Mitocondria

Definiie
Structur, ultrastructur
Funciile mitocondriei
Mitocondria este:
un organit celular
delimitat de un sistem de dou membrane
avnd ca funcie de baz producerea de ATP.

Carl Benda (1903) - mitos: fir, a; khondrion: granul.
Front. Physiol., 15 June 2010 | doi: 10.3389/fphys.2010.00007
Richard Altmann
Die elementar-
organismen und ihre
beziehungen zu den
zellen, 1890
Microscopia optic:
Hematoxilin feric Regaud
granule negre
Verde Janus B colorant
vital
Microscopie de fluorescen
Mitocondrii marcate cu
MitoTracker Green
Ultrastructura mitocondriei
Spaiu
intermembranar
Matrice
Membran
mitocondrial
extern i
intern
Criste
Ultrastructura mitocondriei
Organite mobile prezente sub forma unor reele
tridimensionale dinamice.
Relaia dinamic morfologie-funcie
Volumul compartimentului mitocondrial este reglat pentru a
corespunde nevoilor energetice ale celulei. Mitocondriile au
capacitatea de fisiune / fuziune;
Mitocondriile se pot deplasa activ n interiorul celulei ->
distribuie / localizare controlate;
Mitofagie: proces controlat de autofagie -> ndeprtarea
mitocondriilor nefuncionale
Mitocondriile se asociaz cu RE -> domenii specializate:
MAM (mitochondria-associated membranes)
N Engl J Med 369:23, 2013
N Engl J Med 369:23, 2013
Fuziunea mitocondrial
Intervin mitofuzine (MME)
i OPA1 (MMI);
Influeneaz producerea
ATP
N Engl J Med 369:23, 2013
Fisiunea mitocondrial
Mecanisme de reglare
complexe;
Se poate coordona cu
mitoza;
Intervin proteine ale MME ->
activarea DRP1 (dynamin-
related protein 1)
Distribuie:
Numr i form foarte
variabile n aceeai celul,
datorit plasticitii
Volum relativ:
5 - uzual
20 - hepatocite
30 - miocardocite
O mitocondrie marcat fluorescent
(sgeat) se deplaseaz ntr-o celul
vie pe o distan de 6,6 mm n 33 sec.
(B Trinczek et al., J Cell Sci 112:2355, 1999)
Localizare intracelular:
Mitocondrii n
procesul de
autofagocitoz
(mitofagie)
The Journal of Biological Chemistry, 2011, 286:19630.
MAM:
-Apoziii mitocondrii - RE
-Traficul Ca
2+


Nature Reviews Molecular Cell Biology 2012; doi:10.1038/nrm3412
Mitocondrii cu criste tubulare
Metodologia studierii mitocondriei
Funciile mitocondriei
Postulatele teoriei chemiosmotoice (P. Mitchell, 1961)
Premiul Nobel n chimie, 1978
1 Lanul respirator este transportor de protoni
2 ATP sintaza produce ATP prin disiparea gradientului
protonic
Funciile mitocondriei
Postulatele teoriei chemiosmotice (P. Mitchell, 1961)
3 Membrana mitocondrial intern conine
transportorii ce asigur traficul metaboliilor
4 Pe ci nespecifice, membrana mitocondrial intern
este practic impermeabil la protoni i, n general, la
ioni
Teoria chemiosmotic
fosfat
anorganic
legturi fosfoanhidrice
Energie Energie
Riboz
Riboz
Adenin
Adenin
Sinteza ATP Hidroliz ATP
Spaiu intermembranar
De unde provine energia necesar
funcionrii ATP-sintazei ?
ATP sintaza (F
0
F
1
ATP-aza)
- 500 kD
- Structur de b de tob (trunchi,
gt i cap)
- Cel puin 9 proteine (2 autonome)
- Partea transmembranar (F0): canal
protonic
- Gtul i capul (3a + 3b + 1g +
+ 1d + 1e): ATP sintaza
-Funcionarea presupune rotirea
subunitii F1 ce cuprinde 3 situsuri
catalitice
- Fiecare din situsurile catalitice trece prin
trei conformaii succesive: deschis, lax,
strns
F0 ATPaza
H Noji et al., Nature 386:299, 1997
Componentele potenialului
membranei mitocondriale interne ()
Cum este realizat gradientul protonic?
Lanul transportor de electroni (respirator)
Lanul transportor de electroni (respirator)
I. Complexul NADH
dehidrogenazei
- 800 kD
- 22 proteine
(7 autonome)
- 1 centru flavinic
- Cel putin 5 centre
fier-sulf
- Preia e
-
de la NADH
i i transfer
ubiquinonei (CoQ)
III. Complexul
citocromilor b-c
1
- 500 kD
- Cel puin 8 proteine
(una autonom)
- Funcioneaz ca dimer (2x500 kD)
- 3 centre hemice; 1 centru fier-sulf
- Transfer e
-
de la CoQ la citocrom c
IV. Complexul citocrom oxidazei
(citocromilor a-a
3
)
- 300 kD
- 9 proteine (3 autonome)
- Funcioneaz ca dimer (2x300 kD)
- 2 citocromi, 2 centre cu Cu
2+
- Transfer e
-
de la citocrom c la oxigen,
cu producerea de ap
Metan
Metanol
Formaldehid
Acid formic
Dioxid de carbon
De unde provine
energia necesar
meninerii
gradientului de
protoni ?
A
d
a
p
t
a
r
e

d
u
p

M
o
l
e
c
u
l
a
r

B
i
o
l
o
g
y

o
f

t
h
e

C
e
l
l

4
t
h

E
d
.
,

B
r
u
c
e

A
l
b
e
r
t
s
,

G
a
r
l
a
n
d

S
c
i
e
n
c
e
,

2
0
0
2

O
X
I
D
A
R
E
ARDERE OXIDARE BIOLOGIC
Eliberare
exploziv
a energiei

Eliberare
treptat a
energiei
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
E
n
e
r
g
i
a

l
i
b
e
r

(
k
c
a
l
/
m
o
l
)

Direcia fluxului de electroni
P
o
t
e
n

i
a
l
u
l

r
e
d
o
x


(
m
V
)

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
ubiquinon
Citocromul c
dehidrogenaz

Complexul
b-c1
citocrom
oxidaz

Molecule transportoare de electroni
Nicotinamid
Adenin
Dinucleotid
(Phosphate)
Fosfat lips din
NAD
forma oxidat forma redus
nicotinamid
Riboz Riboz
Riboz Riboz
Adenin Adenin
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed.,
Bruce Alberts, Garland Science, 2002
Flavoproteine: FAD, FMN
Molecule transportoare de electroni
forma oxidat forma redus
Citocromi
Ubiquinona
Cuplarea lanului respirator de
fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;
De unde provin
electronii de
nalt energie ai
NADH + H
+
i
FADH
2
?
Ciclul Krebs
Cine furnizeaz combustibilul ciclului Krebs?
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
Decarboxilarea piruvatului
Complexul piruvat-dehidrogenaz
- localizat n matricea mitocondrial
- 24 subuniti E
1
, 24 E
2
i 12 E
3

-

legtura dinte glicoliza anaerob
i fosforilarea oxidativ

Glicoliza
anaerob
-se desfoar n citosol
- profit net: 2 mol. ATP
- rezult 2 mol. piruvat

b oxidarea acizilor grai
- se desfoar n matricea mitocondrial
- acizii grai intr sub form de Acil-CoA
- rezult Acetil-CoA

Decuplarea lanului respirator de
fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;
mpiedicarea acestei cooperri conduce la
disiparea sub form de caldur a energiei
acumulate n gradientul protonic;
Decuplantul fiziologic, termogenina,
asigur protecia termic a organismelor.
Funciile mitocondriei
A. Funciile membranei mitocondriale externe
1. Permeabilitate controlat (porine)
2. Acil-CoA sintaza
3. Carnitin-aciltransferaza I
4. Inactivarea aminelor biogene
(monoaminoxidaza)
Utilizarea acizilor grai
n ciclul Krebs
Funciile mitocondriei
B. Funciile compartimentului intermembranar
1. Compartiment tampon (microclimat adecvat
funcionrii mitocondriei)
2. Adenilat kinaza (ATP + AMP = 2ADP)
3. Nucleozid difosfokinaze
Funciile mitocondriei
C. Funciile matricei mitocondriale
1. Ciclul acidului citric (ciclul acizilor tricarboxilici,
ciclul Krebs)
2. b-oxidarea acizilor grai
3. Biosinteza proteinelor
4. Replicarea i transcrierea ADN mitocondrial
Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne
1. Transportul de metabolii
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne

2. Lanul transportor de electroni (lanul respirator)
3. Producerea de ATP
4. Cooperarea dintre lanul respirator i ATP sintaz
Originea mitocondriei
Teoria endosimbiotic;
Argumente:
Prezena cardiolipinei n
membrana intern;
Prezena porinelor n
membrana extern;
ADN propriu, circular;
Ribozomi 70S, sintez
proteic sensibil la
cloramfenicol, insensibil la
cicloheximid;
Capacitate proprie de a se
divide.
Importul proteinelor n mitocondrie
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
Mecanismul importului
Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4
th
Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002
Mitocondria i apoptoza
B Desagher S et al., Trends Cell Biol 10:369, 2000
Rezumat
Mitocondria este un organit deosebit, structurat pe baza unui
sistem dublu de membrane;
Cele patru componente ultrastructurale coopereaz la asigu-
rarea funciei sale eseniale: producerea de ATP;
Aceast cooperare este sintetizat prin postulatele teoriei che-
miosmotice;
Funcia respiratorie este asigurat de cele trei complexe enzi-
matice ale lanului transportor de e
-
, plus CoQ i citocrom c;
Alimentarea cu e
-
a lanului respirator o face ciclul Krebs prin
NADH i FADH
2
;
Disiparea gradientului protonic realizat de lanul respirator asi-
gur energia pentru producerea de ATP;
Cuplarea/decuplarea lanului respirator cu fosforilarea reprezin-
t mecanismul de comutare: ATP/cldur;
Biogeneza mitocondrial nu presupune producerea de novo a
organitului.