U.C.

S
FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
LABORATORIO DE INMUNOHEMATOLOGIA
WILLIANS SANCHEZ RODRIGUEZ

PRACTICA
CONTROL DE CALIDAD EN SUEROS HEMOCLASIFICADORES

OBJETIVO
• E l alumno identificará cual es el propósito de realizar a cabo un buen control
de calidad de los reactivos antisueros hemoclasificadores en el banco de sangre.
Fundamento:

Avidez. Es la intensidad global de la interacción entre 2 moléculas, como el antígeno –

anticuerpo, la avidez depende de la afinidad y la valencia de las interacciones, por
consiguiente la avidez de la IgM por un antígeno multivalente puede ser muy superior a la
avidez de una molécula de IgG dimérica por ese mismo antigeno.

La especifidad se atribuye a los receptores para el antígeno de los linfocitos, que pueden
unirse a una molécula, pero no a otra que presente tan sólo mínimnas diferencias
estructurales respecto ala primera.( 1)

GENERALIDADES:

La calidad puede definirse como término subjetivo que se utiliza para señalar si una
persona , objeto o servicio es bueno o malo, el término calidad se hace objetivo, si se fijan
las especificaciones que deben llevar un producto o servicio, para decir si tiene calidad. A
su vez el control de calidad se divide en:

1. Control de calidad interno: procedimiento que utiliza los resultados de un solo

laboratorio con el propósito de controlar la calidad.

2. Control de calidad externo: procedimiento que utiliza los resultados de varios

laboratorios que analizan la misma muestra, con el propósito de controlar la calidad.
(2)
CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS Y CÉLULAS DE FENOTIPO
CONOCIDO:
Dependiendo de la complejidad de las actividades que se realicen en los laboratorios de
cada banco de sangre, así serán los antisueros y células de fenotipo conocido que se
emplearán en cada jornada de trabajo, siendo las básicas: los antisueros y células de
fenotipo conocido.

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Los reactivos son los elementos más importantes para llevar a cabo las pruebas que se
realizan en inmunohgematologia y éstas serán tan exactas como lo sean los reactivos. El
control de calidad para los sistemas ABO, Rho/Hr y para suero de coombs deben realizarse
todos los días en cada jornada.

Para estudios que no se realicen diariamente, se debe realizar los controles cada vez que
esa prueba se lleve a cabo.

Así mismo los medios de reacción en donde se empleen estos materiales, deben ser
vigilados continuamente para asegurar la consistencia, sensibilidad y exactitud, lo que se
logra con una vigilancia en control de calidad de los reactivos.

NORMAS GENERALES:
1. Recepción de reactivos:
2. Verificar la apariencia física del empaque, en el sello de garantía y la caducidad:
¿presenta alteraciones durante el traslado y/o almacenamiento?
3. Verificar características físicas del reactivo: color, transparencia, presencia de
hemólisis y volumen.
4. El almacenamiento debe ser de acorde con las indicaciones del productor.
5. Leer y almacenar los instructivos hasta terminar el lote.
6. Control de calidad de los diferentes sueros y células reactivo

AVIDEZ:

• Es una medida de la capacidad de unión y la velocidad con el cual el anticuerpo

se combina con su correspondiente antígeno.

• Las pruebas de avidez se realizarán de rutina a los antisueros en uso diariamente

antes de trabajar y a una muestra de antisuero de cada nuevo lote.

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 TIEMPO PROMEDIO DE AVIDEZ PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y
CELULAS REACTIVO

ANTISUERO células Tiempo

promedio
de reacción
Anti A A1 15 seg
A2 20 seg
A1B 15 seg
A2B 30 seg
Anti –H A2 60 seg
lectina
Coombs Células 60 seg
sensibilizadas
Anti A1 A1 30 seg
lectina
Anti B B 15 seg
A1B 15 seg
A2B 15 seg
Anti AB A1 15 seg
A2 20 seg
B 15 seg
A1B 30 seg
A2B 45 seg
Anti D 30 seg

ESPECIFICIDAD:
Es la reactividad selectiva de un anticuerpo con su correspondiente antígeno, evitando
el que llegara a reaccionar con otras, por lo que cada antisuero se hace reaccionar con
los diferentes células y se observara si hubo aglutinación inespecífica.

El grado de reacción se califica como fuerte, débil o negativo. Esta técnica puede
realizarse en placa o tubo empleando eritrocitos al 2-5% para determinar la
especificidad del sistema ABO y Rho.
Esta prueba se realizará diariamente a los antisueros de rutinas, antes de empezar a
trabajar y a una muestra de cada nuevo lote que llegue.

ESPECIFICIDAD PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y CÉLULAS

REACTIVO

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REACTIVO CEL A1 CEL.A2 CEL.B CEL O R1r
ANTI A + + - -
ANTI A1 + - - -
LECTINA
ANTI B - - + -
ANTI AB + + + -
ANTI H - + - -
ANTI D +
CONTROL -
Rho

TITULACION:

Esta prueba mide la máxima dilución del antisuero a la cual es capaz de reaccionar con
sus respectivas células. El resultado se expresa como el recíproco de la máxima dilución
que de una aglutinación de 1+ ante un volumen constante de eritrocitos al 2% de células
. A1, A2, B , R1r células sensibilizadas y no sensibilizadas
Se recomienda correr la prueba conjuntamente con antisueros de referencia. Se anota la
lectura por grado de aglutinación de 1+ a 4+( 2)

VALORES REFERENCIA DE TITULACIÓN:

ANTISUERO GRUPO TITULO

MINIMO
AntiA A1 1:256
Anti A1 lectina A2 1:128
A1B 1:128
A2B 1:64
ANTI B B 1:256
A1B 1:256
A2B 1:256

ANTI AB 1:256

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 A1 1:256
B 1:128
A2 1:256
A1B 1:64
A2B
ANTI H A2 1:8
LECTINA
Coombs CEL 1:32
SENSIBILIZADAS
ANTI”RhO” R1R2 1:64

Material:

10 tubos de ensaye de 13x 100

30 tubos de ensaye 12 x 75
5 Pipetas pasteur
Antisueros anti A,Anti-B, Anti-Rh
Muestra biológico:
Eritrocitos A y B.

Técnica
AVIDEZ
1. Marcar una placa de vidrio con la letra A, B, AB, Rh
2. Colocar una gota de eritrocitos al 10% en solución salina isotónica del grupo A, B,
AB que le corresponde y una gota de eritrocitos al 40% en albúmina bovina al 22%
para Rh.
3. Colocar una gota de antisuero con los eritrocitos con un aplicador de madera, al
mismo tiempo accionar el cronometro.
4. Enseguida, dar una placa un movimiento rotatorio con las manos y estar atento en
que aparece la aglutinación, en ese momento detener el cronometro.
5. Anotar el tiempo de avidez de cada antisuero visualizando los inicios de
aglutinación.

TITULO
Anti sueros ABO
1. hacer una suspensión al 2% en solución salina isotónica de células A, B, AB.
2. Colocar en una gradilla una serie de 11 tubos de ensaye por cada reactivo a probar
3. marcar los tubos como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256, 512, 1024

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 4. agregar acada uno de ellos, excepto el primero, 0.1 ml de diluyente de suero
5. agregar 0.1 ml del antisuero a probar al tubo y al P unicamente.
6. mezclar perfectamente el contenido del tubo 2 y transferir 0.1 ml de esa solución al
tubo siguiente, repetir este procedimiento hasta el ultimo tubo.
7. desechar 0.1 ml del ultimo tubo
8. agregar 0.1 ml de células conocidas a todos los tubos
9. mezclar y centrifugar 25 segundos a 3500 rpm
10. leer y anotar los resultados

Antisuero D
1. Preparar una suspensión de eritrocitos Rh + al 2% con albúmina bovina
2. Preparar una serie de 8 tubos de 12x75 marcados como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64 y 128
respectivamente
3. Agregar acada uno de ellos, excepto al tubo p, 0.1 ml de albumina bovina
4. Proceder como se indica desde el paso 5 de la técnica para ABO
5. Centrifugar 60 segundos a 3500 rpm
6. Leer y anotar resultados.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
AVIDEZ

ERITOCITOS A 10% B 10% A Rh+ (40%) B Rh+ 40%

6 segundos 5 segundos 7 segundos 12 segundos
TIEMPO

TITULO

Antisueros ABO

Características del reactivo A

Nombre de la casa comercial: bio-rad

Fecha de caducidad. 28-febrero-2002
Lote
A

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 B

Características del reactivo B

Nombre de la casa comercial:biorad Lote:
Fecha de caducidad: 28-febrero-2003

Antisuero D
Rh Lote
Nombre de la casa comercial: fecha de caducidad: 30-julio-2002

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CONCLUSIONES:

• En esta practica verificamos el control de los sueros hemoclasisficadores como nos dimos
cuenta algunos de los reactivos cuentan con un buen tipo de avidez y titulación excepto el
a que presenta una fecha de caudicidad muy diferente al del antisuero anti- rh que conto con
un tipo de titulación hasta, 1024 , tomando en cuenta que su titulo mínimo es 1: 64.
• El reactivo de suero anti- A presento un titulo hasta 1024, tomando en cuenta que su titulo
mínimo es hasta 1: 256 .
• El caso de estos antisueros que pasan sus títulos mínimos, nos podrían causar falsos + en
algún caso de urgencia a la hora de realizar un grupo sanguíneo, por eso es importante
revisar el etiquetado del reactivo , observando si no presente alguna alteración , mantiene
su estado de almacenamiento y conservación recomendado.

REFERENCIAS:

1. Abbbas,, K. A, Inmunología celular y molecular, cuarta edición, 2002, Editorial Mc Graw Hill,
paginas: 490,497.
2. Castañeda , L , La calidad la hacemos todos, quinta reimpresión , 1978, ediciones poder,
paginas: 8
3. Radillo, G.A, Medicina Transfusional, Editorial prado,1999, México, pagina

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