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BIOPINGALL01
30.04.2010
01
1. INTRODUCCION
1.1 Biorreactores
Para un componente cualquiera del cultivo, incluida la biomasa, se puede plantear el
siguiente balance de materia en un biorreactor:
=
Donde:
Va
= velocidad de acumulacin
Vi
= velocidad de ingreso
Vs
= velocidad de salida
Vf
= velocidad de formacin
Vc
= velocidad de consumo
(
Siendo
Ci , V
(Ec.1)
F2 , Ci
F1 , Ci1
Donde:
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F1
= Caudal de alimentacin
F2
= Caudal de salida
Ci1
Ci
vrfi
vcfi
Por otra parte, el volumen del cultivo variar en el tiempo segn sean F1 y F2.
Suponiendo que la densidad del cultivo y de la alimentacin es igual resulta:
= 1 2 (Ec.2)
Ahora bien, dependiendo de cmo sean F1 y F2 surgen tres sistemas de cultivo.
1.1.1 Cultivo continuo
Ambos caudales son iguales (F1=F2) y por la Ec.2, V es constante, por lo tanto la Ec.1
se reduce a:
= (
)+ (
) (Ec.3)
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+ (
) (Ec.5)
Como se observa en la Ec.4, el volumen del biorreactor aumenta, por lo que este tipo
de biorreactor tiene una duracin limitada ya que el volumen no puede incrementarse
mas all del volumen til del reactor.
1.1.3 Cultivo Batch
Ambos caudales son nulos (F1=F2=0) por lo que de la Ec.2 se desprende que V es
constante. Al analizar la Ec.1 se obtiene
=
(Ec.6)
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=
=
(Ec.7)
(Ec.8)
(Ec.9)
(Ec.11)
(Ec.12)
El sistema formado por las ecuaciones Ec.11 y Ec.12 posee solucin analtica, pero en
esta no aparece X de forma explcita por lo que resulta de escasa utilidad. En cambio
es posible analizar casos particulares haciendo algunas suposiciones. Por ejemplo se
puede asumir que durante una buena parte del tiempo se cumplir que S >> Ks, por lo
tanto las ecuaciones Ec.11 y Ec.12 se reducen a
=
=
(Ec.14)
(Ec.13)
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Por lo tanto, bajo las condiciones indicadas, el crecimiento se llevar a cabo con el
mximo valor de P posible. Integrando la ecuacin Ec.13 con la condicin t=0 y X=X0
se obtiene
o bien
= ln
(Ec.15)
(Ec.16)
) (Ec.17)
(Ec.18)
+ (
) (Ec.19)
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Alternativamente se pueden emplear las ecuaciones Ec.18 y Ec.19 para calcular Yx/s.
En la siguiente figura se representan las distintas fases de crecimiento de un cultivo
batch aqu descritas que surgen de suponer vlida la ecuacin de Monod. Sin
embargo, antes de la fase exponencial (II) suele existir otra fase llamada fase de
latencia (I).
( ) (Ec. 20)
Normalmente esta fase no es deseable ya que significa una prdida de tiempo, por lo
que usualmente se trata de minimizarla. Una forma de lograrlo consiste en hacer
crecer el inculo en un medio de cultivo igual al que se va a emplear posteriormente y
adems transferirlo cuando las clulas se encuentran en su fase exponencial.
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2. OBJETIVOS
2.1 Objetivo general
Estudiar las caractersticas de una fermentacin tipo Batch.
2.2 Objetivos especficos
Montar un biorreactor de tipo batch para fermentacin.
Monitorear parmetros de una fermentacin alcohlica.
Caracterizar el vino elaborado.
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3. ACTIVIDADES
3.1 Montar un biorreactor de tipo batch.
3.2 Caracterizar un mosto sinttico para una fermentacin alcohlica.
3.3 Evaluar cada semana los parmetros de glucosa, absorbancia, densidad y pH del
mosto fermentado.
3.4 Realizar recuentos de levaduras para monitorear la fermentacin alcohlica.
4. MATERIALES
Cultivo de levaduras Saccharomyces cerevisiae Ec1118, mosto sinttico, micropipetas,
tubos con agua peptonada 0,1%, espectrofotmetro, cubetas de espectrofotmetro,
vasos precipitados, pizetas con agua destilada, etanol 70%, tubos eppendorf,
pHmetro, picnmetro, placas petri con agar YPD, kit GOD-PAP para medir glucosa y
papel absorvente.
5. PROCEDIMIENTOS
5.1 Determinar la curva de crecimiento de un cultivo de levadura
1. Efectuar lecturas en espectrofotmetro a 600nm del cultivo tal y como se realiz en
el primer prctico (curva de crecimiento).
2. Construir grficas de Abs v/s tiempo para las muestras. Si se realiz alguna dilucin
no olvide corregir el valor.
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6. SESIONES
6.1 Primera sesin
1. Montar el biorreactor segn se indicar en el laboratorio.
2.Adicionar 350mL de mosto a la botella mayor. Agregar 200mL de agua estril a la
botella menor.
3. Inocular el mosto con la levadura.
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4. Medir pH y densidad.
5. Dejar incubando a temperatura ambiente.
6.2 Segunda sesin
1. Monitorear los parmetros de pH, densidad, glucosa y realizar recuento de
levaduras.
2. Medir parmetros sensoriales.
6.3 Tercera sesin
1. Monitorear los parmetros de pH, densidad, glucosa y realizar recuento de
levaduras.
2. Medir parmetros sensoriales.