You are on page 1of 45

‫إنزيمات الكسدة والختزال‬

‫إنزيم البيروكسيديز ) ‪( Peroxidase‬‬


‫يوجد هذا النزيم بوفرة في جميع النباتات الراقية فيرتبط مع ‪ H O‬مكونُا معقد قادر على استقبال الهيدروجين‬
‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬

‫ومؤكسدًا أنواع مختلفة من المركبات الفينولية والحماض المينية والكحولت‬

‫طريقة الكشف عن نشاط إنزيم البيروكسيديز‬


‫الدوات ‪:‬‬
‫انبوبتا اختبار‬ ‫‪‬‬
‫إنزيم البيروكسيديز ‪ 1‬مل‬ ‫‪‬‬
‫مادة الجوايكم ‪ 0.1‬مل‬ ‫‪‬‬
‫محلول فوق أكسيد الهيدروجين ‪ H O‬الذي يعتبر مصدر الكسجين اللزم لعملية الكسدة‬
‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪‬‬
‫طريقة العمل‪:‬‬
‫نضع فلي النبوبلة الوللى ) النبوبلة المعامللة ( ‪ 1‬ملل ملن النزيلم ‪ 0.1 +‬ملل ملن ملادة التفاعلل‬ ‫‪‬‬
‫) الجوايكم ( ‪ 1 +‬مل من ‪H O‬‬
‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬

‫نضع في النبوبة الثانية ) الكنترول ( ‪ 1‬مل من النزيم ‪ 0.1 +‬مل من مادة التفاعل ) الجوايكم (‬ ‫‪‬‬

‫النتيجة ‪:‬‬
‫نحصل على للون البرتقالي البني في النبوبة المعاملة بينما يظل الكنترول محتفظًا بلونه الصلي‬

‫التعليق ‪:‬‬
‫يعمل هذا النزيم على أكسدة المواد الفينولية في وجود ‪ ، H O‬حيث يعمل فوق أكسيد الهيدروجين كمستقبل‬
‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬

‫للهيدروجين المنزوع من مادة التفاعل ) الفينولت ( أو الحماض المينية أو الكحولت‪.‬‬


‫ويؤخذ من الدراسللات الطيفيللة أن النزيللم يرتبللط مللع ‪ H O‬مكونلًا معقللد ‪ E – H O‬القللادر علللى العمللل‬
‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪2‬‬

‫كمستقبل لللهيدروجين المنزوع من مادة التفاعل‬

‫قادر على استقبال الهيدروجين‬


‫ومؤكسدًا أنواع مختلفة من‬
‫المركبات الفينولية والحماض‬
‫المينية والكحولت ‪.‬‬
‫طريقة الكشف عن نشاط إنزيم‬
‫البيروكسيديز‬
‫الدوات ‪:‬‬
‫•انبوبتا اختبار‬
‫•إنزيم البيروكسيديز ‪ 1‬مل‬
‫•مادة الجوايكم ‪ 0.1‬مل‬
‫•محلول فوق أكسيد الهيدروجين ‪ H2O2‬الذي يعتبر‬
‫مصدر الكسجين اللزم لعملية الكسدة‬

‫طريقة العمل‪:‬‬
‫نضع في النبوبة الولى ) النبوبة المعاملة ( ‪ 1‬مل‬
‫من النزيم ‪ 0.1 +‬مل من مادة التفاعل ) الجوايكم (‬
‫‪ 1 +‬مل من ‪H2O2‬‬
‫نضع في النبوبة الثانية ) الكنترول ( ‪ 1‬مل من النزيم‬
‫‪ 0.1 +‬مل من مادة التفاعل‬
‫) الجوايكم (‪.‬‬

‫النتيجة ‪:‬‬
‫نحصل على للون البرتقالي البني في النبوبة المعاملة‬
‫بينما يظل الكنترول محتفظًا بلونه الصلي‬
‫التعليق ‪:‬‬
‫يعمل هذا النزيم على أكسدة المواد الفينولية في وجود‬
‫‪ ، H2O2‬حيث يعمل فوق أكسيد الهيدروجين كمستقبل‬
‫للهيدروجين المنزوع من مادة التفاعل ) الفينولت (‬
‫أو الحماض المينية أو الكحولت‪.‬‬
‫ويؤخذ من الدراسات الطيفية أن النزيم يرتبط مع ‪H2‬‬
‫‪ O2‬مكونًا معقد ‪ E – H2O2‬القادر على العمل‬
‫كمستقبل لـلهيدروجين المنزوع من مادة التفاعل‬
‫المعادلة ‪:‬‬

‫إنزيم الكاتاليز )‪( Catalase‬‬


‫هذا النزيم يتميز بقدرته على استخدام فوق أكسيد‬
‫الهيدروجين كمستقبل ومعط في آن واحد ‪ ،‬أي أن عمل‬
‫هذا النزيم هو أكسدة جزيء من فوق أكسيد‬
‫الهيدروجين بجزيء آخر منه‬
‫طريقة الكشف عن نشاط إنزيم‬
‫الكاتليز‬
‫الدوات ‪:‬‬
‫•قطع من البطاطس ) مصدر النزيم (‬
‫•فوق أكسيد الهيدروجين‬
‫•أنبوبة اختبار‬

‫طريقة العمل ‪:‬‬


‫•نأخذ قطع البطاطس ونضعها في انبوبة اختبار‬
‫•نأخذ قطع بطاطس مغلية ونضعها في أنبوبة‬
‫اختبار اخرى‬
‫•نضع في النبوبتين فوق آكسيد الهيدروجين‬
‫) نقطة نقطة (‬

‫‪HO HO‬‬
‫‪HO HO‬‬
‫‪H2O + O2‬‬

‫النتيجة ‪:‬‬
‫•تصاعد غاز الكسجين بشكل فقاعات من النبوبة‬
‫المعاملة‬
‫•عدم تصاعد غاز الكسجين من النبوبة المحتوية‬
‫على بطاطس مغلية ) الكنترول (‬
‫التعليق ‪:‬‬
‫إنزيم الكاتاليز من النزيمات الشائعة في أنسجة‬
‫الكائنات الحية فهو ذو طبيعة بروتينية حديدية ) تعمل‬
‫مركبات الكبريت على تثبيطه ( ويقتصر نشاطه على‬
‫مركبات فوق أكسيد الهيدروجين ‪ ،‬بحيث يعمل على‬
‫تفكيك مركب فوق أكسيد الهيدروجين إلى أكسجين‬
‫وماء‬
‫لذا فهو يحول دون تراكم فوق أكسيد الهيدروجين‬
‫الناتج من عمليات التنفس في النسجة والذي يسبب‬
‫تراكمه تسمم الخليا وبالتالي موتها‪.‬‬
‫تشترك جزيئتان من فوق أكسيد الهيدروجين في‬
‫التفاعل مع إنزيم الكاتاليز ‪ ،‬فإحداهما تعمل كمانح‬
‫للهيدروجين والجزئ الخر يعمل كمستقبل له ‪ ،‬أي أنه‬
‫يتم أكسدة جزيء واختزال جزيء آخر من فوق أكسيد‬
‫الهيدروجين ليعطي الكسجين والماء‬
‫ما اهمية الفيتامينممات وممما‬ ‫المزيد في‬
‫هي مصدرها؟‬ ‫هذه الفئة‬

‫الفيتامينات هي عناصر لغنى عنها للجسم السليم‪ .‬ينص التعريف العلمي ان الفيتامين ‪:‬‬
‫مركب عضوي ‪ ،‬ليس شحما او حامضا امينيا ‪ ،‬يحتاجه الجسم بكميات صغيرة جدة‬
‫لتأدية وظائفه المختلفة ‪ .‬ان المركبات العضوية هي المركبات المحتوية على الكربون‬
‫في بنيتها كما هو الحال مع الفيتامينات والشحوم والحماض المينية ال ان المادتين‬
‫الخيرتين ليستا من الفيتامينات ‪.‬‬
‫أهمية الفيتامينات‬
‫من الناحية العلمية فان اطلق اسم " فيتامين " على اي مستحضر يكفي لسباغ صفة‬ ‫التمارين منذ‬
‫" الضرورة المطلقة للجسم " عليه ان التعبير العام عن عملية تناول الفيتامينات‬
‫يتجسد في تناول النباتات ولحوم الحيوانات التي تحتفظ بهذه لفيتامينات في اجسادها‪.‬‬
‫الصغر تقوي‬
‫اذ ان بعض النباتات والحيوانات تستخدم الماء والهواء وضوء الشمس لنتاج الفيتامينات‬ ‫العظام‬
‫داخلها ) كما هوالحال مع فيتامين سي ( ال ان هذه الفيتامينات يمكن ايضا انتاجها‬
‫ويتوجب على النسان التفريق بين الفيتامينات الطبيعية و الفيتامينات الصناعية‬
‫‪.‬وسنأتي على ذلك لحقا‪ .‬وحينما يتحدث العلم عن الضروري فانه يعني بذلك المواد‬
‫المتواجدة في الطعام وذات ا لوظائف المحددة وا لتي لغنى عنها لجسم النسان "‪.‬‬
‫ويحتاج العلماء عادة الى دراسات طويلة وسنوات عديدة كي يحددوا ما اذا كانت المادة‬
‫الفلنية ضرورية ام ل ‪ .‬والفيتامينات ضرورة قصوى لجسم النسان ‪.‬‬
‫والفيتامينات الضرورية هي ‪ :‬اي ‪ ،‬دي ‪ ،‬كي ‪ ،‬بي ‪ ، \-‬بي ‪ ، 2-‬نياسين ‪ ،‬بي ‪ ،6-‬حامضىا‬
‫لفوليك ‪ ،‬حامضى ا لبانتوثين ‪ ،‬البيوتين ‪ ،‬بي ‪ 12-‬و فيتامين سي ‪.‬‬
‫وتقسم الفيتامينات من ناحية خصائصها الى فيتامينات ذائبة في الماء واخرى ذائبة في‬
‫الدهن ‪ .‬والفيتامينات ا لذائبة في الدهن هي ‪ A,D,E,K‬اما الفيتامينات الخر فكلها ذائبة‬
‫في الماء‪ .‬وتنضوي كل مجموعة فيتامين ب تحت لواء الفيتامينات الذائبة في الماء عدا‬
‫عن فيتامين سي ‪ .‬ويمكن للجسم خزن الفيتامينات الذائبة في الدهن بكميات كبيرة‬ ‫حلول لقشرة‬
‫نسبيا ‪،‬بضمنها ب ‪ ،12 -‬في حين ليمكن خزن الفيتامينات الذائبة في الماء ال بكميات‬ ‫الرأس‬
‫ضئيلة ولهذا ل تسد حاجة الجسم منها ال لفترة محددة ‪.‬‬
‫القيمة اليوميه الموصى بها‬
‫رغم ان حاجة البشر الى الفيتامينات تختلف نسبيا من انسان الى اخر فان إلجسم‬
‫بحاجة الي معدل عام ثابت من الفيتامينات يوميا يطلق عليه اسم القيمة اليومية ‪Daily‬‬
‫‪Value (DV‬وتوصل العلماء ‪ ،‬بناء على ابحاث دقيقة ومطولة ‪ ،‬الى وضع خطوط عامة‬
‫للكميات اليومية اللزمة من الفيتامينات يمكن ان تكون مقياسا دوليا‪ .‬ويمكن ملحظة‬
‫هذه النسب مطروحة على كافة مستحضرات الفيتامينات وبشكل قيمة يومية ‪ .DV‬وقد‬
‫ارسى العلماء تقديراتهم عن القيمة اليومية للفيتامينات على اساس المعدل العام‬
‫للطاقة التي ينالها النسان يوميا عبر التغذية والبالغ ‪ 2000‬سعرة حرارية ‪ .‬وتقدر‬
‫القيمة اليومية من فيتامين سي بحوالي ‪ 60‬ملغم يوميا ولهذا فان اقراص الفيتامينات‬
‫التي يكتب عليها ‪ 30‬مغم او ‪ %50‬تعني انها تحوي نصف القيمة اليومية المحددة‪.‬‬
‫وسوق المستحضرات مليئة باقراص الفيتامينات ال ان اي منها ل يلبي حاجة الجسم‬
‫جين قادر على‬
‫كما تلبيه الغذية العلمية الصحيحة الغنية بالفيتامينات والمعادن والمتوا زنة بيت ا‬ ‫إنماء السنان‬
‫لبروتينات وا لسكريات والشحوم ‪.‬‬
‫ويبدو ان القيم اليومية للفيتامينات ليست ثابتة وانها قابلة للتغيير وبالرتباط مع قناعات‬
‫الطباء في كل بلد ‪ .‬وعلى هذا الساس فقد اتفق اتحاد التغذية اللمان مع نظيره ا‬
‫لنمساوي عام ‪ 2000‬على ضرورة زيادة ا لقيم اليومية للفيتامينات التي تم تحديدها‬
‫عام ‪. 1991‬‬
‫واليكم القيم اليومية المطروحة عام ‪ 2000‬مع مقارنتها بقيم ‪1991‬‬
‫‪ -‬حمض الفوليك‪ 400 :‬ميكروغرام ) ‪ 305‬ملغم عام ‪( 1991‬‬
‫‪ -‬فيتامين سي ‪ 1000‬ملغم ‪ 150 /‬ملغم عند المدخنين ) ‪ 75‬مغم عام ‪( 1991‬‬
‫‪ -‬فيتامين اي ‪ A : 2 - 4‬ملغم ‪ /‬ما يعدل ريتينول ) ‪ 2‬ملغم عام ‪( 1 99 1‬‬ ‫كيف تحفاظين‬
‫‪ -‬فيتامين ‪ E :15‬ملغم ) ‪ 12‬ملغم (‬
‫على بشرة‬
‫مصدرالفيتامينات‬
‫من الواضح ان الغذاء هو افضل مصدر لفيتامينات وان التربة هي افضل مصدر للمعادن‬ ‫طفلك‬
‫الضرورية لنشاط النسان لكن الفيتامينات التكميلية او الضافية التي نبتاعها من‬
‫الصيدلية مستخلصة مرارا من مصادرها الصلية‪.‬‬
‫كيف تقلل فقدان الفيتامينات من الغذية ؟‬
‫تلعب طريقة خزن المواد الغذائية ‪ ،‬وخصوصا ا لفواكه والمخضرات ‪ ،‬واساليب تحضير‬
‫الطعام دورا هاما في تقليل فقدان الفيتامينات من هذه المواد‪ .‬اذ ان طريقة الحفظ‬
‫اوالطبخ قد تؤدي الى فقدان الخضر والفواكه لنسبة من محتوياتها من الفيتامينات‬
‫والمعادن ترتفع الى ‪ .%50‬والسبب هو ان معظم الفيتامينات حساسة للحرارة ‪،‬الضوء‬
‫والوكسجين ويمكن ان تتسرب من الغذية بسهولة تأثيرات هذه الظروف ‪.‬ولهذا فان‬
‫لفترات طويلة ‪.‬‬
‫ويقول البروفسور ايريش موسكات عضو المعهد اللماني للتغذية ان افضل طريقة‬
‫للحفاظ على الفيتامينات في المواد الغذائية هي طريقة تناول المواد المذكورة طازجة‬
‫او مطبوخة قليل ببخار الماء‪ .‬مع ضرورة استخدام ماءا لطبخ المذكور لمرقة او شوربة‬
‫لنها تحوي على نسبة عالية من الفيتامينات ‪.‬‬
‫يمكن للفيتامينات ان تتجزأ الى عناصرها المكونة بفعل عملية الستقلب الجارية في‬
‫النبات ولهذا فان الخزن او الحفظ الطويل يؤدي الى فقدان الكثير من هذه الغذية ‪.‬‬
‫وطبيعي فان الفيتامينات تتجزأ ايضا بفعل الحرارة وليس بفعل الغلي فقط وهذا يعني‬
‫ان الخزن بدرجات حرارة غير ملئمة سؤدي الى فقدان المزيد منها‪ .‬وعلى هذا‬
‫الساس يفقد السبانغ ‪ %79‬من فيتامين سي الكامن فيه بعد يومين من الخزن بدرجة‬
‫فيتامين سي من السبانغ الى ‪ %33‬فقط في حالة‬ ‫شهادات‬
‫صلةوينخفض فقدان‬ ‫تأملت‬
‫حرارة ‪ 20‬مئوية‪.‬‬
‫خزنه في الثلجة ‪ .‬وتختلف نسبة فقدان بيتا ‪ -‬كاروتين من المواد الغذائية بين ‪%24 8‬‬
‫رياضة ثقافة فكاهة شبيب‬ ‫تكنولوجيا‬
‫الحرارة‪.‬‬ ‫صحة‬
‫طريقة الخزن ودرجة‬ ‫مطبخ حسب‬ ‫اسرة‬ ‫سيارات‬ ‫خبار‬
‫ويعتمد مقدار الفيتامين المفقود من المواد الغذإئية على نوعية الفيتامين وعلى‬
‫مشاهير ثقافة جنسية‬
‫درجةالحرارة ‪ .‬وكمثل فان فقدان حامض الفوليك قد يرتفع الى ‪ %50‬في حالة‬
‫ة‬
‫الخضروات المطبوخة اعتياديا والى ‪ %25‬في حالة الطبخ ببخار الماء‪ .‬وتفقد‬
‫الخضروات عادة ‪%35‬من فيتامين سي في حالة الطبخ العادي و ‪ %25‬في حالة‬
‫انضاج طبغ هذه المواد‪.‬‬‫بمنما‬
‫اتمصملوا حالة‬ ‫الموقمع‬
‫يتضاعف هذا الفقدان في‬ ‫عمن‬
‫التبخير‪ .‬وقد‬ ‫الرئيسية‬
‫السبب الخر لفقدان فيتامين سي من الفواكه والمخضرات هو محتوى انزيم‬
‫البيروكسيديز فيها ويتواجد هذا النزيم بشكل اعتيادي في بعض المواد الغذائية ويعمل‬
‫على تفكيك فيتامين سي بشكل فعال في درجات حرارة تتراوح بين ‪ 70 – 4‬درجة‬
‫‪2009‬خلل غلي الماء ثم اضافة الفاكهة او المخضرات‬ ‫لروحك ‪-‬‬
‫تجنب ذلك من‬ ‫موقع‬
‫مئوية ‪ .‬ويمكن‬
‫المطلوبة اذ تعمل الحرارة‬
‫العالية على ابطال مفعول النزيم‪.‬‬
‫هدف‬ ‫‪Arabic Abstract‬‬
‫نصائح اضافية‬
‫البح‬ ‫‪-‬تناول الطعة طازجة في مواسمها ودون فترة خزن طويلة‬
‫لدرا‬ ‫‪ -‬اخزن التفاح ‪ ،‬البرقوق ‪ ،‬البروكولي وا لبقول في ادراج منفصلة في اسفل الثلجة ‪.‬‬
‫مدى‬ ‫‪ -‬التزم بدرجات برودة ا لثلجة المناسبة لمختلف الغذية والمثبتة من قبل منتج الثلجة‬
‫إنزيم‬ ‫‪ -‬احفظ الخضروات وا لفواكه الحساسة للبرودة مثل الفاكهة الستوائية والخيار‬
‫والبطاطا في محل بارد مثل القبو بين ‪5 - 10‬درجة مئوية‪.‬‬
‫البير‬
‫‪ -‬في حالة التجميد تحتفظ الكياس المفرغة من الهواء بالفيتامينات افضل من غيرها‬
‫يز‪ ،‬و‬ ‫ل المخضرات الطازجة مثل البروكولي والسبانغ والبقول قبل ان تجمدها لن هذه‬ ‫‪ -‬اغ ِ‬
‫يعتبر‬ ‫الطريقة تحفظ الفيتامنينات والصبغات من الزوال ‪ .‬لكن هذا ل ينطبق على‬
‫مؤش‬ ‫الكوسةوالفطر والشبارجل خصوصا اذا كانت فترة التجميد المطلوبة ل تتعدى بضعة‬
‫لمدى‬ ‫اسابيع ‪.‬‬
‫‪ -‬ابعد الشياء غير المرغوبة فقط من النباتات حينما تنظفها او تقشرها‬
‫كفاء‬
‫‪ -‬تناول الخضار دائما طازجة وخصوصا الخس والجزر وا لفلفل وا لبندورة ‪.‬‬
‫المع‬ ‫‪ -‬ل تنقع الخضروات والفواكه بالماء وانما نظفها قبل الستخدام مباشرة‪.‬‬
‫الحر‬ ‫‪ -‬عامل مواد السلطة المقطعة بالليمون او الخل حال النتهاء من تقطيعها‪.‬‬
‫لبعض‬ ‫‪ -‬اطبغ المواد دائما بقليل من بخار الماء‪ .‬واضف الخضروات والفواكه الى الماء الغالي‬
‫المع‬ ‫في حالة السلق ‪.‬‬
‫ناد را ما يكون الفرا ط بالنيتامينات ضارا ان عدد الفيتامينات التي تتحول الى مواد‬
‫المتغ‬
‫سامة في حالة الفراط بها هو عدد قليل ومثال ذلك هو الكثار من فيتامين اي و دي ‪.‬‬
‫أصنا‬ ‫يخزن فيتامين اي في الكبد ولذلك فان الفراط به يعني تحويل نسبة منه الى الدم‬
‫محد‬ ‫والتسبب بحالة تسمم ‪ .‬وهذه حالت ليست نادرة تمامة عند الحوامل والطفال‬
‫التفا‬ ‫الرضع ‪ .‬والسبب هو ان الفيتامنات الذائبة في الماء يستطيع الجسم التخلمى منها عن‬
‫البرت‬ ‫طريق الدرار في حالة زيادتها عن حاجة الجسم‪.‬‬
‫ان جرعات مفرطة من فيتامين ب ‪ 6-‬قد تؤدي الى مشاكل عصبية في حين ان‬
‫الجو‬
‫الكثارمن فيتامين سي يسبب الصابة بالسهال‪.‬‬
‫المو‬
‫إستخ‬ ‫اضف تعليق‬
‫كمص‬
‫للنز‬
‫تقدي‬ ‫تعليقات‬
‫مست‬
‫النش‬ ‫ل توجد تعليقات‬
‫النز‬
‫لكل‬
‫مصد‬
‫تمت‬
‫دراس‬
‫ثباتية‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫من‬
‫مصا‬
‫وذلك‬
‫الحف‬
‫تحت‬
‫ظرو‬
‫مختل‬
‫درج‬
‫الحر‬
‫والتى‬
‫تضم‬
‫درج‬
‫التج‬
‫‪ºC‬‬
‫درج‬
‫التبر‬
‫‪C‬‬
‫درج‬
‫حرار‬
‫الغر‬
‫‪0ºC‬‬
‫تناول‬
‫الدر‬
‫أيضا‬
‫ثلثة‬
‫عوام‬
‫متغي‬
‫وهى‬
‫الحر‬
‫زمن‬
‫المع‬
‫الحر‬
‫ودرج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ىع‬
‫معد‬
‫التثبي‬
‫الحر‬
‫للبير‬
‫يز ال‬
‫المس‬
‫من‬
‫الرب‬
‫كما‬
‫مراع‬
‫تماثل‬
‫ظرو‬
‫الس‬
‫والم‬
‫والخ‬
‫التالي‬
‫أثبتت‬
‫الدر‬
‫وجو‬
‫النز‬
‫كل‬
‫المخ‬
‫ولكن‬
‫بمس‬
‫مختل‬
‫النش‬
‫والتي‬
‫أنها‬
‫بإختل‬
‫المص‬
‫نسبي‬
‫وجد‬
‫مست‬
‫مقد‬
‫النش‬
‫للنز‬
‫المس‬
‫من‬
‫فواك‬
‫جميع‬
‫درج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى ال‬
‫إختبا‬
‫‪5.0‬‬
‫‪8.0‬‬
‫‪6.0‬‬
‫مست‬
‫نشاط‬
‫للنز‬
‫لوحظ‬
‫عند‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى)‬
‫) ‪.0‬‬
‫كونه‬
‫عند‬
‫الهيد‬
‫ى‪0‬‬
‫)كما‬
‫أن أ‬
‫مست‬
‫النش‬
‫النز‬
‫من‬
‫فواك‬
‫الدر‬
‫كانت‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى)‬
‫وجد‬
‫التفا‬
‫والج‬
‫والم‬
‫تحتو‬
‫على‬
‫مست‬
‫عالية‬
‫النز‬
‫بينما‬
‫مست‬
‫نشاط‬
‫إنزيم‬
‫البرت‬
‫هو ا‬
‫على‬
‫درج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى‬
‫المخ‬
‫تم إ‬
‫ثباتية‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫للرب‬
‫فواك‬
‫وذلك‬
‫بحفظ‬
‫تحت‬
‫ظرو‬
‫مختل‬
‫درج‬
‫الحر‬
‫وهى‬
‫التج‬
‫‪8oC‬‬
‫درج‬
‫التبر‬
‫‪C‬‬
‫حرار‬
‫الغر‬
‫‪0oC‬‬
‫وذلك‬
‫أسبو‬
‫واحد‬
‫‪.‬إحتف‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫من‬
‫مصا‬
‫بكام‬
‫نشاط‬
‫‪100‬‬
‫عند‬
‫على‬
‫التج‬
‫‪8oC‬‬
‫ة أس‬
‫وعند‬
‫الحف‬
‫على‬
‫التبر‬
‫‪C‬‬
‫أن‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫للرب‬
‫عينات‬
‫إحتف‬
‫بمس‬
‫نشاط‬
‫يساو‬
‫أعلى‬
‫)‪0%‬‬
‫خلل‬
‫الخت‬
‫كما‬
‫أن م‬
‫نشاط‬
‫النز‬
‫للرب‬
‫فواك‬
‫من‬
‫النش‬
‫الص‬
‫أقل‬
‫)وذ‬
‫عند‬
‫لمدة‬
‫أسبو‬
‫على‬
‫حرار‬
‫الغر‬
‫‪0oC‬‬
‫لدرا‬
‫معد‬
‫التثبي‬
‫لدرا‬
‫معد‬
‫التثبي‬
‫الحر‬
‫للبير‬
‫يز‬
‫المس‬
‫من‬
‫فواك‬
‫تعري‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫غير‬
‫للتثب‬
‫الحر‬
‫لدرج‬
‫مختل‬
‫الحر‬
‫‪60‬‬
‫‪80‬‬
‫‪C‬‬
‫مدى‬
‫مختل‬
‫‪2‬‬
‫‪8‬‬
‫دقائق‬
‫وذلك‬
‫درج‬
‫مختل‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى تح‬
‫‪5.0‬‬
‫‪7.0‬‬
‫‪8.0‬‬
‫ومن‬
‫الدر‬
‫وجد‬
‫معد‬
‫التثبي‬
‫الحر‬
‫يزدا‬
‫بزياد‬
‫من‬
‫الحر‬
‫وزمن‬
‫المع‬
‫الحر‬
‫لوحظ‬
‫الدر‬
‫منحن‬
‫التثبي‬
‫الحر‬
‫كانت‬
‫الطو‬
‫لوحظ‬
‫هذا‬
‫من‬
‫هو ا‬
‫السا‬
‫جميع‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫من‬
‫مصا‬
‫‪.‬أثبتت‬
‫بيرو‬
‫زات‬
‫الجو‬
‫المو‬
‫العل‬
‫مقاو‬
‫حرار‬
‫الفو‬
‫المخ‬
‫بينما‬
‫بيرو‬
‫زات‬
‫و الب‬
‫القل‬
‫حرار‬
‫أظه‬
‫المس‬
‫ت‬
‫النز‬
‫للجو‬
‫والم‬
‫ثابتة‬
‫للمع‬
‫الحر‬
‫حيث‬
‫لم ي‬
‫لها ت‬
‫كامل‬
‫كل‬
‫الظر‬
‫التى‬
‫اجري‬
‫عنده‬
‫الدر‬
‫بينما‬
‫التثبي‬
‫الكام‬
‫لمس‬
‫تا‬
‫والبر‬
‫لدرج‬
‫حرار‬
‫‪ .‬فق‬
‫بيرو‬
‫ز الت‬
‫تقري‬
‫‪80‬‬
‫نشاط‬
‫دقيق‬
‫من‬
‫المع‬
‫على‬
‫حرار‬
‫‪oC‬‬
‫فقد‬
‫‪(%‬‬
‫نشاط‬
‫نفس‬
‫الزم‬
‫وذلك‬
‫المع‬
‫على‬
‫حرار‬
‫‪º90‬‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى‪0‬‬
‫بينما‬
‫التثبي‬
‫الكام‬
‫للنز‬
‫‪7‬‬
‫من‬
‫المع‬
‫على‬
‫حرار‬
‫‪)80‬‬
‫وبعد‬
‫دقائق‬
‫المع‬
‫على‬
‫‪º90‬‬
‫عند‬
‫االهي‬
‫ى‪0‬‬
‫أن ا‬
‫الكام‬
‫للنز‬
‫يحتا‬
‫‪6‬‬
‫دقائق‬
‫وذلك‬
‫المع‬
‫على‬
‫حرار‬
‫‪C90‬‬
‫على‬
‫درج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى‬
‫المخ‬
‫أما ا‬
‫الكام‬
‫لبيرو‬
‫ز الب‬
‫فقد‬
‫بعد‬
‫دقائق‬
‫المع‬
‫الحر‬
‫على‬
‫‪º80‬‬
‫بينما‬
‫‪5‬‬
‫كافي‬
‫للتثب‬
‫درج‬
‫‪90‬‬
‫هيدر‬
‫‪5.0‬‬
‫وعلى‬
‫درج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى‬
‫الخر‬
‫يحتا‬
‫التثبي‬
‫الكام‬
‫للنز‬
‫‪4‬‬
‫دقائق‬
‫وذلك‬
‫المع‬
‫على‬
‫حرار‬
‫‪90‬‬
‫وجد‬
‫معد‬
‫التثبي‬
‫الحر‬
‫يعتم‬
‫درج‬
‫الحر‬
‫زمن‬
‫المع‬
‫الحر‬
‫ودرج‬
‫الس‬
‫الهيد‬
‫ى‪.‬‬
‫مقاو‬
‫للتثب‬
‫الحر‬
‫للنز‬
‫المس‬
‫ة من‬
‫الرب‬
‫مصا‬
‫وجد‬
‫أس‬
‫هيدر‬
6.0
7.0
‫أقل‬
‫مقاو‬
‫رصد‬
‫كانت‬
‫الس‬
‫الهيد‬
0‫ى‬
‫تاريخ‬ De
2008
‫الدر‬
‫عدد‬ Num
0
‫الصف‬
‫الراب‬
‫ الزراعة‬: ISHS Horticulturae 697 ‫ اكتا‬ISHS Acta Horticulturae 697: International Symposium on Soilless Culture and Hydr
‫راعة بدون تربة الندوة الدولية حول الثقافة‬

PEROXIDASE ENZYME (EC.1.11.1.7) ACTIVITY AS AN INDICATOR


‫( النشاط‬EC.1.11.1.7) ‫ النزيم‬WATER STRESS IN SWEET PEPPER PLA
‫شر على شح المياه في محطات الفلفل الحلو‬

:Authors ‫ كلر عبد‬، ‫ ليما عملية التخطيط المشترك سلفادور الضعف الجنسي‬، ‫ الكبريت‬SO Jadoski, ED Salvador, AE Klar, JPP Lima
: ‫المؤلف‬

:Keywords soil moisture, enzymatic activity, vegetable physiology, Capsicum annuum L., soluble protein, s
: ‫كلمات البحث‬ ‫ تصرف‬، ‫ والبروتينات القابلة للذوبان‬annuum ‫ ةةةةةةةةة لم‬، ‫ الفسيولوجيا النباتية‬، ‫ والنشاط النزيمي‬، ‫ رطوبة التربة‬condu

: ‫ الخلصة‬:A
‫ العمل الذي كان يقدم بها على‬.The present work was carried out at the Faculdade de Ciências Agronômicas – UNESP, Botuc
The purpose of the study was to evaluate the physiological .‫ س‬، Agronômicas Ciências Faculdade -- UNESP ، Botuc
and biochemical behavior of sweet pepper ( Capsicum annuum L.) plants under different soil water availability conditio
the efficiency of the peroxidase (EC. 1.11.1.7) activity as an indicator of water stress in plants. Sweet pepper plan
grown for 230 days after transplanting of seedlings. The experiment was arranged in a completely randomized exper
design with 4 treatments, two irrigation managements (50 and 1500 kPa) and two soil surface managements (pres
absence of black polyethylene covering), and six replications. Physiological activities, such as stomatal transpirat
resistance to water vapor diffusion, were evaluated, as well as biochemical activities, such as peroxidase activity a
soluble protein in foliar tissues. It was observed that soil water availability may lead to physiological and bioch
alterations in plants. Successive water stress cycles may promote the development of characteristics respons
improving the plant tolerance to periods of low water availability. The peroxidase enzyme activity showed to be an e
‫ الغرض من هذه الدراسة كان لتقييم السلوك والبيوكيميائية الفسيولوجية من الفلفل الحلو )ةةةةةةةة‬.indicator of water stress in sweet peppe
‫‪ (ann‬النباتات تحت ظروف مختلفة المياه توفر التربة وكفاءة البيروكسيديز )‪ (EC. 1.11.1.7‬النشاط كمؤشر من الجهاد المائي في والفلفل الحلو النباتات نمت‬
‫‪ 230‬يوما بعد زرع الشتلت‪ .‬تم ترتيب التجربة تماما في التصميم التجريبي والعشوائية مع ‪ 4‬العلجات ‪ ،‬إدارات الري اثنين )‪ 50‬و ‪ 1500‬كيلو باسكال( واثنين من‬
‫طح التربة )وجود أو عدم وجود من البولي ايثيلين السود تغطي( ‪ ،‬وستة مكررات‪ .‬هذا القبيل ‪ ،‬والثغور النتح المقاومة وبخار الماء وونشرها تقييم النشطة‬
‫ة ‪ ،‬فضل عن النشطة البيوكيميائية ‪ ،‬مثل النشاط البيروكسيديز والبروتينات الذائبة في النسجة الورقية‪ .‬وحظ أن الماء كان قد توفر التربة تؤدي إلى تغييرات‬
‫والبيوكيميائية في النباتات‪ .‬المتعاقبة دورات الجهاد المائي قد تعزيز تنمية الخصائص المسؤولة عن تحسين التسامح مصنع لفترات انخفاض توافر المياه ‪ ،‬ونشاط انزيم‬
‫يز أظهرت أن مؤشر كفاءة من الجهاد المائي في النباتات الفلفل الحلو‪.‬‬

‫‪(Full Text (PDF format, 48337 bytes‬‬

‫‪SPABTS02.001 SPABTS02.001‬‬
‫‪ Page 1 of 4‬الصفحة ‪ 1‬من ‪4‬‬
‫‪ Revised: 04/10/96‬مراجعة ‪04/10/96 :‬‬
‫‪ Enzymatic Assay of PEROXIDASE‬النزيمية فحص من البيروكسيديز‬
‫)‪) (EC 1.11.1.7‬الجماعة الوروبية ‪(1.11.1.7‬‬
‫‪Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) 2،2 '- Azino-'2,2‬‬
‫مكرر )حمض ‪ - Ethylbenzthiazoline - 6 - 3‬السلفونيك(‬
‫‪ as a Substrate‬باعتباره الركيزة‬
‫‪ :PRINCIPLE‬البدأ ‪:‬‬
‫‪ H 2 O 2 + ABTS‬ح ‪ 2‬س ‪ABTS + 2‬‬
‫‪ Peroxidase > 2H 2 O + oxidized ABTS‬البيوكسيديز< ‪2H‬‬
‫‪ + 2‬يا تتأكسد ‪ABTS‬‬
‫‪ :Abbreviation used‬استخدم اختصار ‪:‬‬
‫‪ABTS 1 = 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-‬‬
‫‪ 6-Sulfonic ABTS 1 = 2،2 '- Azino‬مكرر ) ‪- 3‬‬
‫‪ - Ethylbenzthiazoline - 6‬السلفونيك‬
‫‪ (Acid‬حض(‬
‫‪CONDITIONS: T = 25 ° C, pH = 5.0, A‬‬ ‫‪405nm‬‬ ‫‪, Light‬‬
‫‪ ،‬ودرجة‬ ‫مئوية‬ ‫‪ path = 1 cm‬الشروط ‪ :‬تي = ‪ 25‬درجة‬
‫‪ ،‬مسار الضوء ‪ 1 = 5.0 ،‬سم‬ ‫‪405nm‬‬ ‫الموضة و=‬
‫‪METHOD: Continuous Spectrophotometric Rate‬‬

‫‪ Determination‬طريقة ‪ :‬مستمر تديد سعر طيفية‬

‫‪ :REAGENTS‬الكواشف ‪:‬‬
‫‪ .A‬أ‪ mM Potassium Phosphate Buffer, pH 5.0 at 25 ° C 100 100 .‬ملي‬
‫فوسفات البوتاسيوم الحتياطي ‪ ،‬ودرجة الحموضة ‪ 5،0‬في ‪ 25‬درجة مئوية‬
‫) ‪) Prepare 100 ml in deionized water using Potassium‬إعداد ‪100‬‬
‫مل من الماء منزوع اليونات باستخدام البوتاسيوم‬
‫‪ .Phosphate, Monobasic, Sigma Prod‬فوسفات أحادى ‪ ،‬سيغما برود‪.‬‬
‫‪ .No. P-5379‬ف رقم ‪ Adjust .- 5379‬ضبط‬
25 ‫ درجة الحموضة في‬5،0 ‫( إلى‬.to pH 5.0 at 25 ° C using 1.0 M KOH
.(‫ متر كوه‬1،0 ‫درجة مئوية باستخدام‬
‫ ملي‬mM 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic 9،1 9.1 .‫ ب‬.B
‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ) ‫ مكرر‬Azino -' 2،2
(ABTS 1 ) ‫ ( حمض( الحل الركيزة‬Acid) Substrate Solution (ABTS 1
‫ مل في‬Prepare 30 ml in Reagent A using 2,2'-Azino-bis (30 )
‫ مكرر‬Azino -' 2،2 ‫إعداد واستخدام الكاشف‬
- 3 ‫ )حمض‬Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid), Tablets -3)
‫ أقراص‬، (‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6
No. .‫ سيغما برود‬، ‫ ملح ثنائي المونيوم‬.Diammonium Salt, Sigma Prod
‫ البيد‬E ‫ آر‬R ‫ أ‬A ‫ ف‬P ‫ البيد‬E ‫ آر‬R ‫ ف‬9941 ‫ رقم ألف‬A-9941. P
(.‫ ( جديدة‬.FRESH
(‫ ث‬/ ‫ )ث‬٪ w/w) Hydrogen Peroxide Solution (H 2 O 2 ) 0،3 ) %0.3 ‫ جيم‬.C
(2 ‫ س‬2 ‫الهيدروجين بيروكسيد حل )ه‬
‫ مل‬50 ‫ )إعداد‬Prepare 50 ml in deionized water using Hydrogen )
‫في الماء منزوع اليونات باستخدام الهيدروجين‬
/ ‫ )ث‬٪ 30 ، ‫ بيروكسيد‬.Peroxide, 30% (w/w) Solution, Sigma Prod
.1009 - ‫ ه رقم‬.No. H-1009 .‫ سيغما برود‬، ‫ث( محلول‬
(.‫( تستعد جديدة‬. PREPARE FRESH
‫ ملم‬mM Potassium Phosphate Buffer with 0.25% (w/v) 40 40 .‫ د‬.D
(‫ ت‬/ ‫ )ث‬٪ 0،25 ‫البوتاسيوم الفوسفات العازلة مع‬
Bovine Serum Albumin and 0.5% (v/v) Triton X-100 2 , pH
‫ ودرجة الحموضة‬، 2 100 ‫ ت( تريتون اكس‬/ ‫ )ت‬٪ 0،5 ‫البقار مصل الزلل و‬
(‫ درجة مئوية )أنزيم مخفف‬25 ‫ في‬at 25 ° C (Enzyme Diluent) 6،8 6.8
100 ‫ )إعداد‬Prepare 100 ml in deionized water using Potassium )
‫مل من الماء منزوع اليونات باستخدام البوتاسيوم‬
.‫ سيغما برود‬، ‫ فوسفات أحادى‬.Phosphate, Monobasic, Sigma Prod
، ‫ والزلل‬، 5379 ‫ ف رقم‬,No. P-5379, Albumin
No. A-4503, Triton X- .‫ سيغما برود‬، ‫ البقري‬.Bovine, Sigma Prod
‫ سيغما‬، 100 - ‫ تريتون العاشر‬، 4503 ‫ ألف رقم‬100, Sigma
Adjust to pH 6.8 at .100 - ‫ الوراق المالية رقم العاشر‬.Stock No. X-100
‫ درجة مئوية‬25 ‫ متر في‬6،8 ‫ لضبط الرقم الهيدروجيني‬25 ° C using 1 M
1 ‫باستخدام‬
.(K0H.) K0H

SPABTS02.001 SPABTS02.001
4 ‫ من‬2 ‫ الصفحة‬Page 2 of 4
04/10/96 : ‫ مراجعة‬Revised: 04/10/96
‫ النزيمية فحص من البيروكسيديز‬Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(1.11.1.7 ‫( )الجماعة الوروبية‬EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) 2،2 '- Azino-'2,2
(‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ‫مكرر )حمض‬
‫ باعتباره الركيزة‬as a Substrate
n ‫ ط‬i ‫ تي‬t ‫ ن‬n ‫ س‬o ‫ ج‬c ) : ‫ ) الكواشف‬:REAGENTS
( ( ‫ د‬d ‫ ه‬e ‫ ش‬u ‫ن‬
‫ البيروكسيديز الحل أنزيم‬Peroxidase Enzyme Solution ‫ هاء‬.E
‫ )إعداد‬Prepare an enzyme stock solution containing 10 mg/ml )
‫ مل‬/ ‫ ملغ‬10 ‫حل السهم النزيم التي تحتوي على‬
Immediately before use, ‫ في دال الكاشف الباردة‬.in cold Reagent D
‫ وإعداد‬، ‫ على الفور قبل استخدامه‬prepare a
‫ محلول‬solution containing 0.20 - 0.80 unit/ml of Peroxidase
‫ مل من البيروكسيد‬/ ‫ وحدة‬0،80 -- 0،20 ‫يحتوي على‬
(‫( في دال الكاشف الباردة‬.in cold Reagent D
: ‫ الجراءات‬:PROCEDURE
Pipette (in milliliters) the following
‫ ماصة )ف مل( والكواشف التالية ف‬reagents into
: cuvettes ‫ مناسبة‬:suitable cuvettes
‫ اختبار‬Test
‫ فارغة‬Blank
(ABTS) ‫( كاشف باء‬Reagent B (ABTS
2.90 2.90
2.90 2.90
(‫( كاشف دال )مفف أنزي‬Reagent D (Enzyme Diluent
------ ------
0.05 0.05
‫( كاشف البيد )ملول‬Reagent E (Enzyme Solution
(‫أنزي‬
0.05 0.05
------ ------
‫ مزيج من انعكاس وتتوازن‬.Mix by inversion and equilibrate to 25 ° C
405nm ‫ رصد و‬Monitor the A 405nm .‫ درجة مئوية‬25 ‫إلى‬

‫ وذلك‬، ‫ حتى مستمر‬until constant, using a suitably thermostatted


‫ مناسب‬thermostatted ‫باستخدام‬
: ‫ ثم يضيف‬:Then add .‫ معمل‬.spectrophotometer
(2 ‫ س‬2 ‫ ( كاشف جيم )ح‬Reagent C (H 2 O 2
0.10 0.10
0.10 0.10
Immediately mix by inversion and record the
‫ مزيج من انعكاس على الفور وتسجيل‬increase in
‫زيادة ف‬
‫ لدة‬405nm ‫ و‬A 405nm for approximately 2 minutes. 3
3 .‫ تقريبا‬2
‫ الصول على‬Obtain the
r A 405nm /minute using the maximum linear
‫ دقيقة‬/ 405nm ‫أ‬ ‫صلللللللللللللللل‬ rate for both the
‫باستخدام خطي معدل الد القصى لكل من‬
.‫ اختبار وفارغ‬.Test and Blank
: ‫ السابات‬:CALCULATIONS
r A 405nm /min Test - r A 405nm /min Blank)(3.05) )

/ 405nm ‫ ص ألف‬-- ‫ اختبار دقيقة‬/ 405nm ‫(( )ص أ‬df


(‫( )مدافع‬3.05 ) (‫دقيقة فارغة‬
= ‫ مل انزي‬/ ‫ = وحدة‬Units/ml enzyme
(0،05 ) (36،8) (0.05 ) (36.8 )
‫ الحجم الكلي )في‬Total volume (in milliliters) of assay = 3،05 = 3.05
‫مل( من فحص‬
= ‫ عامل مدافع التخفيف‬df = Dilution factor
‫ النقراض‬Millimolar extinction coefficient of oxidized 36،8 = 36.8
‫ = معامل أكسدة‬Millimolar
405nm ‫ ف‬ABTS at 405nm ABTS
Volume (in milliliter) of enzyme used = = 0.05
‫ الجم )ف اللليمت الواحد( من استخدام انزي‬0،05
‫ مل انزي‬/ ‫ وحدة‬units/ml enzyme
= ‫ ملغ الصلبة‬/ ‫ = وحدة‬Units/mg solid
‫ مل‬/ ‫ ملغ انزي الصلبة‬mg solid/ml enzyme

SPABTS02.001 SPABTS02.001
4 ‫ من‬3 ‫ الصفحة‬Page 3 of 4
04/10/96 : ‫ مراجعة‬Revised: 04/10/96
‫ النزيمية فحص من البيروكسيديز‬Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(1.11.1.7 ‫( )الجماعة الوروبية‬EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid 2،2 '- Azino-'2,2
‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ‫مكرر )حمض‬
‫ باعتباره الركيزة‬as a Substrate
i ‫ تي‬t ‫ ن‬n ‫ س‬o ‫ ج‬c ) : ‫ ) السابات‬:CALCULATIONS
( ( ‫ د‬d ‫ ه‬e ‫ ش‬u ‫ ن‬n ‫ط‬
‫ مل انزي‬/ ‫ وحدة‬units/ml enzyme
= ‫ ملغ من البوتي‬/ ‫ = وحدة‬Units/mg protein
‫ ملغ انزي‬/ ‫ ملغ من البوتي‬mg protein/mg enzyme
: ‫ وحدة تعريف‬:UNIT DEFINITION
‫ وحدة واحدة أكسدة‬One unit will oxidize 1.0 µmole of 2,2'-azino-bis
azino ‫ مكررا‬،' 2،2 ‫ من‬μmole 1،0
- 3 ‫ )حمض‬ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) per minute at -3)
‫ السلفونيك( للدقيقة الواحدة في‬- ethylbenzthiazoline - 6
.‫ درجة مئوية‬25 ‫ في‬5،0 ‫ الرقم الهيدروجيني‬.pH 5.0 at 25 ° C
‫ تركيزات الفحص‬:FINAL ASSAY CONCENTRATIONS
: ‫النهائي‬
‫ في مزيج‬In a 3.05 ml reaction mix, the final concentrations are
‫ تركيزات النهائية‬، ‫ رد فعل مل‬3،05
mM potassium phosphate, 8.7 mM 2,2'-azino-bis(3- 96 96
-- 3 ) ‫ مكرر‬azino -' 2،2 ‫ ملي‬8،7 ، ‫فوسفات البوتاسيوم ملي‬
ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid), 0.01% (w/w) hydrogen
‫ ث( الهيدروجين‬/ ‫ )ث‬٪ 0.01 ، (‫ حمض السلفونيك‬- ethylbenzthiazoline - 6
(peroxide, 0.004% (w/v) bovine serum albumin, 0.008% (v/v
(‫ ت‬/ ‫ )ت‬٪ 0،008 ، ‫ ت( البقار مصل الزلل‬/ ‫ )ث‬٪ 0،004 ، ‫بيروكسيد‬
100 - ‫ تريتون العاشر‬.Triton X-100 and 0.01 - 0.04 unit peroxidase
.‫ البيروكسيديز وحدة‬0،04 ‫ حتي‬0،01 ‫و‬
: ‫ الهتمام‬:REFERENCE
Keesey, J. (1987) in Biochemica Information,
، Biochemica ‫( ف العلومات‬1987) ‫ جيه‬، pp. Keesey
‫ الول‬، First 58 ,58 .‫ص‬
Edition, Boehringer Mannheim Biochemicals,
‫ طبعة والواد الكيميائية اليوية‬,Indianapolis
، ‫ماناي إنلهاي انديانابوليس‬
‫ ف‬IN
Pütter, J. and Becker, R. (1983) in Methods of
‫( ف طرق‬1983 ) ‫ ر‬، ‫ وجيه بيكر‬، ‫ تسكع‬Enzymatic
‫النزيية‬
Analysis (Bergmeyer, HU, ed.) 3rd ed., Vol
‫ تليل الطبعه‬3 (.‫ إد‬، ‫ هو جي تاو‬، III, (Bergmeyer
، ‫ اللد الثالث‬،
pp. 286-293, Verlug Chemie, Deerfield Beach,
، ‫ ديرفيلد بيتش‬، ‫ كيمي‬Verlug ، 293 -286 ‫ ص‬FL
‫فلوريدا‬
: ‫ ملحظات‬:NOTES
ABTS is a registered trademark of .1 .1
‫ هي علمة تارية مسجلة‬Boehringer Mannheim ABTS
‫لاناي بورنغي‬
.‫ شركة مدودة‬.GmbH
Triton is a registered trademark of the .2 .2
‫ تريتون هي علمة تارية مسجلة للروم‬Rohm & Haas
‫اند هاس‬
‫ شركة‬.Co
The maximum linear rate occurs within .3 .3
‫ أقصى معدل خطي يدث ف الدقيقة‬the first minute
‫الول‬
.‫ للتفاعل‬.of the reaction
The millimolar extinction coefficient is .4 .4
‫ ف معامل‬millimolar ‫ ويستشهد النقراض‬cited in
.(1987 ) ‫ جيه‬، Keesey, J. (1987). Keesey
This assay is based on the cited .5 .5
‫ ويستند هذا الفحص على الراجع الشار‬.references
.‫إليها‬
SPABTS02.001
Page 4 of 4
Revised: 04/10/96
Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid-'2,2
as a Substrate
( NOTES:( c o n t i n u e d
Where Sigma Product or Stock numbers are .6
,specified
.equivalent reagents may be substituted
This procedure is for informational purposes. For a
current copy of Sigma’s quality control
.procedure contact our Technical Service Department

SPABTS02.001 SPABTS02.001
4 ‫ من‬1 ‫ الصفحة‬Page 1 of 4
04/10/96 : ‫ مراجعة‬Revised: 04/10/96
‫ النزيمية فحص من البيروكسيديز‬Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(1.11.1.7 ‫( )الجماعة الوروبية‬EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) 2،2 '- Azino-'2,2
(‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ‫مكرر )حمض‬
‫ باعتباره الركيزة‬as a Substrate
: ‫ المبدأ‬:PRINCIPLE
ABTS + 2 ‫ س‬2 ‫ ح‬H 2 O 2 + ABTS
‫ يا‬+ 2H 2 <‫ البيروكسيديز‬Peroxidase > 2H 2 O + oxidized ABTS
ABTS ‫تتأكسد‬
: ‫ استخدم اختصار‬:Abbreviation used
ABTS 1 = 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-
- 3 ) ‫ مكرر‬Sulfonic ABTS 1 = 2،2 '- Azino
‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6
(‫( حمض‬Acid
CONDITIONS: T = 25 ° C, pH = 5.0, A 405nm , Light path

‫ مسار‬، 405nm =‫ ودرجة الحموضة و‬، ‫ درجة مئوية‬25 = ‫ تي‬: ‫ = الشروط‬1 cm

‫ سم‬1 = 5.0 ، ‫الضوء‬


METHOD: Continuous Spectrophotometric Rate

‫ مستمر تحديد سعر طيفية‬: ‫ طريقة‬Determination


: ‫ الكواشف‬:REAGENTS
‫ ملي‬mM Potassium Phosphate Buffer, pH 5.0 at 25 ° C 100 100 .‫ أ‬.A
‫ درجة مئوية‬25 ‫ في‬5،0 ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫فوسفات البوتاسيوم الحتياطي‬
100 ‫ )إعداد‬Prepare 100 ml in deionized water using Potassium )
‫مل من الماء منزوع اليونات باستخدام البوتاسيوم‬
.‫ سيغما برود‬، ‫ فوسفات أحادى‬.Phosphate, Monobasic, Sigma Prod
‫ ضبط‬Adjust .- 5379 ‫ ف رقم‬.No. P-5379
25 ‫ درجة الحموضة في‬5،0 ‫( إلى‬.to pH 5.0 at 25 ° C using 1.0 M KOH
.(‫ متر كوه‬1،0 ‫درجة مئوية باستخدام‬
‫ ملي‬mM 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic 9،1 9.1 .‫ ب‬.B
‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ) ‫ مكرر‬Azino -' 2،2
(ABTS 1 ) ‫ ( حمض( الحل الركيزة‬Acid) Substrate Solution (ABTS 1
‫ مل في‬Prepare 30 ml in Reagent A using 2,2'-Azino-bis (30 )
‫ مكرر‬Azino -' 2،2 ‫إعداد واستخدام الكاشف‬
- 3 ‫ )حمض‬Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid), Tablets -3)
‫ أقراص‬، (‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6
No. .‫ سيغما برود‬، ‫ ملح ثنائي المونيوم‬.Diammonium Salt, Sigma Prod
‫ البريد‬E ‫ آر‬R ‫ أ‬A ‫ ف‬P ‫ البريد‬E ‫ آر‬R ‫ ف‬9941 ‫ رقم ألف‬A-9941. P
(.‫ ( جديدة‬.FRESH
(‫ ث‬/ ‫ )ث‬٪ w/w) Hydrogen Peroxide Solution (H 2 O 2 ) 0،3 ) %0.3 ‫ جيم‬.C
(2 ‫ س‬2 ‫الهيدروجين بيروكسيد حل )ه‬
‫ مل‬50 ‫ )إعداد‬Prepare 50 ml in deionized water using Hydrogen )
‫في الماء منزوع اليونات باستخدام الهيدروجين‬
/ ‫ )ث‬٪ 30 ، ‫ بيروكسيد‬.Peroxide, 30% (w/w) Solution, Sigma Prod
.1009 - ‫ ه رقم‬.No. H-1009 .‫ سيغما برود‬، ‫ث( محلول‬
(.‫( تستعد جديدة‬. PREPARE FRESH
‫ ملم‬mM Potassium Phosphate Buffer with 0.25% (w/v) 40 40 .‫ د‬.D
(‫ ت‬/ ‫ )ث‬٪ 0،25 ‫البوتاسيوم الفوسفات العازلة مع‬
Bovine Serum Albumin and 0.5% (v/v) Triton X-100 2 , pH
‫ ودرجة الحموضة‬، 2 100 ‫ ت( تريتون اكس‬/ ‫ )ت‬٪ 0،5 ‫البقار مصل الزلل و‬
(‫ درجة مئوية )أنزيم مخفف‬25 ‫ في‬at 25 ° C (Enzyme Diluent) 6،8 6.8
100 ‫ )إعداد‬Prepare 100 ml in deionized water using Potassium )
‫مل من الماء منزوع اليونات باستخدام البوتاسيوم‬
.‫ سيغما برود‬، ‫ فوسفات أحادى‬.Phosphate, Monobasic, Sigma Prod
، ‫ والزلل‬، 5379 ‫ ف رقم‬,No. P-5379, Albumin
No. A-4503, Triton X- .‫ سيغما برود‬، ‫ البقري‬.Bovine, Sigma Prod
‫ سيغما‬، 100 - ‫ تريتون العاشر‬، 4503 ‫ ألف رقم‬100, Sigma
Adjust to pH 6.8 at .100 - ‫ الوراق المالية رقم العاشر‬.Stock No. X-100
‫ درجة مئوية‬25 ‫ متر في‬6،8 ‫ لضبط الرقم الهيدروجيني‬25 ° C using 1 M
1 ‫باستخدام‬
.(K0H.) K0H

SPABTS02.001 SPABTS02.001
4 ‫ من‬2 ‫ الصفحة‬Page 2 of 4
04/10/96 : ‫ مراجعة‬Revised: 04/10/96
‫ النزيمية فحص من البيروكسيديز‬Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(1.11.1.7 ‫( )الجماعة الوروبية‬EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) 2،2 '- Azino-'2,2
(‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ‫مكرر )حمض‬
‫ باعتباره الركيزة‬as a Substrate
( ( ‫ د‬d ‫ ه‬e ‫ ش‬u ‫ ن‬n ‫ ط‬i ‫ تي‬t ‫ ن‬n ‫ س‬o ‫ ج‬c ) : ‫ ) الكواشف‬:REAGENTS
‫ البيروكسيديز الحل أنزيم‬Peroxidase Enzyme Solution ‫ هاء‬.E
‫ )إعداد‬Prepare an enzyme stock solution containing 10 mg/ml )
‫ مل‬/ ‫ ملغ‬10 ‫حل السهم النزيم التي تحتوي على‬
Immediately before use, ‫ في دال الكاشف الباردة‬.in cold Reagent D
‫ وإعداد‬، ‫ على الفور قبل استخدامه‬prepare a
‫ محلول‬solution containing 0.20 - 0.80 unit/ml of Peroxidase
‫ مل من البيروكسيد‬/ ‫ وحدة‬0،80 -- 0،20 ‫يحتوي على‬
(‫( في دال الكاشف الباردة‬.in cold Reagent D
: ‫ الجراءات‬:PROCEDURE
‫ ماصة‬Pipette (in milliliters) the following reagents into
‫)في مل( والكواشف التالية في‬
: cuvettes ‫ مناسبة‬:suitable cuvettes
‫ اختبار‬Test
‫ فارغة‬Blank
(ABTS ) ‫( كاشف باء‬Reagent B (ABTS
2.90 2.90
2.90 2.90
(‫( كاشف دال )مخفف أنزيم‬Reagent D (Enzyme Diluent
------ ------
0.05 0.05
(‫( كاشف البريد )محلول أنزيم‬Reagent E (Enzyme Solution
0.05 0.05
------ ------
‫ مزيج من انعكاس وتتوازن‬.Mix by inversion and equilibrate to 25 ° C
405nm ‫ رصد و‬Monitor the A 405nm .‫ درجة مئوية‬25 ‫إلى‬

‫ وذلك‬، ‫ حتى مستمر‬until constant, using a suitably thermostatted


‫ مناسب‬thermostatted ‫باستخدام‬
: ‫ ثم يضيف‬:Then add .‫ معمل‬.spectrophotometer
(2 ‫ س‬2 ‫ ( كاشف جيم )ح‬Reagent C (H 2 O 2
0.10 0.10
0.10 0.10
Immediately mix by inversion and record the increase
‫ مزيج من انعكاس على الفور وتسجيل زيادة في‬in
3 .‫ تقريبا‬2 ‫ لمدة‬405nm ‫ و‬A 405nm for approximately 2 minutes. 3
‫ الحصول على‬Obtain the
r A 405nm /minute using the maximum linear rate
‫ دقيقة باستخدام خطي معدل الحد القصى‬/ 405nm ‫أ‬ ‫صلللللللللللللللل‬ for both the
‫لكل من‬
.‫ اختبار وفارغ‬.Test and Blank
: ‫ الحسابات‬:CALCULATIONS
405 ‫( )ص أ‬r A 405nm /min Test - r A 405nm /min Blank)(3.05)(df )
(‫( )مدافع‬3.05 ) (‫ دقيقة فارغة‬/ 405nm ‫ ص ألف‬-- ‫ اختبار دقيقة‬/ nm
= ‫ مل انزيم‬/ ‫ = وحدة‬Units/ml enzyme
(0،05 ) (36،8 ) (0.05 ) (36.8)
‫ الحجم الكلي )في‬Total volume (in milliliters) of assay = 3،05 = 3.05
‫مل( من فحص‬
= ‫ عامل مدافع التخفيف‬df = Dilution factor
‫ النقراض‬Millimolar extinction coefficient of oxidized 36،8 = 36.8
‫ = معامل أكسدة‬Millimolar
405nm ‫ في‬ABTS at 405nm ABTS
‫ الحجم‬Volume (in milliliter) of enzyme used = 0،05 = 0.05
‫)في الملليمتر الواحد( من استخدام انزيم‬
‫ مل انزيم‬/ ‫ وحدة‬units/ml enzyme
= ‫ ملغ الصلبة‬/ ‫ = وحدة‬Units/mg solid
‫ مل‬/ ‫ ملغ انزيم الصلبة‬mg solid/ml enzyme

SPABTS02.001 SPABTS02.001
4 ‫ من‬3 ‫ الصفحة‬Page 3 of 4
04/10/96 : ‫ مراجعة‬Revised: 04/10/96
‫ النزيمية فحص من البيروكسيديز‬Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(1.11.1.7 ‫( )الجماعة الوروبية‬EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid 2،2 '- Azino-'2,2
‫ السلفونيك‬- Ethylbenzthiazoline - 6 - 3 ‫مكرر )حمض‬
‫ باعتباره الركيزة‬as a Substrate
d ‫ ه‬e ‫ ش‬u ‫ ن‬n ‫ ط‬i ‫ تي‬t ‫ ن‬n ‫ س‬o ‫ ج‬c ) : ‫ ) الحسابات‬:CALCULATIONS
((‫د‬
‫ مل انزيم‬/ ‫ وحدة‬units/ml enzyme
= ‫ ملغ من البروتين‬/ ‫ = وحدة‬Units/mg protein
‫ ملغ انزيم‬/ ‫ ملغ من البروتين‬mg protein/mg enzyme
: ‫ وحدة تعريف‬:UNIT DEFINITION
‫ وحدة واحدة أكسدة‬One unit will oxidize 1.0 µmole of 2,2'-azino-bis
azino ‫ مكررا‬،' 2،2 ‫ من‬μmole 1،0
- 3 ‫ )حمض‬ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) per minute at -3)
‫ السلفونيك( للدقيقة الواحدة في‬- ethylbenzthiazoline - 6
.‫ درجة مئوية‬25 ‫ في‬5،0 ‫ الرقم الهيدروجيني‬.pH 5.0 at 25 ° C
: ‫ تركيزات الفحص النهائي‬:FINAL ASSAY CONCENTRATIONS
‫ في مزيج‬In a 3.05 ml reaction mix, the final concentrations are
‫ تركيزات النهائية‬، ‫ رد فعل مل‬3،05
mM potassium phosphate, 8.7 mM 2,2'-azino-bis(3- 96 96
-- 3 ) ‫ مكرر‬azino -' 2،2 ‫ ملي‬8،7 ، ‫فوسفات البوتاسيوم ملي‬
ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid), 0.01% (w/w) hydrogen
‫ ث( الهيدروجين‬/ ‫ )ث‬٪ 0.01 ، (‫ حمض السلفونيك‬- ethylbenzthiazoline - 6
(peroxide, 0.004% (w/v) bovine serum albumin, 0.008% (v/v
(‫ ت‬/ ‫ )ت‬٪ 0،008 ، ‫ ت( البقار مصل الزلل‬/ ‫ )ث‬٪ 0،004 ، ‫بيروكسيد‬
100 - ‫ تريتون العاشر‬.Triton X-100 and 0.01 - 0.04 unit peroxidase
.‫ البيروكسيديز وحدة‬0،04 ‫ حتي‬0،01 ‫و‬
: ‫ الهتمام‬:REFERENCE
Keesey, J. (1987) in Biochemica Information, pp. Keesey
‫ الولى‬، First 58 ,58 .‫ ص‬، Biochemica ‫( في المعلومات‬1987 ) ‫ جيه‬،
Edition, Boehringer Mannheim Biochemicals,
، ‫ طبعة والمواد الكيميائية الحيوية مانهايم إنجلهايم انديانابوليس‬,Indianapolis
‫ في‬IN
Pütter, J. and Becker, R. (1983) in Methods of
‫( في طرق النزيمية‬1983 ) ‫ ر‬، ‫ وجيه بيكر‬، ‫ تسكع‬Enzymatic
Analysis (Bergmeyer, HU, ed.) 3rd ed., Vol III, (Bergmeyer
، ‫ المجلد الثالث‬، ‫ تحليل الطبعه‬3 (.‫ إد‬، ‫ هو جين تاو‬،
‫ ص‬pp. 286-293, Verlug Chemie, Deerfield Beach, FL
‫ فلوريدا‬، ‫ ديرفيلد بيتش‬، ‫ كيمي‬Verlug ، 293 -286
: ‫ ملحظات‬:NOTES
ABTS is a registered trademark of Boehringer .1 .1
‫ هي علمة تجارية مسجلة لمانهايم بورنغير‬Mannheim ABTS
.‫ شركة محدودة‬.GmbH
Triton is a registered trademark of the Rohm & .2 .2
‫ تريتون هي علمة تجارية مسجلة للروم اند هاس‬Haas
‫ شركة‬.Co
The maximum linear rate occurs within the first .3 .3
‫ أقصى معدل خطي يحدث في الدقيقة الولى‬minute
.‫ للتفاعل‬.of the reaction
The millimolar extinction coefficient is cited in .4 .4
‫ في معامل‬millimolar ‫ويستشهد النقراض‬
.(1987 ) ‫ جيه‬، Keesey, J. (1987). Keesey
‫ ويستند هذا‬.This assay is based on the cited references .5 .5
.‫الفحص على المراجع المشار إليها‬

: ‫أ – باللغة العربية‬
(‫دور بعض الفطريات في التحلل والمعالجه الحيائية للمواد المتفجرة )ت ن ت( و )ر د اكس‬
(TNT (2,4,6-trinitrotoluene), and RDX (hexahydro-1,3,5-trinitro-1,3,5-triazine
: ‫ب – باللغة النجليزية‬
Role of some Fungi in the bioremediation and degradation of the
explosives TNT (2,4,6-trinitrotoluene), and RDX (hexahydro-
.(1,3,5-trinitro-1,3,5-triazine
‫موضوع البحث‬

‫يعتبر تلوث التربة والمياه بالمواد المتفجرة مثل‪-:‬‬


‫‪TNT (2,4,6-trinitrotoluene), RDX (hexahydro-1,3,5-trinitro-1,3,5-‬‬
‫‪ .(triazine‬والتي تتكون كمخلفات من السلحة والصناعات الدفاعية أحد المشكلت البيئية العالمية‪ .‬ويقدر‬
‫إنتاج ‪ TNT‬لوحده في العالم بحوالي ‪ 2‬مليون رطل سنويا" ]‪ .[10‬ويهدد النسان من خلل السلسلة‬
‫الغذائية‪ .‬وهذه المواد مولدة للطفرات وسامة وتميل إلى البقاء في بيئة الماكن التي تنتج أو يتم تداولها‬
‫فيها ‪ ,‬ومعظم المركبات المتفجرة توجد في التربة والترسبات والمياه السطحية أو الجوفية في المواقع‬
‫العسكرية ] ‪.[1‬‬
‫وتستخدم تلك المواد المتفجرة بشكل واسع وأساسي في صناعة السلحة التقليدية واستكشاف النفط ومحركات الصواريخ وغيرها من المنتجات‬
‫العسكرية ‪ .‬وهي بالتالي تتسبب في تلويث التربة )وبالتالي المياه الجوفية( والمياه مباشرة" من خلل عمليات التصنيع والمناورات الحية‪ ,‬وقد‬
‫عرف عن هذه المواد أنها تسبب تلف في الكبد وفقر دم في النسان ‪ ,‬إضافة" إلى التأثيرات العصبية التي قد تؤدي إلى تشنجات ‪ ,‬كذلك فهي‬
‫ضاّره للجرذان والفئران والسماك والحياة البحرية ‪ ,‬كما إنها تثبط نمو العديد من الفطريات والخمائر والبكتيريا الموجبة لجرام‪ .‬وقد ذكر أن‬
‫التعرض لمادة ‪ TNT‬يسبب في النسجة المنتجة للدم ‪ pancytopenia‬أي نقص ذاتي في كل من خليا‬
‫الدم البيضاء والحمراء في النسان والثدييات ]‪.[9‬‬
‫ولقد كان الحرق والتحول إلى رماد الوسيلة الوحيدة المتاحة لمعالجة التربة الملوثة بالمركبات سريعة‬
‫النفجار ‪ ,‬إل انها مكلفة حتى لو أجريت على مواقع محددة‪.‬‬
‫وقد تم تطوير ودراسة التحلل الحيوي لتقليل تركيز هذه الملوثات والتخلص منها فمثل في الوليات‬
‫المتحدة في نشاط تموين الجيش في أماتيل قرب هيرميستون تم تنظيف حوالي ‪ 5000‬ياردة مكعبة من‬
‫التربة باستخدام طريقة التحلل الحيوي بنجاح وحوالي ‪٪ 70‬من التحاليل أظهرت تراكيز ل يمكن‬
‫اعتبارها من المادتين ‪ TNT, RDX‬وقدر أنه تم توفير أكثر من ‪ 2.6‬مليون دولر باستخدام التحلل‬
‫الحيوي ]‪. [8‬‬
‫وتم تقييم بعض المواد العضوية النيتروجينية )المركب الساسي في المتفجرات( على أنها من المواد‬
‫السامة جدا" والمسببة للسرطان ‪ ,‬ويتعرض النسان لهذه المواد من خلل التعامل معها في المصانع‬
‫أو من خلل التلوث البيئي في المناطق العسكرية أو مناطق التدريب والمناورات ]‪.[2,1‬‬
‫وتشير البحوث الى أن فطرة العفن البيض ‪ Phanerochaete chrysosporium‬تعتبر من أنجح‬
‫الكائنات الحية الدقيقة المستخدمة في التحول الميكروبي لهذه المواد السامة حيث لها القدرة على معدنة‬
‫‪ (TNT (67%), RDX (50%‬في فترة ‪ 30‬يوما"من التحضين في البيئات السائلة المحتوية على‬
‫تراكيز ضئيلة من هذه المواد وغيرها من المواد المتفجرة وتحويلها حيويا" إلى مشتقات أقل سمية أو‬
‫غير سامة‪.‬‬
‫وتجدر الشارة الى أن الفطر ‪ P. chrysosporium‬هو من الفطريات البازيدية وقد وصف من قبل‬
‫]‪ [7‬كفطر قادر على تحليل قطع الخشب‪ ,‬وهذا الفطر يمتلك نظام أنزيمي محلل لمادة اللجنين حيث‬
‫يسبب الصدأ البيض للخشب‪ ,‬ويتميز بتحليله لمادة اللجنين مع عدم تأثيره على مادة السليلوز ‪,‬‬
‫إضافة" إلى أن درجة حرارته المثلى مرتفعة ) حوالي ‪˚40‬مئوية (‪.‬‬
‫كما تؤكد الدراسات الحديثة أن الخطوات المبدئية في التحولت اليضية للمركبات التي يفرزها الفطر‬
‫في الظروف الهوائية واللهوائية هو تحويل مجاميع النيترو إلى المجاميع المينية ‪ ,‬وأن اختزال هذه‬
‫المجاميع يبدأ بالمجموعة ‪ -para-nitro‬ويمكن أن يحدث الختزال في وجود الخليا البكتيرية أو‬
‫الفطرية ‪ ,‬بينما الخطوة التالية تبدأ باختزال المجاميع ‪ -ortho‬مما ينتج عنه‬
‫‪ , diaminonitrotoluene isomers‬أما اختزال مجموعة النيترو الثالثة فانه ل يحدث إل في‬
‫الظروف اللهوائية الحتمية ]‪.[13,19‬‬
‫ونظرا" لما تسببه هذه المركبات المتفجرة والسامة من تلوث للتربة والمياه السطحية والجوفية فانه‬
‫يلزم استخدام بعض الفطريات الخيطية المعزولة من ترب المملكة المختلفة ودراسة مدى كفاءتها في‬
‫التحولت الحيوية مقارنة مع فطر ‪ P. chrysosporium‬إضافة" إلى إمكانية عزل بعض الفطريات‬
‫من التربة من مواقع عسكرية يتم تداول هذه المواد فيها ‪ ,‬وسوف يتم في هذه الدراسة أيضا" تحليل‬
‫نواتج التحلل الحيوي لمادتي ‪ TNT and RDX‬باستخدام قياس النشاط الشعاعي في السوائل‬
‫باستخدام الكربون المشع ‪. C 14‬‬

‫الدراسات السابقة‬

‫يعد ]‪ [14‬أول من قدم نظرة عامه عن أدبيات التحولت البيولوجية لمادة ‪ TNT‬وغيرها من المركبات‬
‫النيتروعطرية كمصدر خطر فّعال‪ .‬وفي دراسة عن تأثير هذه المركبات سريعة النفجار على البيئة ‪,‬‬
‫استخدم ]‪ [5,6‬النباتات المائية ونباتات الراضي المبتلة ومعاملتها بالمياه الجوفية الملوثة بمادتي‬
‫‪ TNT and RDX‬كما أستخدمت المادتان معمليا" بصورة مشّعة لمعرفة كمية المادة المستهلكة‬
‫وتمثيلها ‪ ,‬وقد أثبتت الدراسة أن امتصاص المادتين كان عاليا" في أنواع النباتات المغمورة بالماء عنه‬
‫في النواع البارزة فوق سطح الماء‪ .‬كما أكدت الدراسة إن امتصاص مادة ‪ RDX‬بواسطة النباتات‬
‫كان بطيئا" مقارنة بمادة ‪ TNT‬وأن تحوله الحيوي في جميع النباتات المعاملة تم الكشف عنه بعد‬
‫ثلثة عشر يوما" من التحضين‪ .‬وفي بحث آخر أشار ]‪ [6‬إلى العتبارات الهاّمة في استخدام النباتات‬
‫المائية ونباتات الراضي المبتلة بهدف التخلص من تلوث المياه بالمواد المتفجرة‪ .‬ومن النتائج‬
‫المتوافرة عن تواجد ونقل وتحول وسمية ثمانية مركبات نيتروعطرية )‪ (nitroaromatic‬ونواتج‬
‫تحللها التي تمثل )‪(TNT, TNB, DNB, DNA, 2ADNT, RDX, HMX and tetryl‬‬
‫أمكن استعمال هذه النتائج للتعريف بمدى تأثير المركبات العطرية على الوساط البيئية ]‪ . [17‬كما‬
‫بينت نتائج الدراسة أن بعض هذه المركبات الكيميائية وجدت في التربة وترسباتها وفي المياه‬
‫صة في المواقع العسكرية ‪ ,‬كما دلت على أن امتصاص التربة لهذه المركبات‬ ‫السطحية والجوفية وخا ّ‬
‫الكيميائية كان متوسطا" ولربما كان بسبب تسربها إلى المياه الجوفية وأن معظم هذه المركبات تتحول‬
‫بواسطة آليات حيوية وأخرى غير حيوية في الوساط البيئية ‪ ,‬كما إن ميكانيكية أو آلية التحول المبدئي‬
‫لهذه المركبات تشمل التحليل الضوئي والتحليل المائي والتحليل الميكروبي‪ .‬وأن التحليل الميكروبي‬
‫لهذه المركبات العطرية يتمثل في الختزال السريع لمجاميع النيترو إلى المجاميع المينية ‪ ,‬أما ما يتبع‬
‫بعد ذلك من تمثيل أيضي فسوف يكون بطيء جدا"‪ .‬كما أوضحت الدراسة تأثير هذه المركبات على‬
‫حياة بعض الثدييات المدروسة في المعمل ]‪.[17‬‬
‫وأشارت دراسة لوزارة الدفاع المريكية إلى وجود أكثر من ‪ 21000‬موقع ملوث بحاجة إلى معالجة‬
‫عاجلة وذلك باستخدام عدد من التقنيات المختلفة وتوجد في هذه المواقع مركبات متفجرة )‪TNT,‬‬
‫‪ , (RDX, and HMX‬ومذيبات كلورونية )‪ (PCE, TCE, and TCA‬ومركبات‬
‫هيدروكربونية عطرية ‪ benzo-a-pyrene‬وثنائية الفينيلت ‪ .[aroclors [16‬وفي هذه الدراسة‬
‫أمكن استخدام الكربون النشط كأحد التقنيات للتخلص من هذه الملوثات ‪ ,‬إل إن المعالجة الحيوية كانت‬
‫البديل الناجح والقل تكلفة على الرغم من وجود بعض القصور في تطبيقاتها‪ .‬وفي محاولة لتطوير‬
‫تقنية المعالجة الحيوية ونقلها من مستوى التجارب المعملية إلى التطبيق الميداني الشامل ‪full-scale‬‬
‫‪ design‬ركز الكثير من المختصين على تفهم هذه الظاهرة عن طريق المتابعة والملحظة المستمرة‬
‫أو مفهوم الملحظات القياسية‪.‬‬
‫يتعرض النسان لمادة ‪ TNT‬إما عن طريق الجلد أو الستنشاق مما ينتج عنه تفاعل هذه المادة مع‬
‫هيموجلوبين الدم مسببة" التسمم الخلوي ‪ cytotoxic‬أو التسمم الجيني ‪ genotoxic‬عبر تفاعلها مع‬
‫الحمض النووي ‪ DNA‬وبروتينات الخلية ]‪ .[3‬ونظرا" للسمية العالية لهذه المركبات العطرية‬
‫النيترية ‪ ,‬كشف ]‪ [2‬عن وجود اثنا عشر مركبا" في عينات البول من أشخاص لهم اتصال مباشر‬
‫بالمواد سريعة النفجار وأنها مولدة للسرطان‪.‬‬
‫كما درس ]‪ [4‬النواتج المتحولة حيويا" لمادة ‪ TNT‬ونواتج اليض على خليا الثدييات في المزارع‬
‫المعملية وأظهر أن لها تأثيرات سامة‪ .‬وللنزيمات التي تفرزها الفطريات دور هام في تحويل ومعدنة‬
‫مادة ‪ TNT‬حيث أثبتت الدراسة التي قام بها ]‪ [18‬هذا الدور لنزيم البيروكسيديز )‪(MnP‬لفطرة‬
‫العفن البيض ‪ Phlebia radiata‬وهي من الفطريات البازيدية ‪ ,‬كما أشارت الدراسة إلى اعتبار هذه‬
‫الفطرة كمؤشر جيد للتحويلت الحيوية لهذه المادة المتفجرة‪.‬‬
‫ودرس ]‪ [10‬التحول الحيوي لمادة ‪ TNT‬بواسطة الفطرة مع حمض السيتريك و ‪ molasses‬عند‬
‫درجة حموضة ‪ 4.5‬حيث ذكروا اختفاء المادة تماما" في أقل من أسبوعين ولكن المعدنة لم تتجاوز‬
‫‪ .٪1‬في حين أن ]‪ [12‬أوضحوا أن استخدام مادة ‪ Tween 80‬في المزارع السائلة للفطرة بوجود‬
‫مادة ‪ TNT‬أدى إلى أعلى معدل معدنة ) حوالي ضعف الكونترول (‪.‬‬
‫وصدرت تقارير من وكالة حماية البيئة في الوليات المتحدة المريكية ]‪ [11‬في عام ‪1999‬م بصدد تطوير كاشف شدة‬
‫التيار الكهربي للفصل اللوني في السوائل باستخدام الختزال الكيميائي الكهربائي الذي أدى إلى رفع‬
‫حساسية الجهاز إلى عشرة أضعاف وذلك عند الكشف عن التحولت الحيوية لمادتي ‪TNT and‬‬
‫‪ RDX‬في مستخلصات التربة أو في المياه الجوفية وفيه تم استخدام الكترود من فضة بدل" من‬
‫الكربون وبهذا أمكن فصل أحد عشر مركبا" من ‪ TNT‬في مدة ‪ 15‬دقيقة‪.‬‬

‫أهداف البحث‬

‫تعتبر الفطريات الخيطيه المسببة للعفن البيض والمحللة لمادة اللجنين من أهم الكائنات المحللة في الطبيعة وسوف يتم في هذه الدراسة حصر‬
‫الفطريات الخيطية المعزولة من ترب مختلفة بالمملكة العربية السعودية ومحاولة عزل فطريات من عينات تربة من مواقع عسكرية يتم تداول‬
‫هذه المواد المتفجرة فيها‪ .‬ومن ثم مقارنة مدى تحمل فطرة ‪ Phanerochaete chrysosporium‬وثلثة فطريات‬
‫خيطيه أخرى لكل من مادتي ‪ TNT, and RDX‬وبتراكيز مختلفة باستخدام بيئة عصير‬
‫الخضراوات في الدراسات المبدئية والتي تتميز بدعم نمو الفطريات الخيطية وتجرثمها‪ .‬إضافة" إلى‬
‫دراسة مستوى التحلل لمستخلصات المادتين ‪ TNT, and RDX‬في البيئات السائلة وذلك بعد‬
‫تعريض الخيوط الفطرية النامية مسبقا" من الفطرة ‪ P. chrysosporium‬للنمو في تراكيز عالية‬
‫نسبيا" )‪ (µg ml¯1 100‬من المادتين‪ .‬ومن ثم تقدير مدى تحلل المادتين ومعرفة نواتج التحلل‬
‫بإجراء دراسة مقارنة باستخدام أجهزة ‪ . HPLC, and Scintillation counter‬وكذلك دراسة‬
‫تأثير مادة ‪ Tween 80‬في معدنة هذه المواد المتفجرة‪.‬‬
‫منهج البحث وأساليبه‬

‫سيتم القيام بالفقرات أدناه لتحقيق أهداف البحث ما أمكن ذلك حسب توفر المواد والجهزة اللزمة‪.‬‬

‫عزل بعض الفطريات من ترب مختلفة مأخوذة من مواقع عسكرية يتم تداول المواد المتفجرة فيها ‪ ,‬واجراء الدراسات عليها‪.‬‬ ‫‪-1‬‬
‫تنمية الفطريات الخيطية المعزولة في بيئة عصير الخضروات عند درجة الحرارة المثلى في وجود وعدم وجود مادتي ‪TNT,‬‬ ‫‪-2‬‬
‫‪ and RDX‬بتركيز ‪. (mg/L) 100‬‬
‫تقدير التأثير على النمو بعد ‪ 7‬أيام من التحضين باستخدام ‪. plate count method‬‬ ‫‪-3‬‬
‫ثلثة أنواع من الفطريات السابقة بالضافة إلى الفطرة ‪P. chrysosporium (ATTC‬‬ ‫‪-4‬‬
‫‪ (24725‬سيتم تنميتها على ‪Vegetable juice medium formulated with 50ml V8‬‬
‫‪vegetable juice ( Campbell Soup Co, Camden, NJ, USA ), 10g sucrose,‬‬
‫‪.and 1000ml deionized water, pH 5.5‬‬
‫لتقدير مدى تحمل الفطريات قيد الدراسة لكل من مادتي ‪ TNT and RDX‬سيتم حقن‬ ‫‪-5‬‬
‫‪ 5mm plugs of agar cultures‬في أطباق من ‪ V8-sucrose agar‬تحوي ‪,50 ,0‬‬
‫‪ . µg TNT or RDX mlˉ1 100‬وذلك بقياس ‪ radial growth‬كل ثلثة أيام حتى تمل‬
‫المستعمرة الطبق باستخدام ثلثة أو خمسة تكرارات لكل فطرة بالعتماد على الكمية المتوفرة من‬
‫مادتي ‪. TNT and RDX‬‬
‫تقدير ‪ biodegradation and biotransformation‬باستخدام‪-:‬‬ ‫‪-6‬‬
‫‪ unlabeled and C14-ring labeled RDX and TNT‬بواسطة أجهزة ‪HPLC‬‬
‫‪ and Liquid Scintillation Counting‬حيث يتم تقدير التراكيز في الرشاحة السائلة لكل‬
‫من مادتي ‪ TNT and RDX‬وكذلك تقدير كمية المادة المعلمة ‪ labeled‬في الراشح‬
‫‪. culture filtrate‬‬
‫دراسة تأثير مادة ‪ Tween-80‬على زيادة قدرة الفطرة ‪ P. chrysosporium‬على معدنة مادتي‬ ‫‪-7‬‬
‫‪. TNT and RDX‬‬
‫جمع عينات من التربة في الفقرة الولى وتحليلها كيميائيا" لمعرفة نسبة احتوائها على المواد‬ ‫‪-8‬‬
‫المتفجرة‪.‬‬
‫الفروقات المعنوية بين الفطريات المعاملة والقياسية سيتم تحليلها احصائيا" باستخدام‬ ‫‪-9‬‬
‫‪.(analysis of variance (ANOVA‬‬

‫‪.1‬ان انزيم البروكسيديز يوجد طبيعيا في اللبن وهو علي حد علمي ينقسم الي‬
‫نوعين بالنسبه للبن‪:‬‬
‫‪-1‬لكتوبيروكسيديز‪ :‬هو انزيم بيروكسيديز موجود في اللبن طبيعيا هذا‬
‫النزيم له خصائص مضاده للكسده و مضاده للميكروبات ‪,‬انه قادر علي‬
‫تكوين التفاعل بين البرومين و انواع اليود الي برومين عضوي و يود عضووي‬
‫ويستطيع لذلك ان يصنف الي هالو بيروكسيديز‬
‫‪-2‬هالو بيروكسيديز‪ :‬وهو انزيم بيروكسيديز له القدره علي التوسط بين‬
‫اكسده مركبات الهاليدات والبروموبيروكسيديز‪ .‬والذي له القدره علي‬
‫مقاومه درجه الحراره والذي كان يستخدم علي نطاق واسع كدليل بعد‬
‫بستره اللبن‪.....‬كفائه البستره‬
‫ايضا انزيم البيروكسيديز له تفاعلت اخري مع مركبات اخري مثل فيتامين ‪c‬‬
‫واليود وغيرهم ‪,‬‬
‫ايضا هناك نوع اخر اسمه‬
‫‪ -3‬ميلو بيروكسيديز‪ :‬الذي يوجد بوفره في مركبات في خليا الدم البيضاء‬
‫علي شكل بروتينات و ليزوزوم‪...‬‬
‫هذا وااول البيروكسيديز‪:‬‬
‫هو انزيم يوجد طبيعيا فى الجسم ) يتبع مجموعة الكسدة والختزال(‬
‫ويعرف فى اللبن باسم اللكتوبيروكسيديز‬
‫تعريف نظام اللكتوبيروكسيديز ‪:‬‬
‫يعتبر إنزيم اللكتوبيروكسيديزفي حد ذاته ليس له نشاط مضاد‬
‫للجراثيم‪.‬لذلك لكي يكون النزيم نشط يتطلب وجود بعض المكونات‬
‫الخرىالضافية وذلك لكي يكون له تأثير فعال مضادات للميكروبات‪.‬‬
‫وتشمل مكونات نظام اللكتوبيروكسيديز فوق أكسيد الهيدروجين وملح‬
‫الثيوسينات ) او احدى املح الهاليد )‪ (Cl,I,Br‬ويعتبر الثيوسيانات افضلهم‬
‫نظرا لن سرعة نشاطة متوسطة فى التفاعل بخلف الكلور واليود‬
‫والبروم‪.‬‬
‫وفى وجود كل منإنزيم اللكتوبيروكسيديز مع فوق أكسيد الهيدروجين‬
‫وملح الثيوسينات يشكل معا نظام طبيعي مضاد للبكتريايعرف بنظام‬
‫اللكتوبيروكسيديز‪.‬‬
‫وكذلك يوجد كل من فوق أكسيد الهيدروجين وملح الثيوسينات طبيعيا في‬
‫النسجه البشرية والحيوانية‪ ،‬ولكنبتركيزات منخفضة للغاية ل يستطيع بها‬
‫النزيم أن يقوم بنشاطه‪.‬‬
‫ويستند نظام اللكتوبيروكسيديز إلى تثبيط عملياتالتمثيل الغذائيللبكتيريا‬
‫عن طريق أكسدهملح الثيوسينات إلى هيبوثيوسيانات‪.‬‬

‫وينشط النظام اللكتوبيروكسيديز في اللبن وذلك بإضافات مختلفة من‬


‫تركيزات فوق أكسيد الهيدروجين وملح الثيوسينات‪ ،‬والتي ل تؤثر على‬
‫سلمة من اللبن للستهلك الدامى ولكنه يحد من نمو الكائنات الحية‬
‫الدقيقة‪.‬‬
‫وهناك توصيات من كل من ‪IDF‬و ‪ FAO‬باستخدام نظام اللكتوبيروكسيديز‬
‫لحفظ اللبن الخام في مناطق ل يتوافر بها التقنيات الميكانيكية للتبريد‬
‫و‪/‬أو لى لسباب اقتصادية‪.‬‬

‫وهذا يعنى أن لنظام اللكتوبيروكسيديز فعالية لمنع التلف اللبن الخام‪،‬‬


‫وقد أكدت البحاث التي أجريت فعالية نظام اللكتوبيروكسيديز في منع‬
‫تلف اللبن فى حالة عدم توفر أجهزة التبريد لحفظ اللبن الخام وذلكضمن‬
‫الطار البرامج التابعة لمنظمة الغذيه والزراعة والتي تعمل على حفظ‬
‫اللبن المعامل بنظام اللكتوبيروكسيديز والتي درجة حرارة التخزين على‬
‫تلك المدد المشار لها فى الجدول التالى‪:‬‬
‫الوقت )الساعة(‬
‫درجة الحرارة )&‪;186#‬م(‬
‫‪4-7‬‬
‫‪31-35‬‬
‫‪8 -7‬‬
‫‪30‬‬
‫‪11-12‬‬
‫‪25‬‬
‫‪17 -16‬‬
‫‪20‬‬
‫‪26 -24‬‬
‫‪15‬‬
‫‪ 5-6‬يوم‬
‫‪4‬‬
Peroxidas
‫البيروكسيديز معلومات المنتج‬ e
‫ لللل للللل‬: ‫ المصدر‬Source: Horseradish Roots ‫البيروكسيد‬
‫يز‬
IUB: 1.11.1.7 IUB : 1.11.1.7
Man•
Peroxidase (HRP) is a hemoprotein catalyzing the oxidation by hydrogen
ual
peroxide of a number of substrates such as ascorbate, ferrocyanide,
Text
(‫ البيروكسيديز )برنامج التناسل البشري‬.cytochrome c and the leuco form of many dyes
‫ فيروسيانيد السيتوكروم‬، ‫ ج‬، ‫هو هيموبروتين تحفيز أكسدة التي بيروكسيد الهيدروجين عدد من ركائز مثل أسكوربات‬ ‫دليل‬
HRP has a molecular weight of 40 kDa and an .‫ من الصباغ كثيرة‬leuco ‫وشكل‬
‫النص‬
‫ كيلو دالتون والرقم الهيدروجيني‬40 ‫ برنامج الصحة النجابية لديه الوزن الجزيئي من‬.optimum pH of 7.0 Assa•
: ‫ الستقرار‬.Stability: HPOFF is stable for 9-12 months at 2-8°C .7،0 ‫المثل لل‬ y
HPOD is stable 2 to 3 years at 2-8°C. .‫ درجة مئوية‬8-2 ‫ شهرا في‬12-9 ‫ ثابت لمدة‬HPOFF ‫فحص‬
.‫ درجة مئوية‬8-2 ‫ سنوات في‬3 ‫ حتي‬2 ‫ مستقرة‬HPOD
Refe•
Unit Definition : One Worthington Unit decomposes 1µmole of H 2 O 2 renc
: ‫ وحدة التعريف‬.per minute at 25°C, pH 7.0 using aminoantipyrine and phenol es
‫ باستخدام‬7،0 ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫ درجة مئوية‬25 ‫ في الدقيقة عند‬2 ‫ يا‬2 ‫ حاء‬1μmole ‫المراج وحدة واحدة ورثينجتون تتحلل‬
.‫ والفينول‬aminoantipyrine ‫ع‬
Technical Note: The RZ (Reinheitzahl) which is the absorbance ration,
Cat•
RZ : ‫ التقنية ملحظة‬.A 403 /A 275 , has been used as an indication of purity
However, .‫ وقد استخدمت كدليل على نقاء‬، 275 ‫ أ‬/ 403 ‫ وهناك‬، ‫(( الذي هو حصة المتصاصية‬Reinheitzahl
alo
Shannon et al., JBC, 241 , 266 (1966) report that this ratio for the g
‫ شانون سسسسسس س سسسسسس‬، ‫ ومع ذلك‬.isozymes varies from 2.50 to 4.19 Pag
This, .4،19 ‫ حتي‬2،50 ‫ يختلف‬isozymes ‫ أن هذه النسبة ل‬266 (1966) ‫ التقرير‬، 241 ‫سسسس س‬ e
together with the influence exerted by buffer and pH, would seem to ‫كتال‬
.render questionable the preciseness of this ratio as a criterion of purity ‫وج‬
‫ ويبدو ان تجعل مشكوك في الدقة من هذه‬، ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫ جنبا إلى جنب مع أن التأثير الذي تمارسه العازلة‬، ‫هذا‬
.‫الص النسبة كمعيار للنقاء‬
‫فحة‬
Numerous different methodologies are utilized for the determination of
Listed below .‫ وتستخدم العديد من منهجيات مختلفة لتحديد النشاط البيروكسيديز‬.peroxidase activity Price•
‫ وفيما يلي‬.are some approximate conversions as determined by Worthington List
.‫قائمة بعض التحويلت تقريبي على النحو الذي يحدده ورثينجتون‬
Worthington unit = 4.6 o-dianisidine units previously used by 1 • ‫السعا‬
‫ المستخدمة من قبل ورثينجتون‬dianisidine ‫ وحدات يا‬4.6 = 1 ‫ • وحدة ورثينجتون‬Worthington ‫ر‬
Worthington unit = 0.62 ABTS units (µmole of dye oxidized per 1 •
ABTS (μmole ‫ وحدات‬0.62 = 1 ‫( • وحدة ورثينجتون‬minute, pH 6.0, 25°C, 1.7 mM dye
(‫ ملي صبغة‬1،7 ، ‫ درجة مئوية‬25 ، 6،0 ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫صبغة أكسدة في الدقيقة الواحدة‬
Worthington unit = 2 ABST units (µmole of dye oxidized per minute, 1 •
‫ صبغة أكسدة في‬ABST (μmole ‫ وحدات‬2 = 1 ‫( • وحدة ورثينجتون‬pH 5.0, 25°C, 8.7 mM dye
(‫ ملي صبغة‬8،7 ، ‫ درجة مئوية‬25 ، 5،0 ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫الدقيقة الواحدة‬
Worthington unit = 0.5 guiacol units (µmole of guiacol oxidized per 1 •
guiacol ‫ من‬guiacol (μmole ‫ وحدات‬0.5 = 1 ‫( • وحدة ورثينجتون‬minute, pH 7.0, 25°C
(‫ درجة مئوية‬25 ، 7،0 ‫ ودرجة الحموضة‬، ‫تتأكسد في الدقيقة الواحدة‬
Worthington unit = 0.5 pyrogallol to purpogallin unit (mg of product 1 •
‫ إلى وحدة‬purpogallin ‫ بيروغالول‬0.5 = 1 ‫( • وحدة ورثينجتون‬per 20 seconds, pH 6.0, 20°C
(‫ درجة مئوية‬20 ، 6،0 ‫ والرقم الهيدروجيني‬، ‫ ثانية‬20 ‫)ملغ من الناتج في‬
Worthington unit = 5 pyrogallol to purpogallin units (µmole of product 1 •
) ‫ إلى وحدات‬purpogallin ‫ بيروغالول‬5 = 1 ‫( • وحدة ورثينجتون‬per minute at pH 6.0, 30°C
(‫ درجة مئوية‬30 ، 6،0 ‫ من الناتج في الدقيقة الواحدة في الرقم الهيدروجيني‬μmole
‫ الوصف‬Description A Co Si Cat P
ct de z . ri
iv ‫ رم‬e ‫ الق‬c
it ‫ ح ز‬.‫ ط‬e
y ‫ ج‬No ‫ال‬
‫الن‬ ‫م‬ . ‫س‬
‫ش‬ ‫ع رق‬
‫ا‬ ‫م‬ ‫ر‬
‫ط‬

‫ البيروكسيديز‬Peroxidase ≤ HP 1 LS0 $ ‫ اشتر الن‬Buy Now


A soluble, dialyzed, 85 O 0 025 3
، ‫ ألف‬.lyophilized powder un D 0 59 0.
‫ مسحوق‬، ‫مدال القابلة للذوبان‬ its HP m LS0 0
RZ ≥1.0. RZ .‫مجفف بالتجميد‬ pe O g 025 0
.≥ 1،0 r D 1 59 3
- ‫ مخزن في‬.Store at -20°C m 0 0،
.‫ درجة مئوية‬20 g 0 0
dr ‫مل‬ 0
y ‫غ‬ $
w
ei
1 LS00 $1 ‫ اشتر الن‬Buy Now
gh
g 2560 98.
t
m LS00 00

1 2560 19
85
‫ج‬ 8،0
‫مل‬
‫م‬ $0
‫غ‬
‫وح‬
‫دة‬
B LS00 ‫ استفسر‬Inquire
‫في‬
ul 2561
‫الو‬
k LS00
‫زن‬
‫ ال‬2561
‫الج‬
‫س‬
‫ا‬
‫ائب‬
‫ف‬
‫ة‬

Peroxidase, EIA Grade, ≤ HP 5 LS0 $ ‫ اشتر الن‬Buy Now


‫ تقييم الثر‬، Purified 50 OF k 064 5
‫ تنقية الصف‬، ‫البيئي‬ 0 F u 74 0.
‫البيروكسيد‬ un HP 5 LS0 0
Chromatographically its OF ‫كو‬ 064 0
‫ تنقية‬.purified pe F 74 5
Chromatographically. r 0،
Single basic isozyme with m 0
‫ الساسية‬RZ ≥2.9. isozyme g 0
pr $
RZ 2،9. A ≤ ‫واحدة مع‬
.lyophilized powder ot
.‫ومسحوق مجفف بالتجميد‬ ei
5 LS00 $3 ‫ اشتر الن‬Buy Now
Suitable for n 0 6476 75.
‫ مناسبة‬.immunoconjugation ≥ k LS00 00
.immunoconjugation ‫ل‬ 50 u 6476 37
.Store at 2-8°C or -20°C 0 5 5،0
· ‫ أو‬8-2 ‫تخزين عند درجة حرارة‬ ‫مل‬ $0
0
‫ جيم‬20- ‫غ‬
‫كو‬
‫من‬
‫الب‬
‫روت‬ B LS00 ‫ استفسر‬Inquire
‫ين‬ ul 6472
‫في‬ k LS00
‫وح‬ ‫ال‬
‫دا‬ ‫ س‬6472
‫ت‬ ‫ائب‬
‫ة‬

‫ ورثينجتون دليل المنتج‬: ‫ س‬Up: Worthington Product Catalog

Home
‫ حول‬About Us Contact Us Privacy Policy ‫ خريطة‬Site Map
‫الصفحة‬ ‫ أسئلة وأجوبة‬FAQ
‫بنا‬ ‫اتصل بنا‬ ‫سياسة الخصوصية‬ ‫الموقع‬
‫الرئيسية‬

.‫ رثينجتون شركة كيميائية حيوية‬-- Worthington Biochemical Corporation. © 2010 -2010 ©


08701 ‫ يكوود بولية نيوجيرسي‬، ‫ شارع فاسار‬Vassar Ave., Lakewood, NJ 08701 730 730
1.732.942.1660 • 1.800.445.9603 1.732.942.1660 • 1.800.445.9603
‫ لولو‬lulu

‫لله االجلوتاثيون بيروكسيديز‬


‫ الموسوعة الحرة‬، ‫ من ويكيبيديا‬From Wikipedia, the free encyclopedia

‫ بحث‬، ‫ الملحة‬: ‫ اذهب إلى‬Jump to: navigation , search

glutathione peroxidase 1
1 ‫الجلوتاثيون‬

‫ معرفات‬Identifiers

‫ رمز‬Symbol GPX1 GPX1

Entrez Entrez 2876 2876

‫ هوغو‬HUGO 4553 4553


OMIM OMIM 138320 138320

RefSeq RefSeq NM_000581 NM_000581

UniProt UniProt P07203 P07203

‫ بيانات أخرى‬Other data

EC number 1.11.1.9 1.11.1.9


‫المفوضية الوروبية‬
‫رقم‬

‫ مكان‬Locus 3 .‫ مركز حقوق النسان‬.Chr


p21.3 3 p21.3

(glutathione peroxidase 3 (plasma


(‫ )البلزما‬3 ‫الجلوتاثيون‬

‫ معرفات‬Identifiers

‫ رمز‬Symbol GPX3 GPX3

Entrez Entrez 2878 2878

‫ هوغو‬HUGO 4555 4555

OMIM OMIM 138321 138321

RefSeq RefSeq NM_002084 NM_002084

UniProt UniProt P22352 P22352

‫ بيانات أخرى‬Other data

EC number 1.11.1.9 1.11.1.9


‫المفوضية الوروبية‬
‫رقم‬

‫ مكان‬Locus 5 .‫ مركز حقوق النسان‬.Chr


q23 5 Q23

glutathione peroxidase 5
(epididymal androgen-related
‫ )بربخي البروتين‬5 ‫( الجلوتاثيون‬protein
(‫الندروجين ذات الصلة‬

‫ معرفات‬Identifiers

‫ رمز‬Symbol GPX5 GPX5

Entrez Entrez 2880 2880

‫ هوغو‬HUGO 4557 4557

OMIM OMIM 603435 603435

RefSeq RefSeq NM_001509 NM_001509

UniProt UniProt O75715 O75715

‫ بيانات أخرى‬Other data

EC number 1.11.1.9 1.11.1.9


‫المفوضية الوروبية‬
‫رقم‬

‫ مكان‬Locus 6 .‫ مركز حقوق النسان‬.Chr


p21.32 6 p21.32

glutathione peroxidase 6
6 ‫(( الجلوتاثيون بيروكسيديز‬olfactory
(‫)الشم‬

‫ معرفات‬Identifiers

‫ رمز‬Symbol GPX6 GPX6

Entrez Entrez 257202 257202


‫ هوغو‬HUGO 4558 4558

OMIM OMIM 607913 607913

RefSeq RefSeq NM_182701 NM_182701

UniProt UniProt P59796 P59796

‫ بيانات أخرى‬Other data

EC number 1.11.1.9 1.11.1.9


‫المفوضية الوروبية‬
‫رقم‬

‫ مكان‬Locus 6 .‫ مركز حقوق النسان‬.Chr


p21 6 P21

Glutathione peroxidase ( PDB 1GP1 , EC 1.11.1.9 ) is the general name of an


enzyme family with peroxidase activity whose main biological role is to
، 1GP1 ‫ الجلوتاثيون بيروكسيديز ) فوسفات‬.protect the organism from oxidative damage
‫ ( هو السم العام ل انزيم السرة مع البيروكسيديز النشاط الرئيسي الذي‬1.11.1.9 ‫المفوضية الوروبية‬
The biochemical function of .‫البيولوجية دوره في حماية الكائن الحي من الضرر التأكسدي‬
glutathione peroxidase is to reduce lipid hydroperoxides to their corresponding
‫ وظيفة حيوية من‬.alcohols and to reduce free hydrogen peroxide to water
‫ إلى ما يقابلها من الكحول والحد من الخطوط‬hydroperoxides ‫الجلوتاثيون هو تقليل الدهون‬
.‫بيروكسيد الهيدروجين في الماء‬

‫ محتويات‬Contents
[hide]

Isozymes 1 1•
Isozymes
Reaction 2 2•
‫ردود‬
Structure 3 3•
‫الهيكل التنظيمي‬
Reaction 4•
mechanism 4
‫ردود الفعل اللية‬
Species 5•
distribution 5
‫توزيع النواع‬
Discovery 6 6•
‫ديسكفري‬
References 7 7•
‫المراجع‬
See also 8 8•
‫انظر أيضا‬

Isozymes [ ‫ ] تحرير‬edit ] Isozymes ]


There are several isozymes encoded by different genes, which vary in celullar
location and substrate specificity. Glutathione peroxidase 1 (GPx1) is the
most abundant version, found in the cytoplasm of nearly all mammalian tissues,
whose preferred substrate is hydrogen peroxide. Glutathione peroxidase 4
(GPx4) has a high preference for lipid hydroperoxides; it is expressed in nearly every
mammalian cell, though at much lower levels. Glutathione peroxidase 2 is an
intestinal and extracellular enzyme, while glutathione peroxidase 3 is extracellular,
، ‫ المشفرة بواسطة الجينات المختلفة‬isozymes ‫ وهناك عدة‬. [ especially aboundant in plasma [ 1
‫( هو النسخة الكثر‬GPx1) 1 ‫ اكسيداز البيروكسيديز‬.‫ الركيزة‬celullar ‫والتي تختلف في المكان وخصوصية‬
.‫ الذي فضل هو الركيزة بيروكسيد الهيدروجين‬، ‫ وجدت في السيتوبلزم من جميع أنسجة الثدييات تقريبا‬، ‫وفرة‬
‫ وأعرب في ما يقرب‬، ‫ الدهن‬hydroperoxides ‫( لديه تفضيل السامية ل‬GPx4) 4 ‫اكسيداز البيروكسيديز‬
‫ وخارج‬2 ‫ انخفاض مستويات أنه اكسيداز البيروكسيديز‬.‫ على الرغم من كل ذلك بكثير في‬، ‫من خليا الثدييات‬
So . [1] ‫ خصوصا في البلزما‬aboundant ، ‫ هو خارج الخلية‬3 ‫ بينما الجلوتاثيون‬، ‫الخلية هو انزيم المعوية‬
far, eight different isoforms of glutathione peroxidase (GPx1-8) have been identified
.‫( في البشر‬GPx1 - 8) ‫ مختلفة من الجلوتاثيون‬isoforms ‫ وقد تم تحديد ثمانية‬، ‫ وحتى الن‬.in humans
‫ ] تحرير [ ردود الفعل‬edit ] Reaction ]
‫ رد فعل سبيل المثال أن‬:An example reaction that glutathione peroxidase catalyzes is
: ‫الجلوتاثيون يحفز هو‬
+ ‫ → ع سان جرمان‬2 ‫يا‬ 2 ‫ ه‬+ 2GSH + H 2 O 2 → GS–SG + 2H 2 O, 2GSH
، ‫ س‬2H 2

where GSH represents reduced monomeric glutathione , and GS–SG


، ‫ حيث خفضت المدفع جريازيف يمثل أحادى الجلوتاثيون‬. represents glutathione disulfide
. ‫وع سان جرمان يمثل ثاني كبريتيد الجلوتاثيون‬
Glutathione reductase then reduces the oxidized glutathione to complete the
: ‫ اختزال الجلوتاثيون يقلل ثم الجلوتاثيون المؤكسد لكمال دورة‬:cycle
NADPH + ‫ ع سان جرمان‬. + GS–SG + NADPH + H + → 2 GSH + NADP
+ +
NADP + ‫ → المدفع جريازيف‬2 ‫ح‬+

‫ ] تحرير [ هيكل‬edit ] Structure ]


Mammalian GPx1 , GPx2 , GPx3, and GPx4 have been shown to be selenium
-containing enzymes, whereas GPx6 is a selenoprotein in humans with cysteine-
‫ وقد ثبت أن‬GPx4 ‫ و‬، GPx1 ، GPx2 ، GPx3 ‫ الثدييات‬.containing homologues in rodents
‫ في البشر مع السيستين‬selenoprotein ‫ هو‬GPx6 ‫ في حين‬، ‫السيلينيوم التي تحتوي على النزيمات‬
GPx1, GPx2, and GPx3 are homotetrameric proteins, .‫المحتوية على المتماثلت في القوارض‬
‫ هي بروتينات‬GPx3 ‫ و‬، whereas GPx4 has a monomeric structure. GPx1 ، GPx2
As the integrity of the cellular and .‫ أحادى‬GPx4 ‫ في حين أن لديها بنية‬، homotetrameric
subcellular membranes depends heavily on glutathione peroxidase, the
antioxidative protective system of glutathione peroxidase itself depends heavily
‫ وعلى سلمة والتحت خلوية الغشية الخلوية يعتمد اعتمادا كبيرا على‬.on the presence of selenium
‫ نظام الحماية من الجلوتاثيون نفسه يعتمد اعتمادا كبيرا على‬antioxidative ‫ و‬، ‫الجلوتاثيون بيروكسيديز‬
.‫وجود السيلينيوم‬
‫ ] تحرير [ آلية رد الفعل‬edit ] Reaction mechanism ]
The mechanism is at the selenocysteine site, which is in a Se(-) form as resting
This is oxidized .‫( شكل ممكن‬-- ‫ وهو يستريح في سي )الدولة‬، ‫ هذه اللية في سيلينسيستين موقع‬.state
by the peroxide to SeOH which then reacts with a GSH molecule to form GS-Se and
water, then by another GSH molecule to from Se(-) again, releasing GS-SG as the by-
‫ سراج‬/ ‫ الذي يتفاعل مع جزيء ثم المدفع جريازيف لتشكيل ع‬SeOH ‫ يتأكسد هذا من بيروكسيد ل‬.product
‫ سان جرمان‬/ ‫ والفراج عن ع‬، ‫( مرة أخرى‬--) ‫ ثم من جانب آخر جزيء من الجلوتاثيون لسي‬، ‫الدين والماء‬
.‫كمنتج على حدة‬
‫ ] تحرير [ توزيع النواع‬edit ] Species distribution ]
Mice genetically engineered to lack glutathione peroxidase 1 (Gpx1 knockout mice)
are grossly phenotypically normal and have a normal lifespan, indicating that this
‫ خروج‬Gpx1 ‫ )الفئران‬1 ‫ فئران معدلة وراثيا لنقص الجلوتاثيون‬.enzyme is not critical for life
‫ مشيرا إلى أن هذا النزيم ليست حرجة‬، ‫ طبيعية ولها عمر العادي‬phenotypically ‫المغلوب( بشكل صارخ‬
However, Gpx1 -/- mice develop cataracts at an early age and exhibit defects in .‫للحياة‬
‫ الفئران تطوير إعتام عدسة العين في‬-- / -- Gpx1 ، ‫ [ ومع ذلك‬muscle satellite cell proliferation. [ 1
[1]
.‫سن مبكرة والعيوب في المعرض الصناعي انتشار خليا العضلت‬
However, glutathione peroxidase 4 knockout mice die during early
‫ الفئران تموت بالضربة القاضية‬4 ‫ الجلوتاثيون بيروكسيديز‬، ‫ [ ومع ذلك‬embryonic development. [ 1
[1]
.‫خلل التطور الجنيني المبكر‬
There is some evidence that reduced levels of glutathione peroxidase 4 can increase
‫ يمكن أن‬4 ‫ [ هناك بعض الدلة على أن انخفاض مستويات الجلوتاثيون‬life expectancy in mice. [ 2
[2]
.‫سسسس متوسط العمر المتوقع في الفئران‬
‫ ولم تتوفر معلومات على‬.No information is available on knockouts of the other isozymes
.‫ الخرى‬isozymes ‫بالضربة القاضية من‬
‫ في كرات الدم الحمراء‬. The bovine erythrocyte enzyme has a molecular weight of 84 kDa
. ‫ كيلو دالتون‬84 ‫انزيم سسسسسسس لديها الوزن الجزيئي من‬
‫ ] تحرير [ الكتشاف‬edit ] Discovery ]
‫ [ اكتشف اكسيداز‬Glutathione peroxidase was discovered in 1957 by Gordon C. Mills. [ 3
[3]
.‫ من قبل غوردون جيم ميلز‬1957 ‫البيروكسيديز في‬
‫ ] تحرير [ المراجع‬edit ] References ]
abc
Muller FL, Lustgarten MS, Jang Y, Richardson A, Van Remmen ^.1
، ‫ جانغ ص‬، Lustgarten ‫ ماجستير‬، ‫ ^ أ أ أ مولر فلوريدا‬.(H (August 2007
Trends in oxidative" .(2007 ‫ ه )أغسطس‬Remmen ‫ فان‬، ‫ريتشاردسون‬
"‫ "اتجاهات في التأكسدي نظريات الشيخوخة‬.aging theories". Free Radic
Med. 43 (4): 477–503. doi : .‫ لللل‬.Biol .‫لللللل للللل‬
) 43 : ‫ للل‬. 10.1016/j.freeradbiomed.2007.03.034 . PMID 17640558
‫ بميد‬. j.freeradbiomed.2007.03.034/10.1016 : ‫ دوى‬.503-477 (4
. 17640558
Ikeno (2007). ‫ ص‬، ‫ ليانغ ه‬، ‫ ^ ران س‬.(Ran Q, Liang H, Ikeno Y (2007 ^.2
"Reduction in glutathione peroxidase 4 increases life span through
‫ حياة تمتد‬4 ‫ "تخفيض في الجلوتاثيون‬.increased sensitivity to apoptosis". J
.‫ للل‬."‫الزيادات البيروكسيديز من خلل زيادة الحساسية لموت الخليا المبرمج‬
.Med .‫ لللللل لللللل لللللل‬.Sci .‫ للللل‬.Gerontol. Gerontol. A Biol
.42-932 (9) 62 : ‫ لللللل‬. Sci. 62 (9): 932–42. PMID 17895430 .‫للل‬
. 17895430 ‫بميد‬
MILLS GC (November 1957). "Hemoglobin catabolism. I. ^.3
Glutathione peroxidase, an erythrocyte enzyme which protects
‫ ^ المطاحن القيادة العامة‬.hemoglobin from oxidative breakdown" . J
‫ وهو النزيم الذي‬، ‫ أول الجلوتاثيون بيروكسيديز‬.‫ "هدم الهيموجلوبين‬.(1957 ‫)نوفمبر‬
.‫ لللل‬.Biol .‫ للل‬. "‫يحمي كرات الدم الحمراء الهيموجلوبين من انهيار المؤكسدة‬
Chem. 229 (1): 189–97. PMID 13491573 .
‫ بميد‬.97-189 (1) 229 : ‫ للل‬. http://www.jbc.org/cgi/reprint/229/1/189
. http://www.jbc.org/cgi/reprint/229/1/189 . 13491573

‫ ] تحرير [ انظر أيضا‬edit ] See also ]


‫ اختزال الجلوتاثيون‬Glutathione reductase•
‫ نقص السيلينيوم‬Selenium deficiency•
[hide]

‫ه‬ • ‫د‬ • ‫ الخامس‬v • d • e

(Oxidoreductases : peroxidases ( EC 1.11


‫ ) المفوضية الوروبية‬peroxidases : ‫أوكسيدوريدوكتاز‬
(1.11

1.11.1.1-14 Catalase · Cytochrome c peroxidase ·


1.11.1.1-14 Eosinophil peroxidase · Glutathione
peroxidase ( GPX1 ) · Horseradish
peroxidase · Lactoperoxidase ·
Myeloperoxidase · Thyroid
peroxidase · Deiodinase (
Iodothyronine deiodinase ,
· ‫ ( الكاتلز‬Iodotyrosine deiodinase
‫سيتوكروم ج البيروكسيديز · يوزينية‬
GPX1 ) ‫البيروكسيديز · اكسيداز البيروكسيديز‬
Lactoperoxidase · ‫( · الفجل البيروكسيديز‬
‫· الميلوبيروكسيداز · الغدة الدرقية‬
Deiodinase ( · ‫البيروكسيديز‬
Iodothyronine deiodinase ،
( Iodotyrosine deiodinase

) 1.11.1.15
peroxiredoxin )
6·5·4·3·2·16·5·4·3·2·1
1.11.1.15 (
( peroxiredoxin

‫ لللللللل‬1‫ل‬11 ‫ للل‬. This EC 1.11 enzyme -related article is a stub


You can help Wikipedia by . ‫للللللللل للللل للل للللللل لل للل‬
. ‫ للللل لللللل للللللللل لل لللل للللل للللل‬. expanding it

‫ه‬ • ‫د‬ • ‫ الخامس‬v • d • e

Retrieved from "


‫ " تم السترجاع‬http://en.wikipedia.org/wiki/Glutathione_peroxidase
" http://en.wikipedia.org/wiki/Glutathione_peroxidase " ‫من‬

Categories : Genes on chromosome 3 | Genes on chromosome


5 | Genes on chromosome 6 | EC 1.11.1 | Antioxidants |
‫ الجينات على‬: ‫ الفئات‬Selenium compounds | Oxidoreductase stubs
| 6 ‫ | الجينات على الكروموسوم‬5 ‫ | الجينات على الكروموسوم‬3 ‫الكروموسوم‬
| ‫ | المواد المضادة للكسدة | مركبات السيلينيوم‬1.11.1 ‫المفوضية الوروبية‬
Oxidoreductase ‫بذرة‬

: ‫ تصنيفات مخفية‬Hidden categories: Protein pages needing a picture


‫صفحات بروتين بحاجة لصورة‬
‫ أدوات شخصية‬Personal tools
‫ ميزات جديدة‬New features•
‫ إنشاء حساب‬/ ‫ دخول‬Log in / create account•
‫ مساحات‬Namespaces
‫ المادة‬Article•
‫ مناقشة‬Discussion•
‫ المتغيرات‬Variants
‫ وجهات النظر‬Views
‫ قراءة‬Read•
‫ تحرير‬Edit•
‫ عرض التاريخ‬View history•
‫ الجراءات‬Actions
‫ البحث‬Search
Top of Form
Special:Search

Search

Bottom of Form
‫ الملحة‬Navigation
‫ الصفحة الرئيسية‬Main page•
‫ محتويات‬Contents•
‫ محتوى متميز‬Featured content•
‫ الحداث الجارية‬Current events•
‫ المادة عشوائية‬Random article•
‫ تبرع‬Donate•
‫ التفاعل‬Interaction
‫ حول ويكيبيديا‬About Wikipedia•
‫ بوابة المجتمع‬Community portal•
‫ أحدث التغييرات‬Recent changes•
‫ التصال ويكيبيديا‬Contact Wikipedia•
‫ مساعدة‬Help•
‫ الدوات‬Toolbox
‫ ماذا يرتبط هنا؟‬What links here•
‫ تغييرات ذات علقة‬Related changes•
‫ رفع ملف‬Upload file•
‫ الصفحات الخاصة‬Special pages•
‫ وصلة دائمة‬Permanent link•
‫ استشهد بهذه الصفحة‬Cite this page•
‫ تصدير‬/ ‫ طباعة‬Print/export
‫ إنشاء كتاب‬Create a book•
‫ تنزيل وقوات الدفاع الشعبي‬Download as PDF•
‫ نسخة سهلة الطبع‬Printable version•
‫ لغات‬Languages
Català català•
Česky česky•
‫ المانى‬Deutsch•
Español español•
Français français•
‫ اليطالية‬Italiano•
‫ البهاساميليوية‬Bahasa Melayu•
日本語 日本语•
Polski Polski•
Português português•
Русский Русский•
‫ آخر تعديل‬.This page was last modified on 3 October 2010 at 09:39•
.09:39 ‫ في‬2010 ‫ أكتوبر‬3 ‫لهذه الصفحة في‬
Text is available under the Creative Commons Attribution-•
‫ النص متوفر في إطار لجنة الترخيص البداعي أر‬ShareAlike License
additional terms may apply. See Terms of Use for ; ‫إس إس‬
‫ شروط الستخدام للحصول‬.‫ ؛ قد يتم تطبيق شروط إضافية الرسولي‬.details
.‫على تفاصيل‬
Wikipedia® is a registered trademark of the Wikimedia
‫ ويكيبيديا ® علمة مسجلة‬.Foundation, Inc. , a non-profit organization
.‫ وهي منظمة غير هادفة للربح‬، ‫ل مؤسسة ويكيميديا‬
‫ اتصل بنا‬Contact us•
‫ سياسة الخصوصية‬Privacy policy•
‫ حول ويكيبيديا‬About Wikipedia•
‫ يكي‬Disclaimers•


SPABTS02.001 ..‫علم و بالتوفيق‬
Page 4 of 4
Revised: 04/10/96
Enzymatic Assay of PEROXIDASE
(EC 1.11.1.7)
Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid-'2,2
as a Substrate
( NOTES:( c o n t i n u e d
Where Sigma Product or Stock numbers are .6
,specified
.equivalent reagents may be substituted
This procedure is for informational purposes. For a
current copy of Sigma’s quality control
.procedure contact our Technical Service Department

You might also like