PRACTICA # MONTAJE PERMANENTE DE NEMATODOS FILIFORMES INTRODUCCIN El estudio detallado de los nematodos requiere la preparacin de lminas temporales, semipermanentes

o permanentes que faciliten la observacin de las caractersticas ms relevantes de los especmenes. Los montajes permanentes son muy tiles, cuando por la naturaleza de la investigacin, es necesario preservar los montajes de especmenes por ms tiempo, lo que permite al investigador realizar las mediciones, fotografas y dibujos de los nematodos recolectados tambin son recomendados este tipo de montajes para mantener los especmenes en colecciones de referencia en museos, universidades e institutos de investigacin. OBJETIVOS Aprender a realizar montajes permanentes de nematodos filiformes.

METODOLOGIA 1. Transfiera los nemtodos procesados (filiformes) a un recipiente con glicerina. 2. Limpie el cubre y portaobjeto con alcohol al 96%. Coloque una gota de glicerina sobre el portaobjeto lo ms centrado posible. 3. Se ponen Tres o cuatro pelos de ngel en el centro de la gota de glicerina, estos pelos son del dimetro similar al de los nemtodos y se le denominan como calzas y su fin es evitar que los nematodos se aplasten a la hora de sellar la preparacin, estas calzas se ponen en forma de tringulo si se colocaron 3 o en forma de cuadrado si se pusieron 4 pelos de ngel. 4. Coloque los nemtodos a montar en el centro de la gota de glicerina y en posicin radial a la gota. 5. Deposite suavemente un cubreobjetos tibia para que no quede burbujas de aire. El cubre objetos queda sobre las fibras de vidrio las que impiden que los nemtodos sean presionados por el cubreobjetos. 6. Si la gota no llena el cubreobjetos, se puede aadir glicerina. Si lo sobrepasa retire el exceso con pedazos de papel filtro.

7. Fije el cubreobjetos con tres gotas de esmalte de uas transparente, aplicados en tres puntos distintos. Despus de 5 minutos selle completamente con esmalte de uas transparente mediante un pincel. 8. Una vez montado los nematodos ponga una etiqueta con los datos correspondientes de la muestra.

RESULTADOS

Ilustracin 1 Pesca de nematos para el montaje

Ilustracin 2 Nematodo montado con calzas rodendolo para evitar que se aplaste

Ilustracin 3 Montaje terminado etiquetado y listo para dejarlo secar

DISCUSION Algunos autores consideran que durante el procedimiento a realizar primero se coloquen los nematodos en la gota de glicerina del portaobjetos y despus se coloquen las calzas, pero en la prctica este mtodo es algo complicado y resulto ser ms conveniente colocar primero las calzas ya que as es ms fcil poner correctamente en el centro de la gota a los nematodos a estudiar.

CONCLUSION El uso de las calzas es indispensable para poder realizar un montaje de calidad, ya que si estos no se ponen los nematodos quedan dispersados por todo el portaobjetos o se pueden aplastar al entrar en contacto con el cubreobjetos haciendo inservible el montaje. Otro factor muy importante para el xito del montaje es que este quede sin burbujas de aire a la hora de colocar el cubreobjetos, ya que si la muestra presenta burbuja con el tiempo el nematodo se deshidratara y no servir para observaciones posteriores. El uso de glicerina es un poco ms complicado debido a su consistencia y se tiene que tener ms cuidado y ser ms limpio a la hora de sellar el montaje, ya que como en las preparaciones temporales a la hora de usar agua esta se puede limpiar ms fcil a la hora de sellar, caso contrario de la glicerina.

BIBLIOGRAFIA

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