Ana Isabel Dias Ferreira

C.Nut. A 3 ano Imunologia

18.03.1 1

Radioimunoensaio (RIA)
O radioimunoensaio foi desenvolvido em 1960 e uma das tcnicas mais sensveis existentes para a anlise quantitativa das reaces antignio - anticorpo, permitindo medidas rpidas e precisas, que podem ser feitas directamente no lquido biolgico. O RIA tambm um mtodo de elevada especificidade e por isso os ensaios podem acontecer directamente no lquido biolgico. O radioimunoensaio pode ser utilizado para quantificar hormonas, drogas, marcadores tumorais e anticorpos e antignios em doenas parasitrias. H muitas variaes, mas o princpio o mesmo: a quantidade de reagente marcado (antignio ou anticorpo) quantifica o antignio ou anticorpo no marcado na amostra. Este mtodo tem como princpio geral uma reaco de competio por um receptor comum entre uma substncia a ser determinada e a mesma substncia marcada radioisotopicamente. Os radioistopos podem ser Iodo 125 ou 131, Cobalto ou Trcio. Utiliza-se neste mtodo um leitor radiomtrico, anticorpos radioactivos, antignios radioactivos e a amostra a ser testada. Existem dois mtodos para realizar esta tcnica. Num deles, uma quantidade conhecida de antignios marcados e antignios da amostra so misturados e reagem competitivamente com uma quantidade fixa de anticorpos fixos na fase slida. Depois que a reaco imune atinge o equilbrio, a mistura lavada para remover os conjugados no reactivos, que so separados do imunocomplexo preso na fase slida. A concentrao do analito ser inversamente proporcional ao sinal emitido. No outro mtodo um anticorpo ligado fase slida forma um imunocomplexo. Um segundo anticorpo conjugado liga-se ao imunocomplexo. realizada uma lavagem para retirar os anticorpos conjugados no reactivos. Tambm neste mtodo a concentrao do analito ser inversamente proporcional ao sinal emitido. Quanto s limitaes desta tcnica pode-se apontar o custo do teste, a vida mdia dos reagentes e o risco operacional.

Imagem 1: Primeiro mtodo de realizar RIA.

Imagem 2: Segundo mtodo de realizar RIA.

Bibliografia: y Kindt, Goldsby, Osborne (2007) Kuby Immunology 6 Ed., W. H. Freeman and Company. New York, USA; y Testoni, Natalia (2009) Imunoensaios. http://labvw.com.br/2008/material_cientifico/novos/Imunoensaios%20Natalia%20Witzke%20Test oni.pdf.