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VI.- CONCLUSIONES:
Durante el experimento en el que utilizamos el reactivo de
Nihidrina,pudimos observar que todos los contenidos de los tubos de
ensayocambiaban su color a uno violeta debido a que stos son aminocidos.. . Gracias a la presencia de la fenolftalena y anaranjado
de metilopudimos confirmar la capacidad anftera que tienen los
aminocidos,ya que con la fenolftalena se comport como base y con
elanaranjado de metilo como cido.. . Confirmamos que el reactivo de
milln detecta restos fenlicos en
aminocidos, el reactivo de cido Gliclico detecta a los restos
indlicos y el acetato de plomo, a los restos azufrados. .En el
experimento de solubilidad de los lpidos, se podr observar queel aceite
se ha disuelto en el ter y no en el agua ya queste subir debido a su
menor densidad.
DESNATURALIZACIN:Es la destruccin de la estructura terciaria de
una protena, en laque pasa de una forma plegada o enroscada a una
formaopuesta, por rompimiento de enlaces de hidrgeno. En la
protenadesnaturalizada ocurren cambios estructurales que afectan
suspropiedades biolgicas, como la hormonal, enzimticas y laactividad
inmunolgica. Es generalmente un proceso irreversible,fuertemente
endotrmico, que produce un desorden del sistema. Los principales
agentes desnaturalizantes son:
a) Altas temperaturas, provocan la coagulacin. Ej. Huevo cocido.
b) Cambios bruscos de pH.
PRUEBA DE LA NINHIDRINA(HIDRATO DE
TRICETOHIDRINDENO).Todas aquellas sustancias que presentan al
menos un grupo amino y uno carboxilo libre, reaccionaran con la
ninhidrina. La positividad se manifiesta por la aparicin de un color
violceo o amarillo. Debido a que las protenas y los aminocidos,
poseen esta caracterstica, la reaccin sirve para identificarlos. Algunas
soluciones de amonio y aminas, dan la coloracin caracterstica,
aparentemente debido a una oxidacin y reduccin intramolecular de la
ninhidrina en presencia de amonaco. Los aminocidos porina e
hidroxiprolina, que no poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un
color rojo que pasa rpidamente a amarillo. La reaccin se muestra en la
figura 1
PRUEBA DE BIURET :Es una prueba general para polipptidos y
protenas ya que sirve para reconocer las uniones peptidicas. La
positividad se manifiesta por la aparicin de una coloracin violeta. La
formacin de un complejo de coordinacin entre los cationes cpricos en
medio alcalino con las uniones peptdicas.
Las enzimas cumplen las dos leyes comunes a todos los catalizadores: la
primera es que durante la reaccin no se alteran, y la segunda es que no
desplazan la constante de equilibrio para que se obtenga ms producto,
sino que simplemente favorecen que la misma cantidad de producto se
obtenga en menos tiempo. Las enzimas, a diferencia de los catalizadores
no biolgicos, presentan una gran especificidad, actan a temperatura
ambiente y consiguen un aumento de la velocidad de reaccin de un
milln a un trilln de veces.
LA CATALASA:
Es una enzima que se encuentra en organismos vivos y cataliza la
descomposicin
del perxido de hidrgeno (H202) en oxgeno y agua. El perxido de
hidrgeno es un residuo del metabolismo celular de muchosorganismos
vivos y tiene entre otras una funcin protectora contra
microorganismospatgenos, principalmente anaerobios. Esta funcin la
efecta esta enzima quecataliza su descomposicin en agua y oxgeno.
Adems la catalasa se usa en laindustria textil para la eliminacin del
perxido de hidrgeno, as como en menor
medida se emplea en la limpieza de lentes de contacto que se han
esterilizado enuna solucin de perxido de hidrgeno
Prueba de la Catalasa
Se utiliza para comprobar la presencia del enzima catalasa que se
encuentra el lamayorade las bacterias aerobias y anaerobias
facultativas que contienen citocromo. La principalexcepcin es
Streptococcus.
Originariamente, esta prueba era utilizada para diferenciar entre los
siguientes gneros:
Streptococcus(-) de Micrococcus(+) y/o Staphylococcus(+).
Bacillus(+) de Clostridium(-).
Lysteriamonocytogenes(+) y/o Corynebacterium(+, con las
excepciones de
C.pyogenesy C.haemolyticum, ambos -) de Erysipelothrix(-)
Una prueba de rutina de la catalasa a temperatura ambiente puede
hacerse siguiendo dos
tcnicas:
1. Mtodo del portaobjetos (recomendado):
Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24
horas ycolocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.
Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al 30% sobre
elmicroorganismo sin mezclarlo con el cultivo.
Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).
Desechar el portaobjetos en un recipiente con desinfectante.
Si se invierte el orden del mtodo (extender la colonia sobre el agua
oxigenada )pueden producirse falsos positivos.
2. Mtodo del tubo de ensayo: