Antigenele si structura aparatului imun

Antigenele si structura aparatului imun IMUNITATEA =ansamblul fenomenelor prin care organismul recunoaste si neutralizeaza structuri agresoare sau straine acestuia. RASPUNSUL IMUN = se declanseaza ca urmare a patrunderii in organism a unui Ag PROPRIETATILE GENERALE ALE ANTIGENELOR Imunogenicitatea: capacitate innascuta de a induce un R.I. specific (> 10 kDa): - selectie clonala de L Ag specifice - activarea clonei - expansiunea clonei (proliferarea L) Antigenicitatea: capacitatea de a induce un R.I. si de a reactiona cu Ac solubili sau receptori celulari EPITOPII determinantii antigenici - Fragmentul de molecula/ locul din Ag care reactioneaza cu un Ac sau receptor celular foarte mici Dispunere a) secventiala b) conformationala Localizare : - topografici - criptici Functii: - specificitate - Ag - imunoreactivi Paratopul Ac se combina cu epitopul (conformatie complementara suprafetei epitopului) Valenta Ag nr. de epitopi Monotonia repetitiva imunogena: Ag carbohidrat nr. de epitopi de acelasi tip CLASIFICAREA ANTIGENELOR I. Marimea moleculei II. Complexitatea moleculei (chimica) III. Relatia gazda - Ag I. Marimea moleculei a) Ag complete/imunogene: macromolecule 40 kDa Nr. si varietatea epitopilor creste proportional cu moleculei de Ag

b) Ag. incomplete/neimunogene: < 5 kDa. Haptene: - nu induc un R.I. singure. - reactioneaz cu produsele R.I. - hapten + transportor = imunogene se formeaza LB Ac anti-haptena TCR Ac anti-transportor II. Complexitatea chimica a) Intens imunogene: - proteinele, glicoproteinele b) Polizaharidele si lipidele devin imunogene numai dupa legare cu un substrat proteic (LPZ) Adjuvantii: molecule nespecifice organice/minerale care amplifica R.I. al unui Ag, la administrarea concomitenta. c) Ag nucleare citoplasmatice ( Ag celulare) ADN nuclear dublucatenar ( ADN ds):

antigenicitate slaba antigenicitate prin alipire la histone

2) Histonele: - proteine mici bazice 1, 2a, 2b , 3, 4 - antigenicitatea ADN 3) Antigenele nucleolare: - polipeptide - RNP U1.6 4) Proteinele nehistonice: - ARN polimeraza - ADN topoizomeraza 1 ( Scl 70) - aminoacil transferaza (Jo-1) 5) Ag citoplasmatice: - ribonucleoproteine mici c) Superantigenele: - nu sunt fagocitate sau prelucrate de Mcf - fixare MHC- II si TCR - activeaza pana la 10% din LT periferice - hipersecreie de limfokine implicate in PR, LES, socul endotoxinic (toxine bacteriene) - nu secretie Ig specifice/ limfocite sensibilizate III. Relatia gazda - Ag 1) Ag autologe numai la un individ (autogrefa) 2) Ag. singenice la indivizi identici genetic din cadrul unei familii. 3) Ag allogene ( homologe) la indivizi diferiti genetic din cadrul aceleiasi specii ( ex. mama/copil = R.I.) 4) Ag. xenogene ( heterologe) la specii diferite (intens imunogene; ex. maimuta om) 5) Ag. heterofile epitopi comuni; aparitia reactiei incrucisate cu Ac specifici ( ex. T. pallidum + ag. cardiolipinic din miocard) 6) Ag. specifice de tesut /de organ: - tireoglobulina (tiroidita autoimuna)

- mielina (encefalita alergica post vaccinare) x Ag sechestrate specifice de organ; nu intra in contact cu sistemul imun in mod obisnuit Ag de histocompatibilitate: - HLA (Ag limfocitare / leucocitare umane), MHC ( Complex Major de Histocompatibilitate) - Ag structurale, specific individuale, pe suprf. celulelor - confera specificitate antigenica tesuturilor - rol major in acceptarea respingerea grefelor de organ/ tesut. Structura : - lanturile grele specifice( A, B, C) - lanturi usoare / grele beta 2 microglobuline Genele grupate in 2 regiuni distincte pe bratul scurt al cr. 6. - 6 locusuri: - A, B, C, . . . - cifra (alela varianta structurala), w - 4 cifre HLA- B2705 Categoriile de HLA/MHC a) HLA/MHC I: A, B, C = localizare pe S 2 cel. nucleate ( L, McF ), Tr., NU hematii! = amplificate de IFN , IFN = legare CD8; Ag endogene, virale

Codifica C2, C4, B (complement) Citokine (TNF) Proteine de soc termic (HSP-70) Hidrolaza P450

HLA cromozom 6

STRUCTURA APARATULUI IMUN Sistemul limfoid = organe/tesuturi loc de maturizare / diferentiere a celulelor limfocitare originare A. Organe limfatice primare Timusul involutie dupa nastere - populare cu pro-T numai in viata intrauterina (fereastra de populare timotaxina). Maduva osoasa - specializate numai in geneza de LT si LB - nu au capacitate de R.I. - sursele prenatale ale precursorilor celulari: ficatul, splina, maduva osoasa.

b) HLA/MHC II: DR, DP, DQ = localizate pe LB, LT, Mcf, cel. endoteliale, cel. epiteliale, (Tr. Digestiv, Tr. Respirator ) = amplificate de IFN , TNF, IL-13 = deprima expresia PGE2 = legare CD4; Ag exogene captate de APC

Gene/proteine HLA III

B. Organele limfatice secundare

Componente - ggl limfatici - splina - TLAM digestiva/respiratorie Locul de inducere a R.I. Diferentiere anatomica in ggl/splina: R.I. cel. / R.I. um. 1. Ggl limfatic: a) zona B - dependenta ( corticala): LB - foliculi limfoizi plasmocite - centri germinativi b) zona timodependenta (paracortex) domina LT c) zona medulara : vase sanguine/limfatice LT, LB, Pl, Mcf, cel. dendritice SPLINA LT = in jurul a. trabeculare LB = foliculi limfoizi, peste mansonul de LT (pulpa splenica) APC = Mcf, cel. dendritice in periferia foliculilor limfoizi. Pulpa roie la periferia lobulilor, conine Mf cu rol n fagocitarea hematiilor senescente. Pulpa alb - n jurul arteriolei centrale esut limfoid (PALS - Periarteriolar Lymphoid Sheath) Periarteriolar LT (zona timodependent). La periferia PALS LB (zona timoindependent)

C. Circulatia limfocitelor Sngele 70% - 80 % = LT 10% = LB Cca. 10% = cel. nule Circulatie: - 90% - intravascular - 10% parasesc patul vascular in t. periferice nelimfatice -> ggl. limfatici -> canal toracic >VCS. - ciclu circulator : 24-48 h - sunt ocolite timusul si maduva osoasa - LT circula cel mai mult (viata lunga) - ecotaxie/homing: migrarea prefereniala a L catre anumite tesuturi D. Celulele implicate in R.I. I. Limfocitele T -pro-T provin din M.O. LT - origine timica = 2/3 din L circulante. -durata de viata : luni/ani -maturizarea :

3. TLAM Amigdale (palatine/faringiene / linguale) Placi Payer, apendicele cecal Ag patrunse prin mucoase GALT, BALT, SALT.

aparitia pe S2 a TCR echipament enzimatic markeri de diferentiere celulari (CD4/CD8 glicoproteine)

Maturizarea LT in timus

-cel. suport pentru pro T LT (timocite) -cel. reticulare retea de sustinere LT si timocite -LT = proliferare + maturizare/diferentiere expresie CD4+CD8 + si TCR -selectie : + = pastrare CD4+/CD8+ - = eliminare cele autoreactive TIMUSUL

LT

TCR: -molecula transmembranara, specifica pentru un Ag -TCR 1 (,) 5% CD4 -, citotoxicitate -TCR 2 (, ) 95% Complexul CD4/CD8 TCR CD3= -TCR + epitop -MHC II + CD4 / MHC I +CD8 Markeri celulari de suprafata CD 4 MHC II CD 8 MHC I CD molecule costimulatoare Clasele si functiile LT 1.LTc CD8+ = liza cel. tinta prezentatoare de Ag 2. LTh CD4+ = colaborare LB, Mcf (R.I. u) / LTc (R.I.c) LTh1 = citotoxicitate (LTc), activ.Mcf, aparare contra Ag. intracel, r.inflamatorie IFN- = deprima LTh2; IL-2. LTh2 = secretie IgE, A, G1, proliferare Eoz, ef.antiparazitar IL-10 deprima LTh1; IL-4 LTh17 = IL-17, r.inflam.ac(PMN): AR, psoriazis, B.Crohn. 3. LT inductoare CD4 + = stimuleaza activarea LT, Mcf 4. LTreg CD4 + = efect supresor/regulator, previn autoimunitatea(10%). 5. LT cu memorie CD4 + = centrale, efectoare, viata lunga (10-40 ani). 6. LT CD4 + CD8 + = autoreactive.

II. Limfocitele B -origine in M.O. -implicate in secretia de Ig (plasmocite) -durata scurta de viata ( 5-7 zile) Markeri celulari de S2: a) BCR : - m Ig = receptor specific pentru Ag fixare RFc de S2 LB - mIg: M primul RCB R.I. primar D apare ulterior G R.I. secundar CD79a si CD79b: transmit semnalul de activare a LB - distributie insulara, mobile pe S2 - RCB + Ag ->plasmocit b) RFc pentru Ig. c) receptori pentru C3, C4, C1q. d) MHC-I si MHC II. e) receptori pentru hormoni. f) molecule de adeziune (LFA-1): CD20, CD40, CD45. Clasificarea functionala a LB 1. LB primare (B2CD5-): majoritatea la individul neimunizat, domina RCB IgM, rar IgD. 2.LB CD5+: - rar RCB IgD, NU cel. cu memorie - secreta multa IL-10 (ef. autocrin) - C% mari de IgM = Ac naturali polireactivi cu afinitate -apar in LLC 3. LB cu memorie: pastreaza specificitatea contra Ag genereaza clone de LB secundare III. Celulele prezentoare de Ag (APC) -capteaza si prelucreaza Ag -elibereaza substante activatoare ale LT si stimulante ale sintezei moleculelor de adeziune 1. Macrofagele -cel. principala a APC -cel. fixata tisular/circulanta (MO).

-dimensiuni mari, bogata in lizozomi. -SRE: histocit, osteoclast, sinoviocit, Kuppfer, microgliale, alveolare, seroase. Functiile macrofagelor a) Apararea antimicrobiana: -chemotaxia = C5a, PGE 2 -aderarea = receptori de S 2 - imuni (Fc): IgG, IgE, C3b, C3d -nonimuni: proteine degradate, glicoproteine. -endocitoza = fagocitoza/pinocitoza+ lizozomi = fagolizozomi -digestia = fragmente eliminate/inglobate b) Secretia : - enzime (elastaze, colagenaze, etc.) - mediatori cel. (IFN , IL-1, TNF , NO, factori de coagulare) c) Cel. efectorie: ef. bactericid/tumoricid (RLO, TNF, proteaze) d) Participant in procesul imun: - captare/prelucrare Ag - exprima epitopi + MHC II - LT = C % optima R.I. - LTreg = C % minima/max - LB = R.I. - conserva epitopi = toleranta imuna/R.I. prelungit. 2. Alte APC cel. dendritice Langerhans : piele, ggl. cel. dendritice foliculare : ggl. fixeaza CIC LB MHC II+ -capteaza/prelucreaza Ag + MHC II LTh IL 2 (limitat) Comunicare intercelulara - contact i.c. direct -citokine A. Molecule de adeziune (liganzii): -6 familii, pe S2 tuturor cel. -C% dependenta de citokine -determina natura infiltratului inflamator (L, Pl/PMN) 1. caderinele : implica Ca ++ 2. superfamilia Ig: rol in recunoasterea i.c. 3. integrinele: adeziune limfocitara 4. selectinele : metastazare, aderente la endoteliu 5. proteoglicanii: metastazare, migrare L 6. mucinele ( 6 fractiuni)

B. Citokinele: - secretate de LT, Mcf, etc. - se fixeaza de receptori ai cel. tinta - proteine cu G moleculara - regleaza cresterea, diferentierea, functiile L, Mf. - actioneaza: - autocrin/ paracrin/ endocrin Clasificare: - IL (> ?) - TNF = efect citotoxic - IFN (20) - F. de stimulare a coloniilor ( eritropoetina, CSF) - F. de crestere (TGF, IGF) - Chemokine (CXC) / (CC ): - stimuleaza adeziunea cel. - = activarea PMN - = activare Mo, L, Ba, Eoz RASPUNSUL IMUN In functie de : -calitate Ag -calea de patrundere a Ag -felul liniei de celule angajate R. I. - mediat celular - mediat umoral R.I. mediat umoral -declansarea in conditiile dispersarii Ag in organism -desfasurarea la distanta de locul patrunderii Ag in organism -implica formarea de Ac circulanti specifici -activ in infectii viro-bacteriene -R. aberant = R. de hipersensibilitate imediata I. Activarea LB cu Ag timodependente Stimulare: 1. unirea Ag cu BCR = stimul slab 2. contactul LTh2 activat si/sau Mcf cu LB = stimul puternic Ag LB Pl Ac Mcf =Ag + MHC II LTh2 IL 2, IL 4 IL -1 - molecule costimulatoare (CD154, 22, 2) care se leaga de R specifici ai LB

Fazele R.I. A. R.I. primar - apare dupa prima expunere la Ag a cel. imune reactive inocente = cel. efectorii + cel. cu memorie STOP P Pl Ac - Ac apar la 10-14 zile de la contact - initial IgM -- rapida a C% B. R.I. secundar: -apare la expuneri ulterioare la acelasi Ag -prompt, rapid -activeaza LB cu memorie care au RCB = IgGm -LB cu memorie = APC -Ac: apar precoce IgG -pastreaza specificitatea contra Ag -C% mari, pe durata mare de timp -afinitate v. Ag (1000x) II. Activarea LB cu Ag timoindependente Ag. : -epitopi multiplii repetitivi -LPZ bateriene, flagelina, polimeri micsti, polipeptide - captate prin endocitoza (cel. parenchim.) -persistenta indelungata -eliberare in cantitati mici = R.I. prelungit Activarea LB: a) Ag specifica (1) b) directa (nespecifica-2) (fractiune de molecula Ag) Caracteristici: - absenta cel. cu memorie si LTh - absenta R.I. secundar - secretie excesiva IgM (luni, ani) - fagocitarea CI= eliberarea Ag cu reluarea ciclului ANTICORPII Ig: glicoproteine = 20% din proteinele plasmei Monomerul de Ig: 2 lanturi grele H: - clasa/subclasa - comportament Ag diferit - 5 tipuri - IgG ( ) - IgA ( ) - IgM () - IgD () - IgE () 2 lanturi usoare L : - K ( cr. 2 ) = 2/3

- - ( cr. 22 ) = se gasesc la toate Ig dar numai K sau MONOMERUL TIP 4 LANTURI POLIPEPTIDICE: - lungime diferita - grupate in 2 perechi diferite - dispunere spatiala buclata simetrica a lanturilor -punti S=S ( pastreaza coeziunea) Lantul polipeptidic: A)extremitate aminoterminala Fab (domeniul variabil) se combina cu Ag; 3 regiuni complementar-determinante hipervariabile B) extremitate carboxiterminala F (domeniu constant) Portiune variabila ( H+L) Fab: - recunoste si se uneste cu Ag Domeniul constant al H Fc: - diferentiaza cls./subcls. Ig -9 - fixeaza/ activeaza C3 - fixeaza pe R celulari specifici - transportul transplacentar Ig Clasele de imunoglobuline 1. IgG = 70-90% (10-13g/l) Structura: 2 K/+ 2 H 4 subtipuri : - IgG1 (70%) = traverseaza placenta, C3 (++) - IgG2 = C3 (+) - IgG3 = C3 (+++) - IgG4 (4%) = C3 (0), activitate reaginica Proprietati : - eficienta maxima apararea antimicrobiana ( IgG1) -aglutinare + liza germenilor + activare C3 -opsonine -neutralizarea exotoxinelor bacteriene - caracteristici R.I. secundar - mic = strabat endoteliul difuzeaza extravascular = traverseaza placenta (imunitate la n.n.) 2. IgM ( 3%-10% / 0,8-1,2g/l) Macroglobulina = pentamer Structura : 2 K/ + 2 H(), fara zona balamalei

Proprietati: - mare = nu traverseaza placenta, greu endoteliu vascular -fixare intensa pe R de membrana (Mcf, L, PMN) -sunt mIg caracteristice R.I. primar valoare diagnostica -aglutinare bacteriana -diferentiaza grupele ABO (hemaglutinine) 3. IgA : (5%-25% / 1 4g/ l) Structura: 2 K/ + 2 (1 si 2) = IgA1 + IgA2 forme : -IgA serica (monomer 90%) -IgAs = dimer, in secretii (digestiva, saliva, colostru, lacrimala, bronsica) S = rezistenta v. enzime Proprietati: - protectie antibacteriana pe mucoase: -inhiba aderenta germenilor -limiteaza patrunderea Ag exogene 4. IgD : (0,03 g/L) Structura : -domina lanturile (4X) v. K + 2 -mIg cu rol de RCB 5. IgE : (500ng/ml) Structura: 2 + 2K/ Proprietati: -NU traverseaza placenta/Nu activeaza C3 -fixare pe RFc de pe S2 Baz, Mas = R reaginic rol in apararea antiparazitara -fixarea pe alte cel. (Mcf, E, Tr) = captarea si clearanceul Agpotenteaza R.I. Sinteza Ig de catre LB Clasificare functionala a Ig: A) mIg: RCB; IgM/IgD apoi IgG B) Ig circulante (Ac): in plasma, secretii, spatiul extravascular - Fab - identic la mIg si Ac, pentru acelasi Ag, in cadrul aceleiasi clone celulare (dubl recunoastere / interactiune cu Ag) - Ac - legare direct Ag - ulterior legare/activare C3 Eliminarea Ag Fagocitoza : CIC + legare de Mcf (RFc) Liza: CIC + fixarea/activare C3 Rolul antigenic al Ac -structuri proteice cu valoare imunogena -induc formarea de Ac anti-Ig

-determinanti antigenici = portiune variabila H/L ANTICORPI MONOCLONALI

Epitopi 1. Izotipuri = specificitatea de specie (H) : - diferentiaza speciile intre ele - cls. de Ig sunt antigenic identice la toti indivizii speciei. 2) Allotipuri = specificitate individual / specie - Ig difera antigenic de la un individ la altul - reactie posttransfuzionala de Tr (purpura). 3) Idiotipuri specifici numai pentru Ig elaborate de o anumita clona celulara - fiecare familie de molecule de Ig exprima un idiotip diferit Reglarea R.I. umoral a) C% de Ag prin epurarea de catre Ac stimulul de activare a LB, cu scaderea secretiei Ig specifice. Administrarea simultana de Ag puternic/ Ag slabe. b) Rolul inhibitor al LTreg ( Ag specifice) v. proliferare excesiv LB stimulate - stimularea LTreg apare la C% foarte mic/mari de Ag. c) Interventia Ac : - blocani - anti-idiotipici d) Factori supresori nespecifici: PGE2 LTs = IL 2 PAF LTh1 = IFN - RLO RLO LTh2 = IL 10 Eliberati de APC R.I. mediat celular Functii eliminarea cel. infectate cu virusuri/bacterii cu dezvoltare i.c. -apararea antitumorala -respingerea allogrefelor Ag ramane cantonat la poarta de intrare / fixat pe cel. gazda -derulare la locul de cantonare a Ag -constituire lenta ( R.I. intarziat)

-directionare preponderenta contra celulelor care exprima Ag -mediat de cel. citotoxice specifice (LTcCD8+) / nespecifice (NK, K) si APC. A) Recunoasterea cel. tinta a) cel. afectata = Ag + MHC I b) alipirea precursorului LTcCD8+ la complexul Ag+MHCI = semnal 1 = activarea LTcCD8+ R.I. primar: multiplicare/diferentiere

a)Factori celulari = cel auxiliare 1. Mastocitele: - localizare tisulara preferentiala (piele, pulmon, orofarinx) - RFc pt. IgE si IgG - granule cu mediatori chimici: histamina, Lt B4, SRS-A, triptaza, etc.) - citokine( TNF-, IL-1,6) 2) PMN -rol fagocitant 4 faze : -chemotactism - aderenta -recunoasterea -ingestia deversare extracelulara -puseu respirator = RLO: -anion superoxid -radical hidroxil -peroxidul 3. Bazofilele: - RFc - IgE -granule: histamina, SRS-A, heparina Apararea antiparazitara 4. Eozinofilele: - lizolecitina (cr-CH-Ly) - ef. fagocitant/citolitic (C% mari) - RLO, proteine cationice, Lt-B4 5. Trombocitele : - R - colagen, trombina, ADP - adsorb: fibrinogen, f. V. IX, XII - granule: serotonina, catecolamine b) Factori serici : 1. complementul 2. kininele plasmatice 3. s. coagularii fibrinolizei 4. derivatii ac. arahidonic

cel. cu memorie cel. efectorii (efect citotoxic

c) LTcCD8+ activat liza cel. tinta IL 2 : - autocrin = proliferare LTc. - paracrin = APC, LT. d) resturile de cel. lizata (Ag) ->Mcf Ag +MHC II LTh 1: LTcCD8+

IL -2

-IL - 2 -IFN Mcf: - cel efectorie - stimularea fagocitozei - citotoxicitate Mecanismul imunitatii de tip citotoxic -Citotoxicitate de tip extracelular: -mediatori citolitici solubili (perforine/granzine) liganzi Fas ( molecule de S2) apoptoza. 1) legare de membrana cel. tinta = - LTcCD8+ activat spatiul extracelular: - perforine : tubuli - moarte celular - granzine: = apoptoza - liganzii Fas: legare R Fas -apoptoz 2) detasarea LTc de cel.lizata Celulele citotoxice MHC - nespecifice NK: 2-5% din L periferice -MHC independente -citotoxicitate mediata celular dependenta de K: efect citotoxic v. cel. cu Ig specifice pe S2 lor -2 roluri inhibitor recunoaste MHC-I. activator- elibereaza perforine / granzine. Factorii nespecifici participanti la finalizarea R.I.

Ac.

REACTIA IMUNA I. R. de hipersensibilitate imediata anafilactica -Ag variat, cale respiratorie, digestiva, cutanata, inj. -fixare pe Ac (mIg) prezenti pe cel. raspuns clinic rapid -teren atopic (HLA-A2/40% din populatie) LTh2 --- IL4, 5, 13 + IgE -non-atopic : LTh1---IL 2 IgG -Ac = IgE induse de ag : - contact I fixare ca mIgE pe Baz - contact II Ag + mIgE degranulare Mas Baz = primari secundari tertiari (cel. atrase) - Clinic : a) forma localizata (atopica) = rinita alergica, astm bronsic. b) forma sistemica ---- soc anafilactic II. R. citotoxica Ag : - componenta structurala m. cel. - haptena atasata pe m. cel. Ac : - IgM/IgG Ag + Ac = + C3 liza - fagocitare - cel. NK = citotoxicitate mediata cel. dependenta de Ac Tipuri de Ac : -deprima fct. cel. (hormoni) -stimuleaza fct. cel. (hipertiroidie, miastenie) -blocanti COMPLEXUL DE ATAC AL MEMBRANEI

III. R prin complexe imune CI : - formate in situ - circulante cu depunere ulterioara CI mari : fagocitare, indepartare rapida CI mici : solubile, activeaza C 3, neepurate, traverseaza endoteliul vascular ,activare locala a C 3 inflamatie Clinic: a) formare in situ (Arthus) :activ/pasiv b) boala serului 14 -21zile de la administrare ser repetate = lez. glomerulare, artrite etc. IV. R imuna mediata celular a) R de hipersensibilitate tardiva : dermatita de contact, granulom inflamator b) R citolitica : ex. HAVB