Determinacién de la presencia de Plomo en azticar de cafia (Saccharum officinarum) mediante Espectrofotometria de Absorcién Atémica PACO S. Gloria 1? MORALES V, Mercedes? MALLEA A. Arturo 7 1 Laboratorio de Toxicologia, Instituto de Investigaciones Forenses, Ministerio Piiblico de la Nacién 2 Instituto de Servicios de Laboratorio de Diagnostica e Investigacién en Salud, SELADIS. PALABRAS CLAVE, Plomo, Azdcar, Espectrofotomet Absorcién Atémica. KEY WORDS Lead, Sugar, Atomic Absorption ‘Spectrophotometty. Vol. XIV - Diciembre de 2006 RESUMEN Se determiné la presencia de plomo en muestras de azucar de cama de procedencia nacional, mediante un. nuevo ensayo por Espectrofotometria de Absorcién Atémica Electrotérmica (EAAE). Se utilizaron dos métodos espectrofotométricos, el método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica de Flama (EAAF) y el Electrotérmico, para determinar la sensibilidad de ambos métodos en la cuantificacién de plomo en azticar de cafa. Se analizaron 27 muestras primarias de azuicar de caiia correspondientes a 9 industrias (seis de azticar refinado y tres de azicar morena). En todas las muestras se registré la presencia de plomo dentro un rango de 0,0112 a 0,0640 partes por millén, cuantificado mediante el método EAAE; concentraciones que no fueron detectados por el método de EAAF, por su baja sensibilidad. Los datos obtenidos evidencian que las muestras de azticar presentan una concentracién de plomo permisible por debajo del nivel maximo segun el Codex Alimentarius (0,5 ppm). ABSTRACT The lead presence was determined in samples of sugar through of a new assay: Electrothermic Atomic Absorption Spectrophotometry (EAS). Two methods were used, Flame Atomic Absorption Spectrophotometry (FAAS) and Furnace", to determine the sensibility of both methods in the lead quantification in sugar samples. 27 primary samples of sugar corresponding to 9 industries were analyzed (refined sugar 6 and sugar moraine 3). All the samples was registered the lead presence inside a range from 0,0112 to 0,0640 ppm, quantified through of the method EAAS; this concentrations were not detectad for FAAS method, for their low sensibility. The obtained data evidence that the samples of sugar present permissible concentration of lead below the maximum level according to the. Codex Alimentarius (0,5 ppm). BIOFARBO - (17)PACO, MORALES, MALLEA INTRODUCCION Los nifios son los més susceptibles a los efectos t6xicos del plomo, porque 'ngieren un volumen mayor de alimentos en relacién a su masa corporal que los adultos", absorben el plomo mas facilmente que los adultos, el cerebro es el érgano mas susceptible a este toxico por encontrarse en su fase de desarrollo. En consecuencia los lactantes y los nifios pequefios son mas sensibles a la exposicién al plomo que los adultos, contaminacién que puede provenir de la dieta y otras fuentes ambientales.® El efecto toxico mas importante del plomo es la reduccién del desarrollo cognitivo y ef rendimiento intelestual de los ninios, en cambio para los adultos es el aumento de la presion sanguinea y la manifestacior: de enfermedades cardiovasculares,© 789.1019 Elazicar constituye un alimento importante dentro de nuestra dieta, un producto de expertacién y consumo interno, por esta razén su inocuidad requiere de un control continuo, ctiidando que su consumo no sea perjudicial a corto o largo plazo." En este sentido la presencia de contaminantes en los alimentos por la contaminacién de suelos, aquas o aire, incluyendo los métodos de cultivo, procesos de fabricacién, almacenamiento y/o distribucién inadecuada del alimento; debe ser verificada y controlada regularmente.(3 15 Ante este riesgo fueron prescritos los niveles maximos (NM en mg/kg 0 ppm) y los niveles de ingestion diaria maxima tedrica (IDMT en ug/dia), para estas sustancias, bajo la legislacién cel Codex Alimentarius.®: % 792 Sobrepasar la concentracién limite permisible de plomo en cualquier alimento, por contaminacién de agua, suelos y aire: constituye un aito riesgo de contaminacién plimbica. La Norma Boliviana 484-84 para Azucar, considera ccmo nivel maximo permisible igual a 2 ppm de plomo.2 2 #20 El Instituto Boliviano de Normatizacién IBNORCA recomienda seguir con el método de: International Comisién for Uniform Methods of Sugar Analist-1964 (ICUMSA), método colorimétrico poco sensible y que data de hace 20 afios atras, para determinar la presencia de plomo en azdcar® El presente trabajo sugiere la actualizacién de la Norma Boliviana para el anélisis de plomo en azicar de cafia y su nivel maximo permisible. Presenta como alternativa_un método altamente sensible y especifico'®. #22832, e| método de EAA; se analizaron las muestras por dos métodos: EAAF y EAAE, para determinar cualitativa y cuantitativamente la presencia de plomo en aziicar de cafia; relacionade con los niveles maximos permisibles de plomo, segin el Codex Alimetarius, igual a 0,5 ppm de plomo (Azucar y derivados) £9 8.9 38.38.37 MATERIALES Y METODOS Coleccién de muestras Se colectaron 27 muestras primarias de azucar de cafia correspondientes a 9 industrias (seis de azucar refinado y tres de azticar morena), de acuerdo a la Norma Boliviana-482, bajo la técnica de toma de muestra primaria de producto a granel, en una cantidad de un kilogramo aproximadamente.® La coleccién de las muestras se realizé al azar, siguiendo un método de muestreo aleatorio, con el objeto de obtener muestras representativas de la poblacién. Procesamiento de las muestras Las muestras para su andlisis fueron preparadas por el método de cuarteo, se tomé cada muestra primaria sobre un papel estéril, se dividié en cuatro partes toméndose los extremos opuestos; con la cantidad obtenida se repitié el mismo procedimiento hasta obtener una cantidad semejante a la necesaria para el analisis. Método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica de Flama Se trabajé con el protocolo de trabajo de ia Farmacopea Europea 2.4.10. Este mé!odo se desarrollé utilizando una llama aire-acetileno, una lampara de plomo de descarga sin electrodes y las siguientes soluciones 1. Solucién de Ensayo. Se disolvié 20 g de sustancia ser examinada en acido acético 1M c.s.p. 190 ml de solucidn, se adiciond 2 mi de solucién saturada de pirrolodin ditiocarbamato de amonio (ADPC), alrededor de 1% piv; y 10 ml de 4 metil pentano, 2- ona-metil isobutil cetona (MIBK) en un embudo de separacién y se agité por 30 segundes protegierdo ve la luz, dejando en reposo y empleando la capa ceténica para la lectura 2. Solucién de Referencia. Se preparé 3 soluciones de referencia de la misma manera de la solucién de ensayo usando 0,5 mi, { mly 1,5 mide solucién esténdar de Pb (10 ppm) en adicién a 20 g de sustancia a ser examinada, Se preparé una solucién blanco de la misma manera como la solucién de ensayo, pero sin la sustancia a ser examinada. Se realizé la lectura de: la solucion de ensayo, las tres soluciones de referencia y la solucién blanco a una longitud de onda de 283.3 1am, utilizando la solucién blanco para llevar a Cero de Absorbancia en el instrumento. Se construyé una curva de calibracién, para determinar el contenido de plomo en la sustancia a ser examinada 3. Condiciones de operacién. Elemento a determinar: Plomo, Llama: aire-acetileno, Lampara: de plomo (18) = BIOFARBO v0. XIV - Diciembre de 2008DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE PLOMO EN AZUCAR DE CANA de descarga sin electrodos, Longitud de onda: 283,3 nm, Limite de deteccién. 0,015 ppm, Limite cuantificable: 0,15 ppm Método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica Electrotérmica. (Horno de grafito) Luago de realizar el muestreo por cuarteo, se pesd 5. g de muestra, en un vaso de precipitados, se disolvid en 20 mi de acido nitrico 1 M, se llevé a un matraz, aforado de 50 ml, enjuagando previamente el vaso de precipitados se enrazé con la solucién de acido nitrico hasta 50 mi. La muestra preparada se llevé a envases herméticos y adecuados, para su posterior Jectura. 1. Condiciones de operacién. Elemento a determinar: Plomo, Corrector de ruido de fondo: lmpara de deuterio, Horna de Grafito: calentamiento longitudinal, Lampara: de plomo de descarga sin electrodos, Energia de calentamiento: 430 miliamperios, Longitud de onda: 283,3 nm, Limite de deteccién: 0,00006 ppm, Limite cuantificable: 0,0006 ppm. RESULTADOS Se analizaron 27 muestras de azucar de caha, correspondientes a nueve marcas nacionales de aziicar de cafa, seis marcas de azicar refinado y tres marcas de azucar morena (3 muestras primarias de cada marca). La cuantificacién mediante el método de Espectrofotometria de Absorcién Atomica Electrotérmica, determiné la presencia de plomo en Un rango de 0,0112 a 0,0640 ppm (valor minimo y maximo respectivamente). Tabla N? 1 Método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica de Flama Mediante el método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica con Flama, no se logré detectar la presencia de plomo en ninguna de las muestras. La determinacién de la sensibilidad de! método revela su baja sensibilidad en la medicién de concentraciones menores a 0,05 ppm de plomo. Gratico No. 1 Método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica Electrotérmica La determinacién de la sensibilidad del método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica Electrotérmica, revelé una alta sensibilidad en la medicién de concentraciones menores a 0,05 ppm de plomo. Grafico No. 2 El 100% de las muestra analizadas (27 muestras primarias de 9 marcas de azicar de cana de industria nacional) presentan concentraciones por debajo de 0,5 ppm, valor limite maximo permisible determinado por el Codex Alimentarius, ‘Comparando las concentraciones de plomo en azuicar de cana se encontré que 3 marcas de azticar refinado (Unagro, Unagro Super Cristal y Guabira) y 2 marcas de azicar morena (irupana y Unagro), presentan valores superiores a 0,057 ppm. Tres marcas de azUcar refinado (Bélgica, Bermejo y San Aurelio) y una marca de azucar morena (Guabira) presentan valores inferiores a 0,039 ppm. Grafico No. 3 DISCUSIONES En la determinacién de la sensibilidad del método de Espectrofotometria de Absorcién Atémica de Flama, TABLAN® 1 CONCENTRACION DE PLOMO EN AZUCAR DE CANA (SACCHARUM OFFICINARUM) DE INDUSTRIA NACIONAL, MEDIANTE DOS METODOS DE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA [C] de Plomo [6] de plomo VALOR Muestras | Procedencia Marca Por EAAF* por EAAE™ PROMEDIO (ppm) (ppm) (ppm) (1.2.3) | Santa Cruz La Bélgica No detectaco | 0,0297-0,0302-0,0204 | 0.0298 8 (45,6) | SantaCruz | Unagrorefinado | Nodetectade | 0,0576-0,0561-0,0569 | 0.0875 (7.8.8) | Santa Cruz |Unagro Super Cristal | No detectado | 0,0636-0,0608-0,0624 | 0.0623 1D (10,11,12) | Santa Gruz Guabira No detectado | 0,0654-0,0632-0,0649 | 0.0645 E(13.14.15) |__Tariia Bermejo Nodetectado | 0,0102-0,0112-0,0123 | 0.0112 F (16.17.18) | Santa Cruz ‘San Aurelio No detectado | 0,0360-0,0358-0,0347 | 0.0355 (19,20,21) | Santa Cruz | Guabira Morena | No detectado | 0,0387-0,0890-0,0416 | 0.0398 1 (22,23,24) [__ La Paz Trupana Morena | No detectado | 0,0608-0,0607-0,0609 [0.0608 1(25,26,27) | SantaGruz | UnagroMorena | Nodatectado | 0,0635-0,0663-0,0621 | 0.0640 Espectrofolometria de Absorcién Atémica de Flama " Espectrofotometria de Absorcién Atémica Electrotérmica Vol. XIV - Diciembre de 2006 ————————— BIOFARBO - (19)PACO, MORALES, MALLEA GRAFICO N21 SENSIBILIDAD DEL METODO DE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA DE FLAMA (FAAS) EN LA DETERMINACION DE PLOMO EN AZUCAR DE CANA y= 6,6627x - 0,065 038 R? =0,9923 0,30 < 025 2 Z 020 a B 01s 2 Z 0.10 —— Absorbancia de 0.05 : estandares 7 — LINEALIDAD 0,00 0,00 0,01 0,020.03 0.04005 (0,06 CONCENTRACION DE PLOMO (ppm) Grafico No. 1, no se observa linealidad en la curva de caliraci6n en un rango de 0,01 a 0,05 ppm de plomo, la pendiente de la curva de respuesta o de calibracién no corresponde a una linea recta, por lo tanto la sensibilidad no es constante a lo largo del rango. Por otro lado este método tiene como minimo cuantificable para plomo 0,15 ppm, este valor representa la concentracién mas baja cuantificable del contaminante presente en la muestra, a valores inferiores a este el método no es exacto ni preciso." ™ El tratamiento previo y andlisis de las muestras por este método requiere de un tiempo de trabajo mayor a 20 minutos por muestra, mas de dos reactivos para el tratamiento de la muestra (método de adicién), la atomizacién requiere de seis procesos previos, la cantidad de muestra necesaria es de mas de 1 mi de muestra, no se puede analizar material viscoso, es necesario suficiente energia para la disociacién de las moléculas pero no en exceso porque llegaria a destruir los atomos, en estado fundamental. GRAFICO N82 ‘SENSIBILIDAD DEL METODO DE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA ELECTROTERMICA EN LA DETERMINACION DE PLOMO EN AZUCAR DE CANA y= 6,451x - 0.0222 0.38 Re = 0,9992 030 0,25 8 2 0,20 2 os 5 0, 3 Q 0,10 me < ca 0,05 —— Absorbancia de 0,00 al estandares "0,00 0,010.02 0,030.04 0,05- 0,08 | —— LINEALIDAD CONCENTRACION DE PLOMO (ppm) (20) - BIOFARBO- Vol. XIV - Diciembre de 2006DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE PLOMO EN AZUCAR DE CANA GRAFICO N°3 COMPARACION DE LA CONCENTRACION DE PLOMO EN AZUCAR REFINADA Y AZUCAR MORENA, MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA ELECTROTERMICA, O17 E £008 g 0,062 0.064 0,080 0064 5 3057 j 2 006 7 u 0.035 0,039. | B 004 Verges ma g 0,011 | | E002 —— é 4 2 os e8 EB £ 2 & Be s8 o8 8 > 88 2 € £ § 85 88 38 . ee ee 3 5a 8 En el andlisis de la sensibilidad del método de espectrototome de absorcién ia atomica electrotérmica, Gratico No. 2. La pendiente dela curva de respuesta 0 de calibracién corresponde a una linea recta, por lo tanto la sensibilidad es constante allo largo det rango. Por otro lado este método tiene como minimo cuantificable para plomo 0,0006 ppm, este valor representa la concentracién mas baja cuantificable del contaminante presente en la muestra, valores superiores a este son medibles por este método, por lo tanto se considera un método mas exacto y preciso.(*.° Este método no requiere un tratamiento previo de la muestra y el andlisis de las muestras es directo, el tiempo de trabajo es menor a 10 minutos por muestra, solo requiere de un reactivo para solubilizar a muestra, la atomizacién se realiza en menos de § minutos de manera directa en el atomizador electrotérmico, permite analizar cantidades minimas de muestras liquidas 0 sélidas de elementos en concentraciones 1000 veces mas bajas que el método de flama. De acuerdo a la determinacién de la sensibilidad de los dos métodos utilizados, se evidencié que el plomo fue cusntificable solamente por el método de espectrometria de absorcién atémica electrotérmica debido a su alta sensibitidad, exactitud y precision. Por te tanto este método podria ser de primera eleccién para la determinacién de plomo en azucar de cafia y cumplir de esta manera con un Programa de Vigilancia Sanitaria de Alimentos, Vol. XIV - Diciembre de 2008 Las marcas nacionales de azécar que presenta mayor concentracién de plomo son Guabira Refinado y Unagro Morena, La marca de azuvar que presenta menor concentracién de plomo es el azicar Bermejo, LABORATORIOS MINERVA TIOCOL CODEINA ANTITUSIGENO BENZOSAR ESCABICIDA - PEDICULICIDA HUIRA HUIRA EXPECTORANTE DERMASEROL ‘QUERATOPLASTICO INDUSTRIA BOLIVIANA eos oA ahaa Re eee Ric mn ERE er) BOTAN Veer icL} eae} GLUCOCALCINA CALCITERAPIA CEREBROL \VITAMINAS Y MINERALES: BIOFARBO - (21)Grdfico No. 3. Esta variacién de la concentracién de plomo puede ser debido a la contaminacién ambiental de suelos y agua, la misma sugiere un control mas exhaustivo del contaminante,(®.*%19 AGRADECIMIENTOS Este trabajo fue realizado de acuerdo al convenio entre al Instituto de Servicios de Laboratorio de Diagnostico @ Investigacién en Salud, SELADIS y_ el Instituto Boliviano de Tecnologia Nuclear, IBTEN. Bajo la tutoria del Or. Arturo Mallea Angies y Ja Dra. Mercedes Morales. Sinceros agradecimientos al Instituto Boliviano de Tecnologia Nuclear, IBTEN. BIBLIOGRAFIA 1. Skoog D, Holler J, Nieman T. Principios de Analisis Instrumental. Sta, Edicion. Madrid- Espana. 2001 2. Beaty R, Kerber J. Concepts, Instrumentation and Techniques. Perkin Elmer. 2002 3. Comision Codex Alimentarius. Codex Committee on Food Additives and Contaminants, Thirty-first Session. CX/FAC 99/11. 1999. 4. Mahaffey KR, Rosen JF, Chesney RW. Asociacion entre edad, concentracién de plomo y nutricién. 1999; 35:1327-1331 5. 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