TESTE DE FALCIZAO

Princpio Sob baixa tenso de oxignio, os eritrcitos contendo hemoglobina S tomam a forma caracterstica de foice, ou de meia-lua. O metabisulfito de sdio reduz a tenso de oxignio. Assim, quando uma soluo de metabisulfito adicionada ao sangue total, e esta mistura vedada entre lmina e lamnula por meio de esmalte, os eritrcitos contendo Hb S se deformam, aps algumas horas de repouso. Equipamentos Microscpio Lminas de microscopia e lamnulas Pipetas Pasteur Placas de Petri Esmalte para colorir unhas

Reagentes a. Soluo de metabisulfito de sdio a 2% Na2S2O5 gua destilada q.s.p. b. Esmalte 200 mg 10 mL

Procedimento a. b. c. d. Diluir em um tubo de hemlise 100 ml do sangue em estudo com 200 ml de soluo fisiolgica (NaCl 0,8%). Misturar na lmina de microscopia 10 ml do sangue diludo e 10 ml de metabisulfito de sdio a 2%. Cobrir a preparao com lamnula e vedar os quatro lados com esmalte. Conservar a preparao em cmara mida (placas de Petri com algodo embebido com gua). Examinar em microscpio com objetiva 40x aps 1 hora, 3 horas, 6 horas, 12 horas e 24 horas.

Interpretao O fenmeno da falcizao (teste positivo) ocorre em portadores de Hb S, com variao de tempo entre os diferentes tipos: Hb SS (1 a 3 horas); Hb SC e Hb SD (6 a 12 horas); Hb S/talassemia beta (12 a 24 horas); Hb AS (12 a 24 horas). Entretanto, essa relao falcizao/gentipo/tempo no constante, e tambm no serve para caracterizar o gentipo. Aps 24 horas, na ausncia de eritrcitos falcizados, o resultado ser dado como negativo. Precaues a. b. c. d. e. O metabisulfito deve estar dentro do prazo de validade e preparados momentos antes de ser utilizado. A cmara mida deve ser colocada em lugar fresco, temperatura ambiente. A vedao lmina-lamnula com esmalte fundamental. A concentrao do metabisulfito, bem como sua preparao no momento de uso so pontos crticos. Hb Fetal aumentada, em associao com Hb S, prejudica a falcizao.

Bibliografia: NAOUM, P. C. Doenas dos eritrcitos: tcnicas laboratoriais aplicadas aos estudos dos eritrcitos . Disponvel em: http://www.ciencianews.com.br/doencaeritro/T%E9cnicas%20Laboratoriais%20Especiais%20%2012/curfragos.htm