Gentica Molecular - 2014

Questes relacionadas a aula prtica 2 e 3

1- Qual o papel de cada uma das solues utilizadas na tcnica de
extrao de !"#
O sal fornece ons positivos soluo, neutralizando a carga negativa da
molcula de DNA. O detergente emulsificante, querando as estruturas
compostas por lipdios, lierando os conte!dos celulares na soluo. "omo o
DNA insol!vel em #lcool, a sua mistura promove a precipitao das
molculas de DNA.
2- esta$ue os pontos importantes do protocolo da extrao%
$ise da clula, com a lierao de material gentico e protenas, promovido
pela macerao e pelo acrscimo do detergente. O sal vai fornecer ons para o
material, interagindo com a carga eltrica negativa das molculas de DNA.
%egurar o tuo por &' minutos promove o aquecimento da soluo a () *".
%eparao das molculas de DNA do restante da soluo, ou se+a, precipitao
do DNA, devido adio de #lcool a ai,as temperaturas.
3- &xpli$ue a tcnica de '() com detal*es tentando associar com a
replicao do !"
&- .m uma soluo coloca/se uma fonte de DNA, primers,
oligonucleotdeos, deo,inucleotdeos trifosfato, c#tions divalentes 01g23-,
tampo para manuteno do p4 e DNA polimerase tolerante ao calor.
5- 6ealiza/se o aquecimento, promovendo a desnaturao da template
0amostra de DNA-, para separao das fitas. Agora temos molculas
unifilamentares de DNA em soluo.
(- Os primers vo se ligar regio complementar na fita de DNA e a DNA
polimerase vai replicar estas fitas unifilamentares. Ou se+a, ocorre o
pareamento dos iniciadores sequ7ncia alvo de fita !nica.
8- A DNA polimerase comea a alongar a cadeia atravs da adio de
nucleotdeos. As novas c9pias do DNA ficam prontas e o processo repetido.
:- Aquecimento para arir as cadeias de DNA, permitindo a ligao dos
primers.