PEMBUATAN SERUM DAN PLASMA

Darah
Darah merupakan bagian penting dari sistem transportasi. Darah merupakan jaringan yang
berbentuk cairan yang terdiri dari 2 bagian, yaitu :
1. Plasma darah, bagian cair
2. Bagian korpuskuli, terdiri dari leukosit, eritrosit, trombosit.

Prinsip:
a. Pembuatan serum
Sejumlah volume darah dimasukkan kedalam tabung, lalu dibiarkan membeku. Kemudian
disentrifuge pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Serum yang telah dipisahkan diambil
dan disimpan dalam almari es setelah diberi etiket atau label.
b. Pembuatan plasma
Sejumlah volume darah dimasukkan kedalam tabung yang telah diberi EDTA 10%. Setelah
itu disentrifuge pada kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Plasma diambil dan disimpan
pada almari es dan diberi label.

Cara Kerja
a. Pembuatan Serum
1. Mengambil darah vena sebanyak 3 cc.
2. Darah dibiarkan membeku dalam tabung centrifuge.
3. Bekuan darah dalam tabung disentrifuge selama 10 menit pada kecepatan 3000 rpm.
4. Mengambil serum dan disimpan pada almari es yang terlebih dahulu diberi label.

b. Pembuatan Plasma
1. Mengambil darah vena sebanyak 3 cc.
2. Darah dimasukkan tabung yang telah diberi EDTA 10 % (anti koagulan).
3. Kemudian disentrifuge selama 10 menit pada kecepatan 3000 rpm.
4. Mengambil plasma dan disimpan pada almari es yang terlebih dahulu diberi label.

Serum
Untuk pemeriksaan kimia klinik umumnya digunakan serum. Serum adalah cairan yang
terperas dari bekuan yang berwarna kuning muda, oleh karena dalam proses pembekuan
darah fibrinogen diubah menjadi fibrin, maka serum tidak mengandung fibrinogen lagi, tetapi
zat-zat yang lain masih terkandung didalamnya.
METODE KIMIA KLINIK
Metoda
Prinsip

: GOD PAP
: Glukosa akan dioksidasi dengan adanya enzim glukosa oksidase membentuk

suatu asam glukonat dan peroksida. Peroksida yang terbentuk direaksikan dengan 4 aminoantypyrine dan asam hidroksi benzoic, dengan adanya peroksidase membentuk senyawa
kompleks yang berwarna.Intensitas warna merah yang terbentuk sebanding dengan kadar
glukosa dalam sampel.
Nilai normal : 70 105 mg/dl
5)

Kolesterol Total

Metoda
Prinsip

: CHOD PAP (Kolorimetrik Enzimatik)

: Ester kolesterol dengan adanya enzim kolesterol esterase diubah menjadi

kolesterol dan asam amino bebas. Kolesterol yang terbentuk dioksidasi dengan bantuan
enzim kolesterol oksidase membentuk kolestenon dan hydrogen peroksida. Hydrogen
peroksida yang terbentuk bereaksi dengan DSBmT (disulphobutyl-m-toluidin disodium) dan

4-amino antipyrin dengan bantuan enzim peroksidase membentuk quinonimin yang berwarna
merah muda. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi kolesterol total.
Nilai normal : < 200 mg/dl

6)

Trigliserida

Metoda
Prinsip

: GPO PAP
: Trigliserida oleh enzim lipoprotein lipase dirubah menjadi gliserol dan asam

amino bebas. Gliserol yang terbentuk direaksikan dengan ATP dengan bantuan enzim gliserol
kinase membentuk gliserol-3-phospat dan ADP. Gliserol-3-phospat dioksidasi dengan bantun
enzim gliserol phospat oksidase menjadi dihidroksi aseton phospat dan hydrogen peroksida.
Hidrogen peroksida yang terbentuk akan mengoksidasi klorophenol membentuk quinonimin
yang berwarna merah muda. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan kadar
trigliserida dalam sampel.
Nilai normal : < 150 mg/dl

7)

HDL Cholesterol

Metoda
Prinsip

: CHOD PAP
: LDL, VLDL dan chylomykron dalam sampel akan dinonreaktifkan dengan

penambahan detergent khusus, berupa accelerator dan cholesterol oksidase sehingga hanya
HDL yang reaktif. Kemudian HDL ini diperiksa dengan metoda CHOD-PAP.
Nilai normal :
Pria

: 30 70 mg/dl

Wanita

: 30 85 mg/dl

8)

LDL Cholesterol

Metoda

: CHOD PAP

Prinsip

: LDLCholesterol ditentukan secara langsung dalam dua tahap pemeriksaan.

Tahap pertama adalah mengeluarkan fraksi lain selain LDL, kemudian pada tahap kedua
LDL direaksikan dengan bantuan enzim cholesterol oksidase dan cholesterol esterase menjadi
senyawa tidak berwarna yang dengan penambahan kromogen berubah menjadi senyawa
komplek berwarna sehingga dapat diukur.
Nilai normal : < 150 mg/dl