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Practica No.

Conocimiento y uso del material del laboratorio

Objetivo: Conoceremos el laboratorio clnico, sus instalaciones y sus reas,


asi como el material y su uso clasificado de acuerdo a sus caractersticas.
Generalidades: El laboratorio clnico es el lugar donde se desarrolla la
actividad de anlisis, aplicando mtodos y tcnicas de diagnsticos para
ayudar a mejorar la salud y la calidad de vida del ser humano. Por lo cual es
importante seguir todas las instrucciones y pasos en cada una de las
prcticas o anlisis que se realicen para obtener los resultados correctos. En
todas las prcticas deben anotarse las observaciones, los resultados y las
conclusiones.
Fundamento:
Procedimiento:
1.- Identificar las diversas reas de trabajo en el laboratorio. Colorear cada
rea identificada en la figura 1.

reas

Nombre

Instalaciones

Mesa de
trabajo.

II

Lavado y
esterilizado.

Hidrulica,
gas, elctrica
y drenaje.
Hidrulica y
drenaje.

III

Almacn.

Elctrica

IV

Actividades
Especificas
Anlisis de
muestras.

Color

Lavado de
instrumentos
y materiales.
Guardado de
reactivos y
sustancias.

Celeste

Verde

Gris

Caf

2.- Identificar la ubicacin de las reas de trabajo del laboratorio, y ubicar su


propio asiento en la mesa que se le indique, iluminar de color guinda en la
figura 1.
3.-Identificar las diversas instalaciones de agua, electricidad, gas y drenaje
en tu mesa de trabajo, y en la figura 2, ilumina
a) Azul, la instalacin de agua.
b) Amarillo, la instalacin de gas.
c) Rojo, la instalacin elctrica.
d) Negro, el drenaje.
5.- Uso de las instalaciones de gas, agua, elctrica y drenaje. Reportar sus
observaciones y resultados.
Observaciones generales:
El laboratorio clnico es un establecimiento ligado a la atencin mdica, para
el diagnstico, anlisis y tratamiento a problemas de salud.

Algunos puntos del reglamento son: entrar en silencio y orden, utilizar la


bata blanca, cubre boca, guantes, cabello recogido, no ingerir alimentos ni
bebidas en el laboratorio, no utilizar cosmticos ni barniz en las uas, no
fumar, no utilizar joyera, tener limpieza en las mesas de trabajo y el
material o vestimenta usado debe de ser desinfectado.
Un laboratorio debe tener secciones como; hematologa, inmunologa,
qumica clnica, microbiologa, para que todo est bien organizado. Tambin
se observaron los materiales por clasificacin de uso y por fabricacin (del
material del que estn fabricados).

Observaciones:
En esta prctica se observaron las reas con las que cuenta el laboratorio:
mesa de trabajo, lavado y esterilizado y el almacn (estas son con las que
cuenta el laboratorio debido a que el espacio es muy reducido). Tener en
cuenta que en un laboratorio clnico adecuado cuenta con registro de
paciente y sala de espera, toma de muestras, reas de laboratorio, almacn
y servicios sanitarios.
El laboratorio cuenta con instalaciones hidrulicas y drenaje en lavado y
esterilizado, elctrica en almacn.
Aparte de observar la estructura del laboratorio observamos los materiales
que se encuentran en l, la funcin que tiene cada uno, su clasificacin por
uso (se clasifican por la utilidad que tienen) y clasificacin por fabricacin
(se clasifican segn el material del que estn hechos).

Resultado
Puntualidad

Silencio y
orden

Cumplir con
las normas
de
bioseguridad

Higiene y
salud

Identificacion
de areas e
instalaciones

Desarrolo de
la practica o
tecnica

Tener la
practica con
procedimient
o

Preparar
materiales

Identificaion
de los
materiales

Obtener sus
observacione
sy
resultados

Realizar su
reporte y
conclusion

Entrega de
material y
equipo

Redactar
conclusiones

Limpieza de
las areas de
trabajo

Conclusin:

Esta prctica fue de mucha ayuda ya que aprendimos a identificar cada uno
de los instrumentos y materiales del laboratorio de acuerdo a su
clasificacin por uso y por fabricacin, en cada uno de los materiales cul es
su utilidad de acuerdo al rea que se utiliza, tambin me ayudo a poder
identificar en donde se encuentran situadas las instalaciones del laboratorio,
su uso correcto y como est organizada.

Practica No. 2 Tcnicas de Lavado para el Material del Laboratorio


Objetivo: conocer las diferentes tcnicas de lavado de laboratorio, adems
de conocer la preparacin de las diferentes disoluciones de sustancias
qumicas utilizadas en dichas tcnicas.
Generalidades: Es el procedimiento de limpieza del material de laboratorio
es importante especificar los mtodos de lavado fsico y qumico, y
esterilizacin ya que dependiendo del tipo de suciedad y contaminacin del
material sern los procedimientos adecuados al usar.
Observaciones y fuentes de error:
Al empezar la prctica se debe saber el procedimiento, despus vamos por
los materiales sucios a lavar, posteriormente se hizo la solucin jabonosa
con agua y detergente, despus cada integrante del equipo toma un
instrumento y lo empieza a lavar con la solucin jabonosa y con esponjas,
fibras, escobillones y franelas, a m me ha tocado lavar los portaobjetos,
tomo la esponja cargada de solucin jabonosa y cuidadosamente del lado
suave de la esponja empiezo a frotar a los portaobjetos sin rayarlos, se
desaguan y se ponen a secar. La pipeta se lava ponindole la solucin
jabonosa y haciendo un movimiento de vaivn movindolo de arriba hacia
abajo, se desagua y se pone a secar, los tubos de ensayo y el matraz
Erlenmeyer se lava con escobillones limpindolos sin hacer ni mucha ni muy
poca presin sobre ellos y por fuera con la esponja, se desaguan y se ponen
a secar, el vaso de precipitado por dentro y por fuera se frotan con la
esponja, se desaguan y se ponen a secar, el vaso de precipitado por dentro
y por fuera se frotan con la esponja, se desagua y se pone a secar, se
observa que no queden residuos de suciedad y aceite, si estn totalmente
limpios se dejan secar, si hay suciedad hay que lavarlo nuevamente. En
nuestro caso nos paso con los tubos de ensayo y los matraces Erlenmeyer.
Se llevan con precaucin al almacn para su resguardo y se levanta lo
utilizado, se hace la limpieza de las reas de trabajo y se ha concluido la
prctica.
Los errores que nos sucedieron se produjeron al no lavar correctamente y
dejar residuos de suciedad dentro y fuera de los instrumentos y para
resolver el problema se tiene que lavar nuevamente.
Conclusiones:
El material debe ser desinfectado y esterilizado completamente y
correctamente ya que de lo contrario puede haber complicaciones y
problemas por la combinacin de sustancias y los resultados saldran mal,
as que hay que ser cuidadosos en ese aspecto porque si no se lava
correctamente y es notable hay que lavarlo nuevamente.
Por ltimo se aprendi la utilizacin del autoclave para esterilizacin por
calos seco de los materiales y el procedimiento para hacer la mezcla
crmica para su uso en el lavado qumico en suciedad persistente.
Cuestionario:
1.- En qu momento debe realizarse el lavado fsico de los materiales del
laboratorio?

Despus de cada uso que se les d y si la suciedad es leve.


2.- nicamente en que situaciones realizamos el lavado qumico?
Cuando la suciedad es persistente y hay que tomar medios de limpieza ms
drsticos.
3.- Cul es la diferencia entre lavado fsico y qumico?
Que uno es utilizado para remover la suciedad normal y que el qumico hay
que tener precaucin en la elaboracin ya que son reactivos y sirven para
suciedad ms persistente.
4.- Qu funcin e importancia tiene realizar un procedimiento de
esterilizacin en el laboratorio clnico?
Para evitar problemas con los resultados al combinarse sustancias o por los
organismos que quedan.
5.- Cules son los cuidados que deben observar para cada uno de los
procedimientos realizados?
Limpiar correctamente los recipientes y materiales.
No aplicar mucha presin porque se pueden fracturar.
No dejar residuos de suciedad.
Utilizar proteccin para los reactivos.

Practica 3
Conclusin:
Las sustancias que se miden deben tener gran precisin ya que de lo
contrario todo se echara a perder ya que las medidas deben ser exactas
respetando siempre el menisco segn la forma que este tenga
independientemente de la sustancia que sea, si es cncavo debe ser sobre
la lnea marcada y si es convexo por debajo de la lnea, se aprendi a medir
con gran precisin los lquidos usados y tambin se aprendi el uso que
tienen los materiales graduados y los aforados y el uso correcto que tiene
cada uno de ellos .
Por otro lado tambin se aprendi la manera correcta de aforar en los
materiales utilizando instrumentos graduados para una mejor precisin y se
vio la forma correcta en la que se debe pipetear los lquidos respetando
siempre el menisco.
Observaciones:
Primeramente como se ha visto anteriormente se debe entrar en orden y
guardando silencio, tomar en cuenta las medidas de seguridad e higiene y
llegamos muy bien preparados con la mentalidad de lo que vamos a
desarrollar, con el objetivo de lo que haremos, despus solicitamos los
materiales y se verifican que todos estn bien en todas las formas posibles,
si se encuentra suciedad en ellos se deben de lavar, teniendo ya la practica
en mano se prosigue a seguir los pasos que esta nos muestra y los nuevos
pasos agregados por la maestra escrita en el pizarrn, colocamos agua en
los recipientes hasta llegar a la cantidad indicada que nos dicta la prctica y
procedemos a agregar los colorantes, un color diferente para cada material
volumtrico, seguimos los pasos para mezclar, agregamos o quitamos
cantidades de las sustancias segn lo requiera, como esto se elabor con
colorantes vegetales estos se separaban en sus colores pero al agitar se
mezclaban formando nuevos colores como lo establece la regla de los
colores primarios al combinarse, una vez que ya se ha practicado con todos
y cada uno de los materiales volumtricos, se procede a retirar el lquido y
las sustancias que se encuentran en ellos y proseguimos a hacer el correcto
lavado de estos materiales sin dejar residuos de suciedad, se colocan en
una posicin con la cual se puedan secar y se dejan sobre la mesa de
trabajo y eso ha sido todo, limpiamos nuestras reas de trabajo y hemos
terminado.
Fuentes de error:
Se produjo un error cuando la cantidad a poner en el material se nos pasa
de lo indicado y se tiene que volver a llenar si es necesario, tambin cuando
el menisco nos qued muy por debajo o por arriba de la lnea segn sea su

forma (convexo o cncavo) y se debe de medir nuevamente la sustancia ya


que esto debe tener una exactitud mxima.

Practica No.6 Uso y Manejo de la Centrifuga y el Bao Mara


Objetivo:
En la presente experiencia del alumno comprobara la funcin y aplicara el
uso de los aparatos indispensables como son la centrifuga y el bao Mara.
Generalidades:
La centrifuga es un mtodo que se utiliza para separar partculas de
diferentes densidades de una misma sustancia liquida por medio de su
fuerza centrfuga y centrpeta.
La incubacin por un medio hmedo es un mtodo de agua, acomodando en
ella un recipiente que contenga una sustancia la cual a travs de un calor
emitido, la sustancia se activara o inactivara, de acuerdo al tipo de
sustancia, a este proceso tambin se le llama bao Mara.
Fundamento: Investigar; toma y manejo de muestras (Sangre venosa, orina
y heces fecales), descripcin, operacin, manejo y cuidados de bao Mara,
centrifuga y microcentrifuga. As como sus respectivos principios y
aplicaciones (Bao Mara; Reacciones enzimticas: centrifuga; Fuerza
centrfuga y centrpeta).
SANGRE
La toma deber hacerse en un lugar perfectamente iluminado y con el
paciente cmodamente sentado. Localizar una vena adecuada en la cara
anterior del codo y colocar el torniquete en la parte media del brazo.
Desinfectar el rea con un algodn humedecido con alcohol al 70% e
introducir la aguja con el bisel hacia arriba. Si la sangre no fluye
espontneamente y se est utilizando una jeringa, jalar el mbolo y aspirar
con suavidad; si se estempleando equipo al vaco presionar el tubo de
ensaye hacia arriba. Al empezar a fluir la sangre retirar el torniquete y una
vez que se haya obtenido la cantidad de sangre requerida (generalmente 610 mL), retirar la aguja y colocar una torunda con alcohol sobre el sitio de
puncin ejerciendo presin para detener la hemorragia.
Si la toma se hizo con jeringa, retirar la aguja y verter la sangre a un tubo
estril, dejndola resbalar lentamente por la pared para evitar hemlisis.
Tapar el tubo cuidadosamente. Si la muestra necesaria es sangre total
utilizar el anticoagulante adecuado segn el proceso que vaya a seguirse
(consultar con el laboratorio correspondiente), ya que algunos
anticoagulantes pueden interferir con algunas pruebas. Si la toma de sangre
es para la obtencin de suero, no usar ningn anticoagulante. Si la toma de
sangre es para mtodos moleculares, utilizar EDTA como anticoagulante, y
si el tubo tiene gel, centrifugar lo ms pronto posible.
Cuando se va a enviar el tubo con la sangre total (con o sin anticoagulante)
para evitar la hemlisis utilizar aguja adecuada, evitar agitar el tubo. Evitar
calentamiento o enfriamiento excesivos ya que deja de ser til y habra que
tomar y enviar una nueva muestra.
Muestras para el Departamento de Inmunologa e Inmunogentica:

Tomar las muestras en ayunas, excepto para la donacin altruista que


puede tomarse en cualquier momento.
Tipificacin de genes HLA clase I y II para seleccin de donador para
Trasplante de Mdula sea (TMO), paternidades o donadores altruistas:
2 tubos con anticoagulante EDTA (Tapn lila) por persona.
Para nios menores de 3 aos solo un tubo:
** Nota: si requiere de prueba cruzada para TMO incluir adicionalmente:
2 tubos con anticoagulante ACD (Tapn amarillo), de cada persona.
1 tubo con suero del paciente (sin anticoagulante: tapn rojo).
Trasplante Renal:
Tipificacin de genes HLA clase I y II y prueba cruzada, deteccin de
anticuerpos anti-HLA por ELISA o
Luminometra:
2 tubos con anticoagulante EDTA (Tapn lila) de 7 ml por persona.
2 tubos con anticoagulante ACD (Tapn amarillo), de cada persona.
1 tubo con suero del paciente (sin anticoagulante: tapn rojo).
Cultivo de Mezcla de Linfocitos (CML):
2 tubos de 10 ml con HEPARINA (Tapn verde) de 10 ml, de cada persona.
Si el paciente est en recada o tiene bajo conteo leucocitario enviar 3 tubos
con anticoagulante HEPARINA
(Tapn verde) de 10 ml.
Manejo:
La muestra debe llegar al laboratorio para su procesamiento, un mximo de
20 horas despus de la toma de la muestra. Para estudios de inmunologa e
inmunogentica, enviar el mismo da de la toma de muestra. Enviar los
tubos en posicin horizontal a temperatura ambiente (20 - 25 C). Si la
temperatura es mayor colocar una capa gruesa de gasa o apsito sobre los
tubos y encima un gel refrigerante fro (4C). NUNCA EN REFRIGERACIN.
SANGRE (CONT.)
Muestras para CV (VIH y linfotipificacin): Tomar la muestra con ayuno
mnimo de 10 horas. Utilizar tubos con EDTA (adultos 7 ml, nios 3 ml).
Enviar la muestra a temperatura ambiente (20-25C). Para CD4 y Carga
Viral enviar dos tubos de 5 ml cada uno, para nios solo uno de 5 ml en el
caso de Carga Viral separar el plasma centrifugado a 3000 rpm/15 enviar
congelado en tubo de plstico anotando identificacin del paciente, hora y
fecha de la toma Para el diagnstico de citomegalovirus por PCR se requiere
de 6 a 10 ml de sangre con EDTA Para la identificacin directa de
Tripanosoma cruzi (Hematocrito fluorescente QBC) Tomar 3 ml en tubo con
EDTA Para el diagnstico de leptospirosis se requieren de 3 a 5 mL de

sangre sin anticoagulante, la muestra es procesada inmediatamente, se


recomienda que sea tomada en el laboratorio si el objetivo es realizar
cultivo.
Manejo:
La muestra debe llegar al laboratorio antes de 20 horas despus de haber
sido tomada (CV-VIH y linfotipificacin). Para el diagnstico de
citomegalovirus la muestra debe llegar al Instituto en un horario de 7 a
11:00 A.M. si es necesario transportarla deber hacerse en un contenedor a
temperatura ambiente La muestra debe trasladarse inmediatamente al
laboratorio para su procesamiento; ya que el diagnstico se hace mediante
la observacin de las formas vivas de tripomastigotes de T. cruzi El manejo
es directo e inmediato.
SANGRE PERIFRICA
Para la recoleccin de sangre perifrica, se debe colectar la muestra en una
bolsa con ACD-A por medio de afresis con previa movilizacin de clulas
progenitoras hematopoyticas. El protocolo de cosecha puede ser elegido
por el mdico y/o BACECU de acuerdo al diagnstico del paciente. Se deber
enviar plasma autlogo y biometra hemtica del producto tomado de la
bolsa de cosecha directamente. Para la criopreservacin de sangre
perifrica se debe mantener la muestra en la bolsa de cosecha del hospital
con ACD-A como anticoagulante. La unidad debe llegar al Laboratorio en no
ms de 24 hrs. despus de haberse cosechado.
ORINA
Tomar una muestra de la miccin espontnea despus de una cuidadosa
limpieza de la regin urogenital con agua y jabn y luego con benzal al 1%.
Instruir al paciente para que deseche la primera parte de la miccin y se
colecta el chorro medio en un recipiente estril, de boca ancha con tapa de
rosca. Slo en caso de sospechar parsitos, se usa la primera parte de la
miccin. Para diagnstico de infeccin por agentes bacterianos. Tomar una
muestra de la miccin espontnea despus de una cuidadosa limpieza de la
regin urogenital con agua y jabn y luego con benzal al 1%. Instruir al
paciente para que deseche la primera parte de la miccin y se colecta el
chorro medio en un recipiente estril, de boca ancha con tapa de rosca. Slo
en caso de sospechar parsitos, se usa la primera parte de la miccin. Para
el diagnstico de citomegalovirus por PCR, tomar una alicuola de 50 a 100
ml o en el caso de que el paciente est hospitalizado se requiere el envo de
la bolsa recolectora Para el diagnstico de enfermedades exantemticas
tomar la muestra entre el da 0 5 despus de la aparicin del exantema
Para el diagnstico de tuberculosis por PCR se requiere de 5 a 20 mililitros
de la primera miccin de la maana en recipientes de plstico. Para el
diagnstico de Leptospirosis se requieren 30 mL, se recomienda el chorro
medio de la primera miccin de la maana, en un frasco estril, de boca
ancha, de preferencia de plstico, bien sellado y rotulado, especificar tipo de
muestra, fecha y hora de la toma.
Manejo:

Los frascos con las muestras se empaquetan en una caja de poliestireno


esponjoso con refrigerante congelado para protegerlos del calor excesivo. El
tiempo entre la toma de muestra y su llegada al laboratorio nunca debe
exceder las 24 horas. Se envan las muestras a temperatura ambiente
durante las 2 primeras horas El tiempo entre la toma de muestra y el arribo
al lab. Nunca debe exceder de 24 horas conservar y enviar refrigerada, debe
llegar al laboratorio entre las 7 y las 11 A.M. El tiempo de llegada al
laboratorio no debe exceder de 2 das Para el diagnstico de Micobacterias,
el tiempo no debe exceder de 4 horas. Se enva a temperatura ambiente y
debe llegar al laboratorio antes de 8 horas.
MATERIA FECAL
La muestra de materia fecal (diarreica, pastosa o formada) debe ser
reciente (< de 24 hrs ) Las heces obtenidas del suelo, excusado o paal no
son aceptadas por la contaminacin ambiental a que fueron expuestas. Las
muestras enviadas tanto en hisopo rectal (a menos que el paciente no
pueda evacuar) como en frascos de vidrio sern rechazadas. La muestra
debe enviarse de acuerdo con el estudio que vaya a efectuarse: Estudios
virales: Si la materia fecal es slida o semislida tomar una cantidad que no
debe exceder el tamao equivalente al de una nuez o de 2 a 5 g; si es
lquida bastan 3 a 10 ml para diagnstico de Rotavirus. Depositarla en un
recipiente de plstico no estril, de boca ancha y tapa de rosca con sello de
seguridad para evitar su derrame. Para el diagnstico de ntrax
gastrointestinal transfiera una cantidad mayor o igual a 5 g de heces,
directamente a un recipiente de boca ancha, limpio, estril, seco y a prueba
de fugas. Identificacin de poliovirus para casos de Parlisis Flcida Aguda
(P.F.A.) tomar 2 muestras de 10 a 20 gr cada una con intervalo de 2448
horas entre cada muestra. Colocar cada muestra en un envase de plstico
de boca ancha con cierre hermtico. Para Identificacin de enterovirus no
polio tomar una muestra de 10 a 20 gr y colocarla en un envase de plstico
de boca ancha con cierre hermtico. . Si se buscan Micobacterias se envan
de 2 a 3 gramos de muestra sin ningn medio de transporte Estudios
parasitoscpicos: Colectar tres muestras en 3 das consecutivos. Si la
materia fecal es slida o semislida tomar una cantidad que no debe
exceder el tamao equivalente al de una nuez, si es lquida bastan 1 a 2 mL.
Depositarla en recipientes de plstico, estriles de boca ancha con tapa
hermtica.
Manejo:
Agentes virales: Transportar la muestra a 4 C con refrigerantes congelados.
NO ENVIAR HISOPO RECTAL Agentes bacterianos: Enviar las muestras a
temperatura ambiente Estudios parasitoscpicos: no adicionar
conservadores Las muestras diarreicas se envan de inmediato. Enviar a
temperatura ambiente. Mantener en refrigeracin hasta su arribo al
laboratorio. Transporte al laboratorio las heces sin conservar dentro de un
lapso de 1 hora. Para tiempos de transportacin mayores de 1 hora,
consrvese de 2-8 C. El medio Cary-Blair u otro medio de trasporte
equivalente es aceptable. Mantener la red fra del envo a una temperatura
de 0 a 10C desde el momento que se colecta hasta que llega al laboratorio.
Mantener la red fra del envo a una temperatura de 0 a 10C desde el
momento que se colecta hasta que llega al laboratorio. Mantener y enviar

refrigerada No adicionar conservadores mantener en refrigeracin. Las


muestras diarreicas se deben observar de inmediato (30 minutos como
mximo despus de la deposicin) en caso contrario se debe adicionar
como preservador el menthiolate yodo-formaldehido (MIF) e indicarlo en la
etiqueta de identificacin.
Bao Mara
El concepto de bao Mara implica el calentamiento indirecto de la sustancia
por conveccin trmica desde el medio lquido (agua, frecuentemente).

Para calentar al bao Mara hay que introducir un recipiente pequeo en el


que se deposita la sustancia dentro de otro ms grande que contiene un
lquido y calentar este por su base. De este modo, se calienta en primer
lugar el lquido contenido en el recipiente de mayor tamao y est va
calentando gradualmente el contenido del recipiente menor, de un modo
suave y constante. Es indispensable que en todo tiempo el recipiente
interior (ms pequeo) est en contacto con el lquido para que se produzca
la transmisin de calor.
Utilizando diferentes lquidos (aceites, soluciones salinas, etctera) en el
recipiente grande se obtienen diferentes temperaturas de trabajo. Cuando
se usa agua, la mxima temperatura del producto del recipiente superior no
exceder los 100C (punto de ebullicin del agua a la presin de 1 atm).
El bao de Mara o bao serolgico para laboratorio es un equipo que se utiliza en laboratorios
de qumica, este equipo se utiliza para el calentamiento indirecto, por conveccin trmica del
medio y de sustancia, se basa en un mtodo empleado para conferir la temperatura uniforme a
una sustancia liquida o slida, sumergiendo el recipiente que lo contiene en otro mayor con
agua que se lleva hasta la ebullicin.
Tambin es utilizado para realizar pruebas serolgicas y
procedimietosde incubacion, agitacion, inactivacin, biomdicos, farmacuticos.
Por lo general, se utilizan con agua, pero tambin se puede trabajar con aceite. Los rangos de
temperatura en los cuales normalmente son utilizados estn entre temperatura ambiente (2022C) y los 60C. Tambin se pueden seleccionar temperaturas de 100C.

Partes:

Termostato: La funcin que cumple un termostato es evitar que el agua fluya dentro del
motor, hasta que el equipo llegue a su temperatura de funcionamiento normal

Cubierta: Es la parte exterior que cubre el interior del bao Mara

Tanque: Almacena el agua

Bandeja Difusora: Dispositivo que se coloca en el fondo de los baos de Mara, con el
fin de soportar los recipientes que se ponen en el tanque

Termmetro: Encargado de medir la temperatura

Perilla de Temperatura: Permite ajustar y regular la temperatura

Cuidados:
Antes de Usarlo

Cuidar que tenga siempre agua destilada a la altura que cubra la resistencia

Ajustar la temperatura deseada con el termostato

Durante el Uso

Al utilizar termmetros en un bao de Mara, este debe estar suspendido dentro del
agua, no descansando en el fondo del bao

No mover una vez este encendido

Despus de Usarlo

Apagar y desconectar

Retirar el agua si ya no va a utilizarse

Si se utiliza continuamente hay que cambiar el agua semanalmente


Centrifuga

La palabra centrfuga proviene de la palabra latina centrum, que significa centro y de la


palabra fugare que significa huir.
La centrfuga es un instrumento de laboratorio que a sido diseada para utilizar la fuerza
centrfuga que se genera en los movimientos de rotacin, con el fin de separar los
elementos constituyentes de una mezcla. Existe una amplia diversidad de centrfugas para
poder atender necesidades especficas de la industria y la investigacin.

Para que se usa la centrifuga?


La centrfuga se a diseado para utilizar la fuerza centrfuga para separar slidos
suspendidos en un medio lquido por sedimentacin o para separar lquidos de diversa
densidad. Los movimientos rotacionales permiten generar fuerzas mucho ms grandes que
la gravedad, en periodos controlados de tiempo.
En el laboratorio las centrfugas se usan generalmente en procesos como la separacin
por sedimentacin de los componentes slidos de los lquidos biolgicos y, en particular,
en la separacin de los componentes de la sangre: glbulos rojos, glbulos blancos,
plasma y plaquetas, entre otros, y para la realizacin de mltiples pruebas y tratamientos.
Funcionamiento
El centrifugado es una sedimentacin acelerada, ya que la aceleracin de la gravedad se
sustituye por la aceleracin centrfuga: \omega^2 r , donde \omega\, es la velocidad
angular de giro de la centrifugadora y r es la distancia al eje de la centrifugadora. Puesto
que la velocidad mencionada puede ser de miles de revoluciones por minuto, se alcanzan
aceleraciones mucho mayores que la intrnseca de la gravedad.
Adems de ser ms rpida que la sedimentacin, la centrifugacin permite separar
componentes que la mera sedimentacin no podra realizar, por ejemplo separar el uranio
235 del uranio 238.
Como la sedimentacin, al centrifugado lo rige la ley de Stokes, segn la cual las
partculas sedimentan ms fcilmente cuantos mayores sean su dimetro y su peso
especfico comparado con el del fluido, y cuanto menor sea su viscosidad. Es importante
considerar que la funcin del fluido es esencial, pues sin su viscosidad todas las partculas
se precipitaran a la misma velocidad.
Hay diversas clases de centrfugas, entre las que se citan las siguientes:

La centrfuga de mesa

La ultracentrfuga

La centrfuga para microhematocrito

La centrfuga de pie
Estos son los de mas amplio uso en los laboratorios de salud pblica, de investigacin y
clnicos, entre otros.

Componentes de la Centrfuga
Los componentes ms importantes de una centrfuga son los siguientes.
El control elctrico/electrnico que dispone generalmente de los siguientes elementos:
1.

2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Control de encendido y apagado, control de tiempo de operacin temporizador,


control de velocidad de rotacin en algunas centrfugas, control de temperatura en
centrfugas refrigeradas, control de
vibraciones mecanismo de seguridad y sistema de freno.
Sistema de refrigeracin, en las centrfugas refrigeradas.
Sistema de vaco, en ultracentrfugas
Base
Tapa
Carcaza
Motor elctrico
Rotor. Existen rotores de diverso tipo, los ms comunes son los de ngulo fijo, los
de cubo pivotante, los de tubo vertical y los de tubo casi vertical, los cuales se explican a
continuacin.

MICROCENTRIFUGA
DEFINICION:
Microcentrfuga es una mquina centrfuga especializada utilizada en el
laboratorio clnico. sta pone en rotacin una muestra ms pequea para
separar por fuerza rotatoria sus componentes o fases (generalmente una
slida y una lquida), en funcin de su densidad. Esta es de uso para los
tubos capilares.
Es muy til para precipitar ADN y otras sustancias que se trabajan en
volmenes pequeos.
Descripcin
Descripcin de sus partes
Base del equipo

1. Tapa: para proteger la muestra


en el momento de centrifugacin.
2. Cobertura Metlica: Para
asegurar los capilares
3. Dispositivo de seguridad: Para
asegurarse de que este bien
cerrada.
4. Botn de tiempo: Para determinar
el tiempo de centrifugacin de la
muestra
5. Botn ON: Para encender y
apagar el equipo.
6. Bombilla de encendido: Incida que el equipo est en funcionamiento.
7. Placa de escala: Para determinar los valores.

Funcionamiento
3.1 Conectar el cable a la conexin elctrica de 110 voltios
3.2 Accionar el dispositivo de seguridad para abrir la tapa.
3.3 Colocar los microhematocritos con la muestra, teniendo en cuenta la
carga en el rotor de forma balanceada.
3.4 Asegure los capilares con la cobertura metlica.
3.5 Fijar el tiempo de centrifugacin
3.6 Observar detenidamente el funcionamiento, si no existe ningn
problema contine, de lo contrario suspndase.
3.7 Accionar el dispositivo de seguridad
3.8 abra la tapadera para sacar los tubos.
3.8 Desenchufe
Reacciones enzimticas:
La naturaleza de las enzimas
1) La reaccin qumica se lleva a cabo bajo condiciones suaves
2) Accin especfica de acuerdo a la clase de enzima
3) Tasas de reaccin muy rpidas
4) Numerosas enzimas para diferentes objetivos
Son aquellos procesos biolgicos en los que tienen lugar una enzima.
Enzima es un complejo proteico que presenta la propiedad catalizadora, es decir que aceleran
o aletardan procesos qumicos en cuanto le convenga a la clula. Si normalmente la

degradacin de una sustancia tarda diez das en degradarse, con la accin de una enzima
tardara una hora. Esto se debe a que cada reaccin qumica presenta una energa de
activacin, esto es una barrera energtica que tienen que vencer los reactivos para
transformarse en productos; la enzima, si es cataltica positiva o aceleradora, disminuye esa
barrera para que sea ms fcil convertirse en productos, y si es retardadora o negativa,
aumenta esa barrera.
Cabe destacar que la enzima no sufre transformacin durante la reaccin qumica, es decir, no
se altera qumicamente, y puede ser reutilizada para la siguiente reaccin.
Presenta una zona alexitrica que es la que se une con el sustrato y as lo degrada y lo
transforma en una molcula mucho ms simple.
Por ejemplo: la lipasa, es una que degrada las grasas, que son molculas enormes, que no
puede asimilarlas la clula por lo que necesita la accin de enzimas para llevarlo cavo.
La gran mayora de los procesos celulares esta mediado por enzimas, desde la duplicacin del
ADN, la reproduccin celular, la asimilacin y desecho de sustancias, la concentracin de
sustancias dentro de las clulas, etc. Las enzimas son especficas, esto quiere decir que para
cada sustrato hay una enzima especfica, es el tpico caso de la cerradura y la llave, para cada
cerradura hay una llave, y solo una que pueda abrir la puerta, pasa igual con las enzimas.
Fuerza Centrifuga

En la mecnica clsica o newtoniana, la fuerza centrfuga es una fuerza ficticia que


aparece cuando se describe el movimiento de un cuerpo en un sistema de referencia en
rotacin, o equivalentemente la fuerza aparente que percibe un observador no inercial que
se encuentra en un sistema de referencia rotatorio.
La fuerza centrfuga es la ms conocida de las fuerzas circulares. Veamos en qu
consiste.
Si tienes una botella en la mano y la giras en el aire haciendo crculos con ella, vers que
el agua de su interior forma un remolino como el de la imagen. Esto se debe a la fuerza
centrfuga.
Cuando un objeto es sometido a un movimiento circular parece que ese objeto est
intentando escapar y alejarse del centro del movimiento. De ah el nombre que ecibe esta
fuerza, centrfuga, que significa huir del centro.

El calificativo de "centrfuga" significa que "huye del centro". En efecto, un observador no


inercial situado sobre una plataforma giratoria siente que existe una fuerza que acta
sobre l, que le impide permanecer en reposo sobre la plataforma a menos que l mismo
realice otra fuerza dirigida hacia el eje de rotacin. As, aparentemente, la fuerza centrfuga
tiende a alejar los objetos del eje de rotacin. El trmino tambin se utiliza en la mecnica

de Lagrange para describir ciertos trminos en la fuerza generalizada que dependen de la


eleccin de las coordenadas generalizadas.
En general, la fuerza centrfuga asociada a una partcula de masa
referencia en rotacin con una velocidad angular

y en una posicin

en un sistema de
respecto del eje de

rotacin se expresa:

Por lo tanto, el mdulo de esta fuerza se expresa:

Fuerza centrpeta
Se llama fuerza centrpeta a la fuerza, o al componente de la fuerza que acta sobre un
objeto en movimiento sobre una trayectoria curvilnea, y que est dirigida hacia el centro
de curvatura de la trayectoria.
El trmino centrpeta proviene de las palabras latinas centrum, centro y petere,
dirigirse hacia, y puede ser obtenida a partir de las leyes de Newton. La fuerza
centrpeta siempre acta en forma perpendicular a la direccin del movimiento del cuerpo
sobre el cual se aplica. En el caso de un objeto que se mueve en trayectoria circular con
velocidad cambiante, la fuerza neta sobre el cuerpo puede ser descompuesta en un
componente perpendicular que cambia la direccin del movimiento y uno tangencial,
paralelo a la velocidad, que modifica el mdulo de la velocidad.La fuerza centrpeta no
debe ser confundida con la fuerza centrfuga, tal como se explica en la seccin
Malentendidos comunes.
La fuerza centrfuga y la fuerza centrfuga y centrpeta estn estrechamente relacionadas.
Ahora vamos a explicar la segunda.
La fuerza centrpeta es contraria a la centrfuga. Es la atraccin de un objeto que gira
circularmente entorno a un eje o un centro hacia ese centro. La fuerza centrpeta siempre
acta de forma perpendicular a la direccin del movimiento.
Podemos observar la fuerza centrpeta si atamos una pelota a una cuerda y la hacemos
girar: la cuerda sera la fuerza centrpeta.
Todo esto puede resultar confuso. Te voy a desvelar el secreto: la fuerza centrfuga es una
fuerza ficticia, slo sera "real" para un observador que estuviera en un marco de
referencia en rotacin.

Material:

8
2
2
1
1
1
1

tubos de ensayo de 13x100


tapones para tubo de ensayo.
pipetas graduadas de 5 mililitros.
vaso de precipitado de 100 mililitros.
cucharilla de porcelana.
gradilla metlica.
aplicador de madera.

Sustancias:

Agua corriente.
Arena.
Almidn (harina de trigo).
Orina.
Sangre venosa.

Equipo:

Centrifuga.
Bao Mara.
Cronometro.

Procedimiento: (Reportar el procedimiento a travs del desarrollo de


diagramas de flujo por cada una de las sustancias sin olvidar anotar pasos
del procedimiento que no estn mencionados aqu, con sus respectivos
dibujos)
1.-Preparar una mezcla de agua con almidon en un tubo de ensayo.
a) Colocar 5 mililitros de agua en un tubo de ensayo.
b) Colocar al tubo de ensayo con agua una porcin de almidon con
ayuda de una cucharilla de porcelana.
c) Tapar el tubo con un tapn y mezclar fuertemente hasta obtener una
mezcla homognea y etiquetar.
2.- Realizar el mismo procedimiento con la arena. Para mezclar utilizamos
aplicador de madera.
3.- Centrifugar las sustancias por un tiempo de 5 minutos a 1500 rpm (Los
tubos deben estar etiquetados, colocarlos sin tapones y equilibrar los portamuestras con el otro tubo que contenga agua a la misma cantidad de
sustancia, a este procedimiento se le llama calibrar los tubos).
4.- Colocar 5 mililitros de orina en un tubo de ensayo con ayuda de la
pipeta, previamente mezclada.}
a) Etiquetar y calibrar.
b) Centrifugar por un tiempo de 8 minutos a 3000 rpm.
5.- Extraer 5 mililitros de sangre venosa (Realizar procedimiento de acuerdo
con la tcnica previamente estudiada en la teora).

a) Colocar 2.5 mililitros de sangre extrada en un tubo de ensayo con


anticoagulante, tapar.
b) Colocar los 2.5 mililitros restantes en otro tubo sin anticoagulante.
c) Etiquetar.
d) Centrifugar la muestra sangunea con anticoagulante por un tiempo
de 10 minutos a 2500 rpm.
6.- Colocar el tubo con sangre sin anticoagulante en el bao Mara a 37C,
tratar de que el tubo al colocarlo en la gradilla del bao Mara tenga un
ngulo de inclinacin y tomar el tiempo observando cada 30 segundos si la
sangre ha coagulado. Anotar tiempo exacto.
a) Centrifugar despus de este procedimiento por un tiempo de 6
minutos a 2500 rpm.

Resultado:

Puntualidad.

Silencio y Orden.

Cumplir Normas
de Bioseguridad.

Higiene y Salud.

Colocar 5 ml. de
agua en un tubo
de ensayo.

Desarrollo de la
Practica.

Tener Practica
con
Procedimiento.

Preparar
Materiales.

Colocar almidon
con la cucharilla
de porcelana.

Tapar el tubo y
mezclar
fuertemente.

Etiquetar.

Colocar 5 ml. de
agua en un tubo
de ensayo.

Calibrar los
tubos en la
centrifugadora.

Etiquetar.

Mezclar
utilizando
aplicador de
madera.

Colocar Arena
con la cucharilla
de porcelana.

Centrifugar por 5
minutos a 1500
rpm.

Retirar los tubos.

Colocar 5 ml. de
orina en un tubo
de ensayo.

Etiquetar y
calibrar.

Colocar 2.5 ml.


de sangre en un
tubo sin
anticoagulante.

Colocar 2.5 ml.


de sangre en un
tubo con
anticoagulante.

Extraer 5 ml. de
sangre venosa

Centrifugar por 8
minutos a 3000
rpm.

Etiquetar.

Centrifugar
muestra con
anticoagulante
por 10 min. a
1500 rpm.

Colocar sangre
sin
anticoagulante
en el bao Maria
a 37C

Centrifugar por 6
min. a 2500 rpm.

Entrega del
material y
equipo.

Obtener
observaciones y
resultados.

Realizar reporte
y conclusion.

Lavado del
material.

Limpieza de las
areas de trabajo.

Redactar
conclusiones.

Observaciones:

Primeramente cuando entramos al laboratorio se debe entrar en orden a


tomar nuestros lugares correspondientes y en silencio, se deben aplicar las
normas de bioseguridad para evitar problemas y hacemos la limpieza total
del rea de trabajo.
Proseguimos a realizar la revisin de la prctica que se tiene escrita en la
libreta de trabajo, se repasan los temas y los fundamentos y si alguno de los
compaeros tienen dudas, se resuelven entre todos. Una vez hecho esto se
deber solicitar el material que est indicado en la prctica y que vamos a
utilizar, si en estos materiales se encuentra suciedad se deber lavar muy
bien y de la manera correcta por dentro y fuera para eliminar toda la
suciedad que hay en ellos y poder trabajar bien. Una parte del equipo
empieza por hacer las mezclas homogneas de agua con harina y arena, se
colocan 5 mililitros de agua en dos tubos de ensayo haciendo uso de la
pipeta, se le coloca una porcin de harina en el primer tubo con ayuda de la
cucharilla de porcelana, se coloca un tapn y se agita fuertemente hasta
mezclar y homogenizar, al segundo tubo se le coloca una porcin de arena
con ayuda de la cucharilla de combustin y se procede a mezclar utilizando
el aplicador de madera moviendo circularmente hasta homogenizar
completamente.
Se colocan en la centrifugadora sin taparlos, ponindolos en lados contrarios
para calibrarlos y se ponen a centrifugar por 5 minutos a 1500 revoluciones
por minuto, se espera el tiempo indicado y se extraen los tubos.
Despus haciendo uso de la pipeta se extrae 5 mililitros de orina y se coloca
en un tubo de ensayo sin tapar, se coloca en la centrifugadora y se calibra
con otro tubo lleno de agua a la misma capacidad y se centrifuga por 8
minutos a 3000 revoluciones por minuto, una vez pasado el tiempo se
extraen los tubos de ensayo y se colocan en la gradilla.
Por otro lado la segunda parte del equipo empezara por extraer una
muestra de sangre segn el mtodo investigado en el fundamento, se lleva
el proceso a cabo y utilizamos una jeringa estril de 5 mililitros
preferentemente, se extraen los 5 mililitros completamente, mientras se
preparan dos tubos de ensayo, en uno se coloca una gota de anticoagulante
y el otro queda vaco, se colocan 2.5 mililitros de sangre en cada tubo de
ensayo y el que no tiene anticoagulante se coloca rpidamente en el bao
Mara que est a 37C, se inicia el cronometro y cada 30 segundos se retira
para ver si ha coagulado y si no se coagulo se vuelve a meter hasta que
quede totalmente coagulado, se toma el tiempo exacto y se retira.
Al tubo que contiene anticoagulante se coloca en la centrifugadora
calibrndolo con un tubo con 2.5 mililitros de agua, se pone a centrifugar en
un tiempo de 10 minutos a 1500 revoluciones por minuto, una vez pasado el
tiempo se extrae y se coloca el tubo con sangre coagulada calibrada con el
mismo tubo con los 2.5 mililitros de agua, se pone a centrifugar por 6
minutos a 2500 revoluciones por minuto y se extrae.
Se colocan todos los tubos en la gradilla metlica y se escriben las
observaciones y resultados, se limpia el rea de trabajo y se lava muy bien
el material, una vez lavado se entrega en buenas condiciones, se redactan
las conclusiones y hemos terminado.

Fuentes de Error:
Las fuentes de error que se nos presentaron fueron mnimas, el primero fue
al hacer las mezclas ya que se nos pasaron los mililitros de agua por arriba
de la marca indicada, otro posible error fue en la extraccin de sangre ya
que el proceso fue rpido pero tardamos en colocar el tubo sin
anticoagulante en el bao Mara pero fue a tiempo ya que no se coagulo
antes.
En el pipeteo de la orina nos ocurri de que siempre se nos pasaba el
menisco por arriba de la marca y se tena que pipetear de nuevo hasta que
nos quedara la cantidad exacta y requerida.
En la calibracin de tubos de ensayo ya que los niveles de las sustancias no
estaban del mismo nivel y fue fallo del pipeteo ya que a un tubo le faltaba
ms sustancia y al otro subo le sobraba as que procedimos a quitarle y
agregarle las sustancias respectivamente a los tubos hasta lograr que
ambos quedaran nivelados.
Se centrifugaron los tubos pero el de las mezclas se nos pas el tiempo
indicado y la centrifugadora en la cual haba sangre y orina no se poda abrir
pero al final todo resulto bien.
Conclusin:
En esta prctica se aprendi fundamentalmente a utilizar correctamente la
centrifuga y el bao Mara ya que ese era nuestro objetivo.
Se utilizaron dos centrifugas de distinto tamao pero igual tipo, una sirvi
para centrifugar la orina junto con la sangre y en la otra las mezclas de
almidn (Harina de trigo) y arena.
Por primera vez centrifugamos la sangre y la orina y aprendimos a
identificar los diferentes componentes de la sangre y de la orina.
Tambin aprendimos los fundamentos principales de las maquinas utilizadas
as como sus usos y las partes que tienen y para qu sirve cada una as
tambin las condiciones que debe tener para meterlos a su aplicacin.