengan kedua dosis ekstrak ditemukan secara signifikan menurun ( P < 0,05 ) tingkat peroksidasi lipid yang diukur dengan zat reaktif asam thiobarbituric bila dibandingkan dengan nilai tikus yang diberikan alkohol saja. Dalam penelitian ini alkohol konsumsi menyebabkan penurunan tingkat glutation reduktase (GR) , dan glutation peroksidase (GP) dan penghambatan superoksida dismutase (SOD) dalam hati tikus . Hal ini bisa karena radikal bebas tergantung inaktivasi enzim. Menurunnya tingkat glutathione reduktase hati setelah pemberian alkohol adalah indikasi dari

gangguan pengurangan glutathione teroksidasi menjadi berkurang bentuknya. Menurunnya tingkat aktivitas glutation peroksidase menjadi hasil baik raidkal bebas yang tergantung inaktivasi enzim atau penipisan co- substrat , mengurangi Gluthathione atau NADPH dalam alkohol yang diberikan pada tikus. Mengobati tikus dengan ekstrak kelopak bunga Hibiscus sabdariffa sangat

mengembalikan tingkat enzim antioksidan untuk mendekati normal yang merupakan indikasi dari aktivitas antioksidan yang baik dan perlindungan dari hepatosit radikal bebas yang menyebabkan kerusakan dimediasi ke hati . Peningkatan tingkat peroksidasi lipid karena pemberian alkohol merupakan indikasi dari aktivasi sistem peroksidasi lipid di jaringan hati. Peroksidasi lipid dimulai dengan abstraksi atom hidrogen dari rantai sisi ganda asam lemak tak jenuh dalam membran lipid. Peningkatan peroksidasi lipid dalam pekerjaan ini menguatkan laporan sebelumnya bahwa penambahan alkohol ternyata dapat meningkatkan peroksidasi lipid. Penurunan lipid peroksidasi pretreatment dengan ekstrak berair HSC menunjukkan Kehadiran zat antiperoxidative yang melindungi hati terhadap alkohol-induced dari peroksidasi lemak hati. Fenolat dan flavonoid dalam ekstrak air HSC mungkin menjadi penyebab untuk perlindungan terhadap kerusakan hati akibat alkohol.

BAB IV KESIMPULAN Ekstrak cair dari kelopak Hibiscus sabdariffa dapat melindungi hati tikus dari toksisitas akibat alkohol melalui penghambatan induksi alkohol peroksidasi lipid dan meningkatkan kadar enzim antioksidan. penghambatan peroksidasi lipid adalah salah satu cara yang mungkin berunding perlindungan terhadap hati terhadap toksisitas alkohol.

Daftar Pustaka Ali BH, Wabel N and Bluden G Phytochemical, pharmacological and t oxicological aspect of Hibiscus sabdariffa L. A Review. Phytother Res vol. 19 no. 5 pp 369 375, 2005. Amber HO and Brett JND Nutritional support in alcohol dependency: Hepatoprotection and detoxification. Res Rev vol. 1 pp 1 8, 2000.

Chandra R, Aneja R., Rewa, C, Konduri R, Das SK, and Agarwal S An opium alkaloid papaverine ameliorates ethanol-induced hepatotoxicity: Diminution of oxidative stress. Ind. J. Clin Biochem., vol. 15 no. 2 pp 155 160, 2000. Dahiru D and Ejiofor MN Effect of ethanol extract of Ziziphus mauritiana leaf on serum and hepatic lipid peroxidation and vitamin C levels in acut e alcohol treated rats. Global J Pure Appl Sci., vol. 13 no 4 pp 505 507, 2007. Dahiru D, Obi J and Umaru H Effect of Hibiscus sabdariffa calyx extract on carbon tetrachloride induced liver damage. Biokemistri vol. 15 no. 1 pp 27 33, 2003. Das SK and Vasudevan, D.M. Effect of lecithin in the treatment of ethanol mediated free radical induced hepatotoxicity. Ind J. Clin Biochem vol. 21 no.1 pp 62-69, 2006 Dinu V and Zamfir O Oxidative stress in ethanol intoxicated rats. Rev Roum Physiol vol. 28 no. (1-2) pp 63 67, 1999. Duke JA Handbook of Medicinal Herbs (7th ed). Living Stone Group Ltd, Edinburgh. pp 228 229, 1985. Gupta S, R Pandey, R Katyal, HK. Aggarwal, RP. A ggarwal and SK. Aggarwal Lipid peroxide levels and antioxidant status in alcoholic liver diseases. Ind. J. Clin. Biochem., vol.20 no.1 pp 67 71, 2005. Jurczuk M, Brzoska MM, Jakoniak JM, Sidorczuk MG and Karpinska EK Ant ioxidant enzymes activity and lipid peroxidation in liver and kidney of rats exposed to Cadmium and ethanol. Food Chem Toxicol., vol 42. pp 429 438, 2004.