UNIVERSIDAD INTERAMERICANA

PARA EL DESARROLLO








FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

CURSO : ANALISIS CLINICO

DOCENTE : Q.F. LEN MEJIA ENRIQUE

TEMA : DETERMINACIN DE COLESTEROL

PRCTICA : N 1 SEGUNDA UNIDAD

CICLO : VII FECHA DE ENTREGA: 05/06/14

ALUMNOS :
TOLEDO MEDINA FRANKLIN S.
RAMIREZ ZURITA, DELFIN.
PEREYRA MELGAREJO, JACKY.
CORDOVA CHAVEZ, EDMUNDO.
OSCO JUICA, LUIS.
ROS CONTRERAS, SERGIO.
QUISPE HILARIO, MIZRAIM.

LIMA PER
2014
UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico









INTRODUCCIN

El presente informe tiene como fin dar a conocer sobre la determinacin del nivel
de colesterol total en sangre, que es muy importante, ya que es un marcador
biolgico para algunas enfermedades cardiovasculares; la deteccin oportuna de
los niveles altos de colesterol permite un inicio temprano de tratamiento, y en
algunos casos, se puede prevenir la aparicin de enfermedades
cardiovasculares.









UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico




PRACTICA DE ANALISIS CLINICO: DETERMINACION DE
COLESTEROL
I. MARCO TEORICO
Las lipoprotenas plasmticas transportan esencialmente todo el colesterol y
lpidos esterificados de la sangre. Las cuatro clases principales de lipoprotenas
son: VLDL (quilomicrones), LDL, HDL y algunas protenas menos importantes
cuantitativamente. Pueden identificarse basndose en el tamao de las
partculas, caractersticas fisicoqumicas, de flotacin y de movilidad
electrofortica.
La parte proteica de las lipoprotenas estn compuestas por varias protenas
especficas denominadas apolipoprotenas. Cada lipoprotena tiene una
composicin de apolipoproteca particular y relativamente constante.
El colesterol es un componente esencial de las membranas celulares y
lipoprotenas y es un precursor de la sntesis de hormonas esteroideas y cidos
biliares. El 25-40% del colesterol en el plasma est presente en forma libre no
esterificado, el 60-75% restante est esterificado con cidos grasos no
saturados.
El colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formacin de ateromas
dado que las complicaciones arteriosclerticas prevalecen en individuos
hipercolesterolmicos. La ateroesclerosis es una enfermedad silente hasta que
alcanza estados avanzados cuando ocurren las primeras manifestaciones
clnicas. El reconocimiento de esta condicin se basa en identificar los factores
de riesgo.
Valores de referencia: los siguientes valores discriminantes universales han sido
establecidos por el US Nacional Cholesterol Education Program, aceptados en otros
pases para la evaluacin del riesgo de enfermedad de las arterias coronarias.





UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico




II. OBJETIVOS
Determinacin de los niveles de colesterol en sangre, aplicando los pasos
correspondientes y tcnicas establecidas, para dicho anlisis clnico.
Determinar los clculos correspondientes e Interpretar los resultados,
tomando como referencia los niveles normales del marco terico.
III. MATERIALES Y REACTIVOS
Algodn, alcohol, ligadura y
aguja.
Tubos de ensayo (limpios y
secos).
Gradilla.
Alumno en estado basal.
1 micropipeta de 1000 ul.
1 micropipeta de 10 ul.
Centrifugadora.
Espectrofotmetro.
Reactivos Enzimticos:
o Colesterol Oxidasa.
o Colesterol Ester Hidrolasa.
o Peroxidasa.
IV. PARTE EXPERIMENTAL
a) Se proceder a la toma de muestra del paciente (alumno).
b) Se tomara la sangre venosa en tubo de ensayo, luego se llevara a
centrifugar por 10 minutos a 1000 RPM. Se obtendr la MP (suero
sanguneo)
c) Se tomaran 3 tubos de ensayo, previamente rotulados: Tubo N1 (Blanco),
Tubo N2 (Standard) y Tubo N3 (MP).
d) Agregar los siguientes reactivos y suero para cada tubo de ensayo. Ver
siguiente cuadro.




e) Luego de haber ledo la absorbancia en el espectrofotmetro de los 3
tubos, ahora se debe proceder a realizar los clculos correspondientes.
Aplicando la siguiente formula.
Procedimiento
Tubo N1
(Blanco)
Tubo N 2
(Standard)
Tubo N 3
(MP)
Rvo. Enzimtico 1000uL 1000uL 1000uL
Sol. Standard - 1000uL -
Suero S. - - 10uL
Mezclar, incubar a T ambiente x 10'. Leer en el
espectrofotmetro a 505 nm.
UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico








V. RESULTADOS
Clculos obtenidos.







Algunas fotos de referencia.

















Interpretando los
resultados, podemos
afirmar que la
concentracin de colesterol
en sangre se encuentra
dentro de los valores
normal.
UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico




VI. CUESTIONARIO
6.1 Cmo se explica las reacciones que ocurren en la determinacin de
colesterol total, por el mtodo enzimtico?
En estos mtodos (Allain, 1974) se determina el colesterol total directamente
en plasma o en suero en una serie de reacciones, en las cuales se hidrolizan
los steres de colesterol; en el grupo 3-OH del colesterol es oxidado, y el
agua oxigenada, que es uno de los productos de la reaccin, se determina
enzimticamente.











6.2 Qu precauciones se debe tener con respecto a los reactivos que
intervienen en esta prueba enzimtica?
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
El Reactivo B (fenol) es txico e irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. R25:
txico por ingestin. S24/25: evtese el contacto con los ojos y la piel. S37/39:
usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el
laboratorio de anlisis clnicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la
normativa local vigente.


UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico




6.3 Qu lipoprotena transporta el colesterol?
Las lipoprotenas de alta densidad HDL son aquellas lipoprotenas que
transportan el colesterol desde los tejidos del cuerpo hasta el hgado. HDL
son las lipoprotenas ms pequeas y ms densas, estn compuestas de una
alta proporcin de protenas. El hgado sintetiza estas lipoprotenas como
protenas vacas y, tras recoger el colesterol, incrementan su tamao al
circular a travs del torrente sanguneo.

6.4 Por qu es importante la determinacin de colesterol en una persona
de edad avanzada?
Porque las concentraciones elevadas de colesterol LDL se asocian con un
riesgo progresivamente creciente de ateroesclerosis y enfermedad de las
arterias coronarias. Esto puede desencadenar riego cardiovascular, en
adultos mayores y personas obesas.

















UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioqumica
Curso: Anlisis Clnico




VII. CONCLUSIONES
Es importante la determinacin de colesterol, ya que as podemos descartar
la ateroesclerosis u otra enfermedad que pueda estar relacionado a la
hipercolesterolemia.

En todos los pacientes con un colesterol superior a 200mg/dL,
independientemente de su riesgo coronario, debe intentarse la modificacin
de los hbitos dietticos y la prctica de ejercicios fsicos.

El tratamiento farmacolgico de la hipercolesterolemia est basado en tres
tipos de frmacos distintos: las estatinas, los fibratos y las resinas de
intercambio catinico. Existe, adems, otro frmaco, el ezetimibe, que
funciona inhibiendo la absorcin del colesterol a nivel intestinal.

Los niveles sricos de colesterol bajos, se pueden presentar por deficiencia
de alfa-lipoprotena (enfermedad de Tangier), hipo y a-lipoproteinemias,
desnutricin, necrosis hepatocelular, anemias megaloblsticas y
sideroblsticas, hipertiroidismo, malabsorcin, malnutricin, talasemias.

Los resultados se deben contrastar no solo con una prueba o con una vez,
sino tambin que se debe volver a repetir para descartar falsos positivos.

VIII. BIBLIOGRAFIA
Bernard, H., El laboratorio en el diagnstico clnico, Editorial: Marbn,
primera edicin, S/A, NPag. 1416.

Aldo A. Guerci, Laboratorio: mtodos de anlisis clnicos y su
interpretacin, Editorial el Ateneo, 1988 pagina, 2010-2013.

http://www.infobioquimica.com/wrapper/CDInterpretacion/te/bc/140.htm

Wiener Lab. (Articulo) Mtodo enzimtico para la determinacin de
colesterol en suero o plasma, Ao 2000, Rosario Argentina.