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PROCESAMIENTO DE UN EXUDADO FARINGEO

FUNDAMENTO
El sistema respiratorio se divide en vas altas o superiores, que comprenden las
reas anteriores a la laringe, incluyendo la nasofaringe, orofaringe, laringe,
epiglotis, odo externo y medio, y los senos paransales, y vas bajas o inferiores
que
incluyen
todas
las
estructuras
posteriores
a
la
laringe.
El tracto respiratorio habitual (la faringe) est formado por distintos
microorganismos entre los que destacan los siguientes grupos y
especies: estreptococos,
estafilococos,
micrococos,neisserias,
Moraxella
catarrhalis,
corinebacterias, Haemophilus spp,
Porphyromonas,
Prevotella,
Fusobacterium, Veillonela, Peptostreptococcus, Actinomyces, etc. Sin embargo,
cuando encontramos una patologa en la faringe, el agente etiolgico ms
frecuentemente aislado es el Streptococcus pyogenes, pero tambin, otros
microorganismos patgenos que podemos hallar son: Streptococcus pneumoniae,
Streptococcus alfa-hemoltico
grupo viridans,
etc.
Para poder identificar el agente microbiano de la muestra problema, se proceder
a la siembra del mismo en diferentes medios de cultivo, y as observar si hay o no
crecimiento en cada uno de ellos. Adems se proceder a realizar diferentes
pruebas, como la tincin de Gram, la catalasa.

MATERIALES UTILIZADOS
Hisopo/medio de transporte Stuart
Materiales para la realizacin de un medio de cultivo (matraz erlenmeyer,
varilla)
Materiales para realizar una tincin de Gram (portaobjetos, pipeta Pasteur)
Tira oxidasa
Perxido de hidrgeno (catalas)
Microscopio
Autoclave
Campana de anaerobiosis
Guantes
Bata
. Papel de Filtro

PROCEDIMIENTO
Una vez obtenida la muestra, exudado farngeo, se proceder a la identificacin
de los microorganismos que posiblemente estn presentes en la misma. Para ello
se realizarn las pruebas que a continuacin se describen:
En primer lugar se escogern los medios especficos para la muestra de exudado
farngeo:
- Estreptococos -hemolticos; Columbia ANC + 5% sangre de cordero agar.
- Haemophilus; Chocolate Poly Vitex Bacitracina Agar.
- Cndida albicans, levaduras; Sabouraud Gentamicina Cloranfenicol agar.
- Pneumococos; Columbia ANC + 5% sangre de cordeno agar.
- Staphylococcus aureus; Chapman medio.

El primer da se incubaron todos los medios en aerobiosis, excepto el de


agar sangre, que se incub dentro de una campana de anaerobiosis. Para crear
dicho ambiente de anaerobiosis, se introdujo en la campana un sobre que tiene
como funcin quelar el oxgeno disponible, tanto en el espacio interno de la
campana como en el de la placa. Para comprobar que estas condiciones
anaerbicas se han dado, se introdujo tambin dentro de la campana una tira, la
cual en un principio es de color azul, y tras el periodo de incubacin, si
efectivamente se han dado dichas condiciones, esa coloracin cambiar a
transparente. La incubacin tuvo una duracin de 24 horas a 37C.
El segundo da, todos los medios que anteriormente fueron incubados en
aerobiosis, se incubaron en anaerobiosis como ya se explic en el prrafo anterior.
Adems se sembr otra placa de agar sangre, pero esta vez se incub en
aerobiosis. Esta segunda incubacin tuvo una duracin de 24 horas a 37C.

En segundo lugar, se realiz la visualizacin macroscpica a las placas en


las que se produjo crecimiento bacteriano, stas placas corresponden con las dos
de agar sangre, una incubada en condiciones de aerobiosis y otra en anaerobiosis.
En ambas placas se observ que las colonias tenan un halo de hemlisis
correspondiente a la beta hemlisis. En un ltimo momento se visualizaron las dos
placas con la luz ultravioleta, para as diferenciar entre diferentes gneros de
microorganismos.

En tercer lugar, se realizaron dos tinciones de Gram, una de cada placa,


para as diferenciar tanto la forma, agrupacin, morfologa de estos
microorganismos, as como las caractersticas de su pared bacteriana, Gram
positivos o Gram negativos.

Por ltimo, se realizaron dos pruebas bioqumicas, catalasa y oxidasa a las


dos
placas.
- Placa agar sangre en aerobiosis: La catalasa se realiz con el fin de
diferenciar el gnero Streptococcus del gnero Staphylococcus; y, la oxidasa se
realiz
para
confirmar
el
gneroStreptococcus.
- Placa agar sangre en anaerobiosis: la catalasa y la oxidasa se realizaron
para confirmar que el microorganismo presente en esta placa es la Veillonella.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Visualizando las colonias obtenidas, tanto en la muestra en condiciones aerbicas,
como la muestra en condiciones anaerbicas, podemos deducir lo siguiente:

En el primer caso (muestra en condiciones aerbicas), se realizar una


observacin a luz natural (sin la aplicacin de luz UV), en la que se ven colonias
muy pequeas de color blanco, con un halo de hemlisis alrededor,
pertenecientes al grupo de los ------ hemolticos. Posteriormente, se realiza la
misma operacin, pero aplicando una luz ultravioleta; en la que se observan
colonias rojizas, con su halo de hemlisis amarillo-verdoso.

En el segundo caso (muestra en condiciones anaerbicas), con la luz natural


se observan minsculas colonias blancas con un halo de hemlisis de color
amarillas-anaranjado. Expuesta a luz UV, se observan colonias rojizas y el halo de
hemlisis amarillo-verdoso.
Una vez hecho esto, a partir de una colonia aislada obtenida en el medio de
cultivo agar sangre, expuesta en condiciones anaerbicas; se ha realizado una
tincin de Gram, cuyo resultado ha dado cocos, estreptococcus, estafilococcus,
Gram
negativo
(color
rosado).
De la misma forma, se ha realizado la tincin de Gram de una colonia aislada
obtenida por crecimiento en condiciones aerbicas, en el medio agar sangre. En
este caso, los microorganismos observados al microscopio han sido cocos,
diplococos, ttradas, estreptococcus (observado de un tamao mayor, que la
muestra
anterior),
y
Gram
positivo
(color
azul).
En el resto
que no se
ayudado
Para poder

de las placas sembradas, no ha habido crecimiento microbiano, por lo


ha podido realizar ningn tipo de tincin, prueba . Esto, nos ha
a
descartar
la
presencia
de
algunos
microorganismos.
seguir reduciendo la lista de posibles microorganismos se ha realizado

la prueba de la catalasa, dando resultados negativos en ambas muestras; as


como
en
la
prueba
de
la
oxidasa.

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