Aunque la produccin de aerosoles es el principal mecanismo de produccin de ests infecciones hay una series de riesgos, en especial aquellos que

se derivan de secundariamente del deposito de aerosoles y aparatos a partir de los que se transmiten los microorganismos a piel y ojos. Los aerosoles se crean de dos formas: atomizacin de suspensiones lquidas, o rotura en fragmentos pequeos de sustancias slidas. Podemos distinguir dos tipos de aerosoles: - Uno se caracteriza por ser de partculas mayores de 5 m, que caen rpidamente contaminando las superficies del laboratorio y la piel del personal y su va de entrada ser la ingestin. - El otro tipo est formado por partculas menores de 5 m; estas se deshidratan casi instantneamente quedando como ncleos goticulares que se mantendrn en suspensin indefinidamente y se movern con las corrientes de aire (son ,los ms peligrosos). Estas partculas pueden contener uno o vario microorganismos, que pueden alcanzar directamente el pulmn y causar la infeccin. Contaminacin de superficies (partculas < 5m) Apertura de tubos y Contaminacin area (ncleos < 5m) Vertido cuidadoso de

recipientes Pipeteo Agitacin de tubos

cultivos Pipetas automticas Mezclas de cultivos con pipetas Inoculacin de embriones Trituradores de alta velocidad Cultivos con agitacin Pipeteo

Apertura de cultivos liofilizados Centrifugacin

1. ASA DE PLATINO. El principal riesgo se produce en el momento de su flameo en el mechero. Una menor proyeccin se produce colocando el asa en el centro de la base de la llama, donde la temperatura es inferior a ala parte perifrica y, de producirse proyeccin de partculas, ests se incineran al atravesar la llama; en un segundo tiempo se retira lentamente el asa hacia el exterior donde se pondr incandescente. Se evita totalmente este riesgo utilizando mecheros elctricos o

Bunsen tipo Kampff en que la llama se encuentra dentro de un tubo de Pyrex. Otra posibilidad es la esterilizacin del asa en agua hirviendo o la utilizacin de asas desechables de plsticos o palillos de madera estriles. La utilizacin de asas recin flameadas en medios slidos o lquidos tambin produce aerosoles, igual que realizar siembras sobre agar muy deshidratado o con superficie rugosa, lo que se reduce si se siembra con asa de Drigalski. Las asas no deben tener una longitud superior a 5 cm, ya que si son largas vibran demasiado. La parte circular debe estar totalmente cerrada, mejor soldada y un dimetro no superior a 3 mm. Las asas de nicrom son mas seguras que las de platino, ya que producen menos aerosoles, pero sin embargo vibran ms. La realizacin de extensiones sobre portaobjetos para tinciones o emulsiones comporta un riesgo casi inevitable de proyeccin de gotas; est es menor si se realizan movimientos giratorios suaves y al retirar el asa se coloca verticalmente a la superficie del portaobjetos. El riesgo disminuye al llevar a acabo esta operacin en cabina de seguridad. Si se va a realizar una tincin, se puede realizar la emulsin en cloruro de mercurio en lugar de suero salino, ya que as se mueren rpidamente las bacterias. La prueba de la catalasa realizada en porta es una maniobra extremadamente peligrosa. Las reacciones positivas producen grandes aerosoles; estos se evitan haciendo la prueba en tubo o recipiente cerrado.

2. PIPETAS. La utilizacin de pipetas constituye uno de los ms serios riesgos de laboratorio derivado del concepto errneo que existe acerca de la finalidad del tapn de algodn situado en el extremo superior, que se coloca para evitar que el polvo penetre y contamine el interior, mientras que la mayora de las personas creen que sirven para evitar contaminarse al aspirar. Este algodn es un filtro poco efectivo y puede ser atravesado por bacterias que se encuentran en medios lquidos. Adems, al humidificarse, impide el flujo de aire y al aspirar se proyecta hacia la boca. En la aspiracin se producen burbujas que se transforma en aerosoles que inhala la persona que la realiza. La aspiracin con pipetas directamente con la boca debe estar totalmente prohibida en laboratorio. Se debe pipetear con peras, propipetas, o mltiples dispositivos mecnicos y elctricos que permiten pipetear con precisin y seguridad. Los aerosoles externos se pueden producir de dos formas, por descarga rpida del lquido al salir de la pipeta o al tocar el lquido de la superficie slida o lquida sobre la que se vierte. La proyeccin forzada del lquido o las diluciones seriadas aumentan el riesgo. El peligro de las gotas proyectadas se reduce en un 90% si stas caen sobre paos o papeles de filtro colocados sobre la superficie. 3. JERINGAS. Las jeringas pueden ser peligrosas cuando se emplean para inocular a animales, extraccin de sangre o sobre

todo en lugar de pipetas para dispensar suspensiones bacterianas. La aspiracin tiene poco riesgo, ya que slo al vibrar la aguja pueden producirse aerosoles. La expulsin de burbujas de aire produce aerosoles, mxime si se hace con la aguja hacia arriba. Los aerosoles producidos al extraer muestras de frascos con tapn de goma se pueden reducir en un 90% si se pincha a travs de una compresa o gasa impregnada en antisptico. Las heridas producidas por agujas es uno de los accidentes de laboratorio ms comunes y una de las principales fuentes de infeccin. Despus de desecharse, las agujas siguen siendo peligrosas; deben depositarse en recipientes adecuados o someterse a autoclave antes de ser manipuladas. 4. CULTIVOS SLIDOS. La placa de Petri representar un riesgo de contaminacin despus de su incubacin y los matraces y tubos tienen un riesgo menor, ya que los aerosoles se producen en un espacio mas cerrado. El agua de condensacin que contienen, se contaminan rpidamente con la manipulacin. El agua suele situarse en la superficie de unin con la tapa de la placa, lo que provoca una dispersin de gotas en el momento de la apertura. El riesgo disminuye colocando un circulo de papel de filtro en la tapa durante la incubacin. La apertura de la placa aun estando secas puede ser peligrosa en el caso de hongos.

La rotura de las placas y tubos por cada al suelo puede constituir un serio riesgo de contaminacin que puede estar favorecida por las heridas producidas al recoger los fragmentos. No debemos olvidar que en estos casos se producen aerosoles y proyeccin de cultivo que contamina tambin los vestidos y calzado del personal. Los cultivos dejados durante largo tiempo sobre la mesa del laboratorio pueden ser invadidos por insectos y artrpodos, que ms tarde van a transportar al microorganismo a otras zonas. 5. BAOS Y AGITADORES. Un mecanismo frecuente de infecciones y errores diagnsticos debidos a contaminaciones cruzadas son los baos de incubacin. La mejor manera de prevenir estas contaminaciones es la sustitucin de los baos por bloques con calefaccin seca (temp-block). Los agitadores tanto secos, con incubacin, como los hmedos, baos de agitacin, son mecanismos que producen aerosoles y proyeccin de gotculas. 6. CENTRFUGAS. Tienen dos tipos de riesgos: fallo mecnico o produccin de aerosol. Estos fallos pueden producir rotura de tubos, tapones, sistemas de suspensin de los tubos o los rotores. Los aerosoles se producen en la centrfuga cuando los tubos estn demasiado llenos y los bordes y el exterior del tubo estn contaminados, no estn bien cerrados o no tienen tapn y sobre todo si ste se rompe. El ngulo de centrifugacin

determina la produccin de aerosoles; se producen sobre todo en rotores de ngulo fijo, semiinclinados, ya que, al no cambiar su ngulo respecto al eje, si en tubo est demasiado lleno, se produce un derrame del lquido. Los rotores basculantes tienen fallos mecnicos como la rotura de los anillos de suspensin y fallos en el mecanismo de balanceo. El aerosol se puede disminuir con el uso de tubos con tapn de rosca y rotores con tapa. La seguridad en el manejo implica en primer lugar su utilizacin correcta: equilibrado, aceleracin y frenado adecuados, etc. 7. TAPONES Y SISTEMAS DE CIERRE. La apertura tubos o matraces de cultivos lquidos, cualquiera que sea su sistema de cierre (tapn de algodn, goma o rosca), puede producir aerosoles. Este riesgo aumenta considerablemente cuando ha agitado el cultivo o, an sin abrirlo, durante la agitacin. Otro riesgo esta representado por el tapn que suele estar mojado con el cultivo, y an seco: los microorganismos suelen vivir en l dando lugar a un aerosol en el momento de la apertura, igualmente las manos pueden contaminarse directamente al retirarlo. La apertura de recipientes cuyo contenido est seco tiene la posibilidad de producir aerosoles, sobre todo si contienen esporas. Si el interior del envase tiene presin negativa, como en los cultivos liofilizados, la entrada brusca de aire provoca turbulencias y salida de partculas con el aire al exterior.

La apertura de ampollas es una maniobra extremadamente peligrosa, ya que se producen aerosoles en el momento de la apertura y existe la posibilidad de producir heridas e incluso el aplastamiento de la ampolla. Para evitar estos riesgos es recomendable envolver la ampolla en tejido absorbente, hacer una estra con raya vidrio o una lima y sobre sta colocar un vidrio o terminal de pipeta de Pasteur al rojo; se produce entonces una grieta que permite la entrada del aire, y despus de algunos segundos y una vez envuelta se abre la ampolla. Se sumerge en desinfectante la parte superior de la ampolla y el tejido que la rodea y se extrae el contenido con pipeta de Pasteur o jeringa. Si el contenido no es lquido, se aade 0.5 ml de medio de cultivo y se mezclan lentamente evitando formar burbujas. Otra fuente de infeccin son los paquetes mal embalados o que no estn debidamente sealizados. 8. INFECCIONES ADQUIRIDAS DE ANIMALES DE EXPERIMENTACIN. Las infecciones adquiridas ms frecuentes son la brucelosis y leptospirosis. Se recomienda anestesiar o administrar un tranquilizante al animal cuando se maneja para minimizar riesgos. 6. INFECCIONES MS FRECUENTES Y SU LETALIDAD. 6.1. BRUCELOSIS. Es la infeccin bacteriana adquirida en el laboratorio con mayor frecuencia; su letalidad fue menor del 1%.

El curso prolongado y la gravedad de la infeccin justifican las medidas de seguridad en el trabajo con estos microorganismos. 6.2. FIEBRE TIFOIDEA. Es la segunda infeccin en frecuencia descrita y la que ha presentado la letalidad ms alta, 7%. Estas infecciones se pueden considerar un buen ndice de la falta de seguridad de las tcnicas microbiolgicas. 6.3. RICKETTSIAS. FIEBRE Q. Con igual nmero de infecciones descritas que la fiebre tifoidea, la fiebre Q slo ha causado un caso mortal. Las otras enfermedades producidas por rickettsias (fiebre exantemtica, tifus exantemtico) no han registrado tan gran nmero de accidente, pero la mayora de los casos fueron mortales. Est proporcin disminuyo con el uso de vacunas y antibiticos. 6.4. TUBERCULOSIS. El nmero de casos descrito es pequeo porque la tuberculosis puede quedarse como infeccin latente y, si se presenta como enfermedad, lo hace unos meses despus del contagio en el laboratorio. En mltiples estudios se ha demostrado que la incidencia de tuberculosis es mayor entre el personal de laboratorio que entre la poblacin en general. La va de adquisicin de est infeccin sera la area. En el trabajo con micobacterias se aplica el nivel de seguridad biolgica con cabinas tipo l y II, especialmente la IIB2. 6.5. HEPATITIS.

Es la ms frecuente de las infecciones vricas adquiridas en el laboratorio. La baja cifra de declaraciones se explica por la frecuencia de casos subclnicos, que llegan a ser del 86%. Es ms frecuente en otros laboratorios distintos al de microbiologa ya que su frecuencia est en relacin directa con el contacto con la sangre o sus derivados. Los cirujanos muestran una incidencia de Ac de hasta del 23%, mientras que en los microbilogos es del 20% y el personal del departamento de bioqumica del 40%. La adquisicin de la infeccin no requiere necesariamente el contacto con la sangre o sus derivados. Se ha demostrado que el 34% de las muestras obtenidas de las superficies de los muebles del laboratorio clnico contenan AgHBs, as como el 55 y 44% de las parte externa de los envases cerrados que contenan, respectivamente, muestras de sangre y sueros. 6.6. SIDA. El VIH es uno de los patgenos menos transmisibles que conocemos.(0.5% del personal altamente expuesto) incluso cuando se producen pinchazos accidentales con jeringas contaminadas. Aunque el VIH se ha detectado en sangre, suero, semen, lagrimas, saliva, orina, secreciones vaginales y leche materna. Se recomienda el uso rutinario de guantes y bata pero el de mascarilla y gafas. En caso de contacto con sangre se debe lavar rpidamente con agua y jabn. Para descontaminar el derrame accidental se

recomienda un germicida activo como la leja de cloro a concentraciones 1/10 a 1/100. 6.7. OTROS VIRUS. Las bacterias han sido desplazadas por los virus como causa ms frecuente. Se considera que se infecta anualmente el 5% del personal sanitario que trabaja en el laboratorio con virus. Para peligros conocidos, se pueden tomar precauciones ya probadas como efectivas. este no es el caso de virus procedentes de anormales como los herpesvirus B o el virus Marburg. esto nos debe hacer considerar potencialmente peligrosos los cultivos celulares primarios y el manejo de animales, aunque no es ten an inoculados. Respecto a los virus tumorales, se deben tomar las mximas precauciones para alguno de ellos. El Arenovirus y otros virus an no clasificados representan el mximo riesgo de infeccin para el personal sanitario que atiende a los pacientes infectados o maneja sus muestras. Son los que generan las fiebres de Lassa, Marburg, Ebola y las hemorrgicas de Congo-Crimea. Kuru y Creutzfeldt-Jakob son enfermedades degenerativas del SNC producidas por priones que se consideran dentro de la clase 3 y que resisten la mayora de los mtodos de esterilizacin y desinfeccin. Si se toman las precauciones habituales de la hepatitis B el riesgo de adquisicin es mnimo al manipular el material infeccioso en cabinas de clase II.

La esterilizacin del material contaminado se consigue nicamente el autoclave a elevada temperatura, 132 C, durante una hora. Para descontaminar las superficies slo se recomienda la utilizacin de hidrxido sdico 1N o el hipoclorito sdica 5,25% (leja domstica pura). Ambos se deben dejar actuar durante una hora la menos. Se han demostrado ineficaces el xido de etileno, radiaciones UV y la mayora de los desinfectantes. 6.7. MICOSIS. Las dermatomicosis constituyen las infecciones por hongos ms frecuentes, su origen son los animales de laboratorio inoculados y, dada su escasa importancia clnica, no se describen en la literatura. La infeccin ms frecuente ha sido la coccidiodomicosis debido a la facilidad de inhalar sus esporas, seguida de la histoplasmosis. 6.8. PARSITOS. Es el grupo que ha registrado menor nmero de infecciones. Slo se han producido 2 casos mortales por L. donovani y T.gondii.