Iluminacin Khler Introduccin La iluminacin de la muestra es la variable ms importante para obtenerimgenesde alta calidad.

No obstante, con frecuencia la mayora de lossofisticados y bien equipadosmicroscopios no pueden rendir las imgenesexcelentes de la muestra. Los cambios ms importantes en la microscopia surgieron a partir de loscomienzos del siglo XX,cuando el gran fsico Alemn, el Dr. AugustKhler,desarroll un nuevo sistema de iluminacin, quean hoy en da se maneja y llevasu nombre. Esta es recomendada por todos los fabricantes de losmicroscopiosmodernos del laboratorio permitiendo as que el microscopista utilice elmicroscopioasu capacidad mxi ma. La iluminacin Khler consiste en regular la marcha de los rayos de luz,centrando la mayor intensidad de luz y cubriendo exactamente el dimetro frontalde cada lente objetiva en su apertura numrica especfica, de esta manera, poderaprovechar al 100% l a luz emitida por la fuente emisora. Caractersticas La iluminacin Khler se compone de dos diafragmas: 1.Uno de campo situado a nivel de la lmpara. 2.Uno de apertura o iris, situado debajo del condensador. La imagen del diafragmade campo es proyectada en el plano de la preparacinpor el condensador, el cual se desplazar verticalmente hasta conseguir unaimagen lo ms ntida posible del diafragma La iluminacin ms ntida se consigue cundo el condensador se encuentra lo ms cerca de la preparacin. El diafragma de campo sirve para regular la apertura de la iluminacin, es decir, el contraste, la profundidad de campo y el poder de resolucin: a)Cerrando ste diafragma se incrementan los contrastes y la profundidad de campo y disminuye el poder de resoluci n. Es imprescindible asegurar que el filamento de la lmpara est bien centrado conrelacin al condensador de la lmpara, que el haz est bien dirigido por el espejohacia la cara de entrada del condensador. El diafragma iris controla el ngulo de los rayos luz que emergen del condensador y que alcanzan la muestra, tiene gran ingerencia en la resolucin, contraste, profundidad de foco y en el brillo de la imagen debido al uso incorrecto de la fuente de luz,que conduce generalmentea la iluminacin inadecuada

La diversidad celular
Todos los seres vivos estn formados por clulas (a excepcin de los virus, lo que ha llevado a algunos autores a no considerarlos 'vivos'). Las clulas ms pequeas son, claro est, las procariotas. Una bacteria como Escherichiacoli(habitante de los intestinos de mamferos) mide tpicamente del orden de unas pocas micras, aunque tambin tenemos, en el otro extremo, a la bacteria quimiolittrofa Thiomargaritanamibiensis (habitante del fondo marino), que puede apreciarse a simple vista con sus 750 micras (0.75 mm). Este tamao es bastante mayor que el de los eucariotas ms pequeos, como el alga unicelular Chlorella nana, que no supera las 10 micras. Sin embargo, los rcords de mayor tamao sin duda son eucariotas (los huevos de gallina, por ejemplo, cuyo gran volumen se debe a las sustancias de reserva). Algunas neuronas humanas pueden medir mas de un metro de longitud, desde la espina dorsal hasta los dedos. Y neuronas ms largas se pueden encontrar en animales tales como los elefantes o las ballenas. Estas diferencias en tamao y forma no son gratuitas: tienen que ver con las condiciones en las que viven esas clulas. A un organismo unicelular de vida libre le conviene tener un pequeo tamao, porque de esta forma maximiza su superficie en relacin a su volumen, y de esta forma puede intercambiar nutrientes muy eficientemente por difusin. Por su parte, ser grande permite compartimentalizar funciones (los orgnulos de los eucariotas), lo que permitir aumentar elrendimiento de las reacciones qumicas del metabolismo. La diversidad de clulas conocidas es enorme, solo en el ser humano se pueden contar ms de 200 tipos celularesdiferentes; cuyas diferencias tienen que ver con la ontogenia, morfologa y, en ultima instancia, con su funcin. Sin embargo, a nivel fundamental, todas las celulas utilizan las mismas clases de biomolculas y hacen prcticamente lo mismo: obtener energa (metabolismo) y realizar una copia de s mismas (reproduccin). Ejemplos: Espermatozoides (clula sexual) . Leucocitos (Gl.Blancos ) . Neurona (Clula Nerviosa) Fibra Muscular (Tejidos Musculares ) . Plaquetas (Fragmento Clulares) .Hepatocotps (Clula del Higado) Hematies (Gl.Rojos ) .

Diversidad celular y niveles de organizacin Organismos unicelulares y pluricelulares Los seres vivos estn constituidos por una clula. Los organismos unicelulares, formados slo por una clula, realizan todas las funciones vitales, mientras que los organismos pluricelulares, formados por muchas clulas, se produce una especializacin que hace ms eficaz al conjunto. As, hay muchas clulas encargadas de la nutricin del individuo pero tambin las hay diferenciadas para realizar las funciones de relacin y reproduccin. En los organismos unicelulares se pueden encontrar dos tipos de organizacin celular, procariotas y eucariotas . A este tipo celular pertenecen organismos unicelulares, como los protozoos, pero tambin las clulas que forman los seres vivos pluricelulares. Pongamos como ejemplo la Chlamydonoma(organismo unicelular perteneciente a las algas verdes), que con frecuencia se divide y forma 2 individuos a partir de uno solo, este proceso es conocido como mitosis, el cual utilizan los organismos unicelulares para su reproduccin y permite su crecimiento. Organismos coloniales Entre las algas verdes hay clulas que se agrupan y se relacionan entre s denominadas colonias. Si alguna clula se asla del resto y a continuacin va a formar una nueva colonia al sufrir varias mitosis. El alga Volvox se comporta de manera diferente. Cuando una clulas no reproductiva de estas se separa no podr efectuar la mitosis. Lo que sucede es que Volvox ha atravesado la frontera que separa a los organismos unicelulares y pluricelulares. En este caso no puede llamarse eso a una colonia. Diferenciacin celular La diferenciacin celular no es ms que el proceso de especializacin y distribucin del trabajo entre las clulas. De la agrupacin de estas clulas ya especializadas se forman los tejidos y estos a su vez forman los rganos, que dan origen a los aparatos y sistemas.

Esta especializacin y divisin del trabajo aumenta la eficiencia de los seres vivos y su capacidad y velocidad de respuesta a los estmulos y cambios que se efecten en el ambiente. El mecanismo de esta diferenciacin se debe probablemente a los genes que contienen codificados los mensajes de organizacin y caracterstica de cada clula. Diversidad Celular La diversidad celular es resultado de la diferenciacin y especializacin de las clulas, tal como vimos anteriormente. Este proceso trae como consecuencias la formacin de numerosos tipos de clulas que ejercen diferentes funciones en el organismo. La especializacin ejercida en determinadas funciones dentro del organismo aumenta su eficacia. Formacin de tejidos La asociacin de clulas que realizan funciones especficas da origen a los tejidos. La especializacin en ciertas funciones trae como consecuencias la diferenciacin celular. Al mismo tiempo la clulas tienden a adoptar las caractersticas estructurales que las capacitan por el desempeo de su funcin especifica. Diversidad y diferenciacin de los tejidos Un vegetal o un animal esta formado por rganos, diferentes por su forma y funciones, pero dispuestos y coordinados de tal manera que constituye un individuo capas de realizar las funciones propias de cada ser vivo. Cada rgano a su vez esta formado por tejidos diferentes que desempean determinadas funciones. Tejidos vegetales Estos tejidos se han dividido en:
yLos tejidos meristemticos: formado por clulas jvenes con gran capacidad de multiplicacin. Su funcin se relaciona con el crecimiento de las plantas. yTejidos permanentes: formados por clulas muy diferenciadas con funciones muy especificas. Se clasifican en tejidos de revestimiento, parnquimas, tejidos de sostn y tejidos conductores.

Tejidos de revestimiento: protegen a las plantas y evitan la perdida excesiva de agua. La capa protectora es la epidermis, que segrega la cutina, que a su vez forma la cutcula. Parnquimas: formado por clulas vivas. Cumple diversas funciones segn el rgano donde se encuentran. Existen parnquimas clorofilianas, parnquimas de reserva y parnquimas aerfero. Tejido de sostn: comprende un conjunto de tejidos duros que forman el esqueleto de las plantas y las mantiene erguidas Tejidos conductores: son aquellos que transportan el agua, las sales minerales y son de dos clases el leo y el floema. Tejidos animales
yTejido epitelial: est formado por capas de clulas de forma cilndrica, cbica o plana, unidas por una escasa sustancia. Se conocen diversos tipos de tejido epitelial: simple, que puede ser plano, cilndrico y cbico; y estratificado pavimentoso, cilndrico o columnar. El tejido epitelial protege al cuerpo de los factores externos y los relaciona con el ambiente a travs del tacto yTejido sanguneo y linfa: constituye la sangre en la cual estn suspendidos elementos como los glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas en una sustancia. Entre sus funciones estn el transporte de oxgeno, CO2 y las sustancias nutritivas. La linfa es un lquido en el que se hallan suspendidos ciertos elementos, se le relaciona con las distribucin de sustancias nutritivas.

yTejido conjuntivo: es el tejido que sostiene el organismo animal y que conecta sus distintas partes. Da lugar a varios tipos de tejido, como el tejido conectivo laxo, que se infiltra en los rganos dando consistencia al tejido funcional, y el tejido conectivo denso, que aparece en la sustancia dura de los huesos y en la dentina. El tejido conectivo se caracteriza por tener gran cantidad de sustancia fundamental (que est entre las clulas del tejido) y que puede ser fluida, slida o semislida. El tejido conectivo denso regular, es blanco y da lugar a la mayora de los tendones y ligamentos; el tejido conjuntivo elstico, es amarillo. Cumple funciones de amortiguacin y sostn. yTejido adiposo: recubre los rganos vitales para amortiguarlos (como los riones) y sirve tambin de almacn del exceso de alimento. yTejido cartilaginoso: forma parte de las articulaciones y de las zonas de crecimiento de los huesos, est relacionado con el soporte del cuerpo y da flexibilidad a las articulaciones. yTejido seo: tejido duro y resistente formado por clulas seas (osteoblastos). Los huesos tienen una parte orgnica y otra inorgnica formada por sales de calcio, fosfatos y carbonatos. Los huesos forman el esqueleto, que sir ve de soporte al cuerpo y de punto de insercin a los msculos. Lo ms importante radica en la mdula sea en donde se producen los glbulos rojos y blancos. yTejido muscular: est formado por clulas musculares con poco tejido intersticial entre ellas. Estos tejidos que se contraen y se relajan debido a las miofibrillas comprenden los msculos estriados, lisos y msculos cardiacos. El tejido muscular estriado interviene en los movimientos del cuerpo facilitando los movimientos de relajacin; el tejido muscular liso contribuye al funcionamiento de algunos rganos; el tejido muscular cardiaco, que tiene caractersticas tanto del liso como del estriado, esta relacionado con los movimientos del corazn. yTejido nervioso: Este complejo grupo de clulas transfiere informacin de una parte del cuerpo a otra; de esta manera coordina el funcionamiento de un organismo y regula su comportamiento. Cada neurona o clula nerviosa consta de un cuerpo celular con distintas ramas llamadas dendritas y una prolongacin llamada axn. Las dendritas conectan unas neuronas con otras y transmiten informacin hacia el cuerpo de la neurona; el axn transmite impulsos a un rgano o tejido.

Niveles de organizacin Los niveles son todos aquellos tipos de organizacin de la naturaleza, estos van desde el ms simple al ms complejo. Estos son los niveles de organizacin. Desde el punto de vista viviente se puede considerar los siguientes niveles: clulas, tejido, rgano, sistema, individuo, poblacin, comunidad, ecosistema, biosfera. Clula: unidad mnima de un organismo capaz de actuar de manera autnoma. Todos los organismos vivos estn formados por clulas, y en general se acepta que ningn organismo es un ser vivo si no consta al menos de una clula. Algunos organismos microscpicos, como bacterias y protozoos, son clulas nicas, mientras que los animales y plantas estn formados por muchos millones de clulas organizadas en tejidos y rganos. Tejidos: agrupacin de clulas iguales que realizan una funcin especializada, vital para el organismo. Cada tejido realiza una funcin propia. rgano: parte diferenciable del organismo, con forma, ubicacin y funcin definidas. Los rganos suelen estar compuestos por varios tejidos distintos. Slo la cooperacin de todos los rganos hace posible el funcionamiento del organismo. Sistema: asociacin de rganos organizados que juntos cumplen funciones importantes para el organismo. Individuo: ser vivo formado por un conjunto de clulas organizadas en tejidos, rganos y sistemas, que est capacitado para realizar individualmente intercambios de materia y energa con el medio ambiente, y para formar rplicas de s mismo(reproduccin). Representa la cima de la organizacin biolgica y constituye el punto de partida de los niveles ecolgicos.

Comunidad: Podra definirse como el conjunto de poblaciones biolgicas que comparten un rea determinada y coinciden en el tiempo. Ecosistema: sistema dinmico relativamente autnomo formado por comunidades naturales y su medio ambiente fsico. Tiene en cuenta las complejas interacciones entre los organismos. Biosfera: es el conjunto de ecosistemas complejos que engloban, en conjunto, todos los organismos vivos del planeta. Esta perspectiva nica de la Tierra permite apreciar la inmensidad y complejidad de la biosfera terrestre. Es el ltimo de los niveles de organizacin. Conclusin Es maravilloso todo lo que somos nosotros, y todos los individuos de naturaleza compleja, es sorprendente saber que nuestra vida, y la del planeta prescinde sobre organismos microscpicos: las clulas. No pareciera que estos diminutos cuerpos fueran capaces de formar todo lo que conocemos. El tema visto nos aclar las cosas, aunque an falta por muchas cosas por descubrir.

CLOROFILA
Introduccin

La clorofila es el pigmento fotorreceptor responsable de la primera etapa en la transformacin de la energa de la luz solar en energa qumica, y consecuentemente la molcula responsable de la existencia de vida superior en la Tierra. Se encuentra en orgnulos especficos, los cloroplastos, asoc iada a lpidos y lipoprotenas.

Distribucin global de la clorofila en la Tierra. Aparece en color verde brillante, y es notable su concentracin en las zonas templadas y polares de los ocanos. En las zonas costeras la clorofila es tambin abundante, pero parte del efecto en la fotografa es debido a que los sedimentos tienen una absorcin semejante. Fotografa de CommiteeonEarthObservationsatellites En el campo de la Ciencia y la Tecnol oga de los Alimentos el inters fundamental de la clorofila est en el color que confiere a los vegetales verdes, ya que desde el punto de vista nutricional, solamente el magnesio tiene alguna relevancia, y ms bien escasa. La falta de estabilidad del col or de la clorofila es un problema importante. No obstante esta falta de estabilidad, se utiliza tambin la clorofila extrada de vegetales como colorante natural en algunos alimentos. Es soluble en disolventes polares, como alcohol o acetona.
Estructura de la clorofila

Existen dos tipos principales de clorofila, la clorofila a y la clorofila b. La diferencia entre ellas es que la clorofila b tiene un grupo formilo ( -CHO) en lugar de un grupo metilo de la clorofila en uno de los carbonos del anillo de porfirina. En los vegetales superiores, la ms abundante es la clorofila a
Clorofilida

Atomo de magnesio Grupo caracterstico del tipo de clorofila Es un grupo metilo en la clorofila a y un grupo formilo en la clorofila b Zona de unin con el fitol

Clorofila

Atomo de magnesio Grupo caracterstico del tipo de clorofila Es un grupo metilo en la clorofila a y un grupo formilo en la clorofila b Zona de unin con el fitol

En algunas algas inferiores existen otros tipos de clorofila, llamadas clorofila c y d.

Alteraciones de la clorofila

La clorofila puede sufrir distintos tipos de alteraciones. La ms frecuente, y la ms perjudicial para el color de los alimentos vegetales que la contienen, es la prdida del tomo de magnesio, forman do la llamada feofitina, de un color verde oliva con tonos marrones, en lugar del verde brilante de la clorofila. Esta prdida del magnesio se produce por sustitucin por dos iones H +, y consecuentemente se ve favorecida por el medio cido. La prdida es irreversible en medio acuoso, por lo que el cambio de color de los vegetales verdes es un fenmeno habitual en procesos de cocinado, enlatado, etc. La clorofila b es algo ms estable que la clorofila a. Hay que tener en cuenta que los vegetales son siempre cidos, y que en el tratamiento trmico se liberan generalmente cidos presnetes en vacuolas en las clulas, y que hacen

descender el pH del medio.

Efecto del calentamiento (cocinado) sobre la clorofila de las habas Fotografa por cortesa de Carlos de Vega La adicin de bicarbonato, que eleva el pH, ayuda a mantener el color, pero a costa de aumentar la destruccin de la tiamina. Tambin estabiliza algo el color la presencia de sal comn o de compuestos solubles de magnesio o calcio El calentamiento de materiales que contienen clorofila produce tambin isomerizaciones dentro de la molcula, que pueden llegar a afectar hasta el 10% del contenido en el cocinado normal o en el escaldado de veget ales verdes. Esta isomerizacin carece de importancia desde el punto de vista alimentario. En la clorofila puede hidrolizarse el enlace ster que mantiene unido el grupo fitol. Esta hidrlisis est catalizada por el enzima clorofilasa, presente en los vegetales verdes. La estructura que queda al eliminarse el fitol recibe el nombre de clorofilida. Su color es semejante al de la clorofila, y consecuentemente su formacin no representa un problema desde ese punto de vista, e incluso son algo ms estables qu e las propias clorofilas frente a la prdida del magnesio. La feofitina es capaz de unir eficientemente iones de Zn o de Cu en el lugar que ocupaba el magnesio, formando pigmentos estables y de color verde atractivo. La toxicidad del cobre limita su uso, pero los complejos cpricos de

clorofilas o clorofilidas estn autorizados en la Unin Europea como colorantes alimentarios en algunos productos. Posiblemente la formacin de pequeas cantidades de complejos cpricos, que mantienen el color, explica la reiteracin con la que se especifica en los libros de cocina antiguos el uso de recipientes de cobre para cocinar los guisantes.

Clorofila. Imagen cortesa de FoodIngredientSolution La clorofila se puede extraer fcilmente mediante solventes orgnicos polares, como etanol, metanol o acetona, y utilizarse como colorante alimentario. En Europa tiene el cdigo E -140. Los complejos cpricos tienen el cdigo E-141.

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