Mitocondria

Definiie
Structur, ultrastructur
Funciile mitocondriei

 Mitocondria este:
un organit celular
delimitat de un sistem de dou membrane
avnd ca funcie de baz producerea de ATP.

Carl Benda (1903) - mitos: fir, a; khondrion: granul.

Richard Altmann
Die elementarorganismen und ihre
beziehungen zu den
zellen, 1890

Front. Physiol., 15 June 2010 | doi: 10.3389/fphys.2010.00007

 Microscopia optic:

Hematoxilin feric Regaud granule

negre

Verde Janus B colorant vital

 Microscopie de fluorescen

Mitocondrii marcate cu
MitoTracker Green

Ultrastructura mitocondriei
Spaiu
intermembranar

Membran mitocondrial extern i

Matrice

intern

Criste

Ultrastructura mitocondriei
Organite mobile prezente sub forma unor reele tridimensionale dinamice.

Relaia morfologie-funcie:
Volumul compartimentului mitocondrial este reglat prin
capacitatea de fisiune / fuziune a mitocondriilor;
Mitocondriile se pot deplasa activ n interiorul celulei -> distribu ie /
localizare controlate;
Mitofagie: proces controlat de autofagie -> ndeprtarea mitocondriilor
nefuncionale
Mitocondriile se asociaz cu RE -> domenii specializate: MAM
(mitochondria-associated membranes)

N Engl J Med 369:23, 2013

Fuziunea mitocondrial
Intervin mitofuzine (M.M.E.) i OPA1
(Optic atrophy-1, MMI);
Influeneaz producerea ATP

N Engl J Med 369:23, 2013

Fisiunea mitocondrial
Mecanisme de reglare complexe;
Se poate coordona cu mitoza;
Intervin proteine ale MME -> activarea
proteinei efectorii DRP1 (dynaminrelated protein 1)

N Engl J Med 369:23, 2013

Morfologie:
Volum relativ variabil
(~ tipul celular):
5 - uzual
20 - hepatocite
30 - miocardocite

Distribuie intracelular
variabil (~ tipul celular)

Nefrocit, MET
http://www.downstate.edu/histology_lab_manua

Distribuie intracelular:

Celul muscular cardiac, MET

Mol Cell Biochem (2007) 302:225232

Distribuie intracelular:

Celul muscular striat scheletic, MET

http://missinglink.ucsf.edu/lm/ids_104_musclenerve_path/student_musclenerve/subpages/EM.nl.html

Relaia morfologie-funcie
Volumul compartimentului mitocondrial este reglat prin
capacitatea de fisiune / fuziune a mitocondriilor;

Mitocondriile se pot deplasa activ n interiorul

celulei -> distribuie / localizare controlate;
Mitofagie: proces controlat de autofagie -> ndeprtarea
mitocondriilor nefuncionale
Mitocondriile se asociaz cu RE -> domenii specializate: MAM
(mitochondria-associated membranes)

N Engl J Med 369:23, 2013

Mobilitate:
Deplasare intracelular
prin interaciunea cu
elemente ale
citoscheletului
(microtubulii)

O mitocondrie marcat fluorescent

(sgeat) se deplaseaz ntr-o celul
vie pe o distan de 6,6 m n 33 sec.
(B Trinczek et al., J Cell Sci 112:2355, 1999)

Relaia morfologie-funcie
Volumul compartimentului mitocondrial este reglat prin
capacitatea de fisiune / fuziune a mitocondriilor;
Mitocondriile se pot deplasa activ n interiorul celulei ->
distribuie / localizare controlate;

Mitofagie: proces controlat de autofagie ->

ndeprtarea mitocondriilor nefuncionale
Mitocondriile se asociaz cu RE -> domenii specializate: MAM
(mitochondria-associated membranes)

N Engl J Med 369:23, 2013

Mitocondrii n procesul de
autofagocitoz (mitofagie)

The Journal of Biological Chemistry, 2011, 286:19630.

Relaia morfologie-funcie
Volumul compartimentului mitocondrial este reglat prin capacitatea de
fisiune / fuziune a mitocondriilor;
Mitocondriile se pot deplasa activ n interiorul celulei -> distribuie /
localizare controlate;
Mitofagie: proces controlat de autofagie -> ndeprtarea mitocondriilor
nefuncionale

Mitocondriile se asociaz cu RE -> domenii specializate:

MAM (mitochondria-associated membranes)

N Engl J Med 369:23, 2013

MAM:
- Apoziii mitocondrii - RE
- Traficul Ca2+
MFN1, 2 mitofuzin 1, 2
VDAC Voltage-Dependent Anion
Channel

Nature Reviews Molecular Cell Biology 2012; doi:10.1038/nrm3412

Mitocondrii cu criste tubulare - hepatocit

Morfologia cristelor cel. Leydig

THE ANATOMICAL RECORD PART A 278A:454461 (2004)

Metodologia studierii mitocondriei

Funciile mitocondriei

Postulatele teoriei chemiosmotoice (P. Mitchell, 1961)

Premiul Nobel n chimie, 1978

Funciile mitocondriei

Postulatele teoriei chemiosmotice (P. Mitchell, 1961)

1 Lanul respirator este transportor de protoni

2 ATP sintaza produce ATP prin disiparea gradientului
protonic

Teoria chemiosmotic

3 Membrana mitocondrial intern conine transportorii

ce asigur traficul metaboliilor
4 Pe ci nespecifice, membrana mitocondrial intern
este practic impermeabil la protoni i, n general, la
ioni

legturi fosfoanhidrice
Adenin

Riboz

Energie

Energie

Adenin

fosfat anorganic

Riboz

De unde provine energia necesar

funcionrii ATP-sintazei ?
Spaiu intermembranar

Sinteza ATP

Hidroliz ATP

ATP sintaza (F0F1 ATP-aza)

- 500 kD
- Structur de b de tob (trunchi,
gt i cap)
- Cel puin 9 proteine (2 autonome)
- Partea transmembranar (F0): canal
protonic
- Gtul i capul (3 + 3 + 1 +
+ 1 + 1): ATP sintaza
- Funcionarea presupune rotirea
subunitii F1 ce cuprinde 3 situsuri
catalitice
- Fiecare din situsurile catalitice trece
prin trei conformaii succesive: deschis,
lax, strns

F0 ATPaza

H Noji et al., Nature 386:299, 1997

Componentele potenialului
membranei mitocondriale interne ()

Cum este realizat gradientul protonic?

Lanul transportor de electroni (respirator)

Lanul transportor de electroni (respirator)

I. Complexul NADH
dehidrogenazei
-

III. Complexul
citocromilor b-c1
-

500 kD
Cel puin 8 proteine
(una autonom)
Funcioneaz ca dimer (2x500 kD)
3 centre hemice; 1 centru fier-sulf
Transfer e- de la CoQ la citocrom c

800 kD
22 proteine
(7 autonome)
1 centru flavinic
Cel putin 5 centre
fier-sulf
Preia e- de la NADH
i i transfer
ubiquinonei (CoQ)

IV. Complexul citocrom oxidazei

(citocromilor a-a3)
-

300 kD
9 proteine (3 autonome)
Funcioneaz ca dimer (2x300 kD)
2 citocromi, 2 centre cu Cu2+
Transfer e- de la citocrom c la oxigen,
cu producerea de ap

O
X

Metanol

I
D
A

Formaldehid

R
E
Acid formic

Dioxid de carbon

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed.,

Bruce Alberts, Garland Science, 2002

De unde provine
energia necesar
meninerii
gradientului de
protoni ?

Metan

ARDERE

Eliberare
exploziv a
energiei

OXIDARE BIOLOGIC

Eliberare
treptat a
energiei

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

ubiquinon

Complexul
b-c1
citocrom oxidaz

Direcia fluxului de electroni

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Potenialul redox (mV)

Energia liber (kcal/mol)

dehidrogenaz

Citocromul c

Molecule transportoare de electroni

forma oxidat

forma redus

nicotinamid
Nicotinamid
Adenin
Dinucleotid
(Phosphate)

Riboz

Riboz

Adenin

Adenin

Riboz

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed.,

Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Riboz

Fosfat lips din

NAD

Molecule transportoare de electroni

forma oxidat
Flavoproteine: FAD, FMN

mi

biquinona

forma redus

Cuplarea lanului respirator de

fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;

De unde provin
electronii de nalt
energie ai NADH
+ H+i FADH2?
Ciclul Krebs

Cine furnizeaz combustibilul ciclului Krebs?

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Decarboxilarea piruvatului

Complexul piruvat-dehidrogenaz
localizat n matricea
mitocondrial
24 subuniti E1, 24 E2 i 12 E3
legtura dinte glicoliza anaerob
i fosforilarea oxidativ
activitate reglat de PDK
(kinaz) i PDP (fosfataz)

Glicoliza
anaerob

- se desfoar n citosol
- profit net: 2 mol. ATP
- rezult 2 mol. piruvat

oxidarea acizilor grai

se desfoar n matricea mitocondrial

- acizii grai intr sub form de Acil-CoA
- rezult Acetil-CoA

Decuplarea lanului respirator de

fosforilare
Cuplarea chemiosmotic (cuplarea lanului
respirator cu fosforilarea din ATP sintaz)
este esenial pentru producerea ATP;
mpiedicarea acestei cooperri conduce la
disiparea sub form de caldur a energiei
acumulate n gradientul protonic;
Decuplantul fiziologic, termogenina,
asigur protecia termic a organismelor.

Funciile mitocondriei
A. Funciile membranei mitocondriale externe
1.
2.
3.
4.

Permeabilitate controlat (porine)

Acil-CoA sintaza
Utilizarea acizilor grai n ciclul
Krebs
Carnitin-aciltransferaza I
Inactivarea aminelor biogene (monoaminoxidaza)

Funciile mitocondriei

B. Funciile compartimentului intermembranar

1. Compartiment tampon (microclimat adecvat
funcionrii mitocondriei)
2. Adenilat kinaza (ATP + AMP = 2ADP)
3. Nucleozid difosfokinaze

Importul proteinelor n mitocondrie

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Mecanismul importului

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Funciile mitocondriei

C. Funciile matricei mitocondriale

1. Ciclul acidului citric (ciclul acizilor tricarboxilici,
ciclul Krebs)
2. -oxidarea acizilor grai
3. Biosinteza proteinelor
4. Replicarea i transcrierea ADN mitocondrial

Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne
1. Transportul de metabolii

Adaptare dup Molecular Biology of the Cell 4th Ed., Bruce Alberts, Garland Science, 2002

Funciile mitocondriei
D. Funciile membranei mitocondriale interne
2. Lanul transportor de electroni (lanul respirator)
3. Producerea de ATP
4. Cooperarea dintre lanul respirator i ATP sintaz

Alte funcii ale mitocondriei

1. Preia i stocheaz ioni de calciu
n asociere cu RE (MAM)
Fluxul de Ca:
influeneaz producerea de energie
poate iniia apoptoza
moduleaz semnalizarea intracelular
Poate declana autofagia mitocondriilor

NatRevMolCellBiol 2012; doi:10.1038/nrm3412

Alte funcii ale mitocondriei

2. Produce specii reactive de oxigen (ROS)
Una din principalele surse celulare
ROS:
creterea ROS -> stress oxidativ
stimuleaz producia de citokine proinflamatorii
crescute n boli autoimune, cardiovasculare i maligne
iniiaz ci de semnalizare intracelular

Producerea de ROS n mitocondrie

GPX glutation peroxidaz, SOD Superoxid dismutaz

Journal of Hematology & Oncology 2013, 6:19

Alte funcii ale mitocondriei

3. Rol important n apoptoz
Iniiaz apoptoza prin calea caspazelor
Eveniment central: eliberarea citocromului c din MMI n
citosol -> importana permeabilitii sistemului de
membrane mitocondriale (VDAC)
Citocrom c -> APAF -> apoptozom -> activarea caspazelor
Proteine antiapoptotice (bcl-2, bcl-XL) i proapoptotice (bax,
bak, bid)

Mitocondria i apoptoza

B Desagher S et al., Trends Cell Biol 10:369, 2000

Boli mitocondriale
Miopatii mitocondriale
MELAS (Mitochondrial Encephalomyopathy, Lactic Acidosis,
and Stroke-like syndrome)
MERRF (Myoclonic Epilepsy and Ragged-Red Fibers)

Diabet i hipoacuzie (DAD)

Neuropatie optic ereditar Leber
Atrofie optic ereditar autozomal dominant (ADOA)
Sindrom Leigh (encefalopatie sclerozant subacut)

http://www.mitodb.com/

Originea mitocondriei
Teoria endosimbiotic;
Argumente:
Prezena cardiolipinei n
membrana intern;
Prezena porinelor n
membrana extern;
ADN propriu, circular;
Ribozomi 70S, sintez
proteic sensibil la
cloramfenicol, insensibil la
cicloheximid;
Capacitate proprie de a se
divide.

http://www.23andme.com/

http://www.23andme.com/