Sistemul complement

Imunologie Farmacie anul III

Sistemul complement
Sistemul complement (notat cu C') este alctuit din numeroase proteine plasmatice cu diverse funcii, organizate n mai multe clase. Principalele roluri ale C' sunt:
liza microorganismelor patogene; opsonizarea bacteriilor; chemotactism pentru celule; clearance-ul complexelor imune (antigen-anticorp).

Sistemul complement
Pentru cele mai multe componente, nomenclatura acestora reflect ordinea de activare n cascada enzimatic. Fiecare component este desemnat prin litera C urmat de un numr (de exemplu C3). Complexul C1 este alctuit din trei proteine diferite C1q, C1r, C1s. Formele activate sunt marcate cu un asterix (C1r*). n cazul celorlali componeni numerotai ai complementului (C2...C9), adugarea unei litere mici (de exemplu C3a, C3b) desemneaz un fragment activ generat prin proteoliza precursorului inactiv (C3).

Sistemul complement
Multe fragmente active sunt foarte instabile i se degradeaz spontan sau sub aciunea inactivatorilor (proteaze) prezeni n ser. Aceste fragmente inactive sunt notate cu litera "i" aezat naintea numelui fragmentului (de exemplu, iC3b). Cuvntul "complement" este frecvent prescurtat prin litera C', care include toi componenii sistemului complement (de exemplu, "celulele au fost lizate de anticorpi n prezena C' ").

Sistemul complement
Pn la ora actual au fost descrise trei ci de activare a complementului: calea clasic, necesit prezena complexelor antigen-anticorp i este calea imunitii specifice; calea lectinic (prin lectine legate de suprafaa microorganismelor), cum este MBP (mannose binding protein) - o apoprotein seric ce leag manoza de la componenii glucidici din nveliul bacterian sau viral. Aceast cale este complementar reaciei imune nnscute; calea alternativ este acionat prin toxine, LPS etc componentele ei se fixeaz la suprafaa agentului patogen, de obicei microorganism.

Sistemul complement
n activarea C' s-au descris dou faze: una precoce (early) i alta tardiv (late). Faza precoce, sau timpurie, este caracteristic iniierii rspunsului prin C' i ncepe prin evenimente enzimatice n urma crora din componentele inactive iau natere prin clivare dou fragmente: fragmentul major - fixat la suprafaa membranei microorganismului patogen, cu rol n clivarea componentului urmtor i fragmentul minor eliberat n mediu ce acioneaz ca mediator al inflamaiei. Aceast faz se finalizeaz cu formarea C3 convertazei

Sistemul complement
n faza timpurie se departajeaz cele trei ci de activare, prin modul n care se sintetizeaz C3 convertaza. Primul component, dup activare, declaneaz apoi o reacie "n cascad" i induce activarea componentelor n ordinea urmtoare: C1 - C4 - C2 - C3 - C5 - C6 C7 - C8 - C9. Fraciunea C4 apare pe locul doi n secvena de activare deoarece a fost descoperit i descris naintea componentelor C2 i C3.

Activarea complementului pe cale clasic

Activarea C' pe calea clasic se realizeaz pe o suprafa macromolecular i membranar, ca un rezultat al fixrii anticorpului pe determinantul antigenic. Cele 11 componente care particip la activarea C' pe cale clasic sunt organizate n trei uniti funcionale:
unitatea de recunoatere - complex C1 activat (C1q, C1r i C1s); unitatea de activare (C4, C2, C3); unitatea de atac a membranei sau MAC (membrane attack complex) (C5b6789).

Activarea complementului pe cale clasic

Secvenele activrii complementului pe cale clasic.

Activarea complementului
Legarea C1q de complexul antigen-anticorp, n poriunea Fc a Ig.

Activarea complementului pe cale clasic

Proteine fazei timpurii: forme active i rolul lor.
Component nativ C1 Fraciuni active C1q C1r C1s C4 C4a C4b Mediator al inflamaiei Leag covalent structuri din membrana microorganismului Acioneaz ca i opsonin Leag C2 i l pregtete de clivaj Enzim activ a convertazelor C3 i C5 clasice; cliveaz C3 i C5 Rol necunoscut Rol
Leag Fc al Ac tip IgM, IgG din CI, activeaz C1r

Cliveaz C1s n proteaza activ Cliveaz C4 i C2

C2 C2b C2a

Activarea complementului pe cale clasic

Component nativ C3*

Proteine fazei timpurii: forme active i rolul lor.

Fraciuni active C3b** Rol Se leag de suprafaa bacteriei Acioneaz ca opsonin Amplific activarea pe cale alternativ Leag C5 pentru a fi clivat de C2b Mediator al inflamaiei Format prin activitatea serinproteazic a Bb din C5b2Bb (calea altern) i C3b din C4bC2aC3b (calea clasic) Demareaz formarea MAC Mediator inflamator - stimuleaz fagocitoza prin intermediul macrofagului

C3a C5 C5b

C5a

Activarea complementului
Componenii care acioneaz n faza tardiv Finalitatea acestei faze este asamblarea MAC cu formarea de pori membranali, alterarea gradientului ionic i liz. Fragmentul C5a trece n faza solubil i are efecte chemotactice, spasmogenice i rol de anafilatoxin. Fragmentul C5b leag C6 i C7 i formeaz complexul trimolecular C5b67 cu rol chemotactic pentru neutrofile i monocite. Acest complex se leag de membran i apoi se prind de el succesiv celelalte componente formnd complexul C5b6789 numit i complex membranar de atac (MAC). C8 i C9 se fixeaz n membran prin situsurile lor hidrofobe.

Activarea complementului
Componenii care acioneaz n faza tardiv MAC are fie o structur de monomer (de forma unei jumti de inel), fie o structur de dimer cnd formeaz un inel i este alctuit din dou complexe C5b67, iar apendicele care se prelungete ntr-o structur vertical este legat direct de membran i cuprinde dou molecule C8 i ase molecule de C9. Legarea unitilor de atac este controlat de o protein, numit proteina SI - inhibitor al MAC, care se leag de complexul C5b-9 i formeaz un compus inactiv. Inhibitorul MAC determin desfacerea dimerului C5b-9 n monomer C5b-9 care nu are nici un efect biologic.

Activarea complementului
Componenii tardiv care acioneaz n faza
MAC este imaginat ca un canal transmembranar foarte permeabil pentru ap i electrolii, cu o fa extern hidrofob i un canal hidrofil intern cu diametrul de 1000 , care permite pasajul apei i ionilor cu modificarea gradientului protonic (H+). Consecina este lezarea integritii celulei printr-un mecanism asemntor cu porii perforinici realizai de LTc i NK (C9 i perforinele sunt produse de gene nrudite), adic prin oc osmotic.

Activarea complementului
Componenii care acioneaz n faza tardiv Deficitul C5-C9 este asociat cu o sensibilitate crescut la infecii, ca de exemplu la cea cu Neisseria i este mai puin grav dect deficitul componentelor din faza timpurie. Activarea C' pe cale clasic este controlat de dou proteine serice cu rol de reglare: inactivatorul lui C1q (C1INA) care blocheaz activitatea enzimatic a C1-esterazei; inativatorul lui C3b (C3bINA) care poate scinda acest component n alte dou fragmente: C3c i C3d inactive.

Activarea complementului pe cale alternativ

Calea alternativ a activrii complementului, spre deosebire de calea clasic, este determinat de substane cu structur foarte diferit, ca polizaharide (din bacterii, fungi), lipopolizaharide (endotoxinele bacteriilor Gram-negative), de un factor prezent n veninul de cobr (VCF), dar i de IgA agregat sau de unele complexe antigen-anticorp care nu activeaz calea clasic. De fapt cele dou ci de activare sunt legate prin componentul C3b, care poate trece n faza lichid i apoi se poate lega pe membrana celular de C4bC2a - denumit C5-convertaza cii clasice

Activarea complementului pe cale alternativ

n mod normal tioesterul intern nglobat n C3 se activeaz fie prin reacia cu apa, fie datorit unor mici cantiti de enzime proteolitice plasmatice, formnd o cantitate foarte redus de C3b. Aceste molecule "nscnde" au o via scurt, n mod normal fiind inactivate prin inactivatorul lui C3b (C3bINA) i printr-o beta-1-globulin din snge.

Activarea complementului pe cale alternativ

Etapele activrii complementului pe cale alternativ de ctre produii microbieni (polizaharide) i controlul activrii prin factorii H i I.

Activarea complementului pe cale alternativ

Proteinele cii alternative: forme active i rol.
Forma activ C3b Rolul biologic Se fixeaz la membrana microorganismului Are rol fundamental n activare Origine diferit (cale clasic, clivare, alte mecanisme) Leag factorul B i l face susceptibil la clivare de ctre factorul D Component al C3-convertazei alterne: C3bBb* Component al C5-convertazei alterne: Csb2Bb Fragment nativ Enzima activ a convertazei C3, C5 Rol necunoscut Serinproteaz plasmatic cliveaz B legat de C3b Properdina (alctuit din 4 subuniti) stabilizeaz convertaza altern

B** Bb Ba D P

Sistemul complement
Formarea C3 convertazei i legtura dintre cele dou ci de activare a complementului.

Sistemul complement
Clasificarea funcional (global) a elementelor C'.
Rol funcional I. Fixare la complexele imune II. Enzime activatoare Component C1q C1r, C1s C2b Bb D C4b C3b C3a C5a C4a C5b C6 C7 C8 C9 CR1 CR2 CR3 CR4 C1qR C1INH C4BP CR1 MCP DAF H I P CD59

III. Proteine care se leag la membrane i opsonine IV. Mediatori ai inflamaiei

V. Proteine de atac ale membranei

VI. Receptori pentru C'

VII. Proteine reglatoare ale C'

Activarea complementului
Unele substane, cum sunt endotoxinele bacteriene, proteazele din esuturi, enzimele lizozomale, eliberate de PMN etc, sunt de fapt activatori ai cii alternative. Semnificaia biologic a cii alternative const n faptul c prin aceasta se realizeaz activarea C', prin produsele bacteriene, naintea sintezei de Ig specifice. Pe de alt parte, pe lng IgG i IgM - care particip direct la activarea C' pe cale clasic numrul produilor identificai n ultimul timp ca activatori ai C' este n continu cretere. Dintre acetia, o mare importan se acord proteinei-C reactive, considerat ca unul din markerii serici ai leziunilor inflamatoare.

Componentele reglatoare ale complementului

Activarea C' este dependent de un sistem biologic de control care regleaz procesele i funciile biologice n care este implicat C'; altfel, activarea s-ar produce continuu pn la epuizarea n totalitate a sistemului i ar avea ca rezultat o serie de efecte nefavorabile.

Componentele reglatoare ale complementului

Factorul C1INH C4BP CR1 (CD35) Factorul H Factorul I DAF (CD55) MCP (CD46) CD59 Activitatea biologic Leag C1r i C1s i le ndeprteaz de C1q Nu i exercit aciunea enzimatic asupra C4 i C2 Previne activarea spontan a C1q n plasm (CIC) Se leag la C4b, nlocuind C2b Cofactor pentru activarea C4b de ctre I Leag C4b nlocuind C2b Leag C3b nlocuind Bb Cofactor pentru I Leag C3b nlocuind Bb Cofactor pentru I Cliveaz C3b, C4b (serinproteaz) Aciune sinergic cu a H, MCP, C4BP, C1R nlocuiete C3b/Bb i C2b/C4b, nu permite formarea C3 convertazei Acioneaz asupra C3b, C4b fixate la membran Promoveaz inactivarea C3b, C4b de ctre I Previne formarea MAC pe celulele proprii

Receptorii pentru complement

Tipuri de receptori pentru complement
Receptorul CR1 Activitile pe care le promoveaz; exprimare Leag C3b, C4b Promoveaz opsonizarea prin C3b, C4b Stimuleaz fagocitoza i/sau opsonizarea - obligatorie n cazul bacteriilor prevzute cu capsul Transportul eritro citar al CI Se exprim pe eritrocite, macrofage, monocite, PMN, LB Leag C3d, iC3b, VEB Face parte din co -receptorul LB (CD21) Leag iC3b Este o integrin (CD11b/CD18) Stimuleaz fagocitoza Se exprim pe macrofage, monocite, PMN Leag C3b (e ste i el o integrin) Augmenteaz fagocitoza Se exprim pe macrofage, monocite, PMN Leag fraciunile colagen -like de C1q Mediaz legarea cu CI a fagocitelor Se exprim pe LB, macrofage, monocite, PLT, celule endoteliale

CR2 CR3

CR4

C1qR

Efectele biologice ale activrii complementului

C', prin componentele sale activate, are un lan de funcii biologice, dintre care se desprind trei mari categorii:
liza celulei int, reacia de aderen imun, reacia inflamatorie acut mediat de C'.

Efectele biologice ale activrii complementului

Sistemul complement
INTREBARI, DISCUTII