CHOLESTEROL -LQ

Cholestrol-LQ
CHOD-POD. Liquide
Dtermination quantitative de cholestrol
IVD
Conserver 2-8C

CALCULS
( A) chantillo n x 200 (Conc. talon) = mg/dL de cholestrol dans lchantillon
( A) talon

Facteur de conversion : mg/dL x 0,0258= mmol/L.

PRINCIPE DE LA METHODE
Le cholestrol prsent dans lchantillon donne lieu un compos
color, selon la raction suivante :
CHE

Esters cholestrol + H2O

Cholestrol + Acides gras
CHOD

Cholestrol + O2 4-Cholestnone + H2O2

POD

2 H2O2 +Phnol + 4-Aminophnazone

Quinonimine + 4H2O

Lintensit de la couleur forme est proportionnelle la concentration

de cholestrol prsent dans lchantillon test1, 2.
SIGNIFICATION CLINIQUE
Le cholestrol est une substance grasse prsente dans toutes les
cellules de lorganisme. Le foie produit naturellement tout le
cholestrol dont il a besoin pour former les membranes cellulaires et
produire certaines hormones. La dtermination du cholestrol est lun
des outils les plus importants pour diagnostiquer et classifier les
lipmies. Laugmentation du cholestrol est lun des principaux
facteurs de risque cardiovasculaire5, 6.
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les
donnes cliniques et de laboratoire.
RACTIFS

CHOLESTEROL
CAL

PIPES pH 6,9
90 mmol/L
Phnol
26 mmol/L
Cholestrol-estrase (CHE)
1 000 U/L
Cholestrol-oxydase (CHOD)
300 U/L
Peroxydase (POD)
650 U/L
4 Aminophnazone (4-AF)
0,4 mmol/L
talon primaire aqueux de Cholestrol
200 mg/dL

PRPARATION
Tous les ractifs sont prts lemploi.
CONSERVATION ET STABILITE
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de
premption indique sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus
hermtiquement ferms 2-8C, labri de la lumire et des sources
de contamination.
Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique.
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit.
- Absorbation (A) du blanc 505 0,26.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 505 nm.
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage.
- Equipement classique de laboratoire
CHANTILLONS
Srum ou plasma1, 2. Stabilit de lchantillon 7 jours 2-8C, et 3
mois si lchantillon est congel (-20C).
PROCEDURE
1. Conditions de test:
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (500-550)
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm dclairage
Temprature . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37C / 15-25C
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau
distille.
3. Pipeter dans une cuvette:
Blanc
talon
chantillon
R (mL)
1,0
1,0
1,0
-10
-talon (Remarque 1-2) (L)
--10
Echantillon (L)
4.
Mlanger et incuber pendant 5 minutes 37C ou 10 min.
15-25C
5. Lire labsorbation (A) de ltalon contre le Blanc du ractif. La
couleur est stable au moins 60 minutes.

BSIS48-F

16/09/13

CONTROLE DE QUALITE
Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les
valeurs ont t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf.
1002120 et 1002210).
Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser
linstrument, les ractifs et le calibreur.
Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et
dterminer les mesures correctives mettre en place dans le cas o les
vrifications ne correspondraient pas aux attentes.
VALEURS DE REFERENCE
valuation du risque5, 6:
Moins de 200 mg/dL
Normal
200-239 mg/dL
Modr
240 mg/dL ou plus
lev
Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque
laboratoire de dfinir ses propres valeurs de rfrence.
CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Plage de mesure: Depuis la limite de dtection de 0,00 mg/dL, jusqu la
limite de linarit de 1000 mg/dL
Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit,
diluer 1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
Prcision:
Intra-srie (n=20)
Inter-srie (n=20)
Moyenne (mg/dL)
99
201
96
197
SD (mg/dL)
0,83
1,41
1,75
6,41
CV (%)
0,84
0,70
1,82
3,26
Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,0019 (A).
Exactitude: Les ractifs SPINREACT ne montrent pas de diffrences
systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs
commerciaux.
Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
Coefficient de corrlation (r): 0,99549.
Equation de la Coubre de rgression: y=0,911x + 2,624.
Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur
employ.
INTERFRENCES
Il na pas t observ dinterfrences avec lhmoglobine jusqu 5 g/L et
avec la bilirubine jusqu 10 mg/dL1, 2. Il a t rapport que plusieurs
drogues et autres substances interfrent avec la dtermination du
cholestrol3, 4.
REMARQUES
1. CHOLESTEROL CAL : En raison de la nature du produit, il est
recommand de le traiter avec beaucoup de soin vu quil peut
facilement contaminer.
2. LCF (Lipid Clearing Factor) est intgr au ractif.
3. La calibration avec ltalon aqueux peut donner lieu des erreurs
systmatiques dans les mthodes automatiques. Dans ce cas, il est
recommand dutiliser des calibrateurs sriques.
4. Utiliser des embouts de pipette jetables et propres pour la dispensation.
5. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de
ce ractif dans diffrents analyseurs.
BIBLIOGRAPHIE
1.
2.
3.
4.
5.
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Louis. Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic
System. Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.

PRSENTATION
Ref: 41020
Ref: 41022
Ref. 41021
Ref. 41019

Cont.
.

R:2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL

R: 2 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL

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