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MICROBIOLOG

PARSITOS

Chagas-Mazza
2016

Chagas-Mazza

Contenidos

Clnica y epidemiologa

Caractersticas del parsito

Transmisin y vectores

Diagnstico: toma de muestras y procesamiento en laboratorio

Tratamiento

Chagas-Mazza

Clnica y epidemiologa
La enfermedad de Chagas est causada por el parsito Trypanosoma cruzi, y presenta dos
fases clnicas de presentacin: una fase aguda, generalmente asintomtica o con sntomas
leves, como fiebre, malestar general o astenia, y una fase crnica, donde el paciente
presenta cardiopatas, alteraciones digestivas y neurolgicas, por la invasin parasitaria del
tejido muscular.
En Argentina, se estima que hay 7300000 personas expuestas, 1600000 infectados,
300000 afectados por cardiopatas de origen chagsico, y nacen 1300 nios infectados por
transmisin congnita por ao.
Las zonas endmicas del pas, se observan en el siguiente mapa:

Formosa, Chaco, Catamarca, Santiago del Estero, San Juan y Mendoza son provincias
con un alto riesgo de transmisin; Misiones, Corrientes, Crdoba, San Luis, La Rioja y
Tucumn son zonas de riesgo mediano, donde est descendiendo la transmisin por el

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vector; Buenos Aires, Santa Cruz, Tierra del Fuego son zonas con un alto riesgo de
transmisin congnita, mientras que las dems provincias tienen un bajo riesgo de
transmisin, por erradicacin del vector.

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Caractersticas del parsito

Es un protozoo de la clase Zoomastigophora, familia Trypanosomatidae.

Es muy pequeo, mide aproximadamente 20 milsimos de milmetro.

Posee un cuerpo alargado con un solo flagelo y una membrana ondulante,


estructuras que, agitndose y vibrando, permiten su movilizacin dentro de la masa
de sangre.

Posee una sola mitocondria, cuyo genoma se encuentra ordenado en una compleja
y compacta regin (dentro de la propia mitocondria, y cerca de la base del flagelo),
denominada cinetoplasto.

Es un parsito intracelular con un ciclo de vida que involucra vertebrados e


invertebrados.

Es el agente etiolgico de la enfermedad de Chagas.

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Transmisin y vectores
VIAS DE TRANSMISIN
La principal va de transmisin de la infeccin por T. cruzi es la vectorial, la cual se lleva a
cabo en el ciclo domstico del que forman parte el hombre, los mamferos domsticos y los
triatominos adaptados al hbitat domiciliario y peridomiciliario. Tambin existe un ciclo
silvestre al que el hombre puede acceder.
Los triatominos son insectos hematfagos primitivamente silvestres. Algunos se adaptaron
secundariamente a la vivienda humana, pero la mayora de las especies conserva sus
hbitos primitivos, viviendo en ecotopos naturales. An las especies domiciliarias, vectores
principales de la transmisin de T. cruzi en el ciclo domstico, conservan hbitats silvestres
en ciertas reas.
Las especies Triatoma infestans Klug (Zeledn R, 1983), Rhodnius Prolixus Stal, y
Pastrongylus megistus Burmeister son importantes desde el punto de vista epidemiolgico,
por su adaptacin al domicilio y por su abundancia y eficacia como vectores en la
transmisin de T. cruzi. El grado de domiciliacin de los distintos vectores, y por lo tanto la
antigedad de su relacin con el hombre, varan. La especie ms antigua en la vivienda
humana es el T. infestans, existiendo registros arqueolgicos de esta especie hallados
juntamente con restos humanos. Desde el punto de vista
epidemiolgico, T. infestans es el vector ms importante dada su amplia distribucin y su
hbito casi exclusivamente domstico. Como especies peridomiciliarias o en vas de
adaptacin se encuentran T.dimidiata, T. srdida, T. guasayana, T. patagnica, T.
braziliensis, T. rubrofasciata, T. lignarius y R. pallescens. En Sudamrica los insectos
esencialmente selvticos son T. proctata y T. sanguisuga y en Norteamrica T. platenses y
T. rubrovaria (Cerisola JA y col., 1974).
Los reservorios domsticos ms importantes del T. cruzi son el perro y el gato (Ruiz AM y
col., 1985 a). Las aves son refractarias a la infeccin debido a la existencia de un factor
plasmtico que lisa a los tripanosomas. La presencia de parsitos, en el caso de los gatos
y perros revela mayores porcentajes de positividad que en humanos, subrayando la
importancia de estos reservorios domsticos como fuentes de parsitos circulantes,
disponibles para la transmisin en el medio domstico y elevando el riesgo de transmisin
al humano (Gurtler R y col., 1996). Los animales de corral: bovinos, ovinos, caprinos,
equinos y porcinos, no han sido hallados infectados por T. cruzi en
los pocos casos estudiados (Ruiz AM y col.,1985 a)

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Si bien la va de transmisin por el vector es la ms importante, existen otras como ser


transfusional, transplacentaria, por transplantes de rganos, por accidentes de laboratorio;
y con muy baja frecuencia la va digestiva y la va sexual.
La va transfusional es el mecanismo responsable del aumento de casos de infeccin
chagsica en zonas urbanas, siendo la causa de la contaminacin de los bancos de sangre
por donantes que desconocen su seropositividad (Wendel S, 1998). En la mayora de los
pases del Cono Sur las normas nacionales indican el uso de al menos dos tcnicas de
diagnstico para realizar un tamizaje serolgico de la sangre infectada por T. cruzi en los
bancos de sangre. En nuestro pas, desde 1998 el Ministerio de Salud realiza inspecciones
al respecto en bancos de sangre y servicios de hemoterapia pblicos y privados. Cerisola y
colaboradores verificaron que el riesgo de transfusin aumenta proporcionalmente con el
nmero de tranfusiones y que los parsitos permanecen viables hasta 18 das en las
condiciones de almacenamiento de la sangre en los bancos de sangre (Cerisola JA y col.,
1972 b).
La transmisin congnita o connatal es muy poco frecuente y puede producirse con alta o
baja parasitemia tanto en forma intrauterina como en el momento del parto (Bittecourt A,
1988). En evaluaciones realizadas durante 1998 en nuestro pas se determin una tasa de
transmisin vertical del 0.9% (OPS, 1999). El mecanismo por el cual algunos nios de
madres con infeccin chagsica se infectan esta an bajo estudio.
La transmisin del parsito por va del transplante de rganos favorece la infeccin dada la
inmunosupresin teraputica a la que es sometido el receptor (Jost L y col., 1977). En
nuestro pas se observ que la reactivacin de la infeccin en receptores chagsicos
renales fue del 21% y la transmisin de la infeccin a travs del donante en receptores no
chagsicos fue del 18.7% (Riarte A y col., 1999). Por otro lado, el seguimiento de pacientes
chagsicos crnicos sometidos a transplante de mdula sea por un periodo de siete aos,
mostr un ndice de reactivacin de la infeccin del 2% con un 20% de parasitemias
positivas (Dictar M y col., 1998).
La posibilidad de que la infeccin chagsica se produzca por va bucogastroentrica esta
documentada por varios autores. Los mecanismos de entrada observados son la ingestin
de carne de animales infectados o de alimentos contaminados con secreciones de los
mismos (Wood F, 1942; Shikanai-Yasuda M y col., 1991). La posibilidad de transmisin de
la infeccin por la ingestin de leche materna es de muy baja frecuencia y es considerada
de bajo riesgo.

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La transmisin sexual puede considerarse posible, ya que se ha encontrado el parsito en


sangre menstrual (Jorg M y col., 1980).
Por ltimo y con menor frecuencia la transmisin tambin puede ocurrir accidentalmente
por la manipulacin de material de laboratorio, animales parasitados, cultivo de tejidos
infectados, insectos transmisores, etc.

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Diagnstico
En el caso de la transmisin vectorial, uno de los instrumentos de la vigilancia
entomolgica, es el
seguimiento serolgico de los nios desde el comienzo del programa, poniendo en
evidencia nuevas infecciones por la conversin serolgica. La deteccin de la madre
chagsica y el seguimiento de su hijo tambin se realiza por mtodos de diagnstico
serolgico y parasitolgico. El control obligado de la sangre donada para transfusiones, se
realiza en nuestro pas y en los pases del Cono Sur de Amrica, por Los mtodos de
diagnstico de laboratorio se basan en procedimientos que ponen en evidencia al parsito
(parasitolgicos) o que permiten detectar anticuerpos contra el mismo (serolgicos). Si bien
la demostracin de la presencia del parsito es el diagnstico indiscutible de infeccin
chagsica, slo es posible practicarlo con xito en la etapa aguda de la enfermedad, pues
en las etapas indeterminada y crnica, su sensibilidad es baja.

Mtodos Parasitolgicos
La demostracin del parsito en la sangre perifrica puede hacerse simplemente
observando una gota de sangre fresca entre porta y cubreobjeto o en gota gruesa. Los
extendidos se dividen en finos y gruesos, viendo en el extendido fino los Hemates y en el
extendido grueso las restantes clulas. La coloracin que se utiliza para ver a los
tripanosomas es Giemsa, y tambin existen coloraciones especiales en algunos casos.
Este sencillo mtodo permite diagnosticar aproximadamente la mitad de enfermos con
un cuadro agudo de enfermedad de Chagas. Sin embargo, algunos procedimientos
que concentran previamente los parsitos logran una mayor sensibilidad diagnstica.
Entre ellos, el mtodo de Strout es el ms prctico y se basa en la observacin
microscpica del sedimento de
la sangre coagulada centrifugada en su totalidad.
Adems de estos mtodos de bsqueda microscpica directa del parsito en la sangre,
se emplean como mtodos de enriquecimiento el xenodiagnstico y el hemocultivo.
El xenodiagnstico es un mtodo para detectar la presencia de T.cruzi en sangre
perifrica; aumentando la probabilidad de encontrar al parsito a travs del insecto
vector. El mtodo consiste en alimentar al vector sobre el paciente (insectos en el

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2do y 3er estadio ninfal), permitiendo que el parsito se multiplique en la luz de el


intestino del insecto. Luego de un perodo fijo (30 y 60 das), se observan las heces
al microscopio buscando la presencia de parsitos. La sensibilidad del mtodo es del 100%
en los casos agudos y del 50% en los casos crnicos de infeccin.
El hemocultivo es otro mtodo de diagnstico parasitolgico, sin embargo, aunque el
parsito se desarrolla bien en diversos medios de cultivo, la sensibilidad de este mtodo es
buena en casos agudos y congnitos
pero insuficiente en los casos crnicos.
La deteccin del ADN de T. cruzi por PCR, es una tcnica de amplificacin de material
gentico que involucra
enzimas termorresistentes, nucletidos y secuencias de ADN especficas. Esta tcnica
permite la replicacin de ADN in vitro e involucra la sntesis de millones de copias de
unsegmento especfico del mismo. La reaccin de PCR asegura una sensibilidad superior
a cualquier tcnica parasitolgica, ya que posibilita la deteccin de la infeccin, aun
habiendo slo un 2 % del ADN de un nico organismo, en una muestra sangunea de un
paciente infectado. Un ADN muy repetitivo, el ADN nuclear satelital, puede ser amplificado
con mucha sensibilidad mediante los primers que flanquean una secuencia de 195 bases.

Mtodos inmunoserolgicos
El inmunodiagnstico de la enfermedad de Chagas puede efectuarse con dos criterios
distintos: a) tamizaje o descarte, para identificar fcilmente la infeccin, en sangre de
donantes para transfusiones o en epidemiologa; con tcnicas rpidas y muy sensibles o b)
de manera ms precisa, cuando as lo exijan las necesidades clnicas o epidemiolgicas.
En la actualidad las tcnicas de eleccin en la mayora de los laboratorios son la
hemoaglutinacin, la inmunofluorescencia indirecta, las tcnicas inmunoenzimticas.
Reaccin de Hemoaglutinacin Indirecta Cuantitativa (HAI): La prueba se hace en
policubetas con fondo en U, con diluciones seriadas con un factor de dos del suero del
paciente en presencia de hemates de cordero o ave sensibilizados con antgenos
delmparsito. La reactividad se visualiza como un manto de aglutinacin del 50-100% en el
fondo del pocillo. Esta tcnica tiene una sensibilidad de alrededor del 98 % y una
especificidad variable. Ha sido evaluado en varios centros referenciales con paneles de
gran nmero de sueros.

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Reaccin de inmunofluorescencia indirecta (IFI): El antgeno consiste en epimastigotes


de cultivos axnicos tratados con formol y fijados a lminas de vidrio, pudiendo
conservarse por varios meses, a - 20C. La formacin de complejos Ag-Ac con diluciones
seriadas de suero, se revela con anti-Inmunoglobulina G humana marcada con
fluorescena. La prueba tiene alta sensibilidad (98 - 99 %) y especificidad.
Ensayo inmunoenzimatico (ELISA): Esta tcnica se basa en la adsorcin pasiva del
antgeno a una fase slida (superficie de poliestireno). En una segunda etapa, el antgeno
adsorbido es puesto en contacto con una dilucin apropiada de suero. Luego se adiciona
antigamaglobulina humana unida a una enzima (conjugado) y por ltimo se agrega el
sustrato enzimtico correspondiente, lo que dar una coloracin caracterstica. El color es
directamente proporcional a la cantidad de conjugado ligado al complejo antgenoanticuerpo, y en consecuencia a la concentracin de anticuerpos presentes en la muestra.
Existen varias pruebas de ELISA para la deteccin de anticuerpos contra T. cruzi que
emplean diferentes antgenos que van desde mezclas proteicas hasta grupos de molculas
sintticas, o protenas recombinantes.

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Tratamiento

El tratamiento etiolgico se indica con urgencia en la fase aguda y la reactivacin


(inmunosupresin). En ese momento las tasas de curacin parasitolgicos son casi 100% y
que disminuyen con la mayor duracin de la infeccin / enfermedad. A la edad ms joven la
prevalencia de efectos secundarios tambin es menor. Se indica el tratamiento etiolgico,
as, en la infeccin congnita y la fase crnica temprana. En los adultos, especialmente
aquellos con forma indeterminado, el tratamiento etiolgico debe ser ofrecido, pero hay que
considerar el equilibrio de los beneficios potenciales (para prevenir o retrasar el desarrollo
de la enfermedad de Chagas) en contra de un programa de tratamiento a largo junto con
efectos secundarios frecuentes. Los dos frmacos disponibles son el benznidazol y el
nifurtimox. Principales contraindicaciones son el embarazo y la insuficiencia renal o
heptica. Especialmente con nifurtimox, tambin trastornos psiquitricos o neuronal (como
convulsiones).1

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Bibliografa

Sntesis de la Gua de Diagnstico y de tratamiento de pacientes con


Enfermedad de Chagas.

LA ENFERMEDAD DE CHAGAS,Andrs Mariano Ruiz Jacqueline Ba Gabriela


Andrea Garca Instituto Nacional de Parasitologa Dr. Mario Fatala Chaben
Avda. Paseo Coln 568, 1063 Buenos Aires, Argentina

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