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DE LA SALUD
MANUAL DE PRÁCTICAS
Toxicología I
ÍNDICE
Presentación............................................................................................................................ 5
Medidas de seguridad.............................................................................................................. 6
• Práctica N° 1
Aspectos analíticos de la determinación de drogas en fluidos biológicos.................. 8
Riesgo toxicológico N° 1: Toxicología de solventes orgánicos................................... 18
Caso clínico N° 1: Xeroderma pigmentosum.............................................................. 21
• Práctica N° 2
Ensayos preliminares en los análisis toxicológicos.................................................... 24
Métodos para la extracción de drogas de la orina con objetivo de screening........... 30
Taller N° 1: Tratamiento general de intoxicaciones................................................... 38
• Práctica N° 3
Efecto hepatotóxico del tetracloruro de carbono........................................................ 39
Seminario N° 1: Lesiones por radiaciones ionizantes................................................ 46
• Práctica N° 4
Intoxicación experimental por monóxido de carbono................................................. 47
Riesgo toxicológico N° 2: Intoxicación por dioxinas................................................... 56
Caso clínico N° 2: Intoxicación por plomo en niños................................................... 59
• Práctica N° 5
Determinación de cianuro en muestra biológica........................................................ 62
Taller N° 2: Intoxicación por fosgeno y arsina............................................................ 69
• Práctica N° 6
Determinación de mercurio en muestra hidrobiológica.............................................. 72
Seminario N° 2: Contaminación ambiental................................................................. 83
• Práctica N° 7
Determinación de aminas biogénicas en quesos maduros........................................ 84
Riesgo toxicológico N° 3: Uso del anís estrella en lactantes...................................... 91
Caso clínico N° 3: Intoxicación por alimentos............................................................. 92
Taller N° 3: Uso de edulcorantes en tratamiento de enfermedades........................... 94
Seminario N° 3: Uso de aditivos en la industria alimentaria....................................... 95
• Práctica N° 8
Determinación de insecticidas carbamatos en muestras biológicas........................... 96
Caso clínico N° 4: Intoxicación por organofosforados................................................ 106
• Práctica N° 9
Identificación de animales ponzoñosos – shock anafiláctico...................................... 108
Anexo
Tóxicos en ambientes laborales y sus biomarcadores............................................................. 116
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Universidad Católica Los Ángeles de Chimbote / Facultad de Ciencias de la Salud
Luis Torres Santillán Manual de Prácticas de Toxicología I
MANUAL DE PRÁCTICAS
AUTOR:
MG. Q. F. LUIS JOSÉ TORRES SANTILLÁN
ALUMNO.........................................................................
REVISIÓN........................................................................
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Luis Torres Santillán Manual de Prácticas de Toxicología I
PRESENTACIÓN
El Manual de Prácticas de Toxicología I está dirigido a los alumnos del VIII ciclo de Farmacia y
Bioquímica y complementa las actividades académicas teóricas programadas en la asignatura.
Es una herramienta básica para el estudiante, porque guía la ejecución de las prácticas y
ayuda a la mejor comprensión de los métodos analíticos cualitativos y cuantitativos escogidos
en las determinaciones químico-toxicológicas. Así mismo, permite la elaboración de los
informes y el reporte de los resúmenes de los casos clínicos, los riesgos toxicológicos y
seminarios desarrollados en cada unidad.
El autor.
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Todas las que se utilizan en las operaciones y reacciones en el laboratorio son potencialmente
peligrosas por lo que, para evitar accidentes, deberán trabajarse con cautela y normar el
comportamiento en el laboratorio por las exigencias de la seguridad personal y del grupo que
se encuentre realizando una práctica.
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PRÁCTICA N° 1
I.- TÍTULO
II.- INTRODUCCIÓN
Hoy en día, la detección de xenobióticos en matrices biológicas es una tarea difícil, no solo
porque se necesitan equipamientos relativamente caros, sino debido a que la transformación
parcial o total de los mismos en el organismo da lugar a la aparición de entidades químicas
diferentes, lo que conlleva a una buena preparación por partes de los toxicólogos, así como el
desarrollo de técnicas de laboratorio lo suficientemente sensibles y específicas, además de
contar con los patrones de referencia de las drogas y sus posibles metabolitos.
Debido a esta amplia variedad de sustancias que pueden estar presentes en un determinado
fluido, se hace casi imposible diseñar un esquema único para el aislamiento y la
determinación de las mismas.
El grupo más numeroso es el de las drogas, (entre ellas, medicamentos) con alrededor de
1000 compuestos diferentes, lo que le da una importancia singular, además de tener la mayor
incidencia en casi todo el mundo, ya sea como drogas de abuso o como medicamentos de
manera general.
Las drogas son todas aquellas sustancias naturales o sintéticas que, introducidas en el
organismo, modifican, alteran, o reparan una de las funciones normales del organismo vivo.
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técnica directa para aumentar la eficiencia de los análisis. Este procedimiento de screening
puede variar algo, dependiendo de la muestra biológica de que se trate.
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ETAPAS
1.- Preparación de la muestra: Este paso es crucial en los análisis. Generalmente involucra
la homogenización de las muestras, ajustes de pH, procedimientos de hidrólisis (ácida, básica
o enzimática), precipitación, centrifugación, etc. Debido a la complejidad de las muestras
biológicas, este paso adquiere especial significación.
2.- Aislamiento del analito: El método de aislamiento dependerá de la naturaleza del tóxico
que se quiere buscar. En el caso de las drogas la tendencia ha sido desde la extracción con
cloruro de n-butilo, que fue uno de los primeros solventes declarados como extractores
selectivos de drogas, después las extracciones con sales y con solventes, hasta la cada vez
más empleada extracción en fase sólida, la cual presenta muchas ventajas con respecto a
todas las anteriores, como son mayor selectividad, ahorro de solventes y de tiempo, extractos
más limpios y mayor recobrado de los analitos, etc. Existen muchos trabajos que comparan la
extracción líquido-líquido con la extracción en fase sólida, demostrándose cada vez más sus
ventajas, pero no obstante a ello la extracción líquido-líquido se sigue utilizando, dependiendo
de los recursos con que cuenta cada laboratorio.
3.- Concentración del extracto: El objetivo de este paso es colocar el analito en el menor
volumen posible para, de esta manera, aumentar la sensibilidad de los análisis. En el caso de
las drogas, es importante conocer que la concentración de los extractos debe realizarse en
condiciones controladas, aunque las condiciones ideales son concentrar a temperatura
ambiente y en corriente de nitrógeno o de aire.
5- Cuantificación del analito: Una vez identificado el analito, la cuantificación del mismo se
puede realizar por una técnica directa, bien ajustada y utilizando patrones de referencia puros
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para análisis. Esta técnica directa generalmente es una técnica cromatográfica gas-líquida o
líquida-líquida y la espectrometría acoplada a estas dos anteriores.
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13. Todas las muestras deben guardarse en congelación antes y después de terminados
los análisis y las muestras de sangre; para determinación de etanol, deben conservarse
con fluoruro de sodio al 2 %.
De manera general, los análisis de drogas en fluidos biológicos, por parte de los laboratorios
forenses, tienen esencialmente dos objetivos fundamentales:
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III.- CUESTIONARIO
1.- Haga una clasificación general de las principales sustancias relacionadas con intoxicaciones
en seres humanos.
3.- Defina:
- Muestra:
- Contra muestra
- Análisis Químico-Toxicológico
- Medicina forense
- Cromatografía de gases
- Absorción atómica
- HPLC
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RIESGO TOXICOLÓGICO Nº 1
Introducción
Los solventes orgánicos son productos químicos industriales de origen natural, como aceites,
grasas, breas y tinturas, y diversos productos químicos sintéticos como pinturas, herbicidas,
insecticidas, etc.
Los solventes orgánicos son sustancias que a temperatura ambiente se encuentran en estado
líquido y pueden desprender vapores, por lo que la vía de intoxicación más frecuente es la
inhalatoria, aunque también se puede producir por vía digestiva y cutánea.
Todos los disolventes orgánicos son tóxicos, aunque su toxicidad varía de unos productos a
otros.
PARA DISCUSIÓN
Origen y química
Fuentes de exposición
Toxicocinética y toxicodinamia
Efectos tóxicos
Prevención y tratamiento
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CASO CLÍNICO 01
A pesar de los consejos que se brindan a su madre sobre el daño solar, el paciente empeora y
cada 4 ó 5 meses se determina en consulta, nuevas y deformantes lesiones que corresponden
a carcinomas basocelulares y carcinomas epidermoides, que en forma paliativa se resuelven
quirúrgicamente.
PARA DISCUSIÓN:
1.- ¿Cuál es el defecto molecular de XP y cómo se relaciona con una predisposición al cáncer?
2.- Describa los sistemas enzimáticos que participan en la reparación del ADN, dañado por la
luz ultravioleta.
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PRÁCTICA N° 2
I.- TEMA
ENSAYOS PRELIMINARES EN LOS ANÁLISIS TOXICOLÓGICOS
II.- INTRODUCCIÓN
La parte de la muestra destinada para los ensayos preliminares, van a permitirnos orientar el
análisis toxicológico, que por medio de ellos vamos a ir desechando a cierto grupo de posibles
tóxicos así como, inducirnos a sospechar de la causalidad de otros.
Los papeles sensibles, o también llamados papeles reactivos, van a dar una información de la
presencia de tóxicos volátiles y gaseosos. Las láminas metálicas permitirán detectar la
presencia de tóxicos metálicos y no metálicos.
Por otro lado, los ensayos biológicos son herramientas de diagnóstico adecuadas para
determinar el efecto de agentes físicos y químicos sobre organismos de prueba bajo
condiciones experimentales específicas y controladas. Estos efectos pueden ser tanto de
inhibición como de magnificación, evaluados por la reacción de los organismos, tales como
muerte, crecimiento, proliferación, multiplicación, cambios morfológicos, fisiológicos o
histológicos.
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De manera general, los ensayos, también llamados pruebas de toxicidad, pueden ser
definidos de acuerdo con:
Métodos de Screening
Investigaciones previas determinan que los falsos-negativos son poco probables en este tipo
de pruebas, pues se ha demostrado una buena correlación entre resultados positivos-
positivos durante su aplicación en muestras con niveles residuales muy por encima del
correspondiente LMR permitido.
Sin embargo, su aplicación en muestras con niveles cercanos, o por debajo del LMR
establecido para la droga en estudio, dan como resultado un gran número de falsos-positivos.
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MATERIALES:
Por cada mesa de práctica.
Material Biológico:
- 50 g de hígado de pollo
- 10 ml de orina problema
- 10 ml de orina testigo
Material de Laboratorio:
- 2 Placas petri
- 6 Tubos de ensayo y su gradilla
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- 2 Gradillas
- 4 Pipetas 1 ml, 2 ml, 5 ml y 10 ml. y su gradilla
- 2 Vasos de precipitación
- 2 Fiolas de 50 ml
- 4 Papel filtro
- 4 Alfileres
- 4 Recipientes vacíos de frasco-ampolla de penicilina
- 1 Cinta para pegar
- 1 Pipeteador
REACTIVOS:
- 5 ml Nitrato de plata 5%
- 5 ml Acetato de plomo 10%
- 5 ml Sulfato ferroso 2%
- 5 ml Ácido clorhídrico 10%
- 5 ml Carbonato de Sodio
- 5 ml Ácido Pícrico 1%
- 5 ml Tricloruro férrico 20%
- 5 ml o-cresol 0,1%
- 5 ml NH3 2 M
- 2 tab. de 500 mg de Ácido acetil salicílico
- 10 ml de Yoduro de potasio 10%
- 10 ml Ácido sulfhídrico 70%
- 10 g Cianuro de potasio sólido
- 10 ml Formaldehído 70%
- 10 ml Ácido cianhídrico 50%
- 6 ml Ácido sulfúrico q.p.
- 30 ml de agua destilada
- 30 ml de SSF
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Equipos:
- Balanza analítica
- Baño María
- Estufa
- 1 Equipo de disección
IV.- PROCEDIMIENTO
- Efectuar picadillos o papillas, si las muestras son vísceras (lo más rápido posible). Si es una
solución, homogenizar.
- Transferir al frasco de experimentación, agregar cantidad suficiente de agua destilada hasta
que se forme una masa fluida y homogénea.
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- Cuidadosamente, suspender los papeles sensibles en el ambiente del recipiente, sin rozarse
entre ellos ni en el seno del líquido.
- Mantener en reposo en estas condiciones, al mismo tiempo, observar detenidamente los
cambios de coloración en dichos papeles.
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OBJETIVO DE SCREENING
10 ml de orina se ajusta a pH - 3 con ácido fosfórico o tartárico se extrae dos veces con 30
ml de éter etílico y se combinan los extractos, se lava con 5 ml de agua, el lavado se
adiciona a la muestra y se retiene para posterior extracción. El extracto etéreo se reextrae
con 5 ml de solución saturada de bicarbonato de sodio, y dicha solución después de
separada se conserva para el análisis de posibles salicilatos. En el extracto etéreo, se
pueden encontrar drogas neutras y ácidas.
La muestra inicial retenida se ajusta a pH - 8 con amoníaco diluído y se extrae dos veces
con 10 ml de cloroformo, se reúnen los extractos y se le añade unas gotas de ácido
clorhídrico al 1% en etanol, para evitar la pérdida de drogas volátiles. Este extracto puede
contener las drogas básicas. La muestra inicial que resultó del paso anterior se somete a
hidrólisis ácida (con ácido clorhídrico y se calienta a 100° C por 30 minutos) y se extrae con
dos porciones de 10 ml de éter etílico, se combinan los extractos y se lavan con 5 ml de
NaOH 1M. El extracto etéreo pude contener benzofenonas. La fase acuosa se ajusta a pH
- 9 y se extrae con una mezcla de acetato de etilo: isopropanol 9:1. Este extracto orgánico
puede contener opiáceos que, después de la hidrólisis, quedaron libres.
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En el caso de los pelos, debemos recortarlos en pequeños pedacitos, se lavan bien con agua
destilada para que suelten toda la grasa y, por último, se realiza un lavado con metanol.
- Ciertos compuestos como el mercurio, arsénico, bismuto, antimonio, platino, hierro, plomo.
son revelados fácilmente, empleando láminas metálicas de cobre.
TÉCNICA OPERATORIA
1. Lavar las tiras de cobre con HNO3 2.5 N y enjuagar con etanol 95 %, luego secar.
2. Medir 10 ml de orina o una alicuota de lavado gástrico, vómitos. Si fuera polvo, tabletas o
residuo, disolverlo o suspenderlo en 10 ml de agua. Si son vísceras, pesar aproximadamente
2 g, añadir 20 ml de agua destilada, efectuar papillas.
COMPONENTES Vasos de 50 ml
I II III
_____________________________________________
Muestra Problema A 10 ml - -
Muestra Problema B - 10 ml -
Muestra Problema C - - 10 ml
Adicionar HCL cc. 1 ml 1 ml 1 ml
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Introducir a cada tubo las tiras de cobre recientemente lavadas. Calentar suavemente de 20' a
1 hora. Retirar la tira de cobre. Observar e interpretar.
V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Describa las características físico-químicas del:
- Nitrato de plata
- Cianuro de potasio
- Acetato de plomo
- Nitroprusiato de sodio
- Yoduro de potasio
- O-cresol
- Tricloruro férrico
- Amoniaco
2.- Describa dos distintas a las ya referidas, que permitan realizar ensayos preliminares en las
determinaciones químico-toxicológicas.
3.- Fundamente el por qué las vísceras deben estar en forma de papilla para realizar los
análisis toxicológicos.
4.- ¿Cómo se prepara el reactivo de Fujiwara?
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PRÁCTICA N° 3
I.- TÍTULO
EFECTO HEPATOTÓXICO DEL TETRACLORURO DE CARBONO
II.- INTRODUCCIÓN
El tetracloruro de carbono es una de las sustancias que causan efectos tóxicos considerables
en el hígado; si bien es cierto que la mayoría de sustancias son metabolizadas a nivel de este
órgano, que por su constitución está encargado de transformar las sustancias que llegan a él,
ya sea de origen externo o de los tejidos extrahepáticos como producto de su metabolismo;
también es cierto que muchas de estas sustancias tienen afinidad por el hígado, causando
serios problemas patológicos: como el caso del tetracloruro de carbono. También puede
ocasionar:
RIESGO DE INHALACIÓN
Por evaporación de esta sustancia a 20°C, se puede alcanzar muy rápidamente una
concentración nociva en el aire.
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MATERIALES:
Por cada mesa de práctica
Material biológico:
-Cobayos machos con un peso aproximado de 600 - 800 g, aparentemente
sanos (2 ejemplares).
Material de laboratorio:
- 4 Tubos de ensayo
- 1 Gradilla porta tubos
- 2 Jeringas de 5 ml
- 2 Placas petri
- 3 Pipetas de 1, 5 y 10 ml
- Gradilla portapipetas
- 2 Sondas delgadas
- 2 Vasos de precipitación
- 1 Par de guantes
- 1 Balanza
REACTIVOS:
- 2 ml Tetracloruro de carbono q.p.
- 5 ml Aceite vegetal 100 % puro
- 30 ml Solución salina fisiológica
- 30 ml Agua destilada
EQUIPOS
- 1 Equipo de disección
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IV.- PROCEDIMIENTO
DURANTE LA PRÁCTICA
1.- Se extraerán muestras de sangre de ambos ejemplares, aproximadamente 3 ml, que
servirán para determinar el tiempo de coagulación, EMPLEANDO tubos de ensayo.
2.- Luego, los ejemplares serán sacrificados por decapitación y se obtendrán los hígados para
las observaciones macroscópicas directas y la comparación respectiva.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Explicar el mecanismo de formación de hígado graso por intoxicación con tetracloruro de
carbono y describa las alteraciones bioquímicas que se presentan.
2.- Describa las características físico-químicas del tetracloruro de carbono y de otras dos
sustancias que sean consideradas como hepatotóxicas.
3.- Refiera algunas medidas de tratamiento en casos humanos de hígado graso.
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SEMINARIO Nº 1
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PRÁCTICA N° 4
I.- TÍTULO:
INTOXICACIÓN EXPERIMENTAL POR MONÓXIDO DE CARBONO
II.- INTRODUCCIÓN
El monóxido de carbono es un gas que se caracteriza por ser menos denso que el aire,
incoloro, inodoro y sin sabor, que no tiene características irritantes, pues su mecanismo de
acción es asfixiante. Se origina en la combustión incompleta de materiales que contienen
carbono en su composición.
Los síntomas vendrán dados por irritación de mucosas, tos, ronquera, dificultad respiratoria,
intranquilidad, ansiedad, confusión, desorientación, trastornos de la capacidad de juicio,
coloración cutánea azulada, etc.
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Una vez en la sangre, el CO se une con la hemoglobina con una afinidad unas 210-270 veces
superior a la del oxígeno, formando un compuesto denominado carboxihemoglobina.
De forma resumida, una vez en contacto con el CO, éste es absorbido hacia la sangre y se
une con la hemoglobina desplazando al oxígeno, y, además, el escaso oxígeno transportado
es difícilmente cedido a los tejidos para su utilización, provocando hipoxia.
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MATERIALES:
Por mesa de práctica
Material Biológico
• Mus musculus (ratones albinos)
Material de Laboratorio
• 1 Equipo de disección
• 2 Jeringas de 3 ml
• 15 g de algodón
• 1 Par de guantes
• 2 Placas petri
• 1 Gradillas
• 3 Pipetas de 1, 5 y 10 ml
• 1 Probeta
• 4 Tubos de ensayo
• 1 Matraz de 1 litro
• 2 Láminas portaobjetos
• 2 Lunas de reloj
REACTIVOS:
• 10 ml Ácido acético glacial 1/3
• 10 ml Ferricianuro de potasio 2%
• 30 ml Suero fisiológico
• 30 ml Agua destilada
• Monóxido de carbono
• 5 ml Cloruro de zinc 30%
• 5 ml de NaOH 0.5 N
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IV.- PROCEDIMIENTO
A uno de los especímenes se le coloca en el interior de un matraz y, luego de taparlo con una
torunda de algodón, se lleva a la altura del tubo de escape de un vehículo gasolinero por unos
minutos hasta llegar a producir la muerte.
REACCIÓN DE LEHMANN
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Sobre una luna de reloj se colocan II gotas de solución al 10% de cloruro de zinc, luego se
añaden IV gotas muestra de sangre del animal intoxicado. Se procede de la misma manera
con la sangre del testigo. El color rojo-cereza indica reacción positiva en tanto que un color
gris castaño es negativa.
OTRAS DETERMINACIONES:
Se utiliza sangre total entera.
Muestra: problema y testigo.
I Reacción de Orientación
1.- ENSAYO DE DILUCIÓN
En tubos de ensayo debidamente rotulado, se diluye al 10% en agua destilada, la muestra de
sangre normal como la del problema.
A 1 ml de sangre entera, se añade 10 ml de agua destilada. Observar el cambio de color entre
la muestra problema y testigo.
La sangre normal toma una coloración rojo naranja.
La sangre problema se torna de color rojo cereza.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Fundamente la reacción de Lehmann.
2.- Refiera las principales manifestaciones clínicas de una intoxicación con monóxido de
carbono.
3.- Describa las características físicas - químicas de:
- Cloruro de zinc.
- Ferricianuro de potasio.
4.- Defina:
- Carbohihemoglobina.
- Oxígeno hiperbárico.
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RIESGO TOXICOLÓGICO Nº 2
En estos momentos, aún se conoce muy poco sobre estas sustancias. La mayoría de los
trabajos de experimentación se han hecho en trabajadores, tanto en los que producen estos
disolventes como en los que trabajan en la fabricación de herbicidas; además se han
efectuado estudios en animales experimentales. Los efectos sobre la población empezaron a
ser tenidos en cuenta a principios de los años 70 a raíz de un suceso, en el que una nube
tóxica de dioxinas provocó una intoxicación de considerable magnitud en la población de
Seveso, Italia. A partir de entonces, se hicieron estudios para determinar las consecuencias.
Lo que se constató fue el aumento de cánceres en los tejidos blandos, como por ejemplo la
piel, el hígado, el sistema nervioso central o periférico, también se observó un aumento en el
número de abortos y malformaciones en recién nacidos.
Como anécdota, se conoce que este tipo de sustancias se han utilizado en guerras como la
de Vietnam para eliminar la vegetación y tener mayor visibilidad sobre el enemigo. Las
consecuencias de este uso no están totalmente clarificadas pero se ha observado un aumento
de malformaciones en el sistema nervioso y malformaciones congénitas en la población que
habitaba la zona donde se utilizó.
Los herbicidas que potencialmente pueden dar lugar a dioxinas cuando se aplican en
explotaciones agrarias, además de eliminar las malas hierbas, contaminan también otros
productos a los que no van dirigidos. En ocasiones, los animales pueden ingerir directamente
las plantas contaminadas con herbicidas.
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PARA DISCUSIÓN
Origen y química
Toxicocinética y toxicodinamia
Efectos tóxicos
Prevención y tratamiento
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TAREA:
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CASO CLÍNICO Nº 2
Un niño de 18 meses, hijo de peones agrícolas, fue hospitalizado por presentar pérdida de
peso, vómito y dolor abdominal agudo. Se observó que sufría también descoordinación
muscular y debilidad de los músculos de los pies.
PARA DISCUSIÓN
1. ¿Cómo ejerce el plomo sus efectos tóxicos sobre las vías metabólicas?
2. La inhibición enzimática producida por el plomo es: ¿Competitiva o no
competitiva?
3. ¿Por qué mecanismo aumenta la excreción urinaria de ácido aminolevulínico y de
coproporfirina III?
4. ¿Por qué se deposita plomo en los huesos?
5. ¿Por qué es la penicilina, el tratamiento lógico en la intoxicación por plomo?
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PRÁCTICA N° 5
I.- TÍTULO
II.- INTRODUCCIÓN
Los insecticidas con tiocianato (tiocianato de etilo, tiocianato del metilo) también se metabolizan
a ion cianuro en el organismo y pueden causar serios problemas de toxicidad. El cianuro
también es un metabolito del nitroprusiato de sodio (usado como vasodilatador) y otros
compuestos que contienen nitrilos, pero los envenenamientos con cianuro en estos casos son
raros.
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MATERIALES:
Material Biológico
50 g de hígado de pollo
Material de vidrio:
4 Tubos de ensayo
1 Embudo
3 Pipeta de 2, 5 y 10 ml
2 Matraces de 100 ml
2 Vasos de precipitación de 50 ml
2 Gradillas portatubos y portapipetas
Equipos:
PH metro
Equipo de disección
REACTIVOS:
5 ml Solución acuosa de hidróxido de sodio 10%
5 ml Solución acuosa de sulfato ferroso 10% recientemente preparada
5 ml Solución acuosa de ácido clorhídrico 10%
30 ml Agua destilada
30 ml de SSF
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IV.- PROCEDIMIENTO
Determinación cualitativa
Se basa en la formación de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de Prusia) con los
iones ferrosos.
Sensibilidad
Cianuro, 10 mg/l.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Describa las características físico-químicas del cianuro de sodio y del nitroprusiato de
sodio.
2.- ¿Cuáles son las precauciones que se deben tener en cuenta cuando se manejan
muestras de las cuales, se sospechan, contengan cianuro?
3.- Defina:
- Glicosido cianogenético.
- Metahemoglobinemia.
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TALLER Nº 2
INTRODUCCIÓN
Fosgeno es compuesto del producto químico con fórmula Cl2CO. Este gas descolorido ganó
mala fama como arma química durante la Primera Guerra Mundial; es también un valorado
reactivo industrial. En concentraciones bajas, su olor se asemeja al heno o a la hierba del
corte. Además de su producción industrial, unas cantidades pequeñas ocurren naturalmente
en la interrupción de compuestos tratados con cloro y la combustión de clorina, conteniendo
orgánicos compuestos. El magnesio 5000 fue producido aproximadamente en 1989.
PARA DISCUSIÓN
Origen y química
Toxicocinética y toxicodinamia
Efectos tóxicos
Prevención y tratamiento
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TAREA:
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PRÁCTICA N° 6
I.- TÍTULO
II.- INTRODUCCIÓN
El mercurio es un metal blanco plateado. Junto con el cadmio y cinc, se ubica en el grupo II B
de la tabla periódica. Su estructura cortical externa es 5d10, 6s2. El mercurio, por sus
características fisicoquímicas: estado líquido a temperatura ambiente y el único conocido en
estado líquido a 0º C., densidad elevada, calor específico, poco elevado, líquido muy poco
compresible, tensión superficial muy alta, capacidad calorífica muy débil, capacidad de
amalgamación con otros metales; posee el don de la ubicuidad. Cualquier producto que se
analice, natural o artificial, contendrá, al menos, trazas de mercurio.
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El sistema nervioso central es el tejido blanco principal de los efectos del metilmercurio en
adultos, siendo las funciones más afectadas: la sensorial, la auditiva, y la visual, junto con las
áreas del cerebro, y especialmente en el cerebelo las áreas relacionadas con la coordinación.
Los efectos tempranos de la intoxicación son síntomas no específicos como: parestesia,
indisposición ligera y visión borrosa. Existen evidencias de que el metilmercurio afecta el
sistema inmunológico del hombre en exposición crónica. Se ha encontrado una asociación
entre las anormalidades neurológicas y la exposición a metilmercurio, mediante el consumo
de pescado contaminado en hombres y mujeres adultos.
La OMS ha establecido una ingesta diaria tolerable para metilmercurio de 0,48 m g/kg de peso
corporal. Varios países han establecido en sus regulaciones sanitarias límites de mercurio
total en especies de peces depredadores de 1 mg/kg y en otros productos pesqueros 0,5
mg/kg, y Noruega ha propuesto 1 mg/kg para metilmercurio en las mismas especies.
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MATERIALES
Por cada mesa de práctica
Material Biológico
Pescado, molusco langostino, camarones.
Material de laboratorio
• Fiola de 100 ml
• Balón de 250 ml
• Pipeta de 2, 5 y 10 ml
• Vaso de precipitación
• Estufa para encineración
• Gradilla
• Papel milimetrado
REACTIVOS
• Solución de ditizona
• Cloroformo
• H2SO4CC.
• KMNO4
• Hidroxilamina
• Amoniaco cc.
• HCL.0.1N
• Bromato de potasio 40%
• Solución buffer
• Dicloruro de mg. q.p.
• HCL 0.5 N
• Solución estándar agua destilada
EQUIPOS
• Espectrofotómetro
• Equipo de disección
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IV.- PROCEDIMIENTO
Todos representan una mejora considerable del método original colorimétrico de la ditizona. El
método de activación neutrónica se considera como el más exacto y sensible, y usualmente
es utilizado como método de referencia. El método de absorción atómica sin llama es el más
ampliamente usado en muestras biológicas y ambientales; aunque no es selectivo, puede
determinar tanto el mercurio total como el mercurio inorgánico y por diferencia el mercurio
orgánico. El método de cromatografía de gas líquido con detector de captura electrónica se
prefiere cuando se requiere medir selectivamente el metilmercurio en tejidos de pescado en
presencia de otros compuestos de mercurio.
Se basa en la propiedad del mercurio divalente de forma con la ditizona, un ceto complejo de
color amarillo naranja, el cual se extrae con cloroformo.
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Esta extracción no es selectiva (puede estar siendo interferida por otros metales que
interfirieron el proceso).
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Se prepara transfiriendo 10 ml de la solución patrón a una fiola de 1000 ml, luego se afora con
agua destilada; esto significa que la concentración de Hg será 10 ugr/ml.
CURVA DE CALIBRACIÓN
Se toma 2.5, 5, 7.5 y 10 ml de la solución estándar II, que son leídos en el espectrofotómetro y
se grafica en el papel milimetrado. Luego, en esa gráfica, se incluye la lectura de la muestra
problema.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Describa el probable mecanismo de metilación del mercurio metálico en seres vivos.
2.- ¿Cuáles son las poblaciones de riesgo para una intoxicación con mercurio?
3.- ¿Cuál es el nivel límite permisible de mercurio en carne de peces y moluscos en nuestro
país?
4.- Describa la toxicocinética del mercurio.
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SEMINARIO Nº 2
CONTAMINACIÓN AMBIENTAL
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PRÁCTICA N° 7
I.- TÍTULO:
DETERMINACIÓN DE AMINAS BIÓGENAS EN QUESOS MADUROS
II.- INTRODUCCIÓN
Durante la maduración de los quesos, ocurren transformaciones en las características físicas,
químicas y sensoriales, generando el sabor, olor, color y textura que le son particulares a
cada tipo de queso madurado. Los cultivos iniciadores hidrolizan las cadenas polipeptídicas,
liberando aminoácidos; sustrato de las enzimas descarboxilasas microbianas para la
producción de aminas biógenas.
Por otra parte, diversos autores han reportado que los cultivos iniciadores utilizados en la
elaboración de los quesos madurados, se asocian con la producción de aminas biógenas
tales como: histamina, tiramina, triptamina, putrescina, cadaverina, espermina y espermidina.
Los cultivos iniciadores lactobacillus, streptococcus, leuconostoc y pediococcus, que se utilizan
como inóculos en los quesos madurados, han sido identificados como bacterias que poseen
enzimas decarboxilasas de los aminoácidos, con lo cual son potencialmente productoras de
aminas biógenas.
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III.- MATERIALES
Cada mesa de práctica
Material Biológico
• 20 g de queso fresco
Materiales de Laboratorio
• 2 matraces de 100 ml
• 1 embudo de vidrio
• 3 balones aforados de 25 ml
• Papel de filtro
• 2 pipetas de 5 y 10 ml
• 6 pipetas de 2 ml
• 1 micropipeta
• 5 fiolas de 100 ml
Reactivos
• 100 ml de ácido perclórico 0.4 M
• 5 g de tiramina, triptamina, putrescina, cadaverina y espermita estándar
• 5 ml de NaOH 2N
• 5 ml de NaHCO3 saturado
• 10 ml de solución de cloruro de dansilo (10 mg de cloruro de dansilo en 1 ml de
acetona)
• 2 ml de amoniaco puro
• 5 ml de acetonitrilo
• Filtro millipore de 0,22 µm
• 10 ml de acetato de amonio
Equipos
• Homogenizador
• Centrífuga
• Incubadora
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• Cromatógrafo
IV.- PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
Para la preparación de las muestras, se homogeniza 5 g de queso con 10 ml de ácido
perclórico 0,4 M, usando un homogenizador. Luego se centrifuga por 10 minutos a 3000
rpm. Posteriormente, se filtra, usando y se trasvasa a balones aforados de 25 mL. La
operación se repite tres veces y los sobrenadantes son combinados y ajustados a 25 mL
con ácido perclórico 0,4 M.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Identifique la relación de las aminas biógenas presentes en alimentos con el cuadro clínico
de una intoxicación alimentaria.
2.- Describa los tipos de intoxicación alimentaria.
3.- Haga un breve comentario de alguna intoxicación alimentaria masiva extraída de un diario.
4.- Haga una lista con sustancias químicas que frecuentemente contaminan alimentos.
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RIESGO TOXICOLÓGICO Nº 3
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CASO CLÍNICO Nº 3
INTOXICACIÓN POR ALIMENTOS
Una estudiante de 21 años comenzó con una diarrea acuosa profusa, casi continua, y luego
presentó vómitos. Su estado general se deterioró en una forma abrupta y fue llevada
inmediatamente al servicio de emergencia del hospital.
Al momento de la llegada, se determinó que su estado era cianótico, su piel había perdido
turgencia, su presión arterial era 70/50, su pulso rápido y débil. El médico de turno diagnosticó
CÓLERA. Se tomó una muestra de heces para coprocultivo y comenzó de inmediato el
tratamiento.
TRATAMIENTO:
DISCUSIÓN:
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Taller Nº 3
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SEMINARIO Nº 3
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PRÁCTICA N° 8
I.- TÍTULO:
DETERMINACIÓN DE INSECTICIDAS CARBAMATOS EN MUESTRAS BIOLÓGICAS
II.- INTRODUCCIÓN
Los plaguicidas incluyen una clasificación general que incluye los insecticidas, los raticidas,
los herbicidas, los fungicidas y las sustancias para fumigación. Estos compuestos fabricados
con el único propósito de destruir alguna forma de vida, se clasifican como plaguicidas porque
actúan contra organismos que el hombre considera como indeseables.
Aunque la toxicidad selectiva de los plaguicidas es efectiva, todos ellos pueden producir por lo
menos algo de toxicidad en el hombre. El uso de insecticidas en la agricultura ha aumentado
enormemente desde la Segunda Guerra Mundial; existe gran potencial de exposición
ocupacional a estos productos químicos en su producción y uso. Sin embargo, la exposición a
los insecticidas no se limita a los accidentes laborales, a menudo, quedan residuos en el
producto y el hombre está expuesto a bajos niveles de estas sustancias en los alimentos.
Los insecticidas organofosforados han reemplazado en gran parte a los hidrocarburos clorados.
Los organofosfatos no persisten mucho tiempo en el ambiente y tienen muy bajo potencial
carcinógeno, pero su toxicidad aguda es mucho mayor en el hombre.
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Estos insecticidas son comúnmente aplicados bajo distintas formas, ya sea en emulsiones, en
polvos o en soluciones para pulverizar, que pueden quedar impregnados fácilmente en los
vestidos y en la piel y causar serios cuadros de intoxicaciones cuando no se percatan los que
manipulan estas sustancias.
CARBAMATOS PESTICIDAS
Estos compuestos tienen en la fórmula general la substitución de azufre por oxígeno, lo cual
hace que tenga la actividad insecticida más baja que los organofosforados.
Los carbamatos son usados ampliamente como insecticidas, herbicidas y fungicidas. Los
insecticidas de carbamatos inhiben la acetilcolinesterasa y así la evidencia de exposición al
producto puede obtenerse midiendo la actividad de la colinesterasa.
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Interpretación clínica
La exposición a carbamatos puede causar anorexia, dolor abdominal, náuseas, vómitos,
diarrea, lagrimeos, hipersalivación, sudor, ansiedad, ataxia y edema pulmonar agudo. Para la
terapia puede indicarse la atropina, que es un antídoto, la pralidoxima no debe ser usada.
Mecanismo
Los ésteres de carbamato de N-metilo causan carbamilación reversible de la enzima
cetilcolinesterasa, lo que permite la acumulación de acetilcolina, la substancia neuromediadora
en las uniones nueroefectoras parasimpáticas (efectos muscarínicos), en las uniones
mioneurales del músculo esquelético y en los ganglios autónomos (efectos nicotínicos), así
como en el cerebro (efectos en el SNC).
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Los carbamatos de N-metilo se absorben por inhalación, ingestión y algunos penetran por la
piel, aunque esta última tiende a ser la ruta menos tóxica. Por ejemplo, el carbofurán tiene una
DL50 por vía oral de 5 mg/kg en ratas, comparado con una DL50 dermal de 120 mg/kg, lo cual
hace la ruta oral aproximadamente 24 veces más tóxica cuando es ingerido. Los carbamatos
N-metilo son hidrolizados enzimáticamente por el hígado y los productos de degradación se
excretan por los riñones y el hígado.
En las uniones nerviosas colinérgicas, con músculo liso y células glandulares, la alta
concentración de acetilcolina causa contracciones musculares y secreción, respectivamente.
En las uniones musculares esqueléticas, el exceso de acetilcolina puede producir excitación
(espasmos musculares), pero también puede debilitar o paralizar la célula al despolarizar la
placa terminal. Las concentraciones elevadas de acetilcolina pueden causar alteraciones
sensoriales y conductuales, incoordinación y depresión en la función motora en el cerebro
(aunque raras veces causan convulsiones), a pesar de que los insecticidas de carbamato de
N-metilo no penetran eficazmente al sistema nervioso central. La depresión respiratoria,
combinada con edema pulmonar, es la causa común de muerte en el envenenamiento con
estos compuestos.
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MATERIALES
Por cada mesa de práctica
Material Biológico
• 50 g de hígado de pollo
Material de Laboratorio
• 4 Tubos de ensayo
• 3 Pipetas de 2, 5 y 10 ml
• 2 Matraces de 100 ml
• 2 Vasos de precipitación de 100 ml
• 1 Embudo
• 1 Pera de decantación
• 2 Papeles de filtro
REACTIVOS
• 10 ml de solución de ácido clorhídrico (2 mol/l)
• 10 ml de solución de furfuraldehido (100 ml/l) en metanol
• 5 ml de ácido clorhídrico concentrado (densidad relativa 1.18)
• 10 ml de cloroformo
• 10 ml de metanol
• 30 ml de agua destilada
• 30 ml de solución salina fisiológica
• 5 ml de insecticida carbámico
EQUIPOS
• Centrífuga
• Equipo de disección
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IV.- PROCEDIMIENTO
La prueba está basada en una reacción general del carbamatos con el furfuraldehido, con la
presencia de cloruro de hidrógeno.
Prueba cualitativa
Aplicable al contenido estomacal y los residuos de la escena (papilla de hígado de pollo,
contaminada con carbamato).
Método:
1. Acidificar 1 ml de muestra con 0.5 ml de dilución de ácido clorhídrico, extraer con 4 ml de
cloroformo y mezclar cuidadosamente por 5 minutos.
2. Centrifugar durante 5 minutos, desechar la capa superior acuosa y filtrar el extracto del
cloroformo, a través de un papel de filtro en un tubo limpio.
3. Evaporar el extracto a sequedad, bajo una corriente de aire o nitrógeno a 40°C.
4. Disolver el residuo en 0.1 ml de metanol, aplicar una mancha de la solución en un papel de
filtro, dejar secar.
5. Aplicar 0.1 ml de la solución de furfuraldehido a la mancha, dejar secar y exponer el papel a
los humos del ácido clorhídrico, concentrado por 5 minutos bajo campana.
Sensibilidad
Carbamato, 100 mg/l.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Describa un caso clínico referido a intoxicación con insecticidas organofosforados o
carbamatos.
2.- Describa el mecanismo toxicológico en una intoxicación con carbamatos.
3.- Haga un listado con 5 productos insecticidas comerciales que contengan carbamatos.
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CASO CLÍNICO Nº 4
INTOXICACIÓN POR ORGANOFOSFORADOS
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PRÁCTICA N° 9
I.- TÍTULO:
IDENTIFICACIÓN DE ANIMALES PONZOÑOSOS – SHOCK ANAFILÁCTICO
II.- INTRODUCCIÓN
Los animales ponzoñosos han desarrollado aparatos para la producción de veneno y su
inoculación, produciendo e inyectando sustancias altamente tóxicas para inmovilizar y matar a
sus presas. Entre ellos se ubican: serpientes, arañas, abejas, avispas, hormigas, alacranes,
ciempiés, milpiés, peces, y otros.
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III.- MATERIALES
Por cada mesa de práctica
Material Biológico
• Diversas especies de animales ponzoñosos menores (avispas, abejas, arañas,
alacranes, etc.)
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Material de Laboratorio
• 2 Placas petri
• 4 Lunas de reloj
• 2 Vasos de precipitación
• 2 Matraces
• Frasco de vidrio transparente y de boca ancha, uno por cada animal ponzoñoso
• 1 Lupa
Reactivos
• 30 ml SSF
• 30 ml agua destilada
Equipos
• Estereoscopio
• Equipo de disección
IV.- PROCEDIMIENTO
• Con cautela, capturar en sus hábitats, a diversos animales ponzoñosos y trasladar al
laboratorio.
• Con ayuda de lupa y estereoscopio, observar cuidadosamente cada uno de ellos e
identificar sus principales características.
• Identificar el género y la familia a la que pertenecen.
• Reconocer la ponzoña.
• Aislar la ponzoña.
• Investigar el cuadro clínico que produce en el hombre la mordedura y/o picadura de
cada animal ponzoñoso llevado al laboratorio.
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V.- RESULTADOS
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VI.- DISCUSIÓN
_________________________________________________________________________ 113
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VII.- CUESTIONARIO
1.- Describa el mecanismo de producción de shock anafiláctico por accidente con animales
ponzoñosos.
2.- Describa la sintomatología de un accidente por animal ponzoñoso, en el hombre.
3.- Haga una lista con los animales que posean ponzoña, que habitan en la región.
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ANEXO
TÓXICOS EN AMBIENTES LABORALES
Y SUS BIOMARCADORES
ACETONA
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ACETONA EN ORINA (ACET-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML
CADA UNA), TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: CONGELADOR INMEDIATAMENTE DESPUÉS DE LA COLECTA.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA A GAS (CG).
OBS.: DIABÉTICOS PUEDEN EXCRETAR ALTAS CUANTÍAS DE ACETONA EN ORINA.
BENCENO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO TRANS-TRANS-MUCÓNICO URINARIO (MUCON).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 0,5 MG/G DE CREATININA SE CORRELACIONA CON UNA EXPOSICIÓN OCUPACIONAL A 1
PPM DE BENCENO.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
OBS.:
1. EL SORBITOL, UN ADITIVO DE ALIMENTOS, PUEDE OCASIONAR UNA DISCRETA INTERFERENCIA,
QUE ES MINIMIZADA, COLECTANDO LA ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO;
2. EL HÁBITO DEL TABAQUISMO TAMBIÉN PUEDE AUMENTAR LA CONCENTRACIÓN DEL ÁCIDO
TRANS-TRANS MUCÓNICO EN ORINA;
3. LOS VALORES DE REFERENCIA HABITUALMENTE YA CONTEMPLAN ESAS INTERFERENCIAS;
4. EL ÁCIDO TRANS-TRANS MUCÓNICO URINARIO ES RECOMENDADO COMO UN INDICADOR
BIOLÓGICO PARA EXPOSICIÓN A BAJAS CONCENTRACIONES DE BENCENO.
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DIMETILFORMAMIDA
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: N-METILFORMAMIDA EN ORINA (NMF).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA A GAS.
OBS.: ESTE AGENTE QUÍMICO ES FÁCILMENTE ABSORBIDO A TRAVÉS DE LA PIEL.
ESTIRENO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO MANDÉLICO URINARIO (MANDEL).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
OBS.: DEBE SER EVITADA LA INGESTIÓN DE BEBIDA ALCOHÓLICA EN LAS 24 HORAS QUE PRECEDEN LA
COLECTA.
ESTIRENO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO FENILGLIOXÍLICO URINARIO (GLIOX).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
OBS.: DEBE SER EVITADA LA INGESTIÓN DE BEBIDA ALCOHÓLICA EN LAS 24 HORAS QUE PRECEDEN LA
COLECTA.
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ETILBENCENO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO MANDÉLICO URINARIO (MANDEL).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA EN EL
ÚLTIMO DÍA DE LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
OBS.: DEBE EVITARSE LA INGESTIÓN DE BEBIDA ALCOHÓLICA EN LAS 24 HORAS QUE PRECEDEN LA
COLECTA.
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N-HEXANO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: 2,5-HEXANODIONA (ACETONILACETONA) EN ORINA (HEX-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA A GAS.
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NITROBENCENO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: METAHEMOGLOBINA EN SANGRE (MEHB).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SANGRE HEPARINIZADO AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE
TRABAJO (2 ML CADA UNA) TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC. ENVIAR AL LABORATORIO EN EL PLAZO MÁXIMO DE 24 HORAS
DESPUÉS DE LA COLECTA.
V.R.: HASTA 2 %.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE.
OBS.: DESPUÉS DE LA COLECTA, EXISTE UNA TENDENCIA NATURAL DE AUMENTO DE LA
METAHEMOGLOBINA EN LA MUESTRA. POR ESO, ES IMPORTANTE REMITIRLA INMEDIATAMENTE AL
LABORATORIO PARA LA EJECUCIÓN DEL ANÁLISIS.
TOLUENO (TOLUOL)
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO HIPÚRICO URINARIO (HIP).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML
CADA UNA) TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 1,5 G/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
OBS.: DIETAS RICAS EN ALIMENTOS QUE CONTIENEN ÁCIDO BENZÓICO (O PRECURSORES DE ESTA
SUBSTANCIA COMO EL ÁCIDO QUÍNICO), PUEDEN ELEVAR LOS VALORES DEL ÁCIDO HIPÚRICO
URINARIO.
TRICLOROETANO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: TRICLOROCOMPUESTOS TOTALES URINARIOS (TCC).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA (20 ML) TOMADA EN EL ÚLTIMO DÍA DE
LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE.
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XILENO (XILOL)
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO METILHIPÚRICO URINARIO (METHIP).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA (20 ML) TOMADA DESPUÉS DE, AL
MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: N.R.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTO DESEMPEÑO (HPLC).
ARSÉNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ARSÉNICO URINARIO (AS-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA PRE JORNADA (50 ML) TOMADA EL ÚLTIMO DÍA DE LA SEMANA DE
TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 10 ΜG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: ALGUNOS FRUTOS DE MAR PUEDEN CONTENER ALTAS CONCENTRACIONES DE COMPUESTOS
ORGANOARSENICALES QUE, CUANDO INGERIDOS, SON RÁPIDAMENTE EXCRETADOS EN ORINA. EL
TRABAJADOR DEBE SER ALERTADO PARA EVITAR INGERIR FRUTOS DE MAR, POR LO MENOS DOS DÍAS
ANTES DE LA COLECTA.
CADMIO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: CADMIO EN SANGRE (CD-S).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SANGRE HEPARINIZADA (10 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES
CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 0,5 ΜG/DL.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
CADMIO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: CADMIO URINARIO (CD-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA (50 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 2 ΜG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
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COBALTO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: COBALTO URINARIO (CO-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML), TOMADA EN EL
ÚLTIMO DÍA DE LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 2,4 ΜG/L (FIOH).
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
COBRE
LA EXPOSICIÓN OCUPACIONAL AL COBRE PUEDE SER MONITOREADA DETERMINANDO:
COBRE SÉRICO (CU-S).
COBRE URINARIO (CU-U).
COBRE
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: COBRE SÉRICO (CU-S).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SUERO (3 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO. DESPUÉS
DE LA COLECTA DE 10 ML DE SANGRE SIN ANTICOAGULANTE, DEJAR RETRAER EL COÁGULO Y
SEPARAR EL SUERO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: 60 A 140 ΜG/DL.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: DEBIDO A LA BAJA TOXICIDAD DEL COBRE, SU I.B.M.P. NO ESTÁ DETERMINADO.
LA INTERPRETACIÓN DEL RESULTADO QUEDA A CRITERIO MÉDICO DEPENDIENDO, PRINCIPALMENTE,
DEL HISTÓRICO DE LOS RESULTADOS ANTERIORES.
COBRE
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: COBRE URINARIO (CU-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA (50 ML) TOMADA EN EL ÚLTIMO DÍA DE
LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: 5,1 A 31,8 ΜG/L.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: DEBIDO A LA BAJA TOXICIDAD DEL COBRE, SU I.B.M.P. NO ESTÁ DETERMINADO.
CROMO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: CROMO URINARIO (CR-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA EN EL
ÚLTIMO DÍA DE LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 5 ΜG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
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MANGANESO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: MANGANESO URINARIO (MN-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (50 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 8 ΜG/L.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
MERCURIO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: MERCURIO URINARIO (HG-U).
MUESTREO: SE RECOMIENDA LA COLECTA DE LA PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA. SI EL
ACOMPAÑAMIENTO DE LA COLECTA POR EL PERSONAL DEL SERVICIO MÉDICO ES JUZGADA
IMPORTANTE, RECOMENDAMOS LA COLECTA DE ORINA (20 ML) PRE JORNADA.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC V.R.: HASTA 5 ΜG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: PARA EVITAR LA CONTAMINACIÓN EXÓGENA DE LA MUESTRA, LA COLECTA DEBE SER REALIZADA
EN LOCAL ALEJADO DEL TRABAJO. PARA POSIBILITAR LA INTERPRETACIÓN DE LA EVOLUCIÓN DE LOS
RESULTADOS A LO LARGO DEL TIEMPO, LAS MUESTRAS DEBEN SER TOMADAS SIEMPRE EN EL MISMO
MOMENTO.
NÍQUEL
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: NÍQUEL URINARIO (NI-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA PRE JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA EN EL ÚLTIMO DÍA
DE LA SEMANA DE TRABAJO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 8 ΜG/L (NR-7 REDACCIÓN DE 1978: HASTA 23 ΜG/L).
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: LA EXPOSICIÓN A ESTE AGENTE PREDISPONE AL CÁNCER, ESPECIALMENTE PULMONAR Y
NASAL, CONTINUAMOS RECOMENDANDO SU MONITOREO.
PLOMO:
PARA PLOMO INORGÁNICO EXISTEN VARIOS IBES, DOS DE DOSIS INTERNA:
PLOMO EN SANGRE (PB-S).
PLOMO URINARIO (PB-U) Y DIVERSOS INDICADORES DE EFECTO:
ÁCIDO DELTAMINOLEVULÍNICO URINARIO (ALA-U).
ZINC-PROTOPORFIRINA ERITROCITARIA (ZPP).
PROTOPORFIRINA ERITROCITARIA (PROTO / PPE) - ABANDONADO EN PRO DEL ALA-U Y LA ZPP.
COPROPORFIRINA EN ORINA (COPRO) - ABANDONADO EN PRO DEL ALA-U Y LA ZPP. PARA PLOMO
ORGÁNICO (PLOMO TETRAETILA).
PLOMO URINARIO (PB-U).
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PLOMO INORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: PLOMO EN SANGRE (PLUMBEMIA / PB-S).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SANGRE HEPARINIZADA (10 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES
CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 40 ΜG/DL.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
PLOMO INORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ÁCIDO DELTAMINOLEVULÍNICO URINARIO (ALA-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA (20 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC, PROTEGIENDO LA MUESTRA DE LA INCIDENCIA DIRECTA DE LUZ.
V.R.: HASTA 4,5 MG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE.
OBS.: EL ALA-U SE ENCUENTRA AUMENTADO EN PACIENTES CON CIERTAS PORFIRIAS (RAROS
DEFECTOS CONGÉNITOS DEL METABOLISMO DEL HEME). LA EXPOSICIÓN PROLONGADA DE LA
MUESTRA A LUZ INTENSA LLEVA A LA DEGRADACIÓN DE ESTE METABOLITO.
PLOMO INORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ZINC-PROTOPORFIRINA ERITROCITARIA (ZPP).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SANGRE HEPARINIZADO (2 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES
CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC, PROTEGIENDO LA MUESTRA DE LA INCIDENCIA DIRECTA DE LUZ.
V.R.: HASTA 40 ΜG/DL.
MÉTODO ANALÍTICO: FOTOFLUORIMETRÍA.
OBS.: NIVELES AUMENTADOS DE ZPP SON TAMBIÉN ENCONTRADOS EN ANEMIAS FERRIPRIVAS Y
CIERTAS PORFIRIAS.
PLOMO INORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: PROTOPORFIRINA LIBRE ERITROCITARIA (PROTO / PPE).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SANGRE HEPARINIZADO (2 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES
CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC, PROTEGIENDO LA MUESTRA DE LA INCIDENCIA DIRECTA DE LUZ.
V.R.: HASTA 60 ΜG/DL.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE.
OBS.: EL USO DE ESTE INDICADOR FUE ABANDONADO EN FAVOR DE LA ZPP Y DEL ALA-U.
PLOMO INORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: COPROPORFIRINA EN ORINA (COPRO).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA (20 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC, PROTEGIENDO LA MUESTRA DE LA INCIDENCIA DIRECTA DE LUZ.
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PLOMO ORGÁNICO
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: PLOMO EN ORINA (PB-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (75 ML
CADA UNA) TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 50 ΜG/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: AUNQUE PRINCIPALMENTE UTILIZADO COMO INDICADOR DE LA EXPOSICIÓN AL PLOMO
ORGÁNICO (PRINCIPALMENTE EL PLOMO TETRAETILA, UN ADITIVO DE LA GASOLINA EN DESUSO).
VARIOS AUTORES SUGIEREN EL USO DE ESTE I.B.E. TAMBIÉN PARA EL MONITOREO DE LA EXPOSICIÓN
AL PLOMO INORGÁNICO. CON ESTA FINALIDAD, EL HORARIO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO Y EL BEI
(LÍMITE BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN) ES DE 50 ΜG/G DE CREATININA.
ZINC:
LA EXPOSICIÓN OCUPACIONAL AL ZINC PUEDE SER MONITOREADA DETERMINANDO:
ZINC URINARIO (ZN-U).
ZINC SÉRICO (ZN-S).
ZINC
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ZINC URINARIO (ZN-U).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML) TOMADA
DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: 150 A 700 ΜG/L.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: EL ZINC ES UN METAL ESENCIAL, PRESENTE EN MUCHOS COMPLEJOS MULTIVITAMÍNICOS CON
SALES MINERALES. EL USO DE ÉSTOS ELEVA LOS NIVELES DE ZINC SÉRICO Y URINARIO.
ZINC
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: ZINC SÉRICO (ZN-S).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE SUERO (5 ML). EL MOMENTO DE LA COLECTA NO ES CRÍTICO. DESPUÉS
DE LA COLECTA DE 10 ML DE SANGRE SIN ANTICOAGULANTE, DEJAR RETRAER EL COÁGULO Y
SEPARAR EL SUERO.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC V.R.: 59 A 121 ΜG/100 ML.
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (EAA).
OBS.: EL ZINC ES UN METAL ESENCIAL, PRESENTE EN MUCHOS COMPLEJOS MULTIVITAMÍNICOS CON
SALES MINERALES. EL USO DE ÉSTOS ELEVA LOS NIVELES DE ZINC SÉRICO Y URINARIO.
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CIANUROS
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: TIOCIANATO URINARIO (SCN).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML
CADA UNA) TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: HASTA 2,5 MG/G DE CREATININA (NO FUMADORES).
MÉTODO ANALÍTICO: ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE.
OBS.: EL TABAQUISMO ES LA MAYOR FUENTE DE INTERFERENCIA EN LA DETERMINACIÓN DEL
TIOCIANATO URINARIO. DOS FORMAS DE SUPERAR ESTA DIFICULTAD PUEDEN SER UTILIZADAS EN LA
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS:
1. ESTABLECER LA DIFERENCIA ENTRE LOS RESULTADOS DE FINAL DE JORNADA Y DE INICIO DE
JORNADA Y UTILIZAR ESTE VALOR PARA COMPARAR COM EL V.R. Y EL I.B.M.P.; Y
2. DESDE QUE NO EXISTA EXPOSICIÓN CONJUNTA A UN AGENTE CARBOXIHEMOGLOBINIZANTE
(EX: MONÓXIDO DE CARBONO, DICLOROMETANO), DETERMINAR TAMBIÉN LA
CARBOXIHEMOGLOBINA EN SANGRE (OTRO INDICADOR INFLUENCIADO POR EL TABAQUISMO).
LA RAZÓN ENTRE LOS VALORES DE SCN Y COHB NO DEBE SER SUPERIOR A 3.
FENOL
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: FENOL URINARIO (FENOL).
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA AL FINAL DE LA JORNADA DE TRABAJO (20 ML
CADA UNA) TOMADAS DESPUÉS DE, AL MÍNIMO, DOS DÍAS SEGUIDOS DE EXPOSICIÓN.
CONSERVACIÓN: NEVERA A 4ºC.
V.R.: 20 G/G DE CREATININA.
MÉTODO ANALÍTICO: CROMATOGRAFÍA A GAS.
FLÚOR Y FLUORUROS
INDICADOR BIOLÓGICO DE EXPOSICIÓN: FLUORURO URINARIO.
MUESTREO: UNA MUESTRA DE ORINA AL INICIO Y OTRA DEL FINAL DE LA JORNADA (50 ML CADA UNA)
TOMADAS EN EL 4º DÍA DE TRABAJO DE LA SEMANA, EN FRASCOS DE POLIETILENO, CONTENIENDO 0,1
G DE EDTA PARA CADA 50 ML DE ORINA.
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