UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS

BIOMEDICINA
BACTERIOLOGIA
RELTORIO DE AULAS PRTICAS
Discente: Karoline Moreira Sosa
Karina Maria Ta!ares Rosa
Li"a Marc#iotti $e Oli!eira
Docente: Ale%an$re Braoios
&ata' ( GO)*+,-
INTRODUO GERAL
No .icrosc/0io 0ri.iti!o $e Lee1en#oe2 o3ser!o(se 0ela 0ri.eira !e"
3act4rias e 0arasitos5 6ato $o 7al5 ocasiono . 8ran$e con#eci.ento a res0eito $a
!i$a .icro3iana9 Al4. $e sere. locali"a$os e. to$os os a.3ientes5 co.o na :8a5 no
solo e no ar5 os .icror8anis.os ta.34. 0artici0a. $e to$as as 6n;<es !itais e
caracter'sticas $e 6or.as $e !i$a .ais co.0le%as est=o associa$as ao a.3iente n=o !i!o
e a otras coisas !i!as9 >rocessos 3io7'.icos e 8en4ticos acontece. e. to$as as
6or.as $e !i$a tili"an$o .icror8anis.os5 sen$o assi. s=o ca0a"es $e $esen!ol!er
0atolo8ias e $oen;as in6ecciosas e. seres #.anos ?@INN et al5 *+,+A9
A c4lla 3acteriana 4 constit'$a $e !arias estrtras9 En7anto $eter.ina$as
estrtras s=o essenciais5 otras est=o 0resentes a0enas e. $eter.ina$as es04cies9 As
3act4rias ta.34. 0osse. $i6erentes 6or.as e arranBos5 a0resentan$o assi.5 6or.as
cil'n$ricas o 3acilos5 es64ricas o $e cocos e $e es0iral9 Os 3acilos 0osse. 6or.a $e
3astonete5 se $i!i$e. no 0lano $o ei%o .enor5 6or.an$o 0ocos a8r0a.entos o
arranBos5 assi. os $i0lo3acilos a0arece. aos 0ares e estre0to3acilos a0arece. e.
ca$eias9 Os cocos a0resenta. 6or.a re$on$a5 0o$en$o a0resentar ta.34. 6or.as o!ais5
ac#ata$as e. al8.a e%tre.i$a$e o alon8a$as5 as 3act4rias e. 6or.a $e cocos se
$i!i$e.5 ao contrario $os 3acilos e sas c4llas 0o$e. 0er.anecer ni$as .as as
otras 0o$en$o 6or.ar $i0lococos5 estre0tococos e cac#os9 >or 6i. a 3act4ria es0irala$a
0o$e ter . o .ais es0irais5 0o$e. ser c#a.a$as $e !i3ri<es o saca(rol#as
?TRABULSIC ALTERTDUM5 *++EA9
O 0rinci0al .4to$o 0ara i$enti6ica;=o e 0osterior an:lise $e .a 8ran$e .aioria
$e isola$os e. la3orat/rios $e .icro3iolo8ia 4 a i$enti6ica;=o 6enot'0ica $e 3act4rias9
>ara 7e seBa 6eita .a $escri;=o correta $a 3act4ria a i$enti6ica;=o $o 8Fnero e $a
es04cie s=o $e s.a i.0ortGncia9 Do .o$o $e !ista o0eracional a es04cie 4 .
conBnto $e ce0as 7e te. e. co.. !arias carater'sticas 6enot'0icas5 a ce0a
3acteriana se ori8ina $e . Hnico isola$o $e cltra e a ce0a t'0ica $a es04cie le!a o
no.e re6erFncia 6a"en$o 0arte $e . conBnto $e cltra ?@INN et al, *+,+A9
O Staphylococcus aureus 4 .a 3act4ria 7e 0ossi 6or.a es64rica e 6a" 0arte $o
8r0o $os cocos 8ra.(0ositi!os9 >resente na .icro3iota nor.al $o cor0o5 esta 3act4ria
0o$e ser encontra$a na 0ele e nas 6ossas nasais $e . in$i!'$o sa$:!el9 >or4.5 a S.
aureus 0o$e casar $oen;as co. n'!el $e in6ec;=o 3ai%o $es$e a . n'!el $e in6ec;=o
.ito alto9 >o$e. ser incl'$as in6ec;<es co.o $e n'!el 3ai%o: 6rHnclos5 es0in#as e
cellites e in6ec;<es co.o $e n'!el alto est=o incl'$os: 0ne.onias5 en$ocar$ites5
.enin8ites $entre otras ?SANTOS et al5 *++IA9
A trans.iss=o $a S. aureus se $a 0or contato $ireto co. a 0essoa in6ecta$a 7e
esteBa a0resentan$o les=o 0rlenta o 7e n=o seBa 0orta$ora $e sinto.as9 Sen$o assi.5
as les<es 7e a0resenta. secre;<es s=o as 6ontes $e $isse.ina;=o .ais co.. e at4
.es.o e. #os0itais 0o$e. ocorrer a $isse.ina;=o $a 3act4ria 0elas 0r/0rias .=os $o
0ro6issional $a saH$e ?BURTONC ENGELKIRK5 *++EA9
A Staphylococcus epidermidis 4 .a 3act4ria 0ertencente : cate8oria $os
esta6ilococos coa8lase(ne8ati!os9 Esta 3act4ria 0ossi a ca0aci$a$e $e 0ro$"ir
3acteriocinas ati!as contra otros Gra.(0ositi!os 7e 0o$e. co.0etir 0or nic#os $e
coloni"a;=o5 $e!i$o a este 6ato5 0o$e ser $estaca$a co.o sen$o .a $as es04cies
0re$o.inantes na 0ele $o in$i!'$o5 encontra$a assi. na .icro3iota nor.al $o cor0o5
.ais es0eci6ica.ente 0resente na 0ele e nas .cosas9 E. co.0ara;=o ao
Staphylococcus aureus5 o S. epidermidis n=o a0resenta arsenal $e en"i.as e to%inas5
$e!i$o a este 6ato5 o traBeto $as in6ec;<es a$7ire. .a ten$Fncia a sere. s3a8$o o
crJnico ?EIFF5 *++*A9
A Staphylococcus saprophyticus 4 .a 3act4ria 0resente e. isola$o $e in6ec;<es
0resentes no trato rin:rio $e .l#eres Bo!ens e se%al.ente ati!as5 0ore. 0o$e casar
ta.34. in6ec;<es rinarias no #o.e.9 Esta 3act4ria !i!e na 0ele e na re8i=o 0eriretral
$e .l#eres e #o.ens5 0osse. ta.34. ca0aci$a$e $e a$erir c4llas $o e0it4lio
rin:rio ?TRABULSIC ALTERTDUM5 *++EA9
Os Enterococcus s=o cocos Gra.(0ositi!os 7e 6a"e. 0arte $a .icro3iota $o
trato 8astrintestinal5 $o trato 8enitrin:rio e $a ca!i$a$e oral5 7e est=o $istri3'$os e.
$i!ersos a.3ientes9 Este 8Fnero a0resenta necessi$a$es ntricionais 7e 0o$e. !ariar e
re7erer .eios co.0le%os 0ara se cresci.ento e sa te.0eratra /ti.a $e cresci.ento
4 -EKC ?ANDRADE et al5 *+,,A9
A Escherichia coli 4 .a 3act4ria Gra.(ne8ati!a5 anaer/3ica 6acltati!a9 L
encontra$a ta.34. na .icro3iota nor.al $o cor0o5 a0resentan$o 0ato8enici$a$e 0ara o
#o.e.9 De acor$o co. os .ecanis.os $e !irlFncia caracter'sticos $e a.ostras
0ato8Fnicas e%iste. seis 8r0os $i6erentes $e E.coli 7e 0osse. a ca0aci$a$e $e
casar $iarreia no in$i!'$o in6ecta$o9 As EDEC 6or.a. .a $essas cate8orias 0or
casare. colite #e.orr:8ica no #o.e. e s'n$ro.e #e.ol'tica rF.ica ?SDUA5 $oen;a
$e alta 8ra!i$a$e 7e te. co.o 8ra!e conse7Fncia 6alFncia renal e 0osterior /3ito
?MITTELSTAEDTC CARVALDO5 *++MA9
O Micrococcus corres0on$e :s es04cies Micrococcus luteus e Micrococcus lylae9
Co. 3ase nas $i6eren;as $e co.0osi;=o $os DNAs5 os .icrococos 6ora. se0ara$os $os
esta6ilococos9 Os .icrococos s=o .icror8anis.os 7e 6a"e. 0arte $o .eio a.3iente e
7e 0o$e. ser locali"a$os na 0ele $o ser #.ano e rara.ente associa$os a in6ec;<es
?TRABULSIC ALTERTDUM5 *++EA9
A Salmonella s009 e .a 3act4ria ent4rica 7e casa into%ica;<es ali.entares
8ra!es9 Os soroti0os $e sal.onelas e. sa 8ran$e .aioria casa. $oen;as 0ara o
#o.e. atra!4s $a in8est=o $e ali.entos conta.ina$os5 o 7e te. si$o . 8ran$e
0ro3le.a $e saH$e 0H3lica9 As es04cies $esse 8Fnero atra!essa. a ca.a$a e0itelial
intestinal5 alcan;a. a lG.ina 0r/0ria on$e se 0roli6era.5 co. isto co.e;a. a sr8ir
sinto.as co.o $iarreia5 6e3re 3ai%a5 $ores a3$o.inais e !J.ito5 rara.ente ocorre.
casos cl'nicos 6atais9 Os ali.entos 7e 8eral.ente s=o .ais conta.ina$os 0ela
Salmonella s=o carnes 3o!inas5 $e a!es5 $e s'no e o!os crs ?SDINODARA et al5
*++NA9
Estas 6ora. al8.as $as 3act4rias tili"a$as nas alas 0r:ticas5 analisa$as 0or
.eio $e $i6erentes t4cnicas5 7e ser=o $escritas 0osterior.ente9

INTRODUO ESPECIFCA
Tcnicas de Gram
Dans C#ristian &oac#i. Gra.5 6oi . 3acteriolo8ista 7e e. ,NNO
$esen!ol!e .a t4cnica 7e 4 sa$a at4 os te.0os atas nos la3orat/rios $e
3acteriolo8ia5 a t4cnica $e Gra.9Esta t4cnica 0er.ite classi6icar as 3act4rias e.
$ois 8r0os5 sen$o eles as 3act4rias Gra. 0ositi!as 7e te. a colora;=o e.
ro%o5 e as 3act4rias Gra. ne8ati!as 7e te. a colora;=o e. !er.el#o o rosa9
?BRAOIOS5 *+,-A
Bact4rias Gra. 0ositi!as te. sa 0are$e co.0osta 0or P+Q $e
0e0ti$io8licanos 0or4. s=o encontra$os ta.34. 0rote'nas e :ci$os teit/icos5
on$e 0o$e. re0resentar at4 E+Q $a .assa seca $a 0are$e9 &: a 0are$e $as
3act4rias Gra. ne8ati!as 4 6or.a$a 0or 0ocos 0e0ti$eo8licanos e cont4. .a
ca.a$a e%terna $eno.ina$a .e.3rana e%terna5 as 3act4rias Gra. ne8ati!as
s=o .ais co.0le%as 7e as 3act4rias Gra. 0ositi!as ?TRABULSIC
ALTERTDUM5 *++EA9
FIGURA 1: Di6eren;a entre as 3act4rias Gra. 0ositi!as e Gra. ne8ati!as
FIGURA : A0lica;=o $a t4cnica $e Gra.
>ri.eira.ente na t4cnica $e Gra.5 4 acrescenta$o o Cristal Violeta5 este 0enetra
6acil.ente e. a.3as as 3act4rias9 Ran$o 0enetra$o as 3act4rias a$7ire. .a cor
se.el#ante a cor $e !ioleta o ro%o5 estes a3sor!e. a cor $e!i$o a a.3os 0oss're. .
co.0le%o $eno.ina$o cristal(!ioleta(io$o?co.0le%o I(CVA on$e 7e s=o insolH!eis e.
se cito0las.a9 E. se8i$a 4 acrescenta$o o l8ol on$e este ir: 6a"er li8a;=o co. o
Cristal Violeta5 e ent=o ir: acorrer a 6or.a;=o $e cristais .ito 8ran$es sen$o $i6'ceis
$e retira(los $as 3act4rias9 De0ois $o l8ol ser: acrescenta$o o :lcool(cetona5 4 nessa
eta0a 7e ocorrer: a $i6erencia;=o $as 3act4rias Gra.(0ositi!as e. 3act4rias Gra.(
ne8ati!as9 As 3act4rias Gra. 0ositi!as 7an$o entra. e. contato co. o :lcool(cetona
torna.(se .ais 0er.e:!eis ain$a5 0ois o :lcool(cetona ir: 0ro!ocar e $esi$rata;=o $as
0are$es $a 3act4ria9 Nas 3act4rias Gra. ne8ati!as o :lcool(cetona ir: $issol!er a
.e.3rana e%terna $a 3act4ria5 a.entan$o a 0er.ea3ili$a$e $a 0are$e5 on$e a sa'$a $o
co.0le%o I(CV 6:cil9 As 3act4rias Gra. ne8ati!as $e!i$o a esse aconteci.ento se
tornar=o incolores e as 3act4rias Gra. 0ositi!as ir=o 0ossir a colora;=o $e !ioleta o
ro%o9 >ara 7e as 3act4rias Gra. ne8ati!as seBa. cora$as no!a.ente5 . no!o corante
4 a$iciona$o5 o .ais tili"a$o 4 o corante Fcsina5 7e ir: $ei%ar as 3act4rias Gra.
ne8ati!as rosa ?BRAOIOS5 *+,-A9
A t4cnica $e Gra. 4 sa$a 0ara a!aliar a .or6olo8ia $as 3act4rias 7anto
a sa 6or.a e se arranBo5 e ta.34. a!aliar as 0ro0rie$a$es tintorias .es.as9
FIGURA !" $i6eren;a $as 3act4rias Gra. 0ositi!as e Gra. ne8ati!as9 Dis0on'!el e.
#tt0:))1119.e$icina8eriatrica9co.93r9
C#$%i&' de (icr'r)anism's
Anti8a.ente5 antes $a $4ca$a $e ,NN+ os .eios $e cltra tili"a$os 0ara est$o
$as 3act4rias era . .eio l'7i$o5 o 7e $i6iclta!a o est$o $as 3act4rias 0ras5 0ois
estas se .istra!a. co. as 3act4rias in6ecta$as9 Ent=o na $4ca$a $e ,NN+ .
3acteriolo8ista c#a.a$o Ro3ert Koc# intro$"i o .eio $e cltra s/li$o9 E. to$os os
.eios5 o 7e se $e!e conter s=o os ntrientes 7e 0ossi3ilite. as 0roli6era;=o $os
.icror8anis.os e. 7e n=o esteBa. e. se a.3iente natral9 Esses ntrientes !aria.
$e acor$o co. o .icror8anis.o9 Al4. $os ntrientes 4 necess:rio 6ornecer aos
.icror8anis.os con$i;<es 6a!or:!eis 0ara sa 0roli6era;=o sen$o . $eles o 0D e otro
a te.0eratra9 Os .eios 0recisa. o6erecer ener8ia5 sen$o estas 0e0tonas e car3oi$ratos5
0recisa. ta.34. o6erecer 6/s6oro5 car3ono5 en%o6re entre otros co.0ostos $e acor$o
co. o a.3iente $o .icror8anis.o ?BRAOIOS5 *+,-A9
Os in$ica$ores $e 0D s=o tili"a$os 0ara $eter.inar a !aria;=o $o 0D na cltra
0ois5 al8.as s3stGncias .$a. $e cor $e acor$o co. a !aria;=o $o .es.o9 Ran$o
as s3stancias .$a. $e cor5 estas 0o$e. ser analisa$as on$e 0o$e(se !eri6icar a
0ro$;=o $e :ci$o a 0artir $a 6er.enta;=o $e a;cares e ra$icais a.inas9 U. $os .eios
0elo 7al se 0o$e i$enti6icar o 0D $e . .eio 4 o .eio tili"an$o o 8ar MacC2on2eS
on$e o se in$ica$or $e 0D tin#a colora;=o Ver.el#o netro5 7an$o a 3act4ria
6er.enta!a o .eio e. 0D :ci$o 6ica!a !er.el#o5 e e. 0D alcalino 6ica!a a.arelo9 Os
.eio $e cltra 0o$e. ser classi6ica$os $e acor$o co. a consistFnciaC sen$o estes
s/li$o5 se.i(s/li$o o l'7i$o5 7anto a co.0osi;=oC sen$o .eios sint4ticos o
7i.ica.ente $e6ini$os e .eios co.0le%osC 7anto a 6inali$a$e sen$o .eio $e
trans0orte5 .eio $e .anten;=o o 0reser!a;=o5 .eio $e enri7eci.ento5 .eios
$i6erencias5 .eios seleti!os e .eios seleti!os $i6erenciais9 V:rios s=o os 8ars
tili"a$os nos .eios $e cltra entre eles est=o: 8ar san8eC 8ar c#ocolateC 8ar
MacCon2eS sen$o este tili"a$o 0ara o isola.ento $e 3act4rias Gra. ne8ati!as5 co.o
E.coli e Klebsiella; 8ar Salmonella-Shigella ?8ar SSA 7e co.o o 0r/0rio no.e B:
$i" 4 sa$o 0ara i$enti6icar Salmonella e ShigellaC 8ar Meller Dinton on$e se .eio
$e cltra n=o 4 seleti!o e ne. $i6erencial5 este .eio 4 sa$o co.o .eio 0a$r=o 0ra
teste $e sensi3ili$a$e aos anti.icro3ianosC 8ar Manitol(sal 7e ao contrario $o
Meller(Dinton 4 seleti!o e $i6erencial5 4 .ito tili"a$o no isola.ento $e
Staphylococos e. a.ostras conta.ina$asC 8ar Sa3ora$5 e otros 8ars tili"a$os
e. .eios $e cltra ?BRAOIOS5 *+,-A9
>ara 7e seBa 6eito . est$o $os .icror8anis.os5 4 necess:rio 7e o .eio
0ossa .a cltra 0ra5 o seBa5 .a 0o0la;=o $e .icror8anis.os se. inter6erFncia
$e otras es04cies9 >ara 7e isso ocorra s=o tili"a$os !:rios .eios $e i$enti6ica;=o5 .
$eles 4 a i$enti6ica;=o .acrosc/0ica $o .icror8anis.o ?BRAOIOS5 *+,-A9
As t4cnicas $e se.ea$ra5 s=o .4to$os 0elos 7ais se trans6ere in/clos
3acterianos $e . .eio $e cltra atra!4s $e . .aterial5 0o$en$o este ser escarro5
6eri$a5 0ara . otro .eio e 0ara 7e isso ocorra se. nen#.a conta.ina;=o5 s=o
tili"a$os .4to$os $e asse0sia ?CERRUEIRA5 *++IA9
FIGURA *" t4cnica $e asse0sia9 Dis0on'!el e.: #tt0:))11196693r
Dentre as !:rias se.ea$ras est=o as5 e. .eios l'7i$os on$e consiste e. a$icionar5
co. o a%ilio $e .a al;a $e o a8l#a . inoclo .icro3iano ao cal$o5 a8itan$o(o le!e.ente
0ara #a!er . $es0ren$i.ento $o inoclo $a al;a 0ara o cal$o ?Fi8ra EA5 se.ea$ra e. .eio
se.is/li$o5 0ara !eri6icar a 6er.enta;=o e .otili$a$e 3acteriana ?Fi8ra MA9
FIGURA +" >roce$i.ento 0ara re.o!er .icror8anis.os $a cltra e. .eio
l'7i$o9 Dis0on'!el e. #tt0:))11196693r
FIGURA ," .eio se.is/li$o9
A%i&idade (e%a-.$ica das /ac%rias
O .eta3olis.o $a 3act4ria te. co.o o3Beti!o trans6or.ar t$o 7e esta
a sa $is0osi;=o e. ener8ia 0ara ela .es.a9 As 3act4rias 0o$e. ser
atotr/6icas5 $i!i$in$o(se e. atotr/6icas 6otolitr/6icas on$e tili"a. CO*
co.o Hnica 6onte $e car3ono5 e atotr/6icas 7i.iolitotr/6icos on$e ta.34.
tili"a. CO* co.o 6onte $e car3ono5 0or4. elas 0ro$"e. AT> atra!4s $a
o%i$a;=o $os s3stratos inor8Gnicos 7e re$"e. a NA>DT e 7e ir=o re$"ir a
o%i$a;=o $os co.0ostos or8Gnicos5 0or4. e%iste. 3act4rias #eterotr/6icas
sen$o estas #eterotr/6icas 6otor8anotr/6icos 7e tili"a. co.0ostos or8Gnicos
co.o 6onte $e car3ono5 on$e ir=o 0ro$"ir AT> a 0artir $a 6onte l.inosa 7e
ir=o re$"ir a NAD>T 0ela o%i$a;=o $os co.0ostos or8Gnicos5 e 3act4rias
7i.ior8anotr/6icos 7e a0enas se $i6erencia. 0ela 0ro$;=o $e AT>9 Os
s3stratos co.o car3ono5 alco/is5 .anitol5 8licerol e otros5 7e s=o 6ontes 7e
0er.ite. a i$enti6ica;=o 3io7'.ica $os .icror8anis.os9 O car3oi$rato 0o$e
ser tili"a$o 0ara 6onte $e o%i$a;=o aer/3ia5 o o%i$a;=o anaer/3ia5 e a
$e8ra$a;=o $os car3oi$ratos ir: ori8inar o :ci$o 0irH!ico9 V:rios s=o os testes
0ara reali"a;=o $e i$enti6ica;=o $e 6ontes $e car3ono5 sen$o al8ns $eles o teste
OF?o%i$a;=o)6er.enta;=oA5 7e este teste ir: $eter.inar a !ia .eta3/lica
tili"a$a 0ara $eter.inar a $e8ra$a;=o $a 8licose5 !eri6ica;=o $a 0ro$;=o $e
8:s ?CO*A e :ci$o a 0artir $a 6er.enta;=o $e car3oi$ratos 7e al4. $e !eri6icar
se a 3act4ria 0ro$"i :ci$o5 a .es.a ta.34. 0ro$"i 8:sC teste $e VM)V>
7e ir: !eri6icar 7al !ia .eta3/lica tili"a$a 0ela 3act4ria on$e esta 0ro$"i
8licose?6i8ra IAC teste $a tili"a;=o $e citrato 7e consiste5 e. a!aliar se as
3act4rias 6er.enta. 8licose 0ela !ia :ci$a .ista5 co. a 0ro$;=o $e !:rios
:ci$os5 o 7e 0ro!a o a3ai%a.ento $o 0D a .enos O5O?6i8ra NACMeio SIM
?sl6eto $e D U In$ol U Motili$a$eA este .eio 0o$e(se a!aliar - caracteristicas
$a 3act4ria5 co.o a ca0aci$a$e $e 0ro$;=o $e D*S5 7e al8.as 3act4rias s=o
ca0a"es $e $e8ra$ar co.0ostos conten$o en%o6re5 0ro$;=o $e In$ol e. 7e 4
0ro$"i$o 0ela a;=o $a tri0to6anase so3re o tri0to6ano no .eio $e cltra5
ocorren$o5 ta.34. a 0ro$;=o $e :ci$o 0irH!ico e a.Jnia9
FIGURA 0: E%e.0los $e VM 0ositi!o e ne8ati!o9 Dis0on'!el: A0ostila $o roteiro9
FIGURA 1: 6er.enta;=o e. Citrato
Tes%e de Sensi-i$idade a's An%imicr'-ian's
A essFncia $os anti.icro3ianos 4 a to%ici$a$e seleti!a o seBa .atar o
ini3ir o .icror8anis.o se. a6etar o #os0e$eiro9 Ent=o o anti3i/tico 0o$e casar a .orte
$a 3act4ria o a0enas ini3ir o se cresci.ento5 sen$o assi. $i!i$i$os e. $as
cate8orias: Bacterici$as 7e casa. a .orte $a 3act4ria o 3acteriost:tico 7e
interro.0e sa re0ro$;=o o ini3e o se .eta3olis.o9 Le.3ran$o 7e e.3ora os
anti3acterianos seBa. $i!i$i$os nessas $as cate8orias al8.as $ro8as5 ti0ica.ente
3acteriost:ticas5 0o$e. ser 3acterici$as 0ara $eter.ina$as es04cies $e 3act4rias9
Clinica.ente 6alan$o as $as cate8orias s=o 3astante e6icientes9
O anti3io8ra.a na reali$a$e n=o se trata $e . e%a.e e si. $o reslta$o
$e . e%a.e 7e te. co.o 6inali$a$e a!alia a sensi3ili$a$e $e .a lin#a $e 3act4rias
7e isola$as $e 6or.as $i6erencia$as a0resenta. . anti3i/tico9 Sen$o assi. 0o$e se
$i"er ent=o 7e trata(se $e a0resenta;=o $e reslta$o $a sensi3ili$a$e 7e os anti3i/ticos
0o$e. re6letir e. . 0aciente $e acor$o co. o trata.ento 7e 4 necess:rio a ser
reali"a$o5 0or e%e.0lo5 co.o $eter.ina$o anti3i/tico rea8iria e. .a in6ec;=o
rin:ria9
O .4to$o $e anti3io8ra.a te. co.o !anta8e. se 3ai%o csto5 sa
constante 0a$roni"a;=o5 sa 8ran$e 6le%i3ili$a$e na escol#a $os anti.icro3ianos e sa
6:cil inter0reta;=o9 Os reslta$os 7alitati!os5 o seBa5 in6or.a;<es $a concentra;=o
ini3it/ria .'ni.a $os a8entes .icro3ianos $iante $os .icror8anis.os testa$os s=o sa
.aior li.ita;=o5 al4. $e sere. .4to$os 0a$roni"a$os e aceitos 0ara a a!alia;=o $a
sensi3ili$a$e $e .icror8anis.os anaer/3ios e al8.as es04cies 7e n=o 0o$e. ser
a!alia$as 0ela .eto$olo8ia $a $i6s=o $o $isco ?TRABULSI5 *++NA9
Ses reslta$os s=o $i!i$i$os e. resistente5 inter.e$i:rio e sens'!el9 O resistente 4
7an$o o .icror8anis.o isola$o n=o 4 ini3i$o 0ela concentra;=o $o anti.icro3iano
0resente no local $a in6ec;=o9 O inter.e$i:rio si8ni6ica 7e o .icror8anis.o 0o$e ser
ini3i$o 0or concentra;<es .aiores $e otras $ro8as9 O sens'!el si8ni6ica 7e a in6ec;=o
casa$a 0elo .icror8anis.o est$a$o 0o$e ser trata$a co. a $osa8e. $o
anti.icro3iano testa$o9 ?TRABULSI5 *++NA9
Iden%i2ica34' /ac%eriana
A i$enti6ica;=o $e 3act4rias 3aseia(se na an:lise .or6ol/8ica $a c4lla
3acteriana5 nas caracter'sticas cltrais5 6isiol/8icas5 sorol/8icas5 a;=o 0ato8Fnica e
caracter'sticas .oleclares9 A 6or.a $a 3act4ria5 o3ser!a$a ao .icrosc/0io a0/s
colora;=o $i6erencial5 a 6or.a $a colJnia o3ti$a a0/s cltra e. .eio s/li$o
a0ro0ria$o5 a ca0aci$a$e $e .eta3oli"a;=o $e s3stratos 0articlares5 s=o al8ns $os
in$ica$ores tili"a$os na i$enti6ica;=o $e .a 3act4ria9
As caracter'sticas 8enot'0icas s=o 3asea$as na $etec;=o $e se7Fncias 8en4ticas
es0ec'6icas e as 6enot'0icas s=o tili"a$as na i$enti6ica;=o 3acteriana 3asea$as no
e.0re8o $e .a s4rie $e testes 3io7'.icos ?TRABULSI5 *++NA9
As 3act4rias 0o$e. ser i$enti6ica$as 0or caracter'sticas $o se .eta3olis.o5
co.o a ca0aci$a$e $e $e8ra$ar $eter.ina$os s3stratos e 0ro$"ir 8ases9 As 0ro!as
3io7'.icas tili"a. .eios $e cltra e rea8entes es0ec'6icos 0ara $etectar .eta3/litos
resltantes $a ati!i$a$e 3acteriana5 a%ilian$o na sa i$enti6ica;=o9 As 0ro!as .ais
con#eci$as s=o: tili"a;=o $e 6ontes $e car3ono5 tili"a;=o $e 6ontes $e nitro8Fnio5
0ro$;=o $e en"i.as e .otili$a$e9
A 0ro!a $a catalase 4 tili"a$a co.o . .4to$o 3io7'.ico na 0es7isa $e
en"i.as estrtrais9 Sa 6n;=o 4 $eco.0or o 0er/%i$o $e #i$ro8Fnio ?D*O*A e. :8a
e o%i8Fnio9 O 0er/%i$o $e #i$ro8Fnio 4 6or.a$o $rante a res0ira;=o aer/3ica nor.al5
0or4. ele 4 t/%ico 0ara as c4llas9 Desta 6or.a os .icror8anis.os $esen!ol!era. esta
en"i.a 7e 4 ca0a" $e netrali"ar a a;=o t/%ica9 Nor.al.ente5 .icror8anis.os
anaer/3ios o3ri8at/rios n=o 0ro$"e. a en"i.a catalase9 Este teste 4 tili"a$o na
$i6erencia;=o $e Staphylococcus e Micrococcus $os Streptococcus, sen$o 7e este
Hlti.o 4 catalase ne8ati!o9 ?TRABULSI5 *++NA9
A 0ro!a $a coa8lase consiste e. en"i.as co. ca0aci$a$e 0ara coa8lar o
0las.a san8'neo atra!4s $e . .ecanis.o si.ilar ao $a coa8la;=o nor.al9 A
ati!i$a$e $a coa8lase 4 tili"a$a 0ara $istin8ir es04cies 0ato8Fnicas $e
Staphylococcus $e es04cies n=o 0ato8Fnicas5 sen$o . 3o. in$ica$or $a
0ato8enici$a$e $o S.aureus9 O .es.o ir: 0ro$"ir . co:8lo atra!4s $a en"i.a
coa8lase 0ara se 0rote8er $o siste.a i.nol/8ico $o #os0e$eiro9 ?TRABULSI5 *++NA9
A 0ro!a $a DNAse 4 . .4to$o en"i.:tico 7e 4 tili"a$o 0ara $etectar a
ati!i$a$e 0rinci0al.ente 0ara $i6erenciar Staphylococcus aureus $e otras es04cies
$este 8Fnero9 Ce0as $e al8ns .icror8anis.os 0ro$"e. DNase e en$onclease
ter.oest:!el9 Estas en"i.as #i$rolisa. :ci$o $eso%irri3oncl4ico ?DNAA conti$o no
.eio $e cltra a0/s . 0er'o$o $e inc3a;=o9 >osterior.ente este .eio 4 aci$i6ica$o
co. DCl ,N 0ara a re!ela;=o $a 0ro!a9
O teste $e 6er.enta;=o $o Manitol !isa a 0es7isa $os 0ro$tos .eta3/licos $a
3act4ria9 O .es.o 4 tili"a$o co. 6re7Fncia 0ara a $i6erencia;=o $e colJnias $e S.
aureus $e otras es04cies $e Staphylococcus9 Na 0resen;a $e .anitol os S9 ares
0ro$" colJnias a.arelas circn$a$as 0or . #alo $a .es.a cor9 De!i$o as otras
3act4rias n=o 6er.entare. .anitol elas cresce. co.o 0e7enas colJnias !er.el#as
circn$a$as 0or . #alo !er.el#o o $e cor 0Hr0ra9?TRABULSI5 *++NA9
O teste $a no!o3iocina se0ara es04cies $e Staphylococcus coa8lase ne8ati!a
7e 0o$e. ser sens'!eis o n=o a no!o3iocina9 As .es.as ce0as $e Staphylococcus
saprophyticcus ?No!o3iocina resistenteA $as $e.ais ce0as $e Staphylococcus coa8lase
ne8ati!a $e i.0ortGncia cl'nicaC Staphylococcus saprophyticcus 4 a Hnica es04cie
isola$a e. #.anos co.o casa$ora $e in6ec;<es rin:rias9

O/5ETI6OS
Nas alas 0r:ticas reali"a$as no la3orat/rio $e .icro3iolo8ia $a Uni!ersi$a$e
Fe$eral $e Goi:s 6ora. analisa$as as $i!ersas caracter'sticas .or6ol/8icas $os 8Fneros
$e $i6erentes 3act4rias9 A0licar os .eios sa$os 0ara isola(las e i$enti6ica(las 0ara sa
0osterior analise e ta.34. a!aliar as !ias .eta3/licas co. ses 0er6is anti.icro3ianos9
(ATERIAIS E (7TODOS
Tcnicas de Gram

>ri.eira.ente reali"o(se . es6re8a;o 3acteriano9 A al;a 6oi 6la.3a$a e
0osterior.ente es6ria$a5 a t4cnica 6oi reali"a$a 0r/%i.a ao 3ico $e Bnsen5 a$iciono(
se .a 8ota $e sol;=o salina a .a lG.ina $esen8or$ra$a e li.0a9
Retiro(se $e .a colJnia isola$a5 atra!4s $e .a al;a 6la.3a$a e 6ria .a
0or;=o $e 3act4ria5 6oi .istra$a .a 8ota $e salina on$e 0osterior.ente 6ora.
reali"a$os .o!i.entos circlares5 a6i. $e 7e o es6re8a;o a0to 0ara ser analisa$o no
.icrosc/0io e ta.34. 0ara a !isali"a;=o $as caracter'sticas .or6otinto6atoriais $a
3act4ria9 >ara o es6re8a;o secar5 0asso(se trFs !e"es a lG.ina na c#a.a $o 3ico $e
Bnsen5 0ara 0osterior 6i%a;=o $o es6re8a;o9
A lG.ina 6oi cora$a 0ri.eira.ente 0elo cristal !ioleta5 0or , .into9 On$e
0osterior.ente 6oi la!a$a co. :8a $estila$a9 E. se8i$a co3ri(se o es6re8a;o co.
l8ol 0or , .into ta.34. e no!a.ente a lG.ina 6oi la!a$a9 A$iciono(se o :lcool
cetona 0or a0ro%i.a$a.ente ,+ se8n$os e e. se8i$a 6oi la!a ta.34. a0/s a a$i;=o
$o :lcool e la!a8e. co3ri(se o es6re8a;o co. corante 6csina $rante , .into e
$e0ois 6oi la!a$o co. a8a9 Es0ero(se a seca8e. $a la.ina on$e 0osterior.ente 6oi
analisa$a co. o3Beti!a $e ,++% co. /leo i.ers=o9
C#$%i&' de (icr'r)anism's
Os .eios $e cltra tili"a$os 6ora.: 8ar MaCon2eS5 Manitol sal5 8ar
SS5 8ar Meller Dinton e 8ar San8e9 Utili"o(se .a .istra $e 3act4rias5
on$e estas incl'a. E.coli e Enterococcus 0or estrias $escontinas na 0laca $e
>etri conten$o o 8ar $eseBa$o9 O inoclo 6oi $e0osita$o e. .a 0laca $e >etri5
on$e 6ora. 6eitas estrias $escontinas5 co. o a%'lio $e .a al;a 6la.3a$a e
0osterior.ente es6ria$a5 o inoclo 6oi $e0osita$o na 0laca e a al;a 6la.3a$a
no!a.ente e. .a sol;=o salina5 a al;a 6oi 0assa$a no!a.ente 0ela 0laca
est4ril5 $as !e"es so3re a 0ri.eira estria es8otan$o a 7anti$a$e $e 3act4rias9
>osterior.ente se. 6la.3ar a al;a 6oi 6eita .a estria 0assan$o a .es.a5 0elo
se8n$o conBnto $e estrias e 0ara 6inali"ar 6oi 6eita .a estria se. 0assar a al;a
so3re as estrias 0osteriores 0ara o3ter(se . isola.ento $as colJnias $as
3act4rias9 Reali"o(se o 0re0aro $a lG.ina a 0artir $e .a Hnica colJnia5 on$e
esta 6oi cora$a 0ela t4cnica $e Gra.9
A%i&idade (e%a-.$ica das /ac%rias

Utili"o(se $i!ersos testes 0ara a a!alia;=o .eta3/lica $a 3act4ria S.
aureus. >ri.eira.ente 6oi tili"a$o . .eio soli$o on$e este contin#a 8licose e
o in$ica$or $e 0D 6oi o a"l $e 3ro.oti.ol9 A se.ea$ra 6oi reali"a$a 0or .a
0ica$a 0ro6n$a on$e e. se8i$a 6oi inc3a$a 0or *O #oras a -EKC9
O otro teste 6oi analisa$o a 0ro$;=o $e 8:s ?CO
*
A e :ci$o a 0artir $a
6er.enta;=o $o car3oi$rato9 A 3act4ria 6oi coloca$a e. . .eio li7i$o
conten$o lactose e a$iciono(se . t3o in!erti$o ?t3o $e Dr#anA no otro
t3o conten$o a cal$a9
O teste $e VM)V> 6oi tili"a$o 0ara i$enti6icar a !ia .eta3/lica $a
3act4ria9 O in$ica$or !er.el#o $e .etila 6oi a$iciona$o ao .eio a0/s
inc3a;=o5 e. se8i$a a$iciono(se KOD5 acrescento(se ta.34. al6a(na6itol9
No teste $e Citrato o in$ica$or tili"a$o 6oi o a"l $e 3ro.oti.ol on$e5
se a 3act4ria tili"asse o Citrato o .eio 6icaria a"l sen$o o .eio incial.ente
!er$e9 A se.ea$ra 6oi 6eita no .eio co. a al;a atra!4s $e estrias na s0er6'cie
inclina$a9
No .eio SIM 6oi analisa$o a ca0aci$a$e $e 0ro$;=o $e D
*
S on$e ao
rea8ir no .eio 6or.a . 0reci0ita$o ne8roC 0ro$;=o $e in$ol 7an$o 0ositi!o
.ostra!a colora;=o !er.el#a5 sen$o sa cor ori8inal a.arelaC a .otili$a$e 6oi
analisa$a atra!4s $e . .eio s/li$o e a se.ea$ra 6oi reali"a$a atra!4s $a
0er6ra;=o $o .eio5 caso ocorresse tr!a;=o $o .eio a0/s inc3a;=o5 este
in$icaria o cresci.ento $a 3act4ria9
Tes%e de Sensi-i$idade a's An%imicr'-ian's
O .4to$o tili"a$o 6oi o $a $i6s=o9 Reali"o(se .a ss0ens=o
3acteriana $e Staphylococcus aureus e. sol;=o salina5 on$e esta a0resento
.es.a tr!a;=o 7e o t3o +E $a escala $e Mac6arlan$9 A0/s a co.0ara;=o 6oi
inseri$o . s1a3 no t3o enc#arca$o 0ara ss0ens=o 3acteriana9 O s1a3 6oi
es0al#a$o $e 6or.a #o.o8enia 0r/%i.o : c#a.a5 na s0er6'cie $o 8ar9
>osterior.ente co. o a%ilio $e .a 0in;a 6ora. a$iciona$os os $iscos $os
anti3i/ticos 0ressionan$o(os le!e.ente 0ara a 6i%a;=o $os .es.os9 A 0laca 6oi
inc3a$a 0or ,N a *O #oras a .a te.0eratra $e -EKC9 A0/s a inc3a;=o 6oi
.e$i$o o $iG.etro $o alo $e ini3i;=o $a 3act4ria co. o a%ilio $e .a r48a9
Iden%i2ica34' /ac%eriana
8 Pr'&a da Ca%a$ase"
A 0ro!a $a Catalase 6oi reali"a$a e. lG.ina on$e 6oi a$iciona$a .a
colJnia $e 3act4rias 0osterior.ente a$iciono(se $as 8otas $e 0ero%i$o $e
#i$ro8Fnio e o3ser!o(se a 6or.a;=o $e 3ol#as5 si n=o #o!er 0ro$;=o $e
3ol#as a Catalase ser: ne8ati!a5 $o contr:rio 0ositi!a9
8 Pr'&a da C'a)#$ase

A 0ro!a $a Coa8lase 6oi reali"a$a e. t3o5 on$e 6oi a$iciona$o E .l $e
0las.a conten$o EDTA e .a 0or;=o $a colJnia teste5 inc3o(se o t3o 0or O
#oras !eri6ico(se a 6or.a;=o $e coa8lo inclinan$o(o le!e.ente5 .itas !e"es
a0/s ,N #oras o t3o 0o$e 6a"er co. 7e a 6or.a;=o $e coa8lo se $issol!a5
0ara isso 4 coloca$o o t3o ,N #oras no!a.ente 0ara a leitra9
8 Pr'&a da DNAse
A 3act4ria 6oi se.ea$a e. 8ar DNAse5 a se.ea$ra 6oi 6eita e. 6or.a
$e . 3ot=o9 A 0laca 6oi inc3a$a 0or -MKC entre ,N e *O #oras5 a0/s a
inc3a;=o 6oi a$iciona$a ao .eio DCL5 as ce0as 0ro$toras $e DNAse
a0resentara. . alo trans0arente ao re$or $a colJnia co.o o caso $a
Staphylococcus aureus.
( Pr'&a da Fermen%a34' d' (ani%'$

Foi se.ea$o e. 8ar .anitol sal a 3act4ria on$e 0osterior.ente 6oi
inc3a$o a -EKC 0or ,N a *O #oras 0ara o3ser!ar a colora;=o $a colJnia9
Pr'&a da N'&'-i'cina
>re0aro(se .a sol;=o 3acteriana e. sol;=o salina on$e a0resentasse
a .es.a tr!a;=o se8in$o a escala $e MacFarlan$9 Co. a aB$a De . s1a3 a
3act4ria 6oi se.ea$a e. to$a s0er6'cie $a 0laca ni6or.e.ente9 Coloco(se .
$isco $e No!o3iocina na s0er6'cie $o 8ar on$e este 6oi inc3a$o 0or *O #oras
a -EKC5 on$e 0osterior.ente 6oi .e$i$o o #alo $e ini3i;=o9




RESULTADOS E DISCUSS9ES
Tcnica de Gram
As 3act4rias !isali"a$as 0ertencentes ao 8r0o Gra. 0ositi!as 6ora.
Staphylococcus aureus5 S9 saprophyticus e Enterococo. &: as Gra. ne8ati!as
6ora. Klebsiella e E.coli9
Bact4ria Gra. A8r0a.ento
S. aureus T Cac#o
Klebsiella ( Bacilo
E. coli ( Bacilo
Saprophyticus T Coco e Di0lococo
:#adr' 1: Classi6ica;=o $as 3act4rias 0ela t4cnica $e Gra.
C#$%i&' de (icr'r)anism's
A 3act4ria tili"a$a nesse .4to$o 6oi a Salmonella;
:#adr' : Classi6ica;=o $as 3act4rias e .or6olo8ia $e acor$o co. o 8ar9
No 8ar Manitol a Salmonella5 te!e a a0arFncia .eio 3ranca 7ase
trans0arente5 sa coloni"a;=o 6oi 0e7ena5 e on$e 6oi 6eita a estria se. a ter
0e8a$o . 0oco $as otras estrias B: 6eitas esta n=o coloni"o5 0ossi .a
/ac%ria ('r2'$')ia
(icr'sc.<ica
)ar (an; )ar S); )ar (C )ar SS )ar (=
S. aureus Coco Gra.T % %
E. coli Bacilo Gra.( % % % %
Salmonell
a
Bacilo Gra.( % %
Proteus Bacilo Gra. ( % % %
Enterococ
o
Coco Gra.T % %
6or.a cre.osa9 O Manitol 0oss' sa colora;=o inicial !er.el#a5 0or4. 7an$o
a Salmonella 4 clti!a$a o 8ar 0assa $e !er.el#o 0ara a.arelo9
No Meller Dinton5 a Salmonella 0ossi . as0ecto 3ril#ante5 as
3act4rias 6ora. o3ser!a$as e. to$a a 0laca $e 0etri5 0or4. co. 0oco
isola.ento9
No 8ar S9S a Salmonella 0ossi 0oco isola.ento 0ela 0laca $e 0etri5
0ossi .a colora;=o to$a acin"enta$a e o .eio 3ril#ante5 0ossi . as0ecto
.ol#a$o9
No 8ar MacCon2eS #o!e 0oco isola.ento5 te!e .a colora;=o
.arro. e 3ril#ante e 6oi o3ser!a$a a 3act4ria 0or to$a a 0laca $e 0etri9
A%i&idade me%a-.$ica das -ac%rias
( A 3act4ria tili"a$a nesta ala 6oi a Staphylococcus aureus teste OF:
Inicial.ente o .eio era ro%o5 0or4. a0/s a a$i;=o $a 3act4ria S.aureus o
.eio 6ico a.arelo 0ois este5 6oi 0ositi!o 0ara reia9
Tes%e <ara &eri2ica34' da <r'd#34' de )>s e acid' a <ar%ir da 2ermen%a34'
de car-'idra%'s
A 3act4ria 6oi intro$"i$a ao .eio li7i$o5 no t3o 6oi a$iciona$o otro
t3o c#a.a$o t$o $e De#an 0ara $etectar a 0resen;a $e 8:s5 0ore. no t3o
e. 7est=o n=o 0oss'a o t3o $e De#an9 On$e n=o 6oi 0oss'!el !eri6icar se a
3act4ria 0ro$"i 8:s o n=o9 O teste 6oi 0ositi!o 0ara 6er.enta;=o $e 8licose e
lactose5 0ois o .eio inicial.ente era ro%o e 6ico a.arelo9
Tes%e d' 6(?6P
>ri.eira.ente a 0laca a0resento reslta$o ne8ati!o 0ara 6er.enta;=o $e
8licose5 0ore. a0/s a7eci.ento #o!e 6er.enta;=o $a 8licose e o t3o 6ico
!er.el#o9
Tes%e da #%i$i@a34' de Ci%ra%'
A 3act4ria S. aureus a0resento reslta$o ne8ati!o 0ara o Citrato5 0ois o .eio era
!er$e e contino !er$e9 Esta 3act4ria n=o tili"a o Citrato co.o 6onte $e car3ono9
(ei' SI(
Neste .eio a 3act4ria n=o e ./!el5 n=o 0ro$" D
*
S e ne8ati!a .ais in$ol9
Iden%i2ica34' /ac%eriana

Es<cie Ca%a$ase C'a)#$ase?DNAse (ani%'$ N'&'-i'cina
Staphylococcus
aureus T A A SensB&e$
Staphylococcus
epidermidis A 8 8 SensB&e$
Staphylococcus
saprophyticus A 8 A '# 8 Resis%en%e
Tes%e de Sensi-i$idade a's An%imicr'-ian's
A0/s a .e$i;=o $os #alos !eri6ico(se 7e o S. aureus 4 sens'!el 0ara
to$os os ti0os $e anti3i/ticos 7e 6ora. testa$os CRV5 VAN5 AMT5 SUT
Anti3i/tico Cresci.ento Dia.etro $o Dalo ResistFncia
CRV Si. Resistente
VAN N=o P Resistente
AMI N=o ,N N=o Resistente
AM> Si. Resistente
SUT N=o N=o resistente
Ra$ro -: Reslta$os $o teste $e sensi3ili$a$e aos anti.icro3ianos



CONCLUSO
REFERCNCIAS /I/LIOGRFICAS
ANDRADE5 A9 O9C et al9 Is'$amen%' e iden%i2ica34' de Enterococcus s<; em
in2ec3Des end'dEn%icas <rim>rias9 Rio $e &aneiro5 !9 MN5 n9 ,5 09 *+(O5 Ban9)Bn5 *+,,9
BURTON5 G9 R9 @9C ENGELKIRK5 >9 G9C (icr'-i'$')ia" 0ara ciFncias $a SaH$e9 IK
e$9 Rio $e &aneiro: Gana3ara Koo8an5 *++E9
EIFF9 C9C >ETERS9 G9C DEILMANN9 C9 Pa%F')enesis '2 in2ec%i'ns d#e %' c'a)#$ase8
ne)a%i&e s%a<FG$'c'cci9 Lancet5 In6ect Dis *: MII(MNE5 *++*9
MITTELSTAEDT9 S9C CARVALDO5 V9 M9 Escherichia coli en%er'Fem'rr>)ica
HE=ECI O1+0"=0; Re! Inst CiFnc SaH$e9 &l(set5 *O?-A: ,IE(N*5 *++M9
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