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TERCERA ED!CJON

Roberto Arenas Cuzman

Profesor de Dermatologfa y Micologia Secretaria de Salud Universidad Nacional Autonoma de Mexico

Director editorial: Dr. Marco Antonio Tovar Sosa Editor sponsor: Camilo Heras Martinez

Supervisor de edicion: Ansberto Horacia Contreras Colfn Composicion y [ormacion: Arturo Rocha Hernandez Supervisora de produccion: Angela Salas Cafiada

Diseiio de portada: Blackrype

NOTA

La rnecicina es una ciencia en constants desarrollo, Conlorrne surjan nuevos conoclmlentcs, sa recuerlran camblos de la .erapeutica. EI (los) autones) y los editores se han esforzado para que los cuaoros de dosilicaci6n meoicarnentosa sean prsosos y acordes can 10 esiablecido en la fecha de publicacion. Sin embargo, ants los posibres errares humancs y cambios en la rneotclna, ni .os eoitores ni cualquier otra persona que haya participado en la preparacion de la obra garantizan cue ls intermaclon contenida en ella sea precisa a completa, tampoco son responsables de errores U omisiones, ni de los resultados que con Gicha informacion se obtenqan, Convendrfa recurrir a otras tuantes de datos, par ejemplo, y de manera particular, habra que consuitar la hoja informativa que S8 adjUl'la can cada medicamenlo, pa~", lenercertez8 de que la informacion de esta abra es creclsav no se han lntro-

dUo cido c;~bk;s. Sfl I.a d.O~iS recornendada ('. et, Iss contralnolcacionss ~sra 'su ~d:n~!l~Etf~~tCWL' E~!~ .. ' I es de particular importancia can respectc a farmacos nuevas 0 de usa no Irecuenre. Tamolen debet£: consultarse a los !aboratorios para reeabar informacion sabre los valores norm ales.

MICOLOGlA II'IEDICA ILUSTRA,DA

Prohibida la reproduccion total 0 parcial de esta obra, par cualquier medio, sin autorizaci6n escrita del editor.

~ McGraw-Hili rrJlliIlnteramericana

DERECHOS RESERVADOS © 2008, respecto a la tercera edici6n en espsfiol por, McGRAW-lllLL INTERA11ERICANA EDITORE;S, SA de CV

A subsidiary of the McGmw-Hlli Companies, Inc.

Prolongaci6n Paseo de la Ref 01111 a 1615': Torre A, Piso 17 CoL Desarrollo Santa Fe

Delegac.on Alvaro Obregon

C P. 01376, Mexico, D. E

Miembro de Ia Camara Nacional de la Industria Editorial Mexicans. Reg. num.736

ISBN-13: 978-970-10-6567-9 ISBN-10: 970-10-6567-0

l234567390 Impreso en Mexico

09765432108 Primed in Korea

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Contcnido

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1. Historia de fa micologia medica, 1

Auxoncgrama y zirnograrna, 48 Estudio de las necesidades

vitaminicas, 49

Sfntesis de ureasa, 50

Inoculaci6n experimental, 50 Reacciones inmunologicas, 51 Pruebas de sensibilidad a farrr.acos, 52 Aislarniento del bongo, S3 Identificacion de los hongos, 54 Preservacion y conservacion de .

cultivos, S4

Otros t.ipos de microscopia, 55 Biologla molecular en rnicologia medica, 55

Riesgo bio16gico, 59 Mecidas de seguridad, 59

Prefacio de la tercera edici6n, ix Prefacio de la segunda edicion, xi 'Pro/ago d~ hI prlrtign.ci.·o-;rlJc.i(il), , xiii

Secci6n I

ASPECTOS GENERALES

2. Generalidades, 9 Introducci6n, 9 Actinornicetos, 9 Bongos, 11 Micosis, 15

3. Hongos, 17

Caracteristicas fundamentales, 17 Talo, 18

Estructura, 20

Necesidades fisiologicas, 22 Reproducci6n, 23

Secci6n II

MICaSIS SUPERFICIALES

4, Taxonomla y cIasificaci6n, 34 Clasificacion general de los hongos, 35 Controversias taxon6micas, 37

6. Dermatofitosis, 61 Datos de laboratorio, 88

7. Pitiriasis versicolor, 95

5, Diagnostico de lab oratorio, 40 Requisites para un laboratoric de

rnicologta, 40

Tecnicas y rnetodos, 40 Estudio con luz de Wood, 40 Recolecci6n de muestras, 40 Cultivo, 47

8.'Pieo·ras, 106

Cuadra chnico, 108 Estudio mico16gico, 109

Infecciones par Blastoschizomyces capitatus, III

9. Tina negra, 113

v

vi • Contenido

10. Oculornicosis, 118

11. Otomicosis, 123

Secci6n III

MICOSIS SUBCUTANEAS

12. Micetorna, 127

Esporotricosis, 149

14. Cromoblastomicosis, 161

15. Lobomicosis, 174

Secci6n IV

MICOSIS SISTEMJCAS

16. Coccidioidomicosis, 179

17. Histoplasmosis, 190

18. Paracoccidioidomicosis, 200

19. Blastomicosis, 209

Secci6n V

M!COSIS POR OPORTUNISTAS

20. Candidosis, 218

Infecciones por Rhodotorula, 237

21. Criptccocosis, 239

22. Zigomicosis, 247 Mucormicosis, 247 Entomoftoromicosis, 257

23. Aspergilosis, 265

Seccion VI

ENFERMEDADES POR ACTINOMICETOS Y BACTERIAS

24. Actinomicosis, 278

25. Nocardiosis, 286

26. Botriomicosis, 292

27. Eritrasma, 296

28. Tr icomicosis axilar, 300

29. Querat6lisis punteada, 303 Dermatofilosis, estreptotricosis

Seccion VII MICaSIS RARAS

30. Rinosporidiosis, 310

31. Hialohifomicosis

y feohifomicosis, 315 Hialohifomicosis, 315 Infecciones por Rhodotorula, Geotrichum, Trichosporon y basidiornicetos, 316

B asidiom.cosis, 318 Adiaspiromicosis, 318 Pseudallescheriasis, 320 Peniciliosis, 321

Infecciones por Fusarium, 323 Infecciones par Pythium

insidiosum, 326 Feohifomicosis, 327

Infecciones por Scytalidium, 331 Algunos hcngos contarninaates en el

laboratorio, 333

32. Prototccosis y neumocistosis, 338 Prototecosis, 338

Neumocistosis, 340

Secci6n VIII

CULTIVOS, TINCIONES, ANTIMICOTICOS

33. Medios de cultivo, 343 Clasicos, 343

Otros medics de cultivo, 344

34. Tinciones, reactivos, colorantes y formulas diversas, 351

Tecnicas de tincion, 351 ,l:Zeacdvos y colorantcs, 354 Formulas diversas, 356

Medics de proteccion contra los

acaros, 356

Pegamentos para sellar larninillas, 357

35. Antimicoticos, 358 Interacciones, 359 Antirnic6ticos clasicos, 359

Contenido II vii

Antibioticos polienicos, 363 Griseofulvina, 367 Imidazoles (azoles), 368 Alilarninas, 317 Ciclopiroxolarnina, 378 Amorolfina, 379 Butenafina, 379

Nuevos antimicoticos, 379 Antirnicotico id6neo, 383

Apendices

A. Guia de productos cornerciales antimic6ticos y contra actinomicetos, 385

B. Closario, 393

[ndice, 401

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ELI. esta nueva edicion ell 2008 se presenta 10 eseaeial y prictlcQ deb raieologla actaal. Se lllic],;JJ 'COl] los da~* ili~~OODOO EriI<lS scbresalientes )' s~ dau gfl.L"1,e{a!i.61a:dt.~ de lees lIcEmomi.ce:m$, ~Q.S bongos y las micosis.

Se analizan las carscteristicas fnndamentales de. los bongos, su e~tflLctlJTJ., fiSlo]ogia y reproduceion; se sim.pJillcan al mb::i:m:o los d,atos basieos y fundamentales de la mico~ugill y se presenrasesquemas de la morfologfa micresc6pica y las formas de repeeduccion.

Se abordan las micosis s~pemdilles, subcutaneas y tisr6r.rucM, tarnb.itn ]3$ causadas por hoagosopnrtneistas 'j las llamadas sendomicosis preducidas POrn" actiaomicesos 'i b .. crerias, as~ como medicamencos antimiconcos, medics de cultivo, tecnicasde tincion, reactives, co]oran~;e5, Y al final se presenra un glosano.

La informacion en cada capItulo ha sido c~~d~doosaiJlli,FJ:~ sistematizada: sinenimie, defi-

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!JLu::mn, datos epidemiclcgicos, etioparogenia, cusdro clinico, eswdio micelogico, datos histoparol6giJcocs, dak)® I(!~ labORl~Drio y ole biologia m.o~cc~tl8!J, diagnostic(J (ijfe!!"encia]. ~llLtamiento y prcm.o1ltico.

El gran apoyo iconograftco hace de la obra un libso snmeznente ~til I!<:i'~ Iift:~ie.fi se .~~ni.c;ia en el estndlio de 10l~ hong;ot!i';·eI esw.Jiante de medicina, de biolog[1li (I qmlF.lrllc:a, asf cernopsra el medico geaeral 0 de ana especiahdad,

_ Sec ilustra [a obra con dibujos de linea de los h{lngo~ (I de sus forrnas de reproduccion. algoritmos y mapas de clisuibt:iQ6n de las micosis,

Hay una biMiografi"a. bas~Cfl,8Jsf eomo refereaeias recientes a COlI@il tema La Sfuli~sis de .os textos, las figuras en color y los cuadros, hacen de ~S~il libro una obra obIigatori.3. para el interes<ldo en aprender Ia.micologia medica de manera ~dla y rapida-

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El diagn6stico clinico de las micosis se ha consideradosencillo, tanto para el medico general como para el especialisza; sin embargo, en Ia actualidad en pacientes inmunocomprometidos 1a presencia de sintomas respiratorios a manifestaciones en Ia piel tan variadas como descamacion, n6dulos a lesiones ulceradas pueden ser la expresion de una micosis localizada osisternica .. En pacientes con leUCC'1.1_ia en Europa se han observado cefunciones por micosis en 12 a ~6% (Eur J Clin Microbial Infect Dis 1988; 153:624- 8). Por eso se deben utilizar en la cllnica diaria las tecnicas del laboratorio de micologfa, pew de una manera racional y prrictica, pues much as veces un simple exarnen directo, pOI ejemplo ante sospecha de onicomicosis, da resultados benefices a largo plazo, tanto para el manejo del paciente como para evitarle un gasto innecesario.

Las micosis superficiales en ocasiones pasan inadvertidas durante mucho tiempo, debido a 511 escasa sintomatologia a pocas rnanifestaciones clinicas, como las infecciones subclinicas de tinea capitis 0 una tina de los pies; por otra parte las micosis pueden ser diseminadas 0 graves e incluso llevar a la muerte del paciente, especialmente en SIDA: P jirovecii 32%, candidosis 31.10/0, criptococosis 29%, e histoplasmosis 9.6% (Rev Iberoarner MicoI1998;l5:633-5).

Los hongos pueden ser rnohos 0 levaduras, pero muchos se cornportan como dimorfos, especialmente si ocasionan micosis sistemicas:

La forma saprofitica se reproduce en las cultivos y esc nos permite la clasificacion precisa de la especie, y de esta rnanera conocer el grado de patcgenicidad del agente causal. Sin embargo casi siernpre se identifican en los tejidos en sus Iormas parasitarias, ya sea en el examen directo a en los estudios histologicos, 10 que generalmente es definitive para establecer el diagn6stico y un adecuado tratarniento.

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En la presente edici6n se trato nuevarnente de compacter 10 esencial y io practice de la rnicologfa actual. Se presentan los datos historicos m5s sobresalientes y se dan generalidades de los actinomicetos, los bongos y las micosis. Se describen las caractensticas fundarnentales de los hongos, su estrucrura, fisiologfa y reproduc-

': 0i6i1; se siniplif,c~J:;'.:~X maximo 10" datos basicos y fundamentales de la micologia y se incluyen esquemas de Ia morfologfa microscopica y las forrnas de reproducci6n.

Se abordan las rnicosis superficiales, subcutaneas y sisternicas, asf como las causadas par bongos oporrunistas y las llamadas seudomicosis provocadas par actinomicetos y bacterias, asf como los medicamentos antirnicoticos, medias de cultivo, tecnicas de tincion, reactivos, cclorantes y al final se presenta un glosario.

La informacion en cada capitulo ha sido cuirladosamente sistematizada: sinonimia, definicion, datos epiderniologicos, etiopatcgenia, cuadro clfnico, estudio micologico, datos histopatol6gicos, datos de laboratorio y de biologfa molecular, diagnostico diferencial, tratamieato y pron6stico; todos los capttulos cuentan con bibliograffa disponible y actualizada,

Dentro de cada capitulo se incluyen fotograHas en blanco y negro, dibujos de lfnea, asi COillO cuadros, diagramas y algoritmos. Las laminas en color cornprenden todas las micosis descritas; cuando es necesario se muestran diferentes aspectos clfnicos de la misrna enfermedad, Tambien en color se ilustran los cultivos y estudios microsc6picos de los hongos. E1 gran apoyo iconografico hace de la obra un libra sumarnente iitil para quien se inicia en e1 estudio de [as bongos, el estudiante de medicina, de biologia o de qufmica, asf como para el medico general 0 de otra especialidad. Ellenguaje es sencillo y la informacion se complernenra con esquernas y

xi

8.. sus agentes causales. Esto tambien se observe toxicas. enmicosis muy 'conocidas y faciles de diagnos-

bear como pitiriasis versicolor, ahora se conocen

siete especies de Malasseria y Ia denominacion

de Pityrosporum. pertenece al pasado.

xii • Prefacio de la segunda edicion

dibujos asf como can referencias cruzadas en las fotograflas clfnicas y los estudios micologicos.

La micologia ha tomado algunas facetas diferentes en los ultimos afios, primero per el incremento en el ntimero de enfennos can micosis, gue es paralelo al aurnento de estados de inmunodepresion, como son los trasplantes de 6rganos (10 a 30%) 0 el SIDA (Transplantation 1983;36:259· 67), y It-ego can la aparici6n de nuevas pat6genos oportunistas como Scytalidium sp., Trichosporon sp., Fusarium sp .. Bipolaris sp. y Penicillium marneffei. Se podrfa decir que poca arencion se ha dado a las rnicosis de paises tropicales como Ia esporotricosis y cromoblastomicosis y que pocas modificaciones existen; sin embargo, hay muchos cambios en terminologia 0 raxonomfa aplicables

POl' citra parte se desarrollan otras areas como los estudios serologicos de anti cuerpos 0 la determinacion de antigenos, y las nuevas teenicas de biologfa molecular gue perrniten hacer el diagnostico filogenetico de la enfermedad pero tambien conocer la epiderniologfa de las micosis, Por ejemplo, Candida puede presentar cambios fenotipicos que tienen una implicacion en el aurnento de su patogenicidad ° en su resistencia a los antifiingicos.

Par desgracia el armamentaria terapeutico es lrmitado y de costa elevado, 10 que .obliga a utilizar racionalmente los antimicoticos y a precisar la naturaleza del diagnostico, siernpre con la mente abierta a los nuevas desarrollos de moleculas antifungicas mas efectivas y menos

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Roberto Arenas

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Pr¢lpgo'. qe la Rrim.~ra ediciop':,

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Durante los ultimos decenios la micologfa medica ha mostrado avances considerables en todo el mundo. Este auge se explica por los progresos de la biologia tras la Segunda Guerra MundiaI. Tarnbien ha contribuido la aparicion de enferrnedades per hongos llamados "oportunistas" debido a la gran difusion de tratarnientos con an'ibioticos de -arnplio espectro Y COlt _ rnedica.;· "'A mentos nuevas como los corticosteroides 0 los an.imicoticos.

Asimismo, cl empleo de tecnicas medicas novedosas en el medio hospitalario ha favorecido el surgimiento de micosis calificadas como yatrogenas 0 intranosccomiales. En el trans CUIso de los iiltimos afios la aparicion del SlDA y SLI rapid a diserninacion han contribuido a multiplicar, debido ala inmunodeficiencia, e1 mimero de estas temibles micosis. A las micosis clasicas, bien estudiadas ell los decenios de 1950 y 1960 se han agregado estas micosis oportunistas, cuyos hongos causales pueden ser muy variados, Entre estos ultimos algunos ya eran patogenos conocidos como Candida, Mucor y Aspergillus; en cambio, otros, que se consideraban inofensivos, han revel ado actividad pat6gena a veces extraordinaria en las condiciones particulares del oportunisrno .. De heche, bajo ciertas circunstancias todo hongo capaz de desarrollarse a la temperatura del cuerpo humane podria originar micosis mas 0 rnenos graves. Por ende, el conocimiento del especialista en rnicologfa medica no debe lirnitarse a aJgunas decenas de hongos clasificados en 1950 como patogenos para el ser humane, sino extenderse a gran cantidad de generos y especies ftingicas, de morfolcgia y fisiologfa muy variadas. El campo de esturlio se hace inmenso y obliga al medico 0 al biologo a adquirir conocimientos completes sabre micologia general.

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La fonnaci6n de micologos medicos pro fesionales conileva ensefianza muy especializada, en la cual s'e utilizan obras que van del tratado de micologia fundamental ala rnonograffa, pasando por los rnanuales de biologia y los libros de informacion medica. Sin embargo, es importante que el rnirnero mas grande po sible de medicos, vet;:;rillad~:isy biologos tenga acceso it esta ciencia para que sean capaees de ponerla en practica can la frecuencia que se necesita. De estes conocimientos depende a menudo un diagnostico correcto y un tratarniento eficaz, de ahf que sea rnuy titil proporcionar a estes profesionales libros conciscs y claros y al mismo tiernpo 10 mas completes posible. Tales obras tam bien pueden utilizarse para la ensefianza universitaria, Es cierto que existe este tipo de libros, pero estan disponibles sobre todo en ingles, La obra que hoy nos presenta el doctor Roberto Arenas es de ia categona que acabamos de definir y se ofrece a-Ios lectores de lengua castellana, complementada ademas con excelentes ilustraciones clinicas y micol6gicas.

Con base err su formaci6n y su trayectoria prcfesional, Roberto Arenas es el indicado para escribir este libra. Es discfpulo de la gran escuela mexicana de dermatologfa, uno de los fares de la prestigiada escuela latinoamericana. Adernas de la excelente formaci6n en micologia medica que ha recibido en eI Centro Dermatologico Pascua, en el laboratorio del doctor Pedro Lavalle, Roberto Arenas ba querido confrontar sus conocirnientos con las fuentes europeas, donde la tradicion en micologfa medica esta mas orientada a los hongos que a la medicine. Para e310 sigui6 en Parts el Curso Superior de Micologfa Medica del Institute Pasteur en 1980 y efectuo una estancia de investigacion de un ano en mi laboratorio. Durante su pcrmanencia en Francia

xiii

xiv. Pr61ogo de la primera edici6n

aprendio a conocer mejor el conjunto de bongos patogenos y de tecnicas modernas de diagnostico micol6gico; por otro lado, su estadia favorecio el intercarnbio de sus experiencias adquiridas en Mexico. Recibimos con el mas grande in teres el libro de micologia que presenta Roberto Arenas. Deseamos que tenga el mismo exito que su rnag-

nifica obra: Dermatologia. Atlas, diagnostico y trctamiento ; publicada en 1987.

D,: Francois Mariat Professeur a l'Institut Pasteur, Hon.

Miembro Honorario de Ia Academia Nacional de Medicina de Mexico

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La presente obra es un libro que trata de compactar 10 esencial y 10 practicode la micologia actual, En los capftulos introductorios se pres entan de manera resurnida los datos historicos mas sobresalientes y se dan generalidades de los actinornicetos, los hongos y las micosis.

Dado que 1a identificac~6Ildel_h?ngoes . trascendental en el Jiagi16stic~j . iJ';-iq)h"gi(:~:~· 'se . ha puesto particular in teres en las caracteristicas fundarnentales de los hongos, su estructura, fisiologfa y reproducci6n; se lleva de la mana a1 lector al simplificar al maximo los datos basicos y fundarnentales de la micolog.a y se presentan esquernas de la morfologfa microscopies y las formas de reproducci6n.

Se describen las micosis superficiales, subcutaneas y sisternicas, asf como las causadas por hongos oportunistas y las seudornicosis por actinornicetos y bacterias. La parte final se ha reservado para antimicoticos, medias de cultivo, tecnicas de tincion, asf como reactivos, colorantes y f6rmulas divers as que se usan en la practica; par ultimo se presenta un glosario.

La informacion en cada capitulo ha sido cuidadosamente sistematizada: sinonimia, definicion, datos epiderniologicns, etiopatogenia, cuadro clfnico, estudio mico16gico, datos histopato16gicos, datos de laboratorio, diagn6stico diferencial, tratamiento y pronostico: todos los capftulos cuentan con bibliografia seleccionada y actualizada,

Las laminas en color comprenden todas las micosis descritas; cuando es necesario se muestran diferentes aspectos clmicos de la misma enfermedad. Tarnbien en color se ilustran los cultivos y estudios microscopicos de los bongos. El gran apoyo iconografico hace de la obra un libra sumamente util para quien se inicia en el

estudio de los hongos. el estudiante de medicina, biologia, .quirnica, aSL como el medico general o de otra especialidad, El lenguaje es sencillo y Ii informacion se complernenta can esquemas y dibujos asi como can referencias cruzadas en las fotografias clinicas y los estudios micologicos. Todo ello perrnite una meier comprensi6n

de este arido campo de la medicina.

Den.ro de cada capitulo se aprovecha la guia que ofrecen las fotografias en blanco y negro, los dibujos de linea, asf como los cuadros, diagramas y algoritmos. En el apartado correspondiente, el Iector encontrara las laminas en color.

La mayor parte de las fotografias clmicas que ilustran este libro fueron tomadas personalmente por el au tor, entre los muchos pacientes que acuden a diario al Laboratorio de Micologia del Centro Derrnatol6gico Pascua y mas recientemente al Departamento de Dermatologfa y Micologta del Hospital General "Dr. Manuel Gea Gonzalez"; otras corresponden a enfermos estudiados conjuntamente can mis cornpafieros y algunas son una aportacion tanto de jovenes como de reconocidos dennat61ogos mexicanos a quienes agradezco infinitamente su participacion, muy en especial al profesor Fernando Latapi (qepd), rni maestro tutelar, can quien trabaje estrechamente durante 15 afios y con quien siempre me unieran fuertes lazes acadernicos y sentimentales y de quien tarnbien heredara UP. gran acervo iconografico; siempre 10 record are can afccto.

Algunas rnicosis, sobre to do las menos frecuentes en nuestro medio, son ilustradas con material intercambiado can el doctor William Marriott (qepd), el entrafiable amigo de los dermat61ogos mexicanos; algunas fueron proporcionadas por Roderick Hay joven y brill ante mic6logo Ingles de trayectoria internacional.

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xvi • Prefacio de la primers edici6n

En el aspecto fotomicrografico de los hongos recibi la invaluable ayuda de Monique Coutansson, y en el histopatologico, durante an as he recibido el apoyo y las ensefianzas de Josefa Novales y mas recientemente de Gisela Navarrete, Susana Ortega y Elisa Vega.

Me inicie en el estudio de las derrnatornicosis can el profesor Pedro Lavalle can guien sigo conservando gran amistad. Realice mis estudios formales en micologfa medica bajo Ja supervision del profesor Francois Mariat, a quien debo principalrnente la orientacion actual en rni vida profesional.

Asimismo fueror, muy valiosas las ensefianzas de los otros miernbros de su equipo: Segrerain, Drouhet, Dupont, Ravisse y De Bievre; tarnbien es de muy grato recuerdo mi estrecha relacion can Guy Badillet, uno de los mejores expertos europeos en dermatofitos.

Para 1a preparacion del manuscrito he tenide la fortuna de recibir el consejo editorial siernpre atinado del doctor Bernardo Rivera Munoz, a quien agradezco adernas 3U apoyo, entusiasmo y entrega. A todos muchas gracias.

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Roberto Arenas

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Se agradece la aportacion fotografica de:

Alexandro Bonifaz: Figs. 6-30, 10-2 y 16-8. Carlos Bonnet. Fig. 31-27.

Alba Barbon. Fig. 16-4.

Rosa fda. Calderon. Fig. 12-14. Lucia Castaneda. Fig. 15-4 .. ' Gu.u.da.iOlpe Chavez. Fig. 1.2-13. Roberto Cortes. Fig. 22-4.

Judith Dominguez; Figs. 13-8 y 13-1S. Luciano Dominguez. Figs. 1-11 y 24-2. Roberto Estrada. Figs. 7-3 y 7-9. Emesto Guillen. Fig. 22-3,

Roderick Hay. Figs. 8-5, 8-8, 25-3, 26-4, 31-7, 31-21 y 31-23. Roberto Herrera. Figs. 12-27,24-5 Y 29-5.

Guadalupe Ibarra. Fig. 20-22.

Rafael Isa Isa. Fig. 31-27.

Ricardo Jimenez. Fig. 29-2.

Fermin Jurado. Fig. 14-9.

Marcia Karam. Fig. 25-1.

Fernando La tap i (qepd). Figs. 12-3, 12-10, 12-22, 12-35,17-3, 17-4y25-2. Jose Llerena Gamboa. Fig. 31-22.

Francois Mariat. Fig. 22-11.

rVilliamMarriott (qepd). Figs. 1-7,19-2,19-3,19-5, 19-7A, 21-1, 30-3 y 30-4. Nassira Martinez de Larios. Fig. 23-3B.

David Moncada. Fig. 28-3.

Lourdes Morales. Figs. 12-10, 19-7,27-1. Gisela Navarrete. Fig. 12-14.

Iosefa Novales. Figs. 6-328 y 26-3.

Rocio Orozco. Figs. 20-14, 21-2, 21-8B Y 23-2. Susana Ortega. Fig. 5-2.

Francisco de Ovando. Figs. 7-6 y 7-7. Elvia perez. Fig. 13-16

Pierre Ravisse. Fig. 22-11.

JLllio Rodrigue: Vindas. Figs. 15-3 y 17-6, 31-18. Ram.on Rui: Maldonado. Figs. 22-12, 22-13 y 22-14. Rosalinda Sanchez Laparade. Fig. 13-5

Patricia SilChil. Figs. 12-37 y 14-3.

Jesus Valdes. Fig. 6-21.

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xviii • Agradecimientos

Rataporn Ungpakorn. Fig. 31-8. Patricia Valdes. Fig. 5-1. Antonio Zuniga. Fig. 31-22.

Silvio Alen{:ar Marques. Fig. 13-1.

Se agradece la supervision en la seccion de biolcgia molecular: Enrique Salas Tellez. Cap. 5 .

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Al Hospital General "Dr. Manuel Gea Gonzalez".

Ala Facultad de Medicina de Leon, Universidad de Guanajuato.

Ala Universidad Nacional Autonorna de Mexico.

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Los bongos, 0 las enfennedades que producen, se conocen desde Ia mas remota antiguedad; los griegos y los romanos describieron algunas de las manifestaciones clinicas de las derrnatofitosis, como el querion y la mentagra.

La micologia es la rarna de la microbiologfa que se desarrollo primero. Con el descubrimiento del microscopio (Antonj van Leeuwenhoek [1632-1723 J) en el siglo XVII, se inicio el estudio cientifico de los bongos microscopicos jm110 can el de otros microorganisrnos. En 1729, Pier H. Micheli publico investigaciones sobre bongos en su obra Nova plantarum; a el se debe el termino Aspergillus. El conocirniento de la relacion entre hongo y enfermedad precedio a la floreciente epoca bacterio16gica desarrollada par Robert Koch y Louis Pasteur.

La his tori a de la micologia medica comenz6 en 1835 con Agostino Bassi, de origen italiano y alumna de Lazzaro Spallanzani, el fundador de la biologia modema. Descubri6 que la muscardina del gusano de seda era producida por un hongo (Beauveria bassiana) (fig. 1-1). En 1838, el bo.anico y entornologo Victor Audouin confirmo estas observaciones y las publico en frances. En 1850,

Fressenius utilize pOI prirnera vez el terrnino "aspergilosis" para una de las primeras micosis reconocidas en seres humanos 0 animales, aunqlle desde 1815, Mayer y Emmert ya habfan descrito una infeccion en los pulmones de UD cuervo.

En 1837, Robert Rernak (fig. 1-2), judio de origen aleman, arrogante y dificil, descubri6 que la tina favica era causada por lin hongo al eual dio el nornbre de Achorion schoenleinii en honor a su maestro aleman Schonlein, No se le otorg6 eI credito correspondiente, pues hizo sus publieaciones en 1845, en 10 que se considera el primer tratado de micologfa. En 1839, Schonlein estudio el hongo del favus, aunque se sefiala que el habra sospechado su existencia desde 1827.

Par estas circunstancias, persisten las controversias acerca de quien es el fundador de la micologia derrnatologica.

En 1839, Bernhard Rudolph Conrad von Lagenbeck descubrio una Ievadurs en el algodcncillo, y en 1845 senalo la aetinornieosis en seres humanos.

En 1840, eI famoso dermat61ogo Alphee Cazenave observe una epidernia de tifia de la cabeza y propuso eI nornbre de "Herpes tonsu-

1

·2 II Seccf6r1 j ASPECtO~ generalC'5

_.':-'

Fig. '.1. l\90~tlno Eass.i (1793-1856), inic;iador de 1<1 mi(Qllo91~ m~k<l.

rans capiUitif' , quiza por Ia presencia eonconutante de lesiones <Inllililres de "Herpes cin::inC1ius," (Jean Louis Marc Alioen) ,

En 1841, David Gruby, un judie jeven y pobre, C:e Budapest, quien termino sus estudios de medlicma en Viene, a.is16 el bongo del favus y reprodcjo la enfermedad antes que Koch fcrmulara sus lJo.stohdos; tambi.en describio 19. tina microsponca y cuUiv.o Microrpon.jm audo,loImii; 1.0 detlonin6 asf por e] I:anOOiOI pe<q~lefio de las esporas y en hOM!' a Audouia. Plilblio6 Sus descubrimieruos en su Iibro Memoire .mr wlew!gtfmtion qUI cQl'lsrirue fa vraie utgne. Sus trabajos encontrarcn la resistencia natura]. del auge bacteriolegico susciradopor Pasteur, perc fueron apoyados por el eminente dermatologo Ernest Balin ell .1860. En 1842, iliuby (lig. 1- 3)1 presento el verdadero bongo del algodoncillo (muguet) Rille la Academic de Scienc~s, de Paris; instalo un consultorio Con gran eJOtto social al dedicarse 11 Ia medicioa y a, ]01. magia; entre su clientela se contaba <II Ci:!QP'Mil. LiS'll, George Sand y los Dumas, N klOca fue aceptado verdaderamente por los franceses y fue repudiado pOI 10$ .hUngal"ils.

Se ignorillon los trabajos de Rem<l..k: y Gruby, segerarneme pGF el aatisemitismo medico de loll e:poc.a; el ultimo fue rehsbili tado posreriormente per Sa1x)'uraud, quien 10 considero un dermani-

fig. 1-2. Robe~t Rem,al{ mn5·186.5~, corund.aJdlor de la mim!o.g.f1l m,rmatolo.gica.

logo mediocre, pero uncbservador precise en e.l microscopic; como pirlUl:ba de enD, estan los dibujos que se conservan en 100 archives de parasitologia d la Focu!M de NUdecine, de Paris.

En 1846, Carl Ferdinand Eichstedt encontro en las escamas de piti.rias.is versicolor un hongo qu e luego Robin Barno Mit It)Jponu'n ftufur y, en Hl98, Baillcn 10 clasifie» en el glfue:ro Malasse.VCl. En]874, LOULs Charles Malassez identifiw e~ "'c:hamplgnon de Ia pe.lade"; en 1884, Bizzozzero )0 encontre ell Pityri cuis simplex y Sabouraud le llamc Pityrosponmt.

En 18:53, Charles Robin publico e[ libra Histoire nar~reUe des vfglio.ll;' parosires, donde

Fig. 1-3. Da~'id Srui1Y :H! 10-1896), quien .. isl6 105 hong(l5 del f.illluS 'I del algocbnci!/o tl1luguet).

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compile los trabajos sabre derrnatofitosis Y SLl tratamiento topico, asf como 1a depilzcion M la tina de la cabeza; a el se debe la clasificacion de Oidium albicans (fig. 1-4).

En 1855, Kurchenmeister describio el primer case de mucormicosis, aunque este termino fue acufiado hasta 1885 par Paltauf Enla seguncla rm tad del siglo XIX, la rnicroscopia aplicada a la cIin.ica indujo a los cientificos de este periodo a buscar hongos en cualquier trastorno derrnatoIogico. Tambien era la moda mostrar en reuniones acadernicas lesiones micoticas causadas par autoinoculacion de material infectado mediante una tecnica ideada por Remak, quien fue el primero en sorneterse a este experimento con T schoenleinii; en 1862, Heinrich Koebner se inoculo favus y.pitiriasis vErs:icoTol:,,>

Uno deIos micolcgcsmaserfunentes del siglo XIX fue eI sabio frances Raymond Jacques Adrien Sabouraud; nacio en Nantes en 1864, y fue mrisico y escultor. En 1889, terrnino sus estudios de medicina en Paris y luego se especializo en derrnatologia con Emile Vidal y Emest Besnier. En 1890, 111ici6 el estudio sistematico de las dermatofitosis y en 1910 pu blico la enciclopeeli a Maladies du cuir chevelu; el tercer volurnen, "Les teignes" fue el primer manual de micologia dermatologica, considerado hoy como un c1<'18ico de la rnedicina y un modelo de la observaci6n ciennfica (fig, 1-5).

En esa epoca y en la posterior, proliferaron los sinonimos de los hongos; aumentaron de esta rnanera las especies, a tal grade que la nomenclatura se hizo rnuy diffcil y sobrevino la deca-

Fig. 1-4. Charles Robin, clasifico a Oidium alb/cans.

Historia de la rnicoloqta medica tl 3

Fig. '·S. Raymond Saooureud (1864-1938), padre de . 1C!,::rkqIQgfa rncderna.

den cia micologica, .al tiempo que brillaban los trabajos de Pasteur,

A finales del siglo XIX y principios del xx, se hicieron grandes descubrirnientos, 1:0 tanto en Europa sino en diferentes partes del mundo.

En 1860, Vandick Carter, en ia India, describio y acufio el termino "micetorna"; fue UIl gran medico que lucho porque se aceptara a mujeres en las escuelas de medicina (fig 1-6). En 1874, McQuestin, medico estadounidense, estudio los prirneros micetornas de America en Hermosillo, Sonora, Mexico. En 1876, Bollinger, en Europa, reconoci6 Ia acrinomicosis como enfermedad parasitaria, Ell 1877, Harz eneontr6 Actinomyces en la mandfbula de un buey y llamo Actinomyces bovis 21 grano.

Fig. '·6. vandlck Carter acuno ellermino mlcetorna.

4 • Secci6,1 I Aspectos generales

En 1833, Domenico Majocchi describio el granuloma tricofnico y se dedico a su estudio durante 40 afios, En 1889, Trevisan, en honor a Nocard, creo el genero Nocardia y, en 1890, Eppinger describio la nocardiosis en seres humanos, En 1892, Alejandro Posadas, estudiante de medicina, alumnodel patologo Robert Wernicke, describio en. Argentina el primer caso de coccidioidomicoais COIl motive> de sutesis recepcional (fig. 1- 7).

En 1894, Busse. y en 1895, Bnschke, describieron Ia criptococosis .. y en 1894, Caspar Gi1christ, en 18 zona de Chicago, hizo 10 mismo con la b1asto~cosis oorteamericana. En 18~6, Wright sefialo al hongo negro Madurella mycetomii como agente causal de micetoma.

En 1898, Benjamin So::he,nck, casi al termino J~ sus estudios de medicina en Rochester, Esta- . dos Unidos, definid la esporotricosis Y SU microorganismo causal. En 1900, Guillermo Seeber, tambien estudiante de meclicina en Argentina, describio la rinosporidiosis.

En 1903, De Beurman y Gougerot, ell Francia, efectuaron los estudios mas importantes sabre esporonicosis y, err 1912, publicarnn Les sporotrichoses, monograffa clssica basada en el esmdio de cerea de 200 cases (fig. 1-8). Es curioso que siendo los franceses quienes mas contribuyeron a1 conocimiento de esta micosis, no la observen en Ia actualidad y la consideren enfermedad de impor'acion.

En 1905, Samuel Taylor Darling, durante los prirneros trabsjos ell el Canal de Panama) describio 1a histoplasmosis y, en 1934) William

Fig. 1-7. ,:abeza de Domingo Escurra, primer paciente con coccidioidomicosls, estudiado par Alejandro Posadas en Argentina.

~ ..

Fig. 1-8. Profesor Gougerot, quien estudio la esporotricosis en Fr~.nr:ii:! ~ principios del ~.i'p'lfl xx,

De Monbreun cultivo el hongo, demostro su namraleza dimorfa y reprodujo 1a enfermedad de modo experimental.

En 1908, Lutz, en Brasil, informo el primer caso de patacoccidioidomicosis; a partir: de 1909, Adolfo Splendore, medico italiano, inicic el estndio del hongo y 10 clasifico como levadura. En 1928, Almeida fue quien delimit,o en definitiva esta enfermedad y so agente causal, Esta micosis es exclusiva de Latinoamerica y son los brasilefios j' el grnpo de Angela Restrepo, en Colombia, quienes mas han contribuido al conocimiento de esta enfermedad.

En 1911, Pedroso describe. en Sao Paulo la . cromomicosis (crornoblastomicosis) y, en 1915, Lane y Mediar llevaron a cabo 1 a primera publicacion en Boston.

En 1911, Cicero comumco los cuatro primefOS casos de rn.icetoma en Mexico. El mejor COIlOcimiento clinico de este padecimiento se debe a Latapi (fig. 1-9}, quien, ademas, inid6 e1 traramiento del actinemlcetoma COIl salfonas en 1947,

En 1916, Bruno Bloch, en $uiza, realize los primeros estudios sebre inmunclogta de las micosis, Ese mismo ana, Chalmers y Archivald precisaron las diferencias etiologicas de actinomicetos y eumicetos en e1 micetoma,

En 1920, Hopkins y Rhoda Benham, de la Columbia University, iniciaron el estudio dennfico de la nucologia rnedica. A Benham se le considera la fundadora de 1a micologja medica modtma (fig. 1-10) En 1923, Berkhout dio fm a

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J

Fig. 1·9. Doctor Fernando Latapt (190'2'1989). fundador de la Escuela Mexicana de Dermatologia.

muchos errores taxonomicos enlas levaduras al crear el genera Candida.

En 1931, Jorge Lobo, en Recife, Brasil, describio la enfermedad que hey lleva su nombre. En 1937 Dickson y Gifford estimularon e1 interes par la epidemiologfa y la eeologia de los hongos al encontrar modalidades benignas y ocultas de coeeidioidomicosis.

En 1947, Gonzalez Ochoa (fig. 1-11) y Soto Figueroa. en Mexico, aislaron un polisacarido de Sporothrix y contribuyeron mucho al diagn6stico y el estuc!io inmunologico de esta micosis, En 1950, Gonzalez Ochoa describio el primer caso de paracoccidioidornicosis en Mexico y demostro que e1 agente causal penetra por innalacion.

Fig. '-10. Rhoda Benham, f:.mdadora de la niicologfa medica moderna.

Hts.orta de la micologia medica _ 5

Fig. 1·11. Doctor Antonio Gonzalez Ochoa (1910- 19"84), iniciador de !a investigaci6n micol6gica en Mexico.

En 1958, Gentles, eD. Inglaterra, descubrid el uso de griseofulvina en derrnatofitosis e inicio un gran carnbio en 1a terapeuticz antimicotica.

Las bases de 1a nomenclatura actual fueron establecidas por Langeron (1930) tomando en cuenta los modos de reproduccion d~ los hongos; ademas, luch6 por el uso del lann en el lenguaje micologico. Sus ideas fueron seguidas par los estadounidenses, de tal manera que Norman Conant (fig. 1-12) y, sabre todo, Chester Emmons (1934) (fig. 1-13) reordenaron la nomenclatura, con 10 cual disrninuyeron las confusiones .. A pesar del gran desarrollo de la rnieologia y del descubrimiento de tantas enferrnedades, los microorganismos causales no fueron separados de las plantas sino hasta 1969, aiio en que Whittaker los coloc6 en el reino Fungae.

Fig. 1-12. Norman Conant, contrlbuyo a las bases de la nomenclatura.

IFclg.l-U.. ::l1ies,ler l~mn'1,on:s, una, Ha.dieij,)n <l;[l m~c(lIO'Ji~.

En los 11lhi.m@Safi06 D<:l4l hecho a:polJ;taciQ' nes importanres: Ajello, Albotnaz ([j.g: I- 14), BoreU~ Bad:il],e~, O:'l~tI]er, :OIl Sllva!l.a-caz (fig. li -15), D~ ,Bi6rre, DdaJc:.e~az. DifiDlI'J.W, ,])m!!l.het, Dupont, lrrew~k.i, Greer, Gordon, G,jC~, Grigori[l, Hay, Kaplall, Lo~1de..f, Mi'lii~lt> Ma.y.orga (:fig. 1~[6).. \1cGilomris 01g. 1-11), Negron:i{fig. W-li8"J., Panconesi, Rebell, Rest.rep() (fig. 1-l9), Rippon {fig. L20t San Blas, Se,gr-elailJJ, Th;pjj[l, Y1UI!b:l\eUsegheffiJ.l.,,\Vwmar.u y ZlIpMel" (fig, ], ·16), pO",!!; mencienar alguuos.

A r~tir d~] 940eD,lro en grsn :amge elestudiio de <l!l!ni:miic6tioos: y en ].@S li!itimos deceaies Se hanIO~i3Jd!o gran.des avaaees en illm.Ul'J.ologla, $@i:l.€; [00,0 en diagnnSitico, pero Ol,un despierta gl:l.'I:r1 m[~res el deseebrimiente (k n~e"l0\5 hOIligQ$ produetores de enfennedad 0 de FlU~":a$ €:FJ:f&~

_. __ ._-rr-.=____i:~ .. _--

Fig. 1-1:':;. Carlos Da 5ilva Lacaz y Anthar P .. dlllhOi-

GO:!'l~<l~\fIl\!:,. ~ •

~ medades par hongos conocidos, <'lSi como laos Ci(yntriib:u:ciofnlM ala 'er~clJemifj<logiill.,

L~micologiOi. eilM~i.oo l!a ~egU!]d9 ulla evolucIo[l sernejante a I<'l observada en OLIQS ,piflil" ses b:~moaimei.c~I1i{)'s,~s dedI", las 'fmftt!itl.ed~@,es per ]!Q[lgJo.s SIB lj:a:r: ~stU!d)~ado porvez primera en el campQ de ladermatologfa.

.EIl. ]9G5,Gol1z:l1e~ Umen.;'! p~!lemlt6 $ID. trabejo "Neces:i.dad de b:).!).d3l: en N~iCJo I.:m. dli.s, pensario escuelapara nmos tifioses"; mas tarde se f~[ld:6 ]a eseueta 'Doctor Balmis", Bn 1909, Cieero hablO sobre Ia tec:rica pera u'OItm: liii..as OOn rayos X; poco despues, en tiempcs de la Prirnera Giuerra MiWII.dial. se aba.OOon6 ~SHI! Il6cmca por ]8$ diJlclJJltade$ prura .. cOffilse,g;il~[, ]~sre,jfacolOOle-:> delapa!i.'flto. En 1917, el rnismo autor, basji[ldose en 10 dieho !po.!: S.aoouralUa, .mici6 los esroCiiol> p:n8i :pg;edS8!f la 0013]$ delaoeMo de t~iQ en 1:91 depilaeien t'<lnSiID.ria para ~ii1as d.e lao eabeza .. GOllZiiLez Hen-ej6n. ,enoOfik6 la dosis dpdma! de "7 m.gIkg de [le$oc@WO(l'a[ 'e®_ el 3,e4:\iciQ de. DeiffilMi\llQgh. del Hosp~tfll Gene~ de Mex]oo;

Fi g. 1.10. FltclIrno Za:pall~.~ de Arglelil,tilfla.. IR~bef;1 M~YOr.;J~.de Gua~@m1lL~ y Pe-dro Lalvalle, d:e MI€i;:,;~cQ'.

·.--- ~---------- .. --- ... - -_--

Fig. 1-17. Michael McGinnis, estudloso de dernatiaceos.

los datos aparecieron en su tesis recepcional en 19l9 En 1944, Latapi present6 estadisticas de .rt'~9 niU,o;:;4epilaQ'-')!{ lXI_rJ:em(tecnica; en 1956, . Aceves ernitid unmfonnesobre 1200 casos, Y Barba Rubio y perez Suarez, otro sabre 500.

Posteriormente vclvieron a utilizarse los rayos X y, en 1957, Saul reunio 600 casas.

Los decenios cle 1930 a 1960 constituyen Ia epoca mas fecunda de la micologia clinica en Mexico; Latapi y Lavalle, can la colaboraci6n de Novales y Ortiz, sefialaron las caracteristicas propias de rnuchas micosis cutaneas, tanto en el Servicio de Dermatologia del Hospital General de Mexico como en el Centro Dermato16gico Pascua; Gonzalez Ochoa inicio de rnanera formal Ia investigacion en el Laboratorio de Micologia del Instituto de Salubridad y Enfermedades Tropicales.

A partir de 1960, Francois Mariat (fig. 1-21) inicio una epoca sobresaliente de intercarnbio cientifico entre Mexico y ellnstituto Pasteur de Paris; colaboro en mas de 30 pubiicaciones can investigadores mexicanos y forme a 13 micologos de dicho pais.

His.oria de la rnkolcqla medica .. 7

Fi.g. 1-19. Angela Restrepo, de Colombia.

En Mexico son incontables los estudios

en e.lcampc de .Iamicologfa ctfrIm'ct6l6gk.i;.'6il"'" ".' 1964, Latapi y Ortiz publicaron muchos clatosal respecto en SD Historic de La dermatologia en

Mexico. Tambien se conocen datos de enferrne-

dades por hongos 0 de 12. aplicacion terapeutica

de estes ultimos par e1 C6dice de Martin de la

Cruz, manuscrito aztec a de 1552 conocido como "Libellus de medicinabulus inclorum herbis"

y que fue traducido allatin por Juan Badiano y devuelto por el Vaticano al pals en 1990; ese mis-

mo aiio-Macotela Ruiz publico algunos hechos bibliograficos sabre la historia de la micologfa

medica en Mexico.

Oscar Velasco Castrejon y Jorge Tay Zavala son autores de Introduccion Q la Micologia Medica, el primer libro que se escribio en Mexico sobre micologia en 1978. En 1990, aparecio

Fig. 1-18. Ricardo Negror.i, de Argentina, mic61ogo Fig. '-20. John'N. Rippon, parte de la micologfa rno-

conternpora ieo. derna

fig. ,-21. Doctor IFran~oi5. Mari~.t:. m~es~r'O de la 1W!.~yo· rl.~ d E ~05 mi calogos. mexican as.

M~'ct}'lo!!(t:l medica bas-ictl de Alexandre Bcnifaz (fig. 1-22) y, en 1995, Micologta medica.

Prr:.cedi1nien.:ws pcIJ-a d Diag~t0stico de Laborasorio de Rub6l l.cipe<: Mru-tincz, (1'1,&s. I·n y 1.::23), Luis Jarvie;r Mendel Tovar, Franclsca Hemsndea y Rocio Ca.5[.af:i:6n. Muchos a:HoIes han coerribcido III lm"lAlilecim.iento· de la mioQ lo.g[", rn,e~~a en MexicQ entre los q~U!e podemos destacar a: C(n~truas, Gonzal~<;-Mend.Qza, MaJYD.lga, Or02lOc, Padilla (~g. ].-:22j, SalinasCarmona, Sa61, Suchil, Taylor, Toriello y Welsh (Jlig.I-22).

Fig. 1-22. Primer grupo del Consenso Nacional de Micosis; se encuentra Oliverio Welsh, Ruben Lopez, ftlexand'O Bonlfaz, Ma. Carmen Padilla.

Fi g. 1·:23. Ruben L6p~z M~ r~Iff!Ei'z;, pr'Qteso,r ~j,e' l!TI11C~!I~· gfa, UNAM.

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Stork di <tMrco. r:lloolo8ica. I~.: editona!e. Micologja DerJnIIilo]e;g~c~ ]9S8:2f2.):9HOO

~nco~eri E, Difonzo ThI. Dru:W 'Ieignstondante alfe Trichepl-.]lies 1l1,lJ;;li!!!iint$: 5(1 ~lltDj &. imponanti !WFL~ iTl tvtieq.lQgi.a <:i;!ffil.~t(ll<jgi~.. Mio[](l.Q&ia :~f!m.!l:liQgkl ~9r;9J(2}:I'9-85.

ll:ipPQr. IV,'. Mi!ld!ie8~ ltrly.Cl~!Gl§Y, The pMJ~o~~ fulll;!;!an-d !be Ptl'b~llic p,A::(jilQm~t~s. 3rd ~<l. Phi1~elp~jja.

Sli.ltj.n.d~s. ]:9'gs: 1·-9. .

&~ret3JiD G, DLr<.1I!lb~l E. M8ri&. Ii 1J~~gruwruic de Uboo-ar.tJirrc en Mycciw~e lv1~dica;le.. P8ds~ Mn1Dinc:, 197~;7·,~6)V- 3:B.

TDrrt:~R.o&-i'Sl~ez Jlv.!. EI .bboi'al~cio de .fl.ti(;:Qlo'gf~ [['l6d!ica.

En' Torres-Rodriguez 1M, Palacio-Hernanz A, GuarroArtigas J. Negroni-Briz R. Pereiro-Miguens M red) 1v:fi:ologfa medica. Barcelona: Masson, 1993:11-22.

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INTRODUCCION

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Micoiogia es el estudio de los hongos. La micologia medica es una rama de la microbiologfa, interrelacionada con todas las especialidades de la medicina, y tiene par objeto estudiar las enfermedades producidas por hongos y los hongos que 11i8 prod ucen.

Los hongos se consideraron originalmente como plantas inferiores en 1a categoria de las cript6gamas y en la division (Phylum) Thallophitas. Desde 1969, Whittaker los coloc6 en el reino Fungae y agnp6 a los seres vivos en cinco reinos en la escala bio16gica: Monera, Protista, Fungae, Plantae y Anirnalia, En el reino Monera, se incluian las bacterias, los actinornicetos y algunas algas verdes y azules: en el reino PIGelSta, los protozoarios y el res to de las algas; en el Plantae, los vegetales superiores, y en el AnimaIia, los animales superiores. En 2002, Kendrick, aunando esto a otras tecnicas, la inmunologfa y la biclogia molecular, los clasifica hoy en dia en siete reinos: Archeabacteria, Eubacteria, Chromista, Protozoa, Fungi, Plantae y AnimaLia (fig. 2-1). Los dos primeros tienen celulas procariontes y tambien se Ilaman dominies, los demas son eucariontes,

ACTINOMICETOS

Se han estudiado tradicionalmente en micologia, pero en realidad constituyen un ~ rogeneo cleb_<l:_ctel~ql!e en algrinmornento de ~uoclode crecimiento desarrollan filamentos rarnificados que fragmentan en elementos cocoi-

des y/o bacilares, '

Los actinornicetos pat6genos se clasifican en procariontes de la division (Phylum): Schizomycota, clase: Eubacter y orden: Actinomice-

"tales. Este orden inc1uye los siguientes generos aerobics: ':: Corynebacterium, Mycobacterium, Nocardia, Rhodococcus, Cordona, Tsukamurella, Actinomadura. Streptomyces, y Dermatophilus, tarnbien anaerobios como Actinomyces, Arachnia y Rhotia. Por 10 general, son heterotrofos y utilizan gran variedad d.e, sustancias.como fuentes de nitrogeno y carbono.icreceu en gf'-10SZ1 con pH neutro 0 ligeramente alcalino. Dan un olor caracterfstico a las aguas y el suelo; tienen actividad en procesos de fertilizacion, producen antibioticos (Streptomyces), se utilizan como fuentes de vitaminas 0 desintegran diferentes sustancias y alirnentos.

Los actinomicetos son ~~~g~.1~9S, por 10 que se consideran ~pog1_,l;11_!§.t(J.S y agrupan una amplia gama de microorganismos que van desde los simples bacilos difteroides hasta variantes rniceliales cornplejas. Tienen caracteristicas de bacterias como~?u E~9.~~~~I1l~~·(~~~osde i-mIcra) (figS·.-2~2 y 2-3), ~,?!eo? p~o~'1.1tCiticQs COIl DNA distribuido libremente en la celula y

il;;"org-anTz;-clo;~--~ 'A~~!~O, p;:ese~~Ta-~'~-§~ia.Q::iTIW-Jriilcoen la pared celuli:r,-iio-coiltiene.I1 quitina ni_celuJ()§?c y sint~tizanli:~ina..a partir de acidodiaminopimelico; llegan a produciImice~-· [jo que sefragmenta perpendicula~;~te-Y'fr2g~ mentacion en elementos cocoides y bacilares. Practicarnente todos son' g!~l!l_P9_s_i!iYOS y son sensibles a antibi6ticos antibacterianos mas no a

a;lfiIUngicos-(~;p:;. 24 y 2S). ... ..... .

T()sactinornicetos se parecen a los hongos por su crecimiento atipico (fig. 2-2), presencia de tilameutos y ramificaciones en tejidos I) cultivos y produccion de enfermedades cronicas, Estes microorganismos producen filamentos finos y deIgados de 0.5 a 0.8 rnicras de diametro (rnicrosifonados), can rarnificaciones oicotornicas; algunos pueden generar micelio aereo (fig.

9

10 II Seccion I Aspectos qenerales

....... - .. -_ ... --

Eu~arial'lte

~~~ , ~

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I /

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"

Frocarionres ,

<. (,~--~-

c ". ·'·i"'~'.·'- '.' ~

: ':~'~-rL, _. I -~~ __

IFig. 2;-1. tos siete renos actuales.

2-2). Enmedios s6I:irlos, dan. Ingar a rnasas (lie filamenros y, f..II medics Ilqeidos, tielulen 11 formar racirnos 0 lobules COD ramificaciones dendriticas; producen esporas aisladas 0 en cadenas; pueden tener metabolisrno ox.idativo (aerobios) y enconzrarse en la naturaleza, 0 fermentative (aaaerobios) y hallarse como pane de ]<1 flora endogena en. cavidades de seres humanos Y otros vertebrados (cuadro 2-1).

iUgunas acrinomicetos anaerobies tienen ;o];ltere:s medic{i,. como Acri1'iomyces, BifoI.oOac. feT.iL~m, PrapiOHibacte,.i~lm (.4.radmia) y Rht)tin (fig. 2-4); y entre ]0$ aerobics Noca.rdia,. Actinoma.dlira, Sn'epwmyce$, Corynebacterillm y DermarophihtS (figs. 2-5 y 2-6).

. ,l:~15.a~:t9"rno~. = ~a~,o~r;_a.!~C~I!~E~~~den~' , mcetoma, nocardiosis, dermarofitosis 0 esuee-1',

totricosis, neuill6nfi.- at:erii~_ {?£.~J..~?~O ,., .' ~ Ee~.Qtolenl;J~es. ~cti~(J.ml~~~is~. eri~<~.~~ra: . W]i..sJS plantar, ~rwOOSlS malar y e~~~ ept·

di£m:rico. .

L~. d.a-Gifii..ca.cion)l' Ia nomenclatura han C~ID' biado macho en 101> ultimos afios; hay oontrover' sias en c:IHLn.t.O a. la separacion de alg-unos gel'ltros y especies; por ejemplo, el grupo.ficropDlysporaceae se encuentra simado entre Nocardia y Actinomyces; el gfbJ.po Frankiac:eae, const:itlIid.Q por simbioil.1re.s de ralces ,je ]egummosas que: fi jan n:i.tr6ge[lo atmosferico, preserta micelle fragmentado en bacteroides, pero no se hili cultivado

-----~----~.-- .. --.-----~~~

. ~.:~,.~ ....... :'

Filamentoa fungicos

Demaliaceo·

MlJIc:edirlikeo

Fig. 2·2. Talo (I micello de hongos y acttnomketos. {Modincada de Seqret ... in G, MaFi~, f, orouhet E. Diag Lab rAte Mea ,p';;llrlis: 1'.Mlloilne;, 119'79)

-

. ,

-

G~rll:::ralidC1de~ iJ 11

Fig. 2,-3. Filamentos actlnorniceticos (--1 mlcra) y funqiccs (+1 micra).

in vitro. Para evirar confusiones, se ha tratado de aplicar una taxonomfa numerica,

De interes medico y veterinario se consideran siete familias de aero bios y una de anaerobios. Hay otras tres can 10 generos que no se mencionan aquf. En el cuadro 2-2 y las figuras 2-4 a 2-6, se muestran las caracterfsticas generales de las familias de importancia medica.

Los hongos constituyen un complejo y fascinanre grupo de organismos, tan grande que se calculan mas de 70 000 especies, pero se cree que hay mas de un millen y medic; viven en los medias mas variados y solo alrededor de 100 son necesariamente pat6genos para rramfferos, perc tamoien hay patogenos de vegeta1es, insectos (entomrigenos) 0 de otros hongos (microparasitOS), y unos pocos cientos son hongos oportunistas, En seres humanos, hay micosis como la tina de pies y las candidosis (candidiasis), que se consideran tan frecuentes como el resfriado comun; se desconoce la incidencia verdadera pues estas enfermedades no siernpre se notifican.

Los bongos rnejor conocidos por todos sen los rnacroscopicos, denorninados tambien setas

o charnpifiones. con tamafio, forma y color de 10 mas variado.

Los hongos tienen como caracteristica cormin la ausericia de clorofila, por 10 tanto, no pueden -reaHza7Ta--f-;;-t-;~futesis y deb en nutrirse a partir de rnaterias organicas va elaboradas;

trene;;'ra-habii1ci'add~"-d~~~~~p;~;;'-~';g;~i;;c~

muertos a sus productos (saprofitos 0 saprotro-

r6'sTy(ibtener-eIriltnme~to-de-otrOs;;~gruiism'os

.. 'vivos 0 ~h;_i"isped-;'(p;~isii;;~)':-(S_~i~-d~-~i-'p~~~(to

ocasiona u-naenferriied'ad declarada en cualquier individuo expuesto, se llama pat6geno. Algunos

ho~g_~s~s.o.~!_~~_ ~?tI:~Cl_~~~i:;:n.?_P_~~~se mutuarnente (sirnbiosis) como los liquenes,

racombina~t6~ d~'~-~[~i~'gy las algas,'asfcon10 iasmicorrizas, asoci~ci6n de hong os y ralCeS-de plantas, que sirven para 1l1ci-em~Ilta;'i~~bs-o~c16n

de nutrimentos del suelo .. - _ ....

Los hongos tienen caracterfsticas ecologicas estrategicas que les permiten llenar sus reguerimientos nutricionales junto can su ambients fisico, como temperatura, actividad acuosa y aerofilia. Los hongos patogenos son especies :zootr6picasq'lie-requieren tejidov;v'6~paIa'-el ci-ecimiento, a: rnenos durante una parte de' i~~lck; en' cambio.Tos .hongos cporrunis.asson necro_tr6ficos a saprotroficos, es decir, utilizan com-

1 2 .1 Secci6n I Aspectos genel'al~s

:.~ . ..: '_'_.-J. . '. __ ~ __ .. '!'_'l;_ :-:,:,~'':.: ~ .

. . '~{:"~~ ~t;~·:~~~.~E~)E~I~~::~···:·

,,;,"' .. '-".'_.:':'. \ '. . '.,' ~ ..

Mic.ropolyspm:aoeae· " ACufLomyceuwe"e ... "

Micmpilfyspqra . A.cl.i'1·tlfllyce.s .. _., _ ..

S~chirroP()!Y3poifl '. RoiMa .: ~. \c. '. . .'

. . .• -: . . ',- . .. •. ":' v- -1', •

Ilif(!:!IIIamoiPhl~"e;!l!E; Fropt{mibq,cmiUm~

·F!~:~~:::1:1i~.~~ \ ".{ :',. : .... : .. oi~z!~a?; -"".<:: .~.~

}<"railkj.~·· ,. ".- .: Blfl.ddbQoj,~rjJil~~r~· ~

Ca:.r.gerimt ' .... ~,.' .":'" ., :." .. ::.~,~; ,:,.\~;<:

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Sk~;m~'nil \'-' ".. ':~::. ': .: ~;. '.:;

TJ;~~a~ii~il~:",-,r~. ~ e- ~ I. I·~··"I.'··.

Cor;'nebact&<i~cBae Cory!l~bac.rerimn Distria .

"fJ+iie:n:nom.oT.l}lls'pOfare!!e - NO';(}.i"({i"p~ts . c

Th~nn~'nCll0JPOm SQ\X:nmO'!J);{)!lwpom

M:imuroO:l,yceltaceae : ..

, '.

AC1,inom.adum Mi.tmql;sp).t(.l Microtetraspom

s u:ep'.o.m)'celt~ceae s~re,p.r(Jm)lces N;X(!nll(}i.a~s .

p'~~~me_S~Fg.~C;OU!~!'Ie~~s PO~~~~Fa~_g:s: c compuestos organicos de invertebrados. Los

, hcngos no(:~Mficoi "!)!.lediu "di V:idine;-e.n" 9 Ue{f!ffii(jrnicOs(itilii_a~' gu(!r\itina~,-.~P?flli~s (l:I;an )fpidos), ·os~ofmc~~. ~ qu:e .vi~'e~ ~_l?:_a~~~1~j£~~' pocaacdvidadacuosa), ~imbi_~t;tI~ $.~?_g~~!.2.~. '(Candidc;.), y ~;Il:Qimicos y cap.rofllicos (Tn:cho.sForon y P boydii). .., ....• ,_

LGS bongos (nfj:len~e'2. .~~!!por:;·F1t~,il~:~a~J2.'!~ conserver el equilibrio de la neruraleza, ya que d,esintegran o recician cesi todos los restos orga:meat>; int.e.rviene:n en laprodnccion diel bumus del scelo, mny importante pan su fel)lilidad; a e:s~o se d!i:[lomirna b_iE:c!e~.~~te$~·~,:;i~ y es indispensable en Ill. biosfera, pero tambien participan

ACTI N OMYCETAC EA=

P((Jpirmibtlctru{um ()Ira illl'lliOlj

fig. 2-4. IEsqulema~'dce ~11 efitructura micros'c6pica die l!a~ dn~Cl[illil1liH~~ de ac~inorli'ln(~ro.5 alflm'~~DbiO!l. {Mod.i~(",r.;Io de fHppO.rt JW_ Med'ical Mycobgy, TI~ pa~h0gel'ilic Fungi and! the paUle-genic A.;:tinomycetes. 3fd sd. PhiIIa.dlelphia: WB :Sa.uln:J~r;, 188:S,~

de manera indeseableen el hiLode~~;a!.gllnos hongos se eucuentran disponibles inClU50 para pi.rOlgra:m~ de C{)l]u,""O,l biGi6g]co.

Por sJ mismos, los hongos Sll'\'tn C~mo alimente 0 se utilizan e~l j;;-;I~bor;,u6n -(lutroS'~ pan,. vino, Qervez.:G·(S;ccJj~a~8;-~'~;;visia~)-Y, quesos. como el RGClIJetDllfy erCarnenlben'(&nidUi,llm ro~'l~4ortii, p. cammi/e~;id); s'e usru)"par.~ 'e1<'1bOraT salsa de soja (Rhiwpus· ol'igo~po.rum.),. .t~eniU3r la .mancl:ioc·a o~ca (C();"jneb(ic.t;~i~2 iGea~h~~.r~_.ca;;~L.e,~{li:l!!'9~OCtl; 31': ·u~zall_. ~p_ro_~.~~§, j~4.l.ts_1l.i4,'~s. co~9Ja elab(j·[~d6TIl de _IlJF~Q 4triCQ. Y~:lpe'.rgi~I~!.~_.!iig,~)j, tambien sirven para obtener antibicticos, como 'la penicilina (Penicillium ·no(a.·lin;;,7C'h'~;s;

[en~.~I, __ ~~~e.~:~.~~~.?ii!)jas· ~{C?iJh(llosr_~~i0§., If! griseofulvina (PeniciUi,IJT!··gj:i.ieoprlvum) y .e:llC~ClOfhs{rl:i{~~ "(FiWdilim, ~orf.·aS:T1)Ifri'ib hormonas y enii!;l1as. Por -;us u&os"en lao industria, se ha perfeccionado rnucho la ingeniena gC:.!1.tUCf.I, sobre to do en ]eV<l.dJIlI'@<s,. POE otra pane, pueden ser una seria smenaza para los culrivos; entre los fi~oiPaJ6ge:fJ!o.s, los psrasitos fiinglCQs originan 70% de las enfermedades im:p-ortalotes; pueden destruir rnaderas, pieles, telas, obras de arte, .1.1.lbci::c.9.l1ltes:, cocinas, baio,s 0 ilimentos que consumeel ser humaao 0 los animales. En

:

I ~

L

'-'

----------.------ ---.------~ .. -

M IC ROPOLysao RAG EAE

Mic~opolyspora

Saccharopolyspora

DERMATOPHILACEAE

~~-

Dermatophilus

THER~~OMO~JOSPO':lACEAE

Nocardiopsis

Thermomonospora

Fig. 2-5. Esquemas de la estructura microsc6pica de actinomicetos aerobics (Micropolysporaceae, Dermatophilaceae y Thermomonosporaceae). (Modificada de Mariat F, l.echevalier H. Actinornycetes aerobies pathogenes. Bacteriologie medicale. I, 1977.)

1a ganaderia son sensibles de ocasionar grandes perdidas economicas por enfermedades digestivas, abortos, dermatosis 0 micosis sistemicas,

En seres humanos, la micopatologia es variada, A~ ~~_n!l1ami!~~_p.rC?~.Il.~!A?_Jl.?~~)a._ ingestion de un hongO"macrorniceto (setas toxicas) "seIlama micetismo, por-eJempio: "e~"l;~ cssos de los' derivados d~ Amanita phalloides (faloidisrno), un hongo alucinogeno que suele consurnirse de modo accidental 0 en rites religiosos 0 culturales, y que puede causar desde micetismo gastrointestinal hasta alteraciones cerebrales y la muerte; An;anita muscaria (rnuscardinico), Lepiota helveola (parafoloidisrno ), Psilocybe mexicana (neurot6xico 0 alucin6geno), y He/vella esculenta (hemofilico).

Se conocen como mi:.?toj(Jc?~i.~_I~s •• ~lte!:'f1- ciones producidas par la ingestion de alimentos qlie contienen metabolites -0 ;u~t~~~i~s- p~~~~;!fo-raso._e~loxinas-·de-iiongos,"ccmo··i~~··~ft~:;;:i-

nas (Aspel;f5illus), las fusarinas (Fusarium) que

Generalidades a 13

se desarrcllan sobre rnafz, cacahuates (mani) y otros sustratos utilizados como alirnento para seres humanos 0 anirnales: esas SOD sustancias muy activas que inutilizan los alimentos y pueden originar hepatomas en animales de laboratorio y se cree que producen cancer de hfgado en seres humanos; y ergotcxinas (Claviceps purpurea, que genera alcaloides sirnilares al acido Iisergico [LSD] 0 el comezuelo del centeno [ergotarnina], que se ha utilizado en obstetricia). Tambien pueden ocurrir fen6menos alergicos de hipersensibilidad en personas normales 0 atopicas, fundamentalmente asma y rinitis (Penicillium, Aspergillus).

MICROBACTEF)IAC,EAE

Rhodococcus

NJCardia

Mycobacterium

MADUROMYCETACEAE

~

Actif"/omadura

Microbispora

STREPTOMYCETACEAE

Streptomyces

Nocardfodes

Fig. 2-6. Esquemas de la estructura r1icroscopica de actinomicetcs aerobios (Microbacteriaceae, Maduromycetaceae y Streptomyectaceae). (Modificado de Mariat F, Lechevalier H. Actinomycetes aerobics pathoqenes. Bacterio!ogie Medicale .. I, 1977).

i I

I

I ;-

!

AttinOllilycel:ace1!i~

Lisina, galaceosaacido i\sp~rtico, no tiene ADP

Meso·ADP;lTIot!i.,~!?~.cidtl mJc6hoo

+

Mlcm\l:polyslKJrn•· ceae

+

Mf;S(I-A DP, m<ldl,rmSa, fucosa, xilosa

+

NClcffirji~cea:e Me~o·ADF; iiciJciw nOCai[diiO'~1TIic6li~OIl, nrntimJo:!ia. ~ahNma

+

The:m\!;')lUonospo- M¢s{I ADP; sin lnatlm:o~~

eaeeae

+

No hay

Anaerobios lu1OJ'o3et6tHos

~' ,~ 'C:aJ:ac;~r-I.f(;k.clj microx6J,ioM

. .... i . ~- - -

Filarnen~os,(l.l~ll.1entos cocoides.bacilares )l difteroides

Cadcmm COir~S ds e~sp¢I1i:S,basi:p61:A&as que se :prodiiJm:.L1 !;I'Qr eneima y debajo, Jet mediio

Filarnentos con Ulhiques mutales; divisi6n longnndinal y transversal, ~sporas e-ncapsuladas m.6vik . .;s.

Mi~e]j.~fr~gm_,e~~ado oeocoide 'I Jifte" rQ(i,oe

Micelle fn\~1'J1CP.ta.dQ; esporas en pare~, cadeaas con as '0 en <:lg zag

Mlcelii.Q mt'!lifi,c~d 0; ~p(m'ilJ~ 'rn ,clld~lii~'S ~(liJ:~IS; ]-r.mgun~i!lt1J:c~6ti cocdiucLI)

Miceliia, ftlirnri:f1Lca{lo, CIIs:i I1!llm::a fmg;meIl![(:I~ do; esporas en cadetl<tS,; hifus c.spirt\1c3

___ J

+

Rohay

Aerobio

Pl\e.llellJte; se lrll.g" Aeooobji() ~men:ta ,en, Ull](ia-

des ai·tro.'lpor.l!d<l~

•

~.

I

I

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-

+

MICOSIS

Las infecciones causadas por bongos rnicroscopicosse-l1aman nllcosis y toman-3U nombre cera parteder oi:!j;'ariismoque invade-ii.ToiiTc:onucosis) o-~:l~1:ho.~go·quelas·c~sa·-(Z~~.'Zidioidonllcosis).

.I~~,ag~tl\e.-i'de -la.s·~cosi;' son alrededor de 100 y pueden ser deorigen endogene 0 ex6geno,

Los j' bongos end6genci.ss·eeIi.'~~en-t~';n en mucosas'" 0 tegumentos-'detndividlwssanos-y

• __ L_ .. __ ~ __ ~ ~~u __ ••• _~~_'_'_ .... ~r'.'--""+"-~-"-'~-~·-'._' __ ''' U.~_''U"~"".~L ~)

s6lo en estados especiales del huesoed (inrnuno-

supreSl6n: (iiabete's:'ai;i:ibioticotei~pi~),~~~~~ \;lerte[;el~pat6gencls{p()r~j~~;plo,'¢~r;didc~Loi

I. h,??~,~~."e?~~g~Q9.i.iiX~I1J~!$.m!' __ QiL~ ~IJ1JJlping_o los animales: algunos son parasites obligatorios

(deiil1at6fit6sj'-y~~tros"iQQ~a£~§§lB[JAjEf~7=

lI'AS, :\fu(;nr) y excepcionalmente.se conviert~~

i?P~t?,¥,::~o·s.;~:_~t9;~': jLl~lt~' ~~n algunas l~~~cil;:~

[as, constituyen el grupo de losoportunistas 0 patogenos f~;;-~itatlvos:t:a-~~~yorfa de los hOl}:'"

--,gos ex6genos penetra por via aerea 0 cutanea.

Afg17nos son cosmop'o!itas y'otros~eiitiii~de;ir-llitados a zonas endemicas (Histoplasma, Coccidioides immitis';

Hay cierta afinidad de los hongcs por.los tejidos 0 los 6rgm1OS;-p~oTej'erriplo:-Ios-del;;}it6~ ~tosPO( lei queratina; C'/-yptOCOCCMS n;;fo;;;;"ns portejida nervioso, e Hist;i;ia;-';;~p~r,'sistema' r~ticuloendoteliaL ".--., ~""'."«

Las personas sanas tienen inrnunidad natural a las infecciones micoticas. Esta resistencia es inespecffica y depende de factores geneticos, horrnonales, nutricionales, asf como de la edad y el genera; los cilios nasales, Ia piel y las mucosas

.tambien son barreras mecanicas, asf como las secreciones, como el sebo y el sudor que tienen actividad fungicide, Los microorganismos que .per:etral1"e_stas~an~r~s-;:Iesenca;de~;i-~~~·· ~espuesta inflarnatoria y la fagocitosis. Los bongos actuan ccrnoanngenos yestirnulan 1<: 12rodue-

c~~~ di~~tiC~erp?:~'~fl~I~~_1~~y;{tm;i~g§;~9-

r~.~~11 laJ?:r,~~~?'U!_d~~~ . ..£aJ2Ha.&__[Jl en~~fec to c~t()!6~~C::2: Como no hay corzelacion entre anticuerpos y grado de protecci6n, se cree que esta ultima depende de la inrnunidad celular,

Debido a Ia presencia de estes hongos, las reacciones inmunitarias quiza contribuyan a Ia patologja de las infecciories en el sitio de la invasi6n, como es 13 formacion de granulomas Q, a distancia, al causar reacciones como el eriterna I1UQOSO a la urticaria. Los factores ele virulen-

u,

Generaliclades

15

Piel Ojos Senos

Bucofaringe Ofdo extemo Vagina

cia mas irnportantes son: terrnotolerancia, ere-

~lmlentOsumergldo,'resEtenC1a·-tlagocitosTs , mTrnetismo~moIecura.::, ·"excieci6r'i-d~""enwr:ai, pap~1:~~j£et~les··(hi~n:o····tFe'j:'Cak16~'ICan:-y" '~41~es~?~ Tarnbi6n ha~' ~nesai6rgTcas--'po-r'

inhalaci6n de las esporas y se haestimado que

!~j~t~.1~JS"~':!i~ _ ~~[~_l!rl~'d;cles -;:~~pir;t~ri~s alergicas, como el asrna, es-por~S-o·ngos.~~---

.. 'Segun su localizacion, lasmi,s(\sls ~e cJ (\-

lifi~~~.)~.~,S1t.~tr2,.,.g.r~.£~~~~,&~~S~~:'s~~~!.~~~,

subcutaneas, sistemicas y por oportunistas. Las

M::osli"subc{id.rieas Y sistenllcas-rambien son sensibles de agruparse en las rnicosis profundae.

En general, las~~~E~i§.§l\E~Ellil~~1e.~ise.g:.~.:~ ran por :ontaeto directo con elhongo 0 can una

'perS-?~~'()',"a~;mannfect~d,,?~-'afe~ta~ i~l~l,"~~i~s y'nlUcosas: porejernplo, tifias'y'canciidosis(c-a~didiasis) (cuadro 2-3), Se~onsi2'~~~ci~l:;;lalomicosis cuaiquier infeccion cutanea fungica, y no exclusivamente las dermatofitosis.

Par 10 general, las\'ITlicgq(s","l~b5y.!:~~~~2J~~ ~dquieren del ambiente y el hongo penetra par un

tra;~{atisln'o, PCl;:'~I~;npio'- 'en Ii 'esporotncosls,-ei' rrucetoma'yT3: cromoblastonllcosis··(C1.1adl()2~4).

., ~En l~strTIicosis slstemicas,[ las esporas del hongo penetra!!~I?()"r, [nhaI~c16n (ccccidioidomic()sls-,-1:ilstop~asmosis, paracoccidioidornicosis, blastornicosis), despues ocurre colonizacion y, en la mayoria de personas de &r~~~" end~i\l-lCas:

Blastomicosis subcutanea Cromoblastornicosis Esporotricosis

Entomoftorornicosis (basidiobolornicosis y

conidia bclomicosis)

Eumicetoma (de granos blancos y negros) Hialohifomicosis subcutanea Feohifomicosis (quiste mic6tico) Locomicosis

Rinosporidiosis

Otras: aspergilosis

16 B Seccion I Aspectos g~ne ra les

B lastomicosis ?aracoccidtoiilmmcosi,s Ccccidioidomicosis Adiapirornicosis

His toplasmosis Peniciliosis Aspergilosis _ Criptococosis . Candidosis (candidiasis) Geotiicasis

Tricospornosis CinJecci6n diseminada) Feohifomicosis y hialohifomicosis sisternica

Seudofillescheriasis ..

ha.y up..a mf'!cci6n pulmonar 8~intom.acir:8~.en UTI. porcentaie pequefio se produce rrucosi:s pUimo 11M primaria (IleumoDjaagudaTque-s-e<fCQffirafi:a de slntomas ge.nerales (fig. 2-7). En -ambo-s·caoos, h-ay curacicn u ocurre evolucion a una enferrnedad pulmQnar cronica: es infrecuente 1a dise-

lnhalacion

J

Colonizaci6n

t

Infeccioo

\\ \

/

Neumonra ~$iotomatica

Neumonia

j \

Enfe;medad\

pulrncnar

p rogresiva \

"'

/ j

I Eni8rmedad

pulrr>(>rl.ar cr6ni~a

Curacion

, ,

t ReaClivaci6n endogena

Oisernlnac'on extrapul mon ar

Fig, 2-7. Esquema que muestra la fisiopatogenia de una micosis s'sternica. (Modificada deTopley & Wilson's Microbioloqy and microbial infections. Vol 4. 9th ed. London: Arnold, 1998.)

minacion a cualquier otro orgauo 0 sistema, en especial hfg",-do y bazo (c'l~_~r0 2--5) 0 la reactivacion endogena. La inoculacion cutanea primalia es excepcional, se presenta como una lesion granulornatosa local acompafiada de adenopatfa.

Las micosis g,1terniQgl ~eden afectar piel 0 mucosas,YLSSuperficiales, extenclers-e- ~- 6rgi-· iI·Os p.iofundo~. Se debefl con~id'e;ar ~;;i;;_;;;~ntesi se altera mas de un organo profundo y solido , En general las micosis son de evolucion subaguda o cronica, pueden durar afios 0 ser leta.es; como los hongos Iiberan pocas toxinas, no suele haber fiebre ni modificaciones sangufneas. Se denomina J~ge~a Ia demos~~~i_~n ~~I._!Ionz.~~1 rorrente cireulatorio. La sepsis Iungica implica

pirSistenClao· proliterac16n·~ei~oE_!9._ .. ~I}_san-, m m~i ,~ircunHanci<ldiircD. de demosrrar en ttl

..~. - ' .. '._._._ '." ... ~~ -~ -' -~~,,,,,,,,,,,, .• ,,,,-,,,,,, , .. _ .. __ ._ ...............

pr,':¢tbl, Sc,sls [unglca se reti-re a. unestado .

delliongo 0 sus-productose~.sangre'l )'_o_<:ll~ en: au·sencia- decultivo positive; describe una situscion clinics encontrada con f;~cuencia -pe~ - no rigurosarnente probade. ...~. _ ..

Las l ~c·os, is. por . _op o~n.!!.~a!., son c~lisa.9~. por hongos saprobios que se transforrnan en patogenos en diferentes·slluaCiones· del hues?,~.~_: ..

-

-

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L

-

-~.'.:---------~ _-------

Filamentos 0 hilas
(hyphomycetes Levaduras
o mohos) (blastomycetes)
III Q\S
2l '~1£
t:
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0
OJ Dimol1os
<II tt cpo
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<II (20 a 25·C) (37"C)
e
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~. Calula redonda
"' Fisi6n binaria Y rizoides
UJ
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OJ (:000
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0:: CA RACTER ISTI CAS FUNDAMENTALES

Las caractensticas fundamentales de los hong os (cuadro 3~1) son:

• Toclos son ~!:~t;I6_t.IQ.fos (quirnioorganotrofos) por 10 quc ticnen que alimentarse cle materia organica preformada que uti1izan como fuente de energia y de carbone.

• Sen eucariontes, es decir, presentan un nucle'~-Ciif~i-e"i:lclado can membrana bien organizada,

• Tienen una pared celular formada por polisacaridos, polipeptidos y quitina; esca pmed ei£3:g:i"di: por\oqu'~ n~ p'L~~d~n" fagoci tar alimentas sino que absorben nutrimentos simples y solubles que obtienen al desintegrar

- .. ,' .

Heterotrofos Eucariontes Pared de quitina .

Absorben ~utrilnentos· . Presentan tala

a micelio

. ': -", -,'.-."

polfrneros mediante enzimas extracelulares llamada~_~espolimeras as,

• La estructura fungica consta de un complejo llamado tala 0 rnicelio (fig. 3-1), gue a SIl vez esta constituTd~'por multiples filamentos 0 hifas'-Uliromicet~so-mohosYo;'menos a'-menudo', por estrncturas unicelulares 0 levaduras (bl~s'tomlCetIJsfesti\slilt"n1fis S't reproducen por gemacion (Saccharomyces

Fig. 3-1. Estructura del tala 0 miceliode mohos y levaduras y en la parte inferior dos formas poco frecuentes, (Modificada de Deacon JW.lntroducci6n a 12 micologia medica. Noriega-Limusa: 1988.)

17

~ASE MIC,E:lIAL:

TAn:O IPJlAM"IHirOSIO

!CASE DI;; ~l;:WlDU~A: 1iALO OISOCIAOO

~P()r:aIfl!;lij"cO!fl 8Spl;l:mJilgiimOOfac$

TAllO RE:PRODlllC'IQR:

~ud0!'l1ice!i0 (s~!i.!(fdh'fa}

cere1>isi.a~) y ~~i fi1lmClI por£ fisio!l binaria (Schizo-s~barv~~:icespbn-we );. tan1b~en sos l!UIa ex¢~,~cio~ los Chyu.idiom,Y'l:etes (ci~· diomicetos), formados por cl!1ulas redondas gJ:'fl:llJde~ {)olflriwrides,y les mehos .iltme[~flg.i.~ I'IOSOS, que careeen de pared celular Y puediet! ,,_ijme!J!J:arse per f~OClruosis (fig. ],-1).

TALO

Los l'mngQs q]ue tienen Uflfl fsse p81Irasi~!l.ria lev~(h.)mfonne- "j una 5~1'(}mi.C<l n.lice..bal,'j que e!] ~esIJI]G:Sit.a a ,c'~JOC'ibiQS 'jIIliJib~e~.ta]es·rasmil de esta fase a 20 a 2j<'C a lafase d~ levadura a grC >0 vlf2evers>l, sellsmen dj.!Jrr~\!i (fig. 3-1). Algunos hongcs producen kvaaum y illamentos, y

~tl:\ eonsrituido pmr dospsnes: 9.) 1[!I~.9: ~~~e~fl" .~VQ~ que asegma el des.rrro~!~;;. ],3. .ml~t~k~~~,_]'!-. fijaC:~6~"y Ia edificl!lc16ii"de III pa~e vepl'OOucitora, y b) ntiQrep.oCkmi{]W, d.onde-$e·i~n 'io~ 6rg~~ . no'~' de~,epliO(fucd6n. Pu~d~ 'esla!-:-;;Pr~'se,o:ta4~ p~ Ii!l.ifas, ]€iVamH'1/iS e sel]d1crh]f:~s (bl<lstospor~:s

qtle no seseparan) (fig. 3-2} {figs. 20-]7 y 20~ i'Si'" Cli!p. 2/0).

Si e.l'_~o ~.~~. ~~S'"~~.p~llcell cgI9,· !!i!l!s d~~eya~n'Ls d~ ort,Ci:m~e:Ht:G rapkl!o, eonsis-

--" ._._.- ,--- _... - - - ......... .

teaciacremcsa y l~e se r~~~mb!;·~I]::o(m() las

bli!t:teir~:;lJ; ~PiU&ltQ~ >0 eSilj['i~ (fig:.' 3- 3). Slel.L~k~ 1!:sfiJfI!m~lt~oj da llI1g;ll.r a, ttiioruas de mehcs d~ ~~:~~rrni;;w'0entl'ililgQ' Cags~ 3-4 y 3-5},,'cOll

. ----

:fi]:!Ime:!1~Mr.eolSe!IJIl..;:m.~clad!o\S, InlM (! rJ:1CE~0\'l1

IMg:;~ 0_ ~~r&i~~)e maf~eracoiiipact~,~_c'~n 6~eIfich ~R;.b.arec'l!lb~;;ta d~j~~~e:=I!Q' (fig .

. 6~25, ~;",p .. 6);·el (;r-ecimlent'O ¥S lento salvo en los Fig. ~-3. A,pecto ,'"f'Iacro5.topico d!@ un moho y es tina

h()(mlg;os (;!pOIifDl1ru-StE!S (jigs 3<3 y 2-2·<5, cap, 22). l\'2-vGC!ur;J'.

1jJ,

r:/RiWid"

~~-

Hitas e~ j}

~raqU9f/

\f / 'f

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Fig. 3-4. Crecimiento centrffuqc de un hongo (Penicillium sp).

ambas formes pueden existir juntas y nonecesa-. riamente determinadas por la temperatura. Estes hongos son sensibles de considerarse polimorfos (Candida), Se conocen como hongos bifdsicos aquellcs can una fase filamentosa y otra no necesariamente levaduriforme, como la esferula (Coccidioides immitisy.

Modificaciones del talc

Los bongos presentan variaciones, en su forma y constitucion, importantes para diferenciarlos: dilataciones 0 vesiculas; organos de resistencia 0 clarnidosporas (figs, 20-17, 20-19, cap, 20); orga-

H .i->: Clamidasporas

~-

i1_-/ V"I,"I" O~

Hifas pectinadas

Honqos [)' 19

Fig. 3-5. Esquema de la formaci6n de la colonia, (Modi,ncadadE! C0urssl!pe[i~lIr':te rnycoloqie rnedkale. P'.',is· 111,j.itut P~:>le0t/·19BO.)

nos de fijaci6n como rizoides y appressorium (fig. 22-6, cap, 22); hifas en espiral 0 tirabuz6n (fig. 3-6); 6rganos nodulares formados par hifas torcidas en forma de nuda; hifas en raqueta, con un ensanchamiento en un extrema; candelabras favicos (hifas en cuerno 0 asta) que estan dados par varias rarnificaciones al final de una hifa (fig. 6-31, cap, 6); hifas pectinadas 0 en forma de peine; hifas peridiales, que son ensanchadas Y multiseptadas con terrninacion en espiral (fig. 3-6) Y acurnulacion de muchas hifas (esclerocio

f __ Hifas en espiral y

~fi/ot"b"6"

Candalabros

faVicos

i=ig,3-6. Modificaciones microsc6pi:as del talo, (Modificada de COUfS superieur de mycologie mcdkale. Paris:

Institut Pasteur, 1980)

Fig. 3-7. M{jdu(i1f(J .mycet~tJs, pre$enci~ de €Sd€!fFO'

cr'O'.s (HlXj<. . Fj'g. 3-8. SporothIix schendd~ asociaciones en OOI€m~C6:

, ESTRUCTU RA

Q esclerote), cuyL ubjt:llW eb ~h.'llH~;e.t~ar :fo,!~~~.r~cias die reserva (fig. 3-7).

Otras agregaciones mieeliales sO.mi los ceremios (fl.g. 3-8) Y sinemas (can 6rgnno$ cl~ fructific:lci6n y sm. ellos, re.spec~[\1alUeme,) {I eseorass redondeados fernles y asexuados, como los picnidios (llgs.. 3·9 l 3-.lOJ" 0 sG,:;o;,llarln~ coma el spotecie (aspecto die eopa), peritecio (figs. 3 ·11 Y 3-12) Y cleistotecio (fig. 3-13) (con OStiO~D y sin 61. respectivameme) (fig, 3-14) Hay lateudencia actual a llama, tndas las agregacjol'le~ mj,oeHanas con e]. 'Len[Jjno ascomata.

La hifa (~g. 3-].5) es un InDO d~~Ot..gjlll!C1 varia.j)j~. fu;uiado por una ~hilar rigida, en el que fluye pretoplasma. El diameoo v~fu de 1 a 30 rnicras; tennina en j:lUIIta, misma que ~~~!.tll)''t la 2;~a de ~.~~s.:~.6.n.J."._~eptrc~e:(I~ _l_~ FegtQ[I. d!e crecirreento.

Los bongos superiores rnnesnan .. tabiques U'l1l!IJ.svtlr$illesqU!e se d!eI1lJO~!TIan stqIJ" yfor~ man. el 'rni,relio tabicado (fig. 3~2); t:i~rili:n poros q[Ie:·pe.ITnMen ei]xl:s~o-d~1! eijoplssma y el melee,

l~i91. 3-9. E~L1Iem~, d'<! ,1a.f!oH~Licrll,rl! m~(JOs.ro,pica. cl2J@KIlf'l,oci,ooesc.lO?FotEelmremjo,!eJ p.imidio. ~Mo::lm(ada de Cours sup1;lrklJ~ dl;,' mycolQgie- rnMi:call~. Paris.: lnsntut Pai"teur, 1930j

-------_. . __ .. - .~ .. ~~

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Honyos D 21

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Fig. 3- 1_2. L. seneqaiensis, ascas y ascosporas (2Sx).

Fig. 3-10. Phoma sp, presencia de piCllidiQs.

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Fig. 3-11, L seneqalensis, presencia de peritecios (1 Ox).

Fig. 3-13. A. niduians, presencia de cleistotecios (25x).

AGREGACIONES MICELI ALES

Ascas co n ascosporas

Cleistotecio

Apotecio

Perilecio

Fig.3-14. Esquema de la estructura :nicrosc6pica del cleistotecio, el apotecio y el peritecio. [lV1odificada de (ours superieur GE mycologie medica le, Paris: !nstitut Pasteur, 1980.)

".

JiIFA

MICELIO I"'BUCl~n)O

A~arato (li;!GDI!;]i

ReLlwlo

,endbpli1l.lmloo

NIGcleo C~erpo llploico

Cuerpoll lipfdlcc

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Cica!Mz g9mallite

A!pa.ral0 deoG(:,Jgi

I I I ~

Fig. 3-15. Esquema. ulu;3iestmctJiJral de Ios hongm. (M,odifiC<ld;; de (;OIUrs superieur de mycdloogie rnedicale. Paris:

Instittrt Pasteur, 1980.)

de fIhiI que ]as hiias no con&ro;n de cBuli!s sino de

c~ciP·.1itmrient?~ (fig,' 3:15),: iOO·'hO~~i~erio-

. res quetienen U:Il micelio continuo () cenocnico, carecen de tsbiques (<'l8qllaoos} (fig. ~2), 0 muesrltM. -llYWY'p:;3F'Os fi6~o se p:m~3ell~"1 Fill"a~~l~J~~ panes v.ieJas'o'l3i-re;produccoras (fig:"'n5).

.' -r-o-s: "Ii~cle~5 .- ti.enen'· 'rnenwbEat11l doble y I1u~eG~[); los orgsnelos c~to[.l[asn::lico$ incluyen miroccnddas, reticulo endoplasrnico, vacuolas" ribosOiO:"la$ 8105 (las, b<'jc~ejas nenen 70S} Y 3:ipMa~o de Oofgi :relaClOI;l~do ~DD laproducc:i6n de vesiculas secretoras, cuerpos lipfdicos, iuclusiones cristalinss :( ergosrerol) y microeueepos; tan'lbien puede heber hileras de microuibulos y gl[1c6ge{lQ.

Cadatabiqus s€: eneuentra relacionado coo un corptisculo de Worollin, que al perecer acnia como obt]lrador de los roms l);Jj[aa:isbl' los compa~:mie.!J:to~ euando estQ-s ,em'ej ecen 0 sedifereneian (fig. 3-15). Es pos:iblt:l. queel citoplasma y la pnred se desintegren por am6.hs:S y que se desarrolle una pared secuncaria bastaate gruesa; ella da J.uglli: iI ce:lui<l!~ at resistencia 0 clamidosporas qm: s;obre,nY$tl 81. simaciones adversas 'i permanecea M eseado de lare:nc:ia (.iigs. 20~ 17 Y 20·19, cap. 200).

Lashifas tienen babilidad para 1ill:~.5rr{lm.O"S~ en Iospuntos de contacto, principalmentc en hongOG superiores, y deesta mal1era~)llJedten iniercam-

blat citoplasma Y nncleos. Las ramiftcaciones son sueesives, 10 caal iJa 1:1 la m~Qma llilJlI. Forma circuhLI que Teouen:!b. una tina del ,cueqKl (fig. 3-5) .

En los bongos mccedinscecs, las hifas son iucoloras '0 fuia1ilJ;~~, Y (':[I 10'S negros 0 demati aeMS, de color OSC\1rO poi lit presencia de pigmerucs de-tiro melarana (fig. 2-1, cap. 2) (fig. 3-16). Es~05 pigment".'> son complejes que CODfieren mlerancia contra esues ambiental Y COD· tr:<l:o..'l;idan.~~ anfunucrobitll,lOS. qllle se producen d:eln'llilte la ode-nSf! del hll~.

Las paredes f'UngicHo$ estan formadas pOI d:iferemes capas: p-nb1lictir.iJos, como glucanos (polfrneros de glucosa), mananos (pollrneros de manosa) Y polimeros de glueosarnina; protein as (Mgllna-s de las CllIi1Ll@:-8 SlCl.61 penneas~s).l[pidos eel ergosterol es un esterol esencial); componentes fibrilares, come la ~ujtina~'jc.acsi ]100ca, celulosa,

En el ~f'ittdel~s hifas, hay 'i'esIciL'da:s que forEtll1I1 un complejo interne de membrana. y contienell enzimas que 8in~~til<l!jj! '!! desmte,gl'llJ.'Illa pared; tambiin Elay particul.w deneminadas q~i:i'~osomas, cuya funci.6n no se conoce en definitiVfJJ.

NECESIDADES FISJQLOGICAS

Lcs bOIl~'$ debe-o encortrar e:ffiI 10$ medias de cultivo 1Q necesario pam su crecimiento y desarrello: a) materias nitrogenadas como peptona;

f

>

'-~.

-----~--~----- ... ~--.--.---.-----.-.-

Fig. 3-16. Aureobasidium sp., h.fas y darndosporas oscuras (40x).

b) azricares como glucosa 0 maltosa, que son indispensables; c) un soporte solido, como la gelosa, que permite a los hongos filamentosos desarrollar rnicelio aereo con organos de fructificaci6n, y d) un pH acido, ya que es mas conveniente (5 a 6.5). El media glucosado 0 rnaltosado de Sabouraud reune estas caracteristicas.

Para obtener la esporulacion sexuada 0 asexuada es preferible utilizar medias naturales gelosados como patata-zanahoria Q extracto de malta.

Mucbas hong os necesitan vitaminas; estas se encuentran en las irnpurezas de la peptona y del azricar; en ocasiones, conviene utilizar medias enriquecidos con vitaminas especfficas

La forma de Ievadura de los hongos filamentosos se obtiene en medias can sangre 0 huevo. La temperatura ambiente de 20 a 30°C permite el desarrollo de casi todos los hongos, en especial los parasites superficiales; para los parasites de mucosas y 6rganos profundos conviene mas que sea de 30 a 37°C. Los hongos terrnofilos resisten hasta S5°e y rnuchos se conservan viables a temperaturas de cangelaci6n (psicrofilos). La mayorfa necesita oxfgeno y humedad relativa para V1V1L

La ferrnentacion de aziicares es una caracterfstica de irnportancia para diferenciar las levaduras; tarnbien es conveniente e1 metoda de

Honqos D 23

utilizacion de azticares y materras nitrogenadas en anaerobiosis. Esto tarnbien puede usarse en algunos hengos filamentosos.

REPRODUCCION

Para conservar su habiiidad de acIaptaci6n, los hongos deben reproducirse Iacilrncnte. Las hifas se desarrollan a partir de una espora par ernision de un tubo germinative; la forma mas simple ocurre por crecirmento apical de las hifas; no hay crecimiento intercalar, pero las celulas no terminales pueden ernitir ramificaciones (fig. 3-17) .

. La reproduccion se realiza por media de esporas y puede ser sexuada (teleornorfa) 0 asexuada (anamorfa), Los hongos que presentan ambas formas se llarnan holomorfos. La reproduccion sexuada 0 pcrfecta se produce por la unlo1'j_ de dos micleos, eo tanto que la asexuada 0 imperfecta (hongos mitosporicos), se da a partir de un micelio aereo a reproductor, sin fusion de los nticleos. Las esporas 0 elementos celulares que sirven a 1a dispersion se denorninan propagulos.

Par un fenomeno de pleomorfismo, el hongo sufre una mutacion irreversible, pierde sus 6rganos de reproduccicn y se transfonna en un hongo velloso de rnicelio esteril (Mycellia steriilia) (fig. 2-1, cap. 2) (fig. 3-2).

Reproducci6n sexuada

Consta de una serie de fenomenos como: produccion de 6rganos sexuados y gametes; fusion

TUba germinativQ

Espora

O-rO-~D~~

/--

._.~ sep!~_r:D

(2 -+- 0 Ramificaciones

/ intercalares

Gf)_~c!?c?

Fig, 3-17. Esquema del crecimiento apical. (Modificada de Cours superieur de mycologie medicale. Paris: lnstitut Pasteur, 1 \J80.)

24 • Secdcn l Aspectos gener;;l~e~

REPRODUCCION SIEXUADA

CIgoto

FlEPRODUCCI6N ASEXUADA

- Cigoopa:ra

Esp:xang iospara

;' ()olum~la

IEsporangfoIDm

. ~\'1,-,~;:i.~~', . .• .'- ~ :.. . EIi'I[O.m~ph~f;Jo~al~s .

Fig.3-18. Esquema de la reproducdon sexuada y ,a.5~uada en zi·gomicotin",. {Modiilcada de De~~on ·JW_lntro.::Iucci6n,,~ la micolog,ra medica- Mexico: ~Qriega-Limusa, 19SJl.}

de pmmpb.'ill"-<t. deesms (plasmogamia) y fus.i&n Il,ud~ (cariogea:);. meicsiseu hQ11~OS ll~ploide5; ilpru:ic:i6n dernclQ;(es geneticos.asicomo ~TO~ llo 00 cuerpos frucnferos y esporas sesuadas.

En ocasiones, iii plasrnogamia se aoolnpafia. de fa:rrnaci6n dehifas PJ!:Olec:tOw ab:erleoo.r de] I'IIU!e'\i'o Y evoluciona de manera Jif~nte s~Ilf(l() se trats de hongos iill:&;r~Qfes 0 seperiores. En. los superiores (Jsoofillic.etos, 0 bcidioml.CdOSjo, la .fusi6n m]c]ciIF da luger a canla~ binucleadas 0 di.Cflfiones, y en ]0$ inferiores (zigolllicetO'S) se obeerven heterocanenes, (,I sea, ~6:cleOiS g<l{l;tt_k;:ar.lel)J~e dlist~tl;i(s ..

E1 apareamiento p!!leo,e ser tiel talo pn)ve~ nienrs de una sola espora y se llama ]wmolt:1llico; si los g,arne,w.s SOil iguales, la reproducd6n es isog;l_mic:a., el elemento de b fLlsl.on se deno:l1.una ciggte, y la tl$POr:l, cigospora (fig. 3-18): ~sta es If! rtpmdiuodCiin sexnsda en lazigomiconaa (figil. "?'2-li yn-'l, cap .. 2:2)-

L~ union que. OCIlII:e entre tales diferentes de una misms espoecir:: (oogonio y antt:r:!t.io) se llama be{ief\oUmca.; ]<1 [\ep.cl)Cli.lioc~6;~,. hetero;gamica; el resuhado de 1> fusiQIl:, ,oosferfl, y la espora, oospcra (fig- 3- ]9). Es la rBproduccj6n sexuada en. ].1 m~8ti,g)[imi(:!oMa .. CLl!l.ndo ,eSiItr~pMjble idenrificar con precision los gametes masculine y femenino, se Ilaman positivo (+) y negative (-), que equivalen a donador y receptor, respectivamente. En el proceso sexual se pueden producir precursores y hormonas sexuales, como sirenina,

anteridiol y tltjdm tri~[J6riC\,ls. La sirenina, pOI ,eje.mp~ol se genera ea los gametes femeeinos Y atG'le los gam.eJos masculines _PO[ q:l!imiotaxls; el anteridiol, tambien femenino .. inicieel des a rrello de. <ulltel:idio:s y suahsorciltli!! hace qn~ Ias ramas m1l:Sc~]]M$ origine~ oognmol, e] eualestimula la produccion de oogonics.

En a~c.o:micotiJ;la, la reprotluDcitin :$I~4uada OCIUIEep@r fu...~6[l cmrr~ hifus V!egemllv~, 0 una espora masculine (espermacio) y una. lrifa receptora femeama (n::i.cogino) dependiente del

UNION HET!ROTALICA

REPROOUCCI6N HETEROGiA.MICA

Oospora

/

Fig. 3-19. Esquema de la reproducci6n sexuada en mastigomicotina (ODmycetes). (Modificadc_ de Deacon JW. Introducci6n a la mimlogfa medica. Mexico: Noriega-Limu5a, 1988.)

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_____ ._~_~, __ ~--- ......... - __ ~· ...... d._"' ... ~_, .. ·...__~~cc ~~._O ._~~. -_

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I -

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Asca madre

Ascogonia

Cleistote cio

Honqos iii 25

FiJsi6n nuclear (nucleo diploide)

AlargamienlQ de asca madre

Analases I Y II

\

\

A5cas

\

Asccsporas

Fig. 3-;20. Esquema de la reproduccion sexuada en ascornicotina. (Modificada de Deacon Jw. lntroducdo i a la micologia medica. Mexico: Noriega-Limusa, 1988.)

ascogonio u organo sexual fernenino. La hifa ascogena contiene dos niicleos (dicarion), los cuales se dividen, un par se va al apex 0 vertice, las paredes se reacomodan y se forma la asca madre; hay fusion nuclear y surge un micleo diploide. La asca madre se alarga y pasa par anafases I y IJ; entonces se delirnitan las ascosporas, las cuales quedan finalmente contenidas en sacos o astas que se encuentran dentro de estructuras filamentosas redondeadas (peritecios y cleistotecios) (fig. 3-20) (figs. 3-11 a 3-13).

En basidiomicotina, la reproducci6n se realiza por fusion de dos hifas vegetativas rnonoca:iotas (un micleo), las paredes se disuelven y los micleos se aparean (dicari6n). Despues se forma un cuerpo frucnfero (una seta), donde se desarrollan los basidios; aqui los micleos se fusionan,

hay meiosis y los micleos resultantes haploides emigran hacia las basidiosporas (fig. 3-21.).

La parasexualidad es un sistema genetico altemo que puede sustituir la reproduccion sexuada en hongos imperfectos; se desconoce por que siguen este proceso menos e·ficaz.

Reproducci6n asexuada

La reproduccion mitosporica (antes imperfecta) es 1a rnejor conocida y, por 10 general, sirve para identificar al hongo; suele llevarse a cabo por medic de esporas generadas por una celula especializada 0 conidi6gena, las cuales son externas y se llaman conidios, y s610 en los zigornicotas son internas y se llaman endosporas 0 esporangiosporas {fig. 3-22).

26 • Seccior I Aspectos generales

BASIDIO

Fusion nuclear

~ Meiosis

1f;Jl)

]{ \

Hras raonocariotes

.":" ....

Basidiospcras

Fi£1- 3-21. Esquema de Ia reproduccion sexuada en basloiomicotina. (Modific2da de Deacon Jw. Introducci6n a la micologia l1edii:a. Mexico: Norteqa-drnusa, :988)

ESPORAS EXTERNAS (CONIDlOS)

ESPORAS INTERN AS (ENDOSPORAS)

. . !rP~

conld,IO~J4 4:;o~~.o t

k?

Celula conidi6gena e

.. _ o~e

Conidioforo ~o

"@re Acremonium

Esporangio

Columela

Esporangi6sforo'

Mesoconidios

Fig. 3-22. Esquema de las esporas externas e internas y sus celulas productoras. (Modificada de Cours superieur de mycologie rnedlcale. Paris: lnstitut Pasteur, 1980.)

I CO~IDIOGENESIS

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l rAUCA.·AArRIc;.. J

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OJ • b c SINCRONOGENA

o-o~rr

abc

Hongos II 27

. HOLOAArICA 8

ll~-s

abc d

HOLOTALICA

g=o:n~n

ENOOGENA

Fig. 3·23. Criterios de con idiogenesis y representaclon esquernatica de rnecanismos de forrnacion de conidios. (IVodilicada ce De Haag GS, Guarro J, Atlas of clinlcal fungi. The Netherlands Spain: Centralbureau voor schimmelcultures/Universitat Rovira I Virgili, 1995,)

Endosporas

Son esporas internas que caractcrizan a los hongas inferiores. Se dividen en esporas moviles a zoosporas Que no se observan en hongos pat6genos para seres humanos, y en esporas inmoviles o esporangiosporas, conrenidas en una vesicula 0 esporangio (fig, 22-8, cap. 22). Este Ultimo, a su vez, se encuentra sostenido por un filamento portador 0 esporangioforo, que tiene un tabique de forma especial 0 columela. Dichas esporas se Iiberan por rotura de la vesicula; los fragmentos de esta ultima que permanecen unidos a Ia colurnela constiruyen eI collarete (fig. 3-22).

t r-:

Con idiogenesis

Por este mecanisme se prodrcen Ios conidios, que son las formas de reproduccion asexuada caracteristicas de los hifornicetos. Los criterios de conidiogenesis mas relevantes para la .dentificacion de los bongos de importancia medica, ast como las ilustraciones de sus mecanismos de formacion se presentan en la figura 3~23. Las

celulas c;ue dan Iugar a los conidios se llarnan conidi6genas; a menudo, se observa una estructura diferenciada que sostiene una 0 mas celulas conidiogenas y se llama conidioforo.

Este aparato conidial de cornplejidad variable puede ser muy simple desde e1 punto de vista morfologico; por ejemplo, en Sporothrix los conidios se origin an en hifas vegetativas (fig. 3-24) 0 pueden ser portados por Mas especiales o conidioforos y constituyen un aparato conidial complete que consta de conidio, celula conidi6gena y conidi6foro (fig. 3-22). Los conidios pueden estar ligados a asociaciones micelianas, como los coremios (figs. 3-8 y 3-9); los esporodoquios, conidios que se unen al micelio a traves de un estroma basilar, como en Fusarium (fig. 3-25), a los acervulos, conidios que se unen directsrnente sin necesidad de un estroma bacilar, por ejemplo Cylindrosporium (fig. 3-26),

Hay dos modelos basicos de conidiogenesis (fig. 3-23); talico y blastico. En este ultimo, hay un pequefio brote en Ia celula conidiogena que da lugar al conidio. En el talico, toda 121 celula conidi6gena se convierte en uno 0 mas conidios (fig. 3-23).

en Sl1. dessrrotlo se ~nvolucr1ill todas las paredes ceiulares. L~ enteroblastica sucede cnande el COJlidio sale <'I tJ;"aves de tma abcrtura, se redea de 11n<!! nueva. pared y dejs.una eicamz (fig. 3.23). L<Ii g~mad6n holobl,lstiC:il.iPttwe ser indiferenciada 0 &~I .Pl1!rtt d>c un oonidiCiforo, y [iene dos formaal) sincronogena: rodos los conidios se forman al IDLi.s:mo tiempo, como en el ~e:net"!D Cephaliophom,. y2)s~;mIf'odiil]: ,~n la CU1i1 se constituye un solo couidio ':I la celula conidiogsna crece lenramente para general uu nuevo conidio; estemecsnismo se puede repetir mechas veces, par 'ejerul[.llG D~sd,!lem (,fig. 3-27). s'e CWGcen l:iong;ospi.gmemados (jue prcducen los COIlicli os a traves de un para holoblasrieo (poroconidios) de forma simpodial, como Bip,olan',s:. Cuando nn

I:ig. 3-2:5. h'safiuJll sp'~ presefil~r<l dEl'con,idio~ :sew"!lIii'l,I- conidio holoblasticc genera el siguienre, tambien

nares, por el. rnismo mecanisme, se for:rna Una cadena

28 • SecCi6n I Aspecto~ ';Jenerales

RadulcsporllS

Fig. ;1-24. A~.;)["QdUC1:iQn OIr.ex'IJ~c:la par &impod!~IM~')or<15 ~Sporo~hfix). ~Jv1l)dli'rnc,ada de Gmm 5,ljpa,rieuf de mycQIQgiemedic~le. Pa.ris: Institut Pasteur, 1980.)

Co n idiogenc:sl.s blasnca

Es(ii dada PO[ gllrmd6n, como en JJs levaouras, y hay des modalieades bask as: hol.oMastica y eneeroblastica. El mecanisme de Ionnacidn de la holobliistica es semejsnte al de iIlfiar un b1i~6n, y

EsrO~ODOQUIO

IEs1roma bOistlar

Mk:e1ij subyacenle FUS8{ium

~ .'

I ._ •.... -.. "'-~

~.- -

I -r.

IMice.io ~

Cy,~:ndmsporhfm

Fig. 3-26,. =s.ql.!~mll del esperodequio 'I el ZI(.ervl.llo, {Modifi(ad~ de (OUF5 supefi~!Jr t;I~ ffi:fwlog,ie me.d:I(<!I~. Pa,f'i:s: I t'I~tiitu~ P:a~'teur, 11980J

r r : t..____,}, -

Hongos II! 29

par ejernplo Microsporum (fig, 6-35, cap, 6). De manera general es posible decir que en algunos hongos melanizados de pared gruesa, a rnenudo estas celulas se denominan clamidosporas.

En la talica-artrica, el filamento se convierte en una aerie de conidios que son liberados en la maduracion, y se distinguen cuatro tipos: boloartrico, enteroartrico, endogene y sarcfnico (fig, 3-23).

En el tipo holcartrico, la nifa simplemente se fragmenta (separacion esquizolftica) en una serie de conidios, por ejemplo Geotrichum (figs, 3-28,3-29 y 31-3, cap, 31). En el enteroartrico, Ia hifa. genera de manera altemativa dos clases de celulas, una desarrolla pared gruesa y se convierte en conidia y la otra rnuere y se sacrifica

. para !iherarJQe:"c0~jdiq". 'w,,,6Usi::.), por ejem'que 'puede ser acropetala, donde el conidia mas" ., p16" Coccidioidis'{figL jJj'c3, 16,10, 16~11, 'cap,

joven es el mas distal. 16). En el tipo endogene, la hifa forma paredes

En la gemaci6n enteroblastica, las celulas internas que rodean el micleo y cada una se COD-

conidi6genas son mas diferenciadas y a menu- vierte en un conidia individual, la pared original

do dan lugar a conidios en cadenas can sucesion se rompe y los conidios se Iiberan, por ejemplo

basipetala; eI conidio mas joven es el mas cer- Aureobasidium (fig. 3-16)- (fig. 31-26, cap. 31)

cano a la celula conidiogena. Hay dos formas: En el tipo sarcfnico, la hifa aumenta de espesor

fialidica y anelfdica: y genera tabiques transversales y longitudinales, y

L Gemaci6n enteroblastica fialfdica, En este cada celula es convertida en UD conidio, por

Fig. 3-27. BlDo[ansy Dreschiera sp, disposici6n simpodial.

caso, en el sitio de salida del conidia queda ejemplo Botryomyces.

como remanente un collarete a traves del

cual se producen otros que pueden quedar unidos (catenulados) 0 en un moco (no catenulados), como en Aspergillus (figs. 23-6 a 23-9, cap. 23) y Phialophora (fig, 14-13, cap, 14), respectivamente.

2, Gemacion enteroblastica anelidica. Al aparecer el primer conidio, este deja una cicatriz y ;os subsiguientes seforman a traves de esta y dan Lugar a una zona en anillos, par ejemplo Scopulariopsis (fig. 31-16, cap, 31),

Con idiogenesis talica

Los conidios se forman de un elemento preexistente, pues en la parte terminal 0 intercalar de una hifa se forma un conidio despues de la constitucion de un tabique. Hay des forrnas: h010t3.1ica y talica-artrica (fig, 3-23).

En la holotalica, el clemente completo se convierte en un solo conidio que puedc ser Iirnitado por un tabique y sacrificar su parte veci-

na (separacion rexolitica) 0 suceder de manera Fig. 3-28. Cladosporium sp., esporas produddas por

alternative fusion de tabiques en la base conidial, gemaci6n.

30 II Secci6n I Aspectos geler,JIE'~

~

J\

J) Aruo.sporas o

fig. 3-29. fu!pmdlu.cciofl asexuadii por artrospcras (G-eouichum). (MQdific;ada d@ COUtS supet'i!~lJr de m)'co- 1'::'!<1:'" 11\4dlo;a,ll!. Paris:lrlsHtu[Past~ur, 19-0·1

Parafacilitar la identific~ci6(1 de Ins CC[l]rues de manara p:actiCll, SiB paede senalar qu e es terminal si se origina en el extreme distal de Ia hifa, intercalar, si ..,ooed'e 'ell alg(in pu.nto a 10 largo de la hifa; b.asi~H~to, si el conidia mas jnven se sncuentraen la base de. Una cadena de conidios; ac.rOpeto, cuande el mas joven se locaIiza en el extreme distal, "j si.ucr6geno, si Vru10S conidios se desarrnllan at mismo nempo a psrtir de la c6lulac()md:ioge!Ja.

Moclalidiades mas. frecuentes de raproduccion asexuada

Se pueden senalar las siguiernes: bWIo.S;pO .. ' ras, s:irr,pocbilospora.\ fialosporas, anelosporas,

Candida

pcrosporas, aleuriosporas y artrosporas (figs. 3~29 a 3-37).

Blastosporas

Coradios formados po.r gemacion 0 blastogenesis die la celula conidi6gena, que permanece fija; estes se observan aislados, en racirnos a cadenas, como en las levaduras (figs. 3-23 y 3-30) (fig. 19-7, cap. 19) y Cladosporium (fig. 3:28).

Simpodulosporas

Conidios que nacen PO! gemacion, pero La celula coradicgena sigue creciendo despues 'de 1a formacion de cada conidia, 10 eual da el aspecto de ciempies: las esporas se Haman simpodulosporas y a veces preseruan.un 0~q.ueiJ.o denttculo . que las une a la celula comdi6g{r-ll{Y'ilclquieren ' el aspecto de escofina, en cuyo caso se Haman radnlosporas (figs. 3-23 y 3-24), por ejemplo en Beauveria y Sporothrix schenckii (fig, 3-31). Es tnuy clara la disposicion simpodial en Dreschiem (fig. 3-27).

Fialosporas

Se producen en una celula conidi6gena con forma de florero, por 10 que se llama fialide (figs. 3-23 y 3-32). Tienen una parte ensanchada en su base, un cuello terminal y un collarere. Las fialide$ varian con el hongo, pero en cada uno se C-aractelizan por su tamaiio, forma y actividad 0 disposicion constantes (fig. 3-33). Es posible que se encuentren directamente en la hifa vegetativa, . como en Phialophora (no catenulada) (fig. 14-13, cap, 14) 0 que las porte un conidi6foro cornple-

Cladosporium

\)

~.

Fig. 3-3,0. Reproaucci6n asexUi)JdOlpOrbl~stosporas. (VlQdH'iGlda de COUiS superieur de mycologie medicale. Paris: huti:ut PastF.~~, 1 \lSO.)

.' -- .... --~- ~~-----

!

f:_:-'

Fig.3-31. S, 5chenckii, slrnpodulosporas.

jo, coino en Aspergillus (carenulada) (figs. 23-6 a 23-9, c!lp .. 23) y Vertidllium(fig. 3-34). ..

Anelosporas

E1 primer conidia aparece en la extrernidad de la celula conidiogena como un simple ensanchamiento, pero cada nuevo conidia se produce por gemaci6n a traves de la cicatriz en forma de anillo

Fig.3-33. Fialides de Penicillium sp. y Aspergilll.1S sp,

,IL.,

l'langos _ 31

Penicillium

Pflial~phorl1

Fig. 3-32. Reproduccion asexuada oor fialosporas. (Modlficada'de (ours superieur de mycologie medlcaIe. Paris: Institut Pasteur, 1980.)

que deja el conidia precedente, de ahf el nornbre de estas esporas (figs. 3-23 y 3-35); se observan, .p'~,j; ~j~nii.;{o;·~n ":'>::(~~;da~iopsis (fig. 3-36).

Porosporas tporoconidios, dictiosporas, [ragmentosporas)

Conidios de pared gruesa y pigmentada con divisiones de tipo mural (figs. 3-23 y 3-37). Tambien

Fig.3-34. verticiuium sp., aspecto de la colonia y reproduce/6n por nalides.

32 • SKc16n I Aspectos general@'S

Cicatriz en 8Jnillo

Fig. 3-35. REprodlJ~ci6f1 asexuada por anelosporas ()Cl:)pliroti;:)tJsi~). (Modmcadil d,~ Cours superieur de

. my'QI09iiHn@dhc~i~ Daris:ln$titut Pa~mu .• 198.0.} ••• , -

se llaman dictiosporas y se generan a traves de un pore de la celala conidiogena EI bongo puede crecer en di ~d6[1 distal a partir de loa cicatriz del conidio precedents y adopter un a:lpec:OJ simpocial, como en Ulodadium (fig. 3-3&), 0 ei eonidio puede dar lugar a Illl'evos coaidios y constimir cadenas, POI[ ej:::mpJo en Alt2l"iW.!'ia

(fig. 3-39). r

A leuriosporas

Se fom<ln pCI:!' simple ensanchamiento de la extremidad de la celula conidiogena, que da lugar a Ull solo roruilio (figs. 3-23 Y 3-40). Pued~ SeJ' UIJ~-' ce1\!11<1reil {mic[O.a1eurio.sporillS 0 microconidies) 0 pluricelulares (rr;.aC-l'oaleuriosp eras 0 mscrocoai-

U/oeIadil1m

/

PmQ J

~

Fig. 3-37. Reproducci6n asexuada por porosporas 0 dictiosporas. (Modificada de Cours superieur de mycologie rnedicale. Paris: Institut Pasteur, 1980.)

Fig. 3-36. ScoptJlarlOP5iHp., reprocuccion por anelespor<ls.

dies), por ejsmplo Trich)tecium, Sepedoniu:oJ! y dermarotiros (figs. 6-1, 6-2,6-23, cap. 6).

Fig. 3~38. Uloc!adium sp., presencia de porosporas sirnpodiales (40x).

Fig. 3-39. Alternaria sp., presencia de poroconidios 0 porosporas en cade(l2s (40x).

Artrosporas

Estas son conidios que se producen por la simple separaci6n de tabiques en lahifa (figs: 3-23 y 3-29); el aspecto recuerda los vagones de un

Crrvsospotium

trichotecium

Fig. 3-40. Reproducc'6n asexuada par aleuriosporas. (Modificada de (ours superieur de rrycalogie medicaIe. Paris Institut Pasteur, 1980.)

-

-J~I

HOflgOS iii 33

Fig. 3-41. Geotrichum sp., presencia de artroconidios hoioartricos (25x).

ff;lJ"OGarril, como en Geotrichum (forma holcartrica) (figs. 3-41 y 31-3, cap. 31) y Coccidioides (forma enteroartrica) (figs. 16-3 y 16-10, cap. 16),

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.: "Taxo~:6inia 'j clasXfi~~·~,i6,~:;·:.::r .

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La taxoaomla ddos hongosse habasado prin- morfos. NgullOf.l bongos presentan vari?,S t~po"

cipalmente C.1. criterios morfolcgieos y en his independientes de propagacion a:n~mbrfa y

caractensrieas de las estructuras d~ reproduccion entonces son nombrados sieanaraorfos. Un

sexiada, sin que haya necesidad de analizar los, b.alJ!go~eleomorrfo y uno smanamorfo pueden

au1.Qllltoobiog,u:ffi1ioos (I fis:Ql6giCGs! sel ';'0 en 1<1.5 tenet SIlS p;!'Op.iOIi: norobres, po~ ej:e[l],pl0 l~ espe·

levaducas, en las cuales tillites c:~~..ct:eristicas son eie Petri.!llUdium boy.d.i.i (amhj~:n S(!:COrn4Ce:C©fi

in:ip6i,tilinie;i. ,Hoy t;r. dfa P,a,:....a iJ"~allsi~ ~lX(J'riOr.!.ci ~,'j·:~f:iom.b.r,f'; 'sinan~mmfo de Gl>'.Jphil.;in -eil,!'nO"j',· cos, de identificacion y de dJiagn6s.ti.co, se hacen ". 'ph~£rn YSc.etksporium aP.iosperml~m, aunque

indispensables Los estudics moleculares que estas tres denominaciones se refieren a1 mismo

permitan analizar el aic~.dQ desoximbonucleico arg;amsm.o.

(DNA) delos orgaaismosfrmgicos de manera La nomenclstura en nri.co1Jo.gfae{;t<llb[ece

parasitariao en eultivo. las reglas para usar un lengiU<'-je deacep:w;ion

El reine ds los hongo$. (Fung,ae) se compone universal (C\ladW 4"1); aqtle.Ua denomina a los

de una escsleraraxenomica que se presents en el hcngos COil eos palabras en laun:elg6n.ero, COrn

cuadro 4- l. La" familia esui compuesta de gene- mayusmda 13 primera letra, ]I la especie, que se

J,ct$ Y esto's ooaH,i.~lJie[l las espec:ies. Elgenero eS eseribe COD mi.ml~cu]a$;"rob:().s. debeo if e:.mt CUf-

unbinomo que €:Stili f{)rr.noo® pOI el nombre del S~Ya$ (iffi!:uca~) 0 sub:rayad8lll. CL!lnndo hay F1cCe-

gene:ro y el epfreto especifice. Algunos bongos sidsd de mencionar varias especies del mismo

tiene.n un ciclo de v-ida caracte:rEstico y pueden genero, es recomendable escribir complete este

eneontrarse como organismos con morfolcgfa ultimo la primera .. ez y en 10 sueesivo unicamen~ille:re,mie (pleomcrflsmo). te su letra inicia! {po ej., Cal1d:id<l pseudolropica·

Se dijo qi.ie ]Q~ l:longG~ se nam;1ntcleo~TI!or~ lis, C gHiUhmmmd.ii, C. kr,us~O_ p~~ rd~'[i~s:e .~

fos si trenen reproda.;.cci6n sexuada y anamorfos una Q varias espeeies sin determiuerlaa, se utili- .

si .es~a es asexuada Cuando presentan amhas. urn. las abrsviamras sp. y 3pp.,re3pectiv~menw,

medalidades de reproduccion se Haman holo- despues diel genero (AspergiUUJ spp.).

Las primeras clssificaciones se basaron en

d estudio .m~I.[io16gico de las esporas y sblo inveseigaeiones mris recientes maestran mejo:los mecanismes de formaci6n de eS~S esttueturas de repreduccion, pues los tt;tcanismos de espomlscion SDn los que permnen distinguir las famiiias, Las tecnicas gB:n.6lt.iJcas que, incluyen se.cuE.1lJ::::ias de DN..'\ y a!cidorib~[[!JJltlci.r;o (ru't~),

, hoy se estrin utilizando para. lcgrar una clasificacion naturalerure este muy diverse grupo de orgsnismos y tratar de solucionar el problema de Ia def.inic~6:n w"1.on6mica de grupes s,epaHCios por caJ.r~.Coteris:ticM fe!l!iQt~p~t:l3JS_

Division:

(Emnyco£.a) ~AsOQjJ".yccrillll) (J?h~~~its) (Etlffiui3!les) (O),rn.DO!aosca(;e.:le) (NaJl11 iztio)

$ubdi v;isi®!l Cla.~~

Orden

Faitliha Genera

Es~cie

(N'1n:~l:aiil inc,w-,.lllla)

34

CLASIFICAcrON GENERAL DE LOS HONGOS

El reino Fungae corrprende siete divisiones (cuadro 4-2), las cuatro primeras: Myxomycota, Chytridiontycota, Oomycota y Zygomycota, son hongos inferiores y la ultima division corresponde a los hongos anamorfos antes llarnados deuteromicetos 0 Fungi imperfecti. Ahora se denorninan rnitosporicos los hongos sin reproduccion sexual conocida y meiosporicos si se les conoce, Las divisiones Ascomycota y Basidiomycota corresponden a hong os superiores.

Los hongos inferiores se caracterizan Ror presentar'- fiia~~ntos g;uesos" ce~ocit1~bs -O~.B~o 'tablcados) -muftiplicaci6n - ~s~xllada-p-Or~sporas eiid6gf,nas.·i-ieproill.iC:i;ioll.~F.yliiidA-P(~~-;Q~SPOras F dgOs'lJOraS" (ng.o..J fg 'Y 'fj 9,c.i.p:"'3Y"SC' conocenalguiios hongos no clasificados que tieDen cicIo de vida reducido can endosporulacion, como Pneumocystis carinii (P jirovecil) que se ccloca todavia en zigomicetos y Rhinosporidium seeberii que se considera ahora un protozcario acuatico (cap. 30).

Los hongos superiores presentan filamentos

tabicadosYmulliplica-C;6ti-a::i~xllada~po.r:~P'9S~~. exlemas-(conicllosfaisladas oen'cad~nas 0 dispuestas en conidioforos. La ie.produccl6n'"s~x.~~~da "ocurre par 'fusion de dos espOl:~isde sexes diterentesCOJ1' f Ci6iiic i611c!eiiriii' fis e b"jniicieada 6 dJciribti:por lo"que-es'tad.!visi6j{ tambi6n'se d~~offilna-D~kary'orrlyc(ia: y eTe·siaao·a._~§?rl-~!-

Taxonomfa y clasificacion III 35

Superreino

Reina

Division

I

'1

) Fungae Eucariotes ~ (Eumycota)

i1;!yxol'1.ycota Chytridiomycota ' Oomycota Zygomycota Ascomycota Bosidiomycota

Deuteromycota (Fungi imperfectii. Los nucleos del filamento binucleado se fusionan y dan Ingar a un huevo .quf despues de la reduccion r.mm6 ticaproduce basidios con cuatro basidiosporas (Basidiomycota), 0 ascas, que a su vez tienen cuatro a ocho ascosporas (Ascomyco;a) (figs. 3- 20 Y 3-21, cap. 3). En estes ultimos, la gerrninaci6n ocurre en un filamento haploide (talo 0 rnicelio) 0 en una celula gem ante (levadura).

Zigornicorina esta forrnada por hongos inferiores perfectos que muestran micelio cenocftico, con reproduccion asexuada poresporangiosporas y sexuada pm cigosporas. Por 10 general, la clase Zygomycetes comprende bongos saprofitos que se encuentran en la naturaleza, como mucorales, 0 en reptiles, como Entomoftorales (cuadro 4-3). Los primeros producen mucorrniccsis y los segundos, entomoftoromicosis (cap. 22) .

Subdivision Close Orden Familia . Genera y especie
{ M"W', M. circinelloides
Mucoraceae Ahsidia, A corymbifera
Rhizopus, R. oryzae
Rhizomucor pusillus
..... L....
Mortierellaceae Mortierella woifi!
Mucorales Cunninghamellaceae Cunninghamella bertholletiae
S aksen aeaceae Saksenaea vasiformis
Zygomycetes S ynceph alastraceae Especie de Syncephalastrum
Choanophoraceae Cokerontyces recurvaWs
Zygomycotina
Entomophthoraceae Conidicbolus coronat!iS
Trichomycetee Entomoftorales Basidiobolaceae Basidiobolus haptospcrus ~F~~ pmett~ {:rexlffiad~}. ~'~Fase imperiec~a (~~u~d,:.o,

./\f

Clase

Plecromycetea

Familia

Neotestud{t:J;(I'msaUi Leptosphaeria se:l1eg1l1en,s/s PelrieUidium boydii

,. .

~ I'

A namarfo+:

Cal'ulfaa piMr...:oMtrop'i(;-ali~ C gJ;!m:f~rmoItd~i

c. kruset

c pr;m;rp8 ilosis

H'iSUjp},(1,$mtL .::apmf.tlfwlt [J.[aswmytes ,de:Hootitidi$ Espec'~11; de.l'}.fCMph)'t.QIl'l. ES@(llC~~ ,dB .M~:Cl=pO'P..rm

J Testudinaceae < ~.l~QSPOraCGae LM)CI;QaSCaCe~.e

Pleospcrales

Borouales

JE'''.'OO'" l Gymno"""".

. !

i' .

'-:-L~ .

CLASIFICACI6N GENERAL DE LOS HONGOS

El reino Fungae cornprende siete drvisiones (cuadro 4-2), la~ cuatro primeras: ;Ylyxomycota, Chytridiomycota, Oornycota y Zygomycoia, son hongos inferiores y la ultima division corresponde a los hongos anarnorfos antes Ilamados deurercmicetos 0 FUI1gi imperfecti. Ahora se denominan mitosporicos los bongos sin reproduccion sexual conocida y meiosporicos si se Ies conoce, Las divisiones .Ascomycota y Basidiomycota corresponden a bongos superiores.

Los hongos inferiores se caracterizanpor presentarfilamentos gru~sosce·~oati;bs=Q __ I!O -i·abiC·ados, ·multrplicaci 6;· asex;_lada··por~sporas enGagen as. y.ir::pro(I1JCci6n ·s~r.!l.iadl·.·.r;i-oo~ipoias ·6-c:igcisporas·'Cflgf:.J· ,-gy 3·~·f~\ ·c.?:p:"3j:"-Se· ccnocenalguiios hongos no ciasificados que tienen ciclo de vida reducido con endosporulacion, como Pneumocystis carinii (P jiroveciii que se coloca todavfa en zigomicetos y Rhinosporidium seeberii que se considera ahora lm protozoario acuatico (cap. 30).

Los hongos superiores presentan filamen~?J3-., tabicados y mtlmpllc·icTcS[la~exuadapor~~i.Qi3~. ext"emas··Ccorudlos·):"ais,adas 0 e·ncaden·as 0 dispuestas en cohidioforos. La r~producCi6tl-s~;"_u~daocurre por fusion "de dos esporas de sexes illrel:eutes·con~rOiiiiaclon Cleiii1ifaseblnllc"ieada 60.iciiioti,pOI lo···gue esya"divfs16·;;·t~~bii~~se d~~;·illin ~bik~y·omY~ota: y~eTestadoa~~<§:?~~;·

Taxonornia y clasificacloll II 35

------_ ... __ .-. __ ...•

SliP erre ino

Reina

Division

. ~ungae

Eucariotes -< (Eumycota)

Myxomycota Chytridiomycota . Oomycota Zygomycota Ascomycote

B asidiomycota Deuteromycota

Deuteromycota (Fungi imperfectii. Los niicleos del filamento binuc1eado se fusionan y dan lugar a un huevoque despues de la reduccion G0m~,: ticaproduce basidios con cuctro basidiosporas (Basidiomycota), 0 ascas, que a su vez tienen cuatro a ocho ascosporas (Ascomycota) (figs. 3- 20 y 3-21, cap. 3). En estes ultimos, la germinacion ocurre en un filamento haploide (tala 0 micelio) a en una celula gernante (levadura).

Zigomicotina esta formada por hongos inferiores perfectos que muestran micelio cenocitico, con reproducci6n asexuada por esporangiosporas y sexuada por cigosporas. Por 10 general.Ia clase Zygomycetes comprende bongos saprofitos que se encuentran err la naturaleza, como mucorales, 0 en reptiles, como Entomoftorales (cuadro 4-3). Los primeros producen mucormicosis y los segundos, entornoftoromicosis (cap. 22) .

Subdivision

Orden

Close

Zygomycotina

Zygomycetes

Trichomycetes

Familia

. Genera y especie

I-

i Mucor, M. circinelloules <.. Absidia, A corymbifera l Rhizopus, R. oryzae

! Rhiiomucor pusillus

L

Mucoraceae

Mortierellaceae Cunninghamellaceae SEksenaeaceae Syncephalastraceae Choanophoraceae

Mortierella wolfii Cunninghamella bertholletiae Saksenaea vasiformis

Especie de SyncepT,alastnlm Cokeromyces recurvatus

Entomophthoraceae Basidiobolaceae

Conidiobolus coronatus Basidiobolus haptosporus

i

L-_

~ .

..... + i

Los tricornicetos se eucuentran como parasitos simbiontes en el Intestine de artropodos.

EI grupo ascornicotina cornprende hongos perfectos; presentan hifas can tabiques, 0 SOD levaduras; muestran reproducci6n asexuada por conidios y sexuada par ascas, como las levaduras de la clase Hemiascornycetes, que se pueden desarrollar de manera aislada 0 en un cuerpo fructifero 0 ascocarpo, Si este ultimo tiene forma de botella, se llama peritecio; si es cerrado, cleistotecio, y si es en copa ° disco, apotecio (fig .. 3-14, cap. 3). Los evascomicetos se dividen en loculoascomicetos si sus ascas tienen dos capas, y en plectomicetos, si poseen s610 una (cuadro 4-4). Una clasificaci6n mas actual y simplificada se presenta en el cuadro 4-5. En la clase

. Endomycetes, muchos hongos son unicelulares .~ .. ) COcl1prbll.l.ClJ· e)!rlCiynl: grupo de levaduras, producen celulas gemantes y seudofilamentos Los evascom:icetos tienen talc reptado 0 son unicelulares durante algunas partes del cielo de vida.

Basidiomicotina esta constituida por macrohongos perfectos que incluyen setas (cuadro 4-6). Tienen hifas con tabiques 0 son levaduras, Ia reproduccion es asexuada por conidios, 0 no presentan estos iiltimos y rnuestran reproduccion sexuada por basidiosporas. En general, son hongos sapr6fitos del suelo y plantas. Pueden a no tener basidiccarpo para sostener los basidios.

Los hongos anamorfos (deuterornicotina, adelomicetos 0 Fungi imperfectiy comprenden la mayoria de los hongos patcgenos; presentan £11amentes tabicados 0 levaduras, SLl reproduccion asexuada es por conidios 0 esta ausente (cuadro 4-7). Son hongos imperfectos que no presentan estado sexuado (teleomorfo) 0 se desconoce. La mayoria pertenecen a Ascomycota y pocos a

Clase

Orden

Endomycetes

S acch aromycetales

Evascomycetes

Onygenales Eurotiales Microascales Ophiostomales Sordariales Dothiderales

Taxonornla y clasihcaci6n jI 37

Subdi vision

Close

Orden

r /--;ilObaSidi21eS

Basidio- <I Heterobasidio- tUStilaglnaleS

mycouna I mycetes Holobasidio-

L. mycetes

Basidiomycota, segun su afinidad taxonornica, ya que esta puede establecerse por ultraestructura; los primeros tienen una pared de dos capas de celulas, mientras que los segundos son multilaminares .

Estes 80~'1' bongos aitiJ1L;.if1J.ii'[~:~ll~· ~'~1'~;i_ficados de acuerdo a su modo de crecirniento 0 reproduccion en: levaduras (blastornicetos), hifcmicetos 0 IDahos (hyfomycetes) y coelornicetos. Las levaduras son blanc as 0 rojas, generan enfermedades en seres hurnanos 0 viven como saprofitos en el organisrno. Se identifican por sus caractertsticas fisio16gicas 0 morfo16gicas. Hay tambien hongos levaduriforrnes con celu[as melanizadas que se Ilaman levaduras negras, aunque casi siernpre producen micelio verdadero y son hifomice.os.

Los hifomicetos (H yphomycetes) son rnohos con micelio tabicado en cuyas hifas se forman las esporas asexuadas 0 conidios; a veces se presentan en conidioforos simples 0 corernios." Corresponden a la clase Evascomycetes y la mayoria tiene afinidad par la clase Ascomycetes.

Los coelomicetos (Coelornycetes) son hongos rniceliales con tabiques y reproduccion asexuada por conidios= que se forman en un cuerpo fructifero constituido pOT un estroma en forma de saco 0 picnidio, * 0 en agrupaciones rnicelianas de tipo acervulo, * mientras que el resto del miceIio permanece esteril.

CONTROVERSIAS TAXONOMICAS

Por 10 general, las enfermedades fiingicas se denorninan con el nombre del hongo causal y el sufijo -osis 0 -asis, como aspergilosis, criptoco-

• Acervulo, conidia, corcmio y picnidio equivaie a acervula, conidia, coremia y picnidia. Uri buen nurnero de micologos utiliza Indistln.arnente estes terminos.

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,cools, hjst@~r1l!sm.!l>S~s,orucQ.itiJ;co~is y piti[]aB'~s. E] s1Jfijo -sis s.ignifiUl."e,stooJO debide 8.", POl' ejemplo fusariosis se cle&e a Fwarn~m. Por este ma,Ei,vQ, 1;'1. denominaeidn de. !l!)a enfermedad pue-

GJ~lero '} .e.sf·~'C,ie

{caJ~d!dOlalbiCtl~ E~aie de Malasi!\e~ia

E. flP .. e.CiC. db .'~."·.I,)! .. P.~.Q. C.OO. C1t~.· I!speclc de 'Ir!(;JiosporQr.

'I'om.l(}psis g.lt!b.r"tlta:

Ep!rde~J.l.hJi1!mficc;cO'.$H!t!. Esp~ci~ de: Mic~'O\1po\!'~~m

. Espacie die Ihc.JjQphy!Q:<l

{ E8p'¢oie de A$pergill~:l' ~ ~

. E~pecie de Penicilli tiro:

Especic' die FUMlri~m:

Esp!!:cie d~ Bear,werfa E-SFecie die Ver#\Z'rm~ti'tj "~'Sp~ci.e dl~ p;malophirJr!t . lEspede de C{adwpo.rit~ Es:pecie deAlt&rnLll'ia Esp¢cie de Aur-ecbasir[ilml:

d~ ca:rn.biar, lsi el rwmibre de] ovgmslJ](l C<!IIUsa] se mod]fica como r-e,smb,do de una re'!f"]:sionta.'i;;onomica. Casi siempl'l:), ·em hongosdemetiaeeos, la t1rxQ;nomia.es iI!i~tablril 'j controversial, PO! ejem-

Ad.iasp!..I'omicosis Aspergilo sis E]ag~Ecm:i;s eJr.did\i)&iS!CMiJ(].i~di:a·sisi Cb«id.icioomWosis Cri!plOQiJoD~is Dem!Monrosi:>ltii'i8s

l, ..

Es.pomtriCQsis

F<!v!J:S

Lobomicosls ?ar~{Jcc~dio:~d~.micosi~ .P.iJtiri~sis i(tiii,a) ver,l1lcQJ.o.r Pie0rn ne;gr~

Pie~~ ~1~ll.nCa

QI;g¢fiorc

:0'n~fl ilNbricattl :ril"1~a fJj:S'f'a:

ChrysospDriu.de.sptlcie de Emmonsio. ~s.pecie r!leAspe,rgili!i$

B. dermatiridis

'€specie de CewUJ'(I,

C uw:;",itiif •

C ]'J:eoiOmtil1"l3¥m. l1f;(J/ormGns Ij var. g,altii Derma8:ifttosd.e los .~inM'O;S

Epidernul'phiyto'l1, i'lllicrospon.tl1j. y mchoph:yton

S. scherlckii

Derma[ofitw:fs· c.,-6J~ca DOD ·escU~Il]acs LacilZI:a (lo~} li')ooi

P; brasiliensis

M .• 4rrjw (~spEm~ d:~ Ma[as.M'1:il» Piedwia horot<'l~~e~ pel~ EspE.Ci,~(!lelri(;-hrup.oF(m en pelo Dermalofib;lE:i1l iob!ll1alo.ria profunda T. concemticwl!

Porma <:1iI~nea, m~cl.i!l!IF par ~rrutt1~ceo, (ac,e,pt~doo l!imi'lrofe .. ['llIes no es !ll:ffiJaJ

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':;' L: ::'.~ ~ ~~.f) ..

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L_j' . i

"J t

Histoplasmosis Histoplasmosis capsulatii Histoplasmosis duboisii Histoplasmosis [arciminosi Peniciliosls marneffei Cromoblasrornicosis

Americana 0 clasica

Africans

Linfangitis epizcotica

f

I

P marnefei

Dermatosis verrucosa con' celulas fumagoides Nornbre generico para micosis par demariaceos Hifoinicecos hialinos,

infrecuentes Infecciones PO{ . zigornicetos

Termirr~ que inclu ye no 3610 el genera Mucor, sino el orden Mucorales como Rhizopus

Entomoftoromicosi. Enihomophthora

-, Basidiobolomicosis . . Basidiobolus .Conidiobolomicosis Conidiobolus

Feohifornicosis

. Hialohifomicosis

~ ••• < _ r"", _

Mucnrmicosis (rnucoralomicosis)

plo el hongo Allescaeria boydii (asi llamado en la decada de 1970) cambio a Pctriellidiuni boydii y Pseudallescheria boydii en un tiernpo relativamente corto, 10 que dio lugar a diferentes nombres en la Iiteratura micologica: allescheriosis 0 allescheriasis, petriellidiosis 0 seudallescheriasis. La misma especie tiene un estado anamorfo que se conoce como Scedosporium apiospermum y entonees se afiadio el sinonimo scedosporiosis a la ya confusa terminologfa.

Tambien el nornbre del hongo y Ia terminaci6n -isis pueden Ilevar a terminus ambiguos como sucede can candidosis 0 candidiasis. Per 10 regular, el snfijo -osis constituye una descripci6n colectiva para descripciones patologicas no pat6genas y es un termino aceptado para un grupo de infecciones; por eso, hoy en dia para evitar neologisrnos se considera una mejor opcion utilizar, por ejernplo: Ia patologfa A se debe al hongo X (onicomicosis debida a Scopulariopsis

~axonomfa y dasificaoon ill 39

brevicaulis]. Hay gran mimero de: eufermedades micoticas que han side aceptadas y otras que permanecen en controversia (cuadros 4-8 y 4-9).

El termino seudornicosis se utiliza cuando 1a enferrnedad es causada per una bacteria 0 un actinomiceto, perc que por tradicion en Ia m.colagia se ha estudiado en el grupo de las micosis, dada su evolucion cronica y la posibilidad de producir filamentos en los tejidos 0 cultivos que se confunden Call hongos, como actinomicosis y nocardiosis. 21 termino parafungico se ha ap.icado B,: organismos rniceliares 0 unicelulares que causan infecciones que desde el punta' de vista clfnico 0 histo16gico se parecen a los hongos, como Phytim insidiosum 0 Prototheca. La nomenclatura cltnica de las rnicosis debe tener arnplia fiexibilidad que pClnllta . acornodar la

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':nueva informacion, J,t:;f C01'nU:"~[f J,"u\)cle.rr:~izRci6n

de Ia vieja terminologia, Sin embargo, se debe tratar de crear una nomenclatura estable, consistente y dinamica.

De una rnanera formal, para estudiar la terrninologia de las rnicosis se ha reunido periodicamente eI Councilfor International Organizations of Medical Sciences celOMS), que es apoyado por la Organizacion Mundial de Ja Salud (OMS), y tarnbien existe un Cornite de Nomenclatura en la International Soder} of Human and Animal Mycology (IS;{AM).

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REQUrSITDS

PARA UN LABORATORJO DE MKOLOGIA

I. Sala adecuada para recolectar muest.ras.

2. Poseer los instrurnentos para realizar anali--:::" .: ~,ilf.Jit~r;'L;::r.;-;:::.ul livas, estudios his~opatoM··.· giccs ~' iJeLicHi\.:;aci6n de los hongos,

3. Implemeruar tecnicas de busqueda de anticuerpos contra hongos patogenos y oportunistas,

4. De manera idonea, can un 1aboratorio de biologfa molecular para el esrudio delscido desoxirribonucleico (DNA) de los hongos.

5. De ser posible contar con medidas de bioseguridad.

TECNrCAS Y METOOOS

La confinnacion del diagnostico de micosis se basaen una orientacion clinica adecuada y en I1!lS I pruebas de laboratorio mas convenientes. Esto depende sobre todo de las tecnicas apropiadas de recoleccion de material anatomnpatologico para estudio micologico. El metodo debe tener las earacteristicas siguientes:

1. Poaer de manifiesto el parasite err 12s lesiones.

2. Permirir el aislamiento del hongo par cultivo directo 0 por media de animales de laboratorio.

3. Identificacion del hongo.

4. Investigacion de las reacciones inmunitarias del huesped.

ESTUDIO (ON LUZ DE WOOD

Cuando se dispone del equipo necesario, SueIe pracricarse antes que el estudio micologico,

,.

- : ...

mas no 10 susriruye. Es ritil en algunas .nicosis superficiales. Se reaJjza en un cuarto OSCu~~).y s,e utiliza una Iampara de luz ultravioleta que emite radiaciones de UlJ'OS 366 nm y da fiuorescencia reconocible can facilidad (cuadro 5-1), (fig. 5-1) (fig. 7-12, cap. 7).

RECOLECCION DE MUESTRAs ' .-

fVlaterial requerido

La recoleccion de muestras es sencilla y el material utilizado es barato y esta a1 alcance de. todos; generalmente el instrumental metalico se esteriliza f:. ]14. flama. Se usan:

1. Pinzas de depilar y tijeras fmas y fuertes,

2. Cucharilla de Brocq u hojas de bistun.

3. Agvja de diseccion.

4. Cajas de Petri 0 dos portaobjetos can envoltura estenl (sirven para obtener y conservar las muestras) Para el transporte es mejor usar paquetes de papel.

5. Portaobjetos y cubreobjetos.

6" Asa de aluminio 0 platina, de preferencia recta; se utiliza para sembrar y recolectar productos.

7. Matraces Erlenmeyer,

8. Tubos de ensayo.

Tiria de la cabeza Microsp6rica favus Tricofitica

Pitiriasis versicolor Eritrasma

Verde Amarillo-verde-sa No hay

Amarillo- verda s a Rojo coral

40

L

I·

e......

Fig. 5-1. Flucrescencia rojo coral en eritrasma (Iuz de

Wood).

9. Hisopos esteriles, espatulas, torundas.

10. Cepillos.

11 J eringas de insulina, 12 Frascos

1]. Solucion salina, formol y alcohol de 70 grados.

14. Medias de cultivo: agar glucosado de Sabouraud con antibioticos y sin ellos, medio de tioglicolato y, si es posible, medics colorimetricos para levaduras.

En un laboratorio es muy conveniente contar con never a 0 refrigerador para conserver medics, cultivos y reactivos; autoclave; estufa de cultivo; microscopies, de los cuales son muy titles aqueHas que cueutan con campo oseuro, contraste de fase y fluorescencia, 0 los de varias cabezas para la ensefianza

Obtencion de muestras

Para realizarla de manera adecuada es necesario pedir al individuo que suspenda cualquier tratarniento por 10 menos tres elias antes; debe reCOIdarse que cualquier sustancia puede inhibir el desarrollo fungico. En ocasiones conviene limpiar 1a zona afectada con alcohol, eter 0 algun antiseptico local. Es conveniente contar COIl una mesa de exploracion para mayor comodidad del paciente y del personal tecnico. La obtencion de la muestra, as! como su transporte y procesamiento deben Ilevane a cabo con estricta tecnica esteril.

Diagn6sti::o de labora torio II 41

Rechazo de muestras

1. Ante micosis pulmonares.se recolecta esputo mas no la saliva.

2. Las muestras de piel, ufias 0 peios deben tornarse de las zonas enfermas 0 del limite entre Ia lesion y la parte sana, pero no .ser tornadas al azar,

3 Muestras insuficientes.

4. De ser posible DO se usen muestras con mucho tiernpo de alrnacenamiento, puestas en hielo seco, congeladas 0 en medios de trasporte par mas de 24 horas.

Escamas

-En le:~~·~~)(le,~; clH~~nl.:·~B~~.-!-·5~·(:;,)_'~~: "Bf: recoiectan escamas abundantes dci66roe de'la lesion 0 de varies sitios. Se raspa con una cncharilla, una hoja de bisturf 0 simplemente con un portaobjetos. Las escamas se colocan dentro de una caja de Petri o entre dos portaobjetos esteriles 0 fiarneados, y se cubren con una hoja de papel donde pueden anotarse los datos. En lesiones hiimedas es mejor utilizar cucharilla, pinzas 0 tijeras. Un analisis negative debe repetirse si la lesion es muy sugerente. Tambien es muy eficaz 1a utilizaci6n de hisopos previamente humedecidos en agua esteril, con los cuales se raspa la lesion y Iuego se pasan sobre 13 superficie del medio de cultivo.

La cinta adhesiva transparente ("Scotch tape") se utiliza en pitiriasis versicolor y dermatitis seborreica; se aplica la cinta sobre la piel enferma y luego sobre un portaobjetos para observacion directa al microscopio (fig. 7-7, cap. 7).

En Iesiones secas, una variante es la biopsia de superficie can cianoacrilato ("Kola-loka"). Se utiliza una gota sabre, un portaobjetcs, que se coloca en contacto con la piel durante 40 segundos, Se retira, se tifie con acido peryodico de Schiff (PAS) y se observa al microscopic (fig. 5-2).

La tecnica del tapiz (Maria: y Adan-Campas) consis te en fro tar la superfi cie por estudiar con un cuadro esteril de alfombra de lana de 5 cm por 1ado que luego se pone en contacto con la superficie del medio de cultivo contenido en una caja de Petri (fig, 6-31. cap. 6). Con ese mismo fragmento se pueden sernbrar varias cajas. Este metodo permite atrapar las esporas fiingicas para Iuego depositarlas en el cultivo, Es muy iitil en

Fig.5.2;. Ili.opsia de sJ,perfici@, tirlcicn de PM.

cncuestas epidemiologicas, en lesiones subclfnicas 0 p8!!ra oovia£( mnestras per 'COITElO·

... y,.~. 'E.;:~& tecnica se h~ modif c",(lio. utiliutfldo [lit

. ~. . .. - I --" - . "." I -

i". m.bwa manera un csadradc de ~e.J;ciopc.:lo sin(erico qtle puede usarse sin esteri]iz!II 0 luego de. exponerlo a luz uhravioleta: se guards Y transpacta ,enw!eii.w en ])\lIlPe18!~ill.m.iI:]io-

Los cepillossimil ares a los de pelo, dentales o psramasaje circular en el cuarpo pue.d!&1_ utilizarse pMII obte:llerliJ.mestr-.3!s 6::: p~er eabelluda; es posible utilizar I:riS{lPOS de iI~god61l en esta 0 en cllidljlli.e:r otra locelizaeioa, De.spu~ de pfi$ar10~ o fmtaJ:'lci5!purr la zona afeetada, se colocao £OIl<F~ la superficie del medio de culnvo y pennitiren obtCfJf-l!l; colenias ,en todas las puntes del cepillc Q en los sines de extension dE"i~ hiaopo. Esta~i~ ca es sencilla, barata y atraum.{tt:ica.

En nll'fuos qlLllt FlO ooillJboran '1 en 'E:I1IC::Iestl'lS epidemiologicas, rambien se usanplscas de contacto que contienen el medic de cultivo y se apliCaJIlJ directamenee sobee la 1es~6]l,

Es necesario examinar ]1JlS pelos afectaclm~ en 01 case de tfias !:Wcrosp6['i:c~s, la l1uo:!'esce!:',cia con liImpaxa. de Woodoriema _h.aci~ tina de. la cabsza $e utilizan pi!l~a~ cit:: depilar con las males. se· arraacan los pelos foicilrn.ente y sin dO]{i\~ (fig. 6-2], ,c:ap. 6) 'Thmbien es posible usar el escalpslo y raspar la Sllpe:ftiCie: afeetada.

Es necesarie obtener In muesrra e.ll el luniee entre Ia region sana y If! enfenna, sobre lodo de 1:1 regi61JJ suJiH!ngue~l (I de ]tl I,lja en s:i. Dcben obt:e:fll;;irSC· ptlm:ic:l!lias finas medisnte raspaeo con hoja ll,e bis[U,ri 0 cucharilla. Cuaudo hay perionixis, es neeesario recoleetar escasnas de j,a,

reg-ion periungueal y, si hay pus, pueds sembrarse COn cl e;mp~~o de Ullill pipetn (I t1[l hisopo qije puede conservarse h.1medo :!II eclocatlo en SI.lCl!O fisiolcgico.

Exudado de mU(oQSilHI

Se atilizenasas de alambre de platino receas 0 I(!!dond!ls I;) de preferencia hjso_pos. Si el :iJ]Alisis no ,E:i,S [!TImedi~mo, estos ~]Ilim.os se eolocan en suero fisielogico y se .refrigeran basta pro-cesar Ia muestra, de preferencta con algtin ~IltiblOtioo para eviter l.arepl\od1.li~i6[l baeterisna. Si se U'<Ita deexucado vaginal la paciente no debe: cstar mellstrl!!aru:]'o, no ba de asearse nj utilizar medicame!;llQ,$: Pi)l' via ... :ag~rn1I al me:.n.os M 24 heras; para ('lh~(J·\·it;!). mrJ,,,;r.;.V"J_,,0.l.\);~;.~"<l.',",----l~ ~Ll,G~T~n~ (;1'1 posicion ginecelogica csb i~ur:ruti!ilc1::' "el dpej~ vaginal sin lubricaute y see reeeleeta la muestra. En nretra, conjunriva y conducto auditive exrerno, se ~.uiJ]z<l un Iliwpo y h~rn]esi[a eecoleetad a S~ (illVlii. allaboratori 0,

P'U!),)/ lfquidos p.atoI6g~C.Q5 (liqutdo cefstcrraquideo [lCRJJ HqU'iido pleural, orina)

Se deben oMr:me[ las ffil!lleSlr;:!S eon tt!lcnica ~$lr5ri] _r S'il.tllbraF una c.antj (~8!,fI 8ufkiG!!lte (~ . .5 mil); en abscesos, si es posible, se punciona Y aspira con una jed[lg~; se ]ev:a:r:taitllaf costras y se deposita la muestraen tubas esreriles, En LCR y orina, convieae ,c.entrifugar la rnuestra a 2 000 Ie",o]uC~OIl\(l~. per mIDL!l.!O (rpm) por 20 m.]tl!; luego, ,(Ion una pipeta Pasteur esteril, se sep am con sumo cuidsdo el sobrenadante 'l s ~ pasa a un tubo e.s~it e] sedimentQ se utiliza ,P'lliti l:as p1ill!ebilS diagndsticas. En el pus se buscan levaduras. filamemos y grsnoa E~. l.-CR, se uriliza titt:a china paradete~tarCryptococcus (fig. 21-4, cap, 2li).,

E:. _ • r

expectoraoon

Se utiliza un desinfE;;ctant~· bucal 0 aolucicn de Lugel 0 .. tolem de. genc:ianla al 1 %. La .mllleSl:ra no debe dejarse macho tiempo a la temperarnra i!illlbiente. Se examine una gota sill homogeneizaro se a.gita cor agl1l1. esteri] Y ped!lJ$ de vidrio. Ar~re l~ sospecha dsmicosis pulm(ma.r, C.$ p.re~eribl~ obre:n:t[ IlJll.a. mli~s,tr2J lJr()r~gJ(!isJ :p~

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broncoscopia; esto pennitc aspirar secreciones y realizar estudios histopatologicos. En esputo y lavados bronquiales, se aconseja la digestion y la concentracion de los procluctos: a 20 ml se anaden 10 ml de pepsina a 1 %, se incuba dos horas a 37°C y se centrifuga a 2 000 rpm durante 30 min Tambien se pueden digerir con hidroxido de sodio 0 N-acetilcistefna y ditiotreitol (rnucolitico). Se deeanta el sobrenadante y el sedimento se utiliza para las pruebas de diagnostico,

Heces

Se recolectan en un recipiente esteril, Para investigar Candida 0 Geotrichum, quiza baste un pequefio volurnen obtenido con un hisopo rectal, Eli un portaoojetos,·. se dilacere ·,m·'ynllwicIi ~educido sobre una gota de agua esteril olactofenol, y se coloca el cubreobjetos.

Sangre

Para hernocultivo esta ha de citratarse, heparinizarse y desfibrinarse con perlas de vidrio 0 con el anticoagulante acido etilendiarnino.etraacetico (EDIt\.) en la misma proporcion que para Ia biornetrfa hernatica. Se inoculan 2 a 5 ml de sangre en matraces con 100 ml de caldo glucosado de infusion de cerebro-corazon y se incuban a 37°C. En reacciones de precipitacion 0 fijaci6n de cornplemento, se utiliza suero obtenido despues de la retraccion del coagula. A IO ml de suero, se aiiaden unas gotas de timerosal ("Merthiolate") al 1 % 0 de azida de scdio a15%; luego de separar el suero, este se debe conservar en congelacion.

Frotis

Puede ser util en pus, exudados y otros Ilquidos como expectoracicn; se fjan los especfmenes en un portaoojetos mediante calentarniento ligero 0 poniendo dos gotas de alcohol. Se puede utilizar tincion de Gram, awl de metileno, Giemsa, PAS o Papanicolaou (fig. 23-3, cap. 23).

Biopsia de tejidos u orqanos

Del fragmento obtenido, es posible colocar una parte en forrnoi a110% 0 en solucion cle Bonin

)iagll6stico de laboratorio II 43

y otra en un tubo esteril para cultivo, de preferenda can una soluci6n fisiologica a en agua con glicerina a125% y, si no es actinorniceto, COil un antibiotico antibacteriano. Se rnachaca la suspension en un mortero y se siembra. Conviene inocular directarnente un animal de laboratorio ala vez; este se sacrifica a los 15 dias y se siembran los organos, 10 cual facilita el aislamiento puro.

El estudio anatomopatoJ6gico de las micosis superficiales no tiene utilidad practica, pues los bongos se ubican en la capa cornea (fig. 7-11, cap. 7), per 10 cual se encuentran mas facilmenteen un analisis directo, y no generan reaccion celular 0 es minima, salvo cuando profundizan (granuloma tricofftico),

, f'B.l'w zJ.w8is subcutaneas 0 sistemicas,

···dicho·~stujiCc eJ muy importante 0 indispensa- . ble. La reacci6n inflamatoria y las alteraciones hfsticas son inespecfficas pero orientadoras; el hongo casi siempre esta presente y se observa en su fase parasitaria (figs. 13-15, cap. 13 y 14-17, cap. 14).

La tincion sistematica se lleva a cabo con hematoxilina y eosina, importante para valorar el tipo de reaccion en los tejidos, que puede sec congestive can vasodilatacion, edema, exudados y depositos de fibrina; purulenta, con ciirnulos de polimorfonucleares, 0 mas a menudo granulomatosa COil histiocitos, celulas gigantes de tipo cuerpo extrafio 0 de Langhans, rodeadas por Iinfocitos y plasmocitos. Estos iiltimos pueden alterarse y dar Ingar a cuerpos de Russel. Los granulomas sou sensibles de cornbinarse con una zona purulenta 0 presentar una zona central necr6tica (fig. 18-10).

El nodule (granuloma) micotico (fig. 5-3) propio de las micosis profundas se presenta can cuatro zonas caracteristicas: 1) un centro purulento, donde se encuentra el parasite; 2) una corona de histiocitos con cierta distribucion en palizada; 3) una zona granulomatosa, y 4) fibrosis importante. Segun la micosis, quiza predomine cualesquiera de estas zonas 0 tal vez haya una afinidad particular (vascular en rnucormiccsis) (fig. 22-9, cap. 22).

En la tecnica de PAS, se utiliza acido peryodico de Schiff (Hotchkiss Mac Manus), colorante con gran afinidad par mucopolisacaridos y, como consecuencia, elegible para rnernbranas fungicas, que se observan de color rojo en un

44 a Secci6 n I Aspecto~ ~ner~Je~

Fig,5-3, Nedulo micot;co, (12Iulaglgan~ multlnuclsad.\lII~O lLans.i1~IFlS y !eva:dulm (pAS 4lx),

Ioudo 'I'~rce (.Ii;r, 16.11, cap. 16). La impregnac:u6n a;;gentic a con Jl\tmto mete'lllnllUla de plaja (GQrn;uJr~-GiJ;{)IoM() eolorea iII~,sam.eIlre de: negm las paredes del hongo, 'I!i(j ,8s1 las Jibras reticulares {fig, lSrW, cap. is}.

L& tir;cioiL de Zi.ebl.-N eelsen (ZN) 0 el rr.i8[{)do ZN rnodifieado de Kinyoun es lfiril en actinomicetos; ~O!> granos '0' ]~ eultivos de Nocardia Jl'.Ll1estran.resi.a.tmci.apRrc!.al al scido y Actinomy" ces no es resistente (figs. 24-5,. cap. 2.!J ]I 25-2, cap. 25). Latincion de Gtamo de Ziehl-Gram se usa pam te.nir filsmentos acrrr!lJo:mic6tioQs:. :t!s posible cornib.i~ll:r nnpregnacion M,gtntica con mucicarnin para Cryptococcus. Casi nanca se usa Giemse.

El d.]agIl6st:ico Je micosis se puree confirmar s.i se ellClLlen!r8:r1 ]asesrnlclu:r;as rmootiCR$'j', si es:~aSS(HI miry espeeifieas, se llega ai.den.tijk~J la especie (.4amomadura madurae; (fig. 12-12, cap. 12). Los hongcs se pre1>1:iIl&ilnlL en forma de filamentos, ]cv.,.ourH$ y tl$]:!orangi.os; se agmpml de cinco maneras:

I. PiJa~n~(llO:.'i .8pdOWllflOO'S ttl cQ]onias d!CI!lS!!-S c granos (aspergiloma, miceromas, actinomicosis) (figs. 12-20, cap, 12; 13.-]' cap. 23 y 24-5, cap. 24).

2. Exelusivarnente filarnentos (a:s,pergilosi$, nocom:iiosls,f1colmc[)!>ls) (figs. 22-9, car. 22; 23-1, cap. 23 y 25-3,. cap, 25).

3. Exclusrvamen ~!evaduras (blastcmicosis [fig. 19-7, carp. ]. 9}, bis:topl.asmo.s~,$ (fig. 11 ~ 6, cap. 17], criptccocosis [fl.g. 2 H" cap. 2]1).

4 _ Levaduras y filamentcs a la vez (candidosis [candidiasisj) (fig. 2:0-22:, cap. 20) ..

. --.---~-----

5. Presencia de esferulas e esporaagios (ccecidioidomicosis [:(igs. ~ 6- 9 Y 16-1O,c1Ip. 16J, rinosporidiosis [fig. 30-3J).

En. ocasiones se Ol1Se.rVJi. fenomeno de Splendore-Hoeppls, en el cuallas esnucreras fClnglclI:s. eshi!\ rodeadas de material eo.sin6fi]o fi brinolde DOn dis[ribuc.i6~ radiada, que corresponde a una reaccion enue trrt.:lgeilo y anticuerpo {fig. 13-15, cap. ]3)..~. material forma las clavas :::1'1 gral)oo acnnomicotices caasados por NoctiJdi.a y Actinomyces (figs. 12-20, cap. 12 y 24-5,cap,24}; ern esporotncosis, mcka a una ievadurn )' da i~.ga!l· al cuerpo asteroide; en conidiobolomicosis es mn)' car~JJ(;te.d~t~co y rodea <'I '1,111 filamento (fig. 22-15, cap. 12.). Siu embargo .• pue!lJ.e: ser nn cle-menw inespecffieo y pre~~otar.'le en cualquier hOD go' 0

_~' .. ", I'". . .• ,1..... -.~' .... _.. - ~I.:.I··. - .

~.i~aE~!tc I • ~ '. .. • •

Es impoilaiite '];)' j'dentiflcJci6n corrects de cuerpos ex:traii.~iS (a1god6n, cristales, calcificacicnes) y.. si es posible, urilizar luz polarizada para defmirlos mejor, ya que pueden simelar t:~Llrll!(:H:U'as lm¢oticas; por '~jemp10, los tefos gotosos se confundsn con granos de mieetoma; los filameatos de fillrimt" con filamsnsos <lct:U~(')cmj.c6~iCQ.S.; los euerpes de Russel, CO[l levaduras, y etros pa;msit~s,c.o:milU!.ishmani!:1,. COn Histoplasma (fig, 17-6,c2p- 17). Es imponameno considerar como pal6genos 10;; hongos saprdfieos qlle Sill: adhieren 11., 0 se desarrelian en, los especfmenes para estudio amromopatologico (porosporas). Se debe reeerdar que una micos.is no siempre es p.rir1l!i~i'i'a Ji '9ue, puede desarrollerse a partir de precesos neoplasicos, infecciosos . Q metab6]ioos.

Cada frasec dsbe etiqueni:r,oe debidamente con el nembre, til edad y sl Ilnm.ero tI!~ expediente del eafenno; nombre del medico o Iaboratorio; diagnostico cllnico; evolueiou; terapeutica, 'J tipo {ie, pm,Elha pl-jl!Ctica.da_ Si se. en\i'[an las muestras a distancia, es necesario evitar el rompimiento del fiasco.

Analtsrs dirs ctn

Es se:nci!lO, rapido y bararo. Permite observar al hongo Sm. modifeacienes y CllMtitiCM lacantidad de elementos. Se efecnia a partir de prodoctos anatomepatologieos, como escamas, pelos y ezudados, ~SJCClIJlliO ,e:tpec~.aJ:acioiIl uorres lfquidos Pru-.a obtener los pnrneros, ae utilizaun asa de pla-

~ WlO y, pam los segundos, Una: pipeta Pasteur.

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Los elementos fiingicos se observan a1 microscopic con la lente de aumento debil o mediano; en estado fresco, varian de 2 a 20 rnicras de diarnetro. En general los hongos pat6- genos son escasos, pero los oportunistas son muy abundantes.

Los exudados se observan de manera directa o se pone una gota de agua destilada a solucion fisiol6gica, pero es mas conveniente usar solucion de Lugol (solucion yodo yodurada) pues da cierta coloracion a los elementos parasitarios dernasiado palidos (fig. 12-5, cap. 12).

Yoduro de potasio 2 g Yodo cristalizado 1. g Agua destilada 300rnl

Sig.: solucion de Lugol

Para Cryptococcus (fig. 21-4, C21p.21), se' utiliza tinta china en soluci6n eOJ. agua destilada (1:101:2).

Las muestras con queratina, como pelos y escamas, sou dificiles de observar, par 10 que deben utilizarse sustancias aclarantes para facilitar elestudio, Los elementos 'anatomopatoiogicos se coloean can una gota de Ia soluci6n, se cubren can un cubreobjetos y se observan a los 5 a 10 min (figs. 6-20,6-21, cap. 6 y 9-4, cap. 9). E1 aclaramiento es mas intense si se calienta un poco la laminilla, pew esto tarnbien destruye el material bio16gico con mayor rapidez y Ia precipitacion del mismo produce much os artefactos (fig. 5-4).

Se utilizan como reactivos soluci6n de potasa a sosa al 5 a 40%, a 1a que puede afiadirse glicerina para mejorar el aclaramiento y evitar la desecacion, a dimetilsulfoxido (DMSO) a140%, que da aclaramiento mas rapido, sobre todo en ufias. Con esta solucion, ~l analisis se realiza en pocos minutes y ni siquiera es necesario calentar la larninilla.

KOH 30g

Agua destilada 70 ml

Sig.: solucion de potasa al 30% NaOH 30 g

Agua destilada 7 I) ml

Sig.: solucion de sosa a130% KOH 20 g

DMSO 40 ml

Agua destilada 60 ml Sig.: solucicn de DMSO

Dia'j nostico de Iaboratorio _ 45

Fig. 5-4. Artefactos en el exarnen directo. A, mosaico tricofftico; B, gotas de grasa.

Los cristales de KGB deberi afiadirse lentamente al agua y agitar hasta la disoiucion, pues la rnezcla produce cal 0,.

Can solucion de lactofcnol el aclararniento es mas lento y la observacion, mas retrasada, pero tambien permite conservar mejor la integridad de los elementos durante mayor tiempo, por ejemplo pelos.

Cristales de fenol 20 g Acido lactico 20 ml Glicerina 40 ml

Agua destilada 20 rn1 Sig.: lactofenol de Amann

Loscristales de fenol se disuelven calentan-

do un poco y se puede agregar:

Azul de metileno 0.075 g

Sig.: lactofenol azul de algod6n (azul de lactofenol)

E1 sulfito de sodio aclara rapidamente, debe observarse antes de tres horas y casi no genera artefactos, pew como la solucion es higrosc6pica, es imposible usarla luego de dos meses.

Sulfito de sodio 10 rnl Agua destilada 75 rnl Alcohol de 80 grados 25 ml Sig.: sulfito de sodio al 10%

E1 laurilsulfato de sodio aclara lentamente y no tiene actividad antifungica, por 10 que el material utilizado para observacion directa se puede cultivar; debe observarse ames de tres hams.

Se utilize blanco de calcoflrior bajo el microscopio de fluoresoencia (410 a 450 om) que sirve para hacer evidentes los hcugos dada la presen-

cia de qumna. ED no portaobjeros, se coloca una Fig. 5-6. FiI~menM b~jo mkras"1)iO de fl\Jo~5cencia.

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46 • 'seccior I Aspectos qenersles

Laurilsu'fato de scdio 5 g ."'-gl]8 destilada 95 ntl

Sig.: l aurilsultato de so~i;) al 5 %

Fijaci6n de escarnas

Permite conserver pm tiernpo indefinido para un analisis directo; se uriliza sobre lode en la enseiial12.a. Se coloca una capa delgada de albiimina de ~Vleye1' sobre im portsobjetos. Con la ayuda de una aguja de diseccion, se colocan encima fllgunos f:mgmen~os de escarnas, pelos 0 raspado de uiias; ~e. dejsn sec a .r a la temperatura smbiente tcda la neche 0 una a des horas a 37°C, 'i quedan liSIOS para teiiirse.

El anllis.is cirecto en caso de dermatofitosis mue~uz; filru:lenflJs refringemes que ~C'ni:lrril(lr' ". el iliagn6stico (fig: 6-20, cap.ti), y ell candidosis , (candidiasis), filamemos, 0 levaduras, 0 ambos (fig. 20·15, cap. 20). En onicomicosis, en ocasicDeS se encucntran masas fungicas que se donominan de.rma;to1'itoDrna·tfig. 5-:5); su coservaeion

o b de eualcuier estrucmra rongica en examen directo Sf: visualiza ll1~j Of con negro de elorazol, En el resta de Las micosis las unagenes SQn especfficas, por ejemplo en eoccidicidomicosis, esferu.as (fig. 16-9. cap. 16), ~ en paracocc.dioidomic osis, levad urns mukigeman es (fig. 18 -'1, cap. ~ 8).

EntI~ los anefactos qUI: pueden desorientar se encueetran: el mosaico fdngiee a tricofltieo que simula filarnentos y se produce POf los Urrrites cit: lau paredes de los comeecitoe 0 jX)I dep5~ sites de cristajes '[1 Upido5; es.tos de:sllparecen al aiiadir agua a la preparaciou (fig. 5-4). Tambien originan confusion los pliegues de las escamas. Las fibras de aIgoc!6n simulan Iilamentos, pero tienen calibre irregular 'i extremes deshilachados. Los de,p6sioo.s de grasas (pomades, cremas) semejan levadnrss. A veces S~ encucntran conidios pigrneutados de bongos saprofitos, como las porosporas (figs 3-2.7. }·37 y 3<~g, cap, '3).

Analisis directo

(on fluorescencia (fig. 5-6)

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.l'ig. 5-5. D~rm&to1itolTIa (rieqro d~ clCr212011 0 y 40x}.

gota de solucicn de KOH con una got.a de la preparacion y se colona un cubreobjeros, se caliente hgeramente y se exarnina. Se puede diluir Lambien 1 a 10 en solucion aCUOSi\ de azul de Evans a1 0.05% como coloracion de fondo. Los hongos se mamfies tan al unirse a ]?Q.:.isaciridos, como eelulosa y qciuna. Se observan hifas, seudohifas y levaduras t pero es imposible ver endosporas de C. immitis.

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I CULTIVO

Es la siernbra de los productos anatornopatologicos en los medics id6neos, y casi siernpre se realiza en lab oratorios especializados. Las muestras se pueden recolectar con un hisopo esteril 0 con el asa de platino previarnente ealentada al rojo y enfriada en e1 medic de cultivo, 10 cual facilita la adherencia en el caso de pelos y escamas, En general, se co.ocan los especfmenes sobre Ia superficie del media de cultivo y se conservan a temperatura ambiente (26 a 27°C); en caso de micosis profundas, es mejor a 30 a 3rC. Las levaduras se siernbran con tecnica de zig zag (fig. 28-3, cap. 28).

Los pelos y las escarnas se disponen en frag~ento.s : . = :?~~~re~~:'~~:.~P~~~t~-~~.d~::·J 8.- ~.~.l?~rfic~~ d.el. medic; qll iza . sea-ti tik' sembrar cercade J a pared

de vidrio para observar el cultivo a traves de Ja misma. Algunos colocan los productcs anatornopatologicos en alcohol y los enjuagan antes de sernbrar.

En lfquidos, heees y pus, se debe sembrar aproximadamente 0.5 a 1 ml por tuba.

Las Ievaduras se desarrollan en 24 a 48 horas, y los contarninantes, en dos a cuatro dias, pero Ia rnayorfa de los hongos patogenos requiere una ados sernanas.

Para observar al microscopic las levaduras, basta to In2_[ una asada del eultivo y observarla con cualquier colorante aunque se prefiere azul de lactofenol. En hongos filarnentosos, se puede usar una aguja y desmenuzarlos, 0 bien se utiliza cinta adhesiva transparente ("Scotch tape") que se coloca suavemente sobre la superficie del medic de cultivo y luego se deposita sabre un portaobjetos, donde previarnente se ha vertido una gota del lactofenol; algunos utilizan la solucion de Albert:

Azul de toluidina 0.15 g Verde malaquita 0.2 g Acido acetico glacial 1 ml Alcohol de 96 grades 2 ml Agua destilada 1 I a ml Solucion stock 10 rnl Glicerina 3 ml

Agua destilada 20 rnl Sig.: solucion d.e Albert

La observacion in situ es factible en Candida y Trichophyton vernlCOSUIn para Vel' clami-

Di3gnostico de laboratorio II 47

dosporas, y cr. T. soudanense para hallar hifas refiexivas (fig. 6-34, cap. ~).Se coloca la piaca de Petri invertida sabre 1.1 platina del rnicroscopio, 0 se puede cortar un fragmento del agar con 18 colonia incluida y luego calentarse 0 presionarse Iigeramente antes de observar al microscopio. Si se cuenta con dermatoscopio se puede utilizar en Iugar del microscopic,

Tecnica de resiernbra

Se recolecta con el asa ·de platina un fragmento de la colonia y se deposita en el otro tubo. Sirve para conservar Ia cepa.

Cultivo en lamina 0 microcultivo

Elmaterial necesariuconsta eIe' pcriacibjetos;' cajas de Petri, caballetes de vidrio en U dentro de estas ultirnas y agua, todo esteril, Se torna una caja de Petri con un caballete (si no estan esteriles,. se pasan por la flama). Se depositan 5 m] de agua en 1a caja, que evitan la desecacion posterior. Se coloca un portaobjetos sobre el caballete y con una pipeta esteril se pone una eupa de gelosa en la superficie de 1a laminilla y se reaspira para minimizar el espesor de 13 capa. Se siernbra en el centro un fragmento del cultivo

y se incuba a [a temperatura seleccionada.

Luego del desarrollo suficiente del cultivo, se retira el exceso de gelosa, se pone una gota de awl de lactofenol, se cubre con una laminilla, se sella y se examina,

Hay dos variedades de esta tecnica:

1. Lamina desecada. Tras retirar el exceso de gelosa, se seca el cultivo a 37°C, se fija can una gota de alcohol absolute, se colorea can azul de algod6n, se deshidrata con alcohol, se enjuaga con tolueno y ·se monta con resina.

2. Cuadrado de gelosa. El cultivo se realiza en el punto medic de los cuatro lados de un pequefio cuadrado de gelosa de Sabouraud (1.5 em de lade y 2 rom de espesor) que se coloca en el portaobjetos poniendo encirna el cubreobjetos (fig. 5-7). Despues del creelmiento del hongo se retiran el cubreobjetos y la gelosa. De esta rnanera, los filarnentos y los organos de reproduccion quedan unidos al cubreobjetos y el portaobjetos. Arnbas partes se montan con azul de algodon, se sellan y examinan al microscopic.

48 • Secoon l Aspectos generales

Flg. 5-7. R~pf(!sentEle.icin gn!ifica de un microcultivo.

O!Iattcmc<!. de tinciU[I conlli~te ell qll![tar el medio de. cultivo, !l;iiegO ss seca sl portaobjetos en la estufa a 37~'C dUlJrnn[c 24 horas. y se colorean de hi siguiente manera: se agrega alcohol-eter y se deja secar Se cubre con eneosinapor espacio d-e·15 min m~-Ulli:o. £~ ~V~ ~~ ~::·:f~;::;ie;lu::'~qi:.· . agll:!'!. 'Se seca cerca de ]a filii!' • .;',;; lii\W,ga azul de tnptano dUfiUl£e 5 mn, se lava COIL agua, Se pasil sllce£iva:rne...nte pon alboif;.oi de 30, 70 Y 96 grades: alcohol ebscluro: acetona, y xilol. Antes ,que este ulul'tl'!) seque, Sf: pone M~amo de Canadj y sec menta.

Cultivo sobre pelo

o metoda del anzuelo

En una caja d..b Petri. se pone iieI1111 hdme.da y se deposiran pelos 0 eabellos. Bste prccedimiento permite .ais]:n de!lTIlilf6fi'oos de) ~ueI·o y esnidiar sus formas sexuadas,

Ataque del pelo in vitro (6rganos perforadores)

ED una csja de Petri, se colocau 25 ml de agua este.ril y se agrega eu % de extracto de levadura. Se deposuaa peqnel'los fragmeatos de l ern de pelo rubio 0 de niiio; se sierabra el hongo por estndiar. Se exam.man ~ri6dicaIDe!1'[1;l, Jos pelos COlD a:i:,ul de iacwrool Si hay tOJ:grulQS perforsdores, se O·liJserViliii COmO di.lllrtacio:Jilles perpendicuia;--.es a su eie .. Es util en deil:m:M6titos; Tric.hophyton menJagrophytes ~0I.'l produce, no as]' Trichaphy.ton mbrum [fig. 6~:l2, cap. 6).

AUXONOGRAMA Y ZIMOGRAMA

En levadaras, e$:~OS son importentes pnncipalmente. para de:finir ]!iJ e,S'[p~cie con base en las

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caractensticas fisiologicas; para sernbrar la cepa problema se hace una suspension en solucion salina esteril.

Auxanograma

Es la utilizaci6n 0 la asimilaci6n de aliment03 con carbono 0 nitr6geno. Los rnetodos SOL variantes de la tecnica de Beijerinck, El material usado cornprende cajas de Petri esteriles de 15 em de diametro con media para auxonograrna, Se usa el medic .sin carbona para estudiar alimentes que contienen este ultimo y sin nitrogeno para ali men as nitrogenados.

Medio de Lodder modificado (auxonoqramas)

l. Asimilacion de aziicares:

Celosa lavada 20 g

Sulfate de amonio 2 g Fosfato monopotasico 1.5 g Sulfato de magnesia 0.25 g Biorina 108 U

Ti ami n a 106 U

Piridoxina 106 U

Acido nicotfnico 106 U Pantotenato de calcio 106 U Inositol 105 U

o Iigoelementos

(solucion de Berthelot) 10 gotas Agua bidestilada 1 000 ml

Medio de Ladder y Bastide

Fosfato dipotasico I g Sulfato de rnagnesio 0.5 g Sulfate de amonio 5 g Agar 20 g

Agua destilada 1 000 ml

Se utilizan pequefios discos de papel filtro de 1 em de diametro que se impregnan con dos gotas de solucion al 20% de la sustancia por esrudiar (glucosa, galactosa, maltosa, sacarosa, lactosa, rafinosa, trehalosa, ceiobiosa) y se desecan en la estufa.

2. Asimilacion denitr6geno:

Mismo medio anterior, sin sulfato de arnonio can 20 g de glucosa pura. Se utiliza para

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probar sulfate de amonio y KN03. SOl coloca en Ia caja de Petri e1 media de cultivo sin el alimente que se desea probar y se siembra en toda la superficie una suspension de levaduras. Los discos se coloean en circulo en la superficie de Ia gelosa. Normalmente, en ausencia de un cornponente esencial, ningun cultivo se desarrollara en el media. pero habra crecirniento del hongo alrededor del disco que contiene el alimento carbonado (p. ej., glucosa) 0 nitrogenado, utilizable par el hongo.

Una variante es el media de extracto de Ievaduras para asimilacion de azticares, usaclo para identificar levaduras:

Extracto de levadura 0.67 mg

("Yeast nitrogen base") . ~.;, ~·-·!~'f~-g~rJn!.olc:· ::·f.-.Ctg-·

. Agtti\ieSlila:tia" l' 000 rill

Se esteriliza este media base y se afiaden

discos 0 cornprimidos impregnados con los aziicares por estudiar,

Zimograma

Es la fermentacion de aziicares. Se cultiva la levadura en un media Uquido can un ghicido y un indicador coloreado. Se emplean tubas de hemolisis I van-Ball, con un estrechamiento y una perla de vidrio que acnia como valvula. Se utiliza media de agua peptonada con el indicador (indicador de Andrade). Con tecnica esteril, se agregan ur.as gotas de solucion al 30% del aziicar elegido; si hay viraje del indicador, sefiala acidificacion; la aparicion de una burbuja debajo de la perla de vidrio indica forrnacion de gas.

Medio de Marcelou-Kinti, para fermentaci6n rapida de azucarcs

Agar 9 g Peptona 109

Purpura de bromocresol 0.04 g Cloranfenicol 0.5 g

Agua destilada 1 000 rnl

Se remoja el agar en 900 ml de agua 24 horus; luego se afiade la peptona. Se calienta a 110°C durante 10 min, Se agrega el indicador de bromocresol y el cloranfenicol y se afora a I 000 ml. El pH se ajusta a 7 con bicarbona:o de

Diagn6stico de laboratorlo • 49

scdio al10%. El media queda de color purpura o violets.

Para esta prueba de fermentacion se preparan soluciones 31 30% de glucosa, rnaltosa, rafinosa, galactose, lactosa, sacarosa y trehalose; luego se impregnan discos de papel filtro que se colocan en tubas de hernolisis y se afiade el hODga par estudiar en solucion fisiologica, El media previarnente derretido en baric Maria se distribuye a 45°C. Se tap an los tubas y se colocan a 3rC durante 24 a 48 horas. Si hay fermentaci6n, el medio se decolora.

ESTUDIO DE LAS NECESIDADES VITAMfNICAS

:.' .'. '.A.1.i:nedlo base.se Leo agreHc!T] fO;'b~:bs\)iiJ!hUiai;~" "': .

. salvo la que se desea estudiar, Los tubc;sse"i6."cu:'·· .' '."_ .

ban con un fragmento del cultivo a cart una suspension de esporas 0 levaduras, No se observa crecimiento en el tuba donde falta una vitamin a

. indispensable.

Media base:

Glucosa tratada con carbon activado 20 g Asparagina sintetica 1 g (0 hidrolizado de casefna sin vitaminas) 10 g Gelosa Iavada 20 g Oligoelernentos 10 gotas

(solucion de Berthelot) Fosfato monopotasico 1. ,5 g Sulfate de magnesia 0,25 g Agua destilada 1 000 m1

Se afiaden al medic las vitaminas siguientes:

Biotina l09U Tiarnina 10s U

Acido nicotfnico 106 U Inositol 105 U

Piridoxina 106 U Panrotenato de calcio 106 U

Las so.uciones de las vitaminas se preparan como sigue:

En 100 mJ de agua destilada se colocan 250 mg de inositol, 10 mg de tiarnina, 0 150 rng de histidina. Se esterilizan en autoclave a 120°C 10 min. Se agregan 20 a 100 rnl de la solucion base y se coloca en tubas. E1 hongo se siernbra en UJ. tuba can vitaminas y en otro sin ellas. En el

comercio se conocen CQmo ''Agar TricbIo;pbytoll" y se numeran del uno al siete, el primere .IlO tieae vitaminas.

SINTESIS DE U REASA

Se realize pOI" alca inlza1ci6n dsbido a la forIlla.:;ioll; de carki,(JlllIii.m de ruJ).Qrwio, 'f ss m:rnitk:csta pOI' viraje del indicador .de pH. Se utiliza medio urea-indol (que se LII.sa pRU'J illiferenciar leDteroibil:ct:eria~). A 31QC el roio fenol, de cai,OJ amarilln, vira a rojo-violeta en (res' a se:is horas (CryptococCus).

Pam de.rrn.at6titm; se udliza co.no m~o base:

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KHtPO~ 2g G1uCQsa 5 g

Gel10sa 20 s

. Aglil,a desiilad!li 1 Il}OO ml

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Se funde la gelosa 'f se agrega rojo fenol (0.2% en etanel al 50%),6 rnl/l; Se estenliza en autoc~a\!\e :5 a 20 min a usoe. Se cfeja e-ufrirua 5IJl"C: bajo ikniCii estenl, se agregan 100 J.l1!1 de una solucion acuosa de urea <11 20%, !)l',eviamente esterilizada FOr filtracion, En 10s tu bos s:olii:(bl'iclld!o~ en posicion m~]illarlll se ~iemfu:.f.il un petl'..IJeio il1oculo de: la colonia y ~ IDcuba a 2.5 grades cern(gradru ..

INOCULACI6N EXPERIMENTAL

Se emplea en in\i'e~tigaci6i1. pero I.l't.I~(le k;~er utilidad dlu.ag)ll,o~iica. Se us.a:n con ejos, rn~8iS, ratones, cobayos y cricet,os (hamsteres) dorad~~. Los hongos pued~' S!et inoeulados per via subc d~ea (lJ.g. 12.'37, cep. 12), illttaV,el1osa, !I]trap~J:OIle<lI., intrfJJ1.e:s,ticliJ]~.l' e lnWcraij"jeal. 1.1I presencia (:16 lesiones es indispensable para ase,gttf~ Is. patoge~icjdt!idl eel .~oaglO'. Si despues de un Lempo ,el alffilJim;aj 'rIO IDUll,e, se sacrifioo. En la necropsia, se iotenta obtener el cultivo dellhongo lEi!ocubd.O (retmc111ti'fQ) y otra [iar;;e de los olga-

nos se fiJa p~ eS~1JJ(jio histopato16gicQ. .

., Para II lilOClJi~ ac.iol1, se pre-para uoa sllspen- 510n del hongo problema; se colocaen so-lucian s<liina una oOllcemtraci6111. de alrededor- de lOa ll\gfrru Y se aplica ll1f-lruallte j eriIlJg1l. de insnlina

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p.a{a h~Derla eon Dcili.dad se sesnene firrnemen- 1

te la cabeza del aaimsl ,P!1l.ra 10. cual se coloca al t

raton ~Ol Ntl ~ ~nil pi I' eza Ide m1,al.l.a d~~ alambre ~ se I.

mmoviu z a. <:I..L asir a co 11. y as orejas: se sostiene i

con firmeza la para derecha, se inserte Ia aguj a j.

en el cojinete pllliD!lM y se inyectan 0.05 a 0.08 II

mill de Ia suspension (fig. 12-37. CHp. 12). t

lnoculeclcnintraperitoneal f

Se sostiene al animal de la misrna maner:, se I

flexiona la cabeza y se elevaa las patas para dis- t

rninuir las posibdidacies de lastimar las vfsceras, I

se inserta ]8 ~guj~a _en lalfnea medi;~. del abdomen ! ._._

r se inyectaa 0.) rnl de ~B. suspen!o16n.Ll1egos~:.'"_ .. ,' <':+':'",'" buscan nodulos bl<!nque{inos: 'i se extirpan ·pani···· ···l~;··

el diagn6stioo. l .

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lnoculaeion plantar del raton

tnoculacien intratesticul.ar

Se presiona b. ca vi dad abdominalpara hacer visibles los li:Bs,eicnlos y se i.nyec'la 12J. suspension,

Inoculaci6n intracerebral

Se lIti.fu:o. ;agii.lj]a ,eaii.ib·re 26 (I 1"1 de bisel corto; se anestesia al raton de cuatro a cinco semanas de edad con eter 0 clorotormo: 51!: inmoviliza la cabeza coloeando los. dleGas lndice y pulgar de la :nano ]zq uie::rda .sobr~ las Ql'~j [IS. Se inyecta en la parte posterior del craneo un poco a la derecha de, la line-a media hast~ que se !;)e.r.6be un pequeno estircn; se illy,ec;,taJl. le!ilblme:tlle 0.02 ml de la ffi.oestr,a; la rn;Ll.e.rte: enlas prirneras 24 horas indica tranmntismo pee Ia inoculaci6n.

Es mas seneilla ell! conejos, La suspension se inyec~a lID las "'en~ del paJbeU6:n ,-!uricular.

lnoculacion superficial

8610 se praenea en el Ca80 de; dennat6fitos. Se depila y escarifica la region abdominal del cobayo yse unta con miel de abeja qtle contiene el lll!ermaM11i!¢.

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HEACC[ONES INMUNOLOGICAS

Dependen de algunos hongos pat6genos y pueden ayudar al diagn6stico. Se dividen en pruebas de sensibiIidad cutanea y en reacciones serologicas.

Pruebas de sensibilidad cutanea

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Con estas pruebas, 0 intradermorreacciones, se investiga 101 inrnunidad celular, Se Ilevan a cabo con la aplicacion intraderrnica de antigenos obtenidos de filtrados de cultivos 0 extractos de polisacaridos (fase filarnentcsa 0 levaduriforme) de los hongos, de micosis tanto superficiales como profundas Se invecta 0, 1 rnl de la solucion en la

.. . 3;)::>'.r,:>. anterior del antebrazo 0 en.la region interes-

capulovertebral; 1a lectura se efecnia en 24 a 48 horas. La intensidad de la reaccion se mide par el tamafio de Ia induracion, no por el eritema. Una reacci6n positiva mide 5 mm de diametro, una dudosa menos de 5 rom, y si no hay induracion, es negativa (fig. 13~16).

Estas pruebas son auxiliares en el diagnostico, el pron6stico 0 la valoracion del estado inmunitario del huesped. Por ejemplo, una candidina positiva indica contacto previo con el hongo; Ia tricofitina es titil en dermatofitosis inflamatorias y profundas; una esporotricina positiva en presencia de lesiones clfnicas es diagn6stica; la coccidioidina es una intradennorreacci6n altamente especifica, una respuesta positiva indica infecci6n, si hay lesiones importantes y es positiva, indica buen pronostico pero si es negativa y se acompaiia de tin.los altos de anticuerpos fijadares de complernento, el pron6stico es malo, Algunas, como la histoplasmina y la paracoccidioidina, generan reacciones cruzadas entre sf.

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Serodiaqnostico

y deteccion de antfqenos

El primero pone de manifiesto la presencia de anticuerpos. No ha habido gran perfeccionamiento de tecnicas de diagn6stico serologico en micosis endemicas, En la deteccion de anticuerpos, se han usado mezclas crudas de antigenos que dan reactividad cruzada, y no se han estandarizado; en la biisqueda de antigenos, se han usado tecnicas recombinantes, El estandar

Diagnostico de lacoratorio II 51

de oro es el cultivo, por ejernplo ell histoplasmosis, aunqlle este puede tardar varias sernanas o ser negative.

Las reacciones serologicas mas conocidas son las de anticuerpos precipitantes 0 reacciones de precipitaci6n Estas utilizan antfgenos celulares (somaticos) y rnetab6licos, segun provengan de rnachacados ce cultivos 0 de filtrado de los rnismos. Una de las tecnicas utilizadas es la doble difusion en "gar, la cual se practica en cajas de Petri que contienen gelosa (agar); en un lade se deposita el suero del paciente y, er; el otro, el anngeno; la reaccion anttgenc-anricuerpo se rnanifiesta por lineas opacas de precipitacion (fig. 17-7, cap. 17).

En la tecnica de Ouchterlony, el suero par probar se coloca en un reservoriocenrral. v los

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anugenos de modo rad12_ck'l .y',n ,I~· mi8tTia,d.istancia (fig. 5-8). En Ia tecnica de gradiente, el suero se ubica en un surco central, y los antigenos, en depositos laterales a diferente distancia (fig. 5-8).

Las teenicas de electrodifusion pueden ser inrnunoelectroforesis y electrosineresis. En la primera, se deposita en un portaobjetos una capa de1gada de gelosa purificada en En amortiguador de Veronal; el suero problema se coloca en un surco central y, los antigenos, en dos perforaciopes laterales; la separacion electroforetica de los antigenos se logra al colocar los electrodos en los extremes de la Hmina y la lectura se efecnia en uno a cinco dias (fig. 5-8).

En la electrosineresis, se combina la electroforesis y la inrnunoprecipitacion entre los anttgenos y los sueros que contienen los anticuerpos; las globulin as emigran 3.1 catodo y, los antigenos, al anode. La lectura se hace en dos a cuatro aoras. Este metodo puede Ilegar a constituir un importante recurso diagn6stico y de valoracion de tratamiento.

Otra reacci6n serokigica es la de anticuerpos aglutinantes de partfculas de latex 0 colodion sensibilizadas can los antfgenos respectivos; se ernpiean en Candida y Cryptococcus,

. Los anticuerpos fijadores de cornplemento en general causar, tltulos debiles; en algunas micosis, como las coccidioidornicosis, aquellos son rnuy Miles para establecer el pronostico; los titulos altos indican mal pronostico y, los bajos, bueno. Las pruebas de inrnunofluorescencia indirecta se usan scbre todo en investigacion; consisten en poner er. contacto el suero del paciente

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Fi~.5~8.·r~~~i,ca~.de' p:rffipitZlcii6n ~n,inmul1oelectrofor~~i5. (Modific.ada d~ Sc'g;et'a;n G, ;v1a'~~t F, OrO'l!'i,et'L'Di~~(' , , ;. ~"'/i.-' n05tl{"de,'laboraWlfe en mycologl'~ medica Ie. Pans: Maimne, '1979_)

y el ,Snli,gellO ell ~esell;cia de. una sustencia fiuo- en micosis sistemicas y nosocomiales, dildo el I' .

rescenta. Si hay anticuerpos espedficos. €..sto~ aUIl1~nW en el mimero de infeceiones y Ia apsri-

preseutaran ftuorescencia baj 0 un m:iir:.roscop~()ci6n cit. rui.sl~.pci~.. f

de; lim !.:dt;rav:iQJ~ta; tal bechope.r.mi!te cuantificar Las pnncipales d]ficuitad.es a las, que se ~

tifLdos ma$,8..l,e¥adosde anticuerpcs que con fija- enfrentan los metodos actuales son: las variacio- I

cion de complemento. n~s en el pH, los di:el'cntes ~amaiiQS del inoculo, r

Las teoiicas inmanoenzimstieas qLJ.e se usan eltipc; de media, t!empo y reroperalllra de incu- I"" .

.ampliarnen1ie en otraseofermedades, se luilizfln baci6.ID! }', porsupnesto, las grandea dif~encl~ en

e[!investi.&l~ci61JJ (I en la,bora~(!irios muy cspecialii-pruebas para levaduras u hcngos filamentosos.

l.~d()$ . Pruebes talss camo el ~tudio innnmoab- Debido a Iii falta de estandarizacion los resulta r

sorbente enzimarico (ELTSA), el Western blot, ~s,cm v~a~1es ylacorrclaci6n de l~s restlhad{l~ ~

el radioinmunoanalisis (RIA), Ia electroforesss, in vitro no ~ clara COn losresultados Ji~> 11i1.lo. .1

Ia cenrraimnanceleetroferesis, 0 las pruebes Para mediF esta ;9('!t1SihU!.idad, ss h:a:Ell1.tlhzado los t

de iarrranofluoeesceacia seaaalizan de manera siguientes metodos: tulb03 germiaativos, eonsu - .!

SlI.c:iIlMI en 'los capltrdo,s respectivos. mo de metabolites, citometna de flojo, rnetcdos ~

Hay anticuerpos monoclonales contra Ios basados en agar y dilucien de C.1Je'lQS de eultivo. ~ .

componentes estructurales deIes ho-ngos ?at:.6ge- La m.a:yorfa:. son poco practices. Les teenicas die I

nos m~ impm:ilMl:teS (disl}omob en el comercio Ilig1llr son [:lci]es de practical: y de bajo cesso, peru !

"PAm.o~odomu-b:lse<d latex particle .aggiutina- rieaen gWJ'l. variaeion de: resultados. 1

tion" y EUSA para Candida .• A$pl2rgW~ls)' Cryp- Los metodos de diluci6nson.lo.s rr~{is arnplia- I

fOCOGC!lS), 3U introdu.cci6n ha desarrollsdo LIl! mente usados y ya t':um sica estandariaados per el l

de~ci6.n de anticuerpos circulantes en: pacientes Naricnal C()mm~~He.e for Laborawry Swniw.rd:!! ;

icuri.lilI1i.ocle~c.10Dit~s y SOil la base po~ei!lc!a] piml (] 995). pero 'B~too reservados para Candida y

nuevas pruebas cit de[oociOn. Cryptococcus; no 1l1!i)' metodos estaadarizados para bongos filamentceos. La ccnelacien entre

los laborstorics que USM estes m6i[oo\)0 es de 90% para anfotericma B, 15% FI1I]!;!!! kr;l~o<co:n~ol. 85% p~ 5-ftuoro.ci~o:s.i:mt y 88% para fl.'I.wona~ 2001., pero cl metodo no es sensible para detectar resistencia a anfoterici na B _

52: III S ecdon ! ASpectos gen~rale5

$= slLIero

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A FARMACOS

Es csda Vt2 ma,~ necesaria 1111 creacion de esrudim; de sensibilidad para probar 108 sntifungiccs

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En la mayoria de los cstudios publicados, se encuentra disparidad entre la concentracion minima inhibitoria (eMI) in vitro y la eficacia in vi'Jo, pero los metodos estandarizados han mejorado la correlacion, Con la creacion de pruebas in vitro de metodos de dilnei6n decaldos de cultivo (macrodiluci6n) y estandarizacion del inoculo par espectrofotomeufa, hoy es posible correlacionar la CMI del farmaco con el resultado clfnico,

La falla en Ia terapeutica se debe a la res istencia, que ba sido estudiada fundamentalmente en Candida y en particular a fluconazol. Se ha perfeccionado una tecnica de dilucion en CHRO~ Magar-Candida usando plates irnpregnados de fluconazol para detectar mutantes resistentes e identificar las especies.

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Se basa en el uso de azul de Alamar para producir cambia de color de azul a raja, cuando se reduce en presencia de un crecimiento microbiano. Las sales de tetrazolio pueden cambial' de color cuando se reducen, y para detectarlose usa el espectrofotornetro.

La tecnica de Heatley consiste en tomar una suspension homogenea que contenga 2 rnillones de esporas, Ievaduras 0 fragmentos de filarnentos por milimetro y distribuirla uniformernente en una caja de Petri que contenga Sabouraud. Se colocan en la superficie pequefios discos de papel filtro previamente impregnados 30 a 60 min can el medicarnento par estudiar y secados a 37°C. Cuando se desarrolla e1 hongo, se rniden las zonas de inhibicion a1rededor de los discos.

Las pruebas de contacto reproducen rnuy de cerca la actividad antifiingica in vivo. Se colocan fragrnentos 0 pequefias gotas de material anatomopatol6gico en llna larninilla que tenga concavidades; se cubre el material can la soluci6n antimicotica y se rnantiene eI contacto 1 a 10 min. Se enjuaga dos veces con agua destiiada y los fragmentos se siernbran en Sabouraud. El control se neva a cabo con especfrnenes no procesados de esta manera. Se incuban durante e1 tiempo necesario para el crecimiento de; hongo por estudiar, Una variante es colocar en los tubas con los medios de cultivo la sustancia antimicotica a diferentes concentraciones,

La prueba E (E test Biodisk) se ha usado con b acteri as, es una banda impregnada con un gra-

Diagn6stico de laboratorio '" 53

diente definido del agente antimicrobiano a probar. Las bandas se ubican en el agar sernbrado can el hongo a determinar. Si.se presenta zona de inhibicion, se lee en la cscaia irnpresa en Ia cinta 10 que corresponde a la concentraci6n del farmaco. Hay dificultades para medir derivados azolicos. Tal prueba quiza sea prornetedora en la valoracion de Ia eMI cuantitativa, es similar a las pruebas de disco-difusion y esta cornercializada,

Se preparan cuatro a cinco tubas con 9 ml de agua esteril. Para el primer tuba se calcula 1 g 0 1 ml de sustrato, por ejemplo, suelo. Se hornogcneiza y se pasa 1 ml a1 segundo tuba y asi sucesivamenre; de los dos illtirnos tubas se toma 1 ml y se vierte en cajas de Petri esteriles,

.tn <f!'t\l~ po) y~d~~,20,.[I1.! .qf', agar-patata-dextrosa ii..indidci. y §:pf~ili} ~.o~<ivG.Eri otras dos, sf: pone rosa de Bengala en las mismas condiciones y se homogeneiza por rotacion sabre la mesa.

Para sustratos poco contaminados, se cortan en una caja de Petri fragmentos pequefios del material problema y se distribuyen sobre la superficie de otra caja con agar-patata-dextrosa igual que la anterior, se deja solidificar y se incuba a 28°C. Para hongos del medic arnbiente, se colocan cajas de Petri con agar-patata-dextrosa y rosa de Bengala, se destapan y exponen al ambiente 5 a 10 min, se cubren y se observan a diario.

AISLAMIENTO DEL HONGO

El hongo pat6geno debe ser aislado de otros rnicroorganismos. Para las Ievaduras, se pueden agregar dos gotas de una rnezcla de penicilinaestreptomicina (5 000 UJrnl y 5 mg/ml) 0 ernplear medias que contengan cloranfenicol (500 mgIL).

En hongos filamentosos, deben eliminarse las bacteria.s saprofitas al colocar la muestra antes de sembrarla en Ifquido de Raulin, pues tiene pH acido e inhibe bacterias; tambien es posible ubicar la muestra en una solucion con antibioticos antibacterianos (penicilina-es~fe.ptolllicina-cioranfemcol) o situar dos tubes de la rnezcla de antibioticos en el medio de cuItivo, pues estos se difunden bien; para muchos es mas sencillo utilizar medias con antibioticos termoestables (c.oranfenicol).

Es mas dificil eliminar hongos sapr6fitos de los cultivos; para lograrlo, es factible incubar a 30 a 3rC (los hongos sapr6fitos banales se desa-

l'I«JHaD con mayor lentitud a estas ller1'!pet'a~tUra.s); lltilizaJ" medi,os especiales para agestes pat.6- genes, con mm.gre 0 v:iltili-ru.lla~, 0 simplemeate ,empl~ar medics con cieloheximida (Acti<liOil1J.e).

Tecnicas deaislamienlto

para liquidos, solidos yambiente

S e usa una tecnica de dilucicn 'i vaciado en placa pan sustratos liquid os , 0 s6hdos muycoataminado$.

IDENTIFICACION DE LOS HONGOS

. A'[ (I~nene.f ei cuhi YO tie urrhongo se .debell. estu-. . d!iar sus caraoteri",~icas macroscopicas, microsc6;picis y iis]oh5giclls para de:timill.- el genel'O y Ia e~pecir;.

Las caracterfsticas varfan con ·ei.mediOde cultivo, la naruraleza d!~ 100 aJ21kares, lapnreza de la peptona, el pH, el grado cl!e hemedad y la ~tm--p~rruca- Por eso es p[\clerib~~ IltWZM' siempre medic g~u.cos:ndQJ de. Sabouraad para es;tudial' y comparar caracrerfstices eSl~nrulr ell las mismas condicione-s de burnedad y temperature, e",jt<1J1dQ ccntaminscioaes.

Morfologfa macroscoplca

1. Forma y tamafio.

2. CO]O[C[l]a superflcie Q en el reverse.

3. Difu60n rllt!. p~mI'...n~o-

4. ColO1ad6n:. blanca, LOsada, gris, anaranjada, verde, rojiza, negra.

5.. Texture: yesosa, glab c a, te1"rosa,gr.anubHI, vellos fI, lanosa, eerea, eremosa.

6. Superficie: elevsda 0 plana, levantamiento cenbt

7. Aspscto: plegsdo, radiadQ, cerebnforme, crateriforme.

R Consistencia: dillra, suave, firms, membranosa

9. Ra.pdlez de' crecimiento; per ejemplo, las le1i'aduras y 103 agentes oparrunistll$ crecen en 24 a 4.8 horas, y los dertl1at6fitQIll en 5 a 10 dias.

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Morfoloqfa microscopica

Pusden utilizarse los. metodos que siguen;

lI.. Au.Mi"s.u~ .:1 [raVes de.l til!ho. Se I.!t:ihza la lupa del micrescepio, se ooserva el borde de crscimiento. :& un metodo poco precise perc rapido.

2. An~msis de un :fragme~.~o del cilJlIUli'o.

Consiste 'Em tomarus fr.agm~!JIt[) de la 0010- ma".-dilactl"a.rlu y obs~a:rlD COn i!I~111 de lac" tore-nol. Es el m~lodo habitual, pen,) puede destruir los aparasos esporfferos y diflcuftar la idennfieacion.

3- M&todo de la cinta adhes]¥~rr~siP'u'el1Ite ([\i:;us,Iil.-;\funn). Bs una van.m.te de Ia tecnicaaoterior y permire ebservar las estructu-

,.~B$ .f['figi(:~.~. ~;;."'i:~~!j!~r'.-:iQ.?~.SE .recerta "tin peq'Llc'I' •. o .cua4rt;r1O>G€ i:::~ria.\l se Ml'riete a . la pMtI?! terminal d.d asa de platmo, se sphca cespues la parte adfues:i'~a sobre ]:111. colonia y luego se w]oca. sobre uu portaobjetos co!'! una gala de eolerante, se retira el asa, ~e aiiade otra goia de eoloraate, se pone un c'il.breol;]jC'~os y se observa al .. mric.'[;)s:c:opio.

4. C1lll~tJivo ea Hi]iIi1LiOOlJrt 0 microeu1ti.vo. Bs el mfu: precise 11 permite observar las estmctUf.as ilin,gicas in situ. COllsis~e enobtener uri cuhivo sobre un portaobjetos y Ob$~f'if1l!:: el hongo sin deterioru de su morfologia (figS-8).

Ell elestudicde los 6rganos~ngic.os se debBIl estudiar: •

. 1. Tnlo:!'l.I.aroentos e levsdnras: grosor; biftrrcaeiones: presencia oaIUSe[lc11J1. de tabiqnes (miceliot.1.bicado OOllIiiOdtioo); color.

2. E~:ronl,s aseXl]ada.s '/ aparam conjdi6geno.

3. Espcras eexuadas y estructnras donde se forman.

4. Ol_a]quier fo~i6]l 13nexa (om<lroellwcio~ nes) (fi.g. 3-6, cep. 3).

Este estudi 0 pued'e ~aCmlar.lle miJ!i'z.1miJlo contraste de fase.

PRESERVAC16N Y CONSERVACI6N DIE CULTIVOS

Los laboratcrios de ensenanza e investigacion deben preservar un ~ coleccien (~tocl.:) pant dis, poaer en el futuro de colcnias tipicas y atip~cas

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Oiagn6stico de laboratorio .. 55

de los hongos parogenos. asf como de los agentes oportunistas. EI objetivo de conservarlos es preserver su viabilidad, sin degeneracion, variaci6n ni mutacion.

Se pueden mantener en agar, traasfiriendo periodicamente a medics frescos inclinados, Para bongos fiiarnentosos, es posible utilizar

Sabouraud simple, agar-patata, extracto de malta, harina de rnaiz (corn meal), y para levaduras, Sabouraud y extracto de malta preferenternente; en caso de la fase levaduriforme de bongos dimorfos, se puede usar infusion de cerebrocorazon.

El metoda de agua destilada sirve para preservar mas de un afio, y hasta en 10 arras se obtienen esporas fertiles, practicamente sin

cambios rnorfologicos ill fisiolozicos. En un Como la rnayorfa de los bongos pat6genos

'pe'querig frHscoJe'~t~~t~l t'o~;·tal~·6ii"~~~~':~;~~~::;'t:::'~:!~r."~~Q~1~,~rsnllcet?s, y .. presentan carac[eri~tlcas.

revestimiento de caucho, se afiaden 2 a 4 ml de amblentiles carnbiantes, el usa de tecnicas mole-

agua destilada, se esterilizan en autoclave yaqui cul ares permite estudiar cualidades estables e

se transfiere una parte de la colonia sin exceso de inmodificables par el ambiente, comoel DNA del

agar; se enrosca firmernente y se coloca un trozo gen y el acido ribonucleico (RNA) molecular.

de parafilm alrededor de latapa; se pueden CCD- La rnejor caractenstica para discriminar

servar a temperatura ambiente y en la oscuridad. individuos, cepas, especies, generos y familias

Es comedo. sencillo y barato. debera ser en el futuro cercano Ia secuencia de

La colonia se puede congelar en refrige- nuoleotidos de moleculas de DNA que llevan

radores a rnenos de 70°C en agar a glicerol, se la informacion genetics, e indican la dis tanmantiene por mas de un ana; S1 se obtiene un cia genetica. Los estudios moleculares tienen

inoculo, inmediatamente se debe regresar al con- apiicacion practica pues permiten distinguir un

gelamiento. Congelado en nitr6geno lfquido, se aislarniento de otro. Sin embargo, aunque estas

conserva basta cinco arras. Para el selJado can tecni~as se han perfeccionado en un tiempo

aceite, se cubre la cepa con aceite mineral este- relativamente corto y, en ocasiones, son funda-

ril (dos horas a 120°C); esta tecnica es simple, mentales en el diagnosticoes dudoso que en la

barata y se prefiere para zigomicetos. Tal vez la rutina diaria puedan suplir los metodos morfo16-

tecnica mas conveniente es 1a de Iiofilizacion, gicos tradicionales. Par otra parte, hay que tener

pues permite conserver hongos hasta pOI 30 y 40 cautela con su uso, pues la simple amplificacion

arras. Como los tubas permanecen sellados, se del DNA en enfermedades por levaduras, como

elimina Ia posibilidad de contaminaci6n. pitiriasis versicolor, no necesariamente es diag-

nost.co de infecci6n; en cambio en onicornicosis can cultivos negatives, el procedimiento podria indicar si se trata de un dermatofito a de un moho oportunista, como Fusarium.

Las tecnicas geneticasutilizadas en la identificacion de especies y generos de hongos COIDprenden: el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restriccion (RFLP, por sus siglas en ingles, restriction fragment length polymorphism) del DNA mitocondrial (mtDNA), la reaccion en cadena de la polimerasa (peR, par sus sighs en ingles, polymerase chain reaction), e: analisis del polimorfisrno en Ia longitud de los

Campo oscuro

Se invierte el sistema optico y se observa una imagen brillante contra un fonda oscuro, 10 cual permite precisar las caracteriaticas de las paredes celulares.

Microscopia electr6nica

Se usa en investigacion rnorfologica yfisiologica. No es rnuy ritil en el diagnostico.

BtOLOGfA MOLECULAR EN MICOLOGfA MEDICA

OTROS TlPOS DE MICROSCOP[A

Contraste de fase

Se inserta un disco de crisral 0 placa de fase en la lente del objetivo para retirar los rayos luminosos que difractan a traves de las estructuras fungicas, resaltandolas con brillo de fase. Es muy titil para visualizar las estructuras de reproduccion can mejor definicion y para fotomicrograffas elegantes.

ffigl~. aI!lf!ea~i~S" iem:pe.ri1t!l~) 'BS Ji)f1_Jj!j' i.m~orta.J'J.'· te para. C0111[10.[,3;[ ]<lie5:pE;cinci.d~d! d~ Ia ~cci.6lll. La ta depc:;.nde de la coropcsicien de bases y d®!. tamaiio d!e!o~oebI3!CLQres ql.:l~s~ unen cads uno a ur.ua eadena dLfeJfeoIlite, de1i:m1JtaIlJCiLo 181 seomenc;i,il (Ie liIllc1e6tlilos qJ.l!Ie, se ]Jr>ele[ldeampWic1!![': La

se.]eoci.6n de diehos ce,badores CQllistiwye UiI)J~) de

los puntas rn.is cutieos de la prueba de peR, y 3)

~xteJl~i6!} de 1", cadena de DNA a copiar a. partir

d.e Los cebad©[ts. iIltlJizalldo ~C\S [liUc4Botidoo pre-

~e:ljjl!es en la soIw:tlOlm.. Dicl:lOl e,;ten,s.iJ6111 ill. ]~e\i'aa,

eabo la e:ntilima pa]imen.sa, de DKA,.ll:IuS' wicia

~n!' actividkuiu'il.S ieecnocer ·La. 'LliJ!.i6:i). de. loS ol!'.ba·

deres a 1 as ~adeIl<'l$ de lamuestra.

La PQlim~nHJa.l]t.ili1.8Jclalfl~~\l>llmente" p.!)o- I

ceoe]]te de E$Che~,~hm tot~, .. ~e . des\~ahmIDz~b~ tl .

' •• '. , '. '",.1 ;.",~}t.~~~i~\_~.~_,s.:~~~l~a .. ~~~,r-a~:rra:s mayores de., . .' .)

. ~. -.. , ~,., . ' .' ... ~.~ .' ).i'Q~.c' &~r(ll.~~~ 1~ r.rt{~ ~(\ipa:oo eadacicio y,por ~~-,. -,~··l

tanto, habfa que reponerla <11 inieio de cada fase j

L",smoltc~iii\$ de, [)NA 0 Ri'J:A swM:tico son mill)' de ,extensl.GIl .. Sin embargo, hoyen oia. se l.uilizoru

ililtJi]izadia;sc@.IDJ:! "so[llll,a:)" en m~~~~fa gen~tit()a. enziroaste:rm.oe~taMe:s como la polimerasa de

pan. de~e.ota!t'. 'l.!'iia .Ilibridlaci.dl'l d~.ii_ddo [ludeico",nq, p:r;ijced!e~te de] uric[l;oQIg~isrn() ~~6fl1[)i

];!!s seeeeneiasespeeftieas de DNA o RNA .8 IJle:I',ll":IHoJ aq~~tl:rricHS. La c~!~dW die, oop~as de' la

F.ro~edi:mj~flto ge!l:eJ"<"d es marc8lf eJ! ~c,'idlo nuclei- secaencia de DNA delimitado par loseebsdores

co sonde, gM~rRlmefite ron fosfa~o radiactive se incremeeta exponencialmente, debido ag:\!e

y dejar que 1~, sonds de eadena se~1Cilla bil:lride las neevas ,oopi!l!s tam bien sirven 'DOIDO patiJ;Q~(liS

~o.nacid(l Jjj)~cllieico .mbIlGC;;!!t~'!:loo.(rJ IMriyado d.¢], eiIJ. 108 Slilhs:i.g~:ilt:[)jle3. ciclos. La, Manica de ~C!R

DNA donade. Pm; ~pt8iJ;"eamnie~no e$,pecfic@ drt presents, s~n el!1"lIbm'go,W1a]imi.tadolll:es neee-

bases Gcrmp~1iH'Ilarias, des ])Ql'ii!1!l!lde6tidiOiS sario cOiIJ!~ce{[pMle de fa secueneia que se gjw.eI\e

de cadena sencflla s610 se hibridruan si son total- ~lificar, al menas aquellas zenas en las qu~ se

mensecomplemeatacics. Ulltl.t,;fu 1 osc~ltla{k):res.

Se .h,a lIsado .t:l1I. C. albi;;.'Qn~, C .tropiwZi;s J c. parnpsito;sis,espe~~es. de "'sp~rgiUtls, Hcwaetl: w!'!m>1lckii, J1'- dermalitidis y ,eSl!ec~es de Mal~5'. sezia. H~ya~~l.ma8diiSporub~~ I;[J: el comercio

(AccuprDbe, Gen-probe) y parasu implementaci6rn se requieren pm:ciolles.-muypequefias de 1a eolesia ([ .~2mm2) y la utili:z:."lc~&1 deun .r~uni.n6meb:O. Es(¢· m&todo e'$~(H a'll ]aici:enn:iicaei6l:'! de hon.gos pat6gen.osi• pere esta l'UITn:.il~d.o Slll, usc en. patogenos tisulares,

.55 •

SeGoionl

fn'lgrnlSJII[Q$ de ~tricci.&~ ~:k ~eg~mlt3 itmp:HfiJc:adas per PeR. (1?C:R-RFIJt ~. anilis:i;z de] polimorfismc enla conformacien die Ias cadenas flefieJ]1ns de DNA :am.p.Li.fi.CMQ par peR (peRSSCP}, 0 eJ fUMHis]s de pa~imOl!"fjllllno del DNA ampIFJ;l.cOlCO con c:ebooo.res m:rrn.tr.anm (MPD, pOI sus -s]glas en .ingles, randomo:mplijied poly" morphic DN.A) , Thmbien en combinacion con OlOOS miiwdos. como la elect4(),ioresjs en ge:]es deagarosa "i la ~Ms~erencia 1'Ii[l,embran8s de DNA (Somhem. h.~ot)o Ia de iRN"A (N"o[·them o]o:t). Se han eeeado lh.err.ume[llas de gTW[I utilida.dn.mw pMAI e5Itlil.dios ge]letti~os y fi]ogenekh~(lS, como para estudios epidemiologieos y diagndstiCQS de los ~OLntos pat6g-e!llOO illv(iJluc~QS tWI l<'lls i]lffJeccj'onl!;s ~c6tic~s.

,- ,

R:eacci6nen cadena de la pollmerasa

Elgran ixitoobte.:rudo a mediadcs del deceaio de 19'80 ]lQ~ K1i!1)! Mli!1I]isw~'sis:ij6 en Iograr il":! ~/~tlfO gran Il!tll]b~1 de copias de'! f~'ag;melltlil~ e~spe_,. cffi.ro§ de DNA, bw[-n.dose ell! unprinci:pio mny seneillo: Ia utllilJC'i6n de mecanismos similarea iI.IO$ usados per hpl-opia ccl.JJ1a e!11a r,epli.caci6n cl.el DNjl,.(!lJl'lI.OO:~~ 1.11 di\!:isi,jJii! oelnbr. La ~eaad6~~

e!fiCade'§1'" de: hi. fQtim.~asa (fIC'R,) ¢OlIJ.sis:te en Ia :repeti_ci,f),[lc.fc!:i.ca de tres etapas: ]) desln;i!t~i· ,acj6:n del DNA bicare.n:ario p~esM~ t.il .Ia .ffil!l$.;l' tfa para separar lasdos (;ac'l.e.fifi~, mediante lao irpiicaci.6n de remperaturas ffiayoresde 90°C; 2) ~nidlJi. esp-.ecifica de los cebadoees {oligo1.li.!J:C:~.e6· ijd.o~ ~i!lt6~i~oll.) .~. ~. cad.:::I!J;l!SSi~!i!~i.ua'srn.ed!allte, oo:mp.kmentariM8JcI d.o 08J3M. Lili. tempetatli.!:I'1I .<J.. la que se re:aliza. esta union (Th,POf Sus siglas en

po,limornsmn en la !~)Ing;itud

de los fra'gm,entosde rastriccion

Esta tecuica, eonocida co roo t&;njca RFLP, P Elrmitediie:renci!!.I di~tii!leos mi,(':rQorg:!lr~lsmo\S median.!:e ,~ .iIDMis~s de _pa:i:rones ,ole ba]l(il;as, derivades de larcrera de su re.spe.ctivo DNA. Bstos pat1J;O~!J, eonocides OlJ11lO'peri!es d!eresbioci6[l de] DNA, se originan debido a la act.i:vidad de ]1IS enzimas

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endonucleasas de restriccion. Cuanto menor sea el tamafio de la secuencia nucleotidica, mayor sera el mimero de fragmentos que se generen.

Las endonucleasas de restriccion se denominan con tres 0 cuatro letras que proceden del nombre de la bacteria en la que se han aislado (p. ej., la enzima Eco pro cede de Escherichia colL) y ademas se le afiade UJ. nrirnero romano (Eco Rl, Eco PlI, Eeo 47III), debido a que se pueden

encontrar varias enzimas de restriccion diferentes, que reconocen distintas secuencias nucleotfdicas en la rnisma bacteria.

Los fragmentos se pueden separar mediante cadenas sencilias de acido electroforesis en gel de agarosa, obteniendose desoxirribonucleico de regiones perfiles de ,e:tricci6n c~acteristicos,. Lo~ perfi- amplificadas par reacci6n

les dependeran de Ia enzima de restnccion usa- ,.

da as! como. del DNA l1tili?-i10o. rDNA, l]1)J::k32".<. en cadena ae I~ p9.ilmerasa

,[nDi~AJ o mWNf\)·,.·iGriqu?):l"mi,;'i;:t!)ii"iA6" :: ~ta ~tcni~a ~CR-SSCP) s~ j)'asa ~~ :la:;r~iaci611 '.

es el mtDNA. La cornparacion entre los perfi- 1 ilid d 1 . fo: F' d h br d

• • F' • .', ,entre a mov 1 a e ectrororetica e una e fa e

les perrrutua diferenciar vanas especies entre 51 D"-TA . (DNA) f

. . . .; ~ monocatenano me . y SU COD orm3-

o incluso en poblaciones dentro de una rmsma .

cion, que en definitiva es reflejo de su secuencia

nucleotidica. En esta tecnica, el DNA bicatenario (bcDNA) se desnaturaliza a mcDNA y posteriormente se separan dos hebras mediante electroforesis en gel de poliacrilarnida, en condiciones no desnaturalizantes. Cualquier diferencia en la secuencia del DNA dara Iugar a un carnbio de movilidad de las moleculas de mcDNA, que se visualizara al final del proceso.

especie.

Este metodo se usa para identificacion, clasificaciono tipificacion. Se ha aplicado mucho en hongos dernatiaceos. Con base en estas secuencias, se supo que el agente pat6geno asexual S. schenckii Ega filogeneticamente con el genero sexuado Ophiostoma; tambien se han investigada filogeneticamente especies de Candida y Blastomyces. Hay tarnbien fragrnentos mitocondriales de DNA que contienen genes de transferencia en T mentagrophytes y A nidulans.

Analisis del polimorfismo

en la longitud de los fragmentos de restriccion de regiones amplificadas por reaccion

en cadena de la polimerasa

Esta tecnica, conocida como tecnica de PCRRFLP, consiste en el usa combinado de la teenica de RFLP, explicada anteriormente, y la tecnica de peR. De esta rnanera, se amplifican fragmentos de DNA especificos mediante PCR y posteriormente se tratan can enzimas de restriccion, que los cortan en trozosmas pequenos. Diferencias en la secuencia nucleotidica entre las especies estudiadas daran lugar a fragmentos de diferentes tarnafios que se analizaran mediante electroforesis,

Diagn6sti(o de laboratorio _ 57

Los perfiles de DNA obtenidos tras la electroforesis son mas sencillos de interpretar, puesto que hay un menor mirnero de bandas y una pequeria cantidad de DNA es suiiciente para llevar a cabo el analisis, ya que se obtiene gran niimero de copias tras su amplificacion pOI peR. &to reduce significativamente 1a cantidad de muestra necesaria,

Analisis del polimorfismo en la conformaci6n de las

Analisis del polirnorfismo

del acido desoxirribonucleico amplificado con cebadores arbitrarios

Se conoce como tecnica de RAPD, denominada tarnbien por otros antares AP-PCR (por sus siglas en ingles, arbitrarily primed peR) 0 DAF (par sus siglas en ingles, Dr/A amplification fingerprinting). Se basa en 1a amplificacion simultanea de multiples fragmentos de DNA nuclear mediante peR, utilizando para ello un unico cebador, normalmente de 9 a 15 bases, cuya secuencia se elige al azar. Las temperatures de union (Ta) usadas (35 a 39°C) son mucho mas bajas en comparacion con la Pf'R tradicional, locual favorece la poca especificidad de la reacci6n. Los fragmentos se analizan mediante electroforesis,

El numero y el tarnafio de los fragmentos amplificados a partir de un determinado DNA

1. Sondes de DNA. se han desarrolledo para H:~st;op,{~$'ma c:apsldan.rm. C:occidioides im!tfitis, Cryptococcus neo/annan.>, Btos~omyce.:r dfrrrarMiti:.dis,~-ped~8; de Sach(4~ 'rolnyces, Candida alb.icc.n>$, CCf,tdida kr,Msei. Candida .l,~s.il!anirne, Pr.eunmoc¥!!tis j.irtJv'(5;i (P carinii), espeoies de Asperginu$, espeeies de Pt:nidlJ.(u.r:I.~" Candida glab.m;t(~ y Saccharo/1!ycesce.revis'ia.e.

Es~eme~odo <1!!liliza cl. DNA tCMai. de 1m. orgauis- 2. La t~.C<li de peR ssha pottfuoc~o!:l;(i!d)o en

mo y no s6]o, el DNA ribosomal 0 OOUl()(lIIdlri<liJ Candida, Pne:umocys;i;s: j.iJ-ow.er;i, e:$peGJ!e$:

El.DNAse corta eonuna enzima de resuieeioa de A~peT:gm~t.~,n-ic.h{u:I~rma, P se.rklldl.es-

y $e: sep~n. en f'lC!l:gmJmj~oo: pOii' e~ecWJfuldise[l che.ria, SCcdosporium, Crypw(;'Oat!~ nee-

gel de~:sarQs~, hlego de ser de.<:[!<;Iltm:alllmo· se jormaf1s variedades neQ[m-maJls yg{jtt~i,

lf$!lcs:~e(~: a l:IfJ@j me:rnb~]Ua. de naY]QIJi 0 nirrcce- a:s.~ ccmo SUB c.l<\t\fo serotipes, especies J~

lulosa, 'j ~.:iliadB 18. sends, wi). secueneia dona- klw]or, S .9ckenckii, Aspe'l;gillu8 :niger y A.

.. ,< da 0 1)]1 olig~!l~l(;Jeii600' .m..arc~Q P!!lf@":h,il\ool,qv;~i '",.' ,i~iV1)jS.. . • , r, - el ficrigme:rnto cO!Ll1JP.lemnenWl~' del DNA jl~!fido .:: ~ ~ ,:,3.. j:,~ tcicmca de EFJ~P si ha e~it~b1~Cid.c<pa.t~·

Se obseeva en <lilliiOfi'acii.ogrnflfl;CJjull.m!olulJ[llru.s, el g&!Emo Fo~eca~QI y[;l~llJ las especies de

ceneia Q .c-eaeci.6n. en<.imati.oa. Se IltlhziI en C Candida (C trapic(1lis, C. paTOf)silopSiS, C.

albi~an;; y A fto~iga~It4. ltl.r'['4~i:aei C.h~lse,i y C. g.~abrt'\\ta).

4. La t~~t1ica de RAPD €:sta dsscrita en 10$

vre que se llI@.ce el mismo cebil!loi! Y se:~aga el estudio en las mismas circunstancias, De ·E:S:te modo, los .[ler]iJ!es ,tibte[lJ~,m.o~ msdiame ]iAPD h<l!Ctlfl posible fa d!ifere:nciaci&n del DNA <I nivel de.(il~ecie, G inclnsea ]live] de bdividuQ,

Southern blotting

Analisis eleCtiOforeti(Q del carlotipo

lis elpatron debandas Vi3U.aJ:j~d!O ('lift un gel,don• de cada banda es la ~ttS]61i de las molGculacs de DnA cromesemieo que han S]OO separsdas PQt fFGi8 (;>or Sus sigJas 'e.cll illlig~~, pldsai foU gel e.lectropJwUS1.s). Ha. 0em.ostrad!o SI!] utilidad en estedioe ,eplideDrioI6gjOOll d~ C«n.dida, C neo!mw'UJm: y Maiassezia; till1lb.~e[l se ha e·s:rud:iooo C inW"-jt~'3 y se .1Ji<li.tl!sadb ua rne~oClo mofu reeieore corHo ro;!A to~ de rranrlerenci.a (tm.NA,po[· sus sJitias en l:ng,Ms, t:Pial nwr4~r .l!r:NA) qUt n1I~e!i[lJ;a! patrcees S.i]ltil~-s ai cerioapo eleo~f(Jr.!5ti~o.

Pollmorfrsmo en la longitud

d~ 105 fraqrnentes de restriccion

y carlottpificaclcn electroforetica

Eswi'l cOlilstJiruyerfl dos procediffllieIlitosqne miJeo diDe:reEim;as g~Gupicas, panie:ndoiJle que des organismps jden.t~cos ~eC!en. la rsisma seeaeneia de .DNA.. lID DMA rilJOiiil011111'J yelmi:i~condria1 se dligle:!:'e[l eCi'l~ gaUi!rica ,encima de :re~.tric¢i6!:!, CQ:m,o ,EcoRt I~vletalldoufrngmen~o.s Ql itJnna dei}8!udiaJ SI()'~([,f;;· un ge] ~~Crt{~r'QfetiCtO (:oloreaJ.o.

Las aplLcaciQn.es direcras de las tecnicas de b]oiogia :m.o~ecu,da. se pueden observer en los s:iguientes eiemplos:

gtfuer{)i!) CaJlJiday Ma:lasseziia en SI]S diferentes especies y se ha descnro en varies ht:mgJos" e~~tre letIQ~A$Ju~'rgif1~$ ft,{J'l'tig<l~~I'S.

Los a[!ah~ m.itoc(JildriaXes del DN:A se frI.an apfuCAdB amphiliffiii1Jirre :;11 los llQ.:tgoo d~;rnad,1ke.os. Exophiala jecm:!!ei11wi tiene heterogeneid<1d ge1)i§~oa, y se n<m ellicoiDlrado, 15 tipoiS de mlDNA, Il'lorio16gi.ca.mente roilY ~irlJilal;e3 peeo muy djsrraJn~!Wte ~clacir¥i:ado1l. jg dermratitidis se considera una especie geneticamentehomog;enea.

Exophiala .spinifera tiene 10 tipos de m:tDMA, 11~ ai:skN:Li~to en ~'a]J6n rue b[l'Q .5 V los aislamieutos en China y .t\..m.6:ri:.ca hall sido 3, 5 'Y ~. Phiaf©plior~ 'i.oIerrucostl se ha dliv.idldo en li Q tipos die mtDNA y 1'.' ati1Bricatia en dol'> tipos, ambas e$.pec..~ sen oQ:~pec.rficas.

F(Jr!s~'(;t!l!(Jj p~dFOSOi, G.(fO bflSJee..~ ,s1!l RFL:P, Be .ti;a divi.d!kloe·m S!ei1>tipG~ de .mtDNA ffiUY cercaIl.<Ul1elHe relaeioaades. Conbasle e'n ]<l f.log~ITIia., hay dos lfrHHUl: i]na. ~. itlcl1ill:l;r~pos 1 a 4 que <up!o1reoeThl en .Afric<l, Fm,u!r]ca y Asia, y O~. para .5 'I (; que s610 se, eacuentsan ,e[! Sudamerica Oad(}sPQ~wn cal'1"lv!f:!ii. con base en .Sl1 ];'j,'i)Up se divk1~ ell; cuasro tipos de mffiNA muy relacio!lJ8JdOiS; el tipo I @ilsladol en. Asia, S:l'ldiam:erl.ca y Africa, yel ripo 2, en Ans tralia y M.adagascaJl'. Es prot!libkg)i,U~: este .iJ;oJ].,go se orig;_'m.arra e!lJiMrica, aEl,ms del PllS0 a los otros continenres y se dess-

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rrollara en esas areas, pew s610 ha predorninado en zonas aridas y no en regiones desfavorables; su origen en Sudamerica es poco probable.

Hortaea werneckii se divide segiin su rntDNA-RFLP en nueve tipos vinculados que no se correlacionan con sus orfgenes geograficos, posiblernente par su dispersion aerea 0 acuatica. Las especies aisladas en Sudamerica tienen divergencia genetica mayor que en Nortearnerica y Asia.

RIESGO BIOLOG[CO

El riesgo biol6gico es el peligro potencial de contaminacion para el trabajador, el laboratorio o el medio ambiente, al manipular microorganis-

. ~ 1(-1.?? ~ ~f:_ .. ~¥lJ~-~~.Y--~:~~;;.+:;r4:r.~·:~:~~~: . .:i~~_!::s~ln~c~s; te jido s, secreciones u\;ti'o·UPc. deil.1Jtc.irru biologico.

. Las vias mas frecuentes de exposicion son los accidentes con objetos punzocortantes, las picaduras y las rnordeduras de animales, la inhalacion de aero soles , laingestion accidental y el contacto de membranas mucosas con material infectado.

De acuerdo a sus caracteristicas, los agcntes biologicos se encuentran agrupados en cinco niveles de riesgo biologico:

L Riesgo de infecci6n mfnima, No hay enfermedad causada par elias: hongos de clase superior.

2. Riesgo moderado para eI trabajador, Results de autoinoculacion, ingestion 0 exposicion de membranas mucosas 0 inrnunosupresion: actinomicetos, Blastomyces dermatitidis, C. neoformans, P brasiliensis y S. schenckii .

3. Agentes que presentan riesgo alto para el trabajador y producen enfermedad grave o potencialmente letal, C. immitis, H capsulatum, H. capsula tum var, duboisii.

4. Agentes que presentan riesgo alto de infecci6n tanto para el trabajador como para la comunidad. Se transrniten por via aerea y generalmente no se dispone de tratamiento: ningiin hongo.

5. Agentes con riesgo mayor para eI media ambiente que para el ser humano. Su entrada en rnuchos parses esta prohibida par leyes fitozoosanitarias -.

Dada la amplitud del mundo bio16gico, hoy en dia se desarrolla un megaproyecto para el

Diagr6stico de laboratorio II 59

estabiecirniento de un codigo tinieo de nomenclatura biologica denominado BioCode: http:// www.rom.on.caibiodiversitylbiococlei1ntro.hl:rnl

MEDIDAS DE SEGURIDAD

En un laboratorio de micologia, se debe actuar can responsabilidad y observar las mas elementales normas de segundad para evitar accidentes de trabajo. En Ia realizacion de los cultivos, se recornienda campana de fiujo laminar, Por carencias de este tipo de equipo se utiliza de ordinario una mesa de trabajo, se desinfecta el area antes y despues de las siernbras, y se colocan uno 0 dos rnecheros. Es necesario evitar corrientes de aire y plantas naturales; no se debe fumar, comer ni

beber, .y lia:.~cimpeqit)e; ia.PTe;~~i1i'.l0 :r\?";t;if;;;A.':~:;-:,,';:::';~~.~ . nas extraiias enel labdratorid ... ',. '- ,- .r ...

Hay, como en cualquier laboratorio de productos bioI6gicos, bongos pat6genos que deben manipularse con cuidado. Entre estes se encuentran: Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidicides brasiliensis y Penicillium marneffei. Todos estes hong os deberian manejarse en campanas de segurid ad biologics con aire filtrado e incinerador,

El material que se desecha se debe esterilizar en autoclave antes de su incineracion. Si hay rotura accidental de tubas, ha de esterilizarse la zona can fenol al 5%, colocando previamente toallas humedecidas sobre el area y vigilar peri6dicamente a las personas expuestas a estos accidentes.

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Las micosis superficiales fueron descritas par los griegos y los romanos; los prirneros Ies 11amaron herpes por su :forma circular, y los segundos, tinea, que significa larva 0 polilla, seguramente por SD aspecto en la localizacion cefalica. En Ia Europa del siglo XIII, curar 0 s610 asistir a los tifiosos bastaba para abrir las puertas del cie- 10. Ejemplo de tal creencia es la obra de Esteban Murillo "Santa Isabel de Hungria curando tiiioS05",. representa'cion de quien dedic6 gran parte de su vida a estes enfermos,

Entre 1807 y 1828, se presenraron en Paris 25 000 casas de tina de la cabeza, En ese tiernpo se usaba como tratamiento la calota, un birrete preparado con resinas, se dejaba secar y luego se arrancaba bruscamente; de esta manera, se desprendian las esctitulas del favus, pero se producfan grandes hernorragias. En el siglo XVII, un jesuits utilizaba dicho procedimiento en Mexico, en indigenas tarahumaras, no sin antes encomendarlcs a Justo Martir, el santo de las tifias. Entre 1820 y 1830, los hermanos Mahon se enriquecieron en Paris al preparar y vender medicinas secretas para el favus. En 1829, el mas joven de ellos describio Ja "tina tondante" y publico un libra can informacion comercial y nociones cientfficas: Recherches sur la siege et la nature des teignes.

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En 1834, Rernak observe en material de favus la presencia de filamentos y en 1837 llam6 al hongo Achorion schonleinii; publico sus observaciones entre 1840 y 1845 (fig. 1-2, cap. 1). En 1839, Johann L. Schonlein estudi6 este

. hongo y concluyo que el favus se originaba de plantas (cap. 1). En 1840, Cazenave observe una epidernia de tina tondante (microsporica) que aclquirieron 14 hijos de diplornaticos en colonias :franeesas. En 1841, Grub)' (fig. 1-3, cap. 1) cultivo y describio el hongo del favus y reprodujo la enfermedad en piel sana; en 1843 describio Ia parasitacion endothrix y cultivo Microsporum audouinii .. En 1845, Malmsten ere6 el genero Trichophyton e identifie6 Trichophyton tonsurans. En 1845, Lebert denornino Oidium schoenleinii al hongo del favus. En 1847, Robin identified T. mentagrophytes.

En 1853, Baun y Meissner describieron Ia localizacion ungueaI Y, en 1860, uno de los hermanos Mahon enferm6 de onicornicosis al depilar a un paciente con favus. En 1870, Hebra describi6 el eccema rnarginatum que Sabouraud llamo "epidermofitosis inguinal". En ese rnismo afio, Tilbury Fox se refirio a Ia tinea circinata de la mano.

En 1879, Manson nornbro tinea imbricate a una enferrnedad descrita en la Polinesia como

61

.. tokelOli.U .. y que, e.m1667, .DIl_mp~er, eiDPi]],pmtlJs, fuabfa descriro com.o una fOIl'fi_la delepra; BI1!1il1- cilLiliIld denowl."lo <lii .. ageme CjUS<l~ Tri£:hophylon concemricum:.

En 1882, en II:r. sup]eroe~H:O de] Oxford er.I!g.ln31i. aic\l;iOt1.ary. yaap.a_ftCW eltt:r~ll!~!);O "d~j"nN!IW!f.iiDo", alli[llfJ!~l$ S@ ign().r~.CIli:iTIltio se ecul'io y qtlleil1 ~Q hizo. En 1883, MajQcchi die:l!c.rib16 un C<lSO eriginado por Trichophywn Yio.lact.tl.i'n oomo"uicofit:osis nodu tar s~ngub!''' .Io que ahoIII seconoee como grIllnWom!tuioofitioo,. Bn 18:87, P,eUizzOl!.r~. ()hs~'Vl6ei tip~oo m:iceho k"~cofit~() en las palmas de jasmanos yemiti61~ hip6- ~~is acerca de 1<\ existencia de linetl pedis. En li892, Djelf1~;tildl:J!ih"MQutt.aF idetltHlc6 lashifas e:rI. ]oa tina delos p~es. En ]902, R!lb~rrl die$icfiilli!Ci,

., .}M:ioQv ~M~jtm'(;'1IJi.~ ,J;l;.!.~. ~90fl. .W_tJ;iMidd cemuei-

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.00 $1:pl'1!""IIDr {\''lif.04:'oS~;f:~'''·fI.",e una ue LOS 1'Ies:.

En 1890, SaoollJrnudl (fig. 1-5, ~~p. 1) in:ido ell e$:m.a~(J ~istem!lJtico deb. deooru;OI]~OlSis '1, ell [YIO, plillb,lic!lJ1 una e!lcjclGP~a,c~t}"o~C("ce!l" voJ\.u;rrI!eEl.. "Les ~~ignes", se considers una ebra clasica de la literatara medicil. Oasifi.'co ]08 d~Ji[;aJt6fitoll ·em cualro .geoe:r(l.S: Triciiapil.:yt".'It, Micro~PQF.um:, E_vidgrn:o:pi!yto'R y Ac1J'Qli(itl., deSlC1JIbri.o el tercoro, y 61 cuastose ;mecXo desp!JJes: <11 Thchopli"yl'o'l1. Sus ebservecienes flJeron mel6dicas y mas dfuicas q~e bQtall~C"S.Pl,)bhc6 mllchO$~abajlos ~oil;¥,!;e t~~ol~_,Oj]]f~ "J' l1tiH2i6 ,cornm ti1liitllLffilet'liUO' la depi].aci6n. msnual [pMa ~ ... itar el cJ'edmj.emCD cel1:mIugo de las ti£jas, Planlw la utilidad del acetsto de fal~o p ara depd.1!T, ](lg{6esto per la obs~n'~d6[l d!~ cai[da (lel p(;.].o eJJl!iWa~acj~_Me ill'U!t lom6· I~] m_ed!uclWle!lilOO psra Oi:rOiSfi~e-s., Thmblt'in a~lizb radi.O!lf'J':R!Pia (fig. 1-5, oar·l}

En 1925. M~rg.(¥[o~ y Deve,z,ce $e.~.a~~01fl la fi'uQ[$$CC'!1lciaJ de !os pe:l~$p8![SSdll;c1os. lEn ]927, WeJi.dmanregi.sn:rr6 .J!!. primer.a irnfeci:ion pedal por 1".tich()phy~on~-ubnlm~en ese l:ms~n() <lno, N annizzi cl~cubfi6 el estadeteleernerfa de M. gl'ps~~tm comO Gym~oru-c.~$ gypt,~~~m; o~ro<s C~~ JmXln que S~ tta!ab2 de nn CQnwtmJinamite y esta coatribacion q1uecl6 ip!o.rada[l'os~~O\tm;mJe.. En 1930, Langeroay Milac.hevir¢hpro[lusi~n ]a tranS:.ferencia die] ,ge:n~IO' Ilello.don al!Trichophyu>n._

Luego u[I:fIJci6 ]:11. COt1ru,s.i.on meil'min.alc&gica debidJJ a la descripcion de machas especies COn base e.n dlalosmo.rfoh5gi COs y cl!fuicos de pOCi3J itnPQI'tilmcl>f!.,

Btl; ['9:Jl1, :&nr.!l;Oil!l~ (fig. 1-13, C'llP, n, $ig!l]e~dQ las reglas de nomenclarera y (axono" Nua )jolti:rnic.a:s. dasific6 ]08 de.rmnt6fitos en. s6Io tres g6neros: Trichophyton, }v.!icrosporutn y Ep'idermophyron,

Pese OJ. ia poea wpoctar.icia cli!lica de lss ~C()~ SUPef1ic~aies, e;s. mJ~$~te Sl~:aJa.r q~e ~.os dcmu8Jtot1;Wl$ c:l$tUVl.eFOfifi. punto de cambiar la hisfOri!l.,p1!l:tS en 1942, dm"<l1!1.te la Segunda Gtlefiil. Muncl!ifi~J nmc1m seldados bIitaru.oo.s eliados pl'e~e.nltfll!olil. mod:f1lidad~ i]l~pl1.ci:~]i!ji:es de rnia de los plies, 10 cual dio btgar a ~a ebra Hmgi go to war.

EfJ. 19~5, t~lapf des~bi6 (f(lMt;dDr.) ]IiJS l~'

.P~~.'.-.' .... s. '~ .. _ •. as()® d! .•. r,"i. m.'oke ... _ ~. la. Il.- .. ~l ,121. ~. ierr .... ra.nort ... " l'l: de .

Puebla (fig. [·1!, cap, 1).

"f;a 1954, C()~'t~nt (fig.J,~J2l<·PJi "))l]~~"~",,,.<'!,.; -!';'

claiiJicaci5n . erigrupos "'"'pam 0 I'~ . d~~ ~:':t~r.'r.~"':. . ~"

ba_saoo ea sjmihlulde:s LTIloi:'!"o16gicas de Jas colo-

nias. Ell 1958, GeIlJties ,ClUIW' :~<i d~UOitJ:WS]S

Ie;{.pel,'i.m.ental ,cOr!! gristJo:f!lLl \till,a y W:illiaJm~ ].8,

Ilc$Q. p©r vezpnmera en seres bumanos al ti;[I;~ar

un niil.o con tl'J'la de 13. ·cabe-UI.po:r M. a~~douiiiiH;

d~pryes, m~ y l\:o~abQr~drues prec1sa..rol:l las

dQ~ir$. :~ [95'9 .• Dawsony G~n!J1es doescribi$ffln

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primer hcmgo teleomerfe de un miercorgems-

mo Q!(!er<utnn6filo. En 1900, Olrj{ffu) r-ec1i!!peJl'Q la obswlaciOirilooigil]a[ dIS Na!JLroloZi. Ern 1961 y

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y N. &ypsea, respectlvameate.

Ell 19'] 7, Ajello mz.o una re'ii'.lsil.orJ hjsoo!lric<l y seffii_al6qjl,l!~cl ·co'JilJoomje[J;[.O s'Oore. ·rn~!lit6!Ji- . ~o,s; 1:1., si{lo !P'a!!;aJJ,u(l a] dr!.S3trQUO d.e]a .miaQl~og~a ilil!M~.ca ,~gtl1f:r.ll.

En 198o, We.itzman, NfcOilmis (fig, 1-17, cap. I), Pad!tuye y AjleJlo ()~]deI;l!J:llJllIT!. q O;~ La dibl:!I:Icj1lcjd!~ de dr.)~ ~!F.!~'OS solo POt d.~t.CFmiaadas CfI!l'flore.ri:sti.cas de las hif:as pendiales no era suficience para separarlos yhsn dlejaclo a Narmiuia come sin6.nimo de Arthrodt:1m:!l.

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Microsporum y Epidermophyton. Afectan pie] y anexos. Segtin Ia localizacion se rnanifiestan por afeccion pilar, engrosamiento ungueal, 0 par placas con eritema y descamacion con bordes activos. Tales micosis sou de evolucion subaguda a cronies mas a menos pruriginosa. La invasion profunda es excepcional,

Datos epidemio!6gicos

Los dermatofitos tienen distribucion mundial, pero algunos se lirnitan a zonas geograficas especfficas (cuadro 6-1); la distribucion geografica es dinamica, dados los movimientos migratorios, modos de vida, habitos de salud, 0 viajes turfsticos. Constituyen 70 a 80% de todas las micosis y rienen una frecuencia de S% en Ja.I.Q!1.0n!tl dermatologica. En Mexico, las dermatorirosis se observan entre los 10 primeros Iugares de consulta dermatologica; se han observado en 36.6%, y en 80_9% son causadas par T rubrum, siendo las mas frecuentes onicomicosis (30%) y tina de los pies (25 a 30%).

Son rnicosis cosmopolitas que predorninan en zonas tropicales. Se consideran como las mas frecnentes de las enfermedades par hongos. Aparecen en sujetos de cualquier edad, raza 0 sexo, as! como de cualquier media socioeconomico u ocupaci6n. Las epidemias que afectan la cabeza se relacionan con 1. tonsurans e infecciones subclinicas 0 fomites, y las relacionadas con M. canis se asocian a perros a gatos; otras epidemias fuera de la cabeza se vinculan con hongos antropofi1icos, como los cases per T rubrum en gladiadores. La flora saprofita dermatofttica en adultos depende tarnbien de localizacioues geograficas, se debe a T tonsurans y [vI. canis, fundamentalmente, pero 1. rubrum se ve en 10% (en nifios en 1 %) Y en algunos pafses es T violaceum.

Microsporum audouinii se encuentra en algunas partes de Africa (Nigeria) y de rnanera aislada en el Reina Unido y este de Europa, fundamentalmente. Ocasiono epidemias en Europa en el siglo XIX, luego se exporto a America. y recientemente se ha vuelto a observer en Holanda e Italia por inrnigrantes africanos. Haee SO afios practicamente se extingui6, fue reemplazado por M, canis y en los iiltimos afios por T tonsurans; este ultimo ocupa el primer Iugar en frecuencia en tinea capitis en Estados Unidos, el

Cerrna rofrtosis l1li 63

Reino Unido y Francia, perc en el resto de Europa, pafses arabes, Iran, Brasil, Mexico y Republica Dorninicana, el dermatofito predorninante en tifia.de la cabeza es M. canis (89%).

EI aumento de Ia frecuencia de T. tonsurans en Estados Unidos y Canada se ha relacionado can las migraciones de latinoamericanos, y se observa en particular en estes y en afroamericanos, en ocasiones en epidemias institucionales y escola.res; tarnbien aumenta su frecuencia en Inglaterra y Francia, especialmente en nifios de raza n'egra. Trichophyton tonsurans l1eg6 a America con los conquistadores espafioles; en Mexico, hoy en die se presenta en 15 a 28% y continua decreciendo su frecuencia, Microsporum canis variecad disiorturn se limita a Australia NUf:v? 7eJ.8nd?,. y Estados Uniclos .

.1j;jc]!.9,phyton rubrum se encontraba illidaI-" mente en' Asia, pero durante la Segunda Guerra Mundial se export6 a Europa y posteriorrnente a America; hoy es el mas difundido en todo el mundo. En Mexico se observa en 36 a 52% de las dermatofitosis. Trichophyton. mentagrophytes se presenta en 5 a 8% y Epidermophyton floccosum tambien tiene una frecuencia similar, se observa en 3 a 8%, Trichophyton violaceum. se loca1iza en el este del Mediterraneo, Asia, este de Europa y Latinoamerica; recientemente en Holanda e ItaIia. Trichophyton schoenleinii es infrecuente, se encuentra en el Oriente, Africa y este de Europa; hay focos esporadicos en Estados Unidos, Canada, Guatemala, Brasil, Chile y Argentina,

Trichophyton verrucosum tiene distribucion mundial, se encuentra en Europa y Norteamerica; en Mexico se ha aislado una sola vez en seres humanos, pero es frecuente en anirnales. Trichophyton soudanense es de ongen africano, se encuentran casas en Inglaterra, Alernania, Francia, Belgica, Estados Unidos y Brasil. Microsporum ferrugineum se encuentra en Asia, Lejano Oriente, oeste de Africa, este de Europa; T concentricum.eu parte de Asia, Oceania, algunas zonas de Latinoamerica y en Mexico en la siena norte de Puebla y los altos de Chiapas, y T yaounde! en Africa ecuatorial,

Las tifias se observan can frecuencia alta

en animales domesticos y salvajes, incluso roedares; se hallan en los ganados bovine, porcino y equine, asf co:no las aves; las mas afectadas son las pequefias especies, como perros y gatos.

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Altersn cualquisr parte de Is. pi e],~n espeeiafla cabeza, que present a ZOnaS escamosssa veces costrosas y alopecia.. M icro:sporum nanwnes gW'FiJj,~o, pero causa tin,as en c.ertos; Micr;o$porum ~q'~I.i,m;an afecta caballos y se eneuentra fu~['Id.a:r:m::j]~almeJlJle en. Africa, Australia, Europa, N ueva Zelanda y t\:mirica. Microsporum canis se presenra en PeTI01> y gatos, T. gaUiI'~ae afecbt aves. Trichophyton menta:groph:yt!!s vanedad. erinacei (7. erinace.Q causa tlin,as en erizos en el Reina Urudo y Noeva Zelande, T'ridwphyrcm memagrophyus variedsd q~dl1Jckea~111

:>e. encuemra en AIlStt'ru:U8!, Ca[llld:;:i, esie de El.l:f\}pa e ltilia, Micros.p'()r~a'fl persic'O{,cw' se esocia a peqnenos roedores 'I oeasionalmente a i~eocio~ nes en seres huma.nos;I'rifflGphytcm. simii causa ~iil.as ell. perms, changes, aves de corral y seres hlJiID8.J10<S en 11 India.

Tina de la cabeza

Predomina en mas rurales 0 sutm .. rbanas, es mas frecueate ell csmpesines y ,en personas de uledio sociceeceemice bajo. Es easi exclusive

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de rnnos (98%); a veces afecta mujeres despues de 13 pubertad, alrededor de la menopausia o ancianas; a riltimas fechas, se han detectado adultos portadores zsintomaticos en zonas urbanas. Haee 50 aries, su frecuencia en Mexico era de 40 a 54%; hoy en dfa varia de 4 a 28%. En Asia, Africa, Republica Dominicana y en ciertas zonas urbanas de Estados Unidos y el Reine Unido se presentan epidernias importanres que siguen a un contacto breve con un animal, otro nifio 0 un adulto portador,

Tina del cuerpo

Se observa en todas las latitudes, las altitudes y los climas, Aparece en cualquier sexo y edad, En nino", prydmn.inCl M rq.',7JtY Tt.D',c'~.r'"1!kO- y, en" adultos, 'i"··'1'"!ttJrul?1. -s.eg;"i,D:f0.·di.~·M· . .'-:_~£7n.is; "En la Republica Mexicana, su frecuencia es de 7 a 25%; se presenta per igual en ambos sexes.

EI tokelau afecta grupos etnicos y areas geograficas especificas. Se observa en las islas del Pacifico, Mexico, Centro america y Sudamerica, En Mesoamerica ocurre en indigenas sin mezclas, quienes par 10 general son de talla baja, can piel bronceada y rasgos mongoloides,

Tirias de ingle y pies

Predominan en varones adultos, su incidencia en Mexico es de 4 a 17% y de 20 a 51 %, respectivamente, pew se sefiala que la padeee 30 a 70% de la poblacion general. Se encuentran portadores sanos en 13_5%; durante los dos ultimos decenios ha aumentado la incidencia en nifios, al parecer sin predileccion par sexo, Es mas frecuente en areas urbanas, asf como en deportistas, militares, nadadores y personas que pOI su ocupacion usan zapatos cerrados, botas 0 tenis; en mineros de alquitran en Europa la frecuencia es de 35%.

Onicornicosis

Son las onicopatias mas frecuentes. Entre las enferrnedades de la piel, abarcan cifras de 0,5 a 13%; la prevalencia es de 0.44%, Predominan de los 20 a 40 afios de edad (48%), Estudios en el Reino Unido muestran onicomicosis en 2.7% de la poblaci6n mayor de 65 anos y en 5% de la mayor de 75 afios de edad; con una incidencia de 5 por 1 000 cada afio; en Estados Unidos se pre-

Derrnatofitosis _ 65

sentan en 2 a 13% y en Japon en 0.5 a 2%. En 71 % dependen de dermatofitos; constituyen 10 a 16.7% de las dermatofitosis; en nifios se observan en 4 a 8%_ Las ocasiona T rubrum en 71 a 85%, T mentagrophytes variedad interdigitale ell 22% y ahara tarnbien son ocasionadas por hongos no dermatofitos en 4 a 5% y Candida en 10 a 20%(1 a 32% en ufias de pies y 51 a 70% en ufias de manes). En pacientes diabetic os yen aquellos con sfndrorne de DO\\TI, la frecuencia es significativamente mayor que en la poblaci6n general (25%).

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Formas profundas

Son infrecuentes; el granuloma tricofttico predomina en mujeres adultas. La enfermedad dermatofitica es excepcional, es casi exclusiva del norte de Africa. El seudomi~etomap~~ dermat6fitos se ha descrito en inmunodeprirnidos y recientemente en el sfndrorne de inmunodeficieneia adquirida (SIDA).

Factores predisponentas

La humedad, el calor, los tratamientos con glucocorticoides, la diabetes y el usa de calzado corrade 0 de material sintetico. Se relacionan can mala higiene y la costumbre de no secane adecuadarnente la piel, as! como con la presencia de un familiar afectado.

Etiopatogenia

Los microorganismos causales se Haman dermatofitos (cuadro 6-2), hongos queratinofilos que limitan su presencia a estructuras que contienen queratina: pelos, ufias y capa cornea, Los prop agules que transmiten la enferrnedad son artroconidios a clarnidoconidios que se encuentran en los epitelios de descamaci6n 0 en pelos,

Se han identificado 43 especies anamorfas (cuadro 6-3), casi todas viven como saprofitos del suelo y pueden aislarse por el metoda del anzuelo (cap. 5); s610 11 se consideran imp ortantes como agentes patogenos (cuadro 6-4)_ En teorfa, todo dermat6fito puede ocasionar cualquier tina, 0 esta puede depender de cualesquiera de ellos; en la practica hay afmidad prefcrencial por las areas afectadas (cuadro 6-5).

Los dermatofitos SOil hongos anamorfos de los generos Trichophyton, Microsporum y

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{Si!liild~"'iri6n - Cla5e

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Epidermophyton. (euadros 6-2 y 6<3.); se dis~n~ gillen entre &1 per sus conidics, en eSp'eci al POI" los macroconidics, 10:5 cuales S~ffi! ~spedf~cos de

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ElIFiJyc!lta AE.comj'ootin;a. Af,t;;OhYIil1e.ooJiillyoetes Oi1)'ge;n~!es

Arlh:rOO::rm~t~ceae (O}'IDJ).oa.:;~areae) 04 r.~hmd~nna

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_:erillkIlHl.n. 1 ?6~)

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c,~d<l. genero (figs- 6~la 6-3), jpl3Jr!l!~OS do~ pnmeres, SUs teleemorfos (cuaoso 6·2) pertenecen ill gtl!l~ An:hroaerma (cll9Jdro 6-4) phy]um

Tri~hr)phW"" (W!1!.!!lU~ 184~J

1: ajdlQi ([~br,ells.eghem] Ajell{), 1%3)

.* 1. Ct.1~C<l~trJicmm (,IllanclJard, l895)

:r. eq~J1Ul"jJ ([M~~(>t j' ~soLwilLe1 G~Q~lst, ~9O:l) 1:. J&l1!I!J!1Cc~ng ~.Padhyc '.ICmruicll~ae.]. l'9'7.lj

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Derrnztofitosis • 67

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Teleomorfo

Arthroderma (Currey y Berkeley emend. Weitzman, McGinnis, Padhye y Ajello, 1986)'

1).. benhamiae (Ajello y Cheng, 1967)

A borellii ([Moraes, Padhye y Ajello] Padhye, Weitzman, McGinnis y Ajello! L986)

A cajetani ([AjelloJ Ajello, Weitzman, McOinnis y Padhye,

1986) .

A. ciferri (Varsavsky y Ajello, 1964)

A. cookielum ([ee Clercq] Weitzman, .\1cGinnis, Padhye y Ajello, 1986) .

A. corniculasum. ([Takashio y de Vroey] Weitzman, McGinnis, Padhye y Ajello, 1986)

A. fiavescens (Padhye y Carmichael, 1971)

AJlllvum ([Stockdale} Wcitzrp.3ll, McGinnis, Padhye y

":..;~ ::,,- .. Ajellc, 1926) ".. :~" v:

A. gertleri(Bohme, 1967)

A. gloriae (Ajello, 1967) .

A. grub};i ([Georg, Ajello, Friedman Brinkman] Aje!k),

Weitzman; McGinnis y Parlhye, 1906) ...

A. gypseum ([NannizziJ Weitzman, McGinrus, Padhye y Ajello, 1986)

A. incurvatum ([Stockdale] Weitzman, McGinnis, Padhye y

Ajello, 1986)

A. insingulare (Padhye y Carmichael, 1972) A. lenticularuni (Pore, Tsao Plunkett, 196)

A obtusum ((Dawson y Gentles] Weitzman, McGi.nnis,.,

Padhye y Ajello, 1986)

A. otae (fHasegawp- y Usui] McGinnis, Weitzman, Padhye y Ajello, 1986)

A. persicolor (I'Stockdale] Weitzman, McGinnis, Padhye y

AjeIlo, 19815)

A. quadrifidum (Dawson y Gentles, 1961)

A. simii (Stockdale, Mackenzie Austwick, 1965)

A. racemoswn ([Rush-Muma, Smith y Borelli] Weitzman, McGinnis, Padhye y Ajello, 1986)

A. uncinatum (Dawson y Gentles, 1961) A. vanbreuseghemii (Takashio, 1973)

Anamorfo

Microsporum (Gruby, 1843) Trichophyton (Malrnsten, 1845) ··7 mentagrophytes

M. amaronicum

M. cooke! T georgiae

Mic!"OSporum anamorfo deA. cookieltwrr.

M. boullardii T flavescens

M. fulvum

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M. vcnbreuseghemii

M. gypseum . T tervestre

T terrestre

M. nGltwn

At. canis var. canis

M. canis var, distortum. .

M. persico lor

T terrestre T simii

M. racemosum

T ajelloi

T men.tag rophytes

Ascomycota, y ya se ha descartado Nonnizzia que anteriormente era 13 forma teleomorfa de Microsporum; las diferentes especies pueden ser de signo positive (+) a negative (~). No se ha descrito forma perfecta para el tercer genera, que tinicamente presenta dos especies y s6lo una es patogena para seres humanos (E. fioccosumi (cuadro 6-3).

Los dermat6fitos constituyen un grupo extenso y homogeneo ce hongos con caracte-

risticas taxonomicas, fisiologicas, antigenic as y patogenas sirnilares, y s610 presentan leves diferencias nutricionales y enzimaticas, Can base en 3U distribucion ecologica, se dividen en ge6filos (teltiricos), zoofilos y antropofilos, y se difunden del suelo al ser humano, de los animales a este a de persona a persona, de rnanera directa 0 a traves de fomites (cuadro 6-1). Los hongos geofflicos se consideran ancestros de los derrnatofitos pat6genos; los zoofilicos han

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70 • S2ccI6n II ;\;1icosis superficiales

Genera Epidermophyton

E. floccosum

Fig. 6-3. Genem Epidermootiyzon, conidios caracteristicos. (Modificada de Segretain G, Mariat F, Drouhet E. ":.- D~~gn~~tir:~d8. ~f{iSQr.'~tc·f;;':?~~··::Y;~(ofi_~di.'2; Medicate. Paris..

Maloinc, 197Y,j"" ',.- .

evolucionado gradualmente del suelo haeia los animales y los antropofflicos a partir de especies zoofflicas; esta evolucion es paralela a la perdida de conidios, asf como a su habilidad para la reproduccion sexual y su asoeiaci6n can infecciones cronicas. Par definici6n, no se consideran dermat6fitas Jos mal llamados dermatofitos del suelo que no san patogenos para seres humanos, como T ajelloi (cuadro 6-1),

Para adquirir la enfermedad, se precis a contacto con Ia fuente: suelo 0 animales, a puede transmitirse de una persona a otra 0 por fomites, Tal vez haya predisposicion genetica a resistencia natural a la infecci6n, quiza dada par un factor serico no. bien definido 0 un antigen a de histocornpatibilidad (HLA).

En algunas localizaciones, acnian como factores favorecedores: humedad, rnaceracion, oclusion y traumatismos, No. se ha establecido bien la participaci6n del recarnbio epidermico 0 de la aetividad de las queratinasas, ni la influencia del sudor, pero estas cermatomicosis son mas frecuentes en climas tropicales.

Los dermatofitos inician la infeeci6n par un fencmeno de adherencia a la capa cornea; despues, estos elementos germinan y empiezan la invasion de los queratinocitos; la infeccion se canfina al estrato c6meo y los anexos, exeepcianalmente se afecta Ja capa granulosa. La calorizaci6n produce una reaccion del huesped debida a los productos metabolicos del hongo

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que actuan coma faetores de virulencia; las queratinasas a proteasas digieren queratina y liberan antfgenos (glucoprotefnas) fungicos; elastasas relacionadas con enferrnedad aguda y lipasas vinculadas con enferrnedad cronica, En algunos pacientes, hay reaccion inflarnatoria intensa; en otros, es minima e incluso puede haber un cornensalismo asintomatico entre hongo y huesped; en la mayorfa, la principal caracteristica es un infiltrado linfohistiocitario perivascular en dermis superficial, y en fases tempranas de lesiones muy inflamatorias hay acumulacion pepfolicular de neutrofiios; mas tarde, aparecen c~lulas gigantes alrededor de los foliculos destruidos,

EI grade de respuesta depende de dos factores: 1) de la especie causal; se ha observado que las cepas de morfologfa granular tienen produc- .' l.' ._ .. , cicn 31!2 de enzimas; tarnbien -es· -rrBl~able :'que~~:,:'~~!~:~'~~~~:~~-t?:t . algunas cepas produzcan sustancias que eillninan""'" "'.' '. • ..

las bacterias adyacentes y se sabe que la produc-

cion de artroconidios se relaciona can la forma

parasitaria (las cepas zoofilicas y geofflicas gene-

ran mayor inflamacion), y 2) del grado de hiper-

sensibilidad del huesped; incluso se ha propuesto

una actividad reguladora de proteasa, y quizas influya la temperatura y la localizacion de la enfermedad. Hay respuesta IgG, IgM, IgA e IgE, y cierta evidencia de que los mananas producidos por el hongo suprimen 0 disminuyen la respuesta infiamatoria. El desarrollo de inmunidad celular eIC) correlaciona hipersensibilidad retard ada y se asocia a curaci6n clfnica y eliminacirin del dermatofito; mientras que la falta a los defectos

de Ia IC predisponen al huesped a dermatofitosis

cronica 0 recurrente.

La infecci6ri se explica de la siguiente manera: cuando una espora se deposita en la superficie de la piel, se reproduce en la capa cornea; inicialmente origina una papula y luego una lesion anular par la extension radiada de los filamentos (fig. 3-5, cap. 3), tambien oeurre parasitacion de los vellos y de este modo acnian como reservorios. En la piel cabelluda, el hongo se reproduce en la capa cornea

y (a nivel del orificio folicular) penetra e invade Ia vaina del pelo (fig. 6-4); se extiende hacia la profundidad sin sobrepasar la zona querat6gena (franja de Adamson) (el crecimiento de Mas y esporas ocurre en sentido opuesto a1 crecimiento del pelo); al mismo tiempo, se extiende hacia la parte distal del pelo y 10. transforma en un pelo grueso y fragil que se rompe con facilidad (pelo tifioso).

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Fig. 6-4. A. Colonizacion de piel cabelluda, B. Parasitecion lniclal del pelo, C. Direcci6n de la invasion, franja de Adamson Iflecha), O. Pelo tricofftico (endothrix), E. Pelomicrosp6rico (ectoendothrix), F. Parasitaci6n tipo favico, (Modifcada de Albanese GC Aste N, Biggio P

, et ?J.L. E~)'i.(J'?r:,-!ipk\~:Tt_';~·;,ir'\i_Li~!.,i~.· .p-?l'~~_:_:.~/e~~;?~_~ de~['a .tjn~? ; . capitis. G Ital Derrnatol Veileroi,·' :199;13".4:51 "459.)

Los artroconidios pueden invadir la vaina del pelo sin destruir la cuticula (endothrix) 0 perforar y alterar esta ultima, produciendo una vaina externa de conidios (ectoendothrix). En el primer caso, el pelo se rompe en la salida del foliculo y, en el segundo, unos cuantos milimetros despues de la salida (cuadro 6-6); salvo en T schoenleinii que tiene actividad enzimatica lirnitada y el pelo conserva su resistencia mecanica y presenta s610 rnodificaciones de color y brillantez, La relativa resistencia ala infeccion pospubescente de tinea capitis se debe a la presencia de acidos grasos de cadenas largas, y cuando Ja tina aparece en aclultos, 10 hace de preferencia en edad posmenopausica, seguramente por variaciones cuantitativas y cualitativas del sebo, en particular de los acidos grasos de cadena mediana.

En ufias, el dermatofito penetra por la queratina blanda del hiponiquio, por el borde lateral de la una, 0 par 1a lunula, y afecta al eponiquio; casi nunca 10 haec por la superficie de Ia lamina ungueaL Despues afecta el lecho y en 1a una misrna, par actividad enzimatica, se extiende por una red de uineles excavados en la queratina dura sin invadir la rnatriz (red transversa de Alkiewics). EI hongo penetra en los corneocitos 0 s610 los separa rnecanicamcntc. Las hifas se dirigep bacia la matriz a una velocidad mayor que el crccimienio ungueal en direccion contraria y la mayoria conserva una posici6n transversal.

Dermatofitosis • 71

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En las moclalidadcs inflamatorias (querion), la intensidad depende del grade de hipersensibi lidad; se establece cierto equilibrio entre huesped y parasito, pero al final gana el primero al eliminarse el hongo, casi siernpre con todo el folfculo piloso. En pies, Ia flora bacteriana, la humedacl 0 la sudacion contribuyen a los sintomas. La reaccion tipo "ide" se genera por 1a circulacion de productos alergenos, formados ' a partir de una infeccion pomaria a rnenudo inflamatoria en cabeza 0 pies (tricofftides). En las formas profundas, el granuloma perifolicular se origina por la penetracion en la dennis de un pequeiio fragmento de pelo parasitado; para ello casi siempre se requiere un traumatisrno 0 inmu .. nodepresi6n.

Atin no se esclarecen las alteraciones inrnunitarias; e.s probable ([Ue [as ('dubs de Langer-.' hans de la epidermis procesen los produc.os

Microsporico iII. audouinii M. canis y val'.

distonum

M. ferrugineum M. langeroni

M . rivalieri

tv!. gypseum M·fulvwn M_ nanum fer. vanbreu

seghemii M. gallinae

Microide

T. mentagrophytes

T. rubrum. T. megninii

Megasporado

T. verrl£COsum

II Endot.ll.rix

Tricofftico

T. lonsumns T violaceurr. T soudanense T. yaoundei

T. gourvilii

T rubrum

(infrecuente)

Favico T. schoenleinii

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Lformas superficiales: II. ForinaS"p'["{lfun'daS:

TIna de ls.cabeza Dermsrofitosis

72 • Seccion II Micosis $llpoernriilles

rnetabolicos del bongo y 10$ ,preSet'iite::ll a BtU· trofilos y liefocitcs. Se ha encoctredo depresion especffica de la inmusidsd celnlar en las mfeociones localizadas, e inespecifica ell las generaIizadas. 'Iampoco se ccnccebiea ] a pllrti.cipad6n de [a i[J!l[liU!rudad ~nml;Q~L :% rna]] er.c~l]~mdo, alfa·2Frru:c{ogl.obLl'linas en e1 suern, las cuales .acrUflil como blancueadcres especifices aJ inrubilI enzimas prolwI[i,c8Isproducidas per losderrnatofuos. No hay correlacion entre ]a presencia de snticaeepos y resisteneia it 111 infeccion: en piel cabelluda, suele hater esta lDHim..)~ en cont!aste, en los pies la recurrencia 0 exacerbacien es 111 D'egl.a.

Clasificacion

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TIiia del cuerpo Tiful imbricada

. tffia ir .. gwlliaJ!

Til1a de la mane T'.iiia de los pies 'I'.i:lla de l1is uiias

inflarnarorias Que.ri.on de Celso Favus

Tina de la barba Gmnulo.ma

triwf!lico Seudomicetoma E[Jft::nn~diilli dermarofftiea (_JIadida)

Cuadra cllnico

La jVl,cmbt3ici6n dura d:l",~s·Ol! semanes, en pl'Qm~olio 7 a 15 dias, Las m.trnifesEaC~Qne~ dlni£-as varian seg111n la lccalizacinn y dcpencl!!tll, de) 8~~n~e Ca.'L,).Sill. Las :[OO!L1<to3 slllpe:mcifilles pueden a:l!ethl[ la piel h.mrm~, ei pelo o las ufias; 18 enfermedad C1ermatofEtica y e] .seadomicetcma scnexcepcionajes (cap. [2).

Tina de' Ia cabeza 0 tinea capitis

Es pNpia de los nrnos ya que cura sola en el mom~[(1 de 1 ... pubertad, .Pu~de Scr seca CI inllm· masons.

La variedad seca se rnanifiesta pordescamacion y "pelos ~:ifi()sos": peloscortes (2 a 3 moo) gruesos, quebradizos, deform tados '1, en ncasiones, ron una vaina blanquecina, querecuerdan el aspecto de "parnas de 8rana" (fig. 6-5).

Figl• '0·5. Tina d~ I", cebeze. A ht.~oiftica; B, r:flic·(ospe.rice.

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Las tifi2S tric!oitFlliClls Cirig;i!JI~n alopecia dim" sa con. placas pequefias e irregulares inteecaladas con los pelos saaos; en ccasiones, Sil OibsBrV~I.l. s6]0 cemo puntos negros (gra:!1J.OS de p6~'VQoro.) '1 ptl~de haber Ieaiones muypequeiias, con. afeccion de Joss. bes pelos (fig" 6-6). Las tii12S rnicrospcneal> oogjnilll una (I poeas plaeas rtdr,}Ji!deal(]<'Is, de mayor tamaiie gp:Ie las anteriores, casi siempre de variQIO ceatimetros de diameU'O; tedos los peres cortes se ,e:nCUe.!"J.[[1I[l almisrno [I!~v!E;l Y dan la impresion de haber side cortadcscon segadora ,ole oesptld; las placas esten biell .l.imitadas {fig. 6-5). lin amb-.as variedades cltnieas, el prurito es ml'nimo.

.m qju-eri&n de Celso es lIma tiia inna:;nal~ria. causada so bre todo pOT At canis y T. .mtif:ltagmphytes. Se manifiesta por UD plastron inj]1I!ma~o:rio COrTIstitLI!)cio, pOE p,i!1sltlilas: Y aheeesos

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mt1']tipks;. ba:y a:dC'flOp8!t1as S!lleHtl': y dolor a la presi6n, pew no fiebre: enlas empa:s iniciales es una folicnJitis y, ell las avarn:zadas, ccastituye el qUIe.ri6~Jvetiladello (fig, 6-7), TOHiI,Q este lfl.cm.iJlwe de' suaspeeto, puesel (~nm[lQcJil grii6g0~lg;lJiifi· C!3. "~;n'l!"!",l" - La alopocia esc m-u-)' ~m;pon.aiil~ y .es diiliciJ, t:.'I1!cootrarr .1?dosn:IDo,s:o$; sin tr3iit<ll!n!ltmlt"O, puede d,e:jru: alopecia deiooiti!v<i. (fi.~ 6-8).

Algunos dermat5fit.os, como ]:ycrruco" swn,mi.ginm querion congrandes ulceraciones. Mic.rocsPlN".[.,n:l. s},pse!lIn, 1'. m'oIQ~eut!~ y 0([08 80J.'l g:lQOO i:JeCl~~I1~e!l come .a.gente:s et~@l6gioo-s ElJJJ M"iN;.ioo. ']''1'ich()phJ'W1J., :r~~br'Urn,casi~;!UnC1l OQ!7 siQrJa ~iIl.:a de ]:1 c~hez;a. yge~erirrn,eil'lte .]l:!d!iflCG la fO!l'rn!ac.i6n de ZO[Jj8$ a]r.;.l~~bu de 1 a 2 em de (liametm (.1 lesiones ptJ.stlillares en placas alopecicas irregulares. Epid€;rmopfrytorl- jloccosum nuuea genera tina de la cJJbez.:a, <UlUlqU..e lie ham.

informado unos pOC08 casas verdaderos y etros que probilMemen~e afeetancata 0 riel cabelhrda MpeJo,

~ La I1bicaC]0n :;d.lh~ en aJu]tm; es ~xc.ecp· ci.O.l11lil.aJllimqu.e S~ manreg~i'lbd:CI CllM3 en :a;l:iIcia~ !l!<I5 de rna.s die 70 aijos de edad y cas! »!I!l(lca en ViI1'Ofi!.~ (fig. 6-6)~ como ageutes causales en esta edad se han informado T. tOjlSurans, .1"111. cmtis y T. ~'ulwwil~, fundamemalmenie.

. Para fines .[pIaotioo-s el :f2VUS, o~ii1a :Jllvic<l,. ,e08 c;<rusado pri~]]cjplme.inte por .1: ,,s1~h@eHbl:'!ii y, '11ill. QC!lJ$iO[1;f:s., pnr M gYP$li:wn 11 otros derrnat6,fjliQS; se c<lrnc~riza PQ( esciittl~8!$. es decir, caJlQ.ltJtas ()Qn.-Siljrluldias par nlil!$:a$ de filaeneores y cubierH.IS l)(lf costras amsrilleotas que dan el a.specto de miel eTII. eel panal (fM.r,r,;r = panal). despiden un 0.\0[ Q!ro~.cite~5tit:Qa "~·gtt6IillliiOj(ldo" y dejlln aIope;:ia 'cjc:lltnzal (fitii- 6·9). La e.va]:uci61l.es (.;ron]" ca, sii.! telfldenda. a la io.'ilC"~tll:~6.1jL Tamib.l~I~ p:l!led~ h<1.b~ ]~UQlnM c'M[:futl,ea.-s '0> u~~glJ]tale:s.

Tinadel cuerpo, tinea corporis o herpes circinado

Es U:t1L~ tina de la piel gla]~r.il (]:ampilla); se caracteri'zill per placas eliite;,lla:~o~cam.osas redondsadas, eenberdes acnves.vesieulescs, se extiende en direccicn excenrrica y dej <I. la parte central S'!JUl {I con pocs descamaeion (fig. 6-10).

74 • Secoon n Micas 5 superfr; ales

IFig.6-9. Rl'vus causado por M. gtpseum.

Ji.1i'f. !?rwriro leve, t~'leV:Ql!lci6~1 CS C;rofl:iCii 0 .pl!4.~il·~i.~;~;r,~o.i1-j,i~_"i.· i;:~:i ::,,~~~{!ari :'fil.i~o~pt5ri'C8i·

angina plaeas peqoeiili8 ~O'. 5 a 2 crude Jial!ll~IFO) y mdltiples, se presenta en cualquier parte. de la piel, perc Jmis~n pru-t~ expuesras. PI. menudo se OblSerwill ,e,pidenll as .faru.m~ill"es con UIl a fueate cOm'lln (pe.]NlJ 0 garo iafectado pm' M cal'lis).

La trric'(,fftic.a gen~a .p'JaC:l:S, de ma:yo,]'" tlli:"r!:!I[io Y en menor mimero; s vsces se [OrIDIm circulos ccncenmcos: en, ri:ilns, predonsinn T tonsurans Y. en adulms, T n!hrum; las placas SOil. confluentes, pox 10 que aleanzan ~ill"! tamaiio, y SOn poricidica~ 0 irrregu]:!lJ.fe;S. Puede afectar cejas y pesranas, pero nuncs pe101!) axilares 4) ¢ibicGs. Por cOIuig(hClad, llega a afectarlrnuoo-s~ nasal, :~<lbios 0 canduct,© <l]Jl{litirvo exjerno.

o tra lIaciooad poco frecuente es la dermatofTltos.is gIutll1l. dennatoiitica 0 epid~1",l1tofiWsis de

A

B

Fig. 6·' O. Tina d:!!! CILH!rpo. 1'\ mlcrospnrice (}POf M. 'Gt!I~,lsJ; B, triccl(ttie<ll {p.or t; WJmm111's~.

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l~~ "".... d..,1i' :Il.':11 Of, 110;'- .7_1£. .... ' ... ...." l'~W.r.. ....... :..,::~:"";t;_ ~ - "'I" It ,~,-,

u LO.h2:· ;4." 'p'2.U;U1 I qLZ-~ ~e,. ong_:=nr.: ·rulldEll~il!n:~- ..... ,~---"'· .- ~tIi rr'-.,

mente por E. fi(JcC{J'~·u.m:. se PJe~enta 6i"m~{O:re~~~~-~ - '-1 ,~

de tresanos i~e edad Y afeeta ,~a zona del pai'i~l y ~,'

las partes vecmas, Se caractenza por plaeas enre- I

maroescasnosas armhYl'es, eon a]g'liilmt<lS papldas y ~

V1':1ilctLlas g,l .. l£ dejan areas de piel SaRi! (fig. 10-1 n-

,En :r~giolles tropic.ales, se han ,observl'ido adultos COil epidennof.ilosls, Eml}' exrensas hiperquerarosicas y de, aspecto verrugoso. Tinea corpods glad!;at()r~lIn o u;,cofiJtos:is de los gladiadoees Se :I,l'FeS!enta en lachadcres de euerpe !Ii CUeElfo. es una tiiia del cuerpo qlle afeeta fu~.d.'m[!e~tlllmelJlte cabeza, cuello 'J brazos, y ss pmduc.id!a easi siempre, pOI T. t01lsuran..l'.

Fig. ~-11. Epidermofitmi:5 de la lQn~ ch:1 pan",1 (E. 11«ro5um).

Tina imbrtcada, tinea imbricate, to kelau 01 chsmbere

Bs csusadapor T. ,C011cllntricutl'.l; Se presenta en areas rurale s 'i en, determinadas zonas geogrsficas y grupes ernieos, es probable que haya prsdi eposicion geneuca, se ha prepuesto un patrOl! 1l!Uionorr-JlCO dominante, aunq I!.l:e tnmbien se nil, seilalada, unaherencia recesiva de susceptibilidad; al :ptarece,~ se Ir,~n,sirlirite POf ccatacto directo de onapeeseus a otra. Es la rnilis s~ca y SH[Joe.f.ficiai d!:l.i.1ts, ti'ias; se ciilira,c.~eriza p;1;rescamas q~ se

adhierespor uno die sus hordes, ffilresitm.l!l dispeslcicn conceemca y ~dopta:l aspecto de encaje 0 arabeseo: est.w. mu.y diseminadas y son sim.etriC~, (fig. 6-l2). Las fClI:mas d,1n.iCllS dependen de SUJ as pecto.: COrlCell[ricCi, ];;lmi.n.8!f, Iiquenificado, en placas, .El[llll[lJ[, palmoplantar y oniccmicosis. No ahem pliegues, palmas, p1<ll!J1da s ['.ill piel cabe-

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f:igl. ·6"12, fokdilu' @i'I jndr!g€!.n.!ills; may<l~ {T. ,o.n,,~\'lU;·' Ol..m},

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.~r .. p~i'!h 9C<t::.'l,t.i~!,,:~W~~~¥.,.1--if1~~, J.ila);" PCI:':)]J;O seha.

,ddiniJo! sies pO.r este de1'Iliia~6fi~G u ouo.

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Tina de la ingh1, tinea cruris

b eccerna malrgh1.ado de Hebra

P.wdIOD.J!a etI varones aduhos,. pero 56 Ilegaa ebservae en m.l.'lje.l'eG y []ino.$, Mec:!a lllltHli o aJ~~b~.s I'oegi 0 nes mguinales.puede e:x,tmde,rze a ptri[lea, [legion [)~bi c a, aiJ<a.oroCiJU y nalgas, poeas veces afecia eSCl'O~Q y pene. Sit caracjerizaporplacas Im~e!1(l1ltt)~Q$:!I(l. OOB bordes W$lCU].O,WiS;Cas:i nunca bay pustulas (~,g. 6~13). La. evolucion es cn)[Ij;t:8! Y P(lllogj.i:l!(}$<!, K~:! c1Ja] puede d!<II!l:~Iill.gn a pigmentaci on. y liqne.ni.ficaci6n. Si la iJll~'C~j6rl se hrn:urrfll a ]n;gh~.s, q~~iz8j .cJ!e.rpem.d,[JJ. de E. Pr>f;lt;O· Jum; si es diseminada, de T rubrum, y 81 es infla]"lJ!l<l!loria, de T n:~el'twgrophyJ.e8. E~ f.ro(;~~eme 8,11, zonas caluroses y en quienes pen:n<UTl€.om sentados .m1!tCh.o lL.i.empQ,

_._..'1 liiii,1;; de Ia barbe. tin,€I"barbQ.e o sicosis d~rmatoHti(·a

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Se origina sobre todo por T. mgrJtagrophyles, T rubr~m y T 1J~n'uco..vm:I~:. Es exclusiva de varones aduHos; afecta la zona de lao barba 0 d cuelle. Se: Ca..-aClOO4i! pOT" p:dJstll~as ftohcu].ax,es aisladas 0 agrorad~s, de evolucion Gr6rJ.ca y que dej.:w alepe:;::iacic8!tri.za! (Ing. 6· M)i. No debe cm:l£u~&{$e con lk localizacion facial de Ia tilt!), dd CL,lerpo, qne~eiil~a placas mmlares supe.rficiall;:S (fig. 6-10),

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Fig. 6-13. T1fi~ de Ia ingl~.

La c_ausa primordial es T rubrttm (90%};PleclOllJOOZl e;n V'M\J[];es;<J;d~l~WS y es IDl'fueCfl~iT"l~e ea l"Iii'ios, 1..0 .. s faetores ptedisponentes SO[! Qcupa,c~6!JJ mom,1!,lai y $I!uiac;t:m. Af'ec:tO'l ]j.~a o8!mJba:s pahnas de las manes, predomina en 1£ il;fiuierda de acuerdo con un enndio ex;~e.:1J$Q &111 ml1l~rum.a. n.Ellj. La: :fQl'mil eroniea es la mas frecueme; se rnanifiesta ~O!rallh.id["o\$isjrupepqlllf:l'illItoo.is difusa y desc.,uoc1aci6n pulverulenta e placas eritematoescamcaas; h(liY a.ce.ntu<lci6~ de lOG pliegues de fl.e.xioo (fig, 6~ 1:5). Con base en W carac;l'Cristi.

Su causa es T- rubru.r.n, T. mentagraphyte.s vanedad menfagrophyt,'g,S 0 inte:rffigiwle (T. intenligirale) y menos por E. floccosmn; p.::edomio.fl en Vlll"ones aduUolS, pew tiaJ:n)bi6n' se observa en

mujer:s. y nrno:s (fig. 6~rn Afec[a p~eg1.J:es lrlle{cilglta.les,phintas y oor(res de lc)s pi~. Se manifiesra por escamas, mS!cerociOn, grietas y

fisurss (i.]It~rni.giMila), CR$i $]~p[(i: clebid<l .;li

cas c1[lJJicas, se observa una modaJidad hiperque- T.. rubn:!m; vesfculas y arnpollas (vesiculoam-

:'W~!~"~~:~~,]~l~"a:~~~,-9 ~:a~!:~ .. ~'~~~r~i..~,Y,. ~.f~~,~) ~o .. ,,~~"er,aciolles y C!ostras~eJk~~:~s, . ' c.ausooa. por,]:. ·.l·twi'wn i una. iJCJrm.1:3,'Rfilrn:i~m(i~-·:-: \~~~!:.,~~~~e;n.t.eQCaSl{ln<\,ji!i ~. 'lJ ,m~Jl,'; ... :";·:'.:-,/· ~:

ria o agcda que Be debe·n.md:arnenca1rne!!l&e a T fagrophytl2s; escamas y &eas de hiperquer'atO's:1s '.' __ .

mmtrlgrophytes; se ICal."aCl!erizJpor ¥es:fClll.las que (h~p.e{qllN,:rat(js.iCi!, secae ea WLOC!lSln);~tJien

a veces adoptaa el aspecto de. eccema 0 dishi- debida a :r momm, PU'e:de extenfersee los bor-

dro:>'1:S; puede observarse un borde marginal S.i des del pie, a. ~u tara. donal, 0 dar forma~ "en

[lJfu:ta! los. pliegUics lnte:rdigitaies se eonece como mOG8iSill" 00 "en caleeun' sleg,1li~~elrl!..ivl~:l de ]a

intertrigo d,~matofiticQ, hay acentuaeion de afeceion. La evolucion es cronica, se Hcompaoa

los SlU'COS, normales .• ,descamlici6n furfUEacea y de prurito y olorretido; cursa con exacerbaciO:lJe5

piipula;s (:I vesiculas en los bordes. La evo.ludon &!J. lemporadas carl!l:!1O~:a$y remisienee en epocas

es cru!i1ica., )i el prunte, inconsraate. La concomi- frias. En GflSOS crenicos, puede habel' una colo-

lalllci3. de: h].!P~I!l~m:l"OSis de tint! pa.ll1l!L~ y ]11$ (los ~ilJcS6:"nV6rrk~sfl in:te;rclig:ital que indica aflor:iaci6n

plantas acompanadas de onicomicosis se conoce a microorganismos gramnegativos. como P~{Ju,.

como sfndrome de urn rnauo y los dos pies (fig. domonas ~(lomplejodermawfit6sico); tambien

6- [6); e;J,11111ocal!:i.zacion palnloplomMU", file pueden [puede bab~ Ic:O'~coIrnJ~llcja con CQrinebJic~eriM (eriirssma inl:crdiginu) y flu,o~c.en:::ill roj a COin

luz de Wood (cap. 27).

BE! OOfuoi'> puede haber 1J!~8J. reodalidad ]F1llaffillooria con lesioues interdi.gitales 0 vesiculas pi astares. pern es Ioas frecuente la forma seca

CQn awud':!!)sis. oe$c;liru,caciQF). fina y pul verulenra,

asfcomo acentuacien de los p!i.c:gut;S de fie:)1j6n

(fig,6-l7). .

III 5ecci6f) II

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,Fi g. 6~ 1 5. A, fin ~(l, m(jnWm; B, tinea pedu.

Fig. ,6-16. Sir:Jdrome dorrnatofftieo de una ITI.3n[l y des piei,

asociara qUe:l'JJtade!l1ma de otro origen, especialm,c'!.T1te bereditarias como la 1[J nna- Thost.

Tina de los pies, tinea pedis o pie de at/eta

Tifias d~ las urias, tinea unguium U onienmicosis derma tofltica

Es propia de adultos y areas urbanas. Predomina sn uiias de los pies (70%), en. especial d~ los primeros detJ:os (95%)~ ell 27% Meet:!! llJii!as de las mMOS Y 5610 en 3% simultanearnsnte manes y pies {Fig, lIS-lei), Predispcnenlcsuaumetismos y 101. causa principal es T rJlbrllm (87%). Las manifessaciones ,c].i..nIl::ils se cl asifican como sigue:

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Fig. 6-17. Tineapedis oot Lrubrum, nino de ocho anos de edad.

de onicomicosis

A. Subungueal

Distal-lateral

B. Blanca superficial

C. Blanca proximal subungueal

D. Distr6fica total

E. Endonyx

F Paroniquia *

En la onicornicosis subungueal distal y lateral, la manifestacion mas importante es la hiperqueratosis subungueal, Las ufias son opacas, de color amarillento, cafe (rnarron) 0 grisaceo, son friables y estan ercsionadas; los bordes dan la impresion de duplicarse (fig. 6-18). Puede observarse engrosarniento (paquioniquia), despegamiento (onicolisis) y es poco frecuente Ia invasion de la lamina ungueal (onixis) y la paroniquia. La evolucion es cronies con invasion len-

ta y progresiva. i

La onicornicosis blanca superficial o Ieuconiquia tricofitica predornina en el primer dedo del pie. Se caractenza par pequefias zonas de color blanco porcelana con superficie rugosa,

* Es ocasionada fundamentalmcnre por Candida, pero tambien puede deberse a Fusarium y Scopulariopsis.

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Derrnatofitosis • 77

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Fig.6-18. Onicomicosis. A, subunqueel distal; B, leuconiquia tricofftica.

pero puede extenderse a toda 1a lamina. Se origina porT mentagropliytes variedad interdigitate o T. rubrum, pero tambien puede ser ocasionada por Acremonium, Aspergillus y Fusarium (fig. 6-18). En la forma subungueal blanca proximal, esta afectada la parte subungueal de Ia una por debajo de la cuticula, es de color blanco y avanza can el crecimiento de la una. En las dos rnodalidades anteriores cuando la afeccion es total, es frecuente Ia concornitancia ccn inmunosupresi6n. En la variedad endonyx, la afeccion es de las partes media y distal de la una, lacual toma un aspecto laminar sin alteracion del tejido subungueal; se ha descrito causada por T. soudanense y T. violaceum. Cada dfa se observan con mas frecuencia formas pigrnentadas 0 rnelanoniquia en las diferentes variedades clfnicas, habitualmente generadas por T. rubrum y por varies hong os oportunistas.

En la modalidad distrofica total hay invasion de la hinula, las ufias se rompen y desmoronail, tienen aspecto de madera carcomida y dejan un lecho engrosado qllf, tarnbien puede quedar destruido (fig. 6-18), Hay formas secundarias a cualesquicra de las forrnas descritas. Las onicomicosis por S. dimidiatum 0 S. Iiyalinum producen onicolisis y algunas veces paroniquia, y puede dar ufias pigrnentadas (ver cap. 31).

Puedsn dJltpendew de. Is ~l;'e$ptl!~ta i]imilru:t!ariati• die.] dermarr6fito en a! 0 de: La. ~licaci6n proJi©flgad!a de gluco~oiF]coidl3{>. El asp~otQ mcdificado de la dennawfito,r;i.~ de basese llama OU[~OQe!lh'{)!P;;'O, que se observa sobre tQd.~ en tinea cruris',. y OO!!lJsisteen mayor eritema y extension de Ias lesiones, presencia de places satelite, eSU1<liS att:6iicas y en cl es!iLldio rniog~6~jco, aid~ento del (jerm;at6flin ('l' ridn"!.lffl @ m~ de O!IJJ demma(6fiJro) y C. albi..cans (fig. 20-9, cap. 20).

m qtb~ri6n pH~.e: afectalJ;; OLla]q;u:i~;t pane de la piel (fig. 6-1), :'l :;;1:: carn(l~e:[[z1l! perplaeas illfian'1<1J©ri.JS can ],nisnll3Js ro,]1cllllaJJes:, 8!b.sce.so3, 1i:lcerils y eostras melioerices. Puede curar solo

.r "_.', t:;1~ fl9~~' C:l~_Q'. J!ilt\~~~". iRs Jill.liLamfesLa.-;:JOO ,6p,ti.- ~ : ~~~.~ fu~ all; '~~mnrii\~~ij ~1j,'5Cuaci:a. '.

$$ ba descrito una fOIDIIl queloideaen piel ~ c3bcl~.lLtda y una forma .pr:o£unda. quistica 'ell ingles.

Granuloma tfi(,o~ftico (I dermatorfi;i(:o

Suele depender die T rubrttm, sunqueel Cru5JO on.gil1M full po:); t: vioiaC8iltrn (I\·IJjoccru). Se maui~,est1l! ]JQiI J6du]Qcs decoosj8:~t:liciafi:rn:l,e, [J)ru.cos o muWp]es, casi $ie.lIT!l[ilre oorr£l;",eil:lres;. pUc$!:Een disponerse en p]ac:as eritemetoescamosas arcifOJ.iJD.eS y excepeienalmenre verrugosas (fi.g. ,6- ]9). La ewlucian. eSC4'G.IliCil y poco ,clo]ffi\oo<t. En t3$rn~j~s se ]oca!izaelJ! las extremidades inferiores y hay antecwent.e de rasurado de las mismas; ell! OINS sitios, cssi s.iemp~e I:lary US0 previo pro~ongad!)) d!c, gliiLIOO()(Htki()I]>lies, En las fQr:l;oa.$ S!ojtarias,[SI ifirull!lni.d<i:~ eelul ar es adecuada y Ja tncofiuna es positlva. En las modalidsdes dir;~]TIIaij.as, se eIlcuentlaalgu~ gl'ado die mm,tmQd!ojJIFe<si6:n. La 'pru:ifbnr;!!i.htisr-llod~~aF gr/inulQma~osa de piernes deserita POL Wilson en 1952, se ccnsidera una vsriaaee clfnica 'Y tamfui>fn S~ baml dlel>cri~o ;1JbSD~SOS ]:!o, demJ;ait6ifi:~08.

I&s~<l FDIT.Illl. gr1Wllb[l!l!m~a,[a!l'll:l!m~[I ICQJ~OC~(111 como granuloma de, WibQn.~Majocchi, es en esencia una foliclltlitis detmat.cli~.ca con perifoliculitlS gt~lJlomaiGsa qll]e,.se puede dilt~d!ilr de una mAillen'l" ~~l1ci1la eo: iOEm<il. da;f:c<lI. (iJ. IJpicl.l, esrae~erizada par lesionea 1l0cln1a);BS: ubicadas funda~ menrlll1m.en!~e tn. las ex:rremid:aliiss infenores, 'j1 la fuIJl1a~tjjlPi.cll, CDJl plaC21s, te]Ii]]us: 0 <t:srperno de

:sarcwna de Kapoo&i de tQiPog:affa Ya[iada.y observada casi s~~[,ee(lJi irlmulllL;JdlE't~c.].e!l!~e.ii.

Para mu~hQs: alll:[ore-s es 1.]["I;Ili. veriedad de grall'!!l!.· lema dermatotltlco, pues no hay Ia forrnacion de. ver,,~.~Cle:[osgraoos, y 1<1. enfermedad.no es exogerlilJ, pu:e:s: &p~mle die l.mo'l hiiaCClporal previa. En hi biQPsiS!, :S"~eE1Cl!le1ltra~ s;eil!.dOlgm!lJ@s fOmlad:os pm: agregados de hifas sueltas 0 mas 0 menos ecmpacras eenfenemene de Splendo.re~Hoep]lJi. E~ltQ~ son ,eOl!us<Ji~oo POil M.cani8, T lli.'1btum~ 1M'. cwd~il:lii y M. fe.rrnginew:rl.~

Eld'ermadad oerm·a,tof(ticilI, dermatefitesi s pn'Jfu n d a generaBz:ada 0 enfermedad de !Hlad~da

En ssta pre.~tintac~ond!nlcae;;>;;r:tlpcional, el hongo invade [ej:kio& prefundos y puede afectar vLsceiL.Els;. en lapiel, laslssienes mne-st(an ilistriltmcioB eraueoeaedal, [11:5 euales ,e$tii[~ eonsritaidas por n6d~doo y placas escamosas, Sin d!ud:l!! h.ay un factor h~fJedi,UlriO Q racial, pries la mayoria. de b. CaM~~ se ba d~ficriro UI .1\Fg~t:i;a.

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Estudio mi co! 69 leo

EI estudio con luz de Wood (cuadro 5-1, cap. 5) permite establecer si los pelos presentan ftuorescencia 0 no (cuadro 6~6), y de manera practica s610 hay fluorescencia en pelos microsporicos y en favicos por T. schoenleinii. HI analisis directo de pelos, escarnas 0 raspado de ufias se Ileva a cabo con hidroxido de potasio.ven el caso de pelos, aquel tambien puede practicarse con lactofenol para preservar las estructuras mas tiempo (cap. 5) 0 con negro de clorazol que facilita la observaci6n, asf como el blanco de calcofhior y usa de microscopio de fluorescencia.

En escamas, se observan filarnentos largos 0 tabicados y artrosporados; en tokelau y en corti,,, .. r.:o:,,,,nnn}e0".19.:~.,.f:i1/3H'r.Jlt0_S-,$C.H'~)J:;>.undantes (figs.

. :;',"':' 5 ~2,cap. '5 '~Fb~J,0~ ,'&'C:s"p:E~iinledeil preser, tar ~ ..

cinco tipos de parasitacion (figs. 5~2, cap. 5; 6-4, 6-21, 6-22 Y 6-23), dos endothrix y tres ectoendothrix (cuadro 6-6)_ Del tipo endothrix se distinguen la parasitaci6n tncofitica (T tonsurans) con gran cantidad de esporas agrupadas densamente en el interior del pelo, y una forma favi-

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Fig. 6-20. Examen directo. A, filarnentos artrosporados; B, filamentos en tokelau.

Dermatofitosis • 79

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Fig.6-21. Parasitaci6n del pelo. fl., examen con dermatoscopro: 8, ectoendothrix, rnkrosporico.

ca can escasas esporas y filamentos, asf como . con vesfculas de aile en el interior del pelo (T. schoenieiniu.

La parasitacion ectoendothrix tecotathrix clasica) tiene una modalidad microsporica (M. canis) con esporas pequefias que forman un manguito alrededor del pelo, una forma microide can esporas can disposici6n laxa alrededor del pelo (T meruagroptiytesi y una presentacion megasporada (T verrucosumy can grandes espolas alrededor del pelo. Cuando T rubrum parasita el pelo, es ectoendothrix.

EJ cultivo Sf efectua en los medics habitua'les COn antibioticos a sin ellos. Los bongos se caracterizan por tolerar cic.oheximida y alcalinizar el medio wando crecen en agar can glucosa o peptona, Para estimular Ia frcctificacion, se utiliza agar-patata 0 agar-hanna de maiz (corn meal).

Si no Be dispone de personal especializado, se recornienda el media de prueba de dermarofito (DTM, por sus siglas en ingles, dermatophyte

fio, color, aspecto y textura; tipo de filamentos, tabiques, clamidosporas, hifas especiales (fig. 3~6, cap. 3), y sabre todo pOT las caractensticas de los rnacroconidios (cuadro 6-7}. que en Trichophyton son de paredes 'lisas (fig. 6-1), en Microsporum equinulados (fig. 6-2) Y en Epidermophyton (que no tiene rnicroconidios) tarnbien son Iisas (fig. 6-3).

Genera Trichophyton. Tiene rnicroconidios abundantes, globosos 0 piriformes de 2 a 4 micras de diametro y escasos macroconidios de paredes delgadas, fusiformes 0 elongados-de 4 a 8 porS a 50 micras (fig. 6-1 y cuadro 6-7).

La especie mas frecuente es T rub rum (fig. 6-24), can rnorfologfa microscopies variable, Y que con mas frecuencia genera colonias de color test-medium), mediocon antib~cte:ri?'nQ.s.·.x,~·Dj0,.~, bbn({\AJgS''';:!,QD.0saS con un plgmento:mj~.m:~\, fenorco~oindicador (cap. 33 )';.: deesta'ffi:iinera;' '. :i~::; J;~c&iW;,~,'el;iL'everso (figs. 6-25 y'6-;26);"algl{,:'<'

I verrucosum {ochreceum}

Fig. 6-23. Tipos de parasitaci6n del pelo.IModificada de Segretain G. Maria! F, Drouhet E. Diagnostic de laboratoire eri mycologie medica Ie. Paris: Maloinc, 1979.)

80 • SecCi6n II Miccsis superficiales

Fig: 6-22. Parasitacion del pelo. A, microide; B, 6rganos perforadores.

se inhiben bacterias y si crece un dermatofito, hay viraje de color amarillo a rojo; sin embargo otros bongos pueden tambien causar el viraje,

Una tecnica sencilla para el aislamiento es el metoda del tapiz 0 del terciopelo sintetico (cap. 5), el cual es iitil en grandes encuestas epidemio16gicas 0 para enviar muestras pO! correo. Se incuba a la temperatura ambiente y se observan las colonias en menos de una ados semanas, La obtencion de rnuestras para el cultivo se ha mejorado can la utilizacion de cepillos dentales, de pelo 0 de cuerpo, as! como hisopos para la obtencion y el sembrado de las muestras.

La identificacion se logra al estudiar las caracteristicas macrosc6picas y microscopicas de las coionias; velocidad de crecimiento, tama-

Grupo Ectoendotbrix

Microsp6ricQ

Microide

Megasporado

M. canis

t: mentagrophytes

nas cepas producen un pigrnento melanoide que se difunde en el media y colorea todo el plato. Tambien hay cepas granulosas y plegadas, Los microconidios pueden ser numerosos a escasos, son ovales y nacen a los lados de las hifas; las formas granulosas tienen muchos macro conidios. Cuando se confunde con otros dermatofitos es convenienteIa resiembra en agar harina de maiz para observar en 6 a 10 dfas el pigmento rojo caracterfstico.

Le sigue en importancia T mentagrophytes, el cual posee multiples variedades morfo16gicas que se han abandonado en la nomenclatura (figs. 6-27 Y 6-28). Las cepas antroporilas se describen como vellosas (T mentagrophytes varied ad inter- . digitate) 0 algodonosas de color blanco cremoso

Grupo Endothrix

TricofHico

Favlco

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I sohoenteint!

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E. fioccosum

M. audouinii

M. canis

M. gypseum

T. men/aimphytes

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· Crecimi~~to' :.~ -. : <·2~~~·:"~-;;:·:~f~t!f,~t~~~~~;[{~t.]:~~i.~i}i~jj!~;;1~~r:~~1.~,~~:,~~~;}:~~ ~':/;~~:~~;;~L~D){ .~: k~ a(ro~onidiO~~·., ~ .,~ •. - ··;::c~;~~:t;ticas .:

Moderado (lOa14d)

Moderado (7 a 10 d)

Moderado (6 a 10 d)

Rnpido (6 d)

Moderado (7 a 10 d)

Verde oliva, arnarillento

Gris

Blanco amarillento

Cafe canela

Blanco marfil

Finamente vellosa, plegada, estrellada

.Aterciopelada, plana, en.l'piel de raton"

Vellosa, plana, radiada, 0 lanosa

Pulverulenta, granulosa, .plana

Pulverulenta, granulosa, plana, centro aeuminado

d = dfas; sem = semanas; Ioc. ~ loculos; + == positive; * no.siempre.

Cafe (marten) anaranjado

Cafe (matron) rojizo

Anaranjado

Cafe (marron)

Vinoso"

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En raqueta, clamidosporas'

Pectin~das-,-"-clamidosporas

En raqueta, clamidosporas, GUel1JOS nodulares

En raqueta, astas de eiervo, espirales, zarcillos

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Infrecuentes

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(~~i~Sionales

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ell ~ision'ales

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·'>h;nduntes,

'i!1:;l~:lClmOS, rei~/~ndos

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En clava ° .basto, 2 a 3loc., en "racimos de platanos'~. Deformados.

En huso, extremes afilados, pared gruesa, 60 mas Icc, .

En huso, paredes

. delgadas, menos de 6loe.

ESC(lSOS, en cigarro o salchicba, pared delgada, 1 a 61oc,

Escasos, Iusiformes, Iarg oS,es trechos, en "puntade lapiz":'

Pleomorfismo rapido. No afecta pelo

No erect en medio con arroz

Creec en rnedio con arroz

Pleoinorfismo . rapido .

In vitro perrora pelos en 4 sern,

Es ureasa + enS a 7 d

(continliCl )

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To rubnt.rn

Mederado (14 oJ

Blanco, ,(iifllilde pig_menl:o

M(ld:~,muo (4& 14 d)

VellilMI, algodotl.Otia {I gnmnlostl )i VJallii

Vadahl!e, gris, Cra'~erjfoi]:i!I~. cafe (J1J.a[[(j,n) ceroorifomlc.

plegfitln '0 plutla. puli'efulenla

T. cMcef'WiClim Lemo (10 d) Blance, u:ema, 'JOJo lliTl.ari.tlOll,to

Lento {1:S a Blanco

30 dI) gris:lceo

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Pec~Lnl!>C!a.s, ckl~'Uudosporas

Pix~f(!iOlles, en bigrima. a los lades del filamento

00 t..,

,-, QtraJ' car,i:lcieII8ctioas

IPI. viti,!' r!Q P~do()'l,'a, ptlQI~ , produce pigrnenrc eu agarp2J~ y ",on:! mea{''', V~"_ g nmr.:losum, es ureasa ...

?;rifmme, ell, Infrecuentss g~obQ. aeros-

~.Gtic,o

No p.ooillce pigrcento ell lIgm' -'paE~rn, Requill1I1B tirurul1~

'Ol abra, cersenfor- I"urpura ~ me, CCl:(;;~

d = dfas; sem = semanas: loc, = 16culas;.,;- '" pasitivo; ~ no si~pre.

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Candelabros ,f~ .... ices Infrceuentes

"D~stOJrSiOO1iadncs," , candelabrcs

No hay

Clamid.wporas eo csdenaa, "cescabel de serpLenre"

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Reg urere parcialmente tiaruiilla

Cineaenta pCj;' dcr,to de Las cep<~s reg niere ~1aminil

Cl'ecim~~to Dptitno, .~ 37<1C, F,n ~O a 8.5% req~je:rre liriositoL

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Fig_ 6-24. T. rubrum. A, co.onia: B, microconidios y macrocronidios en salchicha.

y pul.y~~I~I}.t<l~~:rJ" .el~~<I1~q_Dlg., ~)9); las zoofi-

'. ld:s. s:0.l\gv.id~f{.l;jJ:r),'!;.1 f(C:,:£iri\!!:ii; '.f~ <1.s::,(1' ineniagrophytes variedad mentagrophytesi can un color blanco crernoso, pulverulentas con los margenes radiados; en el reverso, hay un color rojo 0 cafe (matron). Se observa abuoclancia de microconidios esfericos, los cuales nacen en ciimulos asi como a 10 largo de las hifas; los macroconidios son cilfndricos y de paredes delgadas y frecuenternente se ven hifas en espirai.

Trichophyton mentagrophytes variedad erinacei se halla en erizos; algunos 10 consideran una especie aparte (T. erinaceit, produce colonias de crecirniento rapido, superficie blanca y pulverulenta y en el reverse tienen un color amarillo brillante (fig. 6-30); se conocen numerosos microconidios eLongados que nacen a los lados de las hifas. Se distingue de T mentagrophytes

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Dermatofitosls _ 83

Fig. 6-26. T. rubrui71, colonia con pigmento ro]o.

por su inhabilidad para utilizar urea, Trichophyton mentagrophytes variedad quinckeanum genera favus en ratones.

Estan en aurnento las infecciones por T. tonsurans (fig, 6-27), el eual da Lugar a colonias pulverulentas que se pliegan con La edad; el color de la superficie puede ser blanco, gris, ante 0 amarillo, Por 10 general hay un color cafe (matron) oscuro en el reverso, Los rnicroconidios son uumerosos y de tamario variable, nacen a les lados de las hifas 0 en brazos cortos, se disponen en angulo recto con respecto a estas (Cruz de Lorena); son cornunes las clamidosporas e infrecuentes los macroconidios de paredes delgadas y lisas con algunas hifas en espiral. Se reconocen dos especies: T. tonsurans variedad tonsurans y variedad sulfureum.

Fig. 5-17. Colonias. A, T mentaqrophvtes; S, T tonsu-

Fig. 6-25. T rubrurn, colonia con difusi6n del pigmento. rom.

84 !III Scccion II M;cQsis superficlales

Fig. 6-28. T. mentagfophyles. A y B, microconidios redondos y macroconidlos: C mkroconldlos en racim05 e hla~ en tiRlbuZOrl.

fig. 6-29. Colonia de T interdigitale.

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Fig. 6-30. Colonia de T erinacei.

Trichophyton violaceum (fig. 6-31) genera r~~ ... ;~" ~l"hr~~ o.cereas decrecimiento.lentov

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rojizo. Al microscopic, se observan hifas tortuosas y las estructuras de reproduccion son infrememes. Los medias con tiamina disminuyen el pieomorfismo 'l quizas haya macroconidios alargados y microconidios en forma de clava.

Trichophyton verrucosum (fig. 6-32) da colonies de crecimiento muy lento con textura dura; e] cultivo es mas rapido a 37°C y crece mejor si se adiciona 0.1 % de extracto de levadura. Las colonias son vellosas y de color blanco a amarilleruo. Puede haber microconidios en forma de lagrima y macroconidios en forma de "cola de rata", pero por 10 regular estan ausentes; en camhio, hay grancantidad de clamidosporas que toman una disposicion de "cascabel de serpiente" y SOn particularmente numerosas a 37°C.

Es uti] el medic con tiamina.

Fig. 6-31,. A, colonia de T. viotoceum, B, candelabro favlco,

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. _ ... ~t : .. :.: .',.'.' ,.... Trichophyton concentricum (fig. 6- 3 3) tr~ne ... - . ,'. L-r:.·':~':· ;;"~;Ia colonias de crecimiento len to y aspecto ceteo,' .

. . ' de color blanco cremoso 0 Jigeramente rosadas, grises 0 ante, de superficie blanda, cerebriforrnes y que al microscopic producen hifas en "asta de ciervo" y clamidosporas; no afecta pelos de la cabeza.

Fig. 6 .. 32. T. verrucosum A,. colonia; B, darnidosporas en cascabel.

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Fig. 6-33. T concentricum. A, colonia; B, filamentos en capa cornea.

Derrnatotitosis )I; 85

Fig. 6-34. Colonias de T. schoenleinli (A) y T. soudanense (8).

Trichophyton schoenleinii (fig. 6-34) da colonias de crecimiento lento can una superficie glabra de color blanco grisaceo, aspecto cerebriforme y micelio sumergido en los hordes de la colonia. La principal caractertstica es la presencia de hifas en "asta" a "cuerno" ("candelabras favicos"), es decir, extremes ramificados y redonc1eados 0 hinchados, No se encuentran formas de reproducci6n.

Trichoohyton soudanense (fig. 6-34) produce colonias gJ abras de crecimiento lento, con textura suave y flecos radiados 0 en forma de estrella; el color es naranja, pero algunas cepas producen uh color rojo con el tiempo. Puede haber hifas a los lados de los filarnentos, pero su principal caractenstica es la presencia de hifas rarnificadas y refiexivas 0 hifas en pequefios fragmentos; tal vez se observen microconidios piriformes.

Tienen limitacion gcografica. T ajelloi, T equi;urm variedad equinum, T. equinum variedad autotrophicum, T. simii, T. gourvilii, T megninii y T yaounde 1.