UNIVERSIDAD ANDRS BELLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR BIO-131 SECCIN 2 PROFESORES: INGRID ARAYA PATRICIO

PONCE

TRABAJO PRCTICO N4: COMPONENTES QUMICOS DE LA CLULA.

Autores: - Mauricio Hinojosa Cuellar. - Thomas Hofman . - Pamela Marin Villaln. - Michel Melendes Cornejo.

- 2011 -

ndice
Pgina I.- Introduccin.... II.- Objetivos.... III.- Materiales y mtodos... Actividad N1 Actividad N2 Actividad N3 Actividad N4 Actividad N5 IV.- Resultados.... Actividad N1 Actividad N2 Actividad N3 Actividad N4 Actividad N5 V.- Discusin VI.- Conclusin........................ VII.- Bibliografa.. 3 3 4 4 4 4 4 5 6 6 7 8 9 9 10 13 14

I.- Introduccin Los seres vivos estn caracterizados, entre otras cosas, por poseer una organizacin celular, es decir, determinadas molculas se organizan de una forma particular y precisa e interactan entre s para establecer la estructura celular (1). La qumica de la clula est basada en los compuestos de carbono. ste se destaca del resto de los elementos por su capacidad para formar grandes molculas. Estas molculas se denominan molculas orgnicas, mientras que el resto, incluida el agua, reciben el nombre de molculas inorgnicas. Todas las molculas orgnicas se sintetizan a partir de un conjunto de compuestos simples, en los que tambin pueden degradarse. Por ende, los compuestos de una clula se relacionan qumicamente, clasificndose en familias diferenciadas, las cuales al polimerizar sus monmeros forman las siguientes macromolculas: carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos. (2) Los hidratos de carbono o glcidos se componen de tomos de carbono, hidrogeno y oxgeno. Los azcares ms sencillos corresponden a los monosacridos, (p.ej.glucosa). Estos al agruparse en molculas ms complejas, dan origen a los oligosacridos (unin de 2 a 6 molculas de monosacridos, p.ej. sacarosa) o a los polisacridos (agrupan cientos o miles de monosacridos, p.ej. almidn, celulosa). (3) La importancia biolgica principal de este tipo de molculas es que actan como reserva de energa o pueden conferir estructura, tanto a nivel molecular (forman nucletidos), como a nivel celular (pared vegetal) o tisular (tejidos vegetales de sostn, con celulosa) (4) Los lpidos son un grupo heterogneo de compuestos biolgicos escasamente solubles en agua debido a su condicin hidrofbica. Los cidos grasos son los lpidos ms simples, y son adems constituyentes de otros lpidos ms complejos como los fosfolpidos, triglicridos y colesterol esterificado. Cumplen mltiples funciones en el organismo, como constituyentes de las membranas biolgicas, hormonas, vitaminas solubles en grasas (vitamina E), aislantes trmicos, reguladores biolgicos y reserva energtica. (5) Las protenas se componen por tomos de carbono, oxgeno, hidrgeno y nitrgeno. Los monmeros de las protenas son los aminocidos, que se unen por medio de un enlace peptdico y forman estructuras ms complejas. Las principales funciones de las protenas son: funcin reguladora, funcin de defensa (inmunoglobulinas), funcin de transporte (hemoglobina), funcin energtica (en caso de necesidad), funcin amortiguadora, funcin enzimtica (aceleran la velocidad de las reacciones qumicas del metabolismo), participan en el movimiento celular (contraccin muscular a travs de la miosina y actina), funcin de resistencia (colgeno, elastina y reticulina). (6) Los cidos nucleicos tienen dos tipos principales, el ADN (cido desoxirribonucleico), y el ARN (cido ribonucleico) estas son grandes molculas constituidas por la unin de monmeros, llamados nucletidos. Los nucletidos se forman por la unin de una base nitrogenada, una pentosa y uno o ms cidos fosfricos. (7) Los cidos nucleicos se diferencian en el azcar que contienen (ribosa en el ARN y desoxirribosa en ADN) y en las hebras (una sola hebra en el ARN y doble hebra en el ADN). Las funciones de los cidos nucleicos son principalmente dos: almacenamiento de la informacin hereditaria (ADN) y sntesis proteica, que se lleva a cabo mediante los distintos tipos de ARN ( ARN mensajero, ARN ribosomal y ARN de transferencia). (3) II.- Objetivos El objetivo de este laboratorio es que seamos capaces de reconocer y diferenciar molculas orgnicas e inorgnicas por medio de una actividad experimental en que a travs de la justificacin de los resultados obtenidos, se conozcan los mtodos de reconocimiento utilizados. 3

III.- Materiales y mtodos Actividad N1: Reconocimiento de hidratos de carbono. Parte A: Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Fehling Para la identificacin de monosacridos preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con diferentes tipos de soluciones. En cada tubo agregamos alrededor de 3 ml de las diferentes sustancias. Para el tubo numero 1 agregamos agua destilada, en el tubo 2 agregamos una solucin de glucosa al 1%, en el tubo 3 agregamos una solucin de almidn al 1%, en el tubo numero 4 agregamos leche y por ultimo en el tubo numero 5 agregamos una solucin de cloruro de sodio al 1%. Despus de agregar las distintas soluciones agregamos 1 ml del reactivo de Fehling A y 1 ml del reactivo de Fehling B, ambos ya preparados con anterioridad. Despus de agregar los reactivos agitamos la solucin y los colocamos en una gradilla dentro de la mquina de bao termo regulado, a una temperatura de alrededor de los 79C por unos 3 minutos. Luego dejamos enfriar las soluciones y anotamos nuestras observaciones con respecto a los precipitados en las distintas soluciones, si es que estaban presentes. Parte B: Identificacin de polisacridos mediante la prueba de Lugol De la misma manera que el experimento anterior preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con las mismas soluciones nombradas anteriormente. En este caso no usamos los reactivos de Fehling, pero en cambio ocupamos el reactivo de Lugol. Agregamos una gota del reactivo de Lugol a cada tubo de ensayo y agitamos la mezcla. A diferencia del experimento anterior las soluciones no fueron calentadas en el bao termo regulado. Observamos e interpretamos los resultados de cada uno de los tubos de ensayo. Actividad N2: Reconocimiento de protenas. En esta parte del laboratorio prctico preparamos y rotulamos 5 tubos de ensayo con diferentes tipos de soluciones. En cada tubo agregamos alrededor de 2 ml de las distintas soluciones. Para el tubo 1 agregamos agua destilada, en el tubo 2 agregamos una solucin de glicina al 1%, en el tubo 3 agregamos clara de huevo al 1%, en el tubo 4 agregamos leche y por ltimo en el tubo 5 agregamos cloruro de sodio al 1%. Despus de preparar los distintos tubos agregamos 2 ml del reactivo de Biuret a cada uno de los tubos. Posterior a eso agitamos las muestras y observamos e interpretamos los distintos resultados en cada uno de los tubos. Actividad N3: Reconocimiento de lpidos. Para el reconocimiento de lpidos preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo. Primero agregamos en uno de los tubos de ensayo 3 ml de agua destilada y en el otro 3 ml de ter. Posterior a eso procedimos con agregar a cada uno de los tubos 1 ml de aceite y agitamos vigorosamente la solucin de cada uno de los tubos. Observamos la formacin de micelas y dejamos reposando los tubos por un tiempo. Despus de eso registramos nuestras observaciones acerca de las 2 reacciones en los tubos de ensayo. Actividad N4: Reconocimiento de sales minerales. Preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo para el reconocimiento de Sales Minerales. A cada uno de los 2 tubos le agregamos 3 ml de Cloruro de Calcio. El tubo numero 1 fue asignado para la identificacin de cloruros por lo que agregamos 1 ml de solucin de Nitrato de Plata al 1%. Observamos e interpretamos los resultados acorde al precipitado y lo dicho en la gua. Para la identificacin de calcio ocupamos el tubo 2. A este le agregamos 1 ml de una solucin de Oxalato de Amonio al 1%. De la misma manera observamos e interpretamos los resultados acorde al precipitado y lo dicho en la gua.

Actividad N5: Reconocimiento de enzimas. Para el reconocimiento de enzimas, preparamos y rotulamos 2 tubos de ensayo. En cada uno de los tubos de ensayo agregamos 1 trozo de hgado para despus hacerlo reaccionar con perxido de hidrogeno. En el tubo numero 1 introducimos un trozo de hgado y posterior a eso agregamos 5 ml de perxido de hidrogeno. Luego observamos e interpretamos los resultados. Para el tubo numero 2 agregamos un trozo de hgado pero a este le agregamos agua destilada primero para as cocer el hgado en el bao termorregulado a una temperatura de 88.7 C. Despus de unos 10 minutos el hgado estaba cocido, por lo que procedimos a remover el exceso de agua. Despus de esto agregamos 5 ml de perxido de hidrogeno y observamos e interpretamos los resultados.

IV.- Resultados Actividad N1: Reconocimiento de hidratos de carbono.

A) Identificacin de monosacridos mediante la reaccin de Fehling: Tabla 1: Imgenes y observaciones de las muestras con reactivo de Fehling. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Imagen de la muestra luego del procedimiento Tubo 4 Tubo 5

Muestra Reactivo utilizado

Observaciones. * 10 minutos despus de hervir las muestras por 3 minutos en bao termorregulado a 79C.

Agua destilada H2O (1 mL) Fehling A (1 mL) Fehling B (1 mL) La muestra mantiene el color azul inicial. No presenta precipitado.

Solucin de Glucosa 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra se ve de color naranjo traslcido. Presenta una precipitacin de color naranjo intenso de 5 mm de altura aproximadamente.

Solucin de Almidn 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra no presenta variacin en el color, se mantiene azul. Ausencia de precipitado.

Leche (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra se separa en tres capas. La primera, ms superficial, de color caf claro. La segunda, en medio de las otras dos, de color caf oscuro. Y una tercera capa de precipitado al fondo del tubo, de color naranjo de 5 a 6 mm de espesor.

Solucin de NaCl 1% (1 mL) Fehling A (1 mL). Fehling B (1 mL). La muestra no presenta cambios en su color azul. Ausencia de precipitado.

B) Identificacin de polisacridos mediante la prueba del Lugol: Tabla 2: Imgenes y observaciones de las muestras con Lugol. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Imagen de la muestra luego del procedimiento

Tubo 4

Tubo 5

Muestra Reactivo utilizado

Observaciones. * Luego de agitar la muestra.

Agua destilada H2O (1 mL) Lugol diludo (2 gotas) La muestra se ve de color amarillento transparente.

Solucin de Glucosa 1% (1 mL) Lugol diludo (2 gotas) La muestra se ve de color amarillento transparente.

Solucin de Almidn 1% (1 mL) Lugol diludo (2 gotas) La muestra se ve de color morado oscuro.

Leche

Solucin de NaCl 1% (1 mL) (1 mL) Lugol diludo Lugol diludo (2 gotas) (2 gotas) La muestra se ve La muestra se ve de color blanco. de color amarillento transparente.

Actividad N2: Reconocimiento de protenas. Tabla 3: Imgenes y observaciones de las muestras con Biuret. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Muestra Agua destilada Solucin glicina Clara de huevo (1mL) 1% (1mL) (1mL) Reactivo Biuret utilizado (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento Biuret (1mL) Biuret (1mL)

Tubo 4 Leche (1mL) Biuret (1mL)

Tubo 5 Solucin NaCl 1% (1mL) Biuret (1mL)

Observaciones

Color celeste muy claro. Disolucin del reactivo.

Color celeste muy claro. Disolucin del reactivo.

Color violeta. Al principio la muestra tena tintes violeta, luego de unos minutos la muestra tom un color violeta

Color violeta claro. Al principio color violeta claro en una parte de la muestra, luego de un tiempo el color era violeta en su totalidad.

Color celeste muy claro. Disolucin del reactivo.

total. - Cmo se explica la diferencia de intensidades en los tubos que presentaron una reaccin positiva? En la reaccin de biuret la intensidad de coloracin depende de la concentracin de reactantes al reactivo de biuret que haya en la muestra (10), puesto que podra dar un falso positivo (11), para este caso se descarta la posibilidad de falsos positivos debido a que los resultados obtenidos concordaron con lo esperado, por lo tanto podemos decir que en el tubo 3 haba una mayor concentracin de protenas que en el tubo 4 que contena leche. Actividad N3: Reconocimiento de lpidos.
Tabla 4: Imgenes y observaciones de las muestras de aceite con agua y aceite con ter. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Agua + Aceite ter + Aceite (1mL) (1mL) (1mL) (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento

Observaciones

Muestra agitada fuertemente: Al aadir 1 ml de agua a 1 ml de aceite y luego agitar la muestra fuertemente, se pudo observar la formacin de gotitas en casi la totalidad de la mezcla. Adems de una separacin muy marcada entre el agua y el aceite, vindose el aceite suspendido sobre el agua. Muestra en reposo: Las gotitas que antes se encontraban en casi la totalidad de la mezcla ahora solo se observaron en lmite entre el agua y el aceite. Se aprecia la misma separacin entre el agua y el aceite que en la muestra agitada.

Al aadir un 1 ml de ter a 1 ml de aceite, se pudo observar que el aceite se disolvi en el ter, formndose una solucin homognea de aspecto amarillento.

Actividad N4: Reconocimiento de sales minerales. Tabla 5: Imgenes y observaciones de las muestras de reconocimiento de sales minerales. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Solucin de nitrato de plata 1% Solucin de oxalato de amonio (1mL) 1% (1mL) Reactivo utilizado Cloruro de calcio Cloruro de calcio (1mL) (1mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento

Observaciones

Al principio, tom un color blanco lechoso con precipitados de color blanco tanto al fondo como en la superficie de la muestra. Luego de unos minutos, el lquido se torn translcido con pequeas partculas en suspensin.

Al principio, tom un color blanco total. Luego de 30 minutos la muestra se torn de color blanco transparente.

Actividad N5: Reconocimiento de enzimas. Tabla 6: Imgenes y observaciones de las muestras de hgado en reconocimiento de enzimas. Tubo 1 Tubo 2 Muestra Hgado crudo Hgado hervido por minutos a 88,7C. Reactivo utilizado Perxido de hidrgeno Perxido de hidrgeno (5mL) (5mL) Imagen de la muestra luego del procedimiento

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Observaciones

Al agregar el perxido de hidrogeno empezaron a salir burbujas, las cuales subieron por el tubo hasta rebalsar. Se podan apreciar burbujas saliendo del hgado durante unos 5 minutos despus de haber agregado el perxido.

Al agregar el perxido de hidrgeno no se produjo ningn tipo de reaccin. En otras palabras la muestra qued intacta.

V.- Discusin Para la experimentacin con reactivo de Fehling: En el caso de la reaccin en el Tubo 1, que contena agua, la muestra mantuvo su color azul debido a que esta sustancia, como ya sabemos, no posee hidratos de carbono, de modo que es utilizada como muestra blanco en el procedimiento, ya que siendo solvente en la muestra, si se produce en este tubo una reaccin, debera producirse en todos los otros tubos. El Tubo 2, por otro lado, que contena una solucin de glucosa al 1%, s present una modificacin en su color, ya que, como sabemos la glucosa es un monosacrido y por tanto puede ser reconocido mediante la reaccin con Fehling, produciendo un precipitado de color anaranjado como se vio en los resultados. Cuando esta molcula est presente en un medio en que existen grupos aldehdos (-CHO), como en los monosacridos y algunos disacridos, oxida a este grupo funcional y se produce el precipitado de cobre reducido de +2 a +1. (8) En este caso la reaccin produce una oxidacin del CHO del carbono 1 de la molcula de glucosa, precipitando el cobre reducido en el fondo del tubo, segn la reaccin (8): calor Azcar reductor + 2 H2O + complejo trtaro cprico ------------ > Cu2O + derivado del reactivo + cido carboxlico Para este Tubo, entonces, existe un reconocimiento de un disacrido, que es la lactosa presente en la leche, formado por glucosa y galactosa. Lo anterior, tambin explica que en el Tubo 3, en el que haba almidn, no hubiese ninguna reaccin. Para el procedimiento realizado con Lugol: Los resultados en el Tubo 1 fueron negativos al igual que en el procedimiento anterior porque, como ya se mencion, el agua es utilizada como muestra blanco en el procedimiento, ya que siendo solvente en la muestra, si se produce en este tubo una reaccin, debera producirse en todos los otros tubos. En la muestra de glucosa 1%, no hubo cambios en el color ms all de la dilucin del color del lugol en la muestra. Por el contrario, en el Tubo 3 en que la muestra era una solucin de almidn 1% (polisacrido), hubo un gran cambio en el color de la muestra que evidencia la reaccin de sta con el reactivo, o ms bien un cambio de inclusin. En la actividad 2 de reconocimiento de protenas usamos el reactivo de biuret, este se llama as debido a que el compuesto coloreado formado por la condensacin de dos molculas de urea con eliminacin de amonaco. Esta reaccin est dada por aquellas sustancias cuyas molculas contienen dos grupos carbamino (-CO. NH) unidos directamente o a travs de un solo tomo de carbono o nitrgeno (12) esto nos da un color azul violeta, que en este caso nos denota la presencia de protenas en la muestra. En el tubo 1 que contena agua no obtuvo un color azul violeta debido a que el reactivo de biuret no reacciono con el agua debido a lo anteriormente referido, por lo que podemos decir que la muestra y el reactivo estaban correctos y sin impurezas, a esto se le llama un control negativo El tubo 2 que estaba ocupado por glicina 1 % tampoco vimos reaccin esto es debido a que al ser un aminocido la glicina no contena enlaces peptdicos o dicho de otra forma no tena el mnimo de grupos carbamino necesarios para producir la reaccin, esto nos dice que el reactivo de biuret funciona de acuerdo a la teora que manejamos En la muestra contenida en el tubo 3 haba clara de huevo, segn los resultados obtenidos, el color de la muestra cambio a azul violeta, esto es concordarte de acuerdo a lo que dijimos antes, debido a que la clara de huevo tiene ovoalbmina en su mayora y conoalbumina entre otros(13), las que son protenas Para la muestra del tubo 4 que contena leche, segn los resultados, vimos el cambio de color correspondiente a la reaccin de biuret, esto segn la imagen 1 es concordante debido a que la leche tiene protenas En la muestra 5 donde colocamos la solucin de NaCl 1 % no vimos la coloracin caracterstica a la presencia de protenas, debido a que el NaCl en agua se disocia en iones imposibles de reaccionar con el reactivo de biuret.

Imagen 1: Tabla de protenas presentes en la leche.

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En la actividad de reconocimiento de lpidos, pudimos observar diferentes situaciones: En la muestra de agua ms aceite, observamos que el aceite no se disolvi en el agua, la explicacin de por qu no se mezclaron tiene que ver con la estructura molecular de ambos lquidos. El agua es una molcula polar la cual est compuesta por tres tomos: dos de hidrgeno y uno de oxgeno. Este lquido no posee fuerzas de atraccin para tentar a una molcula de agua. Para que pudiera existir atraccin entre estos lquidos los extremos de las molculas del agua tendran que ser afines con los del aceite, cosa que no sucede.(14) Las interacciones entre las molculas se rigen por varios parmetros, entre ellos esta lo semejante disuelve a lo semejante, inferimos entonces que el agua disuelve solo a sustancias polares, por ende el aceite al ser apolar no puede ser disuelto.(15) Observamos tambin que el aceite flota sobre el agua, esto se debe sencillamente a que el aceite es menos denso que el agua por lo tanto queda suspendido sobre ella.(14) Adems vimos que se formaron micelas en la muestra. Por ultimo la variacin en el numero y disposicin al dejar la muestra en reposo, se debe a que solo formar micelas la porcin del aceite que esta en contacto con el agua, por eso la muestra al haber reposado y haberse separado completamente el agua del aceite, se reagruparon las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sita sobre la capa del agua (16). En la muestra de ter mas aceite, observamos totalmente lo contrario, el aceite se disolvi completamente en el ter. En la actividad 4 de reconocimiento de sales minerales en el tubo A, el objetivo era la identificacin de cloruros usando nitrato de plata, nuestra muestra al ser cloruro de calcio reacciono con el nitrato de plata formando AgCl lo que vimos como el precipitado blanco de aspecto lechoso (17), la reaccin est dada por: CaCl2(aq) + 2AgNO3 (aq) 2 AgCl (s) + Ca(NO3)2 (aq) Para el tubo B en donde identificamos la presencia de calcio usando el oxalato de amonio, vertindolo en el cloruro de calcio, segn los resultados logramos observar un precipitado blanco cristalino despus de un tiempo, debido a que el calcio reacciono con el oxalato de amonio(17) formando oxalato de calcio esta reaccin se describe segn la ecuacin qumica: (NH4)2C2O4(aq) + CaCl2(aq) CaC2O4(s) + 2NH4Cl(aq) Las enzimas son molculas de naturaleza proteica y se dedican a la catalizacin de reacciones qumicas. Estas hacen posible que reacciones, que solas ocurriran a muy bajas velocidades, ocurran de manera ms rpida y eficiente. En el caso de la catalasa esta cataliza la descomposicin de perxido de hidrogeno, producido en el metabolismo celular, en agua y oxigeno segn la siguiente reaccin:

La catalasa es una de las enzimas ms abundantes en la naturaleza y se encuentra distribuida en todo nuestro cuerpo. Esta enzima esta en abundancia en tejidos como el hgado y los riones, principalmente. A nivel celular se encuentra en la mitocondrias y los peroxisomas, donde realiza la reaccin antes sealada. En nuestro experimento de reconocimiento de enzimas hicimos reaccionar el perxido de hidrogeno con 2 trozos de hgado en diferentes condiciones. Primero hicimos reaccionar el perxido de hidrogeno con un trozo de hgado no cocido y pudimos ver la produccin de oxigeno que se vio manifestado con el gran numero de burbujas que salieron de la solucin. En el caso del hgado cocido no pudimos ver una produccin de oxigeno ya que la enzima se desnaturalizo, perdiendo as su estructura terciaria debido a las altas temperaturas. Al perder la enzima su estructura terciaria su sitio activo fue inactivado dejando a la enzima fuera de funcionamiento, es por esto que no se produjo ningn tipo de reaccin con el hgado cocido. Un correcto funcionamiento de la catalasa es de crucial importancia en el cuerpo humano ya que sin ella se pueden producir un sin nmero de enfermedades. El perxido de hidrogeno es una sustancia muy txica e invasiva para el funcionamiento de nuestros sistemas. Entre las enfermedades que se asocian con un mal funcionamiento de la catalasa esta la reperfusin (18), hemlisis (19), lesiones hemorrgicas en la mucosa intestinal (20), entre otras.

VI.- Conclusin
En conclusin, como grupo nos hemos dado cuenta acerca de la utilidad de las sustancias usadas en el laboratorio, creemos entender fuertemente las potencialidades en el campo de la medicina que tiene todo este prctico, tambin este practico nos dio el pie a investigar la cantidad de sustancias que se pueden usar para reconocer distintas cosas en la clula, lo cual nos deja con un suspiro y aoranza de poder entender y lograr a lo largo de nuestra formacin, la experticia necesaria para poder usar estas herramientas en favor de nuestra vocacin. Algo que nos sorprendi particularmente, y que de principio pasamos por alto y que es sumamente importante al tratar de identificar compuestos en una muestra, es el sistema de la muestra de control negativa, que nos dice en un principio si nuestro experimento es viable, descartando toda posibilidad de contaminacin, algo que nos agrado fue el poder comprobar experimentalmente, los conocimientos tericos, en especial el de la desnaturalizacin en la catalasa.

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VII.- Bibliografa
- Libros:

(2) B. Alberts. Introduccin a la Biologa Celular. (2007) Editorial Mdica Panamericana, 2 edicin. Madrid. pp. 50-51. (18) Gulati G. Ischemia-reperfusion injury biochemical alterations in peroxisomes of rat kidney. Arch Biochem Biophys 1992; 15:90-100 (19) Durak I, Akyol D, Basesme E. Reduced erythrocytes defense mechanism against free radical toxicity in patients with chronical renal failure. Nephron 1994; 66:76-80 (20) Schoenberg MH. Reperfusion injury after intestinal ischemia. Crit Care Med 1993; 21:1376-86
- Pginas de internet:

(1) http://www.genomasur.com/lecturas/Guia02-1.htm (3) http://www2.udec.cl/~lilherna/molorganic.html (4) http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/contenidos5.htm (5) http://www.bio.puc.cl/vinsalud/boletin/42lipidos.htm (6) http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=546 (7) http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/contenidos18.htm (8) http://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r46784.PDF (9)http://webcache.googleusercontent.com/search? q=cache:35J6GsxwhdkJ:www.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS+reaccion+quimica+del+ lugol&cd=5&hl=es&ct=clnk&source=www.google.com (10)http://www.ehu.es/biofisica/juanma/lab3/pdf_doc/biuret.pdf (11) http://www.modna.com/public/mft/producto/p1928.htm (12) http://es.scribd.com/doc/11323090/Determinacion-de-Proteinas (13) http://www.nuevaalejandria.com/archivos-curriculares/ciencias/nota-011.htm (14)http://www.buenastareas.com/ensayos/Quimica/556736.html (15) http://www.sagan-gea.org/hojared_AGUA/paginas/19agua.html (16)http://web.educastur.princast.es/proyectos/biogeo_ov/2BCH/B1_BIOQUIMICA/t12_AGUA/infor macion.htm (17) http://www.csicsif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_21/ALMUDENA_MORENO_1.pdf

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