www.referat.

ro

UNIVERSITATEA POLITEHNIC BUCURETI

AMINOACIZI

CONSIDERAII GENERALE Aminoacizii sunt substane organice, naturale sau de sintez, coninnd, fr excepie, gruprile amino - i carboxil -, uneori i alte grupri funcionale n molecul. Sunt substane solide, incolore , muli dintre ei solubili n ap, alii mai puin sau greu solubili. Cu excepia proteinei aminoacizii sunt puin solubili n alcool i insolubili sau greu solubili n solveni nepolari. Avnd pe molecul grupe amino - i carboxil care disociaz n mediu apos, aminoacizii formeaz amfioni, la anumite valori de pH numite punct izoelectric (pHi); la valori pH diferite de pHi moleculele lor capt o sarcin electric net, manifestnd proprieti electroforetice. Aminoacizii reacioneaz att cu acizii ct i cu bazele - proprieti amfotere- i pot funciona ca sisteme tampon. Datorit gruprilor amino - i carboxil - ct i a altor grupri din molecul, aminoacizii prezint o serie de reacii generale ns i unele reacii particulare care stau la baza multor metode de identificare i dozare a lor.

REACII GENERALE

REACIA CU NINHIDRINA Aminoacizii reacioneaz cu ninhidrina la pH 4-8 formnd compui colorai n albastru-violet. ntr-o prim etap a reaciei ninhidrina reacioneaz ca oxidant, reducndu-se la hidrindantin, iar aminoacidul format sufer o reacie de hidroliz, urmat de o decarboxilare. n etapa urmtoare hidrindantina reacioneaz cu o molecul de ninhidrin i amoniacul eliberat din reacia de hidroliz a aminoacidului, conducnd la un produs de condensare colorat caracteristic. Aceast reacie fiind foarte sensibil este utilizat n metodele de identificare i dozare ale aminoacizilor. Reactivi: soluii de aminoacizi 0,1%, soluie de ninhidrin 0,2% n etanol. MODUL DE LUCRU

ntr-o eprubet se introduce 1 ml soluie de aminoacid i se aduce la pH neutru. Se adaug 5 picturi din soluia de ninhidrin dup care se nclzete 2 minute pe o baie de ap adus la fierbere. n condiiile reaciei se observ o coloraie n galben. REACIA CU ACIDUL AZOTOS Ca i aminele primare alifatice, aminoacizii reacioneaz cu acidul azotos elibernd azot molecular. Reacia are loc cu randament practic cantitativ, la un mol de aminoacid degajndu-se un mol de azot. Aceast reacie permite dozarea azotului aminic din aminoacizii cu gruparea amino- liber. Reactivi: aminoacizi, soluie de azotit de sodiu 10%, soluie de acid clorhidric 2M. MODUL DE LUCRU Se iau 2 eprubete curate, iar n prima se introduc 0,5 g dintr-un aminoacid i 2 ml acid clorhidric 2M. n a II a eprubet se introduc 2 ml acid clorhidric de aceeai concentraie, fr a introduce aminoacid, Coninutul eprubetelor se trateaz cu 1 ml azotit de sodiu 10%, prin picurare, dup o rcire prealabil n baie de ghea. Se urmrete degajarea azotului.

REACII SPECIFICE REACIA XANTOPROTEIC Aminoacizii care conin n molecul radicali aromatici reacioneaz cu acidul azotic concentrat, la nclzire, formnd nitroderivai de culoare galben. Reactivi: tirozin sub form de soluie apoas 0,5%, acid azotic concentrat, soluie de amoniac sau hidroxid de sodiu 20 %. MODUL DE LUCRU ntr-o eprubet coninnd 1 ml soluie tirozin se adaug prin prelingere 1 ml acid azotic concentrat. Se nclzete uor pe o baie de ap adus la fierbere, timp de 1 minut, apoi se rcete. n eprubetele care conin aminoacid cu caracter aromatic se observ o coloraie galben. Dup rcire i alcalinizare cu hidroxid de sodiu sau amoniac, culoarea trece n portocaliu. REACIA CU ACID GLICOXILIC Triptofanul reacioneaz prin restul indolic cu cu acid glioxilic n prezena acidului sulfuric concentrat, conducnd la un compus colorat violet. Reacia poate

avea loc i cu acid acetic glacial, care dup expunere la lumin conine acid glioxilic. Reactivi: Aminoacizi (triptofan, tirozin, glicin) sub form de soluie 0,1%, acid acetic glacial, acid sulfuric concentrat. MODUL DE LUCRU Peste 2 ml soluie triptofan se adaug 2 ml acid acetic glacial. n soluia format se introduc 2 ml acid sulfuric concentrat prin prelingere nceat pe peretele interior al eprubetei, fr agitare. La limita de separaie dintre cele 2 straturi apare un inel violet caracteristic. REACIA PAULY Tirozina i histidina dau reacii de cuplare cu acidul sulfanilic diazotat, formnd compui colorai n rou. Reactani: aminoacizi (turozina, histidin, triptofan, glicin) sub form de soluie 0,1%, soluie de acid sulfanilic 1% n acid clorhidric 0,1M, soluie de azotit de sodiu 5%, soluie carbonat de sodiu 1%. MODUL DE LUCRU Un amestec format din 2 ml. soluie aminoacid i 1 ml soluie acid sulfanilic (n HCl) rcit ntr-o baie de ghea, se trateaz la rece cu 1 ml soluie azotit de sodiu. Dup 2-3 min coninutul eprubetei se alcalinizeaz cu 2 ml soluie carbonat de sodiu. Reacia este pozitiv pentru tirozin i histidin (coloraie roie).

DETERMINAREA AZOTULUI AMINIC PRIN TITRARE CU FORMOL Aminoacizii adopt n soluii apoase structur amfionic, deci se comport ca acizi (donori de protoni) sau ca baze (acceptori de protoni). Titrarea aminoacizilor cu hidroxid de sodiu se face n prezena aldehidei formice luat n exces, reacionnd cu gruparea amino liber. Aciditatea mediului care apare n urma acestui proces poate fi titrat cu hidroxid de sodiu n prezena fenolftaleinei, datorit faptului c valoarea pH a punctului final de titrare este micorat. Reactivi: soluia aminoacidului de analizat cunoscut avnd concentraia pe domeniul 0,070,13 M, soluie de hidroxid de sodiu 0,1N cu factor cunoscut, soluie de fenolftalein 15 n etanol 96%, soluie formaldehid 40%.

MODUL DE LUCRU ntr-un pahar Erlenmeyer de 150 ml se introduc 10 ml formaldehid 40%, 20 ml ap, 2-3 picturi soluie de fenolftalein i se adaug dintr-o biuret hidroxid de sodiu 0,1 N, ncet, prin picurare, pn cnd apare o coloraie roz persistent. Cantitatea de hidroxid de sodiu utilizat n aceast operaie fiind necesar pentru neutralizarea acidului formic coninut n soluia de aldehid formic, nu se va lua n calcul. ntr-un alt pahar Erlenmeyer de 150 ml se introduc 25 ml soluie aminoacid, 2-3 picturi soluie fenolftalein i se adaug ncet, cu pictura, hidroxid de sodiu 0,1 N dintr-o biuret pn cnd apare o coloraie roz persistent. n acest stadiu, peste coninutul paharului se adaug soluia de formalehid neutralizat anterior. Culoarea roz dispare. Se titreaz soluia incolor obinut, cu hidroxid de sodiu 0,1 N, pn la reapariia culorii roz persistent, caracteristic domeniului de viraj al fenolftaleinei. Se citete volumul de hidroxid de sodiu 0,1 N cu care s-a fcut titrarea. 14 V F M= mg N2 n 25 ml soluie aminoacid V= volumul soluiei de NaOH 0,1N consumat F= factorul soluiei de NaOH 0,1N M= molaritatea soluiei NaOH cu care s-a fcut titrarea

Powered by http://www.referat.ro/ cel mai tare site cu referate