OBJETIVOS Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar asi, por ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacién. Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrian ser idénticas. Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia Realizar el seguimiento de una reaccién. Es posible estudiar cémo desaparecen los reactivos y cémo aparecen los productos finales 0, lo que es lo mismo, saber cudndo la reaccién ha acabado. RESULTADOS El simbolo Rf significa "Relacién de frentes", es una relacién de distancias, y se expresa como el cociente entre la distancia recorrida por la sustancia y la distancia recorrida por el disolvente hasta el frente del eluyente: CONCLUSIONES Gran estabilidad de la fase No existen fuerzas de retencién elevada’ Permite una velocidad de muestreo alto4 No se producen procesos de retencién irreversibles y por tanto, no hay deterioro de la colurnna. El sistema cromatogréfico es simple: no se necesitan precolumna para equilibrar las fases Tiene un gran campo de aplicacién: 4 Ademés permite la separacién de compuestos con matrices acuosas, permitiendo su aplicacién a campos de gran interés como: quimico, farmacolégicos, industrial, medicambiental. CUESTIONARIO 1. éCémo se pueden diferenciar 2 6 mas téxicos? La cromatografia agrupa un conjunto importante de diversos métodos que facilitan la. separacién, deteccién e identificacién de compuestos estrechamente relacionados en mezclas complejas.En todas las separaciones cromatogréficas, la muestra se disuelve en una fase mévil que puede ser un gas, un liquido etc, la cual se hace pasar, a través de una fase estacionaria inmiscible fija, en una columna o en una superficie sdlida. Las dos fases, se eligen de tal forma que los componentes de la muestra se distribuyen en cantidades distintas entre la fase miévil y la fase estacionaria, Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria, se mueven con mucha lentitud con el flujo de la fase mévil, en cambio, los componentes unidos débilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de las distintas velocidades de migracién, los componentes de la muestra se separan en bandas 0 zonas distintas que se pueden analizar en forma cualitativa y cuantitativa. 2. éCudles son las funciones de un tecndlogo medico durante el andlisis cromatografico? La funcién primordial del Tecndlogo Medico es el andlisis de muestras de fluidos biolégicos y tejidos provenientes de la sala de autopsia. Dichas muestras son analizadas con el propésito de aislar, identificar y/o cuantificar sustancias téxicas tales como drogas y venenos para ayudar al Patélogo Forense a determinar causa y manera de muerte. Las muestras que provienen de la Divisién de Patologia Forense son recibidas en el Laboratorio por un técnico. Una vez el técnico verifica que se cumpla con el Procedimiento de Recibo de Muestras de Casos de Patologia (ICF-1101), un quimico coteja los casos y toma nota de anélisis no rutinarios (medicaments, rastreo dcido, pesticidas, etc.) solicitados por el patélogo. Mediante el uso de diferentes fases méviles, €Qué conclusiones se pueden obtener? # La fase estacionaria sdlida retiene a los solutos por un doble efecto de adsrocién fisica y quimica, # El sélido retiene a los solutos gracias a atracciones electrostaticas. Cromatografia La fase estacionaria es un material poroso, que retiene a las moléculas en funcién de su tamafio. # Son generalmente polimeros de tipo Ifquido inmovilizado sobre un sélido inerte por enlaces covalentes. En ambos casos la separacién se debe a equilibrios de distribucién de los solutos entre las fases mévil y estacionaria controlados por la diferente solubilidad de los mismos en las distintas fases. Desplaza por capilaridad, gravedad o presién. Pueden emplearse fases méviles liquidas, gaseosa 0 fluidos supercriticos. Fase mévil se consigue por capilaridad 0 gravedad. Sélo pueden emplearse liquidos como fases méviles. 4, éCudl es la funcidn de la campana de seguridad? La principal funcién es la de mantener una érea libre de particulas contaminantes, esta érea normalmente se conoce como zona de trabajo y es la que debepermanecer estéril, alli se manipulan y se realizan los procedimientos requeridos que el laboratorio desarrolle en su momento. Para lograr que la zona de trabajo esté libre de contaminacién el flujo de aire debe ser laminar y sin turbulencias para poder retener las particulas contaminantes y asegurar que ésta zona sea estéril. Este proceso se logra gracias a que las cabinas de flujo laminar vienen provistas de una turbina que fuerza el paso del aire a través de un medio filtrante especial denominado filtro HEPA, éste filtro se sitda acorde al modelo de cabina, puede ir ubicado en la pared frontal produciendo un flujo laminar horizontal 0 ubicado en el techo y producir un flujo laminar vertical, este filtro HEPA tiene una eficiencia del 99,999% y retiene particulas de un tamafio superior a 0,3 um. Adicionalmente para lograr esto se tiene en cuenta el drea de filtracién y espesor que posee el filtro, as/ como la velocidad constante del aire producido por la turbina, Las campanas de seguridad se disefian con propésitos diferentes: * Para proteger la muestra % Proteger al operario # Proteger el ambiente del laboratorio éCual es la funcidn de la plancha de calentamiento? Luego de cada aplicacién se debe permitir la evaporacién de Ia solucién; para esto se lleva a la plancha de calentamiento. Evite calentar demasiado; el desarrollo de un color pardo-obscuro es indicativo de esto ultimo.