Hospital Veterinario Dr.

Daniel Cabello Mariani

Programa de Prevencin Injuria/Enfermedad

Gua de Seguridad para el Trabajo de Laboratorio

1. Reportar todas las condiciones de

administrador y/o director del Hospital.

inseguridad

accidentes

al

2. Todos los materiales utilizados como agujas, lminas de vidrio, puntas de

pipetas, hojillas de bistur, etc. deben ser descartados en los envases
especiales para materiales corto punzantes.
3. Limpiar inmediatamente cualquier derrame de material fecal, orina, sangre
y otros especmenes o qumicos que puedan causar contaminacin de las
reas de trabajo (mesas, pisos, equipos, etc.)
4. Evitar cualquier comportamiento que pueda tender a tener influencia sobre
la seguridad de los empleados.
5. Nadie podr ser autorizado a trabajar bajo influencias adversas sobre su
estado de alerta, bajo estado de fatiga, enfermedad o alguna otra causa que
pudiese ocasionar injurias al personal o mal manejo de los equipos,
reactivos y materiales de trabajo.
6. Los equipos de seguridad, protectores de voltaje, etc. no deben ser
apagados o extrados del laboratorio.
7. Solo personal autorizado y entrenado podr manejar los equipos del
laboratorio.
8. No dude en pedir ayuda (en caso de necesitarla) para la manipulacin y
manejo de materiales, equipos y traslado de los mismos dentro del
laboratorio.
9. Todos los equipos, materiales y herramientas de trabajo deben ser
mantenidos en buen estado y funcionamiento adecuado. Aquellos que se
encuentren daados debern ser etiquetados como defectuosos y no ser
utilizados hasta su reparacin. Reportar inmediatamente al administrador
del Hospital cualquier material que requiera reparacin.
10.Los cables y equipos elctricos deben ser protegidos del agua, animales y
trfico pesado.

11.Los guantes deben ser utilizados al manipular materiales infecciosos,

manipular especmenes, manipular sustancias txicas, corrosivas, etc.

Procedimiento Estndar Operativo: Examen Directo de Heces.

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani

Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Utilizar solo heces frescas y hmedas, preferiblemente muestras rectales para

evitar la contaminacin con fuentes ambientales de organismos motiles,
especialmente larvas y trofozoitos de protozoarios.
Aplicar 1 a 2 gotas de Solucin Salina en una lmina porta objetos limpia.
Usar un palito aplicador para tomar una muestra pequea de heces del
interior de la masa fecal; slo se necesita cubrir apenas por encima el palito
para tener suficiente muestra.
Rodar el palito aplicador por encima de la lmina impregnada con la gota de
Solucin Salina para descargar ligeramente el material sobre la misma.
Colocar la lmina cubre objeto y observar bajo el objetivo de 40X del
microscopio para buscar organismos motiles, particularmente Giardia spp.,
Trichomonas, Balantidium coli, y/o Amibas.
Observar al menos 50 campos seleccionados al azar antes de reportar un
resultado negativo.

Diciembre, 2010

Procedimiento Estndar Operativo: Examen de Flotacin Fecal.

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani

Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay
En un beaker o envase plstico mezclar aproximadamente 5gr de heces frescas
con 45ml de agua limpia (romper todos los acmulos grandes de material fecal
hasta obtener una mezcla homognea).
Colar el material a travs de un papel de filtro o colador y por medio de la
ayuda de un embudo, depositar el material en un tubo de centrfuga de 50ml,
presionar para que todo el material lquido sea decantado en el tubo.
Descartar las partculas slidas en un contenedor de materiales biolgicos.
Dejar el tubo en posicin horizontal y en reposo por 15 minutos. (Esta
corresponde a la Primera Fase de la Sedimentacin)
Luego de los 15 minutos, descartar el sobrenadante (toda la mezcla
exceptuando el contenido que se encuentra en la porcin cnica en el fondo
del tubo). Esto debe ser realizado de manera cuidadosa y delicada para no
alterar el sedimento.
Re-suspender el sedimento en 40 a 45 ml de agua limpia y colocar de nuevo en
reposo por otros 15 min.
Repetir este proceso, una dos o inclusive tres veces para lograr un sedimento
limpio. El objetivo es observar el sedimento sin tener que discriminar entre
mltiples capas de estados parasitarios y material vegetal digerido: mientras
ms se lave, ms limpio ser el producto final y ser ms fcil de examinar!

Despus de la ltima limpieza, el sobrenadante es claro, casi transparente o

parecido a esto, se decanta una ltima vez.
Utilizar una pipeta para cargar dos lminas con el sedimento y colocar
cubreobjetos 22x50. Utilizar el objetivo de 10x para observar todo lo que existe
bajo esos dos cubre objetos.
Buscar especficamente huevos de parsitos, sin embargo, todos los ooquistes,
quistes y huevos de parsitos se pueden encontrar en la muestra ya que se
hundirn en el agua y formaran parte del sedimento.
La muestra puede ser preservada con la adicin de formalina y/o
refrigeracin.

Diciembre, 2010

Procedimiento Estndar Operativo: Flotacin Fecal Centrifugada.

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Nota: preferiblemente utilizar 3-5 gm de heces frescas, si solo se dispone de 13 gm, realizar el examen, pero indicar como comentario que la cantidad de
heces podra ser insuficiente para la obtencin de resultados adecuados. (La
excepcin es para animales muy pequeos como roedores, reptiles y aves,
donde la cantidad de heces proporcionada no es opcional).
Cuando la muestra sea menor a 1 gm de un animal de tamao mediano o
grande (perro, gato, caballo, etc) es probablemente buena idea NO
REALIZAR EL EXAMEN y dejarle saber al clnico que es necesario una
mayor cantidad de muestra fecal. Si no es posible disponer de otra muestra
y el clnico aprueba realizar el examen, este debe hacerse como un examen
directo de heces, pero dejarle saber al clnico en la hoja de resultados que este
fue el nico examen que se pudo realizar. Colocar las heces en una copa de
plstico o de papel y aadir 5-8 ml de agua corriente. Romper las heces
cuidadosamente con una paleta de madera o palito aplicador. Colar el material
a travs de un colador y embudo y dejar caer dentro de un tubo plstico
centrifugable. En caso de que hayan quedado restos de heces en la copa,
aadir unos pocos mls de agua dentro de la copa y revolver el resto de material
que quede en la misma para repetir el procedimiento anterior. Si el volumen no

ha alcanzado la parte superior del tubo, completar con agua hasta llegar al
tope del mismo dejndola pasar a travs del colador y embudo para retirar y
lavar el material fecal remanente. Centrifugar el tubo por 10 min a 500 g.
Retirar el sobrenadante. Luego aadir Sulfato de Zinc al 37% (solucin de
flotacin) al tubo, aproximadamente hasta la marca de 9 ml del tubo, y
revolver cuidadosamente con un palito aplicador, utilizando los lados del palito
para romper los acmulos de heces contra las paredes del tubo. Completar el
resto del tubo con Sulfato de Zinc hasta llegar al tope del tubo y formar un
menisco convexo. Colocar un cubreobjetos plstico de 22 x 22 mm en el tope
del tubo. Centrifugar por 10 min. Retirar el tubo de la centrifuga y colocar en
reposo sobre una gradilla por otros 5 a 10 min adicionales. Retirar el
cubreobjetos horizontalmente sin dejar derramar la emulsin que se
encuentra bajo el mismo y colocar sobre una lamina portaobjetos. Observar y
escanear la lmina con objetivo de 10x, realizarlo metdicamente para
garantizar que todo el rea del cubreobjetos sea observado (si es necesario,
utilizar el objetivo de 20x y 40x para identificar estadios parasitarios en la
lmina, pero retornar al objetivo de 10x para escanear el resto de la lmina).
Emplear la escala de conversin micromtrica para determinar los tamaos de
los parsitos observados (en micrones) Si no se observa ningn estadio
parasitario utilizando solo el objetivo de 10X, repetir el escaneo con el de 40x y
observar 50 campos al azar separados entre si, para observar objetos ms
pequeos, buscando ms especficamente por quistes de proozoarios y
oocistos, especialmente de Giardia spp/Cryptosporidium spp.
Diciembre, 2010

Procedimiento Estndar Operativo: Examen Hematolgico

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Espcimen: sangre completa en EDTA (tubo tapa morada)

Recepcin de la muestra en laboratorio. Observar las condiciones de la
muestra recibida (la sangre no debe tener cogulos, hemolisis, etc). Verificar
que el protocolo de laboratorio tenga la fecha, los datos del paciente, los
exmenes a realizar en el laboratorio y el nombre del mdico solicitante.
Identificacin.

 Tubo de sangre. Colocar el nmero de muestra del da encerrado en un

crculo, seguido del nombre del paciente y la fecha.

Ejemplo:

Molly

12/01/11

Libro de actas del laboratorio. Al inicio del da colocar en el centro de la

lnea el da y la fecha para comenzar con la recepcin y registro de
muestras a procesar.
Ejemplo:

Lunes 12/01/11

Colocar el nmero de muestra del da en el lado izquierdo de la pagina,

seguido del nmero de historia por ejemplo: C-1000845 (en caso de no tener
numero S/N, en caso de ser un paciente referido REF.)En la parte central de
la misma lnea se coloca el nombre del paciente y en la esquina derecha de la
misma lnea el nombre y apellido del mdico solicitante. En la segunda
lnea debajo del nmero de muestra y nmero de historia debe colocarse los
exmenes a realizar (hematologa completa o HC)
Ejemplo:
1 C-1000845

Molly

Ma Elena Villaln

HC
Protocolo de laboratorio del paciente. Colocar en la parte superior
derecha del protocolo el nmero de muestra del da y archivarlo en la
carpeta de protocolos de laboratorio.

Materiales y Equipos:

Procedimiento:

Agitador mecnico

Tubo de sangre en EDTA

Palitos de Madera

Coulter

Lmina porta objetos

Lmina cubre objetos

Gasa o papel secante

Kit de Hemacolor

Microscopio ptico

Contador de clulas

1. Tomar tubo de sangre en EDTA y revisar visualmente que no contenga

cogulos, de tener alguno o sospechar su presencia utilizar un palito de
madera e introducirlo en el tubo rodeando las paredes del mismo para
atrapar el cogulo y extraerlo. OJO: Ninguna muestra coagulada debe
ser introducida al Coulter ya que esto tapara la punta recolectora
de sangre y daara al equipo! Las muestras coaguladas no deben
procesarse ya que los valores hematolgicos se encontrarn
alterados debido al requerimiento de clulas y componentes
sanguneos para la formacin del cogulo, por lo tanto se sugiere al
mdico solicitante del examen repetir el muestreo.
2. Colocar durante al menos veinte segundos sobre el agitador
mecnico para que la sangre se mezcle bien, de ser una emergencia se
puede aplicar agitacin manual invirtiendo el tubo delicadamente al
menos tres veces antes de introducirlo al Coulter.
3. La muestra sin cogulos, previamente agitada es introducida en el
Coulter (destapar tubo, introducirlo verticalmente hasta la parte
superior de la punta de acero, presionar el botn blanco una sola vez y
esperar al sonido del equipo que avisa que ya ha tomado la muestra,
extraer el tubo de la punta de acero y posteriormente limpiar la punta
de acero con una gasa seca hasta retirar todos los restos de sangre.
4. Anotar resultados en el libro de actas una vez que el equipo seale
Next Test. Para leer resultados en el Coulter debe presionarse los
siguientes botones en forma sucesiva (DIR, ADV, SEL) y posteriormente
seguir presionando el botn (SEL) hasta obtener todos los resultados del
equipo.
5. Tomar una lmina porta objetos limpia y pulida para realizar el
frotis sangre completa. El mismo deber ser realizado con la lmina
cubre objetos para obtener un rodamiento delicado de la sangre sobre la
lmina porta objetos. Una vez seca la sangre se procede a su
identificacin. La cual consiste en colocar los siguientes datos sobre la
parte posterior del frotis con un marcador o lpiz: escribir las siglas SC
para denotar que es de sangre completa, nmero de muestra de
laboratorio encerrado en un crculo, y fecha.

SC
1
12/0

Ejemplo:

6. Fijar y teir la lmina. Introducir la lmina en el metanol (envase 1),

para fijarla. Una vez seco el metanol puede teirse con el rojo (envase 2)
y una vez teido debe lavarse en agua corriente, luego de escurrir el
resto del agua, introducir en el colorante morado (envase 3), una vez
fijado el color, lavar en agua corriente y dejar secar sobre un toalln.
Dejar secar la lmina porta objetos en posicin vertical y con la bala
del frotis hacia arriba para evitar la formacin de artefactos por mal
secado.
7. Proceder a la lectura y anlisis de las lminas (contaje diferencial,
caractersticas de regeneracin celular y morfologa). El personal
que se encuentra rotando por el servicio de laboratorio (pasantes,
internos, estudiantes de la especializacin) deber ser autorizado por el
personal contratado del laboratorio para poder leer y revisar las
muestras previamente analizadas. Los estudiantes que estn cursando
la especializacin en medicina de pequeos animales y que hayan
logrado un nivel ptimo de anlisis de las muestras durante su
entrenamiento, podrn colaborar formalmente en su interpretacin.
Contaje Diferencial. Utilizando el contador electrnico se contabilizan 100
glbulos blancos en el frotis sangre completa. El contaje es realizado en la
bala o porcin final del mismo. Y una vez finalizado se transfieren los
resultados al libro de actas. Este contaje ser el equivalente al % de
glbulos blancos en sangre (GB). Luego debe realizarse el clculo
matemtico del valor absoluto o real el cual consiste en tomar el valor de
contaje total de glbulos blancos arrojado por el Coulter (nmero sin la
coma) y multiplicarlo por cada uno de los % obtenidos en el contaje
manual.

Ejemplo:

Valor %
GB 17,5

Clculo: GB 175 x M 11

1925

M
L
N
B
E

11
08
68
01
02

Valor Absoluto
1925
1400
11900
175
350

Signos de Regeneracin Medular de la Serie Roja:

1.
2.
3.
4.

Anisocitosis (escasa, leve, moderada, marcada)

Reticulocitos (tambin llamados policromatfilos)
Cuerpos de Howell-Jolly
Puntillado Basfilo

Sx. Regeneracin Ausentes: ninguno est presente.

Sx. Escasos: escasa a leve anisocitosis, 1 a 2 reticulocitos x campo (100x)
Sx. Moderados: anisocitosis moderada, 2 a 6 reticulocitos x campo, cuerpos

de Regeneracin
Celular.
OJO: Solo es necesario
de Caractersticas
H-J presentes y puntillado
basfilo presente
o no.
describir estas caractersticas para aquellos pacientes que reflejen un
Sx.ndice
Marcados:
anisocitosis marcada,
reticulocitos
x campo,(contaje
cuerpos de
hematemtrico
anormal >o6 estado
de anemia
de
H-Jglbulos
y puntillado
basfilo
presentes
o
no.
rojos, hematocrito y hemoglobina por debajo del rango
normal establecido). Debern describirse las caractersticas de
regeneracin de la serie roja observables en el frotis sangre completa para
poder determinar si existen o no signos de regeneracin y a su vez en qu
Signos de Hematopoyesis Extra-Medular:
grado se estn expresando (Se describirn como ausentes, escasos,
moderados o marcados signos de regeneracin de la serie roja y entre
1. Rubricitos
parntesis se incluirn cules de estos signos se observaron en el frotis
2. Metarrubricitos
SC). En caso de observarse algunas clulas inmaduras de la serie blanca
(mielocitos, metamielocitos, linfoblastos) se reportarn tambin en la
descripcin del frotis.
Contaje Corregido de Glbulos Blancos: en caso de que el nmero de
rubricitos y /o metarrubricitos vistos durante el contaje diferencial de
blancos sea superior a 15 clulas, debe realizarse la correccin del contaje
realizado por el Coulter ya que stas clulas nucleadas fueron incluidas como
glbulos bancos en el contaje. Para corregir este error se emplea la siguiente
frmula:

C.C. GB

nmero de GB (cifra sin la coma) x 100

100 + % de GR nucleados

Ejemplo: GB 17,5

C.C. GB

Metarrubricitos/Rubricitos 18%

175 x 100
100 + 18

9,72

C.C. GB

17,5 9.72

C.C. GB 7,78

Colocar en el libro de actas y protocolo el % de metarr/rubric observados y

al lado el resultado del C.C. GB.
Sospecha de Trastornos del Estroma Medular, Sndrome Mielodisplsico,
Leucemia Aguda:
1.

Formas blsticas de GB (Lecucemia aguda >30% clulas observables en el frotis

son blsticas)

2.

Citopenias, bicitopenias o pancitopenias

Sospecha de Reaccin Leucemoide o de Leucemia Crnica:

1. Abundantes formas maduras de GB (de una o varias lneas celulares)
2. Formas blsticas de GB (5-6% clulas observables son blsticas)
8. Vaciado de datos en el Libro de Actas y protocolos. Todos los datos
recopilados del Coulter, lectura de las lminas (contaje diferencial,
caractersticas de regeneracin celular y morfologa) debern anotarse
cuidadosamente para evitar errores de transcripcin.
9. Firma de protocolos. Solo el personal contratado en el laboratorio
(Mdicos Veterinarios y Bioanalistas) puede firmar los protocolos de

laboratorio realizados durante su turno de trabajo, as como tambin

aquellos estudiantes de postgrado que estn cursando la especializacin
en medicina de pequeos animales y que hayan logrado un nivel ptimo
de lectura e interpretacin de las muestras durante su entrenamiento,
de lo contrario las muestras ledas por cualquiera de los estudiantes
(pasantes, internos, primer ao de especializacin) debern ser
revisadas y los protocolos sern firmados por el personal contratado de
turno.
10. Archivar los protocolos dentro del acorden del laboratorio una vez
que hayan sido revisados y firmados.

Enero, 2011

Procedimiento Estndar Operativo: Despistaje de Hemoparsitos.

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Materiales y Equipos:

Microcapilares
Plastilina Cha-Seal
Microscopio ptico
Gasa o papel secante
Lmina porta objetos
Kit de Hemacolor

Tubo de sangre en EDTA

Micro-centrfuga
Aguja
Corta uas
Lmina cubre objetos

Procedimiento:
1. Tomar el tubo tapa morada y realizar el llenado de 2 micro-capilares.
2. Tapar con la plastilina Cha-Seal uno de los extremos de ambos capilares
y dejar los micro-capilares sobre la base de plastilina en la posicin que
corresponde al nmero de la muestra.
3. Colocar dentro de la micro-centrifuga los micro-capilares. Uno en la
posicin que corresponde al nmero de muestra y el otro en el espacio de
en frente.

4. Centrifugar durante 2 minutos. OJO: No olvidar siempre colocar la

tapa enroscable de la centrifuga ya que de olvidarla se partirn los
micro-capilares y se esparcir la sangre de los mismos dentro del equipo.
De ocurrir esto, se debe retirar todos los restos de vidrio para no causar
desperfectos en el centrifugado y limpiar bien los restos de sangre con
una gasa empapada en alcohol o agua oxigenada.
5. Extraer los micro-capilares de la centrfuga una vez que deje de girar el
plato interno.
6. Realizar la prueba de Woo. Consiste en observar los micro-capilares en
el microscopio y descartar la presencia de micro-filarias en sangre. Ubicar
la capa flogstica y capa blanca para buscar movimiento u observar las
larvas. Colocar el resultado (positivo/negativo) en el libro de actas del
laboratorio.
7.

Realizar el frotis capa blanca. Utilizar una lmina porta objetos limpia
y pulida para realizar el frotis. Cortar uno de los micro-capilares a nivel
del plasma, dejando una distancia de aproximadamente 5 mm entre el
plasma y la capa blanca. Tomar la aguja y revolver la capa blanca
dentro del micro-capilar para mezclar suavemente las clulas y
despegarlas de los bordes del capilar. Extraer la aguja e introducirla por
el extremo de la plastilina hasta dejar caer el plasma, la capa blanca
y una pequea cantidad de capa roja sobre la lmina portaobjetos,
tomar el cubre objetos y mezclar ligeramente la sangre depositada en la
lmina haciendo movimientos circulares. Realizar el frotis en forma de
bala.

8. Una vez seca la sangre se procede a su identificacin. La cual consiste

en colocar los siguientes datos sobre la parte posterior del frotis con un
marcador o lpiz: escribir las siglas CB para denotar que es de capa
blanca, nmero de muestra de laboratorio encerrado en un crculo, y
fecha.
Ejemplo:

CB
1
12/0

9. Fijar y teir la lmina. Introducir la lmina en el metanol (envase 1),

para fijarla. Una vez seco el metanol puede teirse con el rojo (envase 2)
y una vez teido debe lavarse en agua corriente, luego de escurrir el
resto del agua, introducir en el colorante morado (envase 3), una vez
fijado el color, lavar en agua corriente y dejar secar sobre un toalln
secante. Colocar la porta objetos en forma vertical y con la bala del
frotis hacia arriba para evitar la formacin de artefactos por mal
secado.
10. Proceder a la lectura de la lmina (bsqueda de hemoparsitos e
inclusiones virales, bacterianas o micticas). El personal que se
encuentra rotando por el servicio de laboratorio (pasantes, internos,
estudiantes de la especializacin) deber ser autorizado por el personal
contratado del laboratorio para poder leer y revisar las muestras
previamente

analizadas.

Los

estudiantes

que

estn

cursando

la

especializacin en medicina de pequeos animales y que hayan logrado

un nivel ptimo de anlisis de las muestras durante su entrenamiento,
podrn colaborar formalmente en su interpretacin.

En caso de ser hemoparsitos deber colocarse un estimado del grado de

parasitemia en base al nmero de cruces:
++++ Extremadamente alta (70 a 100% de las clulas observables se
encuentran parasitadas)
+++ Alta (50 a 70% de las clulas observables se encuentran parasitadas)
++ Moderada (30 a 50% de las clulas observables se encuentran parasitadas)
+ Leve (1 a 30% de las clulas observables se encuentran parasitadas)
Ejemplo: de las plaquetas totales del paciente fueron observadas solo 3
inclusiones de A. platys, esto equivale a menos del 30% de plaquetas, es decir,
+ A. platys.

11. Vaciado de datos en el Libro de Actas y protocolos. Todos los datos

recopilados de la lectura de las lminas (bsqueda de hemoparsitos e
inclusiones

virales,

bacterianas

micticas).

debern

anotarse

cuidadosamente para evitar errores de transcripcin.

12. Firma de protocolos. Solo el personal contratado en el laboratorio
(Mdicos Veterinarios y Bioanalistas) puede firmar los protocolos de
laboratorio realizados durante su turno de trabajo, as como tambin
aquellos estudiantes de postgrado que estn cursando la especializacin
en medicina de pequeos animales y que hayan logrado un nivel ptimo
de lectura e interpretacin de las muestras durante su entrenamiento, de
lo contrario las muestras ledas por cualquiera de los estudiantes
(pasantes, internos, primer ao de especializacin) debern ser revisadas
y los protocolos sern firmados por el personal contratado de turno.
13. Archivar los protocolos dentro del acorden del laboratorio una vez
que hayan sido revisados y firmados.

Enero, 2011

Procedimiento Estndar Operativo: Urianlisis.

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay
Tubo sin anticoagulante o envase colector estril
Guantes
Micro-pipeta
Materiales y Equipos:
Puntas amarillas (20l)
Gasa o papel secante
Centrfuga
Tira Reactiva
Lminas porta objetos
Lminas cubre objetos
Microscopio ptico
Cinta de pH
Refractmetro
Equipo VetLLab UA IDEXX

Espcimen: orina en envase recolector estril o tubo tapa roja o sin

anticoagulante.
Recepcin de la muestra en laboratorio. Verificar que el protocolo de
laboratorio tenga la fecha, los datos del paciente, los exmenes a realizar en el
laboratorio, el nombre del mdico solicitante, y la tcnica empleada para
recoleccin de la muestra de orina (cistocentesis, catter, miccin
espontnea) y hora en que fue recolectada la muestra.
Identificacin.
Tubo o envase recolector. Identificar como ORINA para evitar confundir
la muestra con otro lquido corporal o sangre. Colocar el nmero de
muestra del da encerrado en un crculo, seguido del nombre del
paciente y la fecha.

Ejemplo:

ORINA

Molly

12/01/11

Libro de actas del laboratorio. Al inicio del da colocar en el centro de la

lnea el da y la fecha para comenzar con la recepcin y registro de
muestras a procesar.
Ejemplo:

Lunes 12/01/11

Colocar el nmero de muestra del da en el lado izquierdo de la pagina,

seguido del nmero de historia por ejemplo: C-1000845 (en caso de no tener
numero S/N, en caso de ser un paciente referido REF.)En la parte central de
la misma lnea se coloca el nombre del paciente y en la esquina derecha de la
misma lnea el nombre y apellido del mdico solicitante. En la lnea
siguiente, debajo del nmero de paciente se coloca los exmenes a realizar en
el laboratorio.

Ejemplo:
1 C-1000845

Molly

Ma Elena Villaln

Urianlisis
Protocolo de laboratorio del paciente. Colocar en la parte superior
derecha del protocolo el nmero de muestra del da y archivarlo en la
carpeta de protocolos de laboratorio.
Inspeccin Visual de la muestra: Colocar estos datos en el protocolo del
paciente.
1. Color: incoloro, beige, amarillo, mbar, rojo, marrn, verde, negro.
2. Turbidez: limpia, ligeramente, moderadamente o marcadamente turbia,
opaca.
Tira Reactiva:
Equipo VetLab UA IDEXX: el equipo VetLLab UA IDEXX debe calibrarse
cada siete das o cuando aparezca el mensaje de Repetir Calibracin en la
pantalla del equipo. (Las instrucciones para procedimientos de calibracin y
lectura de las tiras se encuentran al final del protocolo de Urianlisis). Una vez
finalizada el equipo generar un informe de resultados impresos. Retirar el
resultado de la calibracin y archivarlo en la gaveta. Una vez calibrado
proseguir con el procesamiento de la muestra. Esperar el informe de
resultados impresos y transferir datos al protocolo del paciente y libro de actas
del laboratorio.
Manual: tomar el tubo tapa roja con orina e introducir la tira hasta llenar
todas las almohadillas de la misma, sacarla del tubo y secar la parte de atrs
de la cinta retirando el exceso de orina. Ver la parte externa del tubo de tiras
reactivas para realizar la comparacin y evaluacin de los valores expresados
en la tira. Anotar los valores en el protocolo del paciente y libro de actas del
laboratorio.
Centrifugar muestra en un tubo tapa roja (1000 revoluciones x 5 min).
Evaluacin con Refractmetro:
Calibracin del Refractmetro: colocar una gota de agua destilada y
observar la lnea azul, debe estar justo encima del lmite inferior. Una vez

calibrado, se coloca a travs de la micro-pipeta una gota del sobrenadante

para evaluar los siguientes aspectos qumicos de la orina:
1. Protenas Totales: se mide tambin en el refractmetro en conjunto
con la gravedad especfica (corresponde a la primera columna ubicada a
la izquierda, el valor se expresa en gr/dl).
2. Gravedad Especfica: colocar el sobrenadante del tubo ya centrifugado
sobre el refractmetro, con ayuda de una micro-pipeta. Medir densidad
o gravedad especfica de la orina (columna derecha del refractmetro,
el valor se encuentra expresado por encima de 1000).

Examen del Sedimento Urinario:

1. Examen Fresco: una vez centrifugada la muestra y tomados los valores
de protena urinaria y gravedad especfica de la orina con el
refractmetro, se procede a decantar delicadamente en el lavamanos del
laboratorio todo el lquido superior, dejando solo en el tubo el material
sedimentado que se encuentra en el fondo del mismo.
Se toma la micro-pipeta con una punta de 20 l y se coloca una gota del
sedimento sobre una lmina porta objeto limpia y pulida, colocar una laminilla
cubre objeto sobre el material citolgico depositado y observar al microscopio
con objetivo de 40X.
Describir los cilindros, cristales, fibrina, bacterias, gotas lipdicas,
espermatozoides, cantidad de glbulos rojos y glbulos blancos, parsitos,
levaduras (Expresados en un rango de 0 a abundantes o incontables x
campo). Anotar todos los datos descritos tanto en el libro de actas como el
protocolo del paciente.

2. Sedimento Coloreado: tomar parte del sedimento y realizar de 2 a 4

citologas del mismo. El extendido se har en funcin de las condiciones
macroscpicas de la muestra.
De acuerdo a la celularidad presente se evalan las siguientes opciones de
preparacin de la muestra:
Muestra Acuosa: se realizan concentrados, colocando una gota y esparciendo
el sedimento con la punta de la micro-pipeta en forma de estrella o
simplemente se colocan varias gotas pequeas sin esparcir.
Muestra Semi-Slida: compresin de una lmina sobre otra y luego realizar
traccin inversa de una sobre la otra para obtener una mono-capa de clulas.

Muestra Sanguinolenta: extendido en frotis (como si fuese sangre completa)

Identificar cada lmina colocando el nmero de muestra del da encerrado en
un crculo, la fecha y las siglas SED (sedimento urinario).

Ejemplo. Sedimento Acuoso:

SED 1
12/01/1

OJO: No descartar el resto del sedimento hasta asegurarse de que las

citologas hayan sido coloreadas y hayan quedado correctamente ya que a
veces se pierde parte del material una vez que son lavadas luego de la
coloracin final. Independientemente de la(s) tcnica(s) utilizada(s) se deben
dejar secar completamente las citologas realizadas y posteriormente fijar
con metanol en espray al 10% y colorear con Hemacolor por medio de los
goteros de coloracin de citologas dejando las lminas en posicin horizontal
sobre la bandeja de coloracin con cada colorante por lo menos un minuto
sobre cada lmina.
Una vez coloreadas se decanta el colorante restante y se lavan y dejan secar.
Una vez secas las lminas, se colocan en la mesa de citologas con su
respectivo protocolo debajo de las lminas.
Enero, 2011

Procedimiento Estndar Operativo: Preparacin de Citologas

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Materiales y Equipos:

Metanol
Kit de Hemacolor
Bandeja de Coloracin
Guantes
Gotero para colorante rojo
Agua Corriente
Gotero para colorante morado Alcohol al 70 %
Marcador indeleble o lpiz de cera

Espcimen: lmina(s) porta-objeto con material citolgico.

Recepcin de la muestra en laboratorio. Verificar que el protocolo de
laboratorio tenga la fecha, los datos del paciente, los exmenes a realizar en el
laboratorio, el nombre del mdico solicitante, nmero de lminas tradas
para anlisis citolgico, descripcin macroscpica de la(s) masa(s) o
tejido(s) en estudio, tcnica(s) empleada(s) para la toma de muestra(s),
diagnsticos presuntivos, antecedentes de otras masas.
De ser varios rganos o tejidos muestreados, colocar el nmero de lminas
elaboradas de cada uno de los tejidos en el libro de actas e identificar
inmediatamente los porta-objetos correspondientes para evitar confundir los
especmenes muestreados.
Identificacin.

Identificar cada lmina segn el tejido al cual corresponde, tcnica de

muestreo empleada, nmero de muestra del da encerrado en un crculo,
seguido del nombre del paciente y la fecha.

Ejemplo:
AAF
1

Colocar el nmero de muestra del da en el lado izquierdo de la pagina,

seguido del nmero de historia por ejemplo: C-1000845 (en caso de no tener
numero S/N, en caso de ser un paciente referido REF.)En la parte central de
la misma lnea se coloca el nombre del paciente y en la esquina derecha de la
misma lnea el nombre y apellido del mdico solicitante. En la lnea
siguiente, debajo del nmero de paciente se coloca los exmenes a realizar en
el laboratorio.

Ejemplo:
1 C-1000845

Molly

Ma Elena Villaln

Citologa de Masa en MAD. AAF. (3 lminas)

Protocolo de laboratorio del paciente. Colocar en la parte superior
derecha del protocolo el nmero de muestra del da y archivarlo en la
carpeta de protocolos de laboratorio.

Procedimiento: se deben dejar secar completamente las citologas

realizadas y posteriormente fijar con metanol en espray al 10% y colorear
con Hemacolor empleando los goteros de coloracin de citologas dejando las
lminas en posicin horizontal sobre la bandeja de coloracin con cada
colorante por lo menos un minuto sobre cada lmina.
Tincin con Hemacolor: cubrir la lmina con el colorante rojo y esperar un
minuto o hasta que el color se fije a la muestra, luego decantar el colorante
sobre la bandeja de coloracin y cubrir con el colorante morado. Una vez
coloreadas se decanta el colorante restante, se lavan y dejan secar en posicin
vertical.
Una vez secas las lminas, se colocan en la mesa de citologas con su
respectivo protocolo debajo de las lminas.

Enero, 2011

Procedimiento Estndar Operativo: Anlisis de Fluidos Corporales

Hospital Veterinario Dr. Daniel Cabello Mariani
Facultad de Ciencias Veterinarias
Universidad Central de Venezuela Ncleo Maracay

Materiales y Equipos: Tubo sin anticoagulante o envase colector estril

Guantes
Micro-pipeta
Puntas amarillas (20l)
Gasa o papel secante
Centrfuga
Lminas cubre objetos
Lminas porta objetos
Microscopio ptico
Refractmetro

Espcimen: fluido abdominal, pleural, y/o pericrdico en tubo tapa morada o

con anticoagulante.
Recepcin de la muestra en laboratorio. Verificar que el protocolo de
laboratorio tenga la fecha, los datos del paciente, los exmenes a realizar en el
laboratorio, el nombre del mdico solicitante.
Identificacin.
Tubo tapa morada: Identificar como FLUIDO Abd, Pleu, Peri, para evitar
confundir la muestra con otro lquido corporal, orina o sangre. Colocar el
nmero de muestra del da encerrado en un crculo, seguido del nombre
del paciente y la fecha.

Ejemplo:

FUIDO Abd.

Molly

12/01/11

Libro de actas del laboratorio. Al inicio del da colocar en el centro de la

lnea el da y la fecha para comenzar con la recepcin y registro de
muestras a procesar.
Ejemplo:

Lunes 12/01/11

Colocar el nmero de muestra del da en el lado izquierdo de la pagina,

seguido del nmero de historia por ejemplo: C-1000845 (en caso de no tener
numero S/N, en caso de ser un paciente referido REF.)En la parte central de
la misma lnea se coloca el nombre del paciente y en la esquina derecha de la
misma lnea el nombre y apellido del mdico solicitante. En la lnea
siguiente, debajo del nmero de paciente se coloca los exmenes a realizar en
el laboratorio.

Ejemplo:
1 C-1000845

Molly

Anlisis de Fluido Abdominal

Ma Elena Villaln

 Protocolo de laboratorio del paciente. Colocar en la parte superior

derecha del protocolo el nmero de muestra del da y archivarlo en la
carpeta de protocolos de laboratorio.
Procedimiento:
1. Inspeccin Visual de la muestra: Colocar estos datos en el protocolo
del paciente.
Color: incoloro, beige, amarillo, naranja, marrn, verde, blanco, rosado o rojo.
Turbidez: limpio (visiblemente no turbio), ligeramente turbio (turbidez visible y
capacidad de leer escritura a travs del tubo), moderadamente turbio (capaz de
ver pero no de leer escritura a travs del tubo) u opaco (marcadamente turbio
e imposible ver a travs del tubo).
Revisar que la muestra no contenga cogulos y mezclar el fluido varias veces
delicadamente con la mano para procesar con el Coulter 540. Tomar los datos
de glbulos rojos, glbulos blancos y hemoglobina.
2. Centrifugar muestra en el tubo tapa morada o separar una porcin en
tubo de Ependorff para centrifugar rpidamente (1000 revoluciones x
5 min).
3. Evaluacin con Refractmetro:
Calibracin del Refractmetro: colocar una gota de agua destilada y
observar la lnea azul, debe estar justo encima del lmite inferior. Una vez
calibrado, se coloca a travs de la micro-pipeta una gota del sobrenadante del
fluido para evaluar los siguientes aspectos qumicos:
Protenas Totales: se mide tambin en el refractmetro en conjunto con la
gravedad especfica (corresponde a la primera columna ubicada a la izquierda,
el valor se expresa en gr/dl).
Gravedad Especfica: colocar el sobrenadante del tubo ya centrifugado sobre
el refractmetro, con ayuda de una micro-pipeta. Medir densidad o gravedad
especfica del fluido (columna derecha del refractmetro, el valor se
encuentra expresado por encima de 1000).

4. Preparacin de Citologas a partir del Sedimento:

Una vez centrifugada la muestra y tomados los valores de protena y gravedad
especfica del fluido con el refractmetro, se procede a decantar delicadamente

en el lavamanos del laboratorio todo el lquido superior, dejando solo en el

tubo el material sedimentado que se encuentra en el fondo del mismo.
Sedimento Coloreado: tomar parte del sedimento y realizar de 2 a 4 citologas
del mismo. El extendido se har en funcin de las condiciones macroscpicas
de la muestra.
De acuerdo a la celularidad presente se evalan las siguientes opciones de
preparacin de la muestra:
Muestra Acuosa: se realizan concentrados, colocando una gota y esparciendo
el sedimento con la punta de la micro-pipeta en forma de estrella o
simplemente se colocan varias gotas pequeas sin esparcir.
Muestra Semi-Slida: compresin de una lmina sobre otra y luego traccin
inversa de una sobre la otra para obtener una mono capa de clulas.
Muestra Sanguinolenta: extendido en frotis (como si fuese sangre completa)
Identificar cada lmina colocando el nmero de muestra del da encerrado en
un crculo, la fecha y las siglas AF (Anlisis de Fludo).

Ejemplo. Muestra Acuosa:

AF

12/01/1

OJO: No descartar el resto del sedimento hasta asegurarse de que las

citologas hayan sido coloreadas y hayan quedado correctamente ya que a
veces se pierde parte del material una vez que son lavadas luego de la
coloracin final. Independientemente de la(s) tcnica(s) utilizada(s) se deben
dejar secar completamente las citologas realizadas y posteriormente fijar
con metanol en espray al 10% y colorear con Hemacolor por medio de los
goteros de coloracin de citologas dejando las lminas en posicin horizontal
sobre la bandeja de coloracin con cada colorante por lo menos un minuto
sobre cada lmina.
Una vez coloreadas se decanta el colorante restante y se lavan y dejan secar.
Una vez secas las lminas, se colocan en la mesa de citologas con su
respectivo protocolo debajo de las lminas.
Enero, 2011