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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, Decana de Amrica

Facultad de Qumica, Ingeniera Qumica e Ingeniera Agroindustrial E.A.P. de Ingeniera Qumica Departamento Acadmico de Qumica Analitica

Trabajo de Sustentacin: Determinacin de Lactosa en Leche

Docente: Alumno: Turno:

Qco. Lengua Calle, Rosa Laura Laurente Durand, R. Robin Jueves 8-12 h.

NDICE

I.

Introduccin

pag. 03

II.

Fundamento Terico

pag. 04

III.

Metodologa en la Determinacin de Lactosa

pag. 07

IV.

Conclusiones

pag. 10

V.

Bibliografa

pag. 10

INTRODUCCIN

El anlisis al que se hace referencia se realiza con el fin de hacer un estudio de la calidad de una muestra de leche de una marca y lote en concreto y comprobar que es apta para el consumo. Para garantizar la perfecta conservacin de sus facultades y veracidad de los resultados obtenidos al analizar la muestra, durante todo el tiempo que dure el estudio de la muestra, esta se debe guardar en unas condiciones ptimas de temperatura y humedad. Por consiguiente se guarda a 4C. Tambin se debe tener en cuenta el tiempo mximo que el producto se puede conservar abierto a estas condiciones, y que en algunos casos viene indicado por el fabricante. Entre los componentes de la leche se encuentran: el cido lctico, las protenas, la casena y la lactosa. Estas sustancias son las que permiten a la leche complementar la alimentacin resultando esenciales en las reacciones metablicas de las clulas, as como la aportacin de materia grasa, calcio y enzimas; todas ellas, sustancias cuyo fin es el de satisfacer las demandas del organismo. Es por esto, que estas sustancias estn directamente relacionadas con la calidad de la leche y deben entrar dentro del rango indicado en los mtodos oficiales que rigen la fabricacin, anlisis, almacenamiento, y comercializacin de la misma.

FUNDAMENTO TERICO
La lactosa es el azcar principal de la leche. Este disacrido se encuentra en una concentracin de entre 40 y 50 g/l en la leche de vaca y en 75 g/l en la leche materna. Este azcar est formado por glucosa y por galactosa. La lactosa tiene una gran importancia en el cuerpo humano: primero, porque favorece el desarrollo de la flora intestinal y segundo, y ms importante, porque uno de los monosacridos que la forman, la galactosa es fundamental para el desarrollo del sistema nervioso central. Este azcar es imprescindible en la sntesis de los cebrsidos, sustancias complejas que forman parte de las estructuras del sistema nervioso central. Incluso se ha llegado a demostrar, en algunos mamferos una coincidencia bastante asombrosa entre la cantidad de lactosa contenida en su leche y la velocidad del desarrollo del sistema nervioso central. Cuando la lactosa esta disuelta se produce un equilibrio entre sus formas alfa y beta que depende de la temperatura y del pH.

En determinados grupos humanos, como la raza negra, se padece intolerancia a este azcar, debido a la carencia de estas personas de la enzima lactasa que se encarga de la hidrlisis de este disacrido. Que es adems el responsable junto a los grupos amino de los aminocidos y las protenas, los culpables del oscurecimiento de la leche por calentamiento en procesos industriales.

Determinacin de la composicin de la leche El siguiente esquema explica los pasos a seguir para la descomposicin de la leche.

El estudio se centra en la determinacin de la lactosa, por tanto se har enfoque en los pasos detallados para su determinacin.

Mecanismo de Reaccin de la Lactosa Para el caso, se har empleo de la reaccin de la lactosa con el Reactivo de Fehling. El ensayo con el reactivo de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a xido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad. Si un azcar reduce el R. de Fehling a xido de cobre (I) rojo, se dice que es un azcar reductor (como la lactosa).

Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, el cualfacilita que el azcar est de forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin. Por otra parte, algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a un falso positivo. Al reaccionar con monosacridos, se torna verdoso; si lo hace con disacridos, toma el color del ladrillo. El R. de Fehling est constituido por una mezcla de 2 soluciones: Solucin A: Solucin de Sulfato de Cobre Solucin B: Solucin de Tartrato Mixto de Sodio y Potasio e Hidrxido de Sodio Las reacciones son las siguientes: Cu2+ Cu+ + 1eCu+ + OH- CuOH 2CuOH Cu2O + H2O La reduccin del cprico a cuproso involucra una transferencia de 1 electrn, por lo que el sulfato cprico presentar un peso equivalente a su peso molecular. La lactosa presenta el mismo cambio de oxidacin, de forma tal que anlogamente presenta un peso equivalente igual a su peso frmula.

METODOLOGA EN LA DETERMINACIN DE LACTOSA

1. MATERIALES Matraces volumtricos de 100 mL Matraces Erlenmeyer de 125 y 300 mL Pipetas volumtricas de 5 y 10 mL Pipetas de 10 mL graduadas Bureta de 25 mL graduada en 0.1 mL Placa caliente.

2. REACTIVOS Acido actico glacial (CH3COOH). Solucin A y B de Fehling Solucin acuosa saturada de subacetato de plomo Solucin acuosa saturada de sulfato de sodio (Na2SO4) Solucin acuosa de yoduro de potasio (KI) al 20% Solucin acuosa al 0.2% de cido benzoico (C6H5COOH) Solucin acuosa de azul de metileno al 0.2% (C37H27N3O3S - 2NaSO3) Solucin de tiosulfato de sodio 0.1N (Na2S2O3.5H2O) Solucin patrn de lactosa

3. PREPARACIN DE REACTIVOS

a. Solucin patrn de lactosa: Disolver 10 g de lactosa anhdra pura y diluir a 1 litro con solucin acuosa al 0.2% de cido benzoico. Determinar el ttulo de lactosa. b. Solucin A de Fehling Disolver 34.639 g de CuSO45H2O en agua y aforar a 500 mL en un matraz volumtrico.

Ajustar la solucin, determinando el contenido de cobre en una alcuota con tiosulfato de sodio 0,1N y yoduro de potasio al 20%, hasta obtener 440.9 mg de cobre por cada 25 mL

c. Solucin B de Fehling Disolver 173 g de tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6.4H2O) y 50 g de hidrxido de sodio en agua, aforar a 500 mL y dejar reposar 2 das

4. ESTANDARIZACIN DEL COBRE EN EL REACTIVO DE FEHLING

Medir con pipeta volumtrica 5 mL de solucin A y 5 mL de solucin B en un matraz Erlenmeyer de 300 mL Calentar a ebullicin en una placa caliente y agregar poco a poco, con una bureta, solucin patrn de lactosa hasta la casi reduccin total del cobre. Aadir 1 mL de azul de metileno y continuar la valorizacin hasta desaparicin del color azul. Anotar el volumen gastado y calcular la normalidad del sulfato de cobre.

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Antes que nada, es necesario obtener una muestra representativa de leche cuya composicin sea completamente homognea. Para lo cual debe ser movida en el contenedor dado (sea matraz o vaso de precipitado). En caso se encuentre heterognea, se debe calentar por medio de bao Mara sin provocar la aparicin de grumos. Una vez conseguido el objetivo, se enfra la muestra y se procede con el anlisis: Tomar una alcuota de 10 mL de sustancia problema (leche a analizar), luego pesarla en una balanza analtica (anotar la masa) y diluirla con 25mL de agua destilaza en un matraz volumtrico.

Aadir 6 mL de solucin saturada de subacetato de plomo, 10 mL de solucin acuosa saturada de sulfato de sodio, 1 mL de cido actico glacial y mezclar. El medio cido permite la descomposicin de la leche en casena y grasas como precipitado y al suero que contiene a la lactosa. Dejar reposar media hora. Este proceso de digestin permite una mejor formacin y acumulacin de precipitado de casena y grasas de la leche. Sera recomendable tambin mencionar que sera acertado realizar este proceso en ausencia de luz para evitar la posibilidad de reacciones fotolticas sobre los slidos y por tal, interferencias en el anlisis posterior Aforar a la marca del matraz con agua, filtrar y el filtrado colocarlo en una bureta. Se puede realizar lavado con pequeas dosis de cido actico diluido para asegurar la presencia total de la lactosa en el filtrado.

Proceder a valorar 10 mL de reactivo de Fehling cuya normalidad es conocida por la estandarizacin aadiendo 1 mL de indicador azul de metileno y anotar el volumen gastado. De los datos obtenidos, calcular la masa de lactosa presente en la alcuota inicial y compararla con la masa de la misma para obtener el porcentaje de lactosa en la leche

6. CLCULOS a. Estandarizacin de Cobre en el R. de Fehling NCuSO4 = b. % Lactosa Wlactosa = NCuSO4 x V alcuota de react de Fehling x Peq lactosa

CONCLUSIONES

Es posible determinar la composicin de lactosa de acuerdo al mtodo de Fehling por accin de la oxidacin de la misma dentro de una muestra de leche. De acuerdo a las reacciones principales, es posible determinar la presencia de lactosa por el mtodo de Benedict ya que tambin se basa en la reduccin de una solucin cprica. Es importante el medio que se aplica durante el anlisis para garantizar la formacin de productos esperados en las reacciones establecidas.

BIBLIOGRAFA

http://www.colpos.mx/bancodenormas/nmexicanas/NMX-F-509-1988.PDF http://www.iesalonsoquesada.org/inicio/fisica/departafyq/TecnicasLaboratorio/9AnalisisLeche.pdf http://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo_de_Fehling

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