Chromagar Listeria

Instructions For Use
CHROMagarTM Identification Listeria

Available in several languages
NT-EXT-026
Version 4
ENGLISH FRANCAIS ESPAOL DEUTSCH
English Version Version Franaise Version Espaol Deutsch Version

CH R
OM
ar ag
TM
i i cat if t n Ide
plate teria s i L on
CHROMagar 4 place du 18 juin 1940 75006 Paris - France Email: CHROMagar@CHROMagar.com Tel +33 (0)1.45.48.05.05. Website: www.CHROMagar.com

MEDIUM PURPOSE
ENGLISH
Chromogenic medium for confirmation of L.monocytogenes species from suspect colonies on CHROMagar Listeria. Listeria monocytogenes is a widespread bacteria, present in the soil, sewage, or faecal matter. Its ability to form listerial biofilms on contact surfaces makes it difficult to eliminate. This pathogen can cause serious food poisoning and is therefore frequently isolated in food processing facilities to avoid food contamination. For fast food released onto the market, it is important to rapidly distinguish this pathogen from other harmless Listeria species such as L.ivanovii, L.innocua.
COMPOSITION
The product is composed of a powder base (B) and a supplement (S).
APPLICATIONS
In the food field: For confirmation of L.monocytogenes species from suspect colonies on CHROMagar Listeria:
CHROMagar Listeria method (presence / absence): Certified NF VALIDATION CHR-21/1-12/01. Validity Date: 14-Dec-2017 CHROMagar Listeria enumeration method: Certified NF VALIDATION CHR-21/2-12/06. Validity Date: 14-Dec-2017
Product Total g/L Composition g/L
Base LK970 (B)

51.8 g/L
Agar 15.0 NaCl 5.0 Peptone and yeast extracts 23.0 Chromogenic mix 15.3
Supplement LK970 (S)

6.5 g/L
Selective and enrichment mix 6.5
Aspect
Powder Form 2-30C 6.6 +/- 0.2
Powder Form 2-8C
STORAGE FINAL MEDIA pH
In the clinical field: For confirmation of L.monocytogenes in samples of human origin eg. blood cultures, vaginal swabs, or CSF.
PREPARATION (Calculation for 250ml)

Preparation of the base
Step 1
Disperse slowly 12.95g of powder base in 250ml of purified water. Stir until agar is well thickened. Heat to 121C +/- 1C during 15 minutes. Cool in a water bath to 47C +/- 2C. Add 1.63g of CHROMagar Identification Listeria supplement to 10ml of sterile purified water. Add a magnetic bar and homogenize during at least 30 minutes rotating the magnetic bar at high speed (700-1000 rpm) without heating until getting a creamy homogeneous suspension as presented below.
STAGE 1: Possible Presence of grains on the surface of the vial and in the mix STAGE 2: Formation of white dense foam on the surface and rise of foam STAGE 3: Less dense/ compact Foam, more creamy mix STAGE 4: VERY GOOD MIX
Preparation of the supplement
Step 2
-->
-->
Aspect at this step: No Rise of Foam More ventilated foam Liquid
-->
Aspect at this step: Liquid with undissolved grains
Aspect at this step: Dense/Compact foam (SURFACE) Foamy Mix
Aspect at this step: Homogeneous Fluid (liquid) Without grains No Foam GOOD PREPARATION
Mixing of the base and the supplement
Step 2
Place the melted 47C cooled base under gentle stirring with a magnetic bar. Add the homogeneous reconstituted supplement, keeping the gentle stirring during 1 or 2 minutes until complete homogenisation. Pour IMMEDIATELY into sterile Petri dishes. Warning: DO NOT STACK THE PETRI DISHES. Let them cool down. Let it solidify and dry. Store in the dark before use. Prepared media plates can be kept for one day at room temperature. Plates can be stored for up to two weeks under refrigeration (2/8C) if properly prepared and protected from light and dehydration.
Storage
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INOCULATION
If the agar plate has been refrigerated, allow to warm to room temperature before inoculation. Do a test from typical isolated colonies from CHROMagar Listeria (blue colony with a white halo appearing after 24h +/- 2h at 37C +/- 1C). The test is performed by spot : Do a zigzag streak on the surface of the medium. One can do up to 3 spots by 55mm plates. Incubate 18h to 24h at 37C +/- 1C. Illustration 2: Enumeration Method
1 BPW or non selective Half Fraser 1h at 20C
ENGLISH
CHROMagar Listeria enumeration Method Enumeration of L.monocytogenes in all human food products and environmental samples. (Refer to Illustration 2)
2
zigzag streak on the surface of the medium
CHROMagar Listeria Spreading 0,1ml Incubation 48h at 37C
------>
Spread 0.1ml Spreading Technique
------>
Collection and transport of the samples should be well handled and adapted to the particular specimen according to good laboratory practices.
Blue colonies with halo
------>
YES
ENUMERATION of typical colonies
------------------------>
NO
------>
PROCEDURES
CHROMagar Listeria Method For the Detection of Presence / Absence of L.monocytogenes in all human food products and environmental samples. (Refer to Illustration 1) Illustration 1: Detection Method
1 Half Fraser 24h at 30C
CHROMagar Identification Listeria 18-24h at 37C
------>
CHROMagar Listeria Isolation 0,1ml Incubation 24h at 37C sample: 48 H
Environmental
NCHR-21/2-12/06. Mthode alternative danalyse pour lagroalimentaire - certifi par AFNOR Certification www.afnor-validation.org
Blue colonies with halo
--->
YES
NO NO
CHROMagar 4 Identification Listeria 18-24h at 37C
INTERPRETATION
Microorganism L.monocytogenes L.ivanovii L.innocua L.seeligeri B.cereus Typical colony appearance
------>
ABSENCE of L.monocytogenes
mauve with halo
PRESENCE of L.monocytogenes
Typical colony appearance on CHROMagar Identification Listeria
Listeria monocytogenes
Listeria innocua
------>
ABSENCE of L.monocytogenes
NO
mauve with halo
Final result of L.monocytogenes enumeration
------>
YES
------> ------> ------> ------> ------>
mauve surrounded
by a white halo
colourless surrounded
by a white halo
mauve without halo colourless without halo colourless with irregular

edge (intense halo)
Listeria ivanovii
Bacillus cereus
The pictures shown are not contractual.
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PERFORMANCE & LIMITATIONS
A study on 120 strains of L.monocytogenes and 55 strains of L.ivanovii has shown a sensitivity and a specificity of 100%.
ENGLISH
REFERENCES
Please refer to our website page Publications for scientific publications about this particular product. Web link: http://www.chromagar.com/publication.php
QUALITY CONTROL
Please perform Quality Control according to the use of the medium and the local QC regulations and norms. Good preparation of the medium can be tested, isolating the ATCC strains below: Microorganism L.monocytogenes ATCC 19115* L.innocua CIP 8012 = ATCC 33091* L.ivanovii ATCC 19119 =WDCM 00018 B.cereus CIP 5832 = ATCC 14893* Typical colony appearance
IFU/LABEL INDEX
Quantity of powder sufficient for X liters of media Expiry date Required storage temperature Store away from humidity
pink with halo pink without halo colourless with halo colourless with big halo
WDCM : World Data Center for Microorganism World Federation for Culture Collection * Corresponding strains on www.straininfo.net
WARNINGS
Do not use plates if they show any evidence of contamination or any sign of deterioration. Do not use the product beyond its expiry date or if product shows any evidence of contamination or any sign of deterioration. For in vitro diagnostic use. This laboratory product should be used only by trained personnel in compliance with good laboratory practices. Any change or modification in the procedure may affect the results. Any change or modification of the required storage temperature may affect the performance of the product. Unappropriate storage may affect the shelf life of the product. Recap the bottles/vials tightly after each preparation and keep them in a low humidity environment, protected from moisture and light. For a good microbial detection: collection and transport of specimen should be well handled and adapted to the particular specimen according to good laboratory practices.
DISPOSAL OF WASTE
After use, all plates and any other contaminated materials must be sterilized or disposed by appropriate internal procedures and in accordance with local legislations. Plates can be destroyed by autoclaving at 121C for at least 20 minutes. Pack Size
Need some Technical Documents? Available for download on www.CHROMagar.com Certificate of Analysis (CoA) --> One per Lot Material Safety Data Sheet (MSDS)
Ordering References
sts 25 Te l m 0 1 f o
Base
Supplement
250 ml
LK970
Weight: 12.95gr
LK970(B)
Weight: 1.63gr
LK970(S)
NT-EXT-026 V4 / 18-Oct-2013 CHROMagar is a trademark created by Dr A. Rambach ATCC is a registered trademark of the American Type Culture Collection
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OBJECTIF DU MILIEU
Notice dutilisation
FRANCAIS
Milieu chromognique pour la confirmation des L.monocytogenes provenant de colonies suspectes. sur CHROMagar Listeria. Listeria monocytogenes est une bactrie largement rpandue, prsente dans la terre, les eaux uses ou les matires fcales. Sa capacit former des biofilms listrials sur les surfaces de contact la rend difficile liminer. Ce pathogne peut causer de srieux empoisonnements alimentaires et cest pour cela quil est frquemment une cible des controles qualit microbiens dans les process alimentaires pour viter les contaminations alimentaires. La contamination peut arriver toutes tapes de la chaine alimentaire, des matires premires au lieu de consommation des aliments.
Notice dutilisation
COMPOSITION
Le produit est compos dune base poudre (B) et dun Supplment (S).
APPLICATIONS
Dans lindustrie agro alimentaire: Pour la confirmation des L.monocytogenes provenant de colonies suspectes sur CHROMagar Listeria:
Mthode CHROMagar Listeria (prsence / absence): Certifi NF VALIDATION CHR-21/1-12/01. Date de fin de validit: 14-Dec-2017 Mthode CHROMagar Listeria numeration: Certifi NF VALIDATION CHR-21/2-12/06. Date de fin de validit: 14-Dec-2017
Produit Total g/L Composition g/L
Base LK970 (B)

51.8 g/L
Agar 15.0 NaCl 5.0 Peptone et extraits de levure 23.0 Mix Chromognique 15.3
Supplment LK970 (S)

6.5 g/L
Mix slectif 6.5
Aspect
En poudre 2/30C 6.6 +/- 0.2
En poudre 2/8C
STOCKAGE
pH DU MILIEU FINAL
PRPARATION (Calcul pour 250ml)

Prparation de la base (B)
Dans le domaine clinique: Pour usage avec les chantillons cliniques, permettant la confirmation des L.monocytogenes dans les chantillons dorigine humaine eg. cultures de sangs, chantillons vaginaux, ou CSF.
tape 1
Ajouter 12.95g de poudre de la base (B) dans 250ml deau purifie. Disperser la poudre lentement dans leau en effectuant des rotations pour bien gonfler le milieu Chauffer 121C +/- 1C pendant 15 minutes. Refroidir dans un bain deau 47C +/- 2C. Ajouter 1.63g du supplment CHROMagar Identification Listeria (S) 10ml deau purifie strile. Ajouter une barre magntique et remuer haute vitesse (700-1000 rpm) au moins 30 minutes SANS CHAUFFER jusqu obtenir une suspension crmeuse et homogne, voir ci-dessous:
TAPE 1: Prsence possible de grains sur la surface du mlange et sur la fiole TAPE 2: Formation dune mousse sur la surface et monte de mousse TAPE 3: Mousse Moins dense-compacte, plus crmeux TAPE 4: Trs bon mlange
Prparation du supplment (S)
tape 2
-->
Aspect cette tape: Liquide avec des grains non dissous
-->
Aspect cette tape: Pas de monte de mousse Mousse plus ventile Liquide
-->
Aspect cette tape: Homogne Fluide (liquide) Mousse sans grains Bonne prparation
Aspect cette tape: Mouse Dense/ Compacte (SURFACE) Mlange mousseux
Mlange de la base prpare (B) avec le supplment prpar (S)
tape 2
Mettre le CHROMagar Listeria base, fondu et ramen 47C, en agitation douce. Y ajouter le supplment homogne reconstitu, en continuant lagitation 1-2 min jusqu homognisation complte. Couler IMMEDIATEMENT dans des boites de Petri striles. Attention: NE PAS SUPERPOSER LES BOITES Laissez-les se refroidir et scher. Conserver lobscurit. Les botes prpares peuvent tre conserves une journe temprature ambiante. Les botes prpares peuvent tre conserves jusqu 2 semaines 2/8C si elles ont t bien prpares et protges de la lumire et de la dhydratation.
Stockage
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INOCULATION
Si la boite prpare a t refrigre, la rchauffer temprature ambiante avant inoculation. A partir des colonies typiques observes sur CHROMagar Listeria, sur une boite de CHROMagar Identification Listeria (colonie bleue avec un halo blanc apparaissant aprs 24h +/- 2h 37C +/- 1C). ralisez un spot : faire de petits stries en zigzag sur la surface du milieu. Une boite peut faire jusqu 3 tests avec des boites de 55mm. Incuber de 18h 24h 37C +/- 1C.
stries en zigzag sur la surface du milieu
Notice dutilisation
FRANCAIS
Mthode de numration CHROMagar Listeria Pour le dnombrement des L.monocytogenes dans tous produits dalimentation humaine et chantillons denvironnement. (Rfrer au shma 2) Shma 2: Mthode de dnombrement
1 EPT ou 1/2 Fraser non slectif 1h 20C
Notice dutilisation
CHROMagar Listeria Etalement 0,1ml Incubation 48h 37C
Colonies bleus avec halo
------>
Etaler 0.1ml Technique dEtalement
------> ------------------------>
NON
------>
OUI
DNOMBREMENT de colonies typiques
------>
PROCDURES
Mthode CHROMagar Listeria Pour la Recherche des L.monocytogenes dans tous produits dalimentation humaine et chantillons denvironnement. (Shma 1) Shma 1: Mthode de dtection
1 1/2 Fraser 24h 30C
CHROMagar Identification Listeria 18-24h 37C
------>
CHROMagar Listeria Isolation 0,1ml Incubation 24h 37C Prlvement Environnemental: 48 H
colonies bleues avec halo
--->
OUI
CHROMagar 4 Identification Listeria 18-24h 37C
INTERPRTATION
Microorganismee L.monocytogenes L.ivanovii L.innocua L.seeligeri B.cereus Apparence dune colonie typique
NON NON
------>
ABSENCE de L.monocytogenes
Mauve avec Halo
mauve entour dun halo blanc incolore entour dun halo

blanc
OUI
PRSENCE de L.monocytogenes
mauve sans halo incolore sans halo incolore avec halo aux bords
irrguliers (halo intense)
Apparence typique des colonies sur CHROMagar Identification Listeria
Listeria innocua
------>
ABSENCE de L.monocytogenes
NON
YES Mauve avec Halo
------>
------> ------> ------> ------> ------>
Rsultat final du dnombrement de L.monocytogenes
Listeria ivanovii
Bacillus cereus
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PERFORMANCE & LIMITATIONS
Une tude sur 120 souches de L.monocytogenes et 55 souches de L.ivanovii a montr une sensibilit et une spcificit de 100%.
Notice dutilisation
FRANCAIS
RFRENCES
Merci de rfrer notre page internet Publications pour consulter les publications scientifiques concernant ce produit. Lien internet: http://www.chromagar.com/publication.php
Notice dutilisation
CONTRLE QUALIT
Merci deffectuer un contrle qualit en accord avec lusage du milieu et les normes locales de contrle qualit. La bonne prparation du milieu peut tre teste en isolant les souches ATCC suivantes: Microorganismee L.monocytogenes ATCC 19115* L.innocua CIP 8012 = ATCC 33091* L.ivanovii ATCC 19119 =WDCM 00018 B.cereus CIP 5832 = ATCC 14893* Apparence dune colonie typique
LEXIQUE TIQUETTE
Quantit de poudre suffisante pour X litres de milieu final Date dexpiration Temprature requise de stockage Stocker labri de lhumidit
rose avec halo rose sans halo incolore avec halo incolore avec halo intense aux
bords irrguliers
WDCM : World Data Center for Microorganism World Federation for Culture Collection * Correspondance de souches sur www.straininfo.net
ATTENTION
Ne pas utiliser les boites si elles montrent un signe vident de contamination ou de dtrioration. Ne pas utiliser notre produit au del de la date dexpiration ou si le produit montre un signe vident de contamination ou de dtrioration. Dispositif mdical de diagnostic in vitro. Ceci est un produit de laboratoire qui doit tre utilis par du personnel spcialis et form aux bonnes pratiques de laboratoire. Tout changement ou modification dans la procdure peut affecter les rsultats. Tout changement ou modification de la temprature de stockage requise peut affecter la performance du produit. Une conservation inapproprie peut affecter la dure de vie du produit. Bien refermer les pots/fioles aprs chaque prparation et les conserver labri de lhumidit, protg des moisissures et de la lumire. Pour une bonne dtection microbienne, la collecte et le transport des chantillons doivent tre bien grs et adapts lchantillon en accord avec les bonnes pratiques de laboratoire.
LIMINATION DES DCHETS

Aprs utilisation, toutes les boites et autres matriels contamins doivent tre striliss et jets selon des procdures internes appropris ou en accord avec les rglementations locales. Les botes doivent tre autoclavs 121C pendant au moins 20 minutes. Rfrence de commande Format
O puis-je trouver les documents techniques?
Base LK970(B)
Supplment
250 ml
sts 25 Te l m of 10
LK970
Poids: 12.95gr
Disponible en tlchargement sur www.CHROMagar.com Certificat danalyse (CoA) --> Un par Lot Fiche de Scurit (MSDS)
Poids: 1.63gr
LK970(S)
NT-EXT-026 V4 / FR 18-Oct-13 CHROMagar est une marque cre par Dr A. Rambach ATCC est une marque enregistre par American Type Culture Collection
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FINALIDAD DEL MEDIO
Instrucciones de uso
ESPAOL
Medio cromognico para la confirmacin de las especies de L.monocytogenes en colonias sospechosas en CHROMagar Listeria. Listeria monocytogenes es una bacteria ampliamente distribuida, presente en el suelo, aguas residuales o materias fecales. Su capacidad para formar biopelculas de listerias en superficies de contacto dificulta su eliminacin. Este patgeno puede causar intoxicaciones alimentarias graves, por lo que, con frecuencia, se asla en las instalaciones de procesamiento de alimentos para evitar contaminaciones alimentarias. Para que los alimentos salgan rpidamente al mercado, es importante distinguir rpidamente este patgeno de otras especies inocuas de Listeria como L.ivanovii, L.innocua.
COMPOSICIN
Producto Total g/l
El producto est compuesto de una base de polvo (B) y un suplemento (S).
APLICACIONES
En el campo alimentario: Para la confirmacin de especies de L.monocytogenes en colonias sospechosas en CHROMagar Listeria:
Mtodo CHROMagar Listeria (presencia/ausencia): con el Certificado NF VALIDATION CHR-21/112/01. Fecha de validez 14-Dic-2017 Mtodo de recuento con CHROMagar Listeria: con el Certificado NF VALIDATION CHR-21/2-12/06. Fecha de validez 14-Dic-2017
Base LK970 (B)

51,8 g/l
Agar 15,0 NaCl 5,0 Extractos de peptona y levaduras 23,0 Mezcla cromognica 15,3
Suplemento LK970 (S)

6,5 g/l
Mezcla selectiva y para enriquecimiento 6,5
Composicin g/l
Aspecto
Forma en polvo 2-30C 6,6 +/- 0,2
Forma en polvo 2-8C
ALMACENAMIENTO pH FINAL DEL MEDIO
En el campo clnico: Fara confirmar L.monocytogenes en muestras de origen humano; p. ej., cultivos sanguneos, hisopos vaginales, o LCR.
PREPARACIN (Clculo para 250 ml)

Preparacin de la base
Paso 1
Suspender lentamente 12,95 g de base de polvo en 250 ml de agua purificada. Remover hasta que el agar haya espesado bien. Calentar a 121C +/-1C durante 15 minutos. Enfriar en una cubeta trmica a 47C +/- 2C. Aadir 1,63 g de suplemento CHROMagar Identificacin de Listeria a 10 ml de agua purificada estril. Aadir una barra magntica y homogeneizar durante al menos 30 minutos hacindola girar a alta velocidad (700-1000 rpm) sin calentar, hasta conseguir una suspensin cremosa homognea como se muestra a continuacin.
FASE 1: Posible presencia de granos en la superficie del vial y en la mezcla FASE 2: Formacin de una densa espuma blanca en la superficie y aumento del tamao de la misma FASE 3: Espuma menos densa/compacta, mezcla ms cremosa FASE 4: MEZCLA MUY BUENA
Preparacin del suplemento
Paso 2
--
-Aspecto en esta fase: La espuma no aumenta de tamao Espuma ms ventilada Lquido
--
Aspecto en esta fase: Lquido con granos no disueltos
Aspecto en esta fase: Espuma densa/compacta (SUPERFICIE) Mezcla espumosa
Aspecto en esta fase: Homogneo Fluido (lquido) Sin granos ni espuma PREPARACIN CORRECTA
Mezcla de la base y el suplemento
Paso 2
Poner la base fundida y enfriada a 47C bajo agitacin suave con barra magntica. Aada el suplemento homogneo reconstituido, manteniendo la agitacin suave durante 1 2 minutos hasta la homogeneizacin completa. Verter INMEDIATAMENTE en placas de Petri estriles. Advertencia: NO APILAR LAS PLACAS DE PETRI. Dejar que se enfren. Dejar solidificar y secar.
Almacenar en la oscuridad antes de usar. Almacenamiento Las placas preparadas con medio pueden conservarse durante un da a temperatura ambiente. Las placas pueden almacenarse hasta dos semanas refrigeradas (2/8C) si se han preparado correctamente y se protegen de la luz y la deshidratacin.
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INOCULACIN
Si la placa de agar ha sido refrigerada, dejar que caliente a temperatura ambiente antes de la inoculacin. Haga una prueba en colonias tpicas aisladas de CHROMagar Listeria (colonias azules con un halo blanco que aparece tras 24h +/- 2 h a 37C +/-1C). La prueba se realiza mediante siembra por manchado: Dibujar un zigzag en la superficie del medio. Se pueden dibujar hasta 3 manchas en placas de 55 mm. Incubar de 18 h a 24 h a 37C +/-1C. Ilustracin 2: Mtodo de recuento
1 BPW o Fraser 1/2 no selectivo 1h a 20C
ESPAOL
Mtodo de recuento con CHROMagar Listeria: Recuento de L.monocytogenes en cualquier producto alimenticio para el hombre y en muestras ambientales. (Consulte la imagen 2)
2
siembra en zigzag En la superficie del medio
CHROMagar Listeria Siembra por extensin de 0,1 ml Incubacin durante 48 h a 37C
---->
Extender 0,1 ml Tcnica de siembra por extensin
---->
La recogida y transporte de las muestras debern realizarse y adaptarse a cada muestra concreta de acuerdo con las buenas prcticas de laboratorio.
Colonias azules con halo ------>
RECUENTO de colonias tpicas
------------------------>
NO
------>
PROCEDIMIENTOS
Mtodo con CHROMagar Listeria Para la deteccin de presencia/ausencia de L.monocytogenes en cualquier producto alimenticio para el hombre y en muestras ambientales. (Consulte la imagen 1) Ilustracin 1: Mtodo de deteccin
1 Fraser 1/2 durante 24 h a 30C
CHROMagar 4 Identification Listeria de 18 a 24 h a 37C
------>
CHROMagar Listeria Aislamiento 0,1 ml Incubacin durante 24 h a 37C Muestras medio- ambientales: 48 H 2
Colonias azules con halo --->
CHROMagar 4 Identification Listeria de 18 a 24 h a 37C
INTERPRETACIN
Microorganismo L.monocytogenes L.ivanovii L.innocua L.seeligeri B.cereus Aspecto tpico de las colonias
NO NO
------>
AUSENCIA de L.monocytogenes
malva con halo
PRESENCIA de L.monocytogenes
Aspecto tpico de las colonias en CHROMagar para identificacin de Listeria
Listeria innocua
------>
AUSENCIA de L.monocytogenes
NO
malva con halo
Resultado final del recuento de L. monocytogenes
------>
------> ------> ------> ------> ------>
malva rodeadas
de un halo blanco de un halo blanco
incoloras rodeadas malva sin halo incoloras sin halo incoloras con borde
irregular (halo intenso)
Listeria ivanovii
Bacillus cereus
Las imgenes mostradas no son contractuales.
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Un estudio realizado en 120 cepas de L.monocytogenes y 55 cepas de L.ivanovii ha mostrado una sensibilidad y una especificidad del 100%.
ESPAOL
RENDIMIENTO Y LIMITACIONES
REFERENCIAS
Consulte nuestra pgina web "Publicaciones" para acceder a las publicaciones cientficas sobre este producto en particular. Enlace web: http://www.chromagar.com/publication.php
CONTROL DE CALIDAD
NDICE DE LAS INSTRUCCIONES / ETIQUETA
Realizar el control de calidad de acuerdo con la utilizacin del medio y los reglamentos y normas locales para QC. La correcta preparacin del medio puede analizarse aislando las cepas ATCC que se enumeran ms abajo: Microorganismo L.monocytogenes ATCC 19115* L.innocua CIP 8012 = ATCC 33091* L.ivanovii ATCC 19119 =WDCM 00018 B.cereus CIP 5832 = ATCC 14893* Aspecto tpico de las colonias
Cantidad de polvo suficiente para X litros de medio Fecha de caducidad Temperatura de almacenamiento requerida Guardar protegido de la humedad
rosa con halo azul sin halo incoloras con halo incoloras con un gran halo
WDCM : World Data Center for Microorganism World Federation for Culture Collection * Correspondencia de cepas en www.straininfo.net
PRECAUCIONES
No utilice placas que muestren cualquier evidencia de contaminacin o cualquier otro signo de deterioro. No utilizar el producto ms all de su fecha de caducidad o si el producto muestra cualquier evidencia de contaminacin o cualquier otro signo de deterioro. Uso previsto para diagnstico in vitro. Este producto de laboratorio debe ser utilizado exclusivamente por personal cualificado conforme a las buenas prcticas de laboratorio. Cualquier cambio o modificacin en el procedimiento puede afectar a los resultados. Cualquier cambio o modificacin de la temperatura de almacenamiento requerida puede afectar al rendimiento del producto. Un almacenamiento inadecuado puede afectar la vida til del producto. Volver a tapar hermticamente los frascos / viales despus de cada preparacin y mantenerlos en un ambiente de baja humedad, protegido de la condensacin y la luz. Para una buena deteccin microbiana: la recogida y transporte de las muestras debern realizarse y adaptarse a cada muestra concreta de acuerdo con las buenas prcticas de laboratorio.
ELIMINACIN DE DESECHOS
Despus de su uso, todas las placas y el resto de material contaminado deben esterilizarse o eliminarse mediante procedimientos internos apropiados y de acuerdo con las normativas locales. Las placas pueden destruirse mediante autoclavado a 121C durante al menos 20 minutos. Tamao del envase
Necesita algn documento tcnico? Disponible para su descarga en www.CHROMagar.com Certificado de anlisis (CoA) --> Uno por lote Hoja de datos de seguridad de materiales (MSDS)
Referencias para pedidos

s ueba 25 pr ml de 10
Base
Suplemento
250 ml
LK970
Peso: 12,95 gr
LK970(B)
LK970(S)
Peso: 1,63 gr
NT-EXT-026 V4 / SPA 30-Jan-14 CHROMagar es una marca comercial creada por el Dr A. Rambach ATCC es una marca registrada de la American Type Culture Collection
CHROMagar 4 place du 18 juin 1940 75006 Pars - Francia Correo electrnico: CHROMagar@CHROMagar.com Tel.: +33 (0)1.45.48.05.05. Sitio web: www.CHROMagar.com
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VERWENDUNGSZWECK
Gebrauchsanweisung
DEUTSCH
Chromogenes Medium zur Besttigung von L. monocytogenes Arten aus verdchtigen Kolonien auf CHROMagar Listeria. Listeria monocytogenes ist ein weit verbreitetes Bakterium, das im Boden, im Abwasser oder in Fkalien vorkommt. Es ist schwer zu eliminieren, weil es auf Kontaktoberflchen Biofilme bildet. Dieser Erreger kann ernste Lebensmittelvergiftungen hervorrufen und wird daher oft in lebensmittelverarbeitenden Betrieben isoliert, um eine Lebensmittelkontamination zu verhindern. Fr eine zgige Freigabe von Lebensmitteln ist es wichtig, diesen Erreger schnell von anderen, harmlosen Listeria-Arten wie L. ivanovii oder L. innocua zu unterscheiden.
Gebrauchsanweisung
ZUSAMMENSETZUNG
Produkt Gesamt g/L Zusammensetzung g/L Aussehen
Das Produkt besteht aus einer Base (B) und einem Supplement (S).
ANWENDUNGSGEBIETE
Im Lebensmittelbereich: Zur Besttigung von L. monocytogenes Arten aus verdchtigen Kolonien auf CHROMagar Listeria:
CHROMagar Listeria Methode (Anwesenheit/ Abwesenheit): Zertifikat NF VALIDATION CHR-21/1-12/01. Gltig bis: 14-Dez-2017 CHROMagar Listeria Zhlmethode: Zertifikat NF VALIDATION CHR-21/2-12/06. Gltig bis: 14-Dez-2017
Base LK970 (B)

51,8 g/L
Agar 15,0 NaCl 5,0 Pepton- und Hefeextrakte 23,0 Chromogenmischung 15,3
Supplement LK970 (S)

6,5 g/L
Selektive und Anreicherungsmischung 6,5
Pulver 2-30C 6,6 +/- 0,2
Pulver 2-8C
AUFBEWAHRUNG pH DES ENDMEDIUMS
Im klinischen Bereich: Zur Besttigung von L. monocytogenes in Proben menschlichen Ursprungs, z. B. Blutkulturen, Vaginalabstriche oder CSF.
ZUBEREITUNG (Berechnung fr 250 ml) Schritt 1

Zubereitung der Base
12,95 g der Base langsam in 250 ml destilliertem Wasser resuspendieren. Rhren, bis der Agar aufgequollen ist. 15 Minuten lang auf 121C +/- 1C erhitzen. Im Wasserbad auf 47C +/- 2 C abkhlen. 1,63 g CHROMagar Identification Listeria Supplement in 10 ml steriles destilliertes Wasser geben. Rhrfisch zugeben und mindestens 30 Minuten unter schnellem Rhren (700-1000 UpM) ohne Heizung homogenisieren, bis eine cremige, homogene Suspension wie unten gezeigt entsteht.
Zubereitung des Supplements
Schritt 2
PHASE 1: Mgliche Anwesenheit von Krnern auf der Oberflche des Kolbens und in der Mischung
PHASE 2: Bildung von dichtem weiem Schaum an der Oberflche und Aufsteigen von Schaum
PHASE 3: Weniger dichter/kompakter Schaum, cremigere Mischung
PHASE 4: SEHR GUTE MISCHUNG
-->
-->
Aussehen nach diesem Schritt: Kein Aufsteigen von Schaum Luftigerer Schaum Flssigkeit
-->
Aussehen nach diesem Schritt: Flssigkeit mit nicht aufgelsten Krnern
Aussehen nach diesem Schritt: Dichter/kompakter Schaum (OBERFLCHE) Schaumige Mischung
Aussehen nach diesem Schritt: Homogen Flssig (Flssigkeit) Ohne Krner, kein Schaum GUTE ZUBEREITUNG
Mischung der Base und des Supplements
Schritt 2
Die geschmolzene, auf 47 C abgekhlte Base mit dem Magnetrhrer leicht rhren. Das homogene, rekonstituierte Supplement zugeben, und 1-2 Minuten bis zur vollstndigen Homogenisierung sanft weiterrhren. SOFORT in sterile Petrischalen gieen. Warnung: PETRISCHALEN NICHT STAPELN. Abkhlen lassen. Erstarren und trocknen lassen. Vor dem Gebrauch dunkel lagern. Fertige Platten knnen einen Tag bei Raumtemperatur aufbewahrt werden. Die Platten knnen bis zu zwei Wochen im Khlschrank (2-8 C) aufbewahrt werden, wenn sie sachgerecht zubereitet wurden und vor Licht und Austrocknung geschtzt sind.
Aufbewahrung
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BEIMPFEN
Khl gelagerte Agarplatten vor dem Beimpfen auf Raumtemperatur bringen. Fhren Sie einen Test an charakteristischen Kolonien durch, die auf CHROMagar Listeria isoliert wurden (blaue Kolonie mit weiem Hof, die bei Inkubation bei 37 C +/- 1 C nach 24 Std. +/- 2 Std. erscheint). Der Test wird mit Hilfe des Spot-Verfahrens durchgefhrt: Machen Sie einen zickzackfrmigen Ausstrich auf der Oberflche des Mediums. Auf 55-mm-Platten knnen bis zu 3 Spots durchgefhrt werden. Zickzackfrmiger Ausstrich 18-24 Stunden bei 37 C +/- 1 C auf der Oberflche des inkubieren. Mediums Probennahme und -transport sollten unter Einhaltung guter Laborpraktiken sorgfltig und an die jeweilige Probenart angepasst durchgefhrt werden. Abbildung 2: Zhlmethode
1 BPW oder nicht selektive 1/2 Fraser Bouillon 1 Std. bei 20 C
Gebrauchsanweisung
DEUTSCH
CHROMagar Listeria Zhlmethode Zhlung von L. monocytogenes in allen Lebensmittel- und Umgebungsproben. (Siehe Abbildung 2)
Gebrauchsanweisung
CHROMagar Listeria Ausstrich 0,1 ml Inkubation 48 Std. bei 37 C
Blaue Kolonien mit Hof
------>
Ausstrich 0,1ml Ausstreichen
------> ------------------------>
NEIN
------>
JA
ZHLUNG der typischen Kolonien
VERFAHREN
CHROMagar Listeria Methode Zum Nachweis der Anwesenheit/Abwesenheit von L. monocytogenes in Lebensmittel- und Umgebungsproben. (Siehe Abbildung 1) Abbildung 1: Nachweismethode
1 1/2 Fraser 24 Std. bei 30 C
CHROMagar Identification Listeria 18-24 Std. bei 37 C
------> ------>
CHROMagar Listeria Isolierung 1,0 ml Inkubation 24 Std. bei 37 C Umgebungs- probe: 48 Std.
Blaue Kolonien mit Hof
--->
JA
CHROMagar 4 Identification Listeria 18-24 Std. bei 37 C
INTERPRETATION
Mikroorganismus L. monocytogenes L. ivanovii L. innocua L. seeligeri B. cereus Typisches Erscheinungsbild der Kolonien weien Hof umgeben Hof umgeben
NEIN NEIN
------>
ABWESENHEIT von L. monocytogenes
malvenfarbene mit Hof
ANWESENHEIT von L. monocytogenes
Typisches Erscheinungsbild der Kolonien auf CHROMagar Identification Listeria
Listeria innocua
------>
ABWESENHEIT von L. monocytogenes
NEIN
malvenfarbene mit Hof
Endergebnis der L. monocytogenes Zhlung
------>
JA
------> ------> ------> ------> ------>
mauvefarben, von einem farblos, von einem weien mauvefarben ohne Hof farblos ohne Hof farblos mit unregelmigem
Rand (intensiver Hof)
Listeria ivanovii
Bacillus cereus
Die gezeigten Fotos sind unverbindlich.
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LEISTUNGSMERKMALE UND VERFAHRENSBESCHRNKUNGEN LITERATUR
Eine Studie an 120 Stmmen von L. monocytogenes und 55 Stmmen von L. ivanovii hat eine Sensitivitt und Spezifitt von 100 % ergeben.
Gebrauchsanweisung
DEUTSCH
Gebrauchsanweisung
Wissenschaftliche Artikel ber dieses spezielle Produkt finden Sie im Bereich Publications auf unserer Website. Web link: http://www.chromagar.com/publication.php
QUALITTSKONTROLLE
Bitte fhren Sie die Qualittskontrolle je nach Gebrauch des Mediums und gem nationaler Qualittskontrollvorschriften und -normen durch. Ob das Medium richtig hergestellt wurde, kann durch Isolierung der folgenden ATCC-Stmme getestet werden: Mikroorganismus L. monocytogenes ATCC 19115 L. innocua CIP 8012 = ATCC 33091 L. ivanovii ATCC 19119 =WDCM 00018 B.cereus CIP 5832 = ATCC 14893 Typisches Erscheinungsbild der Kolonien
ZEICHENERKLRUNG GEBRAUCHSANWEISUNG/ ETIKETT
Die Basemenge reicht fr X Liter Medium Haltbar bis Erforderliche Lagertemperatur Vor Feuchtigkeit schtzen
pinkfarben mit Hof pinkfarben ohne Hof farblos mit Hof farblos mit groem Hof
WARNHINWEISE
Platten nicht verwenden, wenn sie Anzeichen von Kontamination oder Beschdigung zeigen. Produkt nicht verwenden, wenn das Haltbarkeitsdatum berschritten ist oder Anzeichen von Kontamination oder Beschdigung beobachtet werden. Nur zur In-vitro-Diagnostik. Dieses Produkt darf nur von geschultem Laborpersonal und unter Einhaltung guter Laborpraktiken verwendet werden. Jede Abweichung von dem beschriebenen Verfahren kann die Ergebnisse beeinflussen. Jede Abweichung von der erforderlichen Lagertemperatur kann die Leistung des Produkts beeintrchtigen. Unsachgeme Lagerung kann sich auf die Haltbarkeitsdauer auswirken. Die Flaschen/Ampullen mssen nach jeder Prparation wieder fest verschlossen und an einem trockenen, lichtgeschtzten Ort aufbewahrt werden. Um einen guten Nachweis von Mikroorganismen zu gewhrleisten, ist es wichtig, dass Probenahme und -transport sorgfltig und entsprechend der jeweiligen Probenart unter Einhaltung guter Laborpraktiken durchgefhrt werden.
ABFALLENTSORGUNG
Alle Platten und sonstige kontaminierte Materialien mssen nach dem Gebrauch sterilisiert oder durch geeignete interne Verfahren und in bereinstimmung mit den lokalen Vorschriften entsorgt werden. Die Platten knnen durch mindestens 20-mintiges Autoklavieren bei 121C unschdlich gemacht werden.
Technische Dokumente: Als Download erhltlich auf: www.CHROMagar.com Analysenzertifikat (CoA) --> Eins pro Charge Sicherheitsdatenblatt (SDB)
Packungsgre
Artikelnummern
sts 25 Te 0ml 1 zu je
Base
Supplement
250 ml
LK970
Gewicht: 12,95 g
LK970(B)
Gewicht: 1,63 g
LK970(S)
NT-EXT-026 V4 / GER 31-Okt-2013 CHROMagar ist eine von Dr. A. Rambach entwickelte Marke. ATCC ist eine eingetragene Marke der American Type Culture Collection
CHROMagar 4 place du 18 juin 1940 75006 Paris - Frankreich E-Mail: CHROMagar@CHROMagar.com Tel. +33 (0)1.45.48.05.05. Website: www.CHROMagar.com
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CHROMagar ListeriaL.monocytogenes Listeria monocytogenes L.ivanoviiL.innocuaListeria
Base (B) 1 (S)
: CHROMagar Listeria L.monocytogenes :

CHROMagar Listeria (/ ): Certified NF VALIDATION CHR-21/1-12/01. :14-Dec-2017 CHROMagar Listeria: Certified NF VALIDATION CHR-21/2-12/06. :14-Dec-2017
Base LK970 (B)

51.8 g/L
15.0 5.0 23.0 15.3
Supplement LK970 (S) 6.5 g/L

6.5
g/L g/L
230C 6.6 +/- 0.2
28C
pH
(L) 1
Base
: L.monocytogenes : CSF
Base12.95g 250ml 121C +/- 1C15 47C +/- 2C
CHROMagar Identification Listeria1.63g10ml (7001000 rpm) 30

1: 2: 3:
4:
-->
-->
:
-->
: ()
: / ()
Base
47C Base 12 :
(28C) 2
1/3
CHROMagar Listeria (37C +/- 1C24 +/- 2 ) : 55mm 3 37C +/- 1C1824
CHROMagar Listeria: L.monocytogenes (2) 2: 1

BPWHalf Fraser20C1
CHROMagar Listeria 0.1ml 37C48
---->
0.1ml
---->
------>
------------------>
CHROMagar Listeria: L.monocytogenes / (1) 1: 1

Half Fraser30C24
CHROMagar Identification Listeria 37C1824
----> ---->
CHROMagar Listeria 0.1ml 37C24 : 48
--->
CHROMagar Identification Listeria 37C1824
L.monocytogenes L.ivanovii L.innocua L.seeligeri B.cereus ()
---->
L.monocytogenes
L.monocytogenes
CHROMagar Identification Listeria
Listeria innocua
---->
L.monocytogenes
----> ----> ----> ----> ---->
L.monocytogenes
Listeria ivanovii
---->
Bacillus cereus
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L.monocytogenes120L.ivanovii 55 100%
ATCC : L.monocytogenes ATCC 19115 L.innocua CIP 8012 = ATCC 33091 L.ivanovii ATCC 19119 = WDCM 00018
Publications : http://www.chromagar.com/publication.php
B.cereus CIP 5832 = ATCC 14893
121C20
www.CHROMagar.com C ertificate of Analysis (CoA) --> One per Lot Material Safety Data Sheet (MSDS)
250 ml
25 10ml /1
Base
LK970
LK970(B)
:12.95gr
LK970(S)
:1.63gr
NT-EXT-026 V4 / JAP 25-Nov-13 CHROMagarDr A. Rambach ATCCAmerican Type Culture Collection
CHROMagar 4 place du 18 juin 1940 75006 Paris - France E: CHROMagar@CHROMagar.com +33 (0)1.45.48.05.05. : www.CHROMagar.com
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Product Total g/L Composition g/L

Base LK970 (B)

Supplement LK970 (S)

Powder Form 2-30C 6.6 +/- 0.2

Powder Form 2-8C

STORAGE FINAL MEDIA pH

PREPARATION (Calculation for 250ml)

Preparation of the supplement

Aspect at this step: Liquid with undissolved grains

Aspect at this step: Dense/Compact foam (SURFACE) Foamy Mix

Mixing of the base and the supplement

CHROMagarTM Identification Listeria

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