1

PERBANYAKAN CEPAT TANAMAN NILAM

(pogostemon cablin Benth.)
SECARA KULTUR JARINGAN

Denny Sobardini, Erni Suminar, Murgayanti

Laboratorium Kultur Jaringan Teknologi Benih Fakultas Pertanian
Universitas Padjadjaran

ABSTRAK

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan Teknologi Benih Fakultas

Pertanian Universitas Padjadjaran sejak bulan Maret 2006 sampai dengan Nopember 2006
Perlakuan dengan penggunaan dua jenis eksplan pada medium MS dengan penambahan BAP
(0; 0.5, dan 1 mg/L) dan NAA (0, 0.01, dan 1 mg/L). Jumlah perlakuan adalah 18 perlakuan,
setiap ulangan diulang sebanyak 3 kali. Metode percobaan yang digunakan adalah Rancangan
Acak Lengkap.
Penggunaan eksplan mata tunas pada media MS dengan penambahan 1 mg/L BAP dan
0.01 mg/L NAA menghasilkan rata-rata jumlah tunas tertinggi mencapai 61 buah tunas per
eksplan., sedangkan penggunaan eksplan pucuk pada media MS dengan penambahan 1 mg/L
BAP dan 0.01 mg/L NAA menghasilkan rata-rata jumlah tunas tertinggi mencapai 19.67 buah
tunas per eksplan.

MULTISHOOTGROWTH OF MELON (Cucumis melo L.)

Kv. ACTION-434 WITH THE USE OF Indole-3-acetic acid (IAA)
AND 6-Benzylaminopurine (BAP).

Denny Sobardini, Murgayanti, Erni Suminar

Tissue Culture Laboratory of Seed Technology Agriculture Faculty
Padjadjaran University

ABSTRACT

The experiment was carried out at Tissue Culture Laboratory of Seed Technology
Agriculture faculty, Padjadjaran University from March 2005 to November 2005.
Culture of shoot tips proliferated on medium MS with the use of IAA
(0; 3; 6;
dan 9 M) dan BAP (0; 3; 6; dan 9 M). The experimental design used a completely
Randomized Design with factorial pattern, consisted of two factors and three replication.
The result experiment showed that there was interaction between IAA and BAP for
formation of callus, leaf and number of roots. But there werentt interaction between IAA and
BAP for formation of roots, number of shoot, and number of leaves.

BAB I
PENDAHULUAN

Nilam (Pogostemon sp.), termasuk familia Labiatae dan umumnya dikenal dengan
nama patchouli, tumbuh berupa semak setinggi kurang lebih 1 m, baik di dataran tinggi
maupun di dataran rendah. Di Indonesia dikenal 3 jenis nilam, yaitu P. cablin disebut Nilam
Aceh, P. heyneanus disebut Nilam Jawa, dan P. hortensis disebut Nilam Sabun (Guether,
1952).
Tanaman nilam merupakan tanaman perdu wangi berdaun halus dan berbatang
segiempat. Daun kering tanaman ini disuling untuk mendapatkan minyak nilam (Patchouli
oil) yang banyak digunakan di berbagai kegiatan industri. Fungsi utama minyak nilam sebagai
bahan baku pengikat (fiksatif) dari komponen kandungan utamanya, yaitu patchouli alcohol
(C15H26) dan sebagai bahan eteris untuk parfum agar aroma keharumannya bertahan lebih
lama. Selain itu minyak nilam digunakan sebagai bahan campuran produk kosmetika
(diantaranya untuk pembuatan sabun), pasta gigi, sampo, lotion dan deodorant), kebutuhan
industri makanan diantaranya pembuatan obat anti radang, anti fungi, anti serangga,
afrodisiak, anti inflamasi, anti depresi, anti flogistik serta dekongestan), kebutuhan
aromaterapi serta berbagai kebutuhan industri lainnya. Minyak nilam dapat dicampur secara
baik dengan minyak atsiri lainnya seperti minyak cengkeh, geranium, akar wangi, minyak
cassia. Aroma minyak nilam sangat kaya, terkesan rasa manis, hangat dan menyengat. Aroma
tetap terasa manis sampai seluruh minyak menguap (Azmi Dhalimi, dkk., 1998).
Nilam merupakan tanaman atsiri yang cukup penting peranannya, baik sebagai sumber
devisa negara, maupun sebagai sumber pendapatan petani. Ekspor minyak nilam mencapai
700 1 500 ton, dengan nilai devisa US$ 14 30 juta. Laju peningkatan ekspor dalam 10

tahun terakhir mencapai 6% tiap tahun (Hobir, dkk., 1998). Dengan volume tersebut pada saat
ini Indonesia merupakan produsn minyak terbesar di dunia dengan kontribusi 90%.
Sebagai sumber pendapatan, petani tanaman nilam cukup penting peranannya di
berbagai daerah produksi. Berdasarkan data BPEN (NAFED, 1993), di Indonesia terdapat 14
sentra produksi yang tersebar di 4 propinsi. Daerah penghasil minyak nilam terbesar di
Indonesia adalah DI Aceh, dengan kontribusi sekitar 50% terhadap produksi nasional
(Mulyodihardjo, 1990).
Minyak nilam merupakan produk yang terbesar untuk minyak atsiri dan pemakaiannya
di dunia menunjukkan kecenderungan yang semakin meningkat. Dapat dikatakan bahwa hingga
saat ini belum ada produk apapun baik alami maupun sintetis yang dapat menggantikan minyak
nilam dalam posisinya sebagai fixative. Data ekspor BPS menunjukkan bahwa kontribusi minyak
nilam (Patchouli oil) terhadap pendapatan ekspor minyak atsiri sekitar 60%, minyak akar wangi
(Vetiner oil) sekitar 12,47%, minyak serai wangi (Citronella oil) sekitar 6,89%, dan minyak jahe
(Ginger oil) sekitar 2,74%. Rata-rata nilai devisa yang diperoleh dari ekspor minyak atsiri selama
sepuluh tahun terakhir cenderung meningkat dari US$ 10 juta pada tahun 1991 menjadi sekitar
US$ 50-70 dalam tahun 2001, 2002 dan 2003, dengan nilai rata-rata/kg sebesar US$ 13,13.
Walaupun secara makro nilai ekspor ini kelihatannya kecil namun secara mikro mampu
meningkatkan kesejahteraan petani di pedesaan yang pada gilirannya diharapkan dapat
mengurangi gejolak sosial (Krismawati, 2005).

Nilam aceh (Pogostemon cablin Benth atau Pogostemon patchouli) merupakan

tanaman standar ekspor yang direkomendasikan karena memiliki aroma khas dan rendemen
minyak daun keringnya tinggi, yaitu 2.5 5% dibandingkan dengan jenis lain (Nuryani,
1998).

Perbanyakan nilam secara konvensional dapat dilakukan melalui stek batang atau
cabang, dan stek pucuk. Stek batang atau cabang diambil dari batang atau cabang yang telah
mengayu, stek dapat langsung ditanam di lapangan atau diakarkan lebih dahulu. Stek yang
ditanam, biasanya mengandung sedikitnya 4 ruas (Rusli dan Hobir, 1990).
Bahan tanaman nilam yang hanya dapat diperbanyak secara vegetatif (stek)
digunakan petani adalah asalan diambil dari kebun tetangga tanpa diketahui dengan pasti
mutunya yang antara lain potensi produksi, rendemen minyak, kadar alkohol, indeks bias,
kadar asam, ketahanan terhadap hama dan penyakit (Djisbar dan Seswita, 1998), sehingga
untuk mengantisipasi efek perdagangan global yang ditandai oleh kompetisi yang semakin
ketat, diperlukan usaha yang intensif untuk memacu penemuan varietas unggul tanaman nilam
ini penting dan sangat strategis, selain itu produksi bibit dalam jumlah yang besar dalam
waktu yang relative singkat perbanyakan tanaman dapat dilakukan melalui kultur jaringan.
Perbanyakan tanaman nilam telah dilakukan secara kultur jaringan yang meliputi kegiatan
laboratorium (inisiasi, multiplikasi tunas dan perakaran) dan kegiatan di rumah kaca
(aklimatisasi). Bibit yang dihasilkan melalui kultur jaringan mempunyai kelebihan
diantaranya bebas penyakit dan proses produksi lebih cepat serta faktor multiplikasi cukup
tinggi yaitu

(1: 50 100) per bulan (Mariska, dkk. 1997).

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

Kultur jaringan adalah suatu metode untuk mengisolasi bagian tanaman seperti
protoplasma sel, jaringan dan organ serta menumbuhkannya dalam kondisi aseptik sehingga
bagian-bagian tersebut dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman lengkap
(Livy Winata Gunawan, 1988).
Pada dekade 1970-an banyak sekali penelitian yang dipublikasikan tentang
perbanyakan tanaman melalui kultur pucuk, dan mulai digunakan untuk tujuan komersial.
Ada beberapa faktor penyebab digunakannya kultur pucuk adalah : (Wattimena, 1992)
metode kultur pucuk dapat diterapkan pada berbagai jenis tanaman dengan memakai
prinsip yang sama
memungkinkan untuk mengontrol tunas yang dihasilkan bebas virus
tanaman yang dihasilkan secara genetik seragam dan true to type
pada banyak tanaman, laju perbanyakannya lebih tinggi
Keberhasilan kultur jaringan sangat ditentukan oleh media yang digunakan. Media
kultur jaringan harus mengandung bahan-bahan penting, yaitu garam-garam anorganik,
senyawa-senyawa organik, dan persenyawaan organik komplek. Garam-garam anorganik
menyediakan

unsur-unsur

hara

makro

(N,P,K,Ca,Mg, dan

S)

dan

unsur

mikro

(Fe,Mn,Zn,B,Cu, dan Co). Senyawa organik yang sering ditambahkan adalah vitamin, zat
pengatur tumbuh, dan senyawa organik alami seperti sari buah tomat, sari buah jeruk, air
kelapa dan sari buah pisang (Livy Winata Gunawan, 1988).
Dalam kultur jaringan dua golongan zat pengatur tumbuh yang sangat penting adalah
sitokinin dan auksin. Zat pengatur tumbuh ini mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis

dalam kultur sel, jaringan dan organ. Penggunaan BAP 0.5 ppm yang dikombinasikan dengan
NAA 0.1 ppm, menghasilkan jumlah tunas per kultur tertinggi (15.7 buah) pada eksplan
shoot tip Ixora fulgens Roxb. Interaksi dan perimbangan antara zat pengatur tumbuh yang
diberikan dalam medium dan yang diproduksi oleh sel secara endogen menentukan arah
perkembangan suatu kultur.
Menurut Gamborg dan Shyluk (1981) serta Pierik (1987) keberhasilan kultur jaringan
dipengaruhi oleh zat pengatur tumbuh tanaman, nutrisi, dan sumber eksplan yang digunakan
serta lingkungan fisik kultur jaringan tersebut. Regulasi organogenesis dan metabolisme
sekunder lebih bergantung pada hara mineral.
Faktor bahan tanaman yang turut menentukan keberhasilan kultur jaringan antara lain
genotipe tanaman, umur eksplan, status fisiologi, ukuran eksplan dan sumber eksplan (Pierik,
1987).
Pada tanaman herba, eksplan diambil baik dari pucuk apikal maupun lateral yang
mengambil jaringan meristematik namun sering kali digunakan mata tunas yang diharapkan
akan berkembang membentuk daun dan batang sempurna. Bagian tanaman yang digunakan
sebagai eksplan adalah tunas lateral atau terminal yang panjangnya kurang lebih 20 mm.
Pengaruh dominansi apikal dapat dihilangkan dengan menambahkan zat pengatur tumbuh
(terutama sitokinin) kedalam medium. Sebagai hasilnya adalah tunas dengan jumlah cabang
yang banyak (Wattimena, 1992).

BAB III
TUJUAN DAN MANFAAT PENELITIAN

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk melihat pengaruh pemberian zat pengatur
(auksin dan sitokinin) terhadap pertumbuhan berbagai jenis eksplan tanaman nilam untuk
tujuan perbanyakan.
Hasil penelitian ini sangat bermanfaat untuk perbanyakan bibit nilam bermutu tinggi
dalam jumlah banyak dan dalam waktu singkat. Penelitian ini dapat menunjang program
pemerintah dalam penyediaan bibit nilam bermutu untuk memenuhi permintaan pasar di
dalam dan luar negeri.

Dalam kultur jaringan panili, zat pengatur tumbuh yang sangat penting adalah auksin
dan sitokinin (Hadipoentyanti, 1999). Zat pengatur tumbuh ini berfungsi sebagai faktor
pemicu yang dapat mempercepat proses pertumbuhan dan morfogenesis. Zat pengatur tumbuh
diperlukan sebagai komponen media bagi pertumbuhan dan diferensiasi. Tanpa penambahan
zat pengatur tumbuh dalam media, pertumbuhan terhambat, bahkan mungkin tidak tumbuh
sama sekali (Pierik, 1987).
Sitokinin penting dalam pengaturan pembelahan sel, morfogenesis dan banyak
berperan dalam mengatur organogenesis, pembentukan tunas, mendorong proliferasi
meristem ujung, menghambat pembentukan akar, mendorong pembentukan klorofil (Evans
dan Sharp, 1981; Tisserat, 1986; Basri dan Muslimin, 2001). Jenis sitokinin yang digunakan
dalam kultur jaringan, yaitu kinetin (6-furfuryl amino purine), zeatine (4-hydroxyl-3-metyltrans-2-butenyl amino purine), BAP/BA (6-benzyl amino purine/6-benzyl adenine),

Thidiazuron (N-phenyl-N-1,2,3-thiadiazol-5-tl-urea). (Santoso dan Nursandi, 2004). Rumus

bangun BAP pada gambar 2.2.
Auksin membantu meningkatkan pertumbuhan akar dikarenakan dapat menginduksi
sekresi ion H+ keluar melalui dinding sel, pengasaman dinding sel menyebabkan K+ diambil
dan pengambilan ini mengurangi potensial air dalam sel. Akibatnya air masuk ke dalam sel
juga mendorong enzim sellulase memotong-motong ikatan selulosa pada dinding primer
hingga dinding elastis dan sel membesar (Gunawan, 1988;) auksin juga digunakan untuk
merangsang kalus, suspensi sel dan organ, mendorng proses morfogenesis kalus membentuk
aar dan tunas, mendorong proses embriogenesis, mempengaruhi kestabilan genetik tanaman.
Jenis auksin sintetik yang digunakan dalam kultur jaringan, yaitu IAA (Indole Acetic Acid),
2,4-D (2,4-dichlorophenoxy acetic acid), NAA (napthalene Acetic Acid), IBA

(Indole

Butyric Acid), Dicamba (3,6-Dichloro Anisic Acid),dan Picloram (4-Amino-3,5,6,-Trichloro

Picolinic Acid) (Santoso dan Nursandi, 2004). Rumus bangun NAA pada gambar 2.2.

(a)

(b)

Gambar 2.2 Rumus bangun zpt (a) BAP (b) NAA

(Sumber : George dan Sherrington,1984)

Seswita et al., (1993) dalam Seswita et al., (2001) menyatakan bahwa media
MS dan zat pengatur tumbuh BAP 0,8 mg/l dalam perbanyakan tanaman obat langka

Roufolvia serpentine memberikan jumlah tunas terbanyak. Penelitian

Hadipoentyanti dan

Udarno (1999) pada panili hibrida, menghasilkan tunas terbanyak pada kombinasi media
MS+BA 0,5 mg/l dan menunjukkan viabilitas yang lebih baik, hal tersebut didukung oleh
penelitian Seswita et al., (2001) dengan penambahan

BAP 0,5 mg/l hingga 2,5 mg/l pada

media MS memperlihatkan hasil yang tidak berbeda nyata dan terbaik untuk mutiplikasi tunas
panili karena BAP merupakan zat pengatur tumbuh dari golongan sitokinin yang sangat
berperan dalam pengaturan pembelahan sel, morfogenesis, dan merangsang pembentukan
tunas.
Panili yang ditumbuhkan secara in vitro pada media MS dengan penambahan
zat pengatur tumbuh BAP 0,5 mg/l memperlihatkan multlipikasi tunas terbanyak, dengan
jumlah tunas berkisar 20 dan tinggi tunas mencapai 10 cm dengan jumlah daun 14 lembar
serta warna daun hijau. Media perakaran yang terbaik, media MS dengan penambahan NAA
0,3 mg/l dengan jumlah akar 9 dan panjang akar 9 cm, serta warna akar putih sampai hijau
muda (Hadipoentyanti, 1999).
Hayati (1992) dalam Seswita et al., (1996), pada kultur maristem nilam
mendapatkan bahwa media MS yang diberi BA 0,5-1,0 mg/l menghasilkan tanaman dengan
multiplikasi yang tinggi, pemanjangan meristem, jumlah daun terbanyak, bobot basah
terberat.
Salah satu zat pengatur tumbuh dari golongan sitokinin yaitu BAP sering digunakan untuk
penggandaan (multiplikasi) tunas pada kultur in vitro. Multiplikasi tunas dapat dirangsang
dengan penambahan zat pengatur tumbuh golongan sitokinin seperti benzilaminopurin,
kinetin, zeatin (Stepper dan Heuser, 1986 dalam

Seswita, et al., 2001). Menurut Gunawan

(1988) untuk merangsang ploriferasi tunas pada tanaman umumnya menggunakan konsentrasi

sitokinin yang lebih tinggi dari konsentrasi auksin. Tanpa penambahan zat pengatur tumbuh
dalam media, pertumbuhan menjadi terhambat, bahkan mungkin tidak tumbuh sama sekali.
Perakaran tanaman dapat dirangsang oleh zat pengatur tumbuh golongan
auksin yang secara luas juga digunakan untuk merangsang pertumbuhan kalus dan
meningkatkan pertumbuhan akar (Gunawan, 1988).

2.3.3 Zat Pengatur Tumbuh

Zat pengatur tumbuh tanaman adalah senyawa organik bukan hara, yang dalam jumlah
sedikit dapat mendukung, menghambat dan dapat merubah proses fisiologi tumbuhan
(Sriyanti dan Wijayani, 1994).
Zat pengatur tumbuh dapat ditambahkan ke dalam media kultur jaringan yang
berfungsi untuk merangsang pertumbuhan antara lain pertumbuhan tunas dan akar. Zat
pengatur tumbuh yang sering ditambahkan ke dalam medium kultur jaringan adalah sitokinin
dan auksin.
zat pengatur tumbuh yang sering digunakan dalam medium kultur jaringan adalah
sitokinin. Sitokinin ditambahkan dalam medium untuk menginduksi pembelahan sel,
pembentukan tunas, dan perbanyakan tunas aksiler (Torres, 1989).

10

Sitokinin yang sering digunakan di antaranya adalah BAP/ BA (6-Benzylamino purin/

6-Benzyladenin)

Gambar 4. Rumus Bangun BAP (Benzil Amino Purin)

(George dan Sherrington, 1984)

Penelitian yang menggunakan BAP untuk merangsang pembentukan tunas antara lain
penelitian yang dilakukan oleh Hadipoentyanti dan Udarno (2000) pada tanaman panili
hibrida menghasilkan tunas terbanyak pada kombinasi media MS + BA 0,5 mg/l. Hasil yang
sama juga didapatkan dari penelitian Geetha et al.,( 2000). Multiplikasi panili pada media
MS dengan penambahan BA 2,5 mg/l menghasilkan tunas terbanyak yaitu 9,66 tunas (Seswita
et al., 2001).
Penelitian lain penggunaan BAP yaitu penelitian Mariska et al., (1987) pada kultur
tunas Geranium yang menunjukkan benzil adenin (BA) 2 mg/l dapat membentuk tunas
majemuk lebih banyak. Percobaan perbanyakan tunas Ixora fulgens telah berhasil pada media
MS dengan penambahan BAP 0,5 mg/l (Amin et al., 2002).
Selain sitokinin, auksin merupakan zat pengatur tumbuh yang juga sering
ditambahkan ke dalam medium kultur jaringan untuk menginduksi pertumbuhan kalus dan
untuk mengatur morfogenesis diantaranya pembentukan akar, tunas dan embriogenesis. Salah

10

11

satu auksin sintetis yang sering digunakan dalam kultur jaringan adalah NAA (-Naphthalene
Acetic Acid) (George & Sherrington, 1984).
NAA memiliki kemampuan untuk menginduksi akar, kalus, dan tunas. NAA juga
memiliki sifat yang lebih stabil karena tidak mudah terurai oleh enzim yang dikeluarkan oleh
tanaman atau pemanasan dalam proses sterilisasi medium (Gamborg & Wetter, 1975 dalam
Sriyanti & wijayani, 1994).

Gambar 5. Rumus Bangun NAA (-Naphtaleneacetic acid)

(George dan Sherrington, 1984)

Penelitian yang menggunakan NAA untuk merangsang perakaran antara lain

penelitian yang dilakukan oleh Seswita et al., (2001) pada perbanyakan panili dengan media
MS dan penambahan NAA 0,3 mg/l menghasilkan jumlah akar terbanyak yaitu 4,83 buah dan
panjangnya 9, 66 cm. Penelitian yang sama juga dilakukan oleh Ravisankar et al., (2001)
dengan penambahan NAA 0,2 menghasilkan akar terbanyak.
Penelitian penggunaan NAA lainnya yaitu penelitian yang dilakukan Taklukder et al., (2003)
pada multiplikasi Dendrobium dengan media MS dan penambahan NAA 0,5 mg/l
menghasilkan akar, pertambahan panjang akar dan jumlah daun terbanyak. Perbanyakan akar
Ixora fulgens telah berhasil juga dengan penambahan NAA 0,2 mg/l pada media MS
(Amin et al., 2002).

11

12

Respon pertumbuhan, adaptasi, diferensiasi, morfogenesis dan perekembangan pada tanaman

lebih banyak ditentukan oleh tingkat kepekaan sel dari pada tingkat konsentrasi hormonalnya
dalam sel (Anthony J. Trewas).
-

Hormon harus ada dalam jumlah yang cukup dalam sel yang tepat
Hormon harus dikenali dan diikat erat oleh setiap kelompok sel yang tanggap terhadap
hormon (sel sasaran yang peka/ sel target)
Diperlukan protein penerima (pengikat hormon) yang dapat menyebabkan perubahan
metabolik lain yang mengarah pada penguatan isyarat

Mekanisme kerja auksin

- auksin menyebabkan pengenduran dinding sel (sifat plastis)
- sel penerima mengeluarkan H+ ke dinding sel primer yang mengelilinginya => ion H+
ini menurunkan pH => pengenduran pH dan pertumbuhan cepat => pH rendah
mengaktifkan beberapa enzim perusak dinding sel yang tidak aktif pada pH tinggi =>
enzim memutuskan ikatan pada polisakarida dinding => dinding lebih mudah
meregang.
Mekanisme kerja sitokinin
- memacu sitokinesis (pembelahan sel), sangat memacu pemanjangan kuncup samping,
mampu mengatasi dominasi apikal, memacu perkembangan kloroplas dan sintesis
klorofil.
- kambium akar mensintesis sitokinin
- mempertahankan keutuhan membran tonoplas, sehingga protease dari vakuola tidak
akan merembes ke sitoplasma dan menghidrolisis protein-larut serta protein membran
kloroplas dan mitokondria.
- Sitokinin mendorong pembelahan sel dalam biakan jaringan dengan cara
meningkatkan peralihan dari G2 ke mitosis. Sitokinin menaikkan laju sintesa protein.
- Sitokinin bekerja pada proses transkripsi, ribosom dalam sel yang diberi perlakuan
sitokinin berkelompok dalam polisom pensinteis protein besar bukan dalam polisom
kecil/sebagai monoribosom bebas (Fosket)
- Houssa, BA mempersingkat waktu berlangsungnya fase S dalam daur sel (G2 =>
mitosis, yaitu tahap sintesa DNA dan protein membelah)
- Sitokinin => kestabilan mRNA
Protein inti => sintesa DNA (translasi di sitosol)

FOTOLISIS => pemisahan air yang dikendalikan oleh cahaya (reaksi hill)

12

13

- transfor elektron=> fotolisis air..... proplastid

13

14

BAB IV
METODE PENELITIAN

1. Tempat dan Waktu

Percobaan telah dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Teknologi Benih

Fakultas Pertanian Universitas Padjadjaran di Jatinangor pada bulan Maret 2006 sampai bulan
Nopember 2005.

2. Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan, yaitu senyawa kimia penyusun media MS (Murashige dan
Skoog, 1962) yang diberi suplemen sukrose 30 g L-1, agar 8 g L-1. Perlakuan Sitokinin terdiri
dari BAP (0; 0.5; 1 ppm), perlakuan NAA (0; 0.01; 0.1 ppm). Jenis eksplan terdiri dari pucuk
dan mata tunas.
Alat-alat yang digunakan adalah botol kultur, cawan petri, pinset, scalpel, labu ukur,
erlenmeyer, digital pH meter, hot plate, magnetic stirrer, autoklaf, laminar air flow cabinet .
per L, agar 8 g per L dan pemberian zat pengatur tumbuh BAP dan NAA. Sebagai eksplan
adalah pucuk dan mata tunas nilam kultivar Lhoukseumawe.

3. Rancangan Percobaan

Metode yang digunakan pada percobaan ini adalah metode perobaan dengan
menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 18 kombinasi perlakuan yang diulang
kali dan setiap ulangan terdiri dari 3 unit percobaan dengan kombinasi sebagai berikut :

14

15

A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N
O
P
Q
R

=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=
=

pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
pucuk
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas
Mata tunas

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

0
0
0
0.5
0.5
0.5
1
1
1
0
0
0
0.5
0.5
0.5
1
1
1

BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP
BAP

+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

0
0.01
1
0
0.01
1
0
0.01
1
0
0.01
1
0
0.01
1
0
0.01
1

NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA
NAA

Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan uji F dan berbeda nyata
dilanjukan dengan uji jarak Scottknott pada taraf nyata 5%.

4. Pelaksanaan Percobaan

1.

Pelaksanaan Percobaan

a. Sterilisasi Alat dan Ruang Kultur

Ruang kultur dibersihkan dan disterilisasi selama 24 jam dengan menggunakan
formalin. Alat-alat yang akan digunakan untuk pembuatan larutan stok media seperti gelas
piala, erlenmeyer, dan labu ukur, dicuci dengan menggunakan deterjen dan dibilas dengan
akuades steril. Hal yang sama juga dilakukan terhadap botol kultur, cawan petri dan alat-alat
tanam. Selanjutnya alat-alat tersebut disterilisasi dengan menggunakan autoklaf pada tekanan
15 psi dan temperatur 121oC selama 60 menit.

15

16

b. Pembuatan Media
Pembuatan media dilakukan dengan mengencerkan larutan stok nutrisi dan vitamin
sesuai dengan perlakuan. Media ditetapkan pH nya menjadi 5.8. Selanjutnya media dimasak
dengan menggunakan hot plate dan diaduk dengan magnetik stirer sampai larutan terlihat
jernih. Setelah itu media dituang dalam botol kultur sebanyak 10 ml dan kemudian mulut
botol ditutup dengan menggunakan alumunium foil dan disterilisasi pada tekanan 15 psi dan
temperatur 121oC selama 20 menit.

c. Sterilisasi Eksplan
Persiapan eksplan mula-mula disterilisasi dengan 10% Bayclin (bahan aktif 5.25 %
sodium hypochlorite) yang diberi 10 tetes/liter Tween 20 selama 7 menit dan dibilas akuades
steril 3 kali.

d. Penanaman
Medium dasar yang digunakan adalah formulasi Murashige & Skoog (1962) yang
diberi tambahan (mg/l) : thiamine HCl 0.4; nicotinic acid 0.5; pyridoxin HCl 0.5; glycine 2;
sukrosa 30.000; agar 8.000; NaH2PO4, 170.

2.

Pengamatan
Pengamatan yang dilakukan meliputi : jumlah tunas per kultur (buah), panjang tunas

(mm), dan jumlah akar (buah).

16

17

BAB V
HASIL PEMBAHASAN

Keadaan umum pertumbuhan eksplan

Pertumbuhan eksplan mulai terlihat pada minggu pertama setelah tanam dalam media
MS0 (tanpa perlakuan). Pucuk dan mata tunas yang digunakan sebagai eksplan mulai
memanjang dan berwarna hijau muda. Pertumbuhan eksplan meningkat dengan bertambahnya
umur. Pada minggu kedua setelah tanam belum terjadi penggandaan tunas, selanjutnya
eksplan dipindahkan kedalam media perlakuan dengan berbagai konsentrasi BAP dan NAA.
Pada minggu ketiga dan keempat dalam media perlakuan, eksplan mulai terlihat
penggandaan tunas. Pembentukan tunas aksilar pada kultur disebabkan menurun atau
hilangnya dominansi apikal. Menurut George dan Sherrington (1984) hilang atau menurunnya
dominansi apikal ini disebabkan karena adanya hormon sitokinin endogen atau eksogen yang
mendorong pertumbuhan tunas aksilar dengan tertekannya dominansi apikal.
Selama percobaan berlangsung, beberapa kultur menunjukkan gejala terkontaminasi
oleh mikroba terutama jamur yang secara visual dapat diamati. Gejala-gejala yang timbul
dapat dicirikan dengan adanya koloni-koloni jamur pada permukaan media berwarna putih
abu-abu atau kehitam-hitaman. Keadaan tersebut semakin lama menutupi seluruh permukaan
media sehingga eksplan tersebut mati. Timbulnya koloni-koloni jamur di dalam botol kultur
disebabkan oleh beberapa faktor antara lain sterilisasi eksplan atau media yang kurang
sempurna, inokulasi dan penanaman yang kurang hati-hati dan ruang inkubator yang kurang
mendukung selama penyimpanan botol kultur.

17

18

Jumlah tunas
Dari hasil sidik ragam, perlakuan BAP dan NAA pada berbagai jenis bahan eksplan
menunjukkan rata-rata jumlah tunas yang berbeda nyata. Tetapi kecenderungan rata-rata
jumlah tunas meningkat dengan meningkatnya konsentrasi BAP.
Pada Tabel 1. terlihat, bahwa jumlah tunas berbeda nyata pada uji F 5% pada minggu
ke-8 dalam media perlakuan. Rata-rata jumlah tunas tertinggi pada minggu ke-8. Pada minggu
ke-8 diperoleh data dari perlakuan Q (mata tunas + 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA) sebanyak
61 buah tunas, M (mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA) sebanyak 50.33 buah tunas,
N (mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA sebanyak 39.67 buah tunas, dan
selanjutnya H (pucuk + 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA. sebaliknya pemberian auksin tanpa
sitokinin pada eksplan mata tunas menghasilkan jumlah tunas relatif rendah yaitu berkisar
4.00 6.33 buah tunas, namun jumlahnya masih lebih tinggi daripada eksplan pucuk pada
berbagai jenis media perlakuan yang hanya menghasilkan tunas pada kisaran 1 3 buah tunas.
Hal ini menunjukkan bahwa jumlah tunas selain

dipengaruhi oleh NAA dan BAP juga

dipengaruhi oleh jenis eksplan. Hal ini sesuai dengan pendapat Gamborg dan Shyluk (1981)
serta Pierik (1987) yang menyatakan bahwa keberhasilan kultur jaringan selain dipengaruhi
oleh zat pengatur tumbuh, nutrisi, dan lingkungan juga sumber eksplan yang digunakan.
Penambahan berbagai konsentrasi NAA yaitu 0.01 dan 1 mg/L NAA pada eksplan
mata tunas dalam media 0.5 mg/L, cenderung menurunkan jumlah tunas, namun pemberian
NAA 0.01 mg/L pada media dengan penambahan 1 mg/L BAP justru menghasilkan jumlah
tunas tertinggi mencapai 61 buah tunas. Sedangkan pada eksplan pucuk dalam media 1 mg/L
BAP dengan penambahan 0.01 mg/L menghasilkan jumlah tunas tertinggi 19.67 buah tunas.
Pertumbuhan terbaik untuk jumlah tunas stroberi adalah berasal dari eksplan mata

18

19

tunas yang dikulturkan di dalam media di 0.5 mg/L BAP dan 0.01 NAA. Menurut Zainal
Abidin (1990), apabila dalam perbandingan konsentrasi sitokinin yang lebih besar daripada
auksin, maka akan memperlihatkan stimulasi pertumbuhan tunas dan daun. Contoh l tunas
majemuk tanaman nilam hasil dari penelitian ini dapat dilihat pada Lampiran 2 .

Tabel 1. Rata-rata jumlah tunas per kultur pada umur 8 MST

No.

Kode

Perlakuan

Rata-rata Jumlah Tunas

(buah)

1
A
pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.00
a
2
B
pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
2.33
a
3
C
pucuk
+ 0 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
2.00
a
4
D
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
3.67
a
5
E
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
2.33
a
6
F
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.67
a
7
G
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
2.67
a
8
H
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
19.67
c
9
I
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.00
a
10
J
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
6.33
b
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
11
K
6.33
b
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
12
L
4.00
a
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
13
M
50.33
e
Mata
tunas
14
N
+ 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
39.67
d
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
15
O
2.33
a
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
16
P
11.67
b
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
17
Q
61.00
e
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
18
R
7.33
b
Keterangan : Nilai rata-rata perlakuan yang ditandai dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji
Scottknott pada taraf lima persen untuk setiap kolom yang sama.

Pemberian BAP dan NAA yang lebih tinggi secara bersamaan pada eksplan pucuk
tidak mampu meningkatkan jumlah tunas. Respon sitokinin dan auksin dalam proliferasi tunas
bergantung pada bahan tanaman dan konsentrasi yang digunakan. Umumnya penggunaan
sitokinin dengan konsentrasi tinggi dan auksin rendah sangat penting dalam pembentukan
tunas pada banyak jenis tanaman.

19

20

Tinggi Tunas

Berdasarkan analisis sidik ragam diketahui, bahwa perlakuan penambahan BAP dan
NAA dan jenis eksplan tidak menunjukkan perbedaan yang nyata terhadap rata-rata tinggi
tunas, namun pemberian NAA 0.01 mg/L secara tunggal pada perlakuan A (pucuk +
0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA) menghasilkan tinggi tunas tunas yang relatif lebih tinggi
daripada perlakuan lainnya yaitu 2.18 cm, sedangkan pemberian 1 mg/L BAP dengan
penambahan 0.01 mg/L NAA pada eksplan mata tunas menghasilkan tinggi tunas yang paling
rendah diantara perlakuan lainnya
Tabel 2. Rata-rata tinggi tunas per kultur pada umur 8 MST
No.

Kode

Perlakuan

Rata-rata Tinggi Tunas

(cm)

1
A
Pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.57
a
2
B
Pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
2.18
a
3
C
pucuk
+ 0 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.63
a
4
D
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.76
a
5
E
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
2.05
a
6
F
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.28
a
7
G
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.89
a
8
H
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
0.99
a
9
I
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.86
a
10
J
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.97
a
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
11
K
1.78
a
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
12
L
1.75
a
Mata
tunas
13
M
+ 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
1.24
a
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
14
N
1.05
a
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
15
O
1.50
a
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
16
P
1.14
a
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
17
Q
0.53
a
Mata
tunas
18
R
+ 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
1.36
a
Keterangan : Nilai rata-rata perlakuan yang ditandai dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji
Scottknott pada taraf lima persen untuk setiap kolom yang sama.

Pemberian 1 mg/L NAA yang dikombinasikan dengan 0.5 mg/L BAP cenderung
menghasilkan tinggi tunas yang lebih rendah daripada penggunaan 0.01 mg/L NAA tunggal.
Khrisnamoorthy (1981) dan Suwarsono Heddy (1996) mengemukakan bahwa auksin dapat

20

21

merangsang perpanjangan sel yang akan berakibat terhadap perpanjangan koleoptil dan
batang. Auksin mendorong perpanjangan sel dengan cara mempengaruhi dinding sel melalui
dua fase, yaitu fase pembelahan dan fase pelebaran sehingga sel akan mengalami
kerenggangan dan penebalan. Semakin tinggi konsentrasi auksin, maka pertumbuhan akan
terhambat karena konsentrasi auksin yang tinggi mengakibatkan terbentuknya etilen, yang
dapat menghambat pertumbuhan.

Jumlah Akar
Pada Tabel 3., menunjukkan bahwa penggunaan BAP dan NAA pada berbagai jenis
eksplan nilam terjadi pengaruh yang berbeda nyata terhadap jumlah akar. Semakin tinggi
konsentrasi BAP ( 0.5 mg/L) pada berbagai konsentrasi NAA (0, 0.01, dan 1 mg/L) pada
eksplan pucuk maupun mata tunas jumlah akar cenderung lebih tinggi daripada perlakuan
lainnya. Namun pada eksplan mata tunas peningkatan NAA sampai dengan 1 mg/L relatif
menghasilakan rata-rata jumlah akar yang lebih rendah, kemungkinan disebabkan pada
eksplan mata tunas pertumbuhan cenderung ke pertunasan, sehingga auksin eksogen tidak
diperlukan. Sesuai dengan pendapat Evans dkk., (1986) yang menyatakan bahwa tunas yang
sedang berkembang dapat memproduksi auksin dalam jumlah yang cukup untuk perakaran
maka penambahan auksin eksogen tidak diperlukan. Jadi tanpa pemberian NAA pun, eksplan
dapat menginisiasi pertumbuhan akar.
Menurut Thimann (1977) dikutip Evans dkk., (1986), setelah tahap inisiasi adalah
tahap pemanjangan akar, yang merupakan tahap sensitif terhadap taraf konsentrasi auksin
yang diberikan dari luar. Auksin tidak meningkatkan jumlah akar secara nyata, bahkan
semakin tinggi konsnetrasi malah menurunkan jumlah akar (Tabel 3.) Dari hasil pengamatan

21

22

diduga kandungan auksin endogen dalam eksplan tersebut sudah cukup, sehingga
penambahan auksin mengganggu keseimbangan hormonal.

Tabel 3. Rata-rata jumlah akar per kultur pada umur 8 MST

No.

Kode

Perlakuan

Rata-rata Jumlah Akar

(buah)

1
A
Pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
6.30
b
2
B
Pucuk
+ 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
17.70
e
3
C
pucuk
+ 0 Mg/L BAP + 1 mg/L NAA
5.70
b
4
D
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
21.30
e
5
E
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
19.00
e
6
F
pucuk
+ 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
14.70
e
7
G
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
3.70
b
8
H
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
0.00
a
9
I
pucuk
+ 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
0.00
a
10
J
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
15.0
e
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
11
K
11.00
d
Mata tunas + 0 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
12
L
8.30
c
Mata
tunas
13
M
+ 0.5 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
18.70
e
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
14
N
11.00
d
Mata tunas + 0.5 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
15
O
9.70
c
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0 mg/L NAA
16
P
15.30
e
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 0.01 mg/L NAA
17
Q
16.30
e
Mata tunas + 1 mg/L BAP + 1 mg/L NAA
18
R
5.70
c
Keterangan : Nilai rata-rata perlakuan yang ditandai dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut uji
Scottknott pada taraf lima persen untuk setiap kolom yang sama.

Menurut Khrisnamoorthy (1981) dan Wattimena (1990), pemberian auksin pada

konsentrasi yang tinggi akan menghambat pertumbuhan akar dan tunas. Pemberian auksin
pada konsentrasi terlalu tinggi dapat memacu produksi hormon etilen yang merupakan
hormon penghambat pertumbuhan akar, daun dan bunga tergantung pada speciesnya. Respon
auksin berhubungan dengan konsentrasinya. Konsentrasi yang tinggi bersifat menghambat
pertumbuhan tunas (Gardner, dkk., 1991)

22

23

BAB VI
KESIMPULAN DAN SARAN

6.1. Kesimpulan
1. Penggunaan eksplan mata tunas pada media MS dengan penambahan 1 mg/L BAP dan
0.01 mg/L NAA menghasilkan rata-rata jumlah tunas tertinggi mencapai 61 buah
tunas per eksplan., sedangkan penggunaan eksplan pucuk pada media MS dengan
penambahan 1 mg/L BAP dan 0.01 mg/L NAA menghasilkan rata-rata jumlah tunas
tertinggi mencapai 19.67 buah tunas per eksplan.
2. Penggunaan berbagai

konsentrasi

BAP

yang dikombinasikan dengan

NAA

memberikan pengaruh yang tidak berbeda nyata terhadap tinggi tunas.

3. Rata-rata jumlah akar tertinggi pada eksplan pucuk mencapai 21.30 buah/eksplan yang
diperoleh pada media MS dengan penambahan 0.5 mg/BAP tanpa pemberian
NAA,sedangkan pada eksplan mata tunas rata-rata jumlah akar tertinggi mencapai
18.70 buah/eksplan yang diperoleh pada media MS dengan penambahan 0.5 mg/L
BAP dan 0 mg/L NAA.

6.2. Saran
Pada penelitian lebih lanjut disarankan penelitian dilanjutkan pada media perakaran
yang selanjutnya diaklimatisasi agar plantlet yang terbentuk hasil kultur jaringan siap di
tanam di lapangan.

23

24

DAFTAR PUSTAKA

Boxus, P.H., M. Quoirin, and J.M. laine. 1977.. Large scale propagation of strawberry plants
from tissue culture. P. 130 143. In: J. Reinert and Y.P.S.bajaj (eds). Applied and
fundamental aspects of plant cell. , tissue and organ culture. Springer-Verlag.New
York.
Campbell, N.A. and J.B. Reece. 2002. Biology. Sixth Edition. Pearson Education, Inc. San
Fransisco..
Chandler, K.C. and Legard.2000, Strawberry cultivars for annual production systems.
University of Florida.
Daisy P. Sriyanti Hendaryono dan Ari Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan. Penerbit
Kanisius. Yogyakarta.
Damiano, C.1980. Strawbery micropropagastion. Proc. Conf. On nursery production of fruit
plants-through tissue culture applications and feasibility. USDA-SEA. Agr. Res.
Results ARR-NE-11. p. 11-22.
Dixon, R.A. 1985. Plant cell culture a practicall approach IRL. Press England.
Evans, D.A., W.R. Sharp, P.V. Ammirato.. 1986.. Handbook of plant cell culture: techniques
and applications Vol. I. Macmillan Publishing Company. New York.
Gamborg O.L. and J.P. Shyluk. 1981. Nutrition, media and characteristic of plant cell and
tissue culture. In Thorpe, T.A. (ed.) Plant tissue culture : methods and application in
agriculture. Academic Press. Inc. New York.
Gardner, G.J.., R.B. Pearce and R.L. Mitchell. 1991. Fisiologi Tanaman Budidaya
(Terjemahan Herawati Susilo). UI. Press. Jakarta.
George, E.F. and P.D. Sherrington. 1984. Plant propagation; by Tissue Culture. Exegetics
Ltd. England.
Liu, Z.R. and J.C. Sanford. 1988. Plant propagation by organogenesis from strawberry leaf
and runner tissye.
Hussey, 1978. The application of tissue cultur to the vegetative propagation of plants.
Blackweel Scientific Publication.
Khrisnamoorthy, H.N. 1981. Plant growth substances. Including application in agriculture.
New Delhi. Tata Mc. Graw-hill. Publishing Company. 1981

24

25

Livy Winata Gunawan. 1988. Teknik kultur jaringan. Laboratoiumn Kultur Jaringan
Tanaman. Pusat antar Universitas Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor.
__________________. 2000. Stroberi. Penebar Swadaya. Jakarta.
Miller, R.A. and Chandler, C.K. 1990. Plant regeneration from excised cotyledons of mature
strawberry acenes.
Minegishi, M. 1989. Strawberry production in Japan Cultivar, cultivating method, main
disease and breeding. ISHS Acta Horticulture 265: International strawberry
symposium. Cesena, Italy.
http://www.actahort.org/books/265/265 103.htm
Murashige, T. and F. Skoog.1974.Plant propagation through tissue culture. Ann. Rev. Plant
Physiologi. 25 : 130-166.
Pierik. 1987. In vitro culture of higher plants. Martinus Nijhoff Publisher. Netherland.
Shoemaker, N.P., H.J. Swartz, and G,J, Galleta. 1985. Cultivar dependent variation in
pathogen reistance due to tissue culture propagation of strawberries. Hort Science 20 :
253-254.
Suwarsono Heddy. 1996. Hormon tumbuhan. CV Rajawali. Jakarta. .
Swartz, H.J., G.J. Galletta, and R.H. Zimmerman. 1981. Field performance and phenotypic
stability of tissue culture propagated strawberries. J. Amer. Soc. Hort.Sci. 106: 667-673
Wang, D., W.P. Wergin, and R.H. Zimmerman. 1994. Somatic embryogenesis and plant
regeneration from immature embryos of strawberry. Hort. Science 19: 71-72
Wattimena, G.A. 1990. Penggunaan pengatur tumbuh tumbuhan pada perbanyakan
propagula tanaman. Dalam Prosiding Seminar Nasional Agrokimia. Himagro Faperta.
UNPAD. Hal. 18-36.
Zainal Abidin. 1990. Zat pengatur tumbuh. Angkasa. Bandung.

25

26

KATA PENGANTAR

Bismillahirrohmaanirrohiim
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena atas berkat dan rahmatNya, penulis dapat menyelesaikan penelitian ini dengan judul PERBANYAKAN CEPAT
TANAMAN NILAM (Pogostemon cablin Benth.) SECARA KULTUR JARINGAN
Dalam kesempatan ini, penulis menyampaikan rasa terima kasih yang sebesarbesarnya

kepada

Rektor

Universitas

Padjadjaran,

Lembaga

Penelitian

Universitas

Padjadjaran, Dekan Fakultas Pertanian Unpad, Ketua Jurusan Budidaya Pertanian, Kepala
Laboratorium Teknologi Benih, Koordinator Laboratorium Kultur Jaringan, Ketua Program
Studi Agronomi, asisten serta para teknisi laboratorium kultur jaringan yang telah membantu
baik moril maupun material.
Akhir kata penulis berharap semoga Allah SWT membalas dengan memberikan
rahmat Dan hidayah-Nya Dan semoga hasil penelitian ini bermanfaat bagi pengembangan
ilmu pertanian terutama dalam bidang kultur jaringan.

Bandung, Nopember 2006

Penulis

26