Professional Documents
Culture Documents
Bagaimana suatu sel mengetahui ketika telah tumbuh cukup besar seperti yang seharusnya
lalu membagi dan menghasilkan sel-sel progeni? Bahkan E. Coli, yang paling dikenal dari
semua organisme seluler, kita masih tidak tahu mekanisme molekulernya di mana sel-sel
"mengukur" massa sel dan memulai pembelahan sel pada waktu yang tepat. Kita tahu bahwa
permulaan putaran replikasi kromosom sangat tepat dikontrol terlepas dari kondisi
pertumbuhan. Selain itu, banyak dari makromolekul yang terlibat dalam inisiasi replikasi
kromosom yang telah diidentifikasi dalam E.coli. Namun demikian, meskipun beberapa
model telah diajukan untuk menjelaskan bagaimana sel mempertahankan rasio yang tepat
dari asal aktif replikasi untuk massa sel, rincian mekanisme kontrol ini tepat dari pembelahan
sel tetap tidak diketahui.
Pada sel eukariotik, kontrol pembelahan sel lebih kompleks daripada prokariota karena tidak
hanya kromosom berduplikasi duplikasi dan sitokinesis harus diatur, tetapi, di samping itu,
komponen mitosis harus membentuk fungsi pada waktu yang tepat dalam siklus sel. Dalam
ragi Saccharomyces cerevisae, proses pembelahan sel sebagian telah yang membelah dengan
mengisolasi dan mempelajari mutan sensitif pada temperatur dalam berbagai tahap siklus sel.
Gen-gen mutan yang dinamakan cdc dapat mnyebabkan kerusakan pada siklus pembelahan
sel. Dengan menentukan tahap-tahap dalam siklus sel di mana berbagai cdc mutan yang
diblokir, ahli genetika mulai menentukan urutan peristiwa yang terjadi selama pertumbuhan
sel dan pembelahan. Jika produk gen cdc dapat diidentifikasi dan fungsi mereka ditentukan,
akhirnya ada kemungkinan untuk menentukan proses yang terjadi selama siklus sel dalam
molekul. Meskipun masih banyak yang harus dipelajari sebelum kita memahami kontrol
pembelahan sel pada tingkat molekular, beberapa komponen kunci dari sirkuit peraturan
penting telah diidentifikasi.
dari siklus sel. Poin kedua adalah melanjutkan melalui kondensasi kromosom dan peristiwa
pemisahan kromatid mitosis; ini terjadi pada awal fase M dari siklus sel. Bukti terbaru
mengindikasikan bahwa regulasi tertentu protein fungsional sebagai sinyal di kedua poin
diatas.
Faktor yang menyebabkan mitosis (MPF) pertama kali ditemukan pada Xenopus. Ketika
disuntikkan ke dalam oosit MPF Xenopus, itu simulasi oosit untuk memasuki fase M. MPF
mengandung setidaknya dua komponen penting: (1) protein yang disebut siklin yang
mengalami siklus sintesis dan akumulasi selama G1 dan G2 dan degragrasi selama fase M
(dan mungkin juga setelah itu dimulai) dan (2) awal dan M fase spesifik yang disebut protein
kinase pp34 (pp untuk phosphoprotein, sebuah protein yang mungkin memiliki kelompok
fosfat pada rantai samping asam amino tertentu, dan 34 untuk berat molekul 34.000), yang
merupakan produk dari gen 2 cdc dari S.pombe dan gen CDC28 dari S.cerevisiae. Bukti
terbaru mengindikasikan bahwa pp34 adalah terlibat dalam kedua peristiwa komitmen. Selain
itu, hasil menunjukkan bahwa fosforilasi/fosforilasi dari residu tirosin tunggal (Tyr 15-asam
amino 15 dari terminal NH2) secara langsung dapat mengatur baik inisiasi replikasi DNA dan
awal fase M ketika pp34 berinteraksi dengan siklin yang sesuai, satu kelas, M-siklin, terlibat
dalam M-fase dan kelas kedua, G1 siklin, terlibat dalam keputusan mulai pembelahan.
Meskipun komponen tambahan tidak diragukan lagi terlibat dalam mengatur siklus sel pada
eukariota, siklin dan protein kinase pp34 merupakan komponen kunci, dan protein homolog
telah diidentifikasi pada eukariota, termasuk manusia, katak, landak laut, dan bintang laut.
genom normal hewan, termasuk manusia. Protoonkogen seluler normal dapat dikonversi ke
dalam tumor-onkogen menyebabkan sel mengalami mutasi atau menjadi terkait melalui
proses rekombinasi. Pengamatan menunjukkan bahwa fungsi sel normal dari protoonkogen
melibatkan aspek-aspek tertentu dari kontrol pembelahan sel.
gen yang aktif akan menunjukkan produk encode yang berfungsi sebagai regulator positif
dari pembelahan sel.
Jadi kesimpulannya, produk-produk onkogen adalah protein sederhana yang memainkan
peran utama dalam stimulasi pembelahan sel dalam satu atau banyak tipe sel. Pada beberapa
kasus, produk onkogen mungkin berubah atau protein mutan yang memicu pembelahan selsel yang pada normalnya tidak membelah dibawah kondisi hidup. Pada kasus lain, produk
enkogen menstimulasi pembelahan sel yang abnormal dengan cara overproduksi- dengan
mensintesis jumlah yang sangat banyak dari jumlah sel normal.
genom dan tergambarkan, mereka ditemukan menjadi gen sel normal dengan struktur yang
membedakan mereka dari onkogen viral homolog. Gen sel normal ini dengan homologi pada
onkogen sekarang disebut protoonkogen. Dalam beberapa kasus, protoonkogen ini dapat
bermutasi menjadi bentuk yang mampu menginduksi onkogenesis- kemampuan untuk
mengubah bentuk sel menjadi neoplastik atau keadaan seperti kanker (lihat bagian di bawah
ini). Bentuknya kemudian, mereka disebut onkogen seluler (disingkat c-onc, contoh: c-src, csis, c-myc) untuk membedakan mereka dari rekan viral-nya. Ini berarti bahwa kita sekarang
menyebut viral oncogenes lebih tepatnya adalah v-oncs, sebagai contoh, v-src, v-sis, dan vmyc.
Menariknya, beberapa onkogen seluler yang sama diidentifikasi oleh cross-hybridization
(hibridisasi silang) untuk rangkaian onkogen viral juga telah teridentifikasi atas dasar
kemapuannya untuk mengubah bentuk sel yang tumbuh dalam kultur menjadi neoplasti atau
kondisi tumor dalam study langsung transfer DNA yang disebut eksperimen transfeksi.
Ketika mereka mengisolasi onkogen seluler dibandingkan dengan onkogen retrovirus dengan
beragam prosedur (contoh: hibridisasi DNA, restriksi, analisis enzim, sekuen DNA), banyak
dari mereka ditemukan homolog pada 1 dari onkogen retrovirus. Contohnya, c-H-ras
onkogen diidentifikasi dengan eksperimen transfeksi dalam DNA dari sel karsinoma kandung
kemih manusia mematikan untuk menjadi homolog dengan v-H-ras onkogen virus sarcoma
Harvey.
kinase sel lain (seperti protein kinase C) dan untuk interaksi dengan protein faktor lainnya
mengatur aktivitas itu. Demikian, secuah gambar akurat tindakan dari kunci pengaturan
protein dalam sinyal transduksi harus menunggu hasil penelitian lebih lanjut. Ketika tersedia,
gambar ini tentu akan bergantung pada pengertian dari struktur dimensional dan fungsi dari
molekul reseptor ditambah semua makromolekul lain yang saling berinteraksi.
c-src protein dan produk beberapa protogen yang berkaitan juga mempunyai kegiatan protein
kinase khusus tirosin. Meskipun demikian, protein kinase ini bukanlah protein transmembran,
tetapi cukup diasosiasi dengan permukaan sitoplasma dari membran plasma. Barangkali,
protein kinase ini juga terlibat dalam tranduksi sinyal, tetapi kita tidak tahu apakah sinyalsinyal yang mereka respon atau bagaimana sinyal ini ditransmisikan. Sebagai sebuah model
kerja, hal itu kelihatan beralasan untuk mengasumsikan bahwa fosforilasi dari kunci protein
target intraseluler adalah cara yang paling mungkin dari aksi produk protoonkogen ini.
Jelasnya, mekanisme aksi dari c-ras produk gen dan produk protoonkogen yang berfungsi
sebagai aktivator transkripsi adalah jelas secara total dari produk protoonkogen baru
didiskusikan. Informasi yang tersedia tentang aksi dari c-ras, c-fos, dan c-gun produk gen
dibahas pada dua bagian selanjutnya pada bab ini.
dari semua vertebrata mengandung tiga bagian yang berbeda, tetapi terkait erat dengan
protooncegenes ras. Keduanya yaitu, c-H-Ras dan c-K-ras, yang erat terkait dengan v-ras
onkogen dari harvey dan strain Kirsten. Ketiganya, ditunjukkan oleh N-ras, yang belum
memiliki gen homolog dalam setiap genom retroviralnya. Ketiga ras protooncegenes selular
dikenal untuk mengkodekan GTP-binding protein dengan aktivitas GTPase. Sayangnya,
fungsi dari protein ras masih belum diketahui dengan jelas.
.
Translokasi Breakpoints pada Lokus Protoonkogen
Selama bertahun-tahun, sitogenetik telah mendokumentasikan adanya korelasi antara
beberapa jenis kanker dan perubahan tertentu khususnya dalam struktur kromosom,
translokasi (kerusakan dan transfer sebagian kromosom untuk kromosom nonhomolog dan
penghapusan atau deficifiencies (yang kerusakan atau hilangnya bagian kromosom,
melibatkan kromosom spesifik, dan yang lebih penting, sering terjadi breakpoints di posisi
yang sama pada kromosom ini, yang berkali-kali diamati pada jenis tertentu dari sel kanker.
contoh paling terkenal dari hal ini adalah yang disebut "Philadelphia" kromosom, kromosom
altred 22 yang telah kehilangan segmen besar dari lengan panjang. kromosom abnormal ini
telah ditemukan dalam studi varios hingga 90% dari pasien yang menderita jenis kanker
tertentu yang disebut leukimia myelogenous kronis.
urutan ALV LTR pada ujung 5 ', menunjukkan bahwa transkripsi dimulai dari promotor LTR
provirus (ara 17.10). tesis hasil sangat menyarankan bahwa limfoma dihasilkan dari berlebih
dari c-myc yang disebabkan oleh integrasi LTRs provirus dengan mereka yang kuat /
penambah promotor berdekatan dengan c-mcy.
Banyak contoh-contoh serupa aktivasi protooncogenes oleh theinsertion provirus baik utuh
atau hanya LTRs provial kini telah dijelaskan. Contoh-contoh awal yang didefinisikan secara
rinci oleh analisis molekuler yang terlibat dalam protoogenes c-myc, c-MYB, dan c-MyBB.
Menariknya, activition dapat terjadi dengan integrasi provirus di kedua sisi intron
protoonkogen atau winthin dari protoonkogen tersebut. Suggedt ini hasil bahwa elemen
penambah hadir dalam LTRs provirus sering bertanggung jawab untuk aktivasi transkripsi
diamati..
Terlepas dari bagaimana onkogen diinduksi kanker, itu bagaimana tampak jelas bahwa
onkogen retrovirus telah berevolusi dari protooncogenes seluler normal. awalnya, ia berpikir
bahwa homolognya seluler onkogen virus mungkin peninggalan provirus retroviral
terintegrasi. Namun, ini jelas tidak terjadi. Perbandingan urutan nukleotida dari onkogen
virus yang homolog dengan protooncogenes selular telah menunjukkan bahwa gen ini
berbagi wilayah utama dari identitas urutan. Perbedaan utama adalah bahwa protooncogenes
selular mengandung intron, sedangkan onkogen virus ekson tunggal. Hal ini tidak konsisten
dengan ide protooncogenes thatcellular telah berevolusi dari v-onkogen pada provirus
terintegrasi. sebaliknya, sangat menyarankan bahwa v-onkogen berasal dari protooncogenes
selular leluhur. Perbedaan ini diharapkan jika v-onkogen berevolusi dari protooncogenes
seluler. Retroviral genom RNA, andthe urutan intron dari transkrip RNA protooncogenes
harus keluar disambung selama pemrosesan RNA. Semua yang perlu terjadi adalah bagi
salinan mRNA dari protooncogeneto akan diligasi ke genom RNA retrovirus dengan
mekanisme rekombinasi yang melindungi daerah LTR dari genom virus. Reverse
transcriptase virus maka akan mengkonversi mRNA-virus hibrida RNA menjadi DNA
homolog untuk integrasi ke dalam genom inang. Apa yang bisa menjadi nilai yang lebih
besar untuk virus daripada memiliki gen baru yang merangsang pertumbuhan meningkat dari
host, sementara genom terintegrasi pergi sepanjang untuk perjalanan?
Contoh yang terbaik yang diketahui dari penyebab penambahan gen yang meliputi toleransi
dari pertumbuhan sel hewan pada kultur terhadap racun methotrexate. Methotrexate
menghambat enzim dehidrofolate reduktase yang merupakan sebuah enzim pengakatalisis
sebuah tahapan penting di dalam sintesis TMP. Mothotrexate terikat pada sisi aktif dari
dehidrofolate reduktase dan mencegahnya untuk berikatan dengan substrat yang normal. Jika
sebuah pemilihan untuk sel-sel dengan toleransi yang meningkatkan konsentrasi methotrexate
secara bertahap beberapa sel akan menjadi toleran melalui penambahan gen yang mengkode
dehidrofolate reduktase.Sel-sel yang toleran terhadap methotrexate mengandung banyak
salinan dari gen tersebut dan mensintesis lebih banyak dehidrofolate reduktase daripada selsel yang normal. Hasilnya, mereka dapat mentoleransi methotrexate pada level yang lebih
tinggi tanpa terbunuh. Beberapa molekul enzim akan mengikat methotrexate dan dihambat,
tetapi dengan beberapa enzim, molekul enzim yang cukup bebas akan tetap ada untuk
membiarkan sel tetap hidup dan tumbuh.
Salinan dari gen reduktase dihydrofolate dalam jalur sel metotreksat-tolerant yang hadir baik
(1) pada kromosom sangat kecil tambahan yang disebut "double minutes" atau DMS atau
sebagai tandem diulang dalam apa yang disebut " bomogeneously staining regions " atau
HSRs dari dinyatakan kromosom yang normal dalam genom. Double minutes adalah
kromosom cadangan yang mengandung gen tambahan dan berdekatan pada molekul siruler
extra kromosomal dari DNA . Mereka mengandung molekul siruler extra kromosomal dari
DNA yang dikemas dalam nukleosom dan benang kromatin seperti kromosom yang normal.
Kromosom ini kecil terlihat seperti dua titik kecil di kromosom yang menyebar (sehingga
namanya " double minutes "). Molekul-molekul DNA sirkular dalam kromosom DM
terutama dalam keadaan postreplication dengan dua lingkaran DNA masih melekat satu sama
lain, ini menjelaskan struktur bipartit mereka. Molekul-molekul DNA pada kromosom DM
berkisar pada ukuran 50- kilobase (kb) sampai beberapa ratus kb. Unit kromosom yang
mengalami proses amplifikasi sering disebut sebagai sebuah amplikon. Dalam semua kasus
yang dipelajari saat ini, ukuran amplikon telah lebih besar daripada gen yang mengkode
enzim target dari obat yang digunakan dalam proses seleksi. Unit amplikon yang sama yang
hadir dalam DMS sering hadir sebagai unit pengulangan tandem dalam wilayah HSR dari
kromosom yang mengandung gen tambahan.
Saat ini ada bukti cukup yang menunjukkan bahwa amplifikasi protooncogen sellular dapat
terlibat langsung dalam proses onkogenesis pada tipe kanker tertentu pada manusia. Dalam
beberapa kasus, protooncogen ada pada kromosom DM, dalam kasus yang lain,
protoonkogen diperkuat adalah bagian dari amplikon tandem dalam HSR dari suatu
kromosom. Dalam beberapa kasus, sel kanker mengandung DMS dan HSRs. Secara khusus,
c-myc diperkuat dengan frekuensi yang sangat tinggi dalam karsinoma sel kecil paru-paru
dan dengan frekuensi yang lebih rendah dalam beberapa jenis kanker lainnya. Dalam studi
awal, Alitalo dan koleganya menggunakan hibridisasi in situ dan autoradiografi untuk
menunjukkan adanya salinan multtiple c-myc dalam HSR pada kromosom X yang abnormal
pada sel ganas dari pasien dengan karsinoma usus besar. Sel dari pasien ini juga mengandung
kromosom DM. Dan ini mungkin membawa salinan DMS diperkuat c-myc juga. Namun,
sensitivitas autoradiografi itu tidak cukup untuk menetapkan dengan pasti bahwa kromosom
DM membawa salinan c-myc. Banyak penelitian lain telah menghasilkan hasil yang sama
dan menunjukkan amplifikasi c-myc dalam beberapa jenis sel kanker manusia, khususnya
karsinoma paru-paru. Selain itu, dua gen seluler yang terkait erat dengan c-myc, yaitu L-myc
dan N-myc, sering ditemukan diperkuat dalam karsinoma paru-paru dan neuroblastomas,
masing-masing. Akhirnya, c-ErbB sering hadir di negara diperkuat dengan karsinoma sel
skuamosa dan glioblastomas.
Efek dari amplifikasi hasil protooncogen selular dari kelebihan produksi produk
protooncogen. Amplifikasi peristiwa itu mungkin tidak terlibat dalam inisiasi onkogenesis,
tetapi dapat memberikan kontribusi pada langkah selanjutnya dalam jalur onkogenik. Namun,
kita harus tahu bahwa tidak ada bukti kuat menunjukkan bahwa amplifikasi protoonkogen
setiap memainkan peran penyebab dalam onkogenesis. Peristiwa amplifikasi bisa tidak lebih
dari efek sekunder dari langkah-langkah lain di jalur onkogenik. Bukti lebih lanjut akan
diperlukan sebelum peran diduga dari amplifikasi protoonkogen di onkogenesis dapat
dievaluasi. Namun demikian, amplifikasi berulang protooncogen tertentu dalam jenis tertentu
kanker menunjukkan bahwa korelasi ini mungkin lebih dari kebetulan dan tentu menjamin
studi lebih lanjut. Selain itu, mengingat peran sentral yang dikenal dari produk dari beberapa
protooncogens di sirkuit komunikasi, tampaknya mungkin bahwa produksi lebih dari produk
protoonkogen tertentu mungkin berkontribusi terhadap onkogenesis.