Articole de fond

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

ANDROSTERILITATEA CITOPLASMATIC LA DIFERITE

PLANTE DE CULTUR
Duca Maria1, Port Angela1, Zgardan Dan2
Universitatea Academiei de tiine a Moldovei
2
Universitatea Tehnic a Moldovei

Rezumat
Androsterilitatea este un fenomen rspndit n natur, cu largi aplicaii n agricultur i
posibiliti de studii fundamentale n diverse domenii ale biologiei. Sunt caracterizate
particularitile moleculare ale manifestrii ASC la diferite plante de cultur.
Este prezentat analiza bioinformatic comparativ a genelor i proteinelor asociate cu
androsterilitatea citoplasmatic.
Cuvinte-cheie: Androsterilitate citoplasmatic gene mitocondriale - proteine
recombinri - incompatibilitate nucleu-citoplasm.
Depus la redacie 05 aprilie 2012
--------------------------------------------------------------------------------------------------------Adresa pentru coresponden: Port Angela, Universitatea Academiei de tiine a
Moldovei, str. Academiei 3/2, MD2028, Chiinu, R. Moldova, portang@yahoo.com,
tel. (+373 22) 73-74-31

Primul caz de androsterilitate citoplasmatic a fost descris de C. Correns, care a

descoperit n anul 1904 plante de cimbru (Satureja hortensis L.) cu polen neviabil.
n urma polenizrii plantelor androsterile cu polen de la plante fertile au fost obinute
forme androsterile pn n generaia F6, demonstrnd astfel c sterilitatea masculin se
motenete pe linie matern [13]. Ulterior, acest fenomen a fost descoperit i descris la
o serie de plante din clasa mono- i dicotiledonatelor, anuale i perene, alo- i autogame.
J. Edwardson a remarcat cazuri de androsterilitate necromozomal la 153 specii, ce
fac parte din 51 genuri i 22 familii, clasicndu-le n funcie de originea lor n felul
urmtor [13]:
sterilitate aprut n rezultatul ncrucirilor dintre plante cu genom i citoplasm
incompatibil;
sterilitate care se manifest spontan la hibrizii intraspecici;
sterilitate determinat de mutaii citoplasmatice.
Androsterilitatea a aprut n condiii naturale diferite, ind observat n populaii
sau la descendenii obinui spontan n urma hibridrilor intraspecice, interspecice
i intergenerice precum i n urma mutagenezei ca rezultat al reorganizrii genelor
citoplasmatice sau nucleare [19].
Pornind de la multitudinea surselor i diversitatea logenetic, feno- i genotipic,
au fost ntreprinse mai multe ncercri de a clasica tipurile cunoscute de androsterilitate.
n funcie de factorii care determin expresia acestui fenomen se disting [77]:
androsterilitate genic sau nuclear, cauzat de gene nucleare n stare
recesiv msms (msms male sterile) care se transmit prin ereditate mendelian;
androsterilitate citoplasmatic, determinat de gene citoplasmatice i gene
nucleare restauratoare de fertilitate Rf ;

22

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

androsterilitate modicaional sau indus, determinat de factori abiotici i

biotici ai mediului, indus prin mutagenez sau prin aplicarea exogen a giberelinelor;
androsterilitate cromozomal, cauzat de diferite tipuri de aberaii
cromozomale aprute n meioz ca o consecin a hibridrilor ndeprtate.
Fiecare tip de androsterilitate are o importan teoretic deosebit. Astfel, studierea
androsterilitii citoplasmatice permite elucidarea mecanismelor de interaciune a
genomului nuclear cu plasmonul, studierea androsterilitii genice pune n eviden
mecanismele de aciune a genelor nucleare, iar n cadrul androsterilitii modicaionale
se examineaz aciunea diferiilor factori asupra procesului de microsporogenez. Pe
lng aceast, fenomenul de androsterilitate este folosit pe larg la crearea de hibrizi
pentru producie, fr a se efectua castrarea manual a orilor, determinnd o cretere
a ecienei economice.
Actualmente, se apeleaz din ce in ce mai des la posibilitatea crerii genotipurilor
androsterile prin utilizarea tehnicilor moderne de genetic molecular. Astfel, a fost
obinut un nou tip de ASC la Nicotiana tabacum L. prin hibridizarea somatic a
protoplastelor [76]. Se efectueaz selectarea formelor ASC prin metoda androgenezei
spontane [23]. La plantele de tutun transgenic au fost obinui mutani androsterili prin
introducerea n genom a unor gene ce codic ribonucleaze, restaurarea fertilitii
ind determinat, n acest caz, de prezena la liniile restauratoare a unui inhibitor al
ribonucleazelor [42]. Astfel, introducerea genei rolC de la Agrobacterium rhizogenes
n formele androfertile de tutun cauzeaz androsterilitatea acestora [54].
Tipuri de androsterilitate citoplasmatic
ASC poate ntlnit att la plantele monoice, ct i dioice din clasa mono- i
dicotiledonate, anuale i perene, cu mod diferit de reproducere (plante alo- i autogame).
Varietatea mare de tipuri de ASC, precum i clasicarea diferit a acestui fenomen,
implic necesitatea cunoaterii surselor, formelor de ASC, modalitatea de transmitere
a acestora i a genelor implicate n disfuncia mitocondrial, soldat cu ntreruperea
procesului de microsporogenez, rezultnd androsterilitatea plantelor.
n funcie de originea genomului citoplasmatic i nuclear care interacioneaz, pot
exista trei tipuri de androsterilitate citoplasmatic [29]:
autoplasmic apare cnd genomul citoplasmatic i cel nuclear fac parte
dintr-o populaie genetic;
homoplasmic apare cnd genomul citoplasmatic i cel nuclear fac parte din
populaie genetice diferite din cadrul aceleai specii;
aloplasmic apare la interaciunea interaciunea genomului citoplasmatic cu
cel nuclear care fac parte din specii diferite.
Primele dou tipuri de androsterilitate reprezint o consecin reasc a proceselor
evolutive n natur, de exemplu, cazul ginodioeciei coexistena indivizilor hermafrodii
i femeli (androsterili), ntlnit frecvent la angiosperme. Natura interaciunii dintre
plasmagene i genele nucleare, inevitabil n restaurarea fertilitii, poate explicat
n contextul teoriei conictului genomic [66].
n numeroase populaii cu ginodioecie indivizii femeli produc cu mult mai multe
semine viabile dect indivizii hermafrodii. Acest avantaj al fertilitii feminine st la
baza evoluiei modelului de ginodioecie. El poate cauzat de:

23

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

efectele sexului matern, care mresc funcionalitatea sexului femel sau

viabilitatea indivizilor androsterili;
efectele inbreeding-lui, indivizii femeli nu se pot autopoleniza i produc mai
multe semine viabile dect indivizii hermafrodiii. Acest tip de androsterilitate este
cunoscut att la speciile de plante din ora spontan, ct i la plantele de cultur.
Androsterilitatea aloplasmic se obine frecvent din ncrucirile interspecice sau
din ncrucirile genurilor apropiate. n 1988, Kaul denete aloplasmia ca fenomen n
care celulele unui organism conin citoplasma unei specii i nucleul altei specii. Autorul
a semnalat 175 cazuri de aloplasmie asociate cu ASC [29]. Se consider, c sterilitatea
masculin aloplasmic este condiionat de disfuncii n activitatea mitocondriilor,
determinate de coordonarea inecient dintre genomurile citoplasmatic i nuclear la
nivelul transcripilor (expresia genelor mitocondriale) sau asamblarea produselor de
translaie n complexul lanului respirator.
Expresia fenotipic a adrosterilitaii determinat de interaciunea dintre citoplasm
i nucleul unei specii donatoare variaz destul de larg, ind asociat uneori i cu
conversii homeotice ale staminelor n alte organe orale - structuri carpeloide sau
petaloide [5].
Diversitatea molecular a androsterilitii citoplasmatice
Androsterilitatea citoplasmatic se manifest n prezena genelor nucleare de
restaurare a fertilitii n stare recesiv rfrf i se motenete nonmendelian. Restaurarea
fertilitii polenului n generaia F1 este asigurat de genele Rf att n stare homozigot
dominant, ct i heterozigot Rfrf [53].
Studiul androsterilitii citoplasmatice prin diverse metode de analiz molecular
(cartare zic comparativ, restricie enzimatic, translaie in vitro, secveniere etc.)
la diferite specii, precum ASC-T la porumb [53], sorg [3], petunie [69], rapi [60],
orez [27], ridiche [40], oarea-soarelui [31] au demonstrat c acest fenomen apare ca
urmare a rearanjamentelor la nivelul genomului mitocondrial, n urma crora rezult
noi cadre de citire orf-uri (orf open reading frame) himerice mitocondriale (g. 1).
Caracteristica molecular a regiunilor himere asociate cu ASC variaz chiar i n
cadrul unei specii. Mutaiile mitocondriale sunt depistate n special n regiunea din
amonte sau aval a genelor care codic componenii complexului ATP-azic. ntruct,
n majoritatea cazurilor androsterilitatea este rezultatul expresiei unor noi cadre de citire
i nu al ntreruperii genelor mitocondriale de baz, fenotipul ASC poate considerat
mutant cu o nou funcie (gain-of-function mutants). Aceast particularitate distinge
formele ASC de mutanii mitocondriali obinui prin silenierea unei gene (loss-offunction) care n majoritatea cazurilor prezint deciene de cretere vegetativ.
Afectarea strii ziologice a mitocondriilor cauzat de prezena noilor orf-uri la
liniile materne se manifest n dezvoltarea staminelor i formrii polenului n perioada
premeiotic, meiotic sau postmeiotic, rezultnd tipul ASC de tip gametot sau
sporot. S-a constatat c n majoritatea sistemelor ASC, inclusiv ale liniilor comerciale
formarea polenului este perturbat n meioz i postmeioz.
ASC la porumb (Zea mays) poate clasicat n trei grupe: ASC tip -T, -C i -S
[67].

24

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

Fig. 1. Genele himere asociate cu ASC la diferite specii de plante [55].

Orf-urile se noteaz dup numrul de codoni, cu excepia unor denumiri
convenionale. Liniile paralele punctate indic similaritile dintre secvene. Direcia
transcripiei (5- 3) este indicat n partea de sus a gurii, cu excepia elementului cox1
n cadrul zonei himerice R la citoplasma de porumb de tip-S.

Prima form de porumb androsteril folosit n tehnologia porumbului hibrid, a fost

tipul-T (Texas) identicat de P. Mangelsdorf i V. Edwardson n anii 1951-1953 la
soiul de porumb Mexican june [13]. Liniile sterile de porumb se deosebeau esenial
dup structura ADNmt, polimorsmul fragmentelor de restricie, structura ARNmt,
produsele mitocondriale de translaie [45]. ns n scurt timp n SUA, s-a renunat la

25

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

folosirea tipului Texas, datorit atacului masiv de Helminthosporium maydis observat

la hibrizii produi pe baza citoplasmei tip-T. n afar de acestea, porumbul cu ASC-T
este sensibil i la aciunea unui alt patogen fungic Phyllosticta maydis. Corelaia
pozitiv ntre androsterilitatea citoplasmatic tip-T i sensibilitatea la atacul fungic a
fost determinat i de faptul c materialul utilizat pentru producerea hibrizilor respectivi
prezenta o nalt uniformitate genetic.
Plantele cu ASC-T posed o gen mitocondrial denumit T-urf13, care codic o
protein de 13 kD ce determin formarea unor pori n membrana intern a mitocondriei
[9; 67]. Prin studii de expresie a genei urf13 n E. coli a fost relevat c polipeptidul
urf13 este localizat n membrana citoplasmatic a bacteriei [9], ceea ce este analog cu
prezena acestuia n membrana intern a mitocondriilor celulelor cu citoplasma T.
Interaciunea toxinei BmT cu urf13 se soldeaz cu permeabilizarea membranei
citoplasmatice a bacteriei. Acelai efect este observat i la porumbul cu ASC-T [22].
Astfel, n prezena toxinei respective, proteina ur3 formeaz pori membranari. n
acelai context, gena urf13 determin sensibilitate la toxine n mitocondriile drojdiilor
[16], tutunului transgenic [63], precum i n mitocondriile insectelor. Expresia genei
urf13 n celulele bacteriene a relevat un grad nalt de toxicitate a proteinei urf13
pentru acestea, precum i pentru celulele insectelor [33]. Polipeptidul urf13 penetreaz
membrana mitocondrial intern de trei ori, iar captul su C-terminal este orientat spre
matricea mitocondrial [32]. Aceast protein poate exista n membrana mitocondriei
sub form monomer, dimer sau trimer.
Gena urf13 este localizat n amonte de regiunea conservat orf221 cu care se
cotranscrie [52]. Orf221 codic o protein transmembranar din subunitatea Fo a
ATP-sintetazei. Analiza complexului ATP-sintetazic la arabidopsis a relevat prezena
unei proteine similare cu orf221, avnd funcii asemntoare celor realizate de
subunitatea b a ATP-azei la diverse organisme. Astfel, omologul acestui cadru de citire
deschis este relevat ca ind gena atp4 [20].
Constatarea c urf13 este cauza avortrii polenului este conrmat de faptul, c n
genomul plantelor cu fertilitatea restaurat se detecteaz o inserie de 5 kb n urf13,
ceea ce cauzeaz apariia unui stop codon prematur, rezultnd un polipeptid doar de 74
aminoacizi, nefuncional [53].
Restaurarea fertilitii n plantele cu ASC-T este controlat de dou gene restauratoare
de fertilitate Rf1 i Rf2 n stare dominant. Analiza cantitativ a produsilor de expresie a
relevat c gena Rf1 afecteaz n mod direct expresia genei urf13, micornd abundena
proteinei urf13 cu circa 80% n timp ce gena Rf2 nu afecteaz expresia acestei gene
[9; 38].
ASC tip-C la plantele de porumb este asociat cu sinteza unui polipeptid solubil de
17,5 kD, spre deosebire de polipeptidul transmembranar solubil de 15,5 kD, caracteristic
mitocondriilor speciilor fertile [45]. A fost determinat c n plantele cu ASC-C genele
mitocondriale atp9, atp6 i coxII sunt afectate de mutaii, rezultat al rearanjamentelor
intergenice ntre ADN-ul mitocondrial i cloroplastic [38].
Restaurarea fertilitii polenului la acest tip de ASC este determinat de aciunea
unei singure gene nucleare dominante Rf4 [49].
ASC tip-S este asociat cu prezena a dou gene noi: orf355 i orf77 [70]. Orf77 este
o gen himer cu secvene codicatoare similare genei atp9 i determin sinteza unui

26

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

polipeptid de 17 aminoacizi (orf17). Polipeptidul orf17 conine resturile C-terminale

similare cu cele ale proteinei ATP9 [15]. Originea genei orf355 nu este cunoscut i
nici produsul proteic nu a fost identicat.
Genomul mitocondrial n aceste plante se caracterizeaz prin prezena unor plasmide
liniare de ADN notate S1 i S2 [50]. Plasmida S1 are o lungime de circa 6397 pb, iar
S2 25453 pb [48]. Relaia dintre prezena plasmidelor S1 i S2 i sterilitatea polenului
n plantele ASC-S nu este pe deplin elucidat. Mitocondriile plantelor cu fertilitate
restaurat prin aciunea genei Rf3 pstreaz plasmidele S1 i S2. Spre deosebire de
ASC-T i ASC-C, la plantele cu ASC-S este posibil revenirea spontan a fertilitii. n
astfel de plante, nu se detecteaz plasmide libere S 1 i S2 [67 ; 70].
ASC la petunie (Petunia) se manifest ca urmare a rearanjrilor la nivelul locusului
atp9 ce cauzeaz apariia genei himere pcf (petunia CMS-associated fused) cu 354 de
codoni. Orf pcf este generat prin fuziunea regiunii 5-noncodante i regiunii aminoterminale ale genei atp9, cu fragmentul de ADN ce codic gena coxII i un cadru de
citire neidenticat urfS [69]. Locusul conine copiile normale ale genelor nad3 i rps12,
precum i nou codoni provenii de la o gen necunoscut, orf143, depistat i la liniile
fertile de petunie [18].
Prin deleia acestui locus se asigur restaurarea fertilitii, determinat de aciunea
unei singure gene nucleare dominante Rf. Astfel, la liniile cu fertilitate restaurat,
transcripia genei pcf este nisat prematur [69], micorndu-se esenial coninutul
transcriptului.
Proteina de 45 kD codicat de orf pcf, este procesat pn la o protein de 19,5 kD,
ce prezint o mobilitate echivalent cu o polipeptid de 25 kD n gel de acrilamid [46].
Proteina lipsete complet la liniile fertile, iar cantitatea acesteia este redus substanial
la liniile cu fertilitate restaurat.
ASC la ridiche (Raphanus sativus) este determinat de apariia unor noi cadre de
citire orf138 i orf125 care conin 375 nucleotide [26].
La unele varieti japoneze de ridiche a fost identicat un tip de androsterilitate
ASC-ogu ce se caracterizeaz prin deosebiri semnicative ale transcripilor genelor
mitocondriale atp6, atpA i coxII. Un cadru nou de citire cu 105 codoni orf105, a fost
identicat la captul 5 al genei atp6, ind cotranscris mpreun cu aceast din urm. O
alt secvena de ADN rearanjat, cu o lungime de 120 pb a fost atestat la captul 5 al
regiunii codante a genei coxI [41].
La ridichea Kosena (Raphanus sativus cv. Kosena) a fost identicat o regiune
similar cu orf138/atp8 din varz, cu excepia unei deleii de 39 de nucleotide, fapt
care genereaz un nou orf125. La liniile cu fertilitatea restaurat nu se constat prezena
transcriptului i nici a proteinei orf125 [26].
ASC la genul Brassica este mult mai variat n comparaie cu alte specii de plante.
Au fost identicate mai multe tipuri ASC-ogyra, ASC-nap, ASC-mur, ASC-pol, ASCtour, ASC-nig i ASC-ana [19], care n majoritatea cazurilor rezult din hibridizarea
interspecic i incompatibilitatea nucleo-citoplasmic.
La Brassica ogyra a fost relevat existena unui cadru de citire orf133 situat n
amonte de gena atp8 [4]. Acesta codic un polipeptid de 19 kDa care nu este transcris
n prezena genei Rfo. La liniile cu fertilitatea restaurat se constat i lipsa proteinei de
19 kD orf138, prezent la liniile sterile [17].

27

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

La Brassica napus secvenierea genei mitondriale asociate cu androsterilitatea

citoplasmatic relev prezena unui nou cadru de lectur din 222 de codoni (orf222),
situat dup gena atp6 i n aval de gena nad5 i orf139 [6]. Studiul genei orf263 de
la Brassica tournefortii, atest faptul c aceasta, este format din aproximativ 90 de
codoni similari exonului genei nad5, urmat de 45 de codoni asemntori genei atp6.
Tot n acest caz a fost observat prezena proteinei de 32 kDa la liniile sterile, ns
asocierea acesteia cu ASC nu este nc pe deplin conrmat [35].
Studiile realizate pe hibrizii sterili de Brassica napus/Brassica ogura au relevat
prezena unui fragment de 2,5 kb NcoI de ADN-ul mitocondrial al ridichii cu ASC-ogu,
asociat cu apariia ASC-ogu n B. napus. Cu toate acestea, fragmentul de 2,5 kb NcoI
nu este lincat cu gena apt6 sau cu gena atpA [67].
ADNmt la liniile sterile cu ASC-pol a fost studiat prin analiza de restricie [68].
Astfel, la aceste linii rearanjamentele ADN din apropierea genei atp6 genereaz un
cadru de citire de 224 de codoni orf224. Cotranscrierea orf224 mpreun cu atp6
genereaz un transcript bicistronic. Genele restauratoare de fertilitate, determin deleia
acestui transcript bicistronic, formnd un transcript monocistronic [59]. Aceast gen
himer orf224 include primii 58 de codoni ai genei atp8, 13 codoni ai genei rps3 i
unele secvene neidenticate.
Prezena alelei Rfp sporete cantitatea transcriptului monomeric al genei atp6,
implicat n manifestarea ASC [59]. Este sugestiv gradul nalt de similaritate ntre
ADNmt nap i pol. Astfel, n citoplasma steril tip-nap, s-a identicat o gen himer
orf222, care nu este cotranscris cu atp6. n schimb, orf222 este cotranscris cu exonul
c al nad5 i cu gena orf139. Identitatea orf139 nu este cunoscut, dei prezena ei se
atest la un numr relativ mare de specii. Genele orf222 i orf224 prezint o omologie
de 75%. Transcriptul orf222/nad5c/orf139 este afectat de prezena alelei Rfn [6].
ASC la orez (Oryza sativa) a fost raportat, pentru prima dat, la specia slbatic
de orez chinezesc Oryza rupogon Griff. Se cunosc mai multe tipuri de ASC la orez:
ASC-CW, ASC-Bo, ASC-Ld, ASC-WA i ASC-HL [39].
Cea mai utilizat citoplasm androsteril la orez este citoplasma tip-Bo. Genomul
mitocondrial cu citoplasma Bo conine dou copii ale genei atp6. n avalul celei de-a
doua copie a genei atp6 (B-atp6) se identic orf39 asociat cu ASC. ASC-Bo este
asociat cu adiia unei gene himere urf-rmc plasat la captul 5 al regiunii noncodante
a genei atp6 [28]. Transcrierea acestei gene, mpreun cu gena atp6, genereaz un
transcript de 181 aminoacizi codicai de atp6, precum i un produs de 9 aminoacizi ai
unei regiunii necunoscute. Restaurarea fertilitii se realizeaz de gena Rf1, localizat
n cromozomul 10 [57]. De asemenea, s-a relevat prezena unei gene himere orf79,
similar cu captul N-terminal al genei coxI. Un numr mare de aminoacizi din primii
28 ai orf79 sunt identici cu cox1 [47].
Prezint interes similaritatea de 80% dintre orf79 i un cadru de citire neidenticat la
sorg cu citoplasma A3 [62]. Deci, la orezul cu citoplasma steril tip-Bo II, androsterilitatea
este asociat cu prezena unei copii anormale a genei apt6, care produce un transcript
ARNm aberant cu un cadru de citire adiional notat orf79 [2].
S-a studiat rolul orf79 n manifestarea fenotipic a ASC prin mai multe modaliti
[65]. n primul rand, s-a identicat citotoxicitatea proteinei orf79 n E.coli. n majoritatea
cazurilor, expresia genei a fost letal pentru bacterie. Mai mult ca att, introducerea

28

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

genei orf79 n liniile fertile de orez, utiliznd promotorul 35S specic virusului
mozaicului tutunului, a generat la plantele modicate genetic o semi-androsterilitate.
Acest fapt se datoreaz prezenei transgenei doar n unele gruncioare cu polen dup
realizarea meiozei.
n ceea ce privete celelalte tipuri de ASC la orez, restaurarea fertilitii la acestea
se realizeaz de ctre genele: Rf2 pentru ASC-Ld, localizat n cromozomul 2; Rf3 i Rf4
pentru ASC-WA, amplasate n cromozomul 1 i 10 respectiv; Rf5 i Rf6 pentru ASC-HL
localizat n cromozomul 10; Rfcw pentru ASC-CW i Rf-D1 pentru ASC-D1 [72].
ASC la fasole (Phaseolus vulgaris) este asociat cu prezena unui nou cadru de
citire de 297 pb numit pvs (phaseolus vulgaris sterility). Regiunea pvs conine dou
orf-uri, orf239 i orf98 [1].
Restaurarea fertilitii este determinat de genele nucleare Fr i Fr2. Fr2 spre
deosebire de gena Fr, afecteaz prolul transcriptului ASC [7].
ASC la gru (Triticum aestivum). La formele sterile regiunea 5 ce ancheaz gena
coxI prezint un cadru de citire himeric deschis orf256, care codic un polipeptid
de 256 aminoacizi de 7 kDa. Aminoacizii N-terminali codicai de orf256 i gena coxI
sunt similari [21]. Secvena codicatoare a genei coxI difer la liniile fertile/sterile
doar prin codonul STOP TAA la liniile fertile i TAG la liniile sterile. Secvena unic
asociat cu ASC este ancat la captul 3 i ncepe de la G al codonului STOP a
genei coxI.
ASC la sorg (Sorghum bicolor) apare n urma rearanjamentelor la nivelul genei
mitocondriale coxI i al ADN-ului plastidic [8]. Astfel, regiunea codant a genei coxI
la plantele sterile este extins la captul 3 cu 303 nucleotide i determin sinteza
a 101 de aminoacizi suplimentari la captul C-terminal al proteinei codicate. Mai
mult ca att, majoritatea liniilor sterile de sorg se caracterizeaz printr-o deleie n
ADN-ul cloroplastidian [8]. Aceast deleie este situat la mijlocul genei rpoC2 ce
codic subunitatea a ARN-polimerazei. Mecanismul apariiei deleiei nc nu este
elucidat i neles pe deplin. Gena asociat cu ASC orf107 conine 23 din 31 de
resturi identice cu gena atp9, urmat apoi de un segment, la care 28 din 51 de codoni
codic aminoacizi asemntori cu gena orf79 de la orez, ns produsul de expresie a
acestei gene nu este cunoscut [51]. Transcripia acestui orf107 difer la liniile cu gena
restauratoare de fertilitate Rf3 de liniile sterile.
ASC la bob (Vicia faba) coreleaz cu prezena unor particule citoplasmatice cu
diametrul de circa 70 nm, spre deosebire de alte plante androsterile [14]. Particulele
conin o molecul dublu catenar de ARN de 16,7 kb, capabil de a codica o replicaz
dependent de ARN [37]. Cu toate acestea, particulele nu sunt localizate n mitocondrii
i originea lor este necunoscut. Restaurarea fertilitii este asociat cu dispariia acestor
particulelor citoplasmatice.
ASC la sfecla-de-zahr (Beta vulgaris) este provocat de forme diferite ale ADNmt
i de variaia numrului i tipurilor de plasmide circulare, supraspiralate de ADN.
Genele mitocondriale coxII i atpA din liniile fertile i liniile sterile prezint deosebiri
n produsele de transcripie [56]. La una din ele se atest lipsa a dou polipeptide
mitocondriale cu masa molecular de 21 kDa i 32 kDa n genomul plantelor cu ASC.
Astfel, la majoritatea sistemele ASC caracterizate, se constat mutaii n regiunea
codicatoare a genelor mitocondriale pentru subunitile ATP-sintetazei, indicnd

29

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

asupra faptului, c dereglrile n activitatea ATP-sintetazei determin ASC la numeroase

plante de cultur [19].
ASC la oarea-soarelui (Helianthus annuus L.). Prima surs de ASC a fost
descoperit de Leclercq n 1969 [36] n urma ncrucirii interspecice dintre
Helianthus petiolaris i H. annuus. Datorit folosirii aproape exclusive a acestei surse
de androsterilitate pentru obinerea de semine hibride, toi hibrizii din cultur sunt
strns nrudii n baza citoplasmei. Eforturile n domeniul ameliorrii vizeaz n special
creterea variabiliti genetice a hibrizilor de oarea-soarelui, prin dezvoltarea de noi
sisteme ASC.
Se cunosc cel puin 62 de surse noi de ASC la oarea-soarelui. Multe din ele sunt
derivate din ncruciri interspecice, altele au aprut spontan n populaiile slbatice
de oarea-soarelui sau au fost obinute prin mutagenez.
Analiza citoplasmei PET1 la oarea-soarelui a relevat, c liniile androsterile se
deosebesc de analogii androfertili printr-o inversie de 11kb i o inserie de 5 kb, g. 2.
Datorit inversiei, orf 873 este translocat din poziia sa n faa genei cob, iar n poziia
orf 708 are loc inseria unde se creeaz un nou cadru de citire cu 522 de nucleotide orfH522 [58; 31]. Primii 19 aminoacizi codicai de aceast gen sunt identici cu gena
atp8 i prezint o protein de 15-16 kDa [43].

Fig. 2. Organizarea ADN-lui mitocondrial ancat de genele la liniile fertile i sterile

Boxele cu sgei marcheaz orientarea secvenelor invers repetitive 261 pb [34].

S-a constatat c regiunea rearanjat a ADN mitocondrial este ancat de repetiii

inverse de 261pb i prezint omologie cu unele secvene din ADN nuclear sau
mitocondrial [31] (g. 3).
Prezena a 57 de nucleotide de la orfH708 n aval de gena atpA, ca parte a orfH522
n liniile androstrile i a 223 pb din secvena codicatoare a regiunii 3 orfH708 de o
parte i de alta a inseriei de 5 kb demonstreaz faptul c inseria a avut loc n orfH708
dup inversia acestei regiuni. Datorit fenomenului de recombinare, cea mai mare
parte a orfH708 a fost deletat sau translocat n alt regiune a genomului mitocondrial
[71].

30

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

Fig. 3. Organizarea unei regiuni din ADN mitocondrial situat ntre atpA i cob la
liniile androsterile de H. annuus L. (BASO-ASC) [25]

Primele cercetri privind activitatea funcional a acestor dou orf-uri: H708 i

H873 din regiunea asociat cu ASC, au fost efectuate de Kohler n 1991 [24;31]. Astfel,
investigarea a 28 linii sterile i linii ferile n-a constatat prezena transcripilor n ARNul extras din plantulele etiolate
Spre deosebire de datele obinute la plantule etiolate, analizele efectuate de noi la
nivelul transcripilor din inorescen n fazele R1 i R2 ale dezvoltrii reproductive au
pus n eviden expresia orf 873 att la liniile fertile ct i sterile [11].
Spre deosebire de proteinele asociate cu androsterilitatea, unele plante, polipeptidul
de 16 kD codicat de orfH522 a fost detectat att n esuturile vegetative, ct i n
cele generative, rezultate care demonstreaz modul constitutiv i nu tisular specic
de expresie a genei respective [12]. Totui n orile de oarea-soarelui cu fertilitatea
restaurat, nivelul sintezei acestui polipeptid de 16 kD este mai redus, comparativ cu cel
pentru linia androsteril [43]. S-a constatat, c micorarea coninutului stoichiometric
al cotranscriptului atpA-orfH522 se datoreaz poliadenilrii, marcndu-l astfel ca
substrat - inta pentru ARN-aza2 [43]. Produsul genei nucleare de restaurare la nivel
post-transcripional destabilizeaz noul transcript mitocondrial, fenomenul avnd
specicitate tisular. Nu s-a observat editarea diferenial a orfH522 ca rezultat al
restaurrii fertilitii de ctre genele de restaurare [43].
Restaurarea fertilitii la liniile androsterile de oarea-soarelui este controlat de
aranjamente complexe de gene ce reacioneaz difereniat cu liniile ASC. Studiile de
transmitere a restaurrii fertilitii sunt puse n dicultate de genele complementare
existente n unele linii parentale femele, dar i de genele prezente n liniile de restaurare
a fertilitii.
Primele investigatii privind genele implicate n restaurarea fertilitii liniilor
androsterile de oarea-soarelui (linia T66006-2-1) i corelaiile existente ntre genele
corespunztoare aate in liniile androsterile respective au fost raportate de ctre Kinman
n 1970. Cercettorul a indicat prezena unei singure gene dominante de restaurare a
fertilitii Rf1 [30]. Puin mai trziu, s-a stabilit c pentru restaurarea fertilitii este
necesar nc o gen dominant complementar cu Rf1 gena Rf2. Astfel, au fost
obinute linii de plante homozigote Rf2Rf2 sterile cu citoplasma PET1. Vranceanu i
Stoenescu (1977) au determinat relaiile alelice ntre diferite surse de gene de restaurare
a fertilitii, demonstrnd c controlul genetic al restaurrii fertilitii polenului poate
determinat de aciunea cumulativ a 2 gene dominante non-alelice, cu un raport de
segregare de 9:6:1 (fertil/parial fertil /steril). Dominguez-Gimenez i Fick (1975) au

31

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

raportat prezena a 4 gene de restaurare ale fertilitii printre descendenii de tip slbatic
H.annuus i H.petiolaris, i a presupus c cel puin 2 alele dominante trebuie s e
prezente la unul din cei patru loci, pentru a exprimat complet restaurarea fertilitii
[10].
Cercetrile ntreprinse de Anashchenko, Cuco (1985) i Anashchenko, Duca
(1985a) au conrmat existena unui control genetic al restaurrii androfertilitii la
oarea-soarelui [73; 75].
Astfel, s-au studiat 40 de linii restauratoare de fertilitate la liniile androsterile cu
citoplasm PET1. S-a remarcat faptul c la 5 din ele restaurarea fertilitii este controlat
de 2 gene dominante, n timp ce la 4 linii restaurarea fertilitii este determinat de 2
gene dominante. De asemenea, n urma hibridrilor efectuate s-a descoperit c la liniile
androsterile cu citoplasma ANL1 i PET1 restaurarea fertilitii este controlat de 2 gene
nealele [74].
Actualmente, att prin analize hibridologice ct i marcare molecular au fost
identicate la oarea-soarelui patru gene restauratoare de fertilitate: Rf1 localizat n
grupul de linkage 6; Rf2 depistat n majoritatea liniilor fertile, inclusiv i n genotipurile
menintoare de sterilitate; Rf3 restaureaz fertilitatea la diverse surse ASC i este
diferit de Rf1; Rf4 identicat la linia H. maximiliani 1631, restaureaz fertilitatea la
ASC-GIG2 [44].
Analiza comparativ a genelor i proteinelor mitocondriale asociate cu
androsterilitatea citoplasmatic
n baza de Date National Center for Biotechnology Information (NCBI) au fost
identicate 21 de secvene asociate cu ASC aloplasmic (38,09%) i autoplasmic
(61,91%) la diferite specii de plante, inclusiv 14 din clasa Dicotiledonate (ordinele:
Brassicales, Asterales, Fabales, Caryophyllales, Solanales i Apiales) i 7 din clasa
Monocotiledonate (ordinul Poales). O varietate deosebit de tipuri de androsterilitate
se constat la plantele din familia Brassicaceae (care include ase specii cu ASC),
precum i la cele din familia Poaceae (apte specii).
Au fost identicate numeroase gene ASC, cu o structur diferit, neomoloage,
cu excepia:
la rapi, Brassica napus, orf222 responsabil de ASC nap i orf224 de ASCpol, posed o homologie de 79% la nivel nucleotidic [34];
la cereale, orf79 responsabil de ASC-Bo la orez i orf107 a citoplasmei de tip
3A responsabil de ASC la sorg, posed o identitate de 53% [61].
O caracteristic comun a acestor gene este transcrierea cu o gen mitocondrial
esenial. Transcriptului policistronic a fost identicat n toate cazurile de ASC
observate pn astzi. Lungimea orf-lor implicate n manifestarea androsterilitii
variaz n limitele de la 54 pb (caracteristic pentru orf77 al porumbului cu ASC-S),
pn la 1068 pb (caracteristic pentru orf355, specic pentru aceeai linie de porumb).
La toate orf-urile analizate codonul de iniiere este ATG. Codonul stop variaz la
diferite specii. Cel mai frecvent s-a atestat n calitate de codon stop TGA (utilizat cu
o frecven de 38,10%), urmat de TAA (33,33%) i de TAG (28,57%). S-a constatat
utilizarea codonului TGA, practic, la toate speciile genului Brassica, cu excepia
Brassica oleraceae ASC-ogu, la care acesta este substituit cu TAA. Acelai codon

32

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

TGA se utilizeaz la toate tipurile sterile de porumb cu excepia orf355, caracteristic

pentru ASC-S, care utilizeaz codonul TAG.
La majoritatea speciilor cercetate se observ o cantitate sporit de perechi de baze
adenin-timin (AT), valoarea medie a creia constituie 56,69, cu excepia orf263,
specic pentru Brassica tournefortii, la care coninutul de AT este mai mic comparativ
cu cel de guanin-citozin (GC). Coninutul de GC la cele 19 specii ale cror orf-uri au
fost cercetate a nregistrat valoarea medie de 43,31. Cantitatea maxim de AT a fost
atestat la orf138, caracteristic pentru Brassica oleracea CMS-ogu i Raphanus sativus,
nregistrnd valoarea de 64,75%, iar cea minim la orf263, de la Brassica tournefortii,
constituind 47,98%. Respectiv, cantitatea maxim de GC la orf236 (52,02%), iar
minim la orf138 (35,25%), de la aceleai specii.
n ceea ce privete coninutul procentual mediu al bazelor azotate, s-a atestat o
cantitate esenial de A (28,15%) i T (27,62%) i una mai mic de G (22,97%), i C
(21,25%). Valorile maxime i minime au fost cuprinse n limitele: pentru A de la
19,46% (orf77, Zea mays ASC-S) pn la 40,05% (orf138, Brassica oleracea ASC-ogu
i Raphanus sativus); pentru C de la 11,99% (orf138, Brassica oleracea ASC-ogu
i Raphanus sativus) pn la 26,60% (pvs-orf-1, Phaseolus vulgaris), pentru G de la
18,52% (pvs-orf-1, Phaseolus vulgaris) pn la 37,13% (orf77, Zea mays CMS S), iar
pentru T de la 19,76% (orf77, Zea mays ASC-S) pn la 31,00% (orf256, Triticum
aestivum).
Astfel, analiza bioinformatic a datelor a relevat o frecven nalt a dinucleotidelor
AA i TT, TC, AT, GA i GG i una redus la dinucleotidele CG, GC, CC, GT, etc. n
ce privete trinucleotidele, sunt mai des ntlnite TTT, AAA, CAA, TTC, ATT spre
deosebire de CGC, GAC, etc. Coninutul sporit de AT a acestor loci himeri asigur o
transcriere rapid i complet a mesajului ereditar, respectiv i sinteza polipeptidelor
alterate, toxice sau nespecice pentru celul, acumularea crora n citoplasm este
responsabil de inducerea androsterilitii.
Analiza secvenelor proteice codicate de locii himeri asociai cu ASC a demonstrat
valori ale lungimii ce variaz intre 77aa (orf77, Zea mays, ASC-S) pn la 355aa
(orf355, Zea mays, ASC-S) i dimensiuni incluse intre 8,8 kDa la orf79 (Oryza sativa)
i 39,8 kDa la orf355 (Zea mays, ASC-S).
Alte particulariti care pot evideniate includ:
valoarea PI, care a variat n limitele: de la 5,24 ( orf355, Zea mays, ASC-S),
pn la 10,45 (orf186-1, Zea mays, ASC-S);
majoritatea polipeptidelor cercetate conin o cantitate mare de aminoacizi
ncrcai pozitiv (arginin i lizin), n raport cu aminoacizii ncrcai negativ
(asparagin i glutamin) cu excepia orf355, orf263, orf456, orf256, ceea ce ar putea
favoriza integrarea proteinelor n membrana intern a mitocondriilor.
Studiul proprietilor chimice i a structurii primare a proteinelor codicate de locii
himeri asociai cu ASC a relevat un nivel nalt de similitudine al acestora, g. 4.
Generalizarea datelor privind analiza comparativ a genelor i proteinelor
mitocondriale asociate cu androsterilitate citoplasmatic indic:
un grad sporit de omologie a orfH522 cu subunitatea a 8-a a ATP-azei la Beta
vulgaris, mediu cu orfB la Beta vulgaris, Brassica juncea i Raphanus sativus i redus
cu orfB la Arabidopsis thaliana i orf222 la Brassica napus;

33

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

Fig. 4. Arborele
logenetic care reect
gradul de similitudine
a orfH522, caracteristic
pentru
Helianthus
annuus L., cu alte
locusuri din genomurile
diferitor specii, construit
n baza rezultatelor
analizei Blast.

un punct ancestral comun al subunitii a 8-a a ATP-azei i a orfB la Beta

vulgaris;
originea logenetic identic a orf B la A. thaliana, B. juncea i R. sativus;
distana ancestral seminicativ ntre orfH522 la H. annuus i orf222 la B.
napus, fa de punctul logenetic comun.
Bibliograa
1. Abad, A.R., Mehrtens, B.J., Mackenzie S.A. Specic expression in reproductive tissues
and fate of amitochondrial sterility associated protein in cytoplasmic male-sterile bean. Plant
Cell, 1995, vol. 7, p. 271285.
2. Akagi, H., Sakamoto, M., Shinjyo, C., Shimada, H., Fujimura, T. A unique sequence
located downstream from the rice mitochondrial atp6 may cause male-sterility. Curr. Genet.,
1994, 25, 5258.
3. Bailey-Serres, J., Dixon, L., Liddell, A., Leaver, C. Nuclear-mitochondrial interaction in
cytoplasmic male sterile sorghum. Theor. Appl. Genet., 1986a, 73, 252-260.
4. Bonhomme, S., Budar, F., Lancelin, D., Small, I., Defrance, M.F. and Pelletier, G.
Sequence and analysis of Nco2.5 Ogura-specic fragment correlated with male sterility in
Brassica cybrids. Mol. Gen. Genet., 1992, 235, 240248.
5. Bonnett, H.T., Kofer, W., Hakansson, G., Glimelius, K. Mitochondrial involvement
in petal and stamen development studied by sexual and somatic hybridizations of Nicotiana
species. Plant Sci., 1991, vol. 80, p. 119130.
6. Brown, G. Unique aspects of cytoplasmic male sterility and fertility restoration in Brassica
napus. J. Hered., 1999, vol. 90, p. 351356.
7. Chase, C. Expression of CMS unique and anking mitochondrial DNA sequences in
Phaseolus vulgaris L. Genet., 1994, vol. 25, p. 245-251.
8. Chen, Z. et al. A chloroplast DNA deletion located in RNA polymerase genes rpo C2 in
CMS lines of sorghum. Mol. Gen. Genet. 1993, vol. 236, p. 251-259.
9. Dewey, R.E. et al. A mitochondrial protein associated with cytoplasmic male sterility in
the T cytoplasm of maize. Proc. Nat l. Acad. Sci. USA, 1987, vol. 84, p. 5374-5378.
10. Dominquez, E., Fick, E. Fertility restoration of male sterile cytoplasmic in wild sunower.
Crop. Sci., 1975, vol. 15, nr.5, p.724-726.
11. Duca M., Port A. Transcript analyses for mitochondrial steril type rearrangement in
sunower. Romanian Biotechnological Letters, vol.13, nr.3, 2008, p.3701-3706.
12. Duca M., Port A., M. Orozco-Cardenas, C. Lovat. Gibberellin-induced gene expression

34

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

associated with cytoplasmic male sterility in Sunower. Bulgaria, Biotechnol. & biotechnol.
Equipment, 22, 2008, 2, p. 691-698.
13. Edwardson, J.R. Cytoplasmic male sterility//Botan. Rev, 1970, -V.36, -P.341-420.
14. Edwardson, J.R., Bond, D.A. Christie, R.G. Cytoplasmic sterility factors in Vicia faba
L. Genetics, 1976, 82, 443-449.
15. Gallagher, L.J., Betz, S.K., and Chase, C.D. Mitochondrial RNA editing truncates
a chimeric open reading frame associated with S male-sterility in maize. Curr. Genet.,
2002 42, 179184.
16. Glab, N., Wise, R.P., Pring, D.R., Jacq, C. & Slonimski, P. Expression in Saccharomyces
cerevisiae of a gene associated with cytoplasmic male sterility from maize: respiratory
dysfunction and uncoupling of yeast mitochondria. Mol Gen Genet, 1990, 223, 2432.
17. Grelon, M. et al. Ogura cytoplasmic male-sterility (CMS)-associated orf138 is translated
into a mitochondrial membrane polypeptide in male-sterile Brassica cybrids. Mol. Gen. Genet.,
1994, vol. 243, p. 540547.
18. Hanson, M.R. et al. Mitochondrial gene organization and expression in petunia male
fertile and sterile plants. American genetic association, 1999, vol. 90, p. 362368.
19. Hanson, M.R., Bentolila S. Interactions of mitochondrial and nuclear genes that affect
male gametophite development. The plant Cell., 2004, vol. 16, p. 154169.
20. Heazlewood, J.L., Howell, K.A., Millar, A.H. Mitochondrial complex I from Arabidopsis
and rice: orthologs of mammalian and fungal components coupled with plant-specic subunits.
Biochim Biophys Acta, 2003, 1604: 159169.
21. Hedgcoth, C. et al. A chimeric open reading frame associated with CMS in aloplasmic
wheat with Triticum timopheevi mitochondria is present in several Triticum and Aegilops
species, barley, and rye. Curr. Genet., 2002, vol. 41, p. 357365.
22. Holden, M. J. and Sze, H. Dissipation of the membrance potential in susceptible corn
mitocondria by the toxin of Helminthosporium maydis, race T, and toxin analogues. Plant.
Physiol., 1987, 84, 670-676.
23. Horlow, C., Defrance, M.C., Pollien, I.M, Goujaud L, Delon R., Pelletier G.
Transfer of cytoplasmic male sterility by spontaneous androgenesis in tobacco (Nicotiana
tabacum L.)// Euphytica, 1992, -V.66, Nr.1-2, -P.45 - 53.
24. Horn, R., Friedt, W. CMS sources in sunower: different origin but same
mechanism?Theor. Appl. Genet., 1999, 98:195-201.
25. Horn, R, Khler, R., and Zetsche, . A mitochondrial 16 kDa protein associated with
cytoplasmic male sterility in sunower; Plant Mol. Biol., 1991, 17, 2936.
26. Iwabuchi, M. et al. Identication and expression of Kosena radish (Raphanus sativus.
L. cv. Kosena) homologue of the ogura radish CMS-associated gene, ORF138. Plant Mol. Biol.,
1999, vol. 39, p. 183-188.
27. Iwabuchi, M., Kyozuka, J., Shimamoto, K. Processing followed by complete editing of
an altered mitochondrial atp6 RNA restores fertility of cytoplasmic male sterile rice. EMBO J.,
1993, vol. 12, p. 14371446.
28. Kadowaki, K.I., Suzuki, T. A chimeric gene containing the 5` portion of atp 6 is associated
with cytoplasmic male sterility of rice. Mol. Gen. Genet., 1990, vol. 224, p. 10-16.
29. Kaul, M. Male sterility in higher plants. -In.: Monographs on Theoretical and
Applied Genetics. 1988, Springer-Verlag, Berlin, -P.705-710.
30. Kinman, M. New developments in the USDA and state experiment station sunower
breeding proghrams. Proc. Fourth Int. Sunower Conference. U.S.A., Memphis Tennessee,
1970, p. 181-183.
31. Kohler, R.H. et al. Cytoplasmic male sterility in sunower is correlated with the co
transcription of a new open reading frame with the atpA gene. Mol. Gen. Genet., 1991, vol. 227,
nr. 3, p. 369376.

35

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

32. Korth, K., Kaspi, C., Siedow, J., Levings, C. URF13, a maize mitochondrial pore-forming
protein is oligomeric and has a mixed orientation in E.coli plasma membranes. Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 1991, 88, 10865-10869.
33. Korth, K. and Levings, C. Baculovirus expression of the maize mitocondrial protein
URF13 confers insecticidal activity in cell cultures and larvae. Proc. Natl. Acad. Sci. USA,
1993, 90, 3388-3392.
34. LHomme, Y. et al. Brassica nap cytoplasmic male sterility is associated with expression
of a mtDNA region containing a chimeric gene similar to the pol CMS associated orf224 gene,
Curr. Genet., 1997, 31, 325335
35. Landgren, M. et al. Aloplasmic male-sterile Brassica lines containing B. tournefortii
mitochondria express an ORF 39 of the atp6 gene and a 32 kDa protein. Plant Mol. Biol., 1996,
vol. 32, p. 879890.
36. Leclercq, P. Une strilit mle chez le tournesol. Ann. Amlior Plantes, 1969,
19: 99-106.
37. Lefebvre, A., Scala, R., Pfeifer, . Double stranded RNA associated with the 447
cytoplasmic male sterility in Vicia faba is packaged together with it replicase in cytoplasmic
membraneous vesicles. Plant. Mol. Biol., 1990, vol. 14, p. 477-490.
38. Levings, III C. S. and Dewey, R. . Molecular studies of cytoplasmic male sterility in
maize; Philos. Trans. R. Soc. London B319, 1988, 177-185.
39. Lin, S. and Yuan, L. Hybrid rice breeding in China. In IRRI (ed.), Innovative Approaches
to Rice Breeding, IRRI, Manila, Philippines, 1980, p.35-51.
40. Makaroff, C.A, Apel, I.J., Palmer, J.D. The atp6 coding region has been disrupted and a
novel reading frame generated in the mitochondrial genome of cytoplasmic male-sterile radish.
J. Biol. Chem., 1989, vol. 264, p. 11706-11713.
41. Makaroff, C. A., Apel, I., Palmer, J. The role of cox I associated repeated sequences in
plant mitochondrial DNA rearrangements and radish cytoplasmic male sterility. Curr. Genet.,
1991, 19, 183190.
42. Mariani, C. et al. Induction of male sterility in plants by a chimeric ribonuclease gene;
Nature (London), 1990, vol. 347, p. 737-741.
43. Moneger, F., Smart, C., Leaver, C. Nuclear restoration of citoplasmic male sterility in
sunower is associated with the tissuespecic regulation of a novel mitochondrial gene., The
EMBO Journ., 1994, vol. 13, nr. 1, p. 817.
44. Midoni, A. Identicarea i expresia unor gene (RF) la oarea-soarelui (Helianthus
annuus L.). Autoreferatul tezei de doctor n biologie. Chiinu, 2010, 29 p.
45. Newton, K.J. Plant mitochondrial genomes: organization, expression and variation.
Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology, 1988, vol. 39, p. 503532.
46. Nivison, H., Sutton, C., Wilson, R., Hanson, M. Sequencing, processing, and localization
of the petunia CMS-associated mitochondrial protein. Plant J., 1994, 5, 613623.
47. Notsu, Y., Masood, S., Nishikawa, T., Kubo, N., Akiduki, G., Nakazono, M., Hirai, A.,
Kadowaki, K. The complete sequence of the rice (Oryza sativa L.) mitochondrial genome:
Frequent DNA sequence acquisition and loss during the evolution of owering plants. Mol.
Genet. Genomics, 2002, 268, 434445.
48. Paillard, M., Sederoff, R., Levings, C. III. Nucleotide sequence of the S-1 mitochondrial
DNA from the S cytoplasm of maize EMBO J., 1985, 4: 11251128.
49. Pour, A. K., Gracen, V. ., Everett, . L. Genetics of fertility restoration in the C group
of cytoplasmic male sterility in maize. Genetics, 1981, 98, 379-388.
50. Pring, D., Levings, III C., Hu, W., Timothy, D. Unique DNA associated with
mitochondria in the S type cytoplasm of male sterile maize, Proc. Natl Acad. Sci. USA, 1977, 74,
2904-2908.
51.Pring, D. R., Van-Tang H. Mitochondrial atp6 transcript editing during microgametogenesis

36

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

in male-sterile sorghum. Curr. Genet., 2001, vol. 39, p. 371376.

52. Prioli, L. et al. The plant mitochondrial open reading frame orf221 encodes a membrane
bound protein. Plant Mol. Biol., 1993, vol. 23, p. 287295.
53. Rottmann, W.H. et al. A mitochondrial gene is lost via homologuous recombination
during reversion of cms T maize to fertility; EMBO J., 1987, vol. 6, p. 1541-1546.
54. Schmulling, T., Schell, J., Spena, A. Single genes from Agrobacterium rhizogenes
inuence plant development; EMBO J., 1988, vol. 7, p. 2621-2629.
55. Schnable, P. S., Wise, R. The molecular basis of cytoplasmic male sterility and fertility
restoration. Trends in plant science, 1998, Vol. 3, No. 5, 175-180.
56. Senda, M. et al. Genomic organization and sequence analysis of the cytochrome oxidase
subunit II gene from normal and male sterile mitochondria in sugar beet. Curr. Genet., 1991,
vol.19, p. 175-181.
57. Shinjyo, C. Genetical studies of cytoplasmic male sterility and fertility restoration in
rice, Oryza sativa L. Sci. Bull. Coll. Agr. Univ. Ryukyus, 1975, 22: 1-57.
58. Sicullela, L., Palmer, J. Physical and gene organization of mitochondrial DNA in Fertile
and Male Sterile sunower. CMS-associated alteration in structure and transcription of the atpA
gene. University of Michigan, 1988, vol. 16. nr. 9, p. 3787-3797.
59. Singh, M., Brown, G.G. Suppression of Cytoplasmic Male Sterility by Nuclear
Genes Alters Expression of a Nove1 Mitochondria Gene Region. The Plant Cell, 1991,
vol. 3, p. 1349-1362.
60. Singh, M. et al. Nuclear genes associated with a single Brassica CMS restorer
locus inuence transcripts of three different mitochondrial gene regions. Genetics, 1996,
vol. 143, p. 505516.
61. Tang, H.V. et al. Transcript processing internal to a mitochondrial open reading frame is
correlated with fertility restoration in male-sterile sorghum. Plant J., 1996, vol. 10, p.123133.
62. Tang, H.V., Chen, W., and Pring, D. Mitochondrial orf107 transcription, editing, and
nucleolytic cleavage conferred by the gene Rf3 are expressed in sorghum pollen. Sex. Plant
Reprod., 1999, 12, 5359.
63. von Allmen, J.M., Rottmann, W.H., Gengenbach, B.G., Harvey, A.J., and Lonsdale,
D.M. Transfer of methomyl and hmt-toxin sensitivity from T-cytoplasm maize to tobacco. Mol.
Gen. Genet., 1991, 229, 405412.
64. Vrnceanu, A., Stoenescu, F. Studii de lincaje ntre gene ms i diferite gene marcher la
oarea soarelui //Ann ICCPT - Fundulea, 1977, -V.XLII, -P.15-21.
65. Wang, Z. et al. Cytoplasmic Male Sterility of Rice with Boro II Cytoplasm Is Caused
by a Cytotoxic Peptide and Is Restored by Two Related PPR Motif Genes via Distinct Modes of
mRNA Silencing. Plant Cell, 2006, vol. 18, nr. 3, p. 676687.
66. Werren, J., Beukeboom, L. Sex Determination, Sex Ratios and Genetic Conict. Ann.
Rev. Ecol. & Systematics, 1998, 29:233-261.
67. Williams, . . and Levings, III C. S. Molecular biology of cytoplasmic male sterility, in
Plant breeding reviews (ed.) J Janick (New York: John Wiley), 1992, Vol. 10, p. 23-51.
68. Witt, U., Hansen, S., Albaum, ., Abel, W. Molecular analysis of the CMS inducing
Polima cytoplasm of Brassica napus. Curr. Genet., 1991, 19, 323-327.
69. Young, E.G., and Hanson, M.R. A fused mitochondrial gene associated with cytoplasmic
male sterility is developmentaly regulated. Cell, 1987, vol. 50, nr. 1, p. 4149.
70. Zabala, G. et al. The nuclear gene Rf3 affects the expression of the mitochondrial
chimeric sequence R implicated in S-type male sterility in maize. Genetics, 1997,
vol. 147, p. 847860.
71. Zetsche, K. and Horn, R. Molecular analysis of cytoplasmic male sterility in sunower
(Helianthus annuus L.). In Brennicke, A. and Kuck, U. (eds), Plant Mitochondria. VCH,
Weinheim, 1993, vol. 42, p. 411-422.

37

Buletinul AM. tiinele vieii. Nr. 1 (316) 2012

Articole de fond

72. Zhang, G., Bharaj, T. Lu, Y. Virmani, S., Huang, N. Mapping of the Rf-3 nuclear fertilityrestoring gene for WA cytoplasmic male-sterility in rice using RAPD and RFLP markers. Theor
AppI Genet., 1997, 94: 27-33.
73. , ., , . -Rf
(Helianthus annuus L.). . II.
. .-1985a.-. 21, 12.- . 1999-2004.
74. , ., , . -Rf
(Helianthus annuus L.). . III.
1. .-1985b.-. 21, 12.- . 2005-2010.
75. , ., , . -Rf
(Helianthus annuus L.). . I.
. .-1985.-.21, 5.-. 803-808.
76. , .., , .., , .., , .
Nicotiana (Hyoscyamus) Nicotiana (Scopolia)
//, 1995, -.31,
N10, - .1404-1412.
77. , ., , . .
. i i i i, i
ii, 2007, . 2 (11), . 18-23.

SEMNIFICAIA APEI N COORDONAREA I INTEGRAREA

FUNCIILOR PLANTEI N CONDIII DE SECET.
tefr Anastasia
Institutul de Genetic i Fiziologie a Plantelor al Academiei de tiine a Moldovei
Rezumat
Sinteza informaiei din literatur demonstreaz, c procesele care asigur relaiile
interactive dintre organe sunt asociate cu autoreglarea funciilor i meninerea unui
echilibru dinamic al acestora. n procesul adaptrii se realizeaz o unitate indisolubila
a plantei cu mediul ambiant. Apa unete toate prile componente ale organismului,
ncepnd cu moleculele i terminnd cu esuturile i organele, ntr-un tot unic; pare a
unica substan n plant, care adecvat poate ndeplini funciea tripl de reglare a
creterii, reglare a activitii metabolice i integrare a structurii i funciilor la toate
nivelurile de organisare. Cauza principal a dereglrii integritii funcionale n condiii
de secet este perturbarea mediului lichid intern, relaiilor donator-acceptor i schimbrii
gradienilor apei ntre organe, inhibrii reaciilor metabolice i biosintezelor. n condiii
de secet apei -i revine locul central n coordonarea i meninerea integritii funciilor.
Cuvinte-cheie: autoreglare - coordonare integrare adaptare
Depus n redacie 20 aprilie 2012
--------------------------------------------------------------------------------------------------------Adresa pentru coresponden: tefr Anastasia, Institutul de Genetic i Fiziologie
a Plantelor al Academiei de tiine a Moldovei, str. Pdurii, 20, MD-2002 Chiinu,
Republica Moldova, e-mail: anastasia.sterta@gmail.com, tel: (+373 22) 53 59 90

Seceta, prin insuciena de ap n sol i/sau atmosfer, temperatur i iradiaie

nalte, este cel mai alarmant factor ce limiteaz productivitatea i stabilitatea recoltei
n ntreaga lume. n deosebi de afectate sunt plantele cnd seceta se suprapune pe fond

38