PERKEMBANGAN VAKSIN DINDING SEL JAMUR

Abstrak
Diskusi ini dimaksudkan untuk menjadi gambaran dari kemajuan saat ini dalam
pengembangan vaksin dinding sel jamur dengan penekanan pada Candida; itu
bukan resensi sejarah yang luas dari semua vaksin dinding sel jamur. Yang dipilih,
lebih baru, strategi inovatif untuk mengembangkan vaksin jamur akan disorot.
Kedua hambatan ilmiah dan logistik yang berhubungan dengan pengembangan,
dan penggunaan klinis, vaksin jamur akan dibahas.
Pengenalan
Secara umum, selama bertahun-tahun ada upaya penelitian yang luas untuk
mengembangkan vaksin untuk kedua oportunistik dan infeksi jamur endemik
manusia dan hewan. Beberapa tinjauan komprehensif dan komentar tersedia
(Deepe, 1997; Perruccio et al, 2004;. Feldmesser, 2005; Cutler et al, 2007;.
Cassone, 2008; Ito et al, 2009;. Fidel & Cutler, 2011; Spellberg, 2011 ). Sejauh ini,
sebagian besar pekerjaan ini difokuskan pada vaksin untuk infeksi manusia yang
disebabkan oleh spesies Candida. Namun, banyak upaya telah diperpanjang ke arah
pengembangan vaksin untuk kriptokokosis, coccidioidomycosis, blastomycosis,
histoplasmosis, paracoccidioidomycosis, infeksi yang disebabkan oleh
Pneumocystis, dan yang terbaru, aspergillosis. Meskipun penyelidikan luas dari
vaksin, tidak ada yang belum disetujui oleh Food and Drug Administration (FDA)
untuk imunisasi baik aktif atau pasif pada manusia.
Tabel 1 mencakup daftar lengkap dari berbagai pihak dieksplorasi secara luas untuk
pengembangan vaksin aktif untuk kandidiasis hematogen disebarluaskan dan
mukosa. Tidak semua entitas dan strategi terbatas pada dinding sel organisme.
Tabel 2 adalah daftar lengkap dari berbagai strategi untuk meningkatkan aktivitas
vaksin Candida melalui berbagai adjuvant dan sistem pengiriman. Publikasi
menggambarkan strategi ini telah, secara umum, sangat positif, dan telah
menghasilkan perlindungan substansial dari tikus. Ada kekurangan yang luar biasa
dari eksplorasi vaksin ini dalam model binatang lain, karena setidaknya sebagian
kelimpahan besar pengetahuan dan reagen tersedia yang relevan dengan imunologi
murine. Tikus dan manusia tidak diragukan lagi substansial berbeda mengenai
respon bawaan kekebalan mereka Candida. Misalnya, mouse adalah naif untuk
organisme, sementara spesies Candida menjajah manusia secara luas, tanpa
menyebabkan kerusakan pada host. Ini mungkin sangat diinginkan untuk evaluasi
praklinis vaksin jamur, secara umum, dan khusus untuk vaksin terhadap spesies
Candida, yang akan dilakukan pada hewan model alternatif, selain model murine.
Sementara mahal untuk skrining, primata non-manusia mungkin menjadi model
jauh lebih cocok untuk tahap akhir pengembangan vaksin, karena mereka tidak naif

untuk organisme, dan biasanya dijajah dengan itu, mirip dengan kolonisasi
manusia.

entitas arious dieksplorasi secara ekstensif untuk pengembangan vaksin aktif untuk
hematogen disebarluaskan dan mukosa kandidiasis
Berbagai strategi yang digunakan untuk vaksinasi aktif
terhadap Candida historis
Organisme Heat-membunuh seluruh
Organisme hidup yang dilemahkan
Candida enolase
Candida permukaan sel reseptor iC3b
Candida mannans
-glukan
Heat-shock protein Hsp90
Protein keluarga gen SAP
Protein keluarga gen ALS
Glycoconjugates (mannans dan -glukan)
Various strategies to enhance the activity of Candida vaccines through various
adjuvants and delivery systems

Berbagai strategi untuk meningkatkan aktivitas vaksin Candida

adjuvant yang berbeda
Sistem pengiriman hidung
Sistem pengiriman lipid partikel
pengiriman DNA
Presentasi sel dendritik
pengiriman virosome
Penting adalah bahwa tubuh besar upaya ilmiah diarahkan pada pengembangan
vaksin jamur yang berguna secara klinis tidak menyebabkan FDA atau persetujuan
peraturan lainnya dari suatu entitas tunggal sejauh ini , terutama dengan tingkat
keberhasilan yang tinggi ditemukan dalam model praklinis . Tidak lengkap ini
persetujuan dari vaksin jamur terjadi dalam konteks frekuensi yang semakin
meningkat dari infeksi jamur oportunistik pada pasien yang rentan , terutama yang
berkaitan dengan infeksi kesehatan terkait . Infeksi jamur yang terjadi dalam
pengaturan ini membawa tingkat kematian sekitar 40-50 % , bahkan dalam

menghadapi agresif terapi obat antijamur ( Pappas et al . , 2003). Infeksi kesehatan

terkait ini tidak terbatas pada pasien dengan imunosupresi iatrogenik , transplantasi
organ atau terapi kanker . Mereka juga terjadi pada pasien yang tidak diobati
dengan agen imunosupresif , tetapi telah diobati dengan antibiotik spektrum luas ,
berdiamnya intravena dan intra - arteri garis , bahan prostetik implan dan cairan
hiperalimentasi , dan pada pasien yang pasca operasi atau di unit perawatan
intensif karena alasan lain . Pasien luka bakar dan neonatus berat lahir rendah
adalah populasi tambahan pasien rentan .
Menurut pendapat penulis ini , alasan kurangnya vaksin jamur yang tersedia secara
klinis adalah hasil dari pertemuan masalah . Pertama , ada seorang jenderal di
bawah - apresiasi besarnya infeksi jamur untuk kedua jamur oportunistik dan jamur
endemik . Kedua , ada hambatan tangguh di ' transfer teknis ' dari studi praklinis
sukses dalam bidang vaksin jamur . Hambatan ini meliputi staf yang tidak memadai
kantor untuk transfer teknis di banyak universitas , daya saing usaha kecil
penelitian yang inovatif dan hibah transfer teknis usaha kecil untuk transfer teknis ,
tingginya biaya mempersiapkan antigen untuk digunakan dalam studi manusia
melalui standar pertemuan untuk proses produksi yang baik , tingginya biaya studi
toksikologi dan tingginya biaya melakukan Tahap I uji klinis untuk membangun
tolerabilitas dan keamanan . Untuk pengembangan antigen melalui Tahap I uji
klinis , tahap pertama pengujian pada manusia , kurang lebih 3-4 juta dolar ( USD )
diperlukan ( pengalaman pribadi ) . Ini jelas merupakan jumlah yang tangguh bagi
sebagian besar laboratorium akademik bertambah , dan , sampai saat ini ,
perusahaan farmasi besar tidak terlibat dalam pengembangan vaksin jamur melalui
Tahap I uji . Namun, dua perusahaan biotechnical telah memulai uji Tahap I , mereka
akan dibahas kemudian .
Sebelumnya Bagian Bagian
Strategi inovatif Baru
Hidup yang dilemahkan Candida regangan
Beberapa strategi yang sangat inovatif telah diterbitkan dalam beberapa tahun
terakhir dan akan selektif disorot di sini . Sebuah rekayasa genetika Candida
albicans regangan tet - NRG1 telah digunakan sebagai vaksin eksperimental hidup
dilemahkan terhadap hematogen disebarluaskan candidiasis ( Saville et al . , 2008) .
Strain ini adalah non - patogenik dalam model murine dalam kondisi tertentu yang
dapat diatur . NRG1 adalah regulator negatif filamentation Candida . Dalam
regangan rekayasa ini , gen berada di bawah kendali promotor tetrasiklin
regulatable . Pada tikus tidak mengkonsumsi doksisiklin dalam air minum mereka ,
organisme tetap dalam fase ragi dan non - patogenik , meskipun fakta bahwa hal itu
dapat berkembang biak dalam jaringan . Tikus pertama kali terinfeksi dengan virus
ini sebagai strategi vaksin hidup yang dilemahkan . Infeksi sekunder dengan strain ,
dengan virulensi dari organisme dipulihkan dengan memberi makan tikus doksisiklin
dalam air minum mereka ( downregulating NRG1 , dan memungkinkan
perkecambahan terjadi ) , mengakibatkan perlindungan substansial dari ' virulensi

dikembalikan ' strain . Dengan menggunakan tikus KO , mekanisme perlindungan

didirikan sebagai melalui T-sel , bukan sel - B , atau neutrofil meningkatkan
mekanisme . Hasil ini adalah tingkat tertinggi perlindungan dijelaskan untuk anti - C
. albicans vaksin , terutama pada tikus immunocompromised atau tikus dengan
defisiensi neutrofil . Ini adalah strategi vaksin aktif yang sangat inovatif dan efektif ,
dan dapat memberikan latar belakang yang berharga untuk pengembangan lebih
lanjut . Namun, tidak memerlukan penggunaan hidup , dilemahkan strain Candida ,
yang bisa menghadapi tantangan berat tentang evaluasi keamanan oleh FDA untuk
persetujuan pada manusia .
- Mannan dan konjugasi peptida
Pendekatan yang sangat inovatif lain untuk Candida telah dikembangkan oleh Xin
et al . ( 2008) . Peneliti ini telah menciptakan koleksi enam glycopeptides vaksin
dengan menggabungkan - mannan dan peptida epitop . Lima dari glycopeptides
yang dihasilkan diinduksi perlindungan terhadap murine disebarluaskan
candidiasis . Enam peptida T - sel dari C. protein dinding sel albicans dipilih oleh
pencarian epitop algoritma peptida . Setiap peptida kemudian disintesis dan
terkonjugasi pada dinding sel jamur - mannan trisaccharide [ - ( Man ) 3 ] oleh
sakarida - peptida linker baru untuk menciptakan glycopeptides konjugasi . Linker
ini adalah non - imunogenik , cross- coupling reagen , yang mengakibatkan ikatan
amida stabil . Dalam strategi imunisasi , presentasi sel dendritik digunakan , dan
adjuvant lengkap Freund digunakan sebagai adjuvant . Perlindungan kuat atau
moderat terlihat dengan lima dari enam glikopeptida . Salah satu antigen dikaitkan
dengan kematian meningkat pada tikus kontrol menantang dibandingkan dengan
menantang tikus divaksinasi , sehingga menjadi non - pelindung . Penting yang
signifikan adalah bahwa tanggapan ini pelindung yang dimediasi oleh sepenuhnya
sintetis , dengan rumus kimia , immunogens , dan merupakan pendekatan yang
mungkin memiliki implikasi luas untuk pengembangan antigen vaksin . Studi
tambahan terbaru ( Xin & Cutler , 2011) telah menunjukkan bahwa peptida saja
( FBA ) telah sangat protektif sebagai vaksin aktif terhadap beberapa strain C.
albicans dan bahwa antibodi monoklonal spesifik untuk peptida , E2 - 9 ( IgM ) ,
adalah pelindung bila digunakan dalam transfer pasif . Percobaan ini membuktikan
peran antibodi dalam perlindungan dalam model murine ini .
- Glucan conjugate vaksin untuk Candida
Eksplorasi lebih lanjut dari strategi vaksin untuk Candida menggunakan antigen
dinding sel yang telah dicapai oleh Pietrella et al . ( 2010). Mereka telah
menggunakan - glucan terkonjugasi dengan laminarin - CRM bersama dengan
MF59 adjuvant . Perlindungan yang sangat baik terlihat untuk kandidiasis vagina
dalam model murine mereka. Studi mereka adalah nilai lebih dalam menunjukkan
penggunaan rekayasa genetika , luminescent C. albicans regangan , yang
memungkinkan in vivo evaluasi keefektifan vaksin . The in vivo evaluasi
mencerminkan pengukuran penghitungan koloni akurat . The adjuvant MF59 telah
digunakan secara luas dalam vaksin influenza di Eropa , tetapi saat ini tidak

disetujui oleh FDA untuk digunakan di Amerika Serikat . Ini memiliki properti
perekrutan cepat dan aktivasi helper CD4 + sel . Respon ini diperkirakan untuk
mempromosikan titer yang lebih tinggi dari respon antibodi . Percobaan transfer
pasif menunjukkan perlindungan dalam model ini dimediasi oleh antibodi . Selain itu
, vaksinasi pasif dengan antibodi monoklonal - glukan mengakibatkan
perlindungan terhadap kandidiasis vagina juga. Yang menarik tambahan adalah
bahwa antibodi monoklonal ini juga mengakui linear EPTA - atau - octa - 1 , 3
glukan epitop hadir dalam protein dinding sel Als3p dan Hyr1p . Protein ini
diperkirakan memainkan peran dalam pertumbuhan hifa , dan kepatuhan dan invasi
sel manusia . Karena T helper gabungan ( Th ) 1 dan aktivitas sel - B dari MF59 ,
mungkin adjuvant vaksin yang menarik untuk vaksin jamur ( Brito et al . , 2011) .
Vaksin Sap2p untuk vaginitis yang disebabkan oleh spesies Candida
Vaksin ini didasarkan pada , bentuk terpotong rekombinan dari Sap2p . Protein ini
sebenarnya bukan protein dinding sel , melainkan adalah aspartil proteinase yang
disekresikan . Peran keluarga gen SAP di virulensi telah ditinjau baru-baru ini
( Correia et al . , 2010). Vaksin ini ditargetkan untuk mencegah vulvaginitis berulang
. Sebuah diskusi singkat dari percobaan klinis dengan protein ini berada di bagian
akhir dari diskusi ini dalam bagian penelitian pada manusia .
Studi praklinis untuk vaksin rAls3p - N
Kelompok kami telah bekerja selama bertahun-tahun pada protein dinding sel
strategi berbasis vaksin , yang telah baru-baru ini diuji pada manusia dalam Tahap I
uji klinis ( Hennessey et al . , 2011) . Karya ini dimulai setelah kami menemukan
bahwa Als1p adalah adhesin memungkinkan Candida untuk mengikat sel-sel
endotel vaskular manusia . Penemuan ini dibuat dengan mengubah non - patuh
Saccharomyces cerevisiae dengan genom fragmen DNA Candida dan pengujian
untuk konversi dari Saccharomyces dari tidak patuh untuk patuh . Penggunaan
genetika pengganti berhasil , dan kloning gen yang bertanggung jawab untuk
konversi ini menyebabkan identifikasi dari ALS1 sebagai kepatuhan gen mediasi .
Penemuan itu terjadi tak lama setelah Hoyer et al . ( 1995) telah menemukan gen
ALS dalam upaya mereka untuk menentukan genetika bertanggung jawab atas
filamentation dari Candida . Setelah karakteristik perekat Als1p ditentukan , kami
melakukan studi gangguan gen klasik , serta studi berlebih , untuk mengkonfirmasi
bahwa protein bertindak sebagai adhesin di C. albicans . Fokus penelitian kami
berpisah saat itu menjadi penyelidikan lebih lanjut dari mekanisme yang tepat
kepatuhan , dan kami mulai studi untuk menentukan apakah protein dapat
bertindak sebagai imunogen . Kami memproduksi jumlah yang lebih besar dari
protein oleh teknologi rekombinan di Saccharomyces cerevisiae . Protein dimurnikan
menggunakan kolom nikel untuk mengendapkan protein -Nya - tagged dikodekan
oleh gen albicans C. . Studi vaksinasi awal termasuk adjuvant lengkap Freund
adjuvant diinokulasi dengan rekombinan N - terminus Als1p ( rAls1p - N ) . Selama
hampir semua studi , tikus BALB / c diinokulasi subkutan , didorong dalam 3
minggu , kemudian terinfeksi 2 minggu setelah booster dengan dosis mematikan C.

albicans . Penelitian awal dilakukan dengan umum C. albicans regangan SC5314 .

Secara karakteristik , 40-60 % dari tikus divaksinasi selamat 30 hari waktu
pengamatan dibandingkan dengan 100 % mematikan dalam 10-14 hari pada tikus
yang menerima kontrol adjuvant . Hasil yang menggembirakan serupa terlihat pada
tikus sangat neutropenia , tikus steroid yang diobati , dan dalam model murine
kandidiasis orofaringeal dan Candida vaginitis . Studi ini maju ke pengadilan pada
primata non - manusia untuk menentukan tingkat IgG respon ketika rAls1p - N
diberikan dengan aluminium hidroksida sebagai ajuvan . IgG titer naik 1-2 log pada
primata tersebut , yang, tidak seperti tikus , tidak naif untuk Candida .
Sejak Phan et al . ( 2007) menunjukkan bahwa Als3p tidak hanya adhesin , tetapi
juga invasin untuk Candida pada sel endotel , rAls3p - N diuji sebagai vaksin dan
ditunjukkan untuk menjadi kira-kira sama efektifnya dengan rAls1p - N . Karena
properti ganda ini Als3p , penelitian kami terus menggunakannya sebagai antigen
primer. Kombinasi rAslp - N dan rAls3p - N tidak menunjukkan peningkatan
keberhasilan di kedua antigen saja .
Percobaan transfer angkat menggunakan sel B dan tikus KO T - sel yang digunakan
untuk mengeksplorasi mekanisme perlindungan vaksin . Tikus KO sel - B
ditransfusikan dengan limfosit sel - B dipanen dari tikus , yang telah divaksinasi
dengan kedua rAls1p - N dan rAls3p - N , tidak menunjukkan perlindungan ketika
ditantang dengan C. albicans . Juga , serum dari tikus yang divaksinasi dengan
rAls3p - N tidak protektif dalam tantangan model yang mematikan . Selain itu , IFN -kekurangan tikus tidak dilindungi oleh vaksin . Namun, pada tikus knockout T sel yang ditransfusi dengan sel T dipanen dari tikus divaksinasi , perlindungan
terhadap tantangan mematikan diamati , menunjukkan bahwa mekanisme utama
perlindungan terutama disebabkan sel T dan bukan karena sel B atau produksi
antibodi oleh vaksin ( Ibrahim et al . , 2005). Namun, produksi antibodi diinduksi
pada tikus dengan vaksin .

Studi-studi ini telah diperpanjang untuk menentukan mekanisme perlindungan ( Lin

et al . , 2009). Dalam eksperimen ini , baik tikus dengan siklofosfamid -induced
neutropenia atau tikus kekurangan gp91phox - / - ( tikus yang memiliki neutrofil
tidak dapat menghasilkan superoksida dan memiliki kekurangan membunuh
mikroba neutrofil ) yang dilindungi oleh vaksinasi dengan rAls3p - N , menunjukkan
bahwa neutrofil fungsional sangat penting untuk mekanisme perlindungan vaksin .
Transfer angkat CD4 + limfosit positif dari tikus divaksinasi ke gp91phox - / - tikus
juga gagal melindungi , seperti yang diharapkan .
Untuk menentukan apakah IL - 17 yang diperlukan untuk mekanisme vaksin aksi ,
tikus kekurangan IL - 17A telah divaksinasi dan dibandingkan dengan tikus wild type
kontrol divaksinasi . Tidak ada perlindungan vaksin - diinduksi terlihat pada tikus IL -

17A -kekurangan dibandingkan dengan tikus kontrol yang divaksinasi dan dilindungi
, menunjukkan bahwa , sebagian, vaksin diperlukan IL - 17A . Ketika tidak
divaksinasi tikus IL - 17A - kekurangan dibandingkan dengan tikus kontrol tidak
divaksinasi dan ditantang dengan C. albicans , tidak ada perbedaan yang terlihat ,
menunjukkan bahwa IL - 17A tidak diperlukan untuk perlindungan bawaan , tidak
berhubungan dengan vaksinasi .
Untuk menentukan apakah CD4 + sel adalah sumber IL - 17A , IL - 17A -kekurangan
donor CD4 + sel dipindahkan ke tikus wild type penerima dan sel donor tipe liar CD4
+ dipindahkan ke tikus penerima IL - 17A - kekurangan . The CD4 + sel dari tikus
wild type divaksinasi mengakibatkan perlindungan tikus IL - 17A -kekurangan
ditantang dengan C. albicans . Sebagai antisipasi , transfer CD4 + sel dari
divaksinasi tikus IL - 17A -kekurangan tidak melindungi terhadap C. albicans
tantangan . Percobaan ini adalah bukti bahwa CD4 + sel merupakan sumber IL 17A pada tikus divaksinasi .
Untuk menentukan populasi sel yang disebabkan oleh vaksinasi , limpa dan kelenjar
getah bening diambil dari divaksinasi dan mengendalikan tikus non - divaksinasi 2
minggu setelah dorongan dari tikus divaksinasi . Sel-sel ini dirangsang dengan
rAls3p - N . IFN - dan IL - 17 , serta mengaktifkan neutrofil kemokin KC dan MIP 1 , diproduksi dalam jumlah yang lebih tinggi dari pada kontrol sel tikus non divaksinasi . Supernatan dari tikus divaksinasi merangsang neutrofil jauh lebih luas
daripada supernatan dari tikus kontrol non - divaksinasi . Selain itu , tikus yang
divaksinasi mengalami penurunan substansial dalam beban jamur ginjal, tingkat
myeloperoxidase meningkat pada ginjal pada tikus divaksinasi , serta masuknya
neutrofil , seperti yang diukur pada histopatologi . Selain itu , peningkatan kadar IFN
- , IL - 17 dan neutrofil mengaktifkan sitokin CXC ditemukan di ginjal .
Pada tikus divaksinasi , ada tingkat yang lebih tinggi dari Th1 , Th17 dan sel Th1/17
daripada kelompok kontrol yang tidak divaksinasi. CD4 + CCR6 - sel yang diperkaya
dalam sel Th1 , CD4 + CCR6 + sel diperkaya dalam sel Th17 . Sebagian besar dari
limpa dan kelenjar getah bening CD4 + CCR6 + sel-sel Th1/17 sel .
Singkatnya mengenai mekanisme kerja vaksin rAls3p - N pada tikus , poin-poin
berikut dapat dibuat . IFN - dan IL - 17A yang diperlukan untuk perlindungan
vaksin diinduksi pada tikus . Sumber IL - 17A dan IFN - adalah Th1 , Th17 dan
limfosit Th1/17 . Sitokin ini dimediasi rekrutmen neutrofil , karena CXC dan MIP 1 , ke tempat infeksi , yang mengakibatkan beban jaringan menurun . IL - 17A
tidak diperlukan untuk pertahanan terhadap C. albicans tantangan dalam
pertahanan kekebalan non - vaksin , tetapi diperlukan dalam perlindungan vaksin diinduksi .
Sebelumnya Bagian Bagian
Perlindungan terhadap Staphylococcus oleh vaksin Candida rAls3p - N

Dalam penelitian kami dari mekanisme molekuler lampiran C. albicans ke sel

manusia , kami melakukan pemodelan molekul semua protein Als ( Sheppard et
al . , 2004 ) . Menarik adalah bahwa tingkat tinggi , 80-90 % , tiga dimensi ( 3D )
homologi yang ditemukan antara protein Als dan molekul permukaan sel pada
organisme non - fungal , termasuk bakteri dan virus . Dari catatan adalah homologi
ditemukan dengan faktor penggumpalan ( ClfA ) , sebuah molekul permukaan sel
Staphylococcus aureus . Ketika mengidentifikasi homologi 3D ini , kami
memutuskan untuk menentukan apakah rAls3p - N dapat menginduksi respon
protektif sebagai vaksin terhadap S. aureus . Mencit diimunisasi dengan rAls3p - N ,
sesuai dengan protokol standar yang digunakan untuk C. albicans vaksinasi , dan
kemudian ditantang dengan S. aureus . Hasil perlindungan yang sama dengan yang
untuk C. albicans , menunjukkan ' cross- kerajaan ' perlindungan ( Spellberg et al . ,
2008) . Studi ekstensif dari mekanisme perlindungan telah menunjukkan untuk
menjadi dasarnya identik dengan mekanisme perlindungan rAls3p - N , terutama
mekanisme T - sel daripada mekanisme sel - B dan tidak tergantung terutama pada
antibodi , sebagaimana ditentukan oleh percobaan transfer angkat .
Sebelumnya Bagian Bagian
Penelitian manusia saat ini vaksin terhadap spesies Candida
Penelitian pada manusia vaksin rAls3p - N Candida
Studi-studi ini diuraikan di atas telah menyebabkan Tahap I uji klinis pada subyek
manusia yang dilakukan oleh NovaDigm Therapeutics ( Hennessey et al . , 2011) .
Subyek ( 30 ) diberi dua dosis vaksin , 30 mg dan 300 mg . Vaksin disebabkan tidak
ada efek samping terkait dan ditoleransi dengan baik . Perlu dicatat bahwa semua
studi tentang mekanisme kerja vaksin sampai saat ini telah dilakukan dalam model
murine dan mungkin tidak menerjemahkan dengan sempurna untuk manusia .
Misalnya, Tahap I percobaan klinis pada manusia menunjukkan produksi yang kuat
dari IgG dan antibodi IgA1 di sebagian besar subyek ( Hennessey et al . , 2011) .
Sebagian besar subyek manusia juga mengalami peningkatan produksi IFN - serta
IL - 17A , sebagaimana ditentukan oleh pengukuran ELISpot . Pengamatan ini
menunjukkan bahwa pada manusia , sel-sel T , sel B dan antibodi semua dirangsang
oleh vaksin . Kami telah mempertahankan sel-sel perifer mononuklear darah ( PBMC
) dan serum dari subyek manusia dalam keadaan pra - dan pasca - vaksinasi
mereka , dan sekarang memiliki kemampuan menentukan , lebih detail , respon
vaksin manusia untuk antigen jamur dimurnikan ini . Menarik akan menentukan
aktivitas opsonophagocytic dari serum manusia untuk kedua Candida dan
Staphylococcus . Studi-studi ini sedang berlangsung . Juga sebuah studi rinci dari
respon sel T direncanakan untuk PBMC . Mempelajari sumber daya pra-dan pasca vaksin manusia harus memungkinkan definisi yang sangat ditingkatkan dari
mekanisme kerja vaksin , serta mungkin mendefinisikan tanda pengganti yang lebih
berguna , atau kombinasi dari penanda , untuk menentukan kemanjuran vaksin
dalam percobaan di masa depan .

Jika vaksin ini terbukti manjur , bisa memiliki utilitas dalam berbagai pengaturan
klinis termasuk vaginitis yang disebabkan oleh spesies Candida , infeksi kulit dan
jaringan lunak yang disebabkan oleh S. aureus , dan pada pasien yang memperoleh
baik organisme dalam pengaturan kesehatan terkait , khususnya di unit perawatan
intensif . Dalam keadaan yang terakhir , vaksin akan diberikan kepada pasien
tertentu yang berada dalam kelompok berisiko tinggi , seperti pasien yang
menjalani operasi jantung , toraks atau gastrointestinal . Banyak dari pasien ini bisa
menerima vaksin sebelum operasi , bahkan sebelum masuk ke unit perawatan
intensif . Pasien dengan imunosupresi ( iatrogenik , seperti yang diobati dengan
kemoterapi kanker sitotoksik ) jauh lebih kecil kemungkinannya untuk mendapatkan
keuntungan dari vaksin aktif , dan tidak terdiri kelompok terbesar pasien
memperoleh bakteremia atau infeksi lain yang disebabkan oleh dua organisme ini .
Pasien tersebut mungkin mendapat manfaat dari vaksin pasif diberikan baik sendiri
atau dalam kombinasi dengan vaksin aktif . Jelas, itu akan sangat diinginkan untuk
vaksin aktif untuk memiliki onset yang cepat efikasi , bila digunakan dalam
pengaturan kesehatan terkait ini. Dalam konteks itu , vaksin rAls3p - N
menimbulkan titer antibodi yang tinggi dalam waktu 3-7 hari setelah pemberian
dalam Tahap selesai uji klinis I ( Hennessey et al . , 2011) . Tidak seperti vaksin yang
diberikan kepada populasi besar mata pelajaran yang dirancang untuk menciptakan
' kawanan ' kekebalan , durasi khasiat untuk vaksin digunakan untuk mencegah
atau memperbaiki infeksi kesehatan terkait akan perlu berkhasiat hanya selama
waktu mata pelajaran yang berisiko terinfeksi .
Percobaan manusia dari vaksin Sap2p untuk vaginitis yang disebabkan oleh spesies
Candida
Pada tahun 2010 , percobaan klinis berdasarkan , bentuk terpotong rekombinan dari
Sap2p dimulai di Eropa . Vaksin ini ditargetkan untuk mencegah vulvaginitis
berulang . Hal ini yang disampaikan baik dalam bentuk intramuskular dan
intravaginal dengan virosome proprietary . Vaksin aktif ini sedang dikembangkan
oleh Pevion Biotech , dan data sementara menunjukkan bahwa itu adalah baik
ditoleransi dan ' efektif ' pada dosis rendah . Penjelasan lengkap dari hasil Tahap I
sidang saat ini tidak dalam domain publik .
Sebelumnya Bagian Bagian
Pengembangan vaksin untuk patogen jamur lain yang menyebabkan penyakit
hematogen disebarluaskan
coccidioidomycosis
Saat ini , pengembangan vaksin untuk organisme jamur lainnya belum mencapai uji
klinis , dengan pengecualian vaksin untuk Coccidioidomyces . Sebuah uji klinis
untuk vaksin untuk coccidioidomycosis dilakukan sejak tahun 1975 ( Pappagianis &
Levine , 1975) , dan sekali lagi pada tahun 1993 ( Pappagianis & The Valley Fever
Vaksin Study Group , 1993) . Namun, belum ada kemajuan lebih lanjut dari uji coba
pada manusia selama lebih dari 18 tahun sekarang , dan vaksin untuk pencegahan
coccidioidomycosis belum disetujui oleh FDA . Namun, pengembangan praklinis luas

vaksin coccidioidomycosis masih berlangsung ( Shubitz et al , 2008; . . Capilla et al ,

2009; . Xue et al , 2009). Studi sebelumnya telah menyertakan berbagai strategi .
Sebagai contoh, sebuah antigen enzim rekombinan , sebuah dioksigenase 4 dehydroxyphenylpyruvate , telah terbukti menjadi pelindung pada tikus terhadap
tantangan intraperitoneal dengan arthroconidia dari Coccidioides ( Wyckoff et al . ,
1995) . Selain itu , ekstrak dari dinding sel luar spherules ( SOW ) juga telah
menyampaikan perlindungan dalam model tikus yang sama ( Wyckoff et al . ,
1995) . Penelitian lebih lanjut dengan antigen yang larut dalam air ( C - ASWS )
menunjukkan perlindungan parsial pada tikus dengan resistensi relatif alami untuk
Coccidioides immitis ( Kirkland & Fierer , 1985) . Tambahan studi telah dilakukan
dengan 33 kDa antigen diisolasi dari spherules ( Galgiani et al . , 1996) . Antigen ini
diakui dari sera pasien yang sudah sembuh dari infeksi alami . Studi yang lebih baru
lainnya termasuk berbagai antigen lain dan pendekatan ( Kirkland et al , 2006 ; .
Tarcha et al , 2006; . Awasthi , 2007 ; . Johnson et al , 2007a , b; . Lunetta et al ,
2007 ) .
Yang menarik adalah penelitian terbaru penting yang meneliti mekanisme aksi dari
hidup , dilemahkan mutan Coccidioides posadasii , digunakan sebagai vaksin pada
tikus . Organisme dilemahkan memiliki knockout gen ganda , CTS2 dan CTS3 , yang
kedua gen kitinase ( Xue et al . , 2009). Mutan dilemahkan ini tidak mampu
bersporulasi . Tikus sepenuhnya dilindungi terhadap coccidioidomycosis paru oleh
vaksin ini . Profil sitokin yang ditemukan di homogenat paru-paru tikus divaksinasi ,
yang ditantang dengan organisme intranasal , menunjukkan Th1 - , 2 campuran - 17
-jenis respon imun dan . Th17 sel fungsional yang diperlukan untuk perlindungan
oleh vaksin dalam model ini , menambah bukti yang berkembang untuk peran sel
Th17 dalam mekanisme perlindungan sebagian besar vaksin jamur di bawah
evaluasi ( Hung et al . , 2011) . Jika strategi ini adalah untuk bergerak maju ke
percobaan manusia , kekhawatiran atas potensi organisme ini , eukariot , untuk
bermutasi kembali ke bentuk virulen akan membutuhkan pengalamatan . Namun,
ada beberapa hidup , virus dilemahkan dalam penggunaan klinis saat ini .
blastomycosis
Secara historis , banyak upaya telah dilakukan oleh kelompok di Wisconsin , yang
dipimpin oleh Bruce Klein , baik menjelaskan mekanisme resistensi alami untuk
Blastomyces dermatitidis , dan untuk mengembangkan vaksin untuk
blastomycosis . Sebuah protein dinding sel yang sangat imunogenik , WI - 1
( sekarang ditunjuk BAD - 1 ) , telah menjadi fokus utama ( Klein & Jones , 1994) .
Antigen ini merangsang humoral dan imunitas sel T serta melayani sebagai ligan
untuk fagosit . Antigen ini telah pelindung pada tikus , mungkin terutama melalui
respon Th2 -type . Baru-baru ini , kelompok ini telah menggunakan strategi inovatif
dari hidup , dilemahkan vaksin pada anjing beagle dan Foxhounds ( Wthrich et al . ,
2011a ) . BAD - 1 adalah protein permukaan sel , yang merupakan adhesi untuk B.
dermatitidis ( Brandhorst et al . , 1999) . Selain itu, ia juga telah terbukti menjadi
penting untuk patogenisitas dalam model tikus untuk infeksi paru yang mematikan .

Sebuah strain B. dermatitidis telah bermutasi melalui merobohkan gen penyandi

BAD - 1 dan diberikan hidup untuk anjing beagle dan Foxhounds subkutan , tanpa
adjuvan . Keamanan vaksin ini didirikan , itu juga imunogenik . Evaluasi
perlindungan itu bukan bagian dari rancangan percobaan ini awal untuk
mengembangkan vaksin anjing untuk blastomycosis .
Dalam studi ini , kelenjar getah bening yang reaktif , yang menunjukkan
peningkatan limfosit berdiferensiasi baik dan follicules , serta makrofag , dan
adanya organisme vaksin . Tidak ada bukti penyebaran organisme vaksin
dilemahkan ditemukan dalam sampel paru-paru . Dalam limfosit vitro proliferasi
diinduksi dengan dinding sel antigen pelindung dari B. dermatitidis . Peningkatan
kadar transkrip IFN - dan TNF - ditemukan , serta GM - CSF , tetapi bukan dari IL
- 4 . Respon imun dalam penelitian ini adalah vaksin dosis - tergantung. Secara
umum, imunitas seluler telah ditemukan operasi dalam respon vaksin untuk
blastomycosis ( Deepe et al . , 2005).
Cukup menarik adalah pekerjaan praklinis baru pada mekanisme perlindungan
vaksin - diinduksi terhadap tiga mikosis sistemik endemik ke Amerika Utara
( Coccidioides posadasii , Histoplasma capsulatum dan B. dermatitidis ) ( Wthrich
et al . , 2011b ) . Peran sel Th17 dalam kekebalan bawaan alami untuk infeksi jamur
telah menjadi kontroversi , dan telah agak berbeda dari organisme jamur untuk
organisme jamur . Dalam studi yang elegan , KO tikus dan transfer teknologi angkat
digunakan secara luas . CD4 + sel dari pengeringan kelenjar yang diproduksi IL - 17
dan IFN - dalam menanggapi antigen dan antigen-spesifik . Untuk menentukan
apakah prima IL - 17 sel bermigrasi ke paru-paru mencit yang divaksin setelah
tantangan paru , transkrip dan jumlah limfosit paru - sitokin memproduksi diuji .
Th17 sel yang perlu dan cukup untuk perlindungan terhadap ketiga organisme
tersebut . Selain itu, perlindungan itu tergantung pada MyD88 , tetapi tidak Dectin 1 . IL - 17A , IL - 17F , IL - 22 dan IFN - yang meningkat . Yang menarik adalah
bahwa temuan ini berbeda dari satu laporan , di mana divaksinasi tikus dengan
Th17 polarisasi meningkat peradangan baik kandidiasis lambung dan aspergillosis
paru ( Zelante et al . , 2007) . Namun, dalam model tikus untuk hematogen
disebarluaskan kandidiasis , Th17 polarisasi telah penting untuk vaksin - diinduksi
perlindungan ( Lin et al . , 2009). Studi-studi ini sangat menyarankan bahwa vaksin
manusia untuk infeksi jamur sistemik harus dirancang untuk menginduksi sel Th17
serta antibodi .
histoplasmosis
Secara historis , upaya telah dilakukan untuk mengembangkan vaksin untuk
pencegahan histoplasmosis . Ekstrak dari dinding sel dan membran sel ( CW / M )
( Garcia & Howard , 1971 ) , serta kompleks ribosom - protein , telah dievaluasi
dengan hasil yang sukses ( Tewari et al . , 1978 ) . Sebuah subfraksi protein
persiapan CW / M , disebut HIS - 62 , ditemukan manjur dalam tiga model mouse
yang berbeda ( Gomez et al . , 1995) . HIS - 80 , lain turunan CW / M , juga telah

pelindung pada model tikus ( Gomez et al . , 1991) . Baru-baru ini , sebuah protein
heat -shock telah menunjukkan perlindungan pada tikus ( Scheckelhoff & Deepe ,
2002) . Pendekatan inovatif lain yang diambil baru-baru ini adalah penggunaan
apoptosis neutrofil ( Hsieh et al . , 2011) .
aspergillosis
Perhatian juga telah diarahkan strategi vaksin untuk Aspergillus ( Ito et al . , 2009).
Organisme ini sangat problematis dalam transplantasi sel hematopoietik ( HCT )
penerima , yang memiliki tingkat respon terhadap terapi konvensional sekitar 31 %
( Herbrecht et al . , 2002) . L. Romani dan kelompok ilmu jamur di University of
Perugia , Italia , lebih dari satu dekade lalu , menunjukkan bahwa mereka bisa
melindungi tikus neutropenia dengan filtrat kultur mentah ( CCFA ) vaksin yang
diberikan intranasal sebelum induksi neutropenia . Tikus ditantang dengan
intranasal inhalasi spora Aspergillus . Kemudian mereka juga menunjukkan bahwa
alergen Asp f 16 , ketika diberikan dengan adjuvant oligodeoxynucleotide , juga
pelindung ( Bozza et al . , 2002) . Mereka juga telah menunjukkan bahwa sel-sel
dendritik berdenyut dengan Aspergillus konidia , atau transfected dengan RNA
konidia , yang pelindung untuk tikus yang menjalani HCT ( Bozza et al . , 2003 ) .
Selain itu , sel dendritik ditransduksi dengan vektor adenoviral encoding produksi IL
- 12 dan berdenyut dengan Aspergillus telah efektif pada tikus ( Shao et al . , 2005).
Selain itu , sebuah glukan dari Laminaria digitata terkonjugasi dengan toksoid difteri
CRM197 telah efektif untuk melindungi terhadap tantangan intravena dengan
Aspergillus pada tikus ( Torosantucci et al . , 2005).
J. Ito dan kelompok di City of Hope telah berusaha vaksinasi pada tikus dengan
freeze - dicairkan hifa dan budaya supernatan dari Aspergillus . Setelah
keberhasilan didirikan , mereka mengidentifikasi alergen Asp f 3 sebagai imunogen
kemungkinan ( Ito et al . , 2009). Setelah sintesis rekombinan Asp f 3 , mereka
mampu membangun perlindungan pada tikus dengan protein dalam kombinasi
dengan TiterMax adjuvant . Sejak Asp f 3 adalah alergen , dan untuk menghindari
kemungkinan merangsang reaksi alergi , bentuk terpotong dari protein yang
digunakan , yang juga pelindung pada tikus steroid - ditekan . Mereka telah
ditetapkan lebih lanjut epitop pelindung protein terpotong yang bertanggung jawab
untuk T - sel Asp f 3 stimulasi tertentu ( Ito et al . , 2009 ) .
Pneumonia , paracoccidioidomycosis dan kriptokokosis
Sebuah tinjauan sejarah perkembangan vaksin untuk pneumonia ,
paracoccidioidomycosis dan kriptokokosis adalah di luar lingkup pembaruan ini .
Upaya-upaya luas telah dilakukan untuk ketiga penyakit . Hasil yang
menggembirakan telah terlihat baru-baru ini dengan strategi DNA vaksin untuk
pneumonia ( Feng et al . , 2011) dan paracoccidioidomycosis ( Fernandes et al . ,
2011) . Sebuah studi baru-baru ini telah diterbitkan mengenai vaksinasi aktif untuk
kriptokokosis ( Chow & Casadevall , 2011) . Dalam studi ini , sebuah konjugasi
galactoxylomannan - protein digunakan pada tikus . Meskipun hal itu merangsang

produksi antibodi , gagal untuk menghasilkan perlindungan tikus divaksinasi

dibandingkan dengan kontrol .
Penelitian inovatif terbaru dengan Saccharomyces
Dari bunga lebih lanjut adalah pekerjaan yang dilakukan oleh kelompok di Medical
Center Santa Clara Lembah berafiliasi dengan Stanford University, yang dipimpin
oleh David Stevens . Ini merupakan kembalinya studi sebelumnya menginduksi
kekebalan pada tikus untuk Candida dengan vaksinasi dengan organisme panas
dibunuh . Kelompok ini telah menunjukkan perlindungan pada tikus dengan
vaksinasi dengan panas - membunuh Saccharomyces cerevisiae terhadap
Aspergillus , Coccidioides , Cryptococcus dan Candida ( Capilla et al , 2009 ; . Liu et
al , 2011a , b ; . . Stevens et al , 2011 ) .