MODELAMIENTO DE LA TRANSFERENCIA DE OXGENO PARA EL CULTIVO DE

MICROORGANISMOS EN UN BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO

DIDIER ANDRS MONTOYA GUZMN


MNICA YAMILE BERMDEZ SEGURA

















UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURA
CARRERA DE INGENIERA QUMICA
Manizales
2003

PORTADA

MODELAMIENTO DE LA TRANSFERENCIA DE OXIGENO PARA EL CULTIVO DE
MICROORGANISMOS EN UN BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO









DIDIER ANDRS MONTOYA GUZMN
Lnea de Profundizacin en Procesos Qumicos, Catalticos y Biotecnolgicos



MNICA YAMILE BERMDEZ SEGURA
Lnea de Profundizacin en Alimentos



Modalidad: Proyecto Final





Director
OSCAR JULIN SNCHEZ TORO
Ingeniero Qumico, M.Sc. en Biotecnologa











UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURA
CARRERA DE INGENIERA QUMICA
Manizales
2003



DEDICATORIA




A D i os qui en es mi pri nci pal pat roci nador,
a mi s padres Adi el a y Arcesi o
por su i ndecl i nabl e propsi t o de apoyarme,
a mi s hermanos por su comprensi n
y a l a momi t a por su i nf i ni t a paci enci a.


D i di er








D edi co est e t rabaj o con mucho cari o
a mi s padres D i l i a y Al f onso por su amor,
a mi hermano Geovanni por su apoyo i ncondi ci onal ,
a Juan Andrs Sol art e por su i nval uabl e col aboraci n,
a D i di er por t odo el t i empo que me permi t i compart i r a su l ado,
adems, a l os que l es f al l y me si gui eron queri endo ...
y por supuest o, a D i os por t oda l a l i bert ad
para hacer bi en o mal mi vi da ...


M oma




AGRADECIMIENTOS


Por sus valiosos aportes en la concepcin y realizacin de este proyecto, los autores
agradecen a:


OSCAR JULIN SANCHZ TORO. Director departamento de Ingeniera de Alimentos.
Universidad de Caldas.


NELSN CAICEDO. Jefe de Planta Piloto. Levapn S.A. Tula.


GERMN BARCO. Profesor adscrito al departamento de Matemticas. Universidad
Nacional de Colombia Sede Manizales.


CARLOS ARIEL CARDONA. Profesor Asociado. Universidad Nacional de Colombia
Sede Manizales.


JUAN ANDRS SOLARTE. Estudiante pregrado Ingeniera Qumica. Universidad
Nacional de Colombia Sede Manizales.


ABSALN VALENCIA HERNNDEZ. Estudiante pregrado Ingeniera Elctrica.
Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales.


LUIS ROLANDO ROS. Tecnlogo Qumico. Universidad Tecnolgica de Pereira.









CONTENIDO


pg.


INTRODUCCIN _______________________________________________________ 15


RESUMEN ____________________________________________________________ 17


1. SOPORTE TERICO AL MODELAMIENTO DE LA TRANSFERENCIA DE
OXGENO EN MEDIOS BIOLGICOS ______________________________________ 18


1.1 CONCEPTOS BSICOS ____________________________________________ 18


1.1.1 Interfase gas lquido. _____________________________________________ 18


1.1.2 Caractersticas reolgicas. _________________________________________ 21


1.1.3 Difusividad. _____________________________________________________ 24


1.1.4 Solubilidad de gases. _____________________________________________ 26


1.1.5 Otros factores fisicoqumicos que afectan el fenmeno de transferencia. _____ 29


1.2 CINTICA DE LA FERMENTACIN ___________________________________ 32


1.2.1 Generalidades. __________________________________________________ 32


1.2.2 Modelos cinticos de procesos simples. _______________________________ 33


1.2.3 Velocidad de la utilizacin metablica de oxgeno. ______________________ 40



1.2.4 Biorreactores utilizados en procesos fermentativos. ______________________ 41


1.3 HIDRODINMICA DE LA COLUMNA DE BURBUJEO _____________________ 43


1.3.1 Tipos y estados de operacin. ______________________________________ 43


1.3.2 Propiedades de la burbuja. __________________________________________ 48


1.3.3 Retencin de gas en la columna. ____________________________________ 53


1.3.4 rea interfacial gas lquido. _______________________________________ 54


1.3.5 Coeficiente de transferencia en el lado lquido. _________________________ 55


1.3.6 Coeficiente volumtrico global de transferencia de masa. _________________ 57


1.4 BALANCE DE MATERIA EN BIORREACTORES DE DOS FASES ___________ 58


1.4.1 Sistema aire agua. _______________________________________________ 58


1.4.2 Sistemas con consumo de oxgeno. __________________________________ 64


1.4.3 Tanques aireados y con agitacin mecnica. ___________________________ 67


2. METODOLOGA___________________________________________________ 69


2.1 LEYES FISICOQUMICAS DEL FENMENO ____________________________ 69


2.1.1 Objetivo. _______________________________________________________ 69


2.1.2 Desarrollo. ______________________________________________________ 69


2.2 BALANCE DE MATERIA PARA EL OXGENO ___________________________ 73

2.2.1 Objetivo. _______________________________________________________ 73


2.2.2 Desarrollo. ______________________________________________________ 73


2.3 COEFICIENTES DE TRANSFERENCIA DE MASA _______________________ 74


2.3.1 Objetivo. _______________________________________________________ 74


2.3.2 Desarrollo. ______________________________________________________ 74


2.4 RESULTADOS DEL MODELO________________________________________ 77


2.4.1 Objetivo. _______________________________________________________ 77


2.4.2 Desarrollo. ______________________________________________________ 77


2.5 SISTEMA DE BURBUJEO CON ASPA _________________________________ 78


2.5.1 Objetivo. _______________________________________________________ 78


2.5.2 Desarrollo. ______________________________________________________ 78


3. RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS__________________________ 80


3.1 PARMETROS FISICOQUMICOS DEL MODELO________________________ 80


3.2 COEFICIENTES DE TRANSFERENCIA DE MASA _______________________ 83


3.3 RESULTADOS DEL MODELO________________________________________ 85


3.3.1 Burbujeo de aire en agua. __________________________________________ 85


3.3.2 Columna de burbujeo operada por lotes. ______________________________ 87

3.3.3 Sistema de burbujeo con agitacin. __________________________________ 88


3.3.4 Columna de burbujeo operada por lote alimentado. ______________________ 90


4. CONCLUSIONES__________________________________________________ 92


5. RECOMENDACIONES _____________________________________________ 94


BIBLIOGRAFA_________________________________________________________ 95


Anexos ___________________________________________________________ 100








LISTA DE TABLAS


pg.


Tabla 1. Viscosidad aparente de una suspensin de levadura. __________________ 24


Tabla 2. Solubilidad del oxgeno en agua y valores de la constante de Henry. ______ 26


Tabla 3. Constantes inicas especficas de sales para oxgeno para el modelo de
solubilidad de gases propuesto por Schumpe et. al. ____________________________ 28


Tabla 4. Parmetros de solubilidad K
i
para oxgeno. __________________________ 29


Tabla 5. Resumen de las relaciones frecuentemente usadas para expresar cinticas
simples en el modelo de simulacin de procesos de fermentacin._________________ 33


Tabla 6. Valores de
max
y K
s
para algunos microorganismos. ___________________ 37


Tabla 7. Valores del coeficiente de mantenimiento para varios microorganismos. ___ 38


Tabla 8. Factores Y
X/S
y Y
O
2
para diferentes microorganismos. __________________ 41


Tabla 9. Dimetros de burbuja.___________________________________________ 53


Tabla 10. Correlaciones para la determinacin del nmero de Sherwood. __________ 56


Tabla 11. Tabla de grados de libertad para el modelo matemtico. ________________ 71


Tabla 12. Constantes de proporcionalidad y nmeros de potencia para diferentes tipos
de rodetes. ____________________________________________________________ 79


Tabla 13. Composicin tpica de un medio de fermentacin. _____________________ 81

Tabla 14. k
L
a para diversas relaciones Altura Dimetro de la columna de burbujeo. _ 83


Tabla 15. Parmetros hidrodinmicos para CB y CBA*._________________________ 88











LISTA DE FIGURAS


pg.


Figura 1. Perfiles de concentracin del modelo de dos pelculas, transferencia de
masa global por absorcin.________________________________________________ 19


Figura 2. Esquema del transporte de oxgeno desde una burbuja de gas al interior
de la clula.____________________________________________________________ 21


Figura 3. Resumen de modelos no newtonianos en estado estacionario (con fines
comparativos se indica tambin el modelo newtoniano). _________________________ 22


Figura 4. Curva tpica de crecimiento celular. ________________________________ 34


Figura 5. Columna de burbujeo simple. _____________________________________ 44


Figura 6. Modelo de circulacin de lquido. __________________________________ 45


Figura 7. Estados de operacin en columnas de burbujeo. ______________________ 46


Figura 8. Distribuidores estticos de gas. ___________________________________ 47


Figura 9. Principio de distribucin de gas a travs de chorros y principales
distribuidores. __________________________________________________________ 47


Figura 10. Formacin de la burbuja de gas en el orificio del difusor.________________ 48


Figura 11. Regiones y en una columna de burbujeo. _________________________ 51


Figura 12. Modelo de ascensin de la burbuja a travs de la columna. _____________ 55



Figura 13. Biorreactor con fases gas y lquida bien mezcladas. ___________________ 58


Figura 14. Modelo simple de circulacin de lquido. ____________________________ 62


Figura 15. Tcnicas de cultivo y crecimiento celular.____________________________ 65


Figura 16. Desarrollo de un modelo matemtico. ______________________________ 69


Figura 17. Algoritmo de clculo para la constante de la Ley de Henry. ______________ 72


Figura 18. Seccin diferencial en la interfase de una Columna de burbujeo. _________ 73


Figura 19. Algoritmo de clculo para el coeficiente volumtrico global de transferencia
de masa. ____________________________________________________________ 75


Figura 20. Algoritmo de clculo para el rgimen de formacin de la burbuja. _________ 76


Figura 21. Algoritmo de clculo para la solucin del modelo matemtico. ___________ 77


Figura 22. k
L
a en funcin de las variables de diseo. ___________________________ 84


Figura 23. Comportamiento de la fraccin molar de oxgeno en la fase gaseosa del
sistema aire agua. _____________________________________________________ 85


Figura 24. Comportamiento de la concentracin de oxgeno disuelto en la fase lquida
del sistema aire - agua. __________________________________________________ 86


Figura 25. Concentracin de oxgeno disuelto en el lquido en funcin del caudal
de aire. ____________________________________________________________ 86


Figura 26. Perfil de los parmetros C
O
2
, y, X, S y r
O
2
en una columna de burbujeo
operada por lotes._______________________________________________________ 87




Figura 27. Variacin de la fraccin molar de oxgeno en funcin de la altura de la
columna. ____________________________________________________________ 88


Figura 28. Efecto de la inclusin de un agitador mecnico en la columna de burbujeo. _ 89


Figura 29. Perfil de C
O
2
en el lquido para diferentes condiciones de mezclado._______ 90


Figura 30. Perfil de los parmetros C
O
2
, F, V, X, S en una columna operada por lote
alimentado. ____________________________________________________________ 91






LISTA DE ANEXOS


pg.


Anexo A Correccin del Valor de Solubilidad con la Presin ___________________ 100


Anexo B Configuracin de los Biorreactores para Fermentaciones Aerobias_______ 101


Anexo C
Correlaciones Empricas para el Clculo de la Retencin del Gas ( ),
el rea Interfacial (a), el Coeficiente de Transferencia en el Lado Lquido (k
L
),
el Coeficiente Volumtrico Global de Transferencia de Masa (k
L
a) y el Coeficiente
de Dispersin Axial (E
L
) _________________________________________________ 110


Anexo D Solucin Analtica del Balance de Materia para el Burbujeo en Agua _____ 121


Anexo E Lista de Smbolos _____________________________________________ 125















INTRODUCCIN


En el desarrollo de procesos biotecnolgicos aerbicos, un factor limitante en el
crecimiento microbiano y por ende en el rendimiento econmico del proceso fermentativo
es la oxigenacin que se haga del microorganismo, ya que este prescinde una cantidad
mnima de oxgeno disuelto en el medio de cultivo para sus requerimientos metablicos.
Se ha estimado que una poblacin tpica de clulas respirando activamente, consume
oxgeno a una velocidad la cual es del orden de 750 veces el valor de saturacin de
oxgeno por hora en un medio acuoso; as puesto que el inventario de gas disuelto en el
caldo de cultivo es considerablemente pequeo, este debe ser continuamente adicionado
al lquido con el fin de mantener una poblacin viable de microorganismos. La eficiencia
del proceso de fermentacin depende en gran parte de la cantidad y la habilidad del
fermentativo.


El comportamiento de la concentracin de oxgeno a travs del biorreactor es vital para
asegurar condiciones de equidad energtica a las clulas. En este sentido, mediante un
arreglo de ecuaciones que describen el fenmeno de transporte en sistemas
gas lquido, fue posible realizar el modelamiento de la transferencia de oxgeno para el
cultivo de microorganismos en un biorreactor de columna de burbujeo, a fin de obtener un
perfil de concentracin de oxgeno sobre el reactor como resultado de la solucin
numrica computacional del modelo.


La importancia de un modelo matemtico adecuado para representar el fenmeno de
transferencia, radica en poder simular intervalos extremos de las condiciones de
operacin los cuales pueden ser impredecibles o imposibles de ejecutar en una planta
real, igualmente establecer caractersticas de funcionamiento, as como introducir nuevos
factores y elementos a un proceso ya establecido. El anlisis y la simulacin del proceso
de oxigenacin de los microorganismos, permiti examinar el efecto de la modificacin de
las variables de diseo y parmetros de operacin con relacin al tiempo global de la
fermentacin.


En un estudio preliminar, el mtodo de aireacin de la levadura, es investigado como un
medio para mejorar la habilidad de la fermentacin de dicha levadura [44]. En este estudio
se desarroll una teora para predecir la ruta de transferencia de oxgeno en una mezcla
de levaduras. Esta teora pudo usarse para predecir los niveles de oxgeno disuelto en el
caldo de cultivo como funcin del tiempo de aireacin en un sistema piloto, De Len y
otros [13] hacan lo mismo para fermentadores a gran escala. Aos despus Hussain
et. al. [22] efectuaron una evaluacin comparativa de diferentes esquemas para el control
de fermentaciones por lote alimentado, en especial para el estudio de levadura de
panificacin.



Como objetivo general del estudio realizado se plante el modelar el fenmeno de
transporte de oxgeno para el cultivo de microorganismos en un biorreactor de columna de
burbujeo que se opera por lotes, esto a partir del arreglo matemtico de ecuaciones que
describen las leyes fisicoqumicas que gobiernan el fenmeno, las ecuaciones del balance
de materia para ambas fases, la obtencin de los coeficientes de transferencia de masa y
la solucin numrica computacional del modelo.


Este modelo de columna de burbujeo simple es modificado mediante la inclusin de un
agitador mecnico que permita comparar ambos sistemas de mezclado. Adicionalmente,
las ecuaciones del balance se utilizaron para la simulacin del sistema dinmico del
proceso (estado no estacionario) semicontinuo, a partir del estudio de una columna de
burbujeo operada por lote alimentado.


Como resultado de la prediccin de nivel de oxgeno disponible en el medio para cada
punto en el biorreactor, la concentracin de biomasa alcanzada, se pueden hacer
estimaciones acerca del tiempo real de fermentacin del microorganismo, caudales de
suministro de aire y analizar la influencia de la geometra del tanque en el producto
obtenido. De esta forma se pretende contribuir a la problemtica que se justific para el
desarrollo del proyecto, adems de aportar a nivel acadmico en el suministro de un
modelo para la transferencia de masa gas lquido y su solucin numrica.


Aunque los resultados de una simulacin constituyen probablemente slo una primera
aproximacin del comportamiento del sistema real, estos resultados confrontados con los
datos experimentales, aumentan el grado de comprensin del sistema real y ayudan a
mejorar el modelo. Adems la disciplina lograda mediante el anlisis de un
comportamiento complejo, de acuerdo con la teora disponible, expresada en forma de
ecuaciones matemticas, constituye una herramienta poderosa para entender las
interacciones entre causa y efecto en un sistema real. El xito de esta metodologa se
basa en la posibilidad de obtener una solucin numrica inmediata, los detalles del
procedimiento numrico son manejados por el computador, mientras el usuario concentra
su atencin en los aspectos relevantes del problema real de ingeniera.














ABSTRACT


Diverse authors have demonstrated that an aeration system favors the fermentative
abilities of the aerobic microorganisms, of there, the importance of the study of the route of
oxygen transfer to a medium of cultivation considering different factors that affect the
phenomenon, such like the regime of the tank, the relationship height - diameter, the
impeller type and dispersor of air, the time of aeration in the tank, the dissolved oxygen
concentration in the medium, etc.


The work thinks about the modeling of the oxygen transfer for the cultivation of
microorganisms in a bubble column bioreactor, with the purpose of obtaining a profile of
oxygen concentration on the biorreactor as a result of the computational solution numeric
of the pattern. As additional objective the dynamics behavior of the phenomenon of
oxygen transfer is analyzed in the bubble column starting from its operation for fed batch.




RESUMEN


Diversos autores han demostrado que un sistema de aireacin favorece las habilidades
fermentativas de los microorganismos aerobios, de all la importancia del estudio de la
ruta de transferencia de oxgeno a un medio de cultivo considerando diferentes factores
que afectan el fenmeno, tales como rgimen del tanque, relacin altura dimetro, tipo
de impulsor y dispersor de aire, tiempo de aireacin en el tanque, concentracin de
oxgeno disuelto en el medio, etc.


En el trabajo se plantea el modelamiento de la transferencia de oxgeno para el cultivo de
microorganismos en un biorreactor de columna de burbujeo, con el fin de obtener un perfil
de concentracin de oxgeno sobre el biorreactor como resultado de la solucin numrica
computacional del modelo. Como objetivo adicional se analiza el comportamiento
dinmico del fenmeno de transferencia de oxgeno en la columna de burbujeo a partir de
su operacin por lote alimentado.

18


1. SOPORTE TERICO AL MODELAMIENTO DE LA TRANSFERENCIA DE
OXGENO EN MEDIOS BIOLGICOS


1.1 CONCEPTOS BSICOS


Los reactores bioqumicos son ampliamente usados en la industria alimenticia,
fermentaciones microbianas, en sistemas de tratamiento de aguas y en algunos procesos
biomdicos. En todos estos reactores se involucran diferentes fases y tanto sustratos
como nutrientes deben ser transferidos de una fase a otra. Para hacer efectivo el grado de
conversin deseado de reactantes a productos, o el suministro suficiente de nutrientes
para el mantenimiento de un microorganismo, la transferencia de masa debe realizarse de
una forma muy intensa y eficiente.


Durante el crecimiento y metabolismo microbianos tiene lugar en forma continua la
transferencia de nutrientes y metabolitos entre el medio ambiente externo y la clula. En
fermentaciones aerbicas, se considera la transferencia de oxgeno de la fase gaseosa a
la fase lquida como el problema ms importante en comparacin con el suministro de
cualquier otro nutriente, ya que el oxgeno es menos soluble en agua que las fuentes de
carbono (generalmente en exceso) y otros nutrientes. Por ejemplo el azcar se disuelve
entre 500 600 g/L mientras que la mxima solubilidad del oxgeno a 1 atm y 4 C en
agua pura es de solamente 8 mg/L [33]. As, no es posible proveer inicialmente un cultivo
microbiano con todo el oxgeno necesario para la respiracin completa, por lo que ste
debe ser suministrado durante el crecimiento a una velocidad suficiente para satisfacer la
demanda de los organismos.


En esta seccin se consideran los parmetros fisicoqumicos que gobiernan el fenmeno
de la transferencia de oxgeno desde la fase gaseosa hasta la fase acuosa en un medio
de cultivo.


1.1.1 Interfase gas lquido.


Teora de la pelcula. Cuando una sustancia se mueve desde el seno de una fase a
la interfase o viceversa, el fenmeno es conocido como transferencia de masa. Como
regla general un flujo de masa N
i
es proporcional a la diferencia de concentracin, en
este caso la diferencia entre la concentracin C y la concentracin de la interfase C
i
. La
constante de proporcionalidad resultante de la relacin entre el flujo de materia y la
diferencia de concentracin es conocida como el coeficiente de transferencia de masa:


(1.1.1) ( ) C C k N
i i

19
C
Gi

C
G

C
Li

C
L

Interfase
Lquido
Transferencia de
masa global
Transferencia de masa
en el lado lquido
Transferencia de masa
en el lado gaseoso
Gas

G

L

Donde k tiene un ndice L G dependiendo de si la concentracin corresponde al lado
gaseoso o al lado lquido.


De acuerdo con la teora de la pelcula, an cuando el seno de ambos fluidos se
encuentre perfectamente mezclado, la turbulencia en cada fluido disminuye cerca de la
interfase y se forma una pelcula fina de fluido relativamente en reposo, estancada o en
rgimen laminar a cada uno de los lados de la interfase y de un espesor . La
transferencia de materia a travs de esta interfase se produce perpendicular a la pelcula
y nicamente por difusin molecular.


La concentracin de oxgeno vara en zonas cercanas a la interfase. La mayor parte de la
resistencia a la transferencia de materia tiene lugar en la pelcula de lquido ms que en el
seno de los fluidos (al estar perfectamente mezclados, la concentracin tiende a ser
constante).


Para efectos prcticos generalmente se supone despreciable la resistencia al transporte
en la interfase, lo que equivale a suponer que las fases se encuentran en equilibrio en el
plano de contacto como se indica en la Figura 1. La diferencia entre C
Gi
y C
Li
en la
interfase justifica la posibilidad de que en equilibrio, el oxgeno pueda ser ms soluble en
una fase que en la otra. La difusin del oxgeno es bsica para que se produzca la
transferencia de materia debido a que las velocidades locales del fluido se aproximan a
cero en la interfase.


Figura 1. Perfiles de concentracin del modelo de dos pelculas, transferencia de masa global
por absorcin.















fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.


Para especies poco solubles en agua como oxgeno o hidrocarburos, las dos
concentraciones en equilibrio en la interfase C
Gi
y C
Li
de la pelcula gaseosa y lquida
20
respectivamente, pueden ser relacionadas en forma lineal a travs de una Ley de
particin:

(1.1.2)

Donde: M = coeficiente de distribucin


En estado estable, la velocidad de transferencia de oxgeno a la interfase gas lquido
debe ser igual a la velocidad de transferencia de oxgeno a travs de la pelcula de lquido,
ya que no existe acumulacin de oxgeno en la interfase ni en ningn otro lugar del
sistema. De esta forma pueden escribirse dos ecuaciones iguales para la velocidad de
transferencia de oxgeno:


(1.1.3)


Donde: Flujo de oxgeno en [mol O
2
/ (m
2
.s)]


Puesto que usualmente no es posible obtener en forma experimental las concentraciones
en la interfase, se recurre a expresar la transferencia de masa en trminos de un
coeficiente global de transferencia de masa K
L
y una fuerza impulsora global (C
L
* C
L
),
donde C
L
* es la concentracin de la fase lquida cuando est en equilibrio con el seno de la
fase gaseosa.

(1.1.4)

En trminos de estas cantidades globales, el flujo de soluto est dado por:

(1.1.5)

Del arreglo de las ecuaciones (1.1.2) a (1.1.5), se obtiene la relacin ampliamente
conocida entre el coeficiente global de transferencia de masa y los parmetros fsicos de
la resistencia al transporte en las dos pelculas, 1/k
G
, 1/k
L
y M:


(1.1.6)


Para especies poco solubles, M es considerablemente mayor que la unidad. Adems, k
G

es por lo general mucho mayor que k
L
. Bajo estas circunstancias, de la ecuacin (1.1.6)
se observa que K
L
es aproximadamente igual a k
L
. As, esencialmente toda la resistencia
a la transferencia de masa se sita en el lado de la pelcula lquida.
Gi Li
C C M
( )
( ) lquido lado C C k oxgeno de Flujo
gas lado C C k oxgeno de Flujo
L Li L
Gi G G


G
*
L
C C M
G L L
k M
1
k
1
K
1
+
( )
L
*
L L
C C K Flujo
21
Pelcula
lquida
Pelcula
lquida
Lugar de reaccin
del oxgeno
Membrana
celular
Seno del lquido
Interfase gas - lquido
Interfase lquido agregado celular
Burbuja
de gas
Agregado
celular
Clula
individual
Resistencia a la transferencia. El oxgeno para ser metabolizado por el
microorganismo debe pasar a travs de una serie de resistencias al transporte,
dependiendo de la hidrodinmica de la burbuja, temperatura, actividad celular y densidad,
composicin de la solucin, fenmeno interfacial y otros factores. En la Figura 2 se
muestra de forma esquemtica las resistencias involucradas en el transporte de oxgeno
desde el interior de la burbuja de gas hasta el lugar de reaccin en el interior de la clula.
Estas son:
1. Difusin desde el seno o ncleo del gas a la interfase gas lquido.
2. Movimiento a travs de la interfase gas lquido.
3. Difusin del soluto a travs de la regin estancada adyacente a la burbuja.
4. Transporte del soluto a travs del seno del fluido lquido.
5. Movimiento a travs de la segunda regin estancada asociada con la clula.
6. Transporte difusivo hacia el interior de la clula.
7. Si las clulas estn en un flculo, agregado o partcula slida, difusin a
travs del slido hasta cada clula individual.
8. Transporte a travs del citoplasma hasta el lugar de reaccin.


Figura 2. Esquema del transporte de oxgeno desde una burbuja de gas al interior de la clula.




















fuente: BAILEY, James and OLLIS, David. Biochemical Engineering Fundamentals, 1986.


1.1.2 Caractersticas reolgicas. La viscosidad constituye un importante aspecto de
la reologa, ciencia de la deformacin y el flujo. Los parmetros reolgicos del medio
(generalmente acuoso) en reactores biolgicos, influencian la magnitud del mezclado
entre fases y consecuentemente las velocidades de transferencia de masa y calor. Los
microorganismos, sustratos, productos y aire presentes en todas las fermentaciones
hacen que un caldo de cultivo exhiba una reologa compleja, desvindose en distintas
formas del comportamiento newtoniano de acuerdo a sus caractersticas especficas.
22
Reiner-Philippoff
o > oo
Ostwarld - de Waele
pseudplstico
Ostwarld - de Waele
dilatante
Pendiente en
el origen = o
Pendiente

Pendiente en
el origen
Pendiente
1/
Pendiente
oo
Pendiente en el origen = o
- o
+ o
Pendiente

Bingham
Pendiente en
el origen = o
Ellis, n < 1
Prandtl-Eyring Ellis, n > 1
Newtoniano
Modelos de dos parmetros
Newtoniano
dx
d
y

dx
d
y

Modelos de tres parmetros

yx yx
Fluidos Newtonianos. Los fluidos se denominan newtonianos cuando su flujo
obedece a la ley de Newton. La ley de Newton de la viscosidad establece que la fuerza
de viscosidad F se opone al movimiento en la interfase de dos capas de lquido que
fluyen con un gradiente de velocidad (d/dx) dado por la ecuacin (1.1.7):


(1.1.7)






Donde es la viscosidad del fluido o resistencia del fluido al flujo, (F/A) es la fuerza de
cizalla o fuerza por unidad de rea y (d/dx) es la velocidad de cizalla o gradiente de
velocidad


La viscosidad es el cociente entre la fuerza y la velocidad de cizalla, y representando una
frente a otra se obtiene una lnea recta para un fluido newtoniano que tiene una
viscosidad constante igual a la pendiente de la recta. Mientras en el proceso de
fermentacin newtoniano la viscosidad no vara con la fuerza de cizalla o con la velocidad
de agitacin, en un fluido no newtoniano puede variar con ambas. En la Figura 3 se
representan las grficas obtenidas con un fluido newtoniano y con algunos no
newtonianos.


Figura 3. Resumen de modelos no newtonianos en estado estacionario (con fines comparativos
se indica tambin el modelo newtoniano).


















fuente: BIRD R., Byron; STEWART, Warren E. and LIGHTFOOT, Edwin. Transport phenomena, 1964.
dx
d
A F


( )
dX / d
A / F

23
Fluidos no Newtonianos. La mayora de las suspensiones y dispersiones, como las
disoluciones homogneas de polmeros de largas cadenas y otras molculas grandes,
son fluidos no newtonianos. Muchos de los procesos de fermentacin utilizan materiales
que presentan un comportamiento no newtoniano, como el almidn, polisacridos
extracelulares y caldos de cultivos que contienen suspensiones de clulas.


Los tipos comunes de fluidos no newtonianos incluyen los pseudoplsticos, los dilatantes,
los plsticos de Bingham y los plsticos Casson. En todos estos casos, la relacin entre el
esfuerzo cortante (
yx
) y la velocidad de cizalla no es constante. A pesar de todo, a
menudo esta relacin se denomina viscosidad aparente
app
cuando se aplica a fluidos no
newtonianos. La viscosidad aparente no es una propiedad fsica del fluido en el mismo
sentido que la viscosidad newtoniana, sino que depende de la fuerza de cizalla ejercida
sobre el fluido. Por lo tanto, no tiene sentido especificar la viscosidad aparente de un
fluido no newtoniano sin citar el esfuerzo cortante o la velocidad de cizalla a la que se ha
medido.


Los fluidos pseudoplsticos y los dilatantes obedecen la Ley exponencial (ley de
potencia):


(1.1.8)


donde n es el ndice de la ley de potencia y K es el ndice de consistencia o rigidez. Para
fluidos pseudoplsticos n es menor de 1 y para fluidos dilatantes n es mayor que 1. Los
fluidos newtonianos tienen n igual a 1. Se han propuesto numerosas ecuaciones
empricas o modelos para expresar la relacin que existe, en estado estacionario, entre

yx
y (d
y
/dx) [6]. Todas las ecuaciones contienen parmetros empricos positivos cuyo
valor numrico puede determinarse correlacionando los datos experimentales de
yx
frente
(d
y
/dx) a temperatura y presin constantes.


Propiedades reolgicas de caldos de fermentacin. Existen en la bibliografa
numerosos datos reolgicos para una gran variedad de caldos de fermentacin. Esta
informacin se ha obtenido utilizando distintos viscosmetros y tcnicas de medicin. Sin
embargo, en muchos casos se han ignorado problemas de operacin como la separacin
de las partculas y la centrifugacin. Charles M.
1
, clasifica los caldos de fermentacin en
tres categoras: cultivos miceliales, cultivos con polisacridos extracelulares, y cultivos de
bacterias y levaduras. La mayora de las suspensiones de micelios se han modelado
como fluidos pseudoplsticos o, si existe tensin, como plsticos Bingham o Casson,
mientras que la reologa de caldos diluidos y cultivos de levaduras y bacterias sin
formacin de cadenas es generalmente newtoniano.

1
CHARLES, M. "Technical aspects of the rheological properties of microbial cultures". Adv. Biochem. Eng. Vol. 8: Mass
Transfer in biotechnology, Ghose, T.H., A. Fiechter y N. Blakerbrough, editors, Springer-Verlag, Berlin, P 1 - 62, 1978.
Citado por DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.
dx
d
dx
d
K
y
1 n
y
yx

,
_

24
Una torta prensada diluida con agua de un cultivo de Saccharomyces cerevisiae con una
velocidad de cizalla de 2 a 100 s
-1
presenta un comportamiento newtoniano para caldos
con una concentracin por debajo de 10 % de slidos ( < 4 5 cP) y pseudoplstico por
encima del 10 % de slidos. Los resultados obtenidos utilizando un viscosmetro rotatorio
de cilindro coaxial, para la medida de las viscosidades aparentes de una suspensin
pseudoplstica de levaduras a diferentes concentraciones de clulas se presentan en la
Tabla 1.


Tabla 1. Viscosidad aparente de una suspensin de levadura.
Concentracin de
clulas (%)
Velocidad de
cizalla [

s
-1
]
Viscosidad aparente * 10
3

[N . s / m
2
]
6,0 20,0 2,5
45,0 2,4
10,5 10,0 4,7
50,0 4,1
100,0 3,8
18,0 1,8 140,0
20,0 62,0
40,0 55,0
21,0 1,8 710,0
4,0 630,0
7,0 480,0
40,0 330,0
70,0 290,0

fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


Diferentes consideraciones sobre factores que afectan la viscosidad del caldo son
tratadas por Blanch y Douglas [7] y Doran [16]. Igualmente Cohu [11] considera la
reologa de fluidos aireados.


1.1.3 Difusividad. El coeficiente de difusin D
A
est definido por la ley de Fick. Para la
difusin en estado estable, unidireccional en un medio estancado, el flujo molar de la
especie A (J
A
) es dado por:


(1.1.9)


Donde dC
A
/dx es el gradiente de concentracin molar en la direccin de la difusin. Los
valores de la difusividad D
A
para solutos de bajo peso molecular en agua estn en el
rango de 0,5 a 2,0*10
-9
[m
2
/ s].
dx
dC
J
A
A A
D
25
El coeficiente de difusin D
A
de componentes gaseosos que reaccionan en la fase lquida
es vital para estimar los coeficientes de transferencia de masa y calcular la velocidad de
absorcin en un rgimen de reaccin rpido o instantneo. En general, la determinacin
del coeficiente de difusin es dificultosa, por esta razn, los datos estn propensos a un
enorme margen de error, an bajo condiciones de temperatura normal.


Son de gran importancia los problemas que involucra la determinacin experimental de
coeficientes de difusin a partir de correlaciones empricas o semiempricas. Reid y
colaboradores [42] ofrecen un resumen de todas las correlaciones y mtodos para la
estimacin de coeficientes de difusin publicados antes de 1977. La llamada teora
hidrodinmica utiliza la ecuacin de Stokes Einstein para coeficientes de difusin en
lquidos no viscosos:

(1.1.10)


En donde R es la constante universal de los gases, r
A
es el radio de la molcula de
soluto A, la cual se asume de forma esfrica y
B
representa la viscosidad del solvente
en cP. La formula de Wilke y Chang
2
, basada en la ecuacin (1.1.10), an hasta este
tiempo ha demostrado ser una base confiable (precisin entre el 10 15%) para la
obtencin de coeficientes de difusin:

(1.1.11)

Donde:
M
B
= peso molecular del solvente en [g / mol]
V
A
= volumen molar [cm
3
/ mol] de A en el punto de ebullicin a presin normal
D
A
= difusividad para el soluto en [cm
2
/ s]
T = temperatura del medio [K]


Wilke y Chang propusieron adicionalmente valores para el parmetro x, el cual se refiere
al grado de asociacin del solvente: x = 2,6 para agua, 1,9 para metanol, 1,5 para etanol
y 1,0 para solventes no asociados tales como benceno, dietil ter y heptano.


V
A
puede ser estimado por la ecuacin de Tyn y Calus basada en el volumen crtico:

(1.1.12)

o por el mtodo del incremento de Le Bas si V
A,crt
no es conocido. El trabajo detallado
puede ser obtenido de Reid y colaboradores [42] quienes adems sugirieron sustituir el
valor del parmetro de asociacin para el agua por el de 2,26.

2
WILKE, C.R. and P. CHANG. AIChE Journal. Vol. 1, 1955. Citado por DECKWER, W.D. Bubble Column Reactors, 1992.
048 , 1
crt , A
A
V 285 , 0 V
A B
A
r 6
T R

D
( )
6 , 0
A B
2 1
B 8
A
V
T M x
10 * 4 , 7

D
26
1.1.4 Solubilidad de gases. La solubilidad de gases en medio lquido para un gas
poco o moderadamente soluble es descrita por la Ley de Henry:


(1.1.13)


Donde: C
A
= solubilidad de A en la fase lquida [mol A / m
3
]
P = presin total en la fase gaseosa [atm]
P
A
= presin parcial de A en la fase gaseosa [atm]
H = constante de la ley de Henry [atm . m
3
/ mol A]
y
A
= fraccin molar de A en la fase gaseosa


Frecuentemente las solubilidades son reportadas en trminos del coeficiente de Bunsen,
el cual corrige los datos de solubilidad tomados a una presin estndar asumiendo
comportamiento ideal. El coeficiente de Bunsen es definido como el volumen de gas,
medido a 0 C y 1 atm, absorbido por unidad de volumen de solvente a una presin
parcial de gas de 1 atm.


Solubilidad del oxgeno. Para el caso del oxgeno en el agua, la Tabla 2 ilustra la
variacin de la constante de la ley de Henry con la temperatura. El clculo de la
solubilidad en funcin de la presin se trata en el Anexo A.


Tabla 2. Solubilidad del oxgeno en agua y valores de la constante de Henry.
Temperatura
[ C ]
Solubilidad de
oxgeno puro
[kg / m
3
]
Constante de
Henry
[atm . m
3
/ kg]
Solubilidad de
oxgeno (aire) [16]
[kg / m
3
]
0 7,03 * 10
-2
14,2 1,48 * 10
-2

10 5,49 * 10
-2
18,9 1,15 * 10
-2

15 4,95 * 10
-2
20,2 1,04 * 10
-2

20 4,50 * 10
-2
22,2 9,45 * 10
-3

25 4,14 * 10
-2
24,2 8,69 * 10
-3

26 4,07 * 10
-2
24,6 8,55 * 10
-3

27 4,01 * 10
-2
24,9 8,42 * 10
-3

28 3,95 * 10
-2
25,3 8,29 * 10
-3

29 3,89 * 10
-2
25,7 8,17 * 10
-3

30 3,84 * 10
-2
26,1 8,05 * 10
-3

35 3,58 * 10
-2
27,9 7,52 * 10
-3

40 3,37 * 10
-2
29,7 7,07 * 10
-3


fuente: International Critical Tables, Vol. III, p. 257, McGraw-Hill Book company, New York, 1928.

A
A
A
y
H
P
H
P
C
27
Dixido de carbono. El dixido de carbono es considerablemente ms soluble que
el oxgeno. La disolucin de CO
2
en agua es ms compleja debido a la reaccin en la
fase lquida del CO
2
. Las posibles especies de soluto son CO
2
, CO
3
2
, HCO
3

y H
2
CO
3
. Las
relaciones de equilibrio entre las especies a 25 C estn dadas por:

M 10 * 01 , 5 K
] CO H [ ] CO [
] HCO ][ H [
7
1
3 2 2
3
+

+


M 10 * 62 , 5 K
] HCO [
] CO ][ H [
11
2
3
2
3

+


La concentracin de dixido de carbono disuelto [CO
2
] es por tanto sensible al pH:


(1.1.14)



Por debajo de un pH de 5, aproximadamente todo el dixido de carbono est presente
como CO
2
disuelto, el in bicarbonato domina cuando 7 < pH < 9 y el in carbonato
cuando pH > 9. Dependiendo del pH, la remocin del CO
2
del lquido a la fase gaseosa
puede ser controlada por reaccin qumica (conversin del bicarbonato a CO
2
) o por el
proceso de disolucin fsica, donde el CO
2
disuelto pasa a las burbujas de aire ocupando
el espacio del oxgeno transferido [CO
2
(disuelto) CO
2
(gas)] [7].


Efecto de las sales. En presencia de sales y solutos orgnicos, las solubilidades de
gases poco solubles decrece (the salting-out effect). Slo en pocos casos, tales como
con alcoholes de cadenas cortas la solubilidad se incrementa. Los caldos de
fermentacin tpicamente contienen sales y azcares, lo cual requiere hacer una
correccin con respecto a la solubilidad de la solucin pura. Schumpe et. al
3
revisaron
mtodos para la medida y prediccin de la solubilidad de gases en fermentaciones. Para
el caso de electrolitos fuertes la disminucin en un soluto puede ser correlacionada de
una modificacin de la ecuacin de Sechenov:


(1.1.15)

Donde:


I
i
es la fuerza inica atribuible a un solo in; el parmetro H
i
es especfico para el gas, el
in y la temperatura; z
i
es la carga de la isima especie de sal; c
i
es la concentracin

3
SCHUMPE, A; QUICKER, G. and DECKWER, W.D. Adv. Biochem. Eng. Vol. 24, No. 1, 1982. Citado por BLANCH, Harvey
and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997.

,
_

+ + + + +
+ +

2
2 1 1
2
2
3 3 3 2 2 T 2
] H [
K K
] H [
K
1 ] CO [ ] CO [ ] HCO [ ] CO H [ ] CO [ ] CO [

n
1 i
i i
o
I H log
2
i i i
z c
2
1
I
28
molar de la especie inica (dado por x
i
c
elec
, x
i
es el nmero de iones de tipo i y c
elec
es la
concentracin molar del electrolito); es el coeficiente de Bunsen para el gas en la
solucin de electrolitos y
o
se refiere al coeficiente de Bunsen en agua pura. Para una
solucin de slo sales, el coeficiente de Sechenov puede ser relacionado con H
i
as:


(1.1.16)

Donde:


Algunos valores tpicos de H
i
en L/mol para oxgeno a 25 C son dados en la Tabla 3.


Tabla 3. Constantes inicas especficas de sales para oxgeno para el modelo de solubilidad
de gases propuesto por Schumpe et. al.

Ion (i) Hi Ion (i) Hi Ion (i) Hi Ion (i) Hi Ion (i) Hi
Cl

0,849 NO

3
0,802 SO
4
2
0,460
H

+

- 0,776
Mg

2+

- 0,297
Br

0,820 ClO
4

0,890 S
2
O
3
2
0,455
Li

+

- 0,675
Ca

2+

- 0,309
I

0,784
HSO
4

0,955 CO
3
2
0,467
Na

+

- 0,568
Ba

2+

- 0,291
OH

0,943 HCO
3

1,076 HPO
4
2
0,477
K

+

- 0,587
Mn

2+

- 0,324
H
2
PO
4

0,997 PO
4
3
0,308
NH
4

+

- 0,704

fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997
4
.


Efecto de compuestos orgnicos. La reduccin en la solubilidad del gas debido a
la presencia de compuestos orgnicos puede ser representada en una forma anloga a la
del efecto de las sales.

(1.1.17)


K
i
es una constante emprica que corresponde a la constante de Sechenov para
compuestos orgnicos. Algunos valores relacionados de K
i
para oxgeno son dados en la
Tabla 4. En medios que contienen sales y compuestos orgnicos, las ecuaciones de
solubilidad (1.1.15) y (1.1.17) pueden ser combinadas para incluir ambos efectos as:


(1.1.18)


4
SCHUMPE, A.; ADLER, I.; DECKWER, W.D. "Solubility of oxygen in electrolyte solutions", Biotechnology Bioengineering.
Vol. 20, P 145 - 150. 1978. QUICKER, G; SCHUMPE, A.; KNIG, B; DECKWER, W.D. "Comparison of measured and
calculated oxygen solubilities in fermentation media. Biotechnology bioengineering. Vol. 23, P 635 - 650. 1981. Citado por
BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997.

n
1 i
2
i i i S
z x H
2
1
K

n
1 i
i , org i
o
c K log


+

n
1 i
i , org i
n
1 i
elec s
o
c K c K log
elec S
o
c K
c
c
log
29
Tabla 4. Parmetros de solubilidad K
i
para oxgeno.


Sustancia Concentracin [g / L] Temperatura [C] K
i
* 10
4
[L / g]
Glucosa 0 450 25 6,58
Lactosa 0 300 25 5,71
Sacarosa 0 200 25 4,36
cido glucnico 0 500 25 3,92
cido ctrico 0 200 25 5,09
Urea 0 300 37 3,74
Glicerina 0 300 37 4,07
Glicina 0 200 37 12,46
Extracto de levadura 0 60 30 6,2

fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997
4
.


1.1.5 Otros factores fisicoqumicos que afectan el fenmeno de transferencia. La
transferencia de masa en biorreactores requiere condiciones moderadas de temperatura,
pH, intensidad inica y presin, pero estas condiciones deben controlarse
cuidadosamente para prevenir daos en las clulas vivas y dems componentes lbiles
esenciales para el proceso. Adicional a los tpicos discutidos en anteriores secciones, es
importante considerar el efecto de los siguientes factores:


Agentes antiespumantes. La mayora de los cultivos producen una gran variedad
de agentes espumantes y de agentes estabilizantes de la espuma, como protenas,
polisacridos y cidos grasos. La formacin de espuma en los fermentadores es muy
comn, particularmente en los sistemas aerobios. sta se forma porque las clulas
liberan protenas, enzimas extracelulares y compuestos metlicos, y al morir liberan su
ADN y protenas intracelulares. Una indicacin de que la fermentacin ha terminado es la
excesiva acumulacin de espuma [33], la cual causa infinidad de problemas de
operacin, por lo que el control de la misma es un parmetro importante en el diseo de
los fermentadores. Una cantidad excesiva de espuma flotando sobre el fermentador
proporciona una va de acceso a los organismos contaminantes y produce un bloqueo de
la salida de gases. De igual manera, los lquidos y clulas atrapados en la espuma
representan una prdida del volumen del biorreactor, ya que posiblemente las
condiciones all existentes son desfavorables para la actividad metablica. Adems, las
clulas frgiles pueden ser daadas por la espuma retenida.


La espuma puede controlarse con la adicin de detergentes, la adicin de
antiespumantes, reduciendo la velocidad del flujo de aire, incrementando el tamao de la
zona de liberacin en la columna o con mtodos fsicos como la aplicacin de calor o el
rompimiento mecnico. De estos, la adicin de agentes antiespumantes especiales al
medio es el mtodo ms comn de reducir la creacin de espuma en los fermentadores.
30
Sin embargo, los antiespumantes afectan la superficie qumica de las burbujas y
estimulan la coalescencia de las mismas, la cual ocurre cuando dos de ellas se renen y
pueden formar una sola burbuja, reduciendo as el rea interfacial y exhibiendo un
marcado efecto sobre el coeficiente de transferencia. La mayora de los agentes
antiespumantes son sustancias fuertemente reductoras de la tensin superficial (agentes
tensoactivos), por lo que favorecen el incremento en el dimetro de las burbujas y
producen menores valores de rea interfacial [33].


Con el fin de mantener el carcter no coalescente del medio y elevados valores del
coeficiente de transferencia, es preferible utilizar mtodos mecnicos antes que qumicos,
ya que de esta manera no se alteran las propiedades del lquido.


Temperatura. La temperatura en las fermentaciones aerobias afecta tanto la
solubilidad del oxgeno C*
AL
como al coeficiente de transferencia de masa k
L
. Un aumento
de temperatura produce una disminucin drstica de C*
AL
y, por tanto, de la fuerza
impulsora de la transferencia de materia (C*
AL
C
AL
). Al mismo tiempo aumenta la
difusividad de oxgeno en la pelcula lquida que rodea a las burbujas, lo que produce un
incremento en k
L
.


El efecto neto de la temperatura sobre la transferencia de oxgeno depende del intervalo
de temperatura considerado. Para temperaturas entre 10 y 40 C un aumento de la
temperatura supone un aumento en la velocidad de transferencia de oxgeno. Por encima
de los 40 C la solubilidad del oxgeno disminuye de forma apreciable.


pH. Generalmente hay un valor de pH del medio para el cual la velocidad de un
bioproceso es mxima. ste vara entre 6,5 y 7,5 para bacterias, entre 5 y 7 para mohos
y entre 4 y 5 para levaduras. Valores de pH menores que el mximo estimulan la
velocidad y valores mayores la inhiben [17].


Presin de gas. La presin total del gas y la presin parcial del oxgeno utilizadas
para airear los fermentadores afecta el valor de la solubilidad. En algunas fermentaciones
para aumentar la transferencia de materia se utiliza aire enriquecido en oxgeno o incluso
oxgeno puro. La solubilidad del oxgeno puede aumentar tambin inyectando aire
comprimido a alta presin. Sin embargo, todas estas soluciones aumentan los costos de
operacin del fermentador y algunas veces es posible que el cultivo sufra un efecto
inhibidor al estar expuesto a presiones parciales de oxgeno demasiado elevadas.


Agregados de clulas. La transferencia de oxgeno se ve afectada por la presencia
de clulas en los caldos de fermentacin. Su efecto sobre la transferencia de oxgeno
depender del tipo de organismo utilizado, de su morfologa y de su concentracin. Las
clulas interfieren la ruptura y coalescencia de las burbujas. Adems, las clulas,
protenas y otras molculas que se absorben en la interfase gas lquido forman una
31
capa o manto interfacial que disminuye el rea de contacto entre el gas y el lquido. El
efecto cuantitativo del manto interfacial depende de cada sistema, al mismo tiempo, el
valor de k
L
puede variar ampliamente ya que la concentracin de clulas, sustratos y
productos vara durante la fermentacin.


Esterilizacin. La mayora de las fermentaciones de las industrias de alimentos y
bebidas se realizan utilizando cultivos puros y condiciones aspticas. El mantenimiento
del reactor libre de organismos indeseados es especialmente importante en los cultivos
de crecimiento lento, los cuales pueden verse invadidos rpidamente por contaminantes.
Generalmente, el 3 % 5 % de las fermentaciones industriales se pierden debido a fallos
en los procesos de esterilizacin. Sin embargo, la frecuencia y causas de la
contaminacin difiere considerablemente de un proceso a otro [16].


Esterilizacin del equipo. Generalmente el equipo se esteriliza con vapor de agua a
presin. Cuando las limitaciones de temperatura impiden la utilizacin de este mtodo se
emplean agentes qumicos lquidos y gaseosos de acuerdo con las circunstancias. La luz
ultravioleta, las radiaciones ionizantes y las vibraciones ultrasnicas encuentran
aplicacin como agentes auxiliares potenciadores de otros procesos esterilizantes.


El agente o la condicin de esterilizante debe actuar eficientemente durante el proceso de
esterilizacin, pero una vez finalizado este proceso no debe presentarse una accin
residual.


Esterilizacin del medio. El objetivo de la esterilizacin de un medio es la remocin o
eliminacin de toda forma de vida animal o vegetal, macroscpica o microscpica,
saprfita o no, existente en el medio. El grado de esterilizacin de un medio depende del
proceso. En algunos procesos las condiciones del medio favorecen la actividad del
microorganismo deseado y afectan la actividad de los contaminantes como por ejemplo la
fermentacin alcohlica y la produccin de levadura para panificacin.


Esterilizacin del aire. El nmero de microbios en el aire es del orden de 10
3

a 10
4
[microorganismos / m
3
]; todos los mtodos de esterilizacin de medios pueden ser
empleados con aire, sin embargo, la esterilizacin de aire mediante calor no slo es
imprctica sino ineficiente debido a los bajos valores de la capacidad calorfica y de la
conductividad trmica del aire. Uno de los mtodos ms eficientes es la esterilizacin de
aire con filtros fibrosos y filtros membrana [17]. El aire debe ser precalentado a la
temperatura de operacin del reactor para evitar un choque trmico que afecte la
estabilidad del microorganismo.





32
1.2 CINTICA DE LA FERMENTACIN


1.2.1 Generalidades. Actualmente se conoce la fermentacin como la utilizacin de
microorganismos para la conversin de un sustrato en productos de valor agregado. El
campo de la biotecnologa que trata sobre las fermentaciones a nivel industrial se llama
microbiologa industrial. Los productos comerciales fermentados son clasificados por
Scragg
5
en tres casos [5]:


1) En el primer caso, el microorganismo elabora el producto, el cual permanece intacto y
puede ser un cido orgnico, un alcohol, una enzima u otra protena, un aminocido,
una vitamina o un antibitico.


2) En el segundo caso, el producto es el mismo microorganismo. Por ejemplo la levadura
de panadera y algunas vacunas.


3) En el caso final, el microorganismo convierte durante un proceso de biotransformacin
una sustancia en otra de mayor rentabilidad econmica, tal es el caso de los
esteroides.


Teniendo en cuenta las condiciones en que acta el microorganismo, se puede clasificar
la fermentacin en aerobia y anaerobia.


Fermentacin aerobia. Es aqulla en la cual el microorganismo necesita oxgeno
durante todo el proceso de fermentacin. Como fuente de ste se utiliza aire a una
presin muy cercana a la atmosfrica. No se utiliza oxgeno directamente ya que ste a
concentraciones altas es txico para los microorganismos, adems el costo y los
cuidados que se requieren debido a su alto poder comburente lo hacen en la mayora de
los casos inaplicable industrialmente.


En la actualidad, se han desarrollado procesos aerobios para la produccin de antibiticos
como la penicilina, la produccin de cidos orgnicos como ctrico, glucnico, itacnico,
actico, etc., solventes como acetona y la produccin de levadura como alimento.


Fermentacin anaerobia. Por definicin es aquella que sucede en ausencia total de
oxgeno, sin embargo son muy pocas las que exigen una exclusin total de aire, debido a
que al trabajar con sistemas vivos stos requieren normalmente su presencia en alguna
etapa del proceso. La fermentacin anaerobia ms conocida es la alcohlica.

5
Scragg, A. H. Aerobic batch culture of Saccharomyces cerevisiae using 2% glucose as a carbon source in Bioreactors in
Biotechnology, 1991. Citado por HENSIRISAK, Patcharee. "Scale up the use of a microbubble dispersion to increase
oxygen transfer in aerobic fermentation of Baker's yeast". Tesis instituto Politcnico de Virginia. Estados Unidos, 1997.
33
1.2.2 Modelos cinticos de procesos simples. El proceso de planteamiento del
modelo matemtico de una fermentacin, usualmente proviene de un esquema
simplificado de la reaccin derivada del conocimiento de la ruta metablica involucrada.
Cada etapa de la reaccin metablica es caracterizada por la reaccin estequiomtrica en
un lado y por el flujo de transferencia, representado por la velocidad de reaccin, en el
otro. sta ltima etapa es generalmente aproximada por el uso de una de las relaciones
derivadas de la teora de enzimas o reacciones qumicas. La Tabla 5 resume las
relaciones ms frecuentemente empleadas para describir la dinmica de un sub-sistema
metablico individual [41].


Tabla 5. Resumen de las relaciones frecuentemente usadas para expresar cinticas simples en
el modelo de simulacin de procesos de fermentacin.

Tipo Relacin
Fenmeno
controlante
Particularidades del modelo cintico
1
S
1
r
Difusin
Relacin lineal entre la velocidad del fenmeno y
la concentracin del sustrato. Propio de procesos
de eliminacin celular.
2

S
2
r
Adsorcin
fsica
Derivado de la obtencin de isotermas de
absorcin sobre superficies slidas. Caracterstico
de la mayora de las reacciones hidrolticas.
3
S
s
K
S
3
r
+

Quimisorcin
Modelo tpico para procesos de fermentacin.
Quimisorcin de un sustrato sobre un sitio activo
tal como la molcula de una enzima.
4

S
s
K
S
4
r
Quimisorcin
Modificacin del caso previo, donde ms de un
sitio activo est presente por molcula
biocataltica.
5
( ) [ ]
s
K S exp 1
5
r
Fuerzas de
disipacin
Interpretacin fsica del movimiento de un punto
de masa a un circunvecino. Incorporacin de
trazas

de

elementos

a

la clula o a la pared celular.
6
( )
s
K S exp
6
r
Disipacin
fsica
Modificacin del tipo anterior, solucionado a partir
de condiciones de frontera diferentes en la
trayectoria metablica. Inhibicin incierta.
7
S
s
K
s
K
7
r
+

Inhibicin
Bloqueo reversible hipottico de los sitios activos
por quimisorcin de un sustrato. Retro-
alimentacin negativa en el esquema metablico.
8

S
s
K
s
K
8
r
Inhibicin
Variante del tipo r6, derivado de la inhibicin de un
gran nmero de sitios activos de reaccin.
Caracterstico de procesos de cuello de botella.

Donde = constante de velocidad mxima de reaccin a concentracin infinita de reactante [s
-1
]
K
s
= constante del sustrato en [kg / m
3
]
= parmetro cintico estipulado para el proceso
S = concentracin del sustrato en [kg / m
3
]

fuente: QUINTERO R., Rodolfo. Ambientes computacionales para el diseo, optimizacin e innovacin
en procesos biotecnolgicos, 1997.
34
La cintica de la mayora de las reacciones enzimticas se representa razonablemente
bien mediante la ecuacin de Michaelis-Menten (tipo 3), la cual no exhibe las limitantes e
imprecisiones de representaciones como las de Eisenthal y Cornish-Bowden [16].


Los modelos de crecimiento pueden clasificarse en estructurados y no estructurados. El
modelo estructurado considera algunos aspectos bsicos en la estructura celular e
identifica una o dos especies qumicas claves dentro de la clula [3]. Sin embargo, para
muchos propsitos tecnolgicos es suficiente un modelo no estructurado, donde el
microorganismo o la clula se considera como un componente simple, generalmente con
una composicin qumica fija. Los modelos segregados consideran la poblacin celular
como una coleccin heterognea de entidades discretas, en tanto que en un modelo no
segregado, el comportamiento de la poblacin celular se aproxima al de una clula
promedio.


Los modelos cinticos que se presentan a continuacin son no estructurados y no
segregados, por ello la concentracin de biomasa se refiere siempre a los
microorganismos como unos entes de composicin y vida media.


Modelo cintico para el crecimiento celular (biomasa). La Figura 4 representa la
curva de un cultivo discontinuo, bajo adecuadas condiciones fisicoqumicas con un
sustrato simple y homogneo, libre de gradientes de concentracin y de sustancias
inhibitorias, donde las clulas se reproducen a intervalos regulares. En general se
considera que la proliferacin de biomasa en un proceso fermentativo sigue cuatro etapas
o fases: fase latente, fase exponencial o de crecimiento, fase estacionaria y fase de
muerte.


Figura 4. Curva tpica de crecimiento celular.


















fase latente

t
lag

X [kg / m
3
]

t [ s ]

fase exponencial
o de crecimiento

fase estacionaria

fase de muerte

t
exp

t
s

35
o max
lag
X
X
ln
1
t t

Con el fin de modelar matemticamente el crecimiento por lotes (batch), se utilizaron
modelos no estructurados como los de Malthus, Verlhulst, Pearl y Reed, quienes
realizaron aproximaciones ingenieriles de una clula tpica en una poblacin de clulas,
estableciendo la "ecuacin logstica" [3]:


(1.2.1)

Donde k y son constantes que dependen del microorganismo considerado. La
deficiencia de la ecuacin logstica para predecir la fase de muerte despus que la
poblacin estacionaria ha agotado todos los recursos disponibles, se supera en un
modelo desarrollado por Volterra a principios del siglo XX [3].


Durante la fase de adaptacin o latencia inmediatamente despus de la inoculacin, la
velocidad de crecimiento es prcticamente cero, y la adaptacin a las condiciones del
proceso toma cierto perodo de tiempo t
lag
, el cual puede ser requerido para inactivar un
inhibidor presente en el medio, o el tiempo de germinacin de un inculo de esporas. La
duracin de la latencia depende de los cambios en la composicin de los nutrientes y la
edad y tamao del inculo. Bajo circunstancias favorables, todas las clulas vivas
transferidas exhiben relativamente una corta latencia y luego entran a la fase de
crecimiento exponencial. En casos menos favorables, la transferencia a un nuevo medio
diferente puede utilizar mucha energa de las clulas vivas de tal forma que podra
presentarse la muerte en este perodo.


Algunas veces se puede observar mltiples fases de latencia cuando el medio contiene
mltiples principios de carbono. Este fenmeno conocido como crecimiento diuxico, es
causado por un cambio en las vas metablicas durante el crecimiento. Adems, un
cultivo de microorganismos en un medio compuesto por diversas fuentes de carbono
utiliza selectivamente aquella que le permite una mayor velocidad de crecimiento y
reprime catablicamente los nutrientes menos tiles. La represin catablica es un
fenmeno importante en algunas fermentaciones industriales, como en la produccin de
levaduras y de algunos antibiticos, y cuando se presenta crecimiento diuxico y
formacin de metabolitos secundarios [45].


El perodo de latencia puede calcularse por el mtodo de Hinshelwood, o de Lodge y
Hinshelwood
6
:

(1.2.2)


Donde:
max
= velocidad especfica mxima de crecimiento
X
o
, X = concentracin de biomasa en t = t
lag
y en t = t
exp
respectivamente

6
HINSHELWOOD, C.N. The Chemical Kinetics of the Bacterial Cell, 1946. LODGE, R.M. and HINSHELWOOD, C.N. J.
chem. soc., 1943. Citado por DUARTE T., Alberto. Introduccin a la Ingeniera bioqumica, 1995.
( ) X 1 X
dt
dX
k
36
X
dt
dX
r
X

( ) ( )
exp lag s
t
o
t t
o
e X e X X

La fase exponencial o de crecimiento se refiere a la etapa en la que despus de
transcurrido el tiempo de adaptacin, la biomasa comienza a proliferar de manera
continua. Se ha establecido que para la fase exponencial la velocidad de crecimiento es
proporcional a la concentracin de biomasa:


(1.2.3)

Integrando la expresin anterior

(1.2.4)


se obtiene la ecuacin fundamental para la produccin de biomasa:


(1.2.5)


Donde es llamada tasa especfica de crecimiento [s
-1
]. Durante el crecimiento
exponencial es suficiente con este parmetro para caracterizar la poblacin y se usa
ampliamente para describir la influencia del ambiente de las clulas en su
comportamiento.


La velocidad de crecimiento especfico puede ser inhibida por los constituyentes del
medio tales como el sustrato (modelo cintico para la inhibicin de Andrews y modelo de
Tseng y Waymann) o el producto (modelo de Holzberg, modelo de Ghose y Tyagi, modelo
de Jerusalimsky y modelo de Bazua y Wilkie) [17].


La velocidad especfica de crecimiento de las clulas durante la fase exponencial
depende de la concentracin de nutrientes existente en el medio. A menudo, un nico
sustrato ejerce un efecto dominante sobre la velocidad de crecimiento. Este componente
es lo que se denomina sustrato limitante de la velocidad de crecimiento. Dicho sustrato es
a menudo la fuente de carbono o de nitrgeno aunque en algunos casos es el oxgeno u
otro oxidante como los nitratos. Durante el crecimiento equilibrado, la velocidad especfica
de crecimiento est relacionada con la concentracin de sustrato limitante del crecimiento
mediante la ecuacin de Monod, una expresin homloga a la de Michaelis-Menten:


(1.2.6)


Donde S es la concentracin de sustrato limitante del crecimiento,
max
la velocidad
especfica mxima de crecimiento y K
s
la constante de sustrato, que representa aqu la
concentracin de nutriente cuando la velocidad de crecimiento especfica est en la mitad
de su mximo valor.
S K
S
s
max
+

s
lag o
t
t
X
X
dt
X
dX
37
En la Tabla 6 se exhiben valores de
max
y K
s
para diferentes microorganismos.


Tabla 6. Valores de
max
y K
s
para algunos microorganismos.
Microorganismo Sustrato limitante
max
[ h
-1
] K
s
[mg / L]
Saccharomyces cerevisiae (30 C) Glucosa
0,5 0,6
25
Escherichia coli (37 C) Glucosa
0,8 1,4
2 4
Lactosa
0,80
20
Glicerol
0,87
2
Candida tropicalis (30 C) Glucosa
0,50
25 75
Klebsiella aerogenes Glicerol
0,85
9
Aerobacter aerogenes Glucosa
1,22
1 10

fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical Engineering, 1997.


Con el propsito de lograr la representacin de los datos experimentales con un mayor
grado de ajuste, diferentes investigadores han propuesto otros modelos como alternativa
a la ecuacin de Monod. Entre ellos se encuentran el modelo de Moser; modelo de
Contois y Fijomoto; modelo de Teissier; modelo de Konak; modelo de Kargi y Shuler;
modelo de Meyrath [3 , 17].


La fase estacionaria se presenta en el momento en el que los nutrientes del medio de
cultivo se han consumido o se acumulan los productos inhibidores
7
, cesa la fase de
crecimiento y la concentracin de biomasa permanece estable por un determinado
tiempo. Para el caso de algunos procesos de tratamiento de aguas residuales y de
algunos procesos de produccin de antibiticos, donde la formacin de producto ocurre
despus de cesar el crecimiento, La Motta
8
utiliz la ecuacin logstica de Kendall para
cuantificar el crecimiento de biomasa:


(1.2.7)


Donde: X
M
= concentracin de biomasa en la fase estacionaria


En la fase de muerte que se presenta en algunos cultivos, las clulas pierden viabilidad o
son destruidas por la rotura y la concentracin de biomasa (clulas vivas) experimenta
una disminucin progresiva. Modelos como el de Chiu, Moser y Steiner pueden satisfacer
las inexactitudes de la ecuacin de Monod en esta fase [17].


7
En algunos casos, el producto obtenido en la fermentacin resulta ser un antisptico contra los microorganismos al
alcanzar cierta concentracin, forzando as la fase de muerte.
8
LA MOTTA, E.J. Biotechnol. Bioeng., 1976. Citado por DUARTE T., Alberto. Introduccin a la Ingeniera bioqumica, 1995.

,
_

M
max X
X
X
1 X
dt
dX
r
38
Modelo cintico del consumo de sustrato. Las clulas consumen sustrato del
medio ambiente y lo canalizan en diferentes rutas metablicas. Parte del sustrato puede
utilizarse directamente en el crecimiento y en la sntesis de producto, mientras que otra
parte se utiliza para generar la energa necesaria para las actividades de mantenimiento.
El sustrato requerido para el mantenimiento vara considerablemente dependiendo del
organismo y de las condiciones de cultivo. De este modo, una estimacin completa del
consumo de sustrato debe incluir un componente de mantenimiento. La velocidad
especfica de consumo de sustrato para actividades de mantenimiento se conoce como el
coeficiente de mantenimiento, m
s
. La Tabla 7 proporciona algunos valores del coeficiente
de mantenimiento para determinados microorganismos.


Tabla 7. Valores del coeficiente de mantenimiento para varios microorganismos.
Microorganismo Sustrato m
s
* 10
4
[kg / (kg.s)]
Saccharomyces cerevisiae Glucosa 0,050
Escherichia coli Glucosa 0,150
Aerobacter aerogenes Glucosa 0,150
Glicerol 0,210
Citrato 0,161
Methane bacteria Glucosa 0,056
Penicillium chrysogenum Glicerol 0,061

fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical Engineering, 1997.


Tanto para cultivos en los que no existe formacin de producto extracelular (por ejemplo
en la fabricacin de levadura de panadera y de protenas de origen unicelular), donde se
supondr que todo el sustrato que entra a la clula se utiliza para el crecimiento y
funciones de mantenimiento, como para modelos en los que el producto est asociado
con el crecimiento microbiano, las velocidades de consumo de sustrato, crecimiento
celular y mantenimiento se relacionan de la siguiente manera:


(1.2.8)


En cultivos con formacin de producto no asociada con el crecimiento microbiano, la
relacin entre las velocidades (consumo de sustrato, crecimiento celular, formacin de
producto y mantenimiento) es:


(1.2.9)


Donde r
P
y Y
P/S
, velocidad de formacin de producto y rendimiento de sustrato en
producto respectivamente, son tratados con mayor amplitud en la siguiente seccin.
X m
dt
dX
Y
1
dt
dS
r
s
S X
S
+
X m
Y
r
dt
dX
Y
1
dt
dS
r
s
S / P
P
S X
S
+ +
39
dt
dX
Y
dt
dP
r
X / P P

dt
dS
Y r
S / P P

En la ecuacin (1.2.9) Y
X/S
es el rendimiento de sustrato en biomasa, el cual provee una
medida de la eficiencia del nutriente para soportar biosntesis. Su valor elevado favorece
la productividad del proceso y disminuye el costo de remocin de calor. Este coeficiente
economtrico da la idea de cunta biomasa se puede formar por cada unidad de masa del
sustrato. Generalmente, cuando el sustrato es el factor limitante del crecimiento, la
cantidad de biomasa producida es proporcional a la cantidad de fuente de carbono
consumida y su rendimiento en sustrato puede definirse de la siguiente manera:


(1.2.10)


Siendo X
o
y S
o
las concentraciones iniciales de biomasa y sustrato, respectivamente. La
Tabla 8 en la pgina 41 presenta un listado de factores de rendimiento para el crecimiento
de diferentes microorganismos.


Modelo cintico de la formacin de producto. De acuerdo con la relacin
cuantitativa entre la cantidad de producto y el crecimiento de biomasa puede darse el
caso que la formacin de producto est directamente asociada con el crecimiento, que no
haya una relacin entre el crecimiento y la formacin de producto o que exista una
relacin parcial entre el crecimiento y la formacin de producto [17].


Formacin de producto asociada al crecimiento microbiano. Algunas de las
ecuaciones que describen la formacin de producto son:


(1.2.11)


(1.2.12)


Donde Y
P/S
es el rendimiento de sustrato en producto y Y
P/X
es el rendimiento de biomasa
en producto, los cuales se definen como:





Siendo P
o
la concentracin inicial del producto.


Formacin de producto no asociada al crecimiento microbiano. Generalmente, esta
cuantificacin es una tarea difcil. En algunos casos se ajusta a los datos obtenidos
experimentalmente.
o
o
S / X
S S
X X
S
X
Y

S S
P P
S
P
Y
o
o
S / P

o
o
X / P
X X
P P
X
P
Y

40
P X P P
K X
dt
dX
Y
dt
dP
r +
La expresin se da como:

(1.2.13)


Donde: r
P
= velocidad de formacin de producto
K
P
= constante de velocidad para formacin de producto [g
producto
/ (g
clulas
. h)]


Formacin de producto parcialmente asociada al crecimiento. El modelo propuesto
por Luedeking y Piret es una combinacin de las ecuaciones (1.2.11) y (1.2.13).


(1.2.14)



1.2.3 Velocidad de la utilizacin metablica de oxgeno. La velocidad de la
utilizacin metablica de oxgeno o velocidad de consumo de oxgeno (r
O
2
) est dada por
la expresin [3]:

(1.2.15)

y su valor es mximo cuando:

(1.2.16)


Donde Y
O
2
es el rendimiento de oxgeno en biomasa. En este rendimiento, la cantidad de
biomasa producida es proporcional a la cantidad de oxgeno consumido:


(1.2.17)


Donde: C
O
2
,in
= concentracin molar de oxgeno en la fase lquida a la entrada
C
O
2
= concentracin molar de oxgeno en la fase lquida a la salida

Algunos de estos factores de rendimiento se listan en la Tabla 8.


La velocidad de transferencia de oxgeno (OTR) de la fase gaseosa a la fase lquida est
dada por la siguiente expresin:

(1.2.18)

in , O O
o
O
2 2
2
C C
X X
C
X
Y

P P
K X r
X
Y
r
2
2
O
O

X
Y
r
2
2
O
max
max , O

) C C ( a k OTR
L
*
L L

41
En estado estable, se asume que OTR es igual a la velocidad de oxgeno consumido [3]:





Donde k
L
a es el coeficiente volumtrico global de transferencia de masa en [s
-1
], que se
discutir en la seccin 1.3.6.


Tabla 8. Factores Y
X/S
y Y
O
2
para diferentes microorganismos.
Microorganismo Sustrato
Y
X/S
[kg
b
/ (kg
s
)]
Y
O
2

[kg
b
/ (kg
O
)]
Saccharomyces cerevisiae Glucosa 0,50 0,97
Aerobacter aerogenes Maltosa 0,46 1,50
Fructosa 0,42 1,46
Glucosa 0,40 1,11
Candida utilis Glucosa 0,51 1,32
Etanol 0,68 0,61
Penicillium chrysogenum Glucosa 0,43 1,35
Pseudomonas fluorescens Glucosa 0,38 0,85
Etanol 0,49 0,42
Rhodopseudomonas spheroides Glucosa 0,45 1,46

fuente: BAILEY, James and OLLIS, David. Biochemical Engineering fundamentals, 1986
9
.


1.2.4 Biorreactores utilizados en procesos fermentativos. En la realizacin de
fermentaciones, la capacidad de cultivar grandes cantidades de organismos se alcanza
con el uso de tanques conocidos como fermentadores o biorreactores. Entre ellos, los
reactores utilizados en cultivos anaerobios, sin inyeccin de aire ni agitacin, son
generalmente de construccin ms simple; mientras que para las fermentaciones
aerobias, gran parte del reto que representa el diseo de un reactor recae en la provisin
de un mezclado y aireacin adecuado. Por ello, en este apartado se consideran las
configuraciones de biorreactores operados aerbicamente [16].


Tanques agitados. El proceso de fermentacin industrial aerobio debe disponer de
un sistema de aireacin y mezclado del cultivo. El reactor de tipo tanque con agitacin
convencional incluye un sistema de agitacin mecnico consistente en un eje vertical con
varios agitadores. Dispone adems de varios deflectores (usualmente entre 4 y 6) cuya
anchura representa el 10 % del dimetro del recipiente, localizados a lo largo del
permetro del reactor con objeto de fomentar la turbulencia.

9
NAGAI, S. Mass and energy balances for microbial growth kinetics in Advances in Biochemical Engineering. Vol. 11,
1979. Citado por BAILEY, James and OLLIS, David. Biochemical Engineering fundamentals, 1986.
X
Y
) C C ( a k
2
O
L
*
L L


42
Los fermentadores agitados se utilizan para procesos con enzimas libres e inmovilizadas,
as como para el cultivo de clulas en suspensin e inmovilizadas. Es necesario tener un
cuidado especial cuando se utilizan determinados catalizadores que pueden ser daados
o destruidos por el impulsor a medida que ste gira a gran velocidad.


Columna de Burbujeo. Una alternativa al reactor agitado la constituyen aquellos
reactores sin agitacin mecnica. El fermentador de columna o de torre de burbujeo es el
fermentador ms sencillo. Est formado por un recipiente cilndrico generalmente con
alturas superiores al doble del dimetro, provisto de un mecanismo de aspersin de gas
en el fondo como nica estructura interna, el cual provee al sistema de la aireacin y la
mezcla deseadas con menos consumo de energa que la agitacin mecnica. Las
burbujas de aire o de oxgeno a medida que ascienden mezclan el contenido del reactor y
satisfacen la demanda de oxgeno de las clulas [3].


Las columnas de burbujas se utilizan industrialmente para la produccin de cido ctrico,
cido lctico, enzimas, esteroides, cerveza y vinagre y levadura para panificacin. En este
ltimo caso, es normal utilizar una relacin altura dimetro de 3:1, mientras que en otras
aplicaciones pueden utilizarse torres con relaciones de 6:1. Algunas veces, en los
reactores de columna muy altos se instalan placas horizontales perforadas para evitar la
coalescencia de las burbujas y lograr una mejor redistribucin del aire.


Reactor de tiro o corriente de aire (reactor air lift). Al igual que en las columnas
de burbujas, en los reactores de tiro de aire la mezcla se produce sin agitacin mecnica.
Se utilizan a menudo para cultivos de clulas animales y vegetales, y catalizadores
inmovilizados porque los niveles de cizalla son bastante inferiores que en los reactores
agitados.


Existen diversos tipos de reactores de tiro de aire. El rasgo caracterstico que los
diferencia de los de columna de burbujas es que las corrientes de flujo de lquido estn
ms definidas debido a la separacin fsica de las corrientes ascendentes y
descendentes. Se emplean en la produccin de protenas de origen unicelular a partir de
metanol y gasoil, as como en el tratamiento de aguas municipales y de reciclo para la
industria.


Lechos empacados. Estos reactores se utilizan con biocatalizadores inmovilizados
o en forma de partculas. El reactor consiste en un tubo generalmente vertical, relleno o
empacado con partculas de catalizador. El medio de cultivo puede alimentarse por la
parte superior o inferior de la columna y forma una fase lquida continua entre las
partculas. En los lechos empacados, el dao debido al desgaste de las partculas es
mnimo en comparacin con los reactores agitados. Se emplean a nivel comercial con
clulas y enzimas inmovilizadas para la produccin de aspartato y fumarato y en la
separacin de ismeros de aminocidos.

43
Lechos fluidizados. Cuando se hace fluir hacia arriba un lquido sobre un lecho
empacado de partculas de catalizador de tamao y densidad apropiados, ste se
expande debido al movimiento ascendente de las partculas. ste es el fundamento de
operacin de los reactores de lecho fluidizado.


Los reactores de lecho fluidizado se utilizan en el tratamiento de residuos con arena o un
material similar que soporta la mezcla de poblaciones microbianas. Tambin pueden
utilizarse con organismos floculantes en los procesos de fabricacin de la cerveza o en la
produccin de vinagre.


Lecho de goteo. El reactor de lecho de goteo (trickle bed) es otra variacin del
lecho empacado; utilizados ampliamente para el tratamiento aerobio de aguas residuales.


Tanques aireados y agitados. Este tipo de biorreactor es popular y
fundamentalmente es el mismo que se utiliza con cultivos a pequea escala. Sin
embargo, cuando el volumen de cultivo se incrementa, aparecen muchos problemas de
escalado tales como: incremento del estrs mecnico por la agitacin del impulsor,
incremento de espuma y adicin de las clulas a la superficie interior del biorreactor. En
la seccin 1.4.3 se hace una ampliacin sobre el comportamiento de estos tanques.


En el Anexo B se tratan otras caractersticas de estos tipos de biorreactores, adems se
ofrecen sus esquemas convencionales.


1.3 HIDRODINMICA DE LA COLUMNA DE BURBUJEO


Los biorreactores aireados son dispositivos generados para la transferencia de masa y la
reaccin qumica gas lquido, en los cuales uno o varios gases son puestos en contacto
para reaccionar con una fase lquida o con un componente disuelto o suspendido en sta.


Las columnas de burbujeo disponen de gran importancia no slo en reas como la
biotecnologa y la ingeniera medioambiental, sino que tambin estn en el umbral de
sustituir completamente las tecnologas convencionales como, por ejemplo, la sntesis del
metanol.


1.3.1 Tipos y estados de operacin. Las etapas de la transferencia de masa, las
cuales bajo ciertas condiciones manipulables de operacin determinan la velocidad a la
que se realiza todo el proceso, pueden tener lugar antes o despus de la reaccin
qumica; por lo tanto, el mayor esfuerzo a nivel ingenieril tiende a alcanzar altas
velocidades de transferencia, por ejemplo en el diseo del reactor, favoreciendo la
creacin de grandes reas interfaciales y altos niveles de turbulencia, entre otros.
44
Gas
(vapor)
Alimentacin
de gas
H
L

Lquido
Producto de
reaccin
Distribucin
de gas
Lquido
Columna de burbujeo simple. La ms simple configuracin de un reactor de
columna de burbujeo es un cilindro vertical, como se muestra en la Figura 5. El gas
ingresa por el fondo a travs de un distribuidor de gas, el cual puede variar en su diseo.
La fase lquida (fase continua) puede ser suministrada en lotes o ser alimentada en
contraflujo a la fase gaseosa (fase dispersa). Por el contrario a las operaciones fsicas de
transferencia de masa, el contraflujo no ofrece significativas ventajas, pues la propia
reaccin conduce a cadas de concentracin suficientes durante el intercambio de
materia. El reactor es calentado o refrigerado por medio de un sistema interno de
intercambio de calor.


Figura 5. Columna de burbujeo simple.

















fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.


Este tipo de reactor se caracteriza por la falta de algn medio mecnico de agitacin, por
lo tanto el gas es distribuido ms uniformemente en la fase lquida. La cima de la columna
de burbujeo es frecuentemente ampliada para facilitar la salida y separacin del gas. El
tamao de cada reactor de columna de burbujeo vara de acuerdo a la intencin de uso y
la velocidad de produccin. La relacin (r) entre la longitud (H
T
) y el dimetro (D
T
) de la
columna puede variar enormemente, a nivel industrial son comunes relaciones r = 10, no
as a nivel de laboratorio o planta piloto.


Cuando la fase lquida en la columna contiene algn slido, como catalizadores o
biomasa, debe evitarse la sedimentacin de los mismos, lo cual se logra mientras la
ascensin de las burbujas de gas propicie una alta velocidad de circulacin de lquido que
los distribuya uniformemente. An cuando la estructura de una columna de burbujeo es
simple al no poseer agitadores mecnicos y requerir bajos niveles de entrada de aire (slo
para la dispersin del gas), ofrece un ambiente para interacciones hidrodinmicas
extremadamente complejas.
45
(a) (b)
Regmenes de operacin. Como la fase lquida es significativamente ms densa
que la fase gaseosa, la velocidad de flujo del lquido pasando alrededor de la burbuja es
mnima. La velocidad superficial del gas (
s
) es el parmetro ms importante y junto con
la coalescencia de la fase lquida, determina el rea interfacial para la transferencia de
masa. El gas retenido en el lquido puede variar ampliamente de acuerdo al mtodo de
gaseo utilizado y al nivel de conversin especificado. El rango normal, basado en el rea
de seccin transversal del reactor vaco, es del orden de 3 12 [cm/s], aunque en la
prctica, velocidades muy altas de hasta 1 [m/s] son tambin utilizadas [14].


El gas ascendiendo a travs del reactor en forma de burbuja, arrastra a su paso algo del
lquido, el cual procede a recuperar su estado, esto conduce al modelo de flujo de
circulacin axial representado en la Figura 6a, en el cual las burbujas y el lquido tienden a
ascender por el centro de la columna mientras que en la proximidad de las paredes existe
un flujo descendente de lquido. La circulacin de lquido arrastra a las burbujas y produce
cierta retromezcla del gas, presentndose un perfil de velocidad y una retencin de gas
radial, a pesar de la distribucin uniforme inicial del mismo.


Figura 6. Modelo de circulacin de lquido.













fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


Como se muestra en la Figura 6b un intercambio radial de elementos del fluido est
superpuesto al modelo de circulacin axial, produciendo una elevacin del intermezclado
radial de forma que prcticamente no puedan originarse gradientes de concentracin en la
fase lquida en la direccin radial.


En la columna de burbujeo dependiendo del caudal de gas, del diseo del difusor, del
dimetro de la columna y de propiedades del medio como puede ser la viscosidad, se
presentan diferentes estados de operacin (Figura 7). Un flujo homogneo se produce
nicamente a caudales bajos de gas y cuando las burbujas (por lo general de tamao bien
definido) que abandonan el difusor ascienden equivalentemente a lo largo de toda la
seccin de la columna y no existe retromezcla de la fase gaseosa.
46
Flujo de burbuja
homogneo
Flujo
heterogneo
Flujo
slug
La mezcla del lquido en este tipo de rgimen de flujo es bastante limitada y se reduce
nicamente a su arrastre en las estelas de las burbujas. Sin embargo, industrialmente se
opera a mayores velocidades de gas, donde se desarrolla un gran flujo catico de
circulacin y se produce el denominado flujo heterogneo, en ste, agregados de
burbujas y otras de gran tamao son formadas y ascienden ms rpido que las pequeas.


Figura 7. Estados de operacin en columnas de burbujeo.












fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.


Una situacin especial se presenta en columnas estrechas, generalmente usadas para
trabajos de laboratorio, las burbujas grandes son estabilizadas en la zona heterognea
por la pared del tubo y se elevan en la columna a manera de flujo pistn. Estas burbujas
elongadas (conocidas como slugs) ocupan prcticamente la totalidad de la seccin
transversal y continan creciendo por la recoleccin de burbujas pequeas a lo largo de
su viaje ascendente.


Columnas de burbujeo modificadas. Existen muchas variaciones al tipo de
columna de burbujeo simple mostrado en la Figura 5, todas adaptadas a necesidades
prcticas particulares.


El Anexo B presenta algunas de las modificaciones frecuentemente usadas en el campo
de la tecnologa qumica como son los reactores de tiro de aire, reactores empacados,
reactores fluidizados y reactores de lecho de goteo.


Distribucin del gas. La seleccin y diseo del distribuidor de gas es un aspecto
particularmente importante para todos los reactores de columna de burbujeo. La
distribucin de las burbujas y la construccin del distribuidor tiene una influencia decisiva
en la retencin de gas de la columna, el rea interfacial y el nivel de transferencia de
masa, incluso en torres muy altas donde las burbujas tienen una gran distancia por
recorrer. En lquidos coalescentes, se obtienen grandes niveles de turbulencia durante la
distribucin del gas, especialmente en la regin del distribuidor, por lo que una
considerable cantidad de transferencia de masa puede tener lugar en ese punto.
47
Ejector
jet
Zona de equilibrio de la
columna de burbujeo
Zona de coalescencia
Injector
jet
Venturi
jet
Slit
jet
Reactor
lquido
Propeller
lquido
Zona de burbuja
primaria
Flujo
insertado
Anillo distribuidor
de gas
El gas puede ser disperso por medio de poros u orificios como se muestra en la Figura 8,
estos instrumentos se conocen como distribuidores estticos de gas.


Figura 8. Distribuidores estticos de gas.










fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.


Por otro lado, para el caso donde la reaccin qumica es ms rpida que la velocidad de
transferencia de masa, resulta ser ms eficiente un sistema de distribucin a travs de
chorros de gas (jet) como el presentado por la Figura 9, en el cual el gas es distribuido en
virtud a la energa cintica generada por la fuerza del lquido.


Figura 9. Principio de distribucin de gas a travs de chorros y principales distribuidores.













fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.


La potencia del chorro de gas genera una zona de disipacin de alta energa en la cual el
gas es fraccionado en burbujas primarias pequeas. Estas burbujas coalescen para
formar unidades mayores y un dimetro de burbuja de equilibrio tiende a establecerse a
partir de all en todo el reactor. La zona de coalescencia y el tamao de las burbujas en la
zona de equilibrio dependen de la cantidad de gas y las propiedades del medio. El
desempeo de la transferencia de masa difiere enormemente entre cada zona y debe ser
calculado por separado.

48
( ) ( )
o
3
Bo G L
d d
6
g

Q < Q
T
Q > Q
T

Volumen variable a
Frecuencia constante
Volumen constante a
Frecuencia variable
Dimetro de la
burbuja d
Bo

Dimetro de orifico d
o

Flujo de gas por orificio
Q
U
B
/ f
T

1.3.2 Propiedades de la burbuja.


Generacin de la burbuja en el orificio. Como se ilustra en la Figura 10 existen dos
regmenes distintos en la formacin de la burbuja basados en el flujo de gas a travs del
orificio. El flujo de transicin (Q
T
) determina el cambio del rgimen de volumen constante
a frecuencia variable, al rgimen de volumen variable a frecuencia constante. As, el
tamao de la burbuja depende del dimetro del orificio (d
o
), tensin superficial () y
fuerza de flotacin. El efecto de las fuerzas inerciales puede despreciarse.


Figura 10. Formacin de la burbuja de gas en el orificio del difusor.















fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997.


La burbuja crece hasta que la fuerza de flotacin exceda la tensin superficial que ejerza
el lquido en el orifico, a partir de all, sin dilacin la burbuja asciende libremente. Un
balance entre las fuerzas de flotacin de la burbuja y la tensin superficial en el orificio es:


(1.3.1)


La velocidad de transicin de flujo de gas (Q
T
) a travs del orificio, es comparada con la
relacin del flujo de gas (Q) y el nmero de orificios (N
o
). S el flujo actual a travs del
orificio (Q/N
o
) es menor que Q
T
, el dimetro de la burbuja en el orificio (d
Bo
) se calcula en
rgimen de volumen constante a frecuencia variable.


Para (Q/N
o
) < Q
T
:
(1.3.2)

3
1
G L
o
Bo
) ( g
d 6
d

,
_

49
A Q
T
las burbujas pueden tocarse y el gas puede no ser difundido bajo el rgimen anterior,
La velocidad de flujo de transicin est dada por:


(1.3.3)


El nmero de Reynolds de la burbuja (Re
B
) relacionando las propiedades del gas y del
lquido se define como:


(1.3.4)



La velocidad de ascensin de la burbuja (U
B
), con un dimetro (d
Bo
) para Re
B
< 1 est
dada por la ecuacin de Stokes:


(1.3.5)


y su flujo de gas de transicin es:


(1.3.6)



Para Re
B
1, la relacin de Mendelson define la velocidad de ascensin de la burbuja
como:


(1.3.7)



y el flujo de transicin para esta condicin es:


(1.3.8)


Para un flujo actual por encima del flujo de transicin Q
T
el tamao de la burbuja
incrementa, pero las burbujas son formadas a una frecuencia constante. El tamao de las
burbujas en este rgimen es correlacionado con las propiedades del lquido y la velocidad
del flujo de gas.
5 , 0
Bo
Bo L
B
2
d g
d
2
U

,
_

2
Bo
L
L
B
d
18
g
U

,
_

Bo
B
T T
3
Bo T
d
U
f : Donde f . d
6
Q

( )
3 / 4
G L
o
L
G L
T
) ( g
d 6
108
g
Q

,
_

6 / 5
G L
o 2 / 1
T
) ( g
d 6
g 38 , 0 Q

,
_

L
L B B
B
U d
Re

50
Para (Q/N
o
) > Q
T


(1.3.9)

Donde:


(1.3.10)



El nmero modificado de Reynolds en el orificio (Re
oL
) relaciona el flujo de gas a travs
del orificio con las propiedades del lquido; mientras que el nmero de Froude (Fr
o
)
considera la interaccin entre las fuerzas inerciales y las fuerzas gravitacionales para el
flujo de gas.


Ms all de estas velocidades de flujo, una aparente formacin de chorros de gas (jet) se
presenta en el orificio. Bajo estas condiciones el dimetro de la burbuja resultante es
dbilmente dependiente de su velocidad de ascensin y para Re
o
>10000 puede
expresarse como:


(1.3.11)


El nmero de Reynolds en el orifico (Re
o
) se basa en el flujo de gas al interior del orificio:


(1.3.12)



Coalescencia y ruptura de la burbuja. Mientras las burbujas ascienden desde el
orificio, ellas estn sujetas a eventos de ruptura y coalescencia que pueden alterar su
tamao. El grado en que esto ocurra, depende de la altura de la columna. Sin embargo,
en presencia de sales y surfactantes, la tendencia de stos ltimos a estabilizar la
interfase de la burbuja por la repulsin de fuerzas elctricas, altera la tensin superficial e
impide la coalescencia [21].


La ruptura de las burbujas es causada por las fuerzas dinmicas de presin que el flujo
lquido turbulento ejerce sobre stas. Tales fuerzas se oponen a la fuerza de tensin
superficial y a la resistencia de la fase lquida a la deformacin. Se ha reportado que el
rompimiento de burbujas no ocurre en lquidos altamente viscosos incluso cuando
Re
o
> 2000 [20].
G o
G
o
d
Q 4
Re

21 , 0
o
1 , 0
oL o Bo
Fr Re d 23 , 3 d

g d
Q
Fr y
d
Q 4
Re
5
o
2
o
L o
L
oL

cm en Re 71 , 0 d
05 , 0
o Bo

51
REGIN
Tamao de
burbuja d
Be

REGIN
Tamao de
burbuja d
Bo

D
T

D
T

H
L

Distribucin del dimetro de la burbuja. En una columna de burbujeo, la regin
cercana al orificio, definida por conveniencia como de altura igual al dimetro del tanque
(Regin ), el tamao de las burbujas, corresponde al tamao generado en el orificio. En
la regin alejada del orificio (Regin ), la coalescencia y la ruptura, causadas por el
movimiento del seno del lquido, pueden determinar un equilibrio en el tamao de la
burbuja. Lo anterior se ilustra en la Figura 11. Para reactores pequeos (H
T
~ D
T
) todo el
tanque se puede considerar en la regin .


Figura 11. Regiones y en una columna de burbujeo.

















fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical Engineering, 1997.


El tamao de la burbuja en la regin debe ser determinado a fin de calcular el rea
interfacial disponible para la transferencia de masa. Para rgimen turbulento, el dimetro
de la burbuja en equilibrio (d
Be
) est dado por la siguiente expresin:



(1.3.13)



En sistemas aire agua ste dimetro es generalmente del orden de 0,45 cm [7]. La
viscosidad aparente
app
puede ser la viscosidad de los fluidos puros Newtonianos
(
app
~
L
), pero en el caso de fluidos pseudoplsticos, sta depende de la velocidad
promedio del fluido, a su vez determinada por la velocidad de corte. Si la velocidad del
fluido (u
L
) es obtenida (por ejemplo, de un modelo de circulacin de lquido tal como el
descrito en la seccin 1.4.1), entonces la velocidad de corte que la burbuja experimenta
se representa como
L
/d
Be
, y es usada para obtener la viscosidad aparente.
( )
metros en
V / P
7 , 0 d
1 , 0
G
app
2 , 0
L
4 , 0
6 , 0
Be

,
_

52

2
Bi
3
Bi
s
d Ni
d Ni
d
( ) ( ) ( )
12 , 0 12 , 0 5 , 0
T s
Fr Ga Bo D 26 d

El tamao de la burbuja en la regin en flujo laminar, llamado dimetro de burbuja

equivalente mximo (d
e
)
10
, puede determinarse relacionando los nmeros adimensionales
de Eotvos y Morton mediante la siguiente ecuacin:


(1.3.14)


Donde el nmero de Eotvos (Eo) y el nmero de Morton (Mo) se definen como:


(1.3.15)


El dimetro promedio de la burbuja o dimetro Sauter (d
s
) cuantifica la distribucin de
tamaos de burbuja que generalmente se presenta en la dispersin real del gas en una
columna de burbujeo [14]:


(1.3.16)


Donde Ni es el nmero de burbujas de dimetro d
Bi
.


Akita y Yoshida
11
usando mtodos fotogrficos determinaron la distribucin del tamao de
la burbuja para la dispersin del gas a travs de orificios simples, como:


(1.3.17)


Donde:
(1.3.18)



(1.3.19)



(1.3.20)


10
PRINCE, M.J. et. al. Bubble breakup in AirSparged Biorreactors. Citado por BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark.
Biochemical engineering, 1997.
11
AKITA K. and YOSHIDA, F. Ind. Eng. Chem. Proc. Des. Dev. Vol. 13, 1974. Citado por DECKWER, W.D. Bubble Column
Reactors, 1992.
[ ]
4
4 / 1 2 / 1 3
Mo 44 , 0 Mo 098 , 0 1 10 * 2 , 3
Eo
1
+

3
L
4
L
L e
g
Mo y
d g
Eo

,
_

L
2
T
g D
Bond de nmero Bo

,
_

2
L
3
T
2
L
D g
Galileo de nmero Ga
) D g (
Froude de nmero Fr
T
s

53
Kafarov, V.V. et. al. [26] (entre otros: [3], [7], [14]), recopilan diferentes correlaciones para
determinar el dimetro de la burbuja de acuerdo al tipo de rgimen que se presente en la
columna. Algunas de estas ecuaciones se indican en la Tabla 9.


Tabla 9. Dimetros de burbuja.
Tipo de rgimen Ecuacin Restricciones
Singular



( )
3
G L
o
B
g
d 6
d

,
_

<
o
B
B s
d
d
U
3
2
Para
Rgimen de chorro


3
B
B
U
Q 6
d

Q > 6 cm
3
/s
Burbujeo masivo



4 , 0
L
4 , 0
L
6 , 0
G
8 , 0
B
305 , 0
d

+

0,55 < < 0,65

Para
s
< 10 cm/s
Interaccin intensa de las
burbujas


7 , 0
B
G 45 , 1 d
( )
3
G L G
2
10 G

Turbulencia libre



g 2
U 8 , 0
d
2
B
B
0,4 m/s <
s
< 0,8 m/s

fuente: KAFAROV, V.V. et. al. Modelirovanie biokhimicheskij reaktorov, 1979.


1.3.3 Retencin de gas en la columna. La fraccin de gas retenida en la columna ()
o holdup, definida como el volumen de gas por volumen de lquido, puede cuantificarse
conociendo el tamao de la burbuja y la velocidad del flujo de gas dentro de la torre
(velocidad de ascensin de la burbuja U
B
). El tiempo de residencia promedio de una
burbuja en la columna est dado por:



(1.3.21)


Donde H
L
es la altura del lquido aireado. As el volumen total de gas (V
G
) en el tanque, es
el producto de la velocidad del flujo de gas (Q) y el tiempo de residencia (t
G
):


(1.3.22)

B
L
G
U
H
t
B
L
G
U
H
Q V
54
B
3
B
2
B
d
6
d
d 6
lquido del volumen
gas de total volumen * burbuja de volumen por rea
a

,
_

Si V
L
es el volumen total del lquido, la fraccin de gas en la columna , puede ser
expresada en trminos del volumen del lquido aireado V
G
/(V
G
+ V
L
), o por definicin
V
G
/V
L
. Empleando esta ltima, se puede estimar la velocidad de flujo de gas por rea de
seccin transversal del tanque mediante la expresin:



(1.3.23)


Donde A es el rea de seccin transversal del tanque y
s
es la velocidad superficial del
gas Q/A. Note que V
L
/A es la altura del lquido H
L
. La retencin del gas aumenta con la
altura del tanque, incrementado de esta manera el volumen total de aire en el reactor [33].


La retencin del gas es en general funcin de la geometra de la columna, la velocidad del
flujo de gas, el tipo de distribuidor del gas y las propiedades del medio. Numerosos
autores correlacionando las variables anteriores han propuesto una serie de ecuaciones
empricas para su clculo. En el Anexo C se acopian algunas de estas expresiones.


Una de las correlaciones ms utilizada para calcular la retencin del gas en columnas de
burbujeo, es la propuesta por Akita y Yoshida
12
.


(1.3.24)


Donde: = 0,20 para lquidos puros y soluciones no electrolticas
= 0,25 para solucin de sales


1.3.4 rea interfacial gas lquido. El rea interfacial gas lquido es funcin de la
geometra de las unidades, de parmetros de operacin y propiedades fisicoqumicas del
sistema especfico. El Anexo C presenta algunas ecuaciones empricas para determinar el
rea interfacial en fermentadores.


En general, el rea interfacial por unidad de volumen del lquido (a) puede calcularse
como:


(1.3.25)



12
AKITA, K. and YOSHIDA, F. Ind. Eng. chem. Proc. Vol. 12, P 76, 1973. Citado por DECKWER, W.D. Bubble Column Reactors, 1992.
( )
B
s
L
B
L
L
G
U A V
U
H
A Q
V
V

( )

,
_

,
_

,
_

T
s
12
1
2
L
2
L
3
T
8
1
L
2
T
4
D g
D g
D g
'
1
55
(a) (b)
(c)
La eficiencia del transporte de oxgeno es proporcional a la relacin del rea superficial de
la burbuja con el volumen de la misma. El rea puede ser manipulada cambiando la
tensin superficial o el tamao de la burbuja. El primero es un factor difcil de ajustar en
muchas fermentaciones; mientras que con el decremento del segundo, se logra un
incremento del rea interfacial que a su vez, resulta en un mayor tiempo de residencia de
la burbuja por tener una menor velocidad de ascensin, dejando ms tiempo para que el
oxgeno sea disuelto [48].


En cultivos aerbicos de 10 m
3
o ms, el rea interfacial gas lquido y el fenmeno de
tiempo de residencia de la burbuja son limitantes para el suministro de oxgeno a los
microorganismos [21].


1.3.5 Coeficiente de transferencia en el lado lquido. El coeficiente de transferencia
de masa de la pelcula lquida (k
L
) es funcin del tamao de la burbuja y el modelo de flujo
del lquido alrededor de sta. Las correlaciones para determinar k
L
basadas en el perfil de
velocidad de un lquido fluyendo alrededor de una esfera, como lo muestra la Figura 12a,
estn dadas en trminos de nmeros adimensionales tales como:


(1.3.26)




(1.3.27)



(1.3.28)



Figura 12. Modelo de ascensin de la burbuja a travs de la columna.












fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997.
2
O
B L
d k
Sh Sherwood de Nmero
D

2
O L
L
Sc Schmidt de Nmero
D

Sc . Re
U d
Pe Pclet de Nmero
2
O
B B

D
56
Como se mencion antes, el valor de k
L
se ve afectado por el tamao de las burbujas; si
las burbujas tienen tamaos inferiores a 3 mm, los efectos de la tensin superficial
dominan el comportamiento de la superficie, as, las burbujas se asemejan a esferas
rgidas con superficies inmviles y sin circulacin interna del gas. Por otro lado, las
burbujas con tamaos superiores a 3 mm desarrollan una circulacin interna y superficies
relativamente mviles dependiendo en todo caso de las propiedades del lquido [16].


Los surfactantes afectan principalmente dos parmetros de la burbuja: su forma y
circulacin interna. A bajas concentraciones, el efecto de circulacin interna de la burbuja
sobre las dinmicas de ascensin libre es significante, y los surfactantes son barridos a la
zaga de la burbuja (Figura 12b). Sin embargo, despus de exceder cierta concentracin,
la interfase de la burbuja se inmoviliza (Figura 12c). La Tabla 10 presenta algunas
correlaciones para determinar el nmero de Sherwood en ambos casos, interfase inmvil
e interfase mvil. Estas expresiones pueden complementarse con el Anexo C.


Tabla 10. Correlaciones para la determinacin del nmero de Sherwood.
Interfase Inmvil Interfase Mvil

Para Re < 1:

(1.3.29)

Para altos nmeros de Pclet:

(1.3.30)

Para 2 < Re < 1300:

(1.3.31)

Para 200 < Re < 4000:

(1.3.32)

De Calderbank y Moo Young:

(1.3.33)



Donde:



Para Re < 1:



(1.3.34)

Para 1 < Re < 10:


(1.3.35)


Para 100 < Re < 1000:


(1.3.36)


A altos valores:

(1.3.37)




fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical engineering, 1997.
2 1
2 1
Pe
2
Re
1 65 , 0 Sh
,
_

+
2 1
2 1
2 1
Pe
Re
9 , 2
1 13 , 1 Sh
,
_

2 1 2 1
G L
L
Pe 65 , 0 Pe 65 , 0 Sh

,
_

2 1
Pe 13 , 1 Sh
2 1
3
2
Pe 21 , 1 0 , 4 Sh

,
_

+
3 1
Pe 0 , 1 Sh
3 1 2 1
Sc Re 82 , 0 Sh
3 1 2 1
Sc Re 5 , 0 2 Sh +
( )
L
3 1 3 2
L
3 4
B
e
V P d
Re

3 1 4 3
e
Sc Re 13 , 0 Sh
57
1.3.6 Coeficiente volumtrico global de transferencia de masa. La determinacin
por separado del coeficiente de transferencia de masa k
L
y el rea interfacial a, es
laboriosa y algunas veces imposible. Es conveniente, por tanto, calcular directamente el
producto de estos, usualmente llamado coeficiente volumtrico global de transferencia de
masa (k
L
a).


En los fermentadores aerbicos, k
L
y a dependen de las condiciones hidrodinmicas
existentes alrededor de las burbujas. Por ello, se ha investigado ampliamente la relacin
entre k
L
a y parmetros como el dimetro de la burbuja, la velocidad del lquido, la
densidad, la difusividad del oxgeno; y a su vez, se han desarrollado correlaciones
empricas entre coeficientes de transferencia de materia y las principales variables de
operacin. En el Anexo C se renen algunas de estas expresiones para diferentes
sistemas. Una de las ms frecuentes en columnas de burbujeo es la propuesta por
Yoshida y Akita
13
:


(1.3.38)



En la prctica, la exactitud de las correlaciones aplicadas a los sistemas biolgicos es
generalmente pobre. Debido a que los lquidos de fermentacin contienen cantidades
variables de sustratos, productos, sales, agentes tensoactivos y clulas, la qumica de la
superficie de la burbuja y, por tanto, la transferencia de materia llega a ser muy compleja.
Adems, la mayora de las correlaciones existentes para calcular los coeficientes de
transferencia de oxgeno se determinaron en tanques agitados a escala de laboratorio, los
cuales se caracterizan por una elevada turbulencia en todo el recipiente, y utilizando aire
puro en agua; por ello, es muy difcil modificar estas correlaciones para aplicarlas en
equipos a gran escala o para diferentes composiciones del lquido.


Con el modelo de dos comportamientos aplicados a fermentadores a gran escala se
obtienen mejores resultados ya que se emplean diferentes correlaciones para la zona
mezclada cercana al difusor y la zona de burbujas alejada de l. Esta tcnica para
calcular la transferencia de oxgeno se describe en la seccin 1.4.


El coeficiente global de transferencia de masa est determinado por la velocidad a la cual
las molculas de oxgeno pasan a travs de la capa lmite. ste puede incrementarse por
la reduccin del tamao de la capa lmite al hacer ms turbulenta la fase lquida y por el
aumento de la velocidad del movimiento de las molculas a travs de la interfase.
Asimismo, debe recordarse que la resistencia al transporte de las molculas en el lado
gaseoso (1/k
G
) es despreciable con respecto a la que ofrece el lado del lquido (1/k
L
).



13
YOSHIDA, F. and AKITA, K. AIChE Journal. Vol 11, 1965. Citado por BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark.
Biochemical engineering, 1997.
1 , 1
31 , 0
2
2 3
T
62 , 0
L
2
T
2 1
O L
L
O
2
T L
L
L
2 2
D g
D g
6 , 0
D ) a k (

,
_

,
_

,
_

D D
58
Entrada al medio
F, C
O
2
, in

Salida de gas
Q
1
, y
Entrada de gas
Q
o
, y
o

Salida del medio
F, C
O
2

L a f racci n mol ar de oxgeno en el
gas es dada por y y l a concent raci n
de oxgeno en el l qui do es C
O
2
. L os
f l uj os vol umt ri cos de ent rada y
sal i da de gas est n dados por Q
o
y Q
1

respect i vament e.
1.4 BALANCE DE MATERIA EN BIORREACTORES DE DOS FASES


En esta seccin se examina el transporte de oxgeno desde la fase gaseosa a la fase
lquida. En la mayora de biorreactores, el comportamiento del flujo de ambas fases
depende de la escala del equipo empleado. A pequea escala, equipo de laboratorio, la
fase lquida generalmente puede ser considerada bien mezclada, mientras que el
comportamiento de la fase gaseosa podra ser bien mezclado o flujo pistn, dependiendo
de si se emplea agitacin mecnica o no. Es importante reconocer estos dos tipos de
comportamiento al plantear los balances de materia apropiados para la transferencia de
oxgeno de una fase a la otra.


Se desarrollan ecuaciones de balances tanto para un sistema de fase lquida y fase
gaseosa bien mezclada, como para un sistema de fase lquida bien mezclada y fase
gaseosa en flujo pistn. Si la fase lquida no es bien mezclada, es menester cuantificar de
alguna manera la dispersin del lquido. Por encima de una velocidad crtica del impulsor,
la mayora de los reactores agitados mecnicamente con fluidos de baja viscosidad se
aproximan al comportamiento de bien mezclado. En grandes reactores, la situacin es
menos clara y se debe tener cuidado para delinear el rgimen del flujo del lquido. En
casos donde el grado de absorcin es alto, la suposicin de comportamiento bien
mezclado o flujo pistn de la fase gaseosa puede predecir velocidades de absorcin las
cuales difieren por un orden de magnitud. Es as que se debe tener cuidado en el
desarrollo de modelos de estos sistemas de dos fases.


1.4.1 Sistema aire agua.


Fase lquida bien mezclada y fase gaseosa bien mezclada. Si tanto la fase
gaseosa como la fase lquida pueden ser consideradas bien mezcladas, se pueden
desarrollar ecuaciones acopladas que describan la transferencia desde el gas a la fase
lquida. La situacin se seala en la Figura 13.


Figura 13. Biorreactor con fases gas y lquida bien mezcladas.












59
La velocidad de transferencia de oxgeno desde el gas a la fase lquida, est dada por :


(1.4.1)

Donde:

N
O
2
= flujo molar de oxgeno [ moles de O
2
transferido / (m
2
rea interfacial . s)

]
a = rea interfacial por unidad de volumen del reactor [ m
2
/ m
3
volumen de lquido

]
K
G
= coeficiente global de transferencia de masa de la fase gaseosa [mol / (s. m
2
. atm )

]
P
O
2
= presin parcial de oxgeno en la fase gaseosa [ atm ]
y = fraccin molar de oxgeno en la fase gaseosa [ mol O
2
/ mol total

]
C
O
2
= concentracin de oxgeno en la fase lquida [ mol O
2
/ m
3
volumen de lquido ]
H = constante de la ley de Henry [ atm . m
3
/ mol

]
P = presin total [ atm ]


El balance de materia en la fase gaseosa incluye trminos de flujo de entrada y de salida
del reactor y el trmino que describe el transporte de oxgeno desde la fase gaseosa, as:


(1.4.2)


Donde a.V
L
es el rea total para la transferencia de materia, NV
L
V
b
es el volumen total de
gas, N es el nmero de burbujas por volumen de lquido, V
b
es el volumen de la burbuja y
el coeficiente global de transferencia de materia en la fase gaseosa K
G
incluye las
resistencias de pelcula del gas y el lquido, dado por:


(1.4.3)

Implcitamente se aduce que el volumen de la burbuja permanece constante y para la
solucin de las ecuaciones, teniendo en cuenta que en estado estable la presin no
cambia con el tiempo, se asumir P = P
LM
. Sin embargo, si hay una variacin significativa
de la presin dentro de la columna de burbujeo, su dependencia con la altura de la
columna debe ser incluida.


La consideracin de un volumen de burbuja constante puede ser precisa para el oxgeno
si la cantidad transferida de ste es pequea. El balance de materia de la fase lquida
para el oxgeno se plantea como:


(1.4.4)
L G G
k
H
k
1
K
1
+
( )
,
_

2
O G
2
O
2
O G
2
O
C
P
H
y P a K C H P a K a . N
( )
( )
,
_

,
_

,
_

2 O L G 1 o o
b L
C
P
H
y aPV K y Q y Q
RT
P
RT
y P V NV
dt
d
( )
L O O L G O O O L
V r C
P
H
y P aV K ) C C ( F C V
dt
d
2 2 2 in , 2 2

,
_

+
60
Donde F es el caudal de la fase lquida y r
O
2
es la velocidad volumtrica de consumo de
oxgeno por reaccin en la fase lquida. Puede asumirse fases de gas y lquido bien
mezcladas solamente en reactores pequeos con lquidos no viscosos. En grandes
reactores la fase gaseosa puede estar sustancialmente agotada de oxgeno a medida que
las burbujas de gas ascienden a travs del lquido. Requerimos entonces considerar la
variacin de la concentracin de oxgeno en la fase gaseosa con la altura del tanque.


Fase lquida bien mezclada y fase gaseosa en flujo pistn. Existe una
dependencia axial de la composicin en la fase gaseosa as como de la variacin en el
tiempo. El balance total de oxgeno en la fase gaseosa es:



(1.4.5)


La velocidad de ascensin de la burbuja es U
B
y a es la relacin rea superficial de
burbuja por volumen de burbuja (note que sta es diferente de a, el rea interfacial por
volumen de fase lquida).


Si la concentracin de oxgeno en la fase gaseosa puede ser considerada invariante con
el tiempo (como puede ser el caso en reactores continuos de tanque agitado en estado
estable), la fraccin molar de la fase gaseosa y depende solamente de la posicin z
(y = y (z)) y la concentracin de oxgeno en el lquido podra solamente depender del
tiempo (C
O
2
= C
O
2

(t)), desacoplando as la ecuacin (1.4.5). Ahora se puede resolver el
balance de la fase gaseosa asumiendo que el volumen de la burbuja V
b
permanece
constante. En este caso, la velocidad de ascensin U
B
y a' pueden ser constantes.



(1.4.6)


Integrando sobre la altura del lquido en el tanque:


(1.4.7)





(1.4.8)


dz
V U
RT V ' a K
C
P
H
y
dy
z
0
b B
b G
y
y
O
o
2

,
_

,
_

,
_

,
_

2
O b G
b
B
b
C
P
H
y P V ' a K
z
y
T R
V P
U
t
y
T R
V P

,
_

,
_

2
O b G
b
B
C
P
H
y P V ' a K
dz
y
RT
PV
d
U
z
U
RT ' a K
C
P
H
y
C
P
H
y
log
B
G
O o
O
2
2

,
_

,
_

61
( )

,
_

,
_

+ z
U
RT ' a K
exp C
P
H
y C
P
H
z y
B
G
O o O
2 2

(1.4.9)


Del teorema del valor medio, la fraccin molar promedio de oxgeno est dada por:




(1.4.10)



Sustituyendo la expresin (1.4.9) en la ecuacin (1.4.10) y resolviendo, la fraccin molar
en la fase gaseosa es:


(1.4.11)


Donde:


As el balance de oxgeno en la fase lquida bien mezclada (anlogo al de la ecuacin
(1.4.4)) es:

(1.4.12)


En estado estable la derivada con respecto al tiempo de la concentracin de oxgeno vale
cero. As, dividiendo por F, sustituyendo la constante a por aV
b
N y organizando se
obtiene:


(1.4.13)


La cual puede ser resuelta si se conoce la expresin de velocidad volumtrica de
consumo de oxgeno (r
O
2
) obtenida para el sistema microbiano o enzimtico bajo
consideracin. En sistemas sin consumo de oxgeno este valor es cero, por lo que la
concentracin de oxgeno disuelto en el medio igualar rpidamente la concentracin de
saturacin de oxgeno [33].


Estas ecuaciones pueden ser empleadas directamente dependiendo de los modelos de
flujo en el tanque bajo consideracin. En columnas de burbujeo las cuales tienen grandes
relaciones de altura a dimetro, el ascenso del gas a travs de la fase continua induce a
un modelo de circulacin de lquido el cual no es bien mezclado y debe considerarse
entonces una dispersin axial del lquido.

,
_

,
_

n
e 1
y
n
e 1
1 C
P
H
y

n
o
n
O
2
( )
L O O L G O O O L
V r C
P
H
y

P V a K ) C C ( F C V
dt
d
2 2 2 in , 2 2

,
_

+
( )
F
V
r
H F T R
U V N V P
e 1
P
H
C y C C
L
O
L
B L b n
O o O O
2 2 in , 2 2

,
_

,
_

+

B
L G
U
H T R a K
n

L
H
0
L
L
H
0
L
H
0
dz ) z ( y
H
1
dz
dz ) t , z ( y
y
62
entrada del gas
El asenso de l as burbuj as de gas i nduce un
f l uj o ascendent e de l qui do en el cent ro de l a
col umna (di met ro d), l a cual t i ene un f l uj o
descendent e a t ravs del rea anul ar dada
en t rmi nos de ( D
T
d).
perfil de
velocidad
Modelo de circulacin de lquido. En muchas columnas de burbujeo la altura con
relacin al dimetro es bastante grande (3:1 a 10:1) de tal forma que el gradiente axial es
generalmente ms importante que el gradiente de concentracin radial. El mezclado axial
del lquido puede ser caracterizado por un coeficiente de dispersin (E
L
), el cual necesita
la adicin de un trmino dentro del balance de materia para el oxgeno en la fase lquida,
as:


(1.4.14)


Donde
L
es la velocidad promedio de circulacin de lquido. Cuando el flujo puede
aproximarse a turbulento homogneo isotrpico
14
, se tiene una til correlacin para E
L
[7]:

(1.4.15)


Entre otras expresiones para el coeficiente de dispersin axial E
L
se encuentran, las que
utilizan un anlisis tipo Taylor en trminos de dos factores dominantes, la recirculacin
convectiva y la difusin por remolinos [15]; aqullas que son funcin de las propiedades
fsicas como la propuesta por Oliveros et. al. [35] y las acopiadas y comparadas con datos
experimentales por Lehrer [29]; que pueden ser consultadas en el Anexo C.


Basada en el modelo de la Figura 14, la velocidad promedio de circulacin de lquido
L
es
calculada a partir de un balance macroscpico del sistema. Si las reas para flujo
ascendente y flujo descendente son iguales , donde las velocidades V

y V
A

tambin son iguales, se tendr
L =
V

. Por tanto d ~ ~ 0,7 D

T
.


Figura 14. Modelo simple de circulacin de lquido.














fuente: BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochemical Engineering, 1997.

14
Teora de la turbulencia isotrpica de Kolmogoroff. DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.
0 r
P
H
C y P a K
dz
dC
u
dz
C d
E
2 2
2 2
O O G
O
L
2
O
2
L

,
_

+
( )
3 1
s
3 4
T L
g D 35 , 0 E
d 2 D
T

T
D ) 2 / 1 (
63
El balance de energa macroscpico simplificado puede expresarse como [7]:


(1.4.16)

Donde:

(1.4.17)


Cuando las reas de flujo no son iguales, el balance de energa se enuncia como:



(1.4.18)





Si el flujo es laminar y el fluido es newtoniano el valor del factor de friccin se puede
estimar de:

(1.4.19)

As, la ecuacin (1.4.16) puede ser resuelta para la velocidad V

.


(1.4.20)


Para flujo turbulento, f

depende dbilmente del nmero de Reynolds, pero se puede

asumir que f

~ 0,02 y la ecuacin (1.4.16) se reduce a:

(1.4.21)


El balance de energa macroscpico provee as de Velocidades promedio de lquido en
ambas regiones (anular e interior) de la columna.


La potencia de entrada (P
w
) para la regin interior donde las burbujas ascienden es dada por:

(1.4.22)
L L M w
H g Q P
( )
3 M
V f 2 2
d
g Q 2

+

1
1
1
1
1
1
]
1

,
_

,
_

,
_

+
+ +

,
_

,
_

f
f
f
1
d
D
1
d
D
1
H
d
1
d
D
1
1 V
d
g Q 2
A
3
2
2
T
T
2
2
2
T
3 M
2 / 1
L
L M
) 2 2 ( 8
g Q
V

,
_

3 / 1
M
f ) 2 2 ( d
g Q 2
V

,
_

L
L
L
L
d V
Re Donde
Re
16
f

2
1
2 1
LM
LM
2
M
P
P
ln
P P
P y
P
P
Q Q


64
y el volumen de dicha regin interior es:


(1.4.23)


As la potencia por unidad de volumen (P/V) que se aplica al fraccionamiento y/o
coalescencia de las burbujas en esta regin se estima de:


(1.4.24)


El dimetro de la burbuja en la columna para el caso de flujo turbulento se calcula mediante
la ecuacin (1.3.13), obtenida antes para el dimetro de la burbuja en equilibrio d
Be
:



(1.3.13)


Para un fluido en ley de potencia (no newtoniano) la viscosidad aparente est dada por:


(1.4.25)


Donde:



1.4.2 Sistemas con consumo de oxgeno. En sistemas aerbicos, la energa
obtenida por la clula a partir de las sustancias nutritivas del entorno, principalmente el
oxgeno, es utilizada en la realizacin de trabajo qumico, en la biosntesis de las
protenas, cidos nucleicos, lpidos, polisacridos y dems componentes celulares
importantes para su desarrollo y replicacin. Tambin se requiere energa para la
realizacin de trabajo osmtico, en el transporte de sustancias nutritivas a travs de la
membrana celular y en el trabajo mecnico de contraccin y locomocin.


Existe una concentracin crtica de oxgeno por debajo de la cual los microorganismos
aerbicos comienzan a morir o actuar anaerbicamente. Esta concentracin es
aproximadamente del 10 % al 20 % del valor de saturacin de oxgeno [48].


El conjunto de la secuencia de reacciones catalizadas enzimticamente que ocurren en la
clula es conocido como metabolismo celular. Cada secuencia se conoce como ruta
metablica y los productos de estas reacciones son los metabolitos [9].
L
2
1
H d
4
V

2
L M
1
d
g Q 4
V
P

( )
1 , 0
G
app
2 , 0
L
4 , 0
6 , 0
Be
V P
7 , 0 d

,
_

( ) n F
1
d
V
K
1 n
app

,
_

( )
n
2 n 6
n
8 n F
,
_

65
1 Fase de retraso
2 Fase logartmica
3 Fase estacionaria
4 Fase de muerte
Cultivo por lotes
Biomasa
Cultivo por lote
alimentado
Operacin
continua
Entrada Salida
Alargamiento de la
fase exponencial
Volumen
constante
tiempo
Biomasa
tiempo
Biomasa
tiempo
1
2
3
4
La mayora de las clulas son bastante sensibles a la concentracin de oxgeno disuelto y
una repentina cada de sta puede causar drsticas modificaciones en sus metabolismos
y fisiologa; algunas clulas pueden morir, otras pueden transitar a la fermentacin
anerbica y otras a la fase estacionaria.


Un adecuado conocimiento de la estequiometra de las diferentes rutas metablicas,
facilita la aplicacin del anlisis estadstico en la evaluacin de los datos obtenidos
durante el desarrollo de un cultivo de microorganismos.


Las tcnicas de cultivo, tal como se muestran en la Figura 15 pueden ser clasificadas en:


- Por lotes (batch) o discontinuo.
- Por lote alimentado (fed batch) o semicontinuo.
- En operacin continua.


El suministro de oxgeno puede alterarse de acuerdo a los requerimientos de oxgeno de
los microorganismos en varias fases del cultivo.


Figura 15. Tcnicas de cultivo y crecimiento celular.























fuente: Instituto Tecnolgico y de estudios Superiores de Occidente de Chile.
66
Biorreactor por lotes. Es el mtodo de produccin ms sencillo, ya que slo al inicio
del cultivo debe proveerse al medio los sustratos necesarios para el crecimiento de
biomasa y producto; es decir, durante el resto del proceso no existe entrada ni salida de
la fase lquida. La cesacin del crecimiento celular refleja la consuncin del sustrato
limitante en el medio [49].


La operacin por lotes simplifica el mantenimiento de condiciones aspticas y minimiza
las prdidas debido a la contaminacin o falla del equipo [5].


Biorreactor por lote alimentado. Alrededor de 1920, la tcnica de sustrato
alimentado, referido como cultivo fed batch fue desarrollado para mantener altos
rendimientos de biomasa. Esta tcnica se encuentra particularmente efectiva para
procesos en los cuales efectos tales como inhibicin de sustrato, represin catablica,
inhibicin de producto y efecto glucosa son importantes. Sonnleithert y Kppeli [45]
explican en detalle stos fenmenos para levaduras.


El proceso de produccin semicontinuo comienza como si fuera un cultivo tipo lote,
cuando los sustratos de crecimiento han sido consumidos, se agregan de nuevo al cultivo
permitiendo alargar la fase exponencial de produccin de biomasa para aumentar la
cantidad de la misma. Los cultivos de alimentacin por lote son realizados cuando los
procesos continuos no pueden ser utilizados [24].


En la fermentacin de la levadura de Baker
15
, los procesos semicontinuos fueron ideados
para prevenir un efecto perjudicial para el crecimiento de levadura por una alta
concentracin de glucosa, efecto glucosa [18], ya que la levadura crece ms
eficientemente cuando la glucosa est presente en pequeas cantidades. Recientemente,
la tcnica por lote alimentado ha sido reconocida como el mejor mtodo para la
produccin comercial de levadura [21].


En la industria de la fermentacin aerbica se han desarrollado estrategias de control para
maximizar el crecimiento de levaduras y minimizar los factores que perjudican el modelo
de crecimiento [22].


Operacin continua. En este tipo de cultivo hay un suministro continuo y constante
de los sustratos para la alimentacin de los microorganismos, cuyo propsito es
mantener en un punto fijo la produccin de biomasa. El volumen se mantiene invariable
retirando del reactor un caudal igual al caudal alimentado [24]. Por ello, el control del
biorreactor debe llevarse cuidadosamente ya que un pequeo cambio en las variables del
proceso puede causar una interrupcin del flujo continuo. Los cultivos continuos son
usados para procesos con altos ndices de produccin.

15
La levadura de Baker es el nombre comercial con el que se conoce la levadura Saccharomyces cerevisiae utilizada para
panificacin.
67
1.4.3 Tanques aireados y con agitacin mecnica. El mezclado es una operacin
fsica que hace al fluido ms uniforme, eliminando gradientes de concentracin, de
temperatura y permitiendo una distribucin homognea de las propiedades del sistema.
ste se efecta por intercambio de material entre diferentes localizaciones para producir
la mezcla final de los componentes. El mezclado se alcanza utilizando un agitador
instalado en el tanque, sta operacin incluye:


- Combinacin de los componentes solubles del medio, como los azcares.
- La dispersin de gases, como el aire, cuando atraviesa el lquido en forma de
pequeas burbujas.

- El mantenimiento de la suspensin de partculas slidas, como las clulas.


El mezclado es una de las operaciones ms importantes en bioprocesado. Para crear las
condiciones ambientales ptimas para la fermentacin, los biorreactores deben
proporcionar a las clulas acceso a todos los sustratos.


Los tanques agitados se construyen generalmente de forma cilndrica. Si es posible, la
base del tanque se redondea con el fin de eliminar las esquinas y cavidades donde se
forman regiones estancadas. La ubicacin de deflectores en recipientes cuyo lquido se
somete a agitacin tiene como objetivo evitar la formacin de vrtices y generar y/o
aumentar la turbulencia del lquido [48]. Cuando se utilizan fluidos newtonianos, la
relacin entre el dimetro del tanque y la del rodete es normalmente 3:1. Este ltimo se
coloca generalmente en la parte inferior de un agitador mecnico situado en el centro del
tanque.


La turbina Rushon es el impulsor ms usado en el cultivo aireado de clulas microbiales.
El impulsor est diseado para incrementar las velocidades de transferencia de oxgeno
por rompimiento de las burbujas de aire ascendentes y as incrementar el rea interfacial
de transferencia. Sin embargo, si la velocidad es muy baja las burbujas podran
acumularse y coalescer bajo el disco del impulsor; como resultado, se forman grandes
burbujas y la velocidad de transferencia de oxgeno es muy lenta; este fenmeno est
referido como impulsor inundado y es indeseable para el cultivo de microorganismos
aerbicos [33].


En reactores grandes o cuando el medio es viscoso, la agitacin juega un importante rol
moviendo las molculas de oxgeno disuelto a travs del volumen del lquido.
Incrementando la velocidad de agitacin se reduce el tamao de la capa lmite
circundante de las burbujas y as incrementa el coeficiente de transferencia de oxgeno. El
suministro de oxgeno por condiciones de aireacin agitacin est relacionado con el
espesor de la pelcula lquida en la interfase, el rea interfacial gas lquido; la retencin
de gas y los coeficientes de transferencia de masa [49]. En el Anexo C se proporcionan
correlaciones para el clculo de estos parmetros.

68
En sistemas aireados y agitados, las burbujas reducen la densidad y as decrece el
consumo de potencia. Para fermentaciones a pequea escala (P/V) puede ser
significativamente mayor que en fermentadores a escala industrial; as se presentan
diferencias en las cinticas de crecimiento observadas. Esta inconcordancia se puede
atribuir a efectos tales como cambio en el modelo de mezclado, condiciones del
movimiento del flujo, velocidades de transferencia de materia y energa, entre otros
parmetros fsicos; adems a propiedades microbiales como crecimiento, adaptacin y
sensibilidad cortante [21].


Algunos organismos como Aspergillus, Penicillum y cadenas industriales de hongos son
muy sensibles al corte producido por altas velocidades de agitacin. La levadura de Baker
no se ve afectada ya que posee una pared celular rgida [21]. Los reactores biolgicos
agitados estn influenciados por la interaccin de los siguientes parmetros [34]:


Parmetros del comportamiento biolgico. Relacionan la sensibilidad de la
biorreaccin a parmetros tales como niveles altos y bajos de oxgeno disuelto y
nutrientes (especialmente en operaciones discontinuas) y pH. El estrs mecnico tambin
puede causar dao de la dinmica del fluido o efecto del rompimiento de burbuja.


a. Parmetros del sistema especfico:

Crecimiento y secrecin del producto.
Dao a microorganismos.
Cambios morfolgicos.
Velocidades de transferencia de O
2
y
CO
2
.
Demanda de nutrientes.

b. Parmetros que pueden ser dependientes
de las condiciones del mezclado:

Calidad de la homogenizacin: toxicidad O
2
,
inanicin O
2
, concentraciones CO
2
.

Dao por estrs sobre las dinmicas del
fluido y el fenmeno de rompimiento de la
burbuja.


Parmetros que no son especficos del sistema biolgico. Son principalmente
especficos a la escala de operacin, la forma del impulsor, la geometra del biorreactor y
son dependientes de las dinmicas del fluido y el fenmeno de transporte.


Cuerpo del fluido mezclado.
Capacidad de dispersin del aire.
Transferencia de calor.
Trazado de potencia.
Coeficiente de transferencia de masa de O
2
.
Dinmicas locales del fluido:
- Cerca al agitador.
- Velocidad de disipacin de energa.
- Rompimiento de la burbuja.



El Anexo B ofrece informacin complementaria sobre biorreactores aireados y agitados.
69


2. METODOLOGA


2.1 LEYES FISICOQUMICAS DEL FENMENO


2.1.1 Objetivo. Representar el modelo matemtico para la transferencia de oxgeno
desde la fase gas hasta la fase acuosa del medio de cultivo, mediante el estudio de las
leyes fisicoqumicas que gobiernan el fenmeno.


2.1.2 Desarrollo. Para la obtencin del modelo matemtico se siguieron las pautas
sugeridas por Rusell [43] esquematizadas en la Figura 16.


Figura 16. Desarrollo de un modelo matemtico.






























fuente: RUSELL, T. W. F. y DENN, M. M. Introduccin al anlisis en ingeniera Qumica, 1976.
No
Seleccin variables dependientes fundamentales
Seleccin variables dependientes de caracterizacin
Seleccin volumen de control
No
Si
Aplicacin de los principios de conservacin
Ecuaciones bsicas del modelo
Situacin fsica
Hay un
valor nico para las variables
de caracterizacin en el volumen
de control?
Son
suficientes
las ecuaciones?
Modelo
Matemtico
Se
exploraron
totalmente los
principios de
conservacin?
No
Si
Si
Relaciones bsicas
70
Apoyados del diagrama anterior se hicieron las siguientes observaciones en la Situacin
fsica de Transferencia de oxgeno para el cultivo de microorganismos en un biorreactor
de columna de burbujeo, en donde la Variable dependiente fundamental ser la masa.


Variables dependientes de caracterizacin: Los valores o las ecuaciones de las
variables fisicoqumicas que caracterizan el modelo, fueron tomados de la literatura
reportada para el proceso de fermentacin en general, no obstante, los parmetros
cinticos utilizados son para un microorganismo particular (Saccharomyces
cerevisiae). Se hace nfasis en:


- Densidad del lquido (
L
): Debido a que la masa celular est compuesta en un 80 %
de agua, el valor de la densidad del caldo de cultivo se asumi igual a la del agua [3].
- Difusividad (D
O
2
): Segn la ecuacin (1.1.11) la difusividad decrece con un aumento en
la viscosidad, sin embargo Gainer et. al.
16
encontraron que en caldos de polisacridos
el valor de la difusividad de un gas es ligeramente menor que su correspondiente valor
en agua. As, el valor de la difusividad utilizado en el modelo, fue el estimado para la
difusin de oxgeno en agua a la temperatura de operacin (proceso isotrmico).
- Constante de la ley de Henry (H): La solubilidad del oxgeno en una fermentacin
vara considerablemente con respecto a su solubilidad en agua dependiendo del tipo y
la cantidad de nutrientes presentes en el caldo, por ello; se elabor un algoritmo
(Figura 17, pgina 72), con el que se puede determinar la constante de la ley de Henry
para diferentes composiciones del medio de cultivo.
- Viscosidad del lquido (
L
): La viscosidad del caldo fue cuantificada a partir del
modelo de circulacin de lquido (ecuacin (1.4.25)), mientras que los parmetros
reolgicos se obtuvieron de la regresin lineal de los datos especificados en la Tabla 1
para una concentracin de slidos en el caldo del 21 %.


Volumen de control: Regin de la columna de burbujeo (Figura 11).


Ecuaciones bsicas del modelo: La base del modelo la constituyen las ecuaciones
de transferencia de oxgeno en la fase gaseosa y en la fase lquida, simultneamente
con las ecuaciones que representan el crecimiento celular y el consumo de sustrato.
El set de ecuaciones anteriores se present en funcin del tiempo (t) como nica
variable independiente del sistema (modelo agregado); la variacin de la fraccin
molar de oxgeno con la altura de la columna es considerada en la ecuacin (1.4.11).


Relaciones bsicas: Principalmente se extractaron de la consideracin del rgimen
de formacin de la burbuja e hidrodinmica de la columna.

A partir de estas consideraciones, se obtuvo la tabla de grados de libertad para el modelo
matemtico del caso estudiado (Tabla 11).

16
GAINER et. al. AIChE Inst. Joint, 1965. Citado por BLANCH, Harvey and DOUGLAS, Clark. Biochem. Eng., 1997.
71
Tabla 11. Tabla de grados de libertad para el modelo matemtico.

Coeficiente de
transferencia de masa
rea interfacial


Sistema general
Propiedades en
comn
Medio
biolgico

C
O
2
,in
, C
O
2
, F, H,
N, P
LM
, Q
o
, Q
1
,
R, T, V
b
, V
L
, y, y
o





Bo, D
O
2
, Fr,
Ga, k
L
, M
B
,
Pe, Re
B
, Re
o
,
Sh, V
A,crit
, V
A
,
x,
G


d, d
B
, d
o
, D
T
, f

, g,
H
T
, K, n, N
o
, P
1
,
P
2
, Q, Q
M
, Q
T
, r,
U
B
, V

,
L
,
L
,
G
,

a, ,
s


K
s
, m
s
, r
O
2
,
S, S
o
, X,
X
o
, Y
O
2
,
Y
X/S
, ,

max

Variables
del
sistema*
14 14 22 3 11
64

C
O
2
(1.4.4)
(1.4.12)
y (1.4.2)
(1.4.9)




S (1.2.8)
X (1.2.3)
Ecuaciones
bsicas del
modelo
2 0 0 0 2
4

H (1.1.13)
N

=

Q

H
L
/(U
B
V
L
V
b
)
P
LM
(1.4.17)
Q
o
= Q
Q
1
= Q
V
b
= d
3
B
/6
V
L
= D
2
T
H
L
/4

Bo (1.3.18)
D
O
2
(1.1.11)
Fr (1.3.20)
Ga (1.3.19)
k
L
(1.3.26)
Pe (1.3.28)
Re
B
(1.3.4)
Re
o
(1.3.12)
Sh -Tabla 10
V
A
(1.1.12)
d = 0,7 D
T

d
B
(1.3.2), (1.3.9),
(1.3.11) Tabla 9
f

= 0,02 (1.4.19)
H
T
= r D
T

P
1
= P
2
+
L
g H
L

Q
M
(1.4.17)
Q
T
(1.3.6) (1.3.8)
U
B
(1.3.5) (1.3.7)
V

(1.4.21)

L
(1.4.25)

G
= P M
A
/(R T)
a (1.3.25)
(1.3.23)
(1.3.24)

s

=

4Q/( D
2
T
)






r
O
2
(1.2.15)
(1.2.6)
Relaciones
bsicas
7 10 11 3 2
33
C
O
2
,in
, F, R, T, y
o

M
B
, V
A,crit
, x,

G

g, K, n, P
2
,
L
,
K
s
, m
s
, S
o
,
X
o
, Y
O
2
,
Y
X/S
,
max

Parmetros
fijos
5 4 6 0 7
22
Grados de libertad (G de L.) 5

* La lista de smbolos de las variables del sistema puede ser consultada en el Anexo E.


De este modo, se designaron como Variables de diseo: d
o
, D
T
, N
o
, Q y r para especificar
completamente el sistema.

G de L. = 5 5 (d
o
, D
T
, N
o
, Q, r) = 0
72
No
No
Si
Se
encuentra el
compuesto j en la base
de datos?
Leer T y nmero
de nutrientes (j)
Iniciar Henry
Calcular la solubilidad
del oxgeno en agua en
funcin de la
temperatura con los
datos de la Tabla 2
No
Todos
los iones del
nutriente j estn en la
base de datos?
Si Seleccionar el in i
de la base de datos
Leer x
i

Si
Es i
igual al nmero
de iones del
compuesto j?
Obtener K
j
con los datos de la
Tabla 3 y la ecuacin (1.1.16)
o directamente de la Tabla 4
No
Leer c
j

Si
Es j
igual al nmero
de compuestos del
medio?
Calcular con la
ecuacin (1.1.18)
Leer K
j

Determinar el porcentaje de
desviacin de la solubilidad del
oxgeno en el medio con
respecto a la del agua
d
Calcular H con la
ecuacin (1.1.13)
Figura 17. Algoritmo de clculo para la constante de la Ley de Henry.
















































73
Fase lquida (L)

Reaccin biolgica

L
A
T
dz.r
f

Fase gaseosa (G)

Transferencia de oxgeno
dA = k
L
(C
*
L
C
L
)

L
A
T

G
A
T

z
L
L L T
z
C
E A

...
z
y
E
RT
P
A
z
G
G G T

z
L L
C F
z
G G
C F
Salida de los mismos flujos evaluados en z + dz
2.2 BALANCE DE MATERIA PARA EL OXGENO


2.2.1 Objetivo. Plantear ecuaciones para el balance diferencial msico del oxgeno en
ambas fases, su velocidad de consumo e incidencia en la aparicin de biomasa y
desaparicin de sustrato.


2.2.2 Desarrollo. En el delineamiento de las ecuaciones del balance de materia para
la columna de burbujeo, se utiliz la Figura 18 que esquematiza la red conceptual
aplicada a la formulacin del modelo matemtico de un biorreactor de dos fases.


Figura 18. Seccin diferencial en la interfase de una Columna de burbujeo.


















fuente: BAILEY, James and OLLIS, David. Biochemical Engineering Fundamentals, 1986.


Examinado la seccin diferencial de la columna entre las posiciones z y (z + dz) se derivan
los balances de materia de la concentracin de oxgeno en la fase lquida y la fraccin
molar de oxgeno en la fase gaseosa. Estos balances de materia se expresan como [3]:


Fase Lquida:




(2.2.1)


)] t , z ( C ) t , z ( C [ ) t , z ( a ) t , z ( k
) t , z , C , S , X ( r
z
) t , z ( C
u
z
) t , z ( C
) t ( E
t
) t , z ( C
L
*
L L
L f
L
L
2
L
2
L
L
+

74
Fase gaseosa:





(2.2.2)





Los parmetros hidrodinmicos que acompaan las ecuaciones de balance, no difieren
con la posicin ni con el tiempo para el volumen de control seleccionado (Regin ) y
como se mencion en el apartado 2.1, el modelo es agregado. As, la forma final de estos
balances de materia corresponde a lo expresado en las ecuaciones (1.4.4) y (1.4.2) para
la Regin ecuaciones (1.4.12) y (1.4.9) para la Regin .


Combinados con balances de materia anlogos para el crecimiento celular
(ecuacin (1.2.3)) y el consumo de sustrato (ecuacin (1.2.8)), estas ecuaciones fueron
usadas para describir la transferencia de masa en el biorreactor en su operacin por lotes
(estado estable) y lote alimentado (comportamiento dinmico) con respecto al suministro
de sustrato.


2.3 COEFICIENTES DE TRANSFERENCIA DE MASA


2.3.1 Objetivo. Obtener coeficientes de transferencia de masa tericos y relaciones
altura dimetro para un biorreactor de columna de burbujeo a partir del modelo
planteado, en el que se consideren las propiedades hidrodinmicas del sistema.


2.3.2 Desarrollo. El coeficiente de transferencia de masa del biorreactor fue obtenido
de manera independiente a las ecuaciones diferenciales bsicas del modelo, ya que para
cada volumen de control ste se considera invariable. No obstante, el coeficiente
volumtrico de transferencia de masa para toda la columna puede calcularse como:



(2.3.1)

Donde la altura de la regin (H

) es:


(2.3.2)
)] t , z ( C ) t , z ( C [ ) t , z ( a ) t , z ( k
) t ( M
) t ( RT
) t , z ( u ) t , z ( y ) t , z ( P
z


z
) t , z ( y
) t , z ( P
z
) t ( E
t
) t , z ( y
) t , z ( P
L
*
L L
L A
L
G G
G
G
G

,
_

,
_

o
T
N
D
125 , 1 H

,
_

,
_

a k
H
H
1 a k
H
H
a k
L
T
L
T
L
75
Evaluar Pe, Re
B
,
d
B
, Q
T
, U
B
en
Regimen_B
Leer
g, K, M
B
, n, P
2
, T,
V
A,crit
, x,
G
,
L
,
Iniciar Hidrodinamica
multiplicar k
L

por a (k
L
*a)
Calcular Bo, D
O
2
, Fr, Ga,
Re
o
, V
A
, d, f

, H
T
, P
1
,
P
LM
, Q
M
, V

,
L
,
G
,
s

Determinar a
con la ecuacin (1.3.25)
Calcular k
L

con la ecuacin (1.3.26)
Evaluar
s

Calcular
Estimar la movilidad o la
inmovilidad de la interfase
Evaluar Sh
con la Tabla 10
El coeficiente volumtrico global de transferencia de masa k
L
a para cada regin fue
obtenido a partir del algoritmo presentado en la Figura 19, el cual involucra las
propiedades hidrodinmicas caractersticas de una columna de burbujeo.


Figura 19. Algoritmo de clculo para el coeficiente volumtrico global de transferencia de masa.































Como se aprecia en el diagrama anterior, el clculo del coeficiente volumtrico global de
transferencia de masa requiere la estimacin previa del rgimen de formacin de la
burbuja (Regimen_B), que determina el comportamiento y las caractersticas de la
burbuja generada en el orificio y en su ascensin a travs del lquido. El algoritmo que se
muestra en la Figura 20 considera los posibles regmenes que se presentan en la
formacin de la burbuja de gas.


Determinado el rgimen de formacin de la burbuja en el orificio, fue posible obtener los
trminos requeridos por la ecuacin (1.3.38) para el clculo directo del coeficiente k
L
a.
Este valor fue comparado con el resultado del producto k
L
*a para diferentes
especificaciones de las variables de diseo.
76
No
Calcular Q
T
con las
ecuaciones (1.3.6) (1.3.8)
Calcular Q
T
con las
ecuaciones (1.3.6) (1.3.8)
No Si
Calcular d
Bo
con la
ecuacin (1.3.11)
Suponer el Re
B

Re
B
< 1 Re
B
1
Calcular U
Bo
con las
ecuaciones (1.3.5) (1.3.7)
Determinar el Re
B
con la
ecuacin (1.3.4)
No
Si
Comparar el valor de
Q
T
con (Q/N
o
)
Obtener el rgimen
de formacin de la
burbuja
Si
Iniciar "Regimen_B"
Determinar el flujo actual (Q/N
o
) y el Reynolds del
flujo de gas al interior del orificio (Re
o
) con la
ecuacin (1.3.12)
Es Re
o
> 10000
No
Suponer el rgimen de
formacin de la burbuja
(Q/N
o
)<Q
T
(Q/N
o
)>Q
T

Calcular d
Bo
con las ecuaciones
(1.3.2) (1.3.9)
Suponer el Re
B

Re
B
< 1 Re
B
1
Calcular U
Bo
con las
ecuaciones (1.3.5) (1.3.7)
Determinar el Re
B
con la
ecuacin (1.3.4)
Si
El valor
calculado de Re
B
corresponde a la suposicin
hecha?
Se
corrobora la
suposicin al comparar
el Q
T
calculado con
(Q/N
o
)?
El valor
calculado de Re
B
corresponde a la suposicin
hecha?
Figura 20. Algoritmo de clculo para el rgimen de formacin de la burbuja.
















































77
2.4 RESULTADOS DEL MODELO


2.4.1 Objetivo. Predecir con base en los resultados del modelo planteado, el perfil de
concentraciones de oxgeno en un biorreactor de columna de burbujeo que opera por
lotes en funcin del tiempo de residencia de las burbujas y de la altura de la columna de
burbujeo.


2.4.2 Desarrollo. Para la simulacin del fenmeno de transporte de masa en el
biorreactor se sigui el algoritmo planteado en la Figura 21, que involucra los algoritmos
presentados con antelacin y permite obtener la solucin numrica de las ecuaciones
bsicas del modelo matemtico, es decir, la variacin de los parmetros bsicos
(C
O
2
, y, X, S) durante el tiempo de fermentacin.


Figura 21. Algoritmo de clculo para la solucin del modelo matemtico.
































Calcular H,
app
, Q
M
, Q
o
,
Q
1
, P
LM
, P
w
,
L
, V

, V
L

Iniciar
Obtencin de los perfiles
de C
O
2
, y, S y X en
funcin del tiempo de
fermentacin
Leer los parmetros fijos
C
O
2
,in
, F, K, K
s
, m
s
, n, R, S
o
,
T, y
o
, Y
O
2
, Y
X/S
,
max

Leer las variables de diseo
d
o
D
T
, N
o
, Q, r
Solucin simultnea de las
ecuaciones bsicas del modelo
(C
O
2
, y, S, X) y las relaciones
bsicas para y r
O
2
.
Evaluar V
b
, N y k
L
a en
Hidrodinamica
78
Planteadas las ecuaciones bsicas del modelo y obtenidos los coeficientes de
transferencia de masa, se hizo un anlisis preliminar que permiti valorar la funcionalidad
de la ecuacin diferencial del balance de materia en la fase gaseosa. Dicho anlisis se
realiz en un sistema sin consumo de oxgeno (burbujeo de aire en agua) simplificando
as el set de ecuaciones al no considerar las correspondientes al crecimiento celular y
consumo de sustrato. De esta forma, se obtuvo un sistema lineal de ecuaciones
diferenciales no homogneas con coeficientes constantes, el cual fue resuelto
analticamente con el procedimiento detallado en el Anexo D.


La solucin del modelo matemtico para una columna de burbujeo operada por lotes con
consumo de oxgeno, es decir, utilizando el set completo de ecuaciones, no pudo
obtenerse en forma analtica (la ecuacin de Monod no tiene solucin analtica), no
obstante, las grficas obtenidas a partir de su solucin numrica por el mtodo de Runge
Kutta de segundo y tercer orden (herramienta utilizada: ode23s), son cotejadas con la
literatura revisada sobre el tema.


Adems, se analiz la variacin en el perfil de concentracin de oxgeno con el caudal
continuo de aire suministrado a la columna operada por lotes con respecto al medio de
cultivo.


2.5 SISTEMA DE BURBUJEO CON ASPA


2.5.1 Objetivo. Examinar el efecto que causa la inclusin de un aspa al modelo de
burbujeo considerado, mediante la comparacin de los coeficientes de transferencia de
masa, perfiles de concentracin de oxgeno y potencia de suministro del dispersor de aire,
determinados en ambos sistemas.


2.5.2 Desarrollo. Para condiciones idnticas de operacin en los biorreactores y
diversas relaciones altura - dimetro, se realizaron tablas y grficos comparativos entre la
potencia de suministro de aire (P/V), el tamao de equilibrio y los tiempos de residencia
de las burbujas en el lquido, los coeficientes volumtricos globales de transferencia de
masa y los perfiles de concentracin de oxgeno, obtenidos para la columna de burbujeo
sin agitacin y con sta. Las correlaciones y algoritmos presentados para la columna de
burbujeo fueron tambin aplicados para la columna con agitacin. Sin embargo, el trmino
(P/V) de la ecuacin (1.3.13) requiri ser modificado.


Para cuantificar el consumo de potencia del agitador mecnico, debi estimarse
inicialmente su consumo de potencia sin aireacin (P
o
) el cual depende del nmero de
Reynolds del rodete definido como:


(2.5.1)

app
2
i ag
i
D N
Re

79
Para flujo laminar (Re
i
< 10):

(2.5.2)


Donde P
o
= consumo de potencia sin aireacin [W]
k
i
= constante de proporcionalidad en funcin del tipo de impulsor (Tabla 12)
N
ag
= velocidad del agitador en [ s
-1
]
D
i
= dimetro del impulsor (0,3 D
T
< Di < 0,5 D
T
) en [m]


Para flujo turbulento:

(2.5.3)


Donde N
p
= nmero de potencia (Tabla 12)


Tabla 12. Constantes de proporcionalidad y nmeros de potencia para diferentes tipos de rodetes.
Tipo de rodete k
i
N
p

Turbina Rushton 70 5,60
Canalete 35 2,00
Hlice marina 40 0,35
Ancla 420 0,53
Cinta helicoidal 1000 0,35

fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


La expresin que relaciona la potencia con y sin aireacin en funcin de las condiciones
de operacin es:



(2.5.4)


Donde P
g
= consumo de potencia en tanques agitados y aireados [W]
A
i
= ancho de la pala del rodete (D
i
/4)


Finalmente, el trmino P
g
de la ecuacin (2.5.4) permiti calcular la potencia por volumen
de lquido (P/V) como P
g
/ V
L
.

3
i
2
ag app i o
D N k P
5
i
3
ag p o
D N N P
20 , 0
3 / 2
L i
4
i
2
ag
25 , 0
L ag o
g
V A g
D N
V N
Q
10 , 0
P
P

,
_

,
_

80


3. RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS


3.1 PARMETROS FISICOQUMICOS DEL MODELO


Variables de diseo:

d
o
= 0,0048 m D
T
= 1 m
N
o
= 45 Q = 0,004 m
3
/s [23]
r = 2,5


Parmetros fijos:


C
O
2
,in
= 0,109375 mol O
2
/ m
3

L
= 1000 kg/m
3

F = 0 = 72,7 * 10
3
N/m
R = 8,2056 * 10
-5
atm . m
3
/ (mol . K) K
s
= 0,025 kg / m
3

T = 303,15 K (sistema isotrmico) m
s
= 0,0192 kg
s
/kg
b
h
y
o
= 0,21 mol O
2
/ mol aire S
o
= 100 kg / m
3

M
B
= 18 g/mol X
o
= 2 kg / m
3

V
A,crit
= 73,4 [46] Y
O
2
= 0,03104 kg
b
/mol O
2

G
= 1,84 * 10
-5
N s / m
2
Y
x/s
= 0,5 kg
b
/ kg
s

g = 9,8 m/s
2

max
= 1,3889 * 10
-4
s
-1

P
2
= 1 atm


Difusividad del oxgeno. Como se mencion, sta se determina a partir de la ecuacin
(1.1.11):

x = 2,26 [42]







Constante de la ley de Henry. La constante de la ley de Henry se calcul para un medio
de fermentacin tpico [7], empleando el algoritmo presentado en la Figura 17:
( )
s / m 10 * 039 , 2
cm ) 100 (
m 1
*
s
cm
) 7095 , 25 (
15 , 303 * 18 * 26 , 2
10 * 4 , 7
2 9
2 2
2 2
6 , 0
2 1
8
A

D
81
Tabla 13. Composicin tpica de un medio de fermentacin.
Compuesto
Concentracin
[g/L]
Concentracin
[mol/L]
Glucosa 30,00 0,167
(NH
4
)
2
HPO
4
1,80 0,014
(NH
4
)
2
SO
4
6,00 0,045
MgSO
4
0,22 0,002
CaCl
2
0,32 0,003
KCl 0,87 0,012


A 30 C,
o
= 0,02635 [7]


De la Tabla 4:
Compuesto K
i
* 10
4
[L / g]
Glucosa 6,58


De la Tabla 3:

Compuesto Hi [L / mol] xi
zi
2

Ks [L / mol] de la
ecuacin (1.1.16)
NH
4

+

- 0,704 2
(+1)
2

(NH
4
)
2
HPO
4

HPO
4
2
0,477 1
(2)
2

0,250
NH
4

+

- 0,704 2
(+1)
2

(NH
4
)
2
SO
4

SO
4
2
0,460 1
(2)
2

0,216
Mg

2+

- 0,297 1
(+2)
2
MgSO
4


SO
4
2
0,460 1
(2)
2

0,326
Ca

2+

- 0,309 1
(+2)
2

CaCl
2

Cl

0,849 2
(1)
2

0,231
K

+

- 0,587 1
(+1)
2

KCl
Cl

0,849 1
(1)
2

0,131

Con los datos anteriores y la ecuacin (1.1.18):





( ) ( ) ( ) ( ) ( ) [ ]
( ) [ ]
4
o
10 * 58 , 6 * 30
131 , 0 * 012 , 0 231 , 0 * 003 , 0 326 , 0 * 002 , 0 216 , 0 * 045 , 0 25 , 0 * 014 , 0 log

+
+ + + +

82



Es decir, la solubilidad del oxgeno en el medio es 7,92 % menor que en el agua.


Se calcul la solubilidad del oxgeno en agua a 30 C (obtenida por aproximacin
polinomial entre los datos de la columna 1 y columna 4 de la Tabla 2):


C
A
= [(-6,4*10
8
T
3
) + (7,57*10
6
T
2
) (4*10
4
T) + 0,01479] *1000/32 en [mol/m
3
]

T en C
C
A
= 0,2519 mol/m
3



Finalmente el valor de la constante de Henry dada por la ecuacin (1.1.13) es:







Parmetros reolgicos. Mediante la ecuacin de la ley de potencia se deduce:


(3.1.1)


Para determinar el ndice de consistencia (K) y el ndice de comportamiento (n), aplicando
reglas para logaritmos de productos y potencias, se expres la ecuacin (3.1.1) as:


(3.1.2)


De tal manera que mediante la regresin lineal de los datos que aparecen en la Tabla 1
para una concentracin celular en el caldo de cultivo del 21%, los valores hallados para K
y n con un coeficiente de correlacin de 0,9927 fueron:


K = 0,833 N s
n
/m
2
y n = 0,749


Estos datos se encuentran en el rango de valores sugerido por Hubbard [23] para caldos
no newtonianos tpicos en fermentaciones aerbicas.
02426 , 0 10 * 02635 , 0 10 *
035877 , 0 035877 , 0
o


mol
m . atm
901 , 0
m / mol 2519 , 0 * 9208 , 0
atm 209 , 0
C %) 92 , 7 % 100 (
P
H
3
3
A
A

1 n
y
app
dx
d
K

,
_

,
_

+
dx
d
log ) 1 n ( K log log
y
app
83
3.2 COEFICIENTES DE TRANSFERENCIA DE MASA


Los valores del coeficiente volumtrico global de transferencia de masa fueron obtenidos
siguiendo el algoritmo descrito en la Figura 19 en cada regin de la columna de burbujeo.
El k
L
a determinado para todo el tanque es calculado por la correlacin (1.3.38) y a partir
de la ecuacin (2.3.1) para el modelo de dos regiones de la columna.


Estos valores son presentados en la Tabla 14 considerando diferentes relaciones
geomtricas de la columna.


Tabla 14. k
L
a para diversas relaciones Altura Dimetro de la columna de burbujeo.
Relacin H
T
/D
T
k
L
a [h
-1
]
1 2,5 5 10
kLa

0,886448 0,884468 0,881561 0,876778
kLa

1,472884 1,444825 1,400618 1,322603
k
L
a Ecuacin (2.3.1) 1,374536 1,407235 1,383208 1,315126
k
L
a Ecuacin (1.3.38) 2,659456 2,655219 2,649017 2,638856


Si bien se consider la regin como bien mezclada, el coeficiente de transferencia de
masa de esta regin (k
L
a

) es menor que su homlogo para la regin (k

L
a

) que se
calcul en flujo pistn. Esto se debe a la fuerte influencia ejercida por la diferencia entre
las reas de transferencia para cada zona, no obstante que k
L

es mayor que k
L
.


Los resultados de las ecuaciones (2.3.1) y (1.3.38) difieren entre s aproximadamente en
un 50 %, sin embargo, el anlisis de la columna de burbujeo en dos zonas (regiones y )
que abarca el rgimen de formacin de la burbuja satisface los requerimientos
hidrodinmicos con mayor amplitud.


En la Figura 22 se agrupan los grficos comparativos de los valores obtenidos del clculo
del coeficiente volumtrico global de transferencia de masa a partir de las ecuaciones
(2.3.1) y (1.3.38) como funcin de las variables de diseo especificadas para el modelo.


En dichos grficos se hace evidente la exigua incidencia que sobre la correlacin (1.3.38)
tienen las variables que se especificaron como manipulables para el sistema, es decir,
sobre un amplio rango de los parmetros d
o
, D
T
, N
o
y r dicha ecuacin arroja resultados
relativamente constantes. No as con el caudal volumtrico de gas con el cual su
comportamiento es lineal. De tal suerte, la ecuacin (2.3.1) no slo representa mejor las
condiciones hidrodinmicas de la columna, sino que tambin manifiesta una mayor
sensibilidad a los parmetros del modelo.
84
Figura 22. k
L
a en funcin de las variables de diseo.












































85
3.3 RESULTADOS DEL MODELO


3.3.1 Burbujeo de aire en agua. A partir de la solucin analtica del sistema de
ecuaciones bsicas del modelo de gaseo a un medio sin consumo de oxgeno (Anexo D),
se obtuvieron las ecuaciones que expresan la variacin de la fraccin molar de oxgeno
en la fase gaseosa (ecuacin (D.20)) y la concentracin de oxgeno en la fase lquida
(ecuacin (D.21)) con el tiempo.


La solucin grfica de estas ecuaciones revel que la fraccin molar de oxgeno en la fase
gaseosa se estabiliza rpidamente y permanece sin sobresaltos durante el proceso
(Figura 23); este comportamiento se debe a la aireacin continua del lquido y a la rapidez
con que el agua alcanza su estado de saturacin (Figura 24), dificultando la transferencia
de oxgeno desde la burbuja al seno del lquido.


Figura 23. Comportamiento de la fraccin molar de oxgeno en la fase gaseosa del sistema
aire agua.
























Al inicio de la aireacin en la columna de burbujeo, la fraccin molar de oxgeno presenta
una cada de 0,0001 mol O
2
/mol aire en su valor inicial, seguida de una recuperacin
en algo ms de 1 hora. Este comportamiento asegura que el oxgeno presente en la fase
gaseosa permanece relativamente constante durante todo el proceso de oxigenacin an
a bajos caudales, es decir dy/dt = 0.
86
Figura 24. Comportamiento de la concentracin de oxgeno disuelto en la fase lquida del sistema
aire - agua.


















El nivel de oxgeno disuelto en el lquido, alcanza un valor de saturacin de 9,0455 mg/L
para las condiciones de operacin dadas. Este resultado es bastante afn con el estudio
preliminar de Reuther et al. [44] quienes reportaron un valor de saturacin de oxgeno en
agua de 9,3 mg/L a 20 C obtenido a partir del diseo de una planta piloto para el sistema
de aireacin de levaduras.


Segn se observa en la Figura 25, el tiempo que tarda el lquido en alcanzar su valor de
saturacin de oxgeno, depende en gran medida de la cantidad de flujo de gas
suministrado al medio. A mayor gaseo, mayor rapidez en la saturacin del lquido.


Figura 25. Concentracin de oxgeno disuelto en el lquido en funcin del caudal de aire.
















87
3.3.2 Columna de burbujeo operada por lotes. De la solucin simultnea de las
cuatro ecuaciones bsicas del modelo (Tabla 11), se logr obtener los perfiles para cada
una de las variables dependientes del arreglo de ecuaciones y la velocidad del consumo
de oxgeno por los microorganismos (r
O
2
). La Figura 26 esquematiza dichos perfiles para
una columna de burbujeo que se opera por lotes.


Figura 26. Perfil de los parmetros C
O
2
, y, X, S, r
O
2
en una columna de burbujeo operada por
lotes.





















Rango para las variables:
y: 0 0,21 mol O2/mol aire; CO2: 0 8,2446 mg/L;
X: 0 100 kg/m
3
; S: 0 100 kg/m
3
; rO2: 0 0,229 mol O2/m
3
.s


El tiempo en el que concluye la fermentacin, est marcado por tres aspectos
simultneos: el agotamiento del sustrato, la cada en la velocidad de consumo de oxgeno
del microorganismo y el umbral de la fase estacionaria de la biomasa. Estos aspectos se
confluyen en un tiempo de 6,65 h (tiempo de fermentacin).


Cabe anotar que en el tiempo al cual comienza la fase exponencial del crecimiento celular
(aproximadamente 2 h), la concentracin de oxgeno en el lquido se encuentra en un
90 % de su valor de saturacin. La fraccin molar de oxgeno es invariante durante el
proceso fermentativo, corroborando la apreciacin hecha en el sistema de burbujeo de
aire en agua; complementariamente, la Figura 27 indica que este valor no se modifica
significativamente con la altura de la columna.
88
Figura 27. Variacin de la fraccin molar de oxgeno en funcin de la altura de la columna.



3.3.3 Sistema de burbujeo con agitacin. La Tabla 15 compara los valores de
algunos parmetros hidrodinmicos para columnas de burbujeo simples y con agitacin.


Tabla 15. Parmetros hidrodinmicos para CB y CBA*.
(P/V) [W/m
3
] d
Be
* 10
2
[m] t
G
[s] k
L
a [h
-1
] Relacin
H
T
/D
T

CB CBA CB CBA CB CBA CB CBA
1,0 47,642 160,38 2,1619 1,2924 2,8778 3,4513 1,3745 8,4875
1,5 46,607 139,16 2,1814 1,3679 4,3517 5,1846 1,3988 1,8324
2,0 45,628 125,83 2,2004 1,4241 5,8147 6,8822 1,4064 1,9694
2,5 44,702 116,38 2,2189 1,4693 7,2672 8,5538 1,4072 2,0394
3,0 43,823 109,19 2,2370 1,5073 8,7099 10,205 1,4049 2,0775
3,5 42,988 103,45 2,2546 1,5401 10,143 11,84 1,4007 2,0984
4,0 42,193 98,727 2,2719 1,5692 11,567 13,46 1,3954 2,1093
4,5 41,436 94,74 2,2887 1,5953 12,983 15,068 1,3895 2,1139
5,0 40,712 91,31 2,3052 1,6190 14,39 16,664 1,3832 2,1145
5,5 40,021 88,314 2,3214 1,6407 15,79 18,252 1,3766 2,1124
6,0 39,359 85,665 2,3373 1,6609 17,182 19,83 1,3698 2,1086
6,5 38,724 83,299 2,3529 1,6796 18,567 21,4 1,3630 2,1035
7,0 38,115 81,166 2,3681 1,6971 19,944 22,963 1,3561 2,0975
7,5 37,530 79,229 2,3831 1,7136 21,315 24,519 1,3492 2,0910
8,0 36,968 77,46 2,3979 1,7291 22,679 26,068 1,3423 2,0840
8,5 36,426 75,833 2,4124 1,7439 24,037 27,611 1,3354 2,0769
9,0 35,904 74,331 2,4266 1,7579 25,389 29,149 1,3286 2,0696
9,5 35,401 72,938 2,4407 1,7712 26,735 30,682 1,3218 2,0622
10, 34,916 71,64 2,4545 1,7840 28,076 32,209 1,3151 2,0547

* CB Columna de burbujeo sin agitacin
CBA Columna de burbujeo con agitacin
89
La Figura 28 es el compendio de los resultados presentados en la Tabla 15; en ellas se
compara el efecto de la inclusin de un agitador mecnico en el modelo de la columna de
burbujeo simple, de donde se extractan las siguientes consideraciones:


El comportamiento de la potencia de entrada por volumen de lquido en la columna de
burbujeo, presenta una tendencia lineal con pendiente negativa, con la agitacin mecnica
el cambio es ms sensible a las relaciones de altura dimetro y demuestra que para
menores relaciones geomtricas, se requiere una mayor potencia para su agitacin [37]. El
d
Be
disminuye por el rompimiento de la burbuja durante la agitacin, no obstante las
burbujas ms pequeas favorecen el tiempo de residencia de las mismas y el k
L
a con
respecto a la columna de burbujeo simple. An para r = 10, t
G
es mucho menor que el
tiempo de fermentacin por lo que no se considera en las ecuaciones bsicas del modelo.


Figura 28. Efecto de la inclusin de un agitador mecnico en la columna de burbujeo.

































90
Dependiendo de las condiciones de mezclado existentes en la columna de burbujeo, la
concentracin de oxgeno disuelto en el lquido diferir en el tiempo requerido para
alcanzar su valor de saturacin. Lo anterior puede observarse en la Figura 29.


Figura 29. Perfil de C
O
2
en el lquido para diferentes condiciones de mezclado.




















3.3.4 Columna de burbujeo operada por lote alimentado. Con el propsito de
complementar el trabajo realizado, se consider el sistema dinmico del fenmeno de
transferencia de oxgeno, el cual especficamente se refiere al proceso semicontinuo del
biorreactor de columna de burbujeo. Las ecuaciones bsicas para el anlisis de ste
proceso, a diferencia del batch, incluyen la variacin del volumen del lquido en el reactor
(V
L
) y el flujo de alimentacin de sustrato (F) durante el tiempo de fermentacin. En su
orden, las ecuaciones que modelan la concentracin de oxgeno en el lquido,
concentracin de sustrato, concentracin de biomasa y cambio en el volumen son:



(3.3.1)




(3.3.2)



(3.3.3)
2 2 2 2
2
O O L O
in ,
O
L
O
r C
H
P y
a k ) C C (
V
F
dt
C d

,
_

,
_

+

s
a
L
K S
X S
3600
4 , 1
) S S (
V
F
dt
S d
X
V
F
X
dt
X d
L

91

(3.3.4)


Para la solucin computacional de las ecuaciones anteriores ((3.3.1) a (3.3.4)), se
utilizaron las siguientes condiciones iniciales:


C
O
2
,in
= 0,109375 mol O
2
/ m
3
S
o
= 1 kg/m
3

X
o
= 4 kg/m
3
V
o
= 8 * 10
-3
m
3



De acuerdo con Enfors et. al. [18]. Si S > 0,11 kg/m
3
, entonces F
o
= 2,5 * 10
-8
m
3
/s


(3.3.5)


Una vez se llega a S < 0,11 kg/m
3
, entonces el flujo de sustrato se mantiene constante e
igual a 1,2575 * 10
-7
m
3
/s.


La simulacin arroja los resultados presentados en la Figura 30.


Figura 30. Perfil de los parmetros C
O
2
, F, V, X, S en una columna operada por lote alimentado.



















Rango para las variables:
CO
2
: 3,5 9,04 mol O2/m
3
; X: 0 100 Kg/m
3
; S: 0 1 Kg/m
3
; V: 0 0,011 m
3

F
dt
V d
L

12
10 * 78 , 4
dt
F d

92


4. CONCLUSIONES


A partir de las variables seleccionadas en la Tabla 11, las cuales fueron detalladas
durante el desarrollo del texto, es posible plantear el modelamiento de la transferencia
de oxgeno desde la fase gaseosa hasta la fase lquida de un medio de cultivo de
microorganismos en un biorreactor de columna de burbujeo, y obtener en funcin del
tiempo de fermentacin el perfil de la concentracin de oxgeno sobre el biorreactor
como resultado de la solucin numrica computacional del modelo.


De acuerdo con el algoritmo para el clculo de la constante de la ley de Henry
planteado en la Figura 17, con el que puede estimarse el valor de la solubilidad del
oxgeno para diferentes composiciones del medio de cultivo, se estableci que ste
valor siempre es menor con respecto al observado en agua pura a las mismas
condiciones de temperatura, debido al efecto que sobre el caldo ejerce la presencia de
sales y compuestos orgnicos. Dependiendo de las sustancias especificadas para el
medio, se presentaron disminuciones de la solubilidad del oxgeno en un rango del
7 % al 15 % de su correspondiente valor en agua pura.


El valor de la viscosidad del caldo de fermentacin es bastante influyente en el
comportamiento hidrodinmico de la columna, se ve afectado por parmetros tales
como el caudal de aire, la presin media logartmica del tanque, el rgimen del fluido y
la aparicin de biomasa; adems difiere significativamente en relacin al valor de la
viscosidad del agua pura. Por lo anterior, debe cuantificarse una viscosidad aparente
del caldo (
app
), que involucre la velocidad promedio del lquido en el biorreactor, esta
ltima obtenida a partir de un balance de energa macroscpico del sistema como el
suministrado por el modelo de circulacin del lquido.


De la solucin analtica del sistema de ecuaciones diferenciales bsicas del modelo de
gaseo a un medio sin consumo de oxgeno, se deduce que el comportamiento que la
fraccin molar de oxgeno presenta en la fase gaseosa permanece relativamente
constante durante todo el proceso de oxigenacin, an a bajos caudales de aire, por lo
que su variacin con respecto al tiempo de fermentacin puede despreciarse y
simplificar as el set de ecuaciones en el modelamiento del fenmeno.


La Figura 23 refleja la invariabilidad de la fraccin molar de oxgeno con el tiempo,
salvo en los primeros instantes de la fermentacin (aproximadamente 1 hora) en los
que dicha fraccin flucta levemente. De tal forma que al inicio de la fase de
crecimiento exponencial (aproximadamente 2 horas), que es la etapa de mayor
inters, su incidencia es nula. Adicionalmente, para columnas pequeas esta fraccin
molar de oxgeno no vara con la altura de la columna (Figura 27).

93
El tiempo que tarda el lquido en alcanzar su valor de saturacin en oxgeno, depende
en gran medida del caudal de aire suministrado al medio. A mayor gaseo, mayor
rapidez en obtener el valor de saturacin del caldo (Figura 25).


El anlisis de la columna de burbujeo con el sistema de dos regiones, no slo
representa mejor las condiciones hidrodinmicas de la columna, sino que tambin
manifiesta una mayor sensibilidad a los parmetros del modelo. En comparacin con
las correlaciones reportadas para el coeficiente de transferencia de masa global, las
cuales fueron establecidas en estudios a nivel de planta piloto, el modelo de dos
regiones ofrece un rango ms amplio de aplicabilidad y reproduce satisfactoriamente
los datos reportados por la literatura para columnas a gran escala.


An cuando se consider la regin como bien mezclada, el coeficiente global de
transferencia de masa de esta regin (k
L
a

) es menor que su homlogo para la

regin (k
L
a

) que se calcul en flujo pistn. Esto se debe a la fuerte influencia

ejercida por la diferencia entre las reas de transferencia para cada zona, no obstante
que k
L

es mayor que k
L
.


El comportamiento de la potencia de entrada de aire por unidad de volumen del lquido
en la columna de burbujeo, ofrece una tendencia lineal con pendiente negativa frente a
las relaciones altura dimetro del reactor, mientras que con la agitacin mecnica el
cambio de la (P/V) es ms sensible al parmetro r, y al igual que lo reportado por
Parakulsuksatid [37] demuestra que para menores relaciones geomtricas se requiere
una mayor potencia para la agitacin del tanque.


El dimetro de la burbuja de equilibrio (d
Be
) disminuye por el rompimiento de la burbuja
durante la agitacin, no obstante, las burbujas ms pequeas favorecen el tiempo de
residencia de las mismas y el coeficiente global de transferencia de masa con respecto
a la columna de burbujeo simple.



94


5. RECOMENDACIONES


Si bien los parmetros hidrodinmicos que acompaan las ecuaciones del balance de
materia se asumieron constantes para los volmenes de control seleccionados, stos
en realidad cambian con el tiempo y la posicin en la columna, por lo que se debe
analizar su fluctuacin en funcin de ambas variables.


En el modelo se realizaron diversas apreciaciones de tipo ideal, sin embargo, en
procura de robustecer el modelo matemtico, podra manejarse el proceso en
trminos de un seccionamiento diferencial que considere tanto el comportamiento
axial como radial del fenmeno estudiado.


Con fines comparativos se establecieron diferencias entre una columna de burbujeo
agitada y no agitada, considerando el tanque agitado como una modificacin de la
columna de burbujeo simple a la cual se le incluy un aspa. Sin embargo, el
procedimiento para analizar tanques aireados y agitados debe ser ms minucioso y
detallado, ya que su variacin en cuanto al rgimen hidrodinmico es considerable.


Para dar validez a cualquier modelo matemtico, es necesaria la adquisicin de datos
experimentales que permitan corroborar los clculos realizados.




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P 31 - 40. Medelln, 1997.


36. OWEN, P. Ward. Biotecnologa de la fermentacin. Principios, procesos y productos.
Editorial Acribia, S.A. Zaragoza, 1989.


37. PARAKULSUKSATID, Pramuk. Utilization of a microbubble dispersion to increase
oxygen transfer increase oxygen transfer in pilot-scale Bakers yeast fermentation
Unit. Tesis Instituto Politcnico de Virginia. Estados Unidos, 2000. <scholar.lib.vt.
edu/theses/available/etd-05122000-00440044/unrestricted/ wholethesis.pdf>.


38. PERINGER, P.; BLACHERE, H.; CORRIEU, G. and LANE, A.G. Mathematical
model of the kinetics of growth of Saccharomyces Cerevisiae. Biotechnology &
Bioengineering. Simposium. John Wiley & Sons, Inc. No. 4, P 27 42, 1973.


39. POSTIGO Miguel; SOSA, Atilio; ZURITA, Jos y KATZ, Miguel. Coeficiente de
difusin axial en columnas de burbujeo. Revista latinoamericana de transferencia de
calor y materia. Vol. 5, No. 3, P 131 - 135, 1981.


40. PRAKASH, A.; LI, H. Flow Behavior analysis in bubble columns based on local heat
transfer measurements <www.chemerg.ca/halifax2001/program/000001777.htm>.


41. QUINTERO R., Rodolfo. Ambientes computacionales para el diseo, optimizacin e
innovacin en procesos biotecnolgicos. Memorias y materiales de apoyo. Santa fe
de Bogot, 1997.

42. REID, R.C.; PRAUTNIZ, J.M and SHERWOOD, T.K. The properties of gases and
liquids. McGraw Hill. New York, 1977.


43. RUSELL, T. W. F y DENN, M. M. Introduccin al anlisis en ingeniera Qumica.
Editorial Limusa, S.A., 1976.
Bibliografa
44. REUTHER Hans et. al. Design and testing of a pilot yeast aeration system.
Technical quarterly. Vol. 32, Nmero 3, P 119 125, 1995.


45. SONNLEITHERT B. and KPPELI, O. Growth of Saccharomyces cerevisiae is
controlled by its limited respiratory capacity: formulation and verification of a
hypothesis. Biotechnology and bioengineering. Vol. XXVIII, P 927 937. John Wiley
& Sons Inc., 1986.


46. TREYBAL, Robert. Operaciones de transferencia de masa. Segunda edicin.
Editorial McGraw Hill, 1997.


47. TZOUNAKOS, A.; KARAMANEV, D.G. and MARGARITIS, A. "Effect of surfactants
on the free rise of gas bubbles in non-newtonian liquids". 51st Canadian Chemical
Engineering Conference. Sunday October 14th to Wednesday October 17
th

<www.chemeng.ca/halifax2001/Program/00000149.htm>


48. VANEGAS, Isleny y VANEGAS, Francisco. Caracterizacin de un agitador rotatorio
con miras a su utilizacin en procesos fermentativos. Tesis en Ingeniera Qumica de
la Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln. Medelln, 1998.


49. VOGEL, Henry and TODARO, Celeste. Fermentation and biochemical engineering
handbook. Principles, process design, and equipment. Second edition. Noyes
Publications. New Jersey, 1997.


50. ZILL, Dennis. Ecuaciones diferenciales con aplicaciones. Tercera edicin. Grupo
editorial Iberoamrica. 1997.

Anexo A

Anexo A
Correccin del Valor de Solubilidad con la Presin


Al trabajar a presiones diferentes de la atmosfrica, puede realizarse la siguiente
correccin para el valor de la solubilidad del oxgeno en agua:



Ley de Henry:



Para P 1 atm [48]:



(A.1)




(A.2)




(A.3)



Donde: C
(S)

= valor de la solubilidad a 1 atm [mg / L]
P = presin de operacin [atm]
T = temperatura de operacin [K]









atm 1 a
H
atm 209 , 0
H
P
C
2
O
) S (

'

,
_

,
_

2
vw
T
961 , 216
T
7 , 3840
8571 , 11 exp P
2 8 5
) 15 , 273 T ( 10 436 , 6 ) 15 , 273 T ( 10 426 , 1 000975 , 0 +

( )
( )( )
] l / mg [
1 P 1
P 1
P
P
1
P C C
vw
vw
) S ( ) P (
1
1
1
1
]
1

,
_

Anexo B
Disco variado Turbina Rushton Hlice marina Turbina abierta

Anexo B
Configuracin de los Biorreactores para Fermentaciones Aerobias


TANQUES AGITADOS: Los fermentadores agitados se utilizan generalmente para
cultivos aerobicos y exhiben un comportamiento en la concentracin de sustrato como el
observado en la Figura B1.


Figura B1. Comportamiento de la concentracin de sustrato en fermentadores con agitacin.









fuente: ATKINSON, B. Reactores bioqumicos, 1986.


En los fermentadores agitados, el oxgeno se suministra al medio mediante la creacin de
enjambres de burbujas de aire bajo el impulsor cuya accin provoca la dispersin del gas
a travs del resto del recipiente. En los fermentadores a escala de laboratorio todo el
lquido se encuentra cerca del rodete, de manera que las burbujas estn sujetas a
distorsiones que interaccionan con las corrientes turbulentas de lquido en el recipiente.
Por el contrario, en la mayora de los tanques agitados industriales las burbujas pasan
una gran parte del su tiempo flotando libremente a travs del lquido despus de la
dispersin inicial del rodete [16]. Algunos de los impulsores usados en estos biorreactores
se esquematizan en la Figura B2 [24].


Figura B2. Tipo de impulsores en los biorreactores con agitacin.












fuente: Instituto Tecnolgico y de Estudios Superiores de Occidente de Chile.
Sustrato
Concentracin inicial
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

Sustrato
tiempo
Anexo B
Cierre del eje del agitador
Agitador de turbina de disco
Entrada de aire
Deflector
La mayora de los biorreactores agitados estn equipados con turbinas tipo Rushton,
estas turbinas fciles de construir suministran una elevada potencia y se caracterizan por
su alta eficiencia para dispersar el gas. En la Figura B3 se esbozan los componentes de
ste sistema de agitacin.


Figura B3. Fermentador con agitacin de turbina.



















fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


Debido a que los impulsores en los biorreactores forman remolinos (Figura B4a), los
fermentadores disponen de dispositivos denominados corta corrientes (Figura B4b y c),
los cuales transfieren la turbulencia hasta las paredes del fermentador evitando la
formacin de vrtices.


Figura B4. Corta corrientes en los biorreactores.












fuente: Instituto Tecnolgico y de Estudios Superiores de Occidente de Chile.
Anexo B
Sustrato Sustrato Sustrato
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

Alimento
Producto
Depsito
(1) (2) (3)
(1) (2) (3)
Alimento
Alimento
Sustrato
Sustrato
Sustrato
Difusor
de aire
Una batera de fermentadores continuos de tanque agitado como el que se aprecia en la
Figura B5, consiste en varios tanques agitados en serie. El primer tanque est provisto de
una alimentacin continua de nuevos reactivos y una corriente continua de material
reactivo pasa de un tanque al siguiente. El producto se descarga continuamente por el
extremo de la lnea de depsitos. Una gran ventaja de esta configuracin, aparte de la
simplicidad de construccin, es el fcil control de la temperatura y del pH [2].


Figura B5. Tren de fermentadores agitados.









fuente: ATKINSON, B. Reactores bioqumicos, 1986.


COLUMNA DE BURBUJEO: La columna de burbujeo de la Figura B6 es el fermentador
ms fcil de construir debido a que no tiene sistema de agitacin. Su hidrodinmica y
caractersticas de transmisin de calor dependen por completo del comportamiento de las
burbujas formadas en el difusor.


Figura B6. Biorreactor de columna de burbujeo.













Las ventajas de los reactores de columnas de burbujeo incluyen los bajos costes de
capital, la ausencia de partes mviles y un adecuado rendimiento de la transferencia de
materia y de la transmisin de calor. Una de las inconveniencias de este tipo de
biorreactores se presenta para cultivos de alta viscosidad, donde los reactores agitados
por aire no proporcionan una mezcla suficiente y, por tanto, la transferencia de materia es
deficiente. En este caso, los reactores agitados mecnicamente son ms apropiados ya
que mediante este sistema se pueden suministrar mayores potencias.
Anexo B
Empacado
Con mezclado
esttico
Multi-capas
Cascada
Columnas de burbujeo modificadas:


Figura B7. Columna de burbujeo de plato perforado.
















La incorporacin de platos perforados como se muestra en la Figura B7 y variaciones que
incluyen hasta la dispersin por un solo agujero, transforman el modelo simple de una
columna de burbujeo en una versin de cascada multietapas. Esta nueva distribucin de
gas sobre los platos perforados intensifica la transferencia de masa, reducen la fraccin
de grandes burbujas y previenen el retromezclado en ambas fases. El mismo efecto
puede ser conseguido en columnas de burbujeo empacadas o mezcladores estticos.
Columnas multicapas se obtienen mediante la incorporacin de dispositivos de
enfriamiento, previniendo la circulacin de lquido y haciendo uniforme la distribucin de
flujo de gas sobre el reactor (Figura B8). Deckwer [14] ofrece mayores detalles sobre las
columnas de burbujeo modificadas.


Figura B8. Reactores de columna de burbujeo modificadas.















fuente: DECKWER, W.D. Bubble column reactors, 1992.
Anexo B
Salida de gas
Tubo de flujo
descendente
Difusor
Aire
(a) (b) (c)
Salida de gas Salida de gas
Difusor
Aire Aire
Tubo de flujo
ascendente
riser
Tubo de flujo
ascendente
Tubo de flujo
descendente
downcomer
Tubo de tiro
de aire
REACTORES DE TIRO O CORRIENTE DE AIRE (REACTOR AIR LIFT): Los
reactores de tiro de aire proporcionan generalmente mejores mezclas que los de
columnas de burbujeo, excepto cuando se opera a velocidades bajas de lquido, donde se
desarrollan corrientes de flujo similares a los del modelo de circulacin axial. La
configuracin de tiro de aire le confiere un grado de estabilidad al flujo de lquido en
comparacin con el de columna de burbujeo, pudiendo utilizarse mayores caudales de
gas sin producir problemas de operacin como pueden ser el flujo pistn o
nebulizaciones. Como se muestra en la Figura B9, el gas es inyectado nicamente en una
parte del reactor denominado "riser". El gas existente en el reactor y la disminucin de
densidad producen un movimiento ascendente del lquido. El gas se retira del lquido en la
parte superior dejando el lquido ms pesado libre de las burbujas y se recircula a travs
del "downcomer". El lquido circula en los reactores de tiro de aire como resultado de la
diferencia de densidad entre el tubo de flujo ascendente (riser) y el tubo de flujo
descendente (downcomer).


Figura B9. Configuraciones de reactores de tiro de aire.


















fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


En los reactores de bucle interno de la Figura B9a y Figura B9b, el tubo de flujo
ascendente y el tubo de flujo descendente estn separados por un deflector interno o tubo
de tiro. El aire puede inyectarse bien en el tubo de tiro o en el anillo. En los reactores de
tiro de aire de bucle externo de la Figura B9c, se conectan dos tubos verticales separados
mediante pequeas secciones horizontales en la parte superior e inferior. En este
dispositivo, la separacin del gas es ms efectiva que en los reactores de bucle interno ya
que el tubo de flujo ascendente y el tubo de flujo descendente se encuentran separados.
As mismo, en este ltimo se arrastran muy pocas burbujas, lo que provoca que la
diferencia de densidad entre los fluidos de ambos aumente y la circulacin de lquido en el
reactor sea ms rpida. Por consiguiente, la mezcla es generalmente mejor en los
reactores de bucle externo que en los de bucle interno.
Anexo B
Medio recirculado
Difusor
Recipiente
agitado
Aire
Agitador
Bomba
Salida de gas
Lecho relleno de
partculas de
catalizador
LECHOS EMPACADOS: En los reactores de lecho empacado la transferencia de
materia entre el medio lquido y el catalizador slido, se facilita trabajando a caudales
elevados a travs del lecho para lo cual normalmente se recircula el lquido, tal como se
muestra en la Figura B10. Para evitar que el catalizador se arrastre fuera de la columna
se colocan pantallas a la salida del lquido. Las partculas deben ser relativamente
incompresibles y capaces de soportar su propio peso en la columna sin deformarse y
obstruir el flujo del lquido. El medio recirculado debe estar tambin limpio y libre de
desechos para evitar el taponamiento del lecho. La aireacin se realiza generalmente en
un recipiente separado ya que si se inyectara el aire directamente en el lecho, la
coalescencia de las burbujas producira bolsas de gas y canalizaciones o una distribucin
deficiente del flujo. Los lechos empacados no pueden utilizarse en aquellos procesos que
produzcan grandes cantidades de dixido de carbono u otros gases que puedan quedar
atrapados en el relleno.


Figura B10. Reactor de lecho empacado con recirculacin del medio.





















fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


LECHOS FLUIDIZADOS: Cuando se aumenta el caudal en un reactor de lecho fijo, la
prdida de carga del fluido al pasar a travs del lecho se hace igual al peso por unidad de
rea del mismo, y en consecuencia las partculas quedan suspendidas en el fluido sin
contacto, unas con otras, en su mayor parte.


En los reactores de lecho fluidizado (Figura B11a), aprovechando que las partculas all
presentes estn en continuo movimiento y no se producen canalizaciones ni atascos en el
mismo, el aire puede introducirse directamente en la columna.
Anexo B
Figura B11. Reactor de lecho fluidizado y Reactor de lecho de goteo.























fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


LECHO DE GOTEO: En los reactores de lecho de goteo (Figura B11b), el lquido es
rociado en forma de "spray" sobre la parte superior del empaquetamiento y las gotas
descienden a travs del lecho en forma de pequeas corrientes. El aire puede introducirse
por la base, y puesto que la fase lquida no es continua a travs de la columna, el aire o
cualquier gas se mueve con relativa facilidad alrededor del empaquetamiento.


TANQUES AIREADOS Y AGITADOS: En la Figura B12 se muestra un tpico biorreactor
agitado y aireado. La mezcla y dispersin de las burbujas se alcanza mediante agitacin
mecnica, lo cual requiere una relativa gran cantidad de energa por unidad de volumen.
Los deflectores se utilizan para reducir la formacin de vrtices.


La aireacin suministra el oxgeno necesario a los microorganismos, y la agitacin
mantiene condiciones uniformes dentro el fermentador. A escala piloto y fermentadores a
escala productiva, el oxgeno generalmente es suministrado por aire comprimido y
aparatos mecnicos son usados para agitar el caldo de cultivo. Se ha demostrado que el
oxgeno disuelto en un medio de cultivo es afectado por la velocidad de flujo de gas,
velocidad de agitacin y presin parcial del gas en la aireacin [21].



Salida de gas
Recirculacin
de lquido
Entrada
de gas
Recirculacin
de lquido
Distribuidor por
nebulizacin o
spray
Salida de gas
Bomba
Entrada de gas
Bomba
(a) (b)
Anexo B
Entrada del agua
de refrigeracin
Salida de gas
Sellador asptico
Salida del agua
Agitador
Separador de espuma
Serpentn
Deflector
Entrada de aire
Difusor
Incrementando N
ag
Incrementando Q
Figura B12. Fermentador de tanque agitado tpico para cultivos aerobios.



















fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.


En la Figura B13 se exhiben las corrientes de flujo que presentan este tipo de reactores
como funcin de la velocidad del impulsor y el caudal de aire alimentado. En los
fermentadores altos se instalan varios rodetes para mejorar la mezcla. La geometra de
los fermentadores aireados debe disearse de forma que se facilite la eficacia del
intercambio gaseoso. Las caractersticas finales deben tener en cuenta los fenmenos de
transporte que existen en los procesos biolgicos.


Figura B13. Corrientes de flujo en los biorreactores agitados y aireados en funcin de la
velocidad del rodete N
ag
y del caudal del gas Q.















fuente: DORAN, Pauline M. Principios de Ingeniera de los bioprocesos, 1998.
Anexo B
Carcter e intensidad del
flujo de la fase continua
(turbulencia)
Coalescencia y
rompimiento
de la burbuja
Distribucin del
tamao de la burbuja
Potencia por unidad de
volumen (impulsor, rpm, etc.)
Velocidades relativas de
las burbujas
Distribucin del tiempo de
residencia de la burbuja
Flujo de transferencia
instantneo
Flujo de
transferencia medio
rea superficial
de la burbuja total
Retencin de gas de
la fase dispersa
Velocidad de
transferencia
media total
En los tanques aireados y agitados, por lo general, slo del 70 % al 80 % del volumen se
llena con lquido, lo que permite que exista un espacio en la parte superior para retirar las
gotas que arrastra el gas de salida y para dar cabida a cualquier espuma que se forme. Si
la formacin de espuma es un problema, se puede instalar otro rodete denominado
separador de espuma [3].


La construccin ms econmica tiene una relacin de forma, es decir, la relacin entre la
altura y el dimetro, aproximada de 1, ya que presenta la menor superficie y, por tanto,
necesita la mnima cantidad de material para un determinado volumen. Sin embargo, en
reactores aireados y agitados, la relacin de forma aumenta, lo cual proporciona tiempos
de contacto mayores entre las burbujas que ascienden y el lquido, as como una mayor
presin hidrosttica en el fondo del reactor.


La Figura B14 esquematiza la relacin entre la intensidad en la agitacin y la velocidad de
transferencia gaseosa resultante en un biorreactor aireado y agitado.


Figura B14. Esquema de las relaciones hidrodinmicas en un sistema con agitacin.




























fuente: BAILEY, James and OLLIS, David. Biochemical Engineering Fundamentals, 1986.
Anexo C

Anexo C
Correlaciones Empricas para el Clculo de la Retencin del Gas ( ),
el rea Interfacial (a), el Coeficiente de Transferencia en el Lado Lquido (k
L
),
el Coeficiente Volumtrico Global de Transferencia de Masa (k
L
a) y el
Coeficiente de Dispersin Axial (E
L
)


CLCULO DE LA RETENCIN DEL GAS ( ):


Deckwer [14] acopia las ecuaciones propuestas por los siguientes autores para columnas
de burbujeo:


Hughmark
17
:

(C.1)

s
en [m/s],
L
en [g/cm
3
], en [mN/m]
platos perforados, D
T
10 cm

s
= 0,4 45 cm/s


El aire siempre es usado como gas, lquidos: agua, soluciones de Na
2
CO
3
, aceite ligero,
glicerol, ZnCl
2
y solucin de Na
2
SO
3
.

L
= 0,78 1,7 g/cm
3
,
L
= 0,9 152 mPa. s, = 25 76 mN/m


Hikita y Kikukawa
18
:

(C.2)


lnea de alimentacin: d
o
= 0,9 3,62 cm, D
T
= 10 19 cm,
s
= 7 33,8 cm/s

Aire agua, metanol y soluciones de azcar en agua.

L
= 0,91 1,24 g/cm
3
,
L
= 0,7 13,8 mPa. s, = 37,5 74,8 mN/m

17
HUGHMARK, G.A. Ind. Eng. Chem. Proc. Des. Dev. Vol. 6, P 218, 1967.
18
HIKITA, H. and KIKUKAWA, H. Univ. Osaka Prefect., Ser. A. Vol. 22, P 151, 1973.
3 1
L S )] 72 / ( [ ) / 35 , 0 ( 2
1
+

05 , 0
L
3 2 47 , 0
s
) / 1 ( ) / 72 ( 505 , 0
Anexo C
Gestrich y Rhse
19
:

(C.3)


Fr =
2
s
/(g.d
B
), =
L

3
/(g.
L
), d
B
= 0,3 cm

Alimentacin del gas en platos perforados (d
o
= 0,3 y 5 mm)

s
= 1 8 cm/s, H
L
/D
T
= 0,26 20

El aire usado siempre como gas, agua, metanol, etanol, iso y n propanol, iso y
n butanol, dicloroetano, metil etil cetona, etil acetato, etilenglicol, benceno.

= 8 * 10
4
5 * 10
10


Kumar et. al.
20
:

(C.4)


platos perforados: d
o
= 0,087 0,309 cm, D
T
= 5 10 cm,
s
= 0,2 14 cm/s

Aire agua, aire queroseno, aire 40 % glicerol, aire solucin 2 M NaOH.

L
= 0,78 1,11 g/cm
3
,
L
= 0,88 11,5 mPa. s, = 31,2 74,5 mN/m


Bach y Pilhofer
21
:


(C.5)


platos perforados: d
o
= 0,05 cm, D
T
= 10 cm,
s
= 1 20 cm/s

El aire siempre es usado como gas, agua, butanodiol 1,3, etilenglicol, n octanol,
tetrabromometano, metanol, dicloroetano, ciclohexano, ciclohexanol, etanol, propanol.

L
= 0,8 2,98 g/cm
3
,
L
= 0,7 * 10
2
124 * 10
2
cm
2
/s, = 21,7 72 mN/m

19
GESTRICH, W. and RHSE, W. Chem. Ing. Tech. Vol. 47, P 8, 1975.
20
KUMAR, A., DEGALEESAN, T. E., LADDHA, G.S. and HOELSCHER, H. E. Can. J. Cehm. Eng. Vol. 54, P 503, 1976.
21
BACH, H. F. and PILHOFER, Th. Ger. Chem. Eng. Vol. 1, P 270, 1978.
05 , 0 Fr ) D / d ( ) D / H ( 89 , 0
047 , 0 ) log 6 , 2 ( 025 , 0 3 , 0
T B
) log 7 , 15 ( 035 , 0
T L

+ +
3
s
2
s s
0975 , 0 485 , 0 728 , 0 +
23 , 0
L L
3
s
/ g u
115 , 0
1

,
_

Anexo C
Hikita et. al.
22
:


(C.6)



= 1 para no electrolitos
= 10
0,04141
para fuerza inica < 1 g-ion/L
= 1,1 para > 1 g-ion/L


alimentacin del gas d
o
= 1,1 cm, D
T
= 10 cm,
s
= 4,2 38 cm/s

Aire agua, solucin acuosa de azcar (30 y 50 % peso), metanol, n butanol, anilina,
53 % peso metanol (en agua, 7 % peso iso butanol), H
2
agua, CO
2
agua,
CH
4
agua, C
3
H
8
agua, aire y soluciones de sal.


Para soluciones no electrolticas:

L
= 0,79 1,24 g/cm
3
,
G
= 0,0837 * 10
3
1,84 * 10
3
g/cm
3
,
L
= 0,66 17,8 mPa . s,

G
= 0,8 * 10
2
1,81 * 10
2
mPa . s, = 30 76 mN/m

Para soluciones electrolticas:

L
= 1,01 1,17 g/cm
3
,
L
= 0,9 1,87 mPa . s, = 71,9 79,6 mN/m


De acuerdo al tipo de columna, Bailey [3] recopila las siguientes ecuaciones:


Chakravarty
23
: Columna de burbujeo

(C.7)



Donde Bo = nmero de Bond = g D
2
T

L
/
Ga = nmero de Galileo = g D
3
T

L
/
2
L

Fr = nmero de Froude =
T s
D g /


22
HIKITA, H., TANIGAWA, Asai, SEGAWA, K. and KITAO, M. Chem. Eng. J. Vol. 20, P 59, 1980.
23
CHAKRAVARTY, M. et. al. Biotech. Bioeng. Vol. 4, P 363, 1973. Ntese que esta expresin es igual a la ecuacin
(1.3.24).
107 , 0
L
G
062 , 0
L
G
131 , 0
3
L
4
L
578 , 0
L s
u g
672 , 0

,
_

,
_

,
_

,
_

( )
Fr Ga Bo 2 , 0
1
12
1
8
1
4

Anexo C
Chakravarty
24
: Reactor de tiro a escala laboratorio


En el interior del tubo:

(C.8)



En el cilindro anular:

(C.9)



Donde: = viscosidad en [cP]
= tensin superficial del gas en [dina/cm]

s
= velocidad superficial del gas en [cm/s]
A
in
= es el rea de seccin transversal en el interior en [cm
2
]
A
an
= es el rea de seccin transversal en el exterior en [cm
2
]


Sobre el bafle:
(C.10)


En la columna total:

(C.11)


Calderbank
25
: Tanques agitados


H
T
~ D
T
para Re
0
i
,7
(N
ag
D
i
/)
0,3
< 2 * 10
4




(C.12)



Donde: a
o
, a
1
= rea interfacial por unidad de volumen del caldo
Re
i
= nmero de Reynolds del impulsor = N
ag
D
2
i
/
L


24
CHAKRAVARTY, M. et. al. Biotech. Bioeng. Vol. 4, P 373, 1973.
25
CALDERBANK, P.H. Trans. Inst. Chem. Eng., Vol. 36, P 443, 1958.
( )
88 , 0
s
4 75 , 2
L G 1
10
1 , 74
3 , 73
61 , 1
1
]
1

+

38 , 1
G
08 , 1
an
in 45 , 0
L
2
2
A
A
3 , 79
2 , 74
10 * 23 , 1
1
]
1

1
]
1

88 , 0
s
3
3
10 * 5 , 7

88 , 0
s
03 , 0
5 , 0
B
s
6 , 0
2 , 0
L
4 , 0
o o
B
s
U
P
44 , 1 a y a 015 , 0
U

,
_

Anexo C
para Re
0
i
,7
(N
ag
D
i
/)
0,3
> 2 * 10
4




(C.13)

y:

(C.14)



Richards
26
: Tanques agitados



(C.15)


(P/V) = potencia de entrada por volumen de lquido en [hp/m
3
]

s
= velocidad superficial del gas en [m/h]


Blanch [7] cita la siguiente correlacin hallada por Calderbank
27
, para tanques agitados:



(C.16)



Donde:


s
= velocidad superficial del gas en [p/s]
P/V = potencia de gas por unidad de volumen en [hp/p
3
]
U
B
= velocidad terminal de ascensin de la burbuja en [p/s]
= tensin superificial en [dinas/cm]

L
= densidad del lquido en [g/cm
3
]





26
RICHARDS, J. W. Prog. Ind. Microbiol, Vol. 3, P 143, 1961.
27
CALDERBAN, P.H. Trans. Inst. Chem. Engnrs., Vol. 36, P 443, 1958.
1
B
s
o
1
a 015 , 0
U a
a
+

3 , 0
s
i ag 7 , 0
i
o
1
D N
Re 5 10 * 95 , 1
a
a 3 , 2
log
,
_

37 , 2 63 , 7
V
P
2 1
S
4 , 0
+
,
_

( )
2 / 1
B
s
6 , 0
2 , 0
L
4 , 0
2 / 1
B
s
U
V / P
0216 , 0
U

,
_

,
_

,
_

Anexo C
CLCULO DEL REA INTERFACIAL (a):


Deckwer [14] en un anlisis de mtodos qumicos para la determinacin del rea
interfacial, cita los siguientes autores:


Van Dierendonck et. al.:


(C.17)


Donde = 2,5 con excepcin de soluciones electrolticas donde = 1,45


Akita y Yoshida:

(C.18)


Para
s
< _ 5 cm/s en el rango de 7,7 <_ D
T
< _ 15 cm


Tomida et. al.:
(C.19)

Para lquidos pseudoplsticos y
s
> 2 cm/s


Blanch [7] acopia las correlaciones desarrolladas por Calderbank y Moo Young
28
, quienes
consideraron dos tipos de propiedades para las soluciones; coalescentes y no
coalescentes. Para dispersiones aire agua no coalescentes se propone:


(C.20)


Para dispersiones no coalescentes, tales como los caldos de fermentacin que contienen
electrolitos:


(C.21)


28
CALDERBANK, P.H. and MOO YOUNG, M. Chem. Eng. Sci., P 23, 1961.

,
_

,
_

,
_

8 1
4
L
3
L
4 1
s L
2 1
L
g g
6
a

,
_

,
_

,
_

06 , 0
T
2
s
12 , 0
2
L
2
L
3
T
5 , 0
L
2
T
T
D g
D g D g
D
23 , 0
a
51 , 0
L
s
2
) / ( 10 * 65 , 4 a

4 27 , 0
S
17 , 0
B
5 , 0
s
4 , 0
10 * 9
V
P
0,27 d cual el Para
V
P
55 , 0 a

+
,
_

,
_

17 , 0
s
17 , 0
B
3 , 0
s
7 , 0
V
P
0,89 d tiene se que el Para
V
P
15 , 0 a
,
_

,
_

Anexo C
CLCULO DEL COEFICIENTE DE TRANSFERENCIA EN EL LADO LQUIDO (k
L
):


Deckwer [14], entre otras, presenta las siguientes ecuaciones:


Calderbank y Moo-Young:


para d
B
< _ 1 mm


(C.22)



Franz et. al.:

(C.23)

para fluidos pseudplsticos


Oels et. al.:

(C.24)


basado en la medida de nutrientes de fermentacin sintticos.


Por otro lado Bailey [3], en la recoleccin de informacin para el clculo del nmero de
Sherwood, directamente asociado con el coeficiente de transferencia en el lado lquido k
L
,
presenta:


Para Re del orden de 10
1
10
2
, aplica:


(C.25)


Para pequeos nmeros de Reynolds para la cual se aplica sta prediccin, la velocidad
terminal u
t
de una esfera est dada por:



(C.26)
2 1
Pe 01 , 1 Sh
L
2
B
t
g d
u

3 1
2
L
L G L
3 2
2
O L
L
L
g ) (
31 , 0 k

,
_

,
_

D
32 , 0
L
08 , 0
s
3
L
10 * 5 , 54 k


4 / 3 2 / 1
B
2
O
L
Re Sc
d
15 , 0 k
D

Anexo C
Para nmeros de Reynolds mayores, la burbuja simple resulta en una esfera no circulante
en flujo laminar:

(C.27)


Para d
B
< 2,5 mm


(C.28)


Para d
B
> 2,5 mm
(C.29)


Para clulas individuales, una mayor aproximacin al nmero de Sherwood es:


(C.30)


Blanch [7] expone la siguiente correlacin para el caso en el que la fase lquida exhiba un
comportamiento pseudoplstico, donde el nmero de Sherwood puede ser determinado
para movilidad interfacial como:


(C.31)



CLCULO DEL COEFICIENTE VOLUMTRICO GLOBAL DE TRANSFERENCIA DE
MASA (k
L
a):


Bailey [3] cita los siguientes autores para el clculo del coeficiente volumtrico global de
transferencia de masa k
L
a:


Van't Riet : Tanques agitados


con coalescencia:

(C.32)


V
L
< _ 2600 L; 500 < P/V < 10000 W/m
2

3 1 2 1
Sc Re 6 , 0 0 , 2 Sh +
3 1 3 1 3 1
2
O
B L
Ra 31 , 0 Sc Gr 31 , 0
d k
Sh
D
2 1 3 1
Sc Gr 42 , 0 Sh
3 1
Ra 31 , 0 0 , 2 Sh +
5 , 0
s
4 , 0
2
L
V
P
10 * 6 , 2 a k
,
_

( ) [ ]
2 / 1 2 / 1
Pe 1 n 62 , 1 1 65 , 0 Sh
Anexo C
sin coalescencia:

(C.33)


2 < V
L
< 4400 L; 500 < P/V < 10000 W/m
2



Columnas de burbujeo

(C.34)


Bello et. al: Reactores de tiro de aire


(C.35)


A
d
/A
r
= relacin entre las reas del tubo de descenso y el tubo de ascenso


Wang y Fan: Columnas de burbujeo


(C.36)


Donde:
s
= velocidad superficial de la fase gaseosa en [cm/s]

L
= velocidad superficial de la fase lquida en [cm/s]


Blanch [7] cita la correlacin propuesta por Yagi
29
para el coeficiente de transferencia de
materia en sistemas viscosos, en los cuales se pueden distinguir dos tipos de
comportamiento del caldo:


a. Cultivos donde la viscosidad se debe a la estructura micelial
b. En sistemas tales como fermentaciones de polisacridos donde la viscosidad se debe
a los polmeros emitidos por el organismo.



(C.37)

29
YAGI, H. and YOSHIDA, F. Ind. Eng. chem.. Proc. Des. Dev., Vol. 14, P 488, 1975.
7 , 0
s L
32 , 0 a k
) A / A 1 (
) V / P ( 0005 , 0
a k
r d
8 , 0
L
+

2 , 0
s
7 , 0
3
L
V
P
10 * 0 , 2 a k
,
_

,
_

1 , 47 99 , 1
12 , 0 a k
s
s 624 , 0
L L
32 , 0
s
ag i
19 , 0
2
ag i
5 , 1
app
L ag
2
i
6 , 0
s app
5 , 0
O L
app
O
2
i L
N D
g
N D N D
06 , 0
D a k
2 2

,
_

,
_

,
_

,
_

,
_

D D
Anexo C
Donde la viscosidad aparente
app
se obtiene de la ley de potencia como:


(C.38)



CLCULO DEL COEFICIENTE DE DISPERSIN AXIAL (E
L
):


Para el clculo de coeficientes de dispersin axial, Deckwer [14] recopila las siguientes
ecuaciones:


(C.39)

Donde:
E
L
= coeficiente de dispersin axial en [cm
2
/s]
D
T
= dimetro del tanque en [cm],

s
= velocidad del gas en [cm/s] y
d
o
= dimetro del orificio en [cm].


La ecuacin se emplea para
s
< 10 cm/s, el segundo trmino puede ignorarse para altos
valores de flujo de gas y dimetros de columna.


Ohki y Inoue
30
:

(C.40)

Towell y Ackermann
31
:
(C.41)


Propuesta para columnas de gran dimetro (D
T
= 40,6 y 106,7 cm)


Badura et. al.
32
:
(C.42)



30
OHKI, Y. and INOUE, H. Chem. Eng. Sci. Vol. 25, P 1, 1970.
31
TOWELL G. D. and ACKERMANN, G. H. Proc. 2
nd
Int. symp. chem.. React. Engng., Amsterdam, 1972.
32
BADURA, et. al. Chem. Ing. Tech. Vol. 46, P, 399, 1974.
o
2 , 1
s
2
T L
d 170 D 3 , 0 E +
2
T
L
) 1 (
D 14
E

5 , 0
s
5 , 1
T
L
D 23 , 1 E
3 , 0
s
4 , 1
T
L
D 7 , 2 E
n
1 n
ag app
n 4
1 n 3
) N 11 ( K

,
_

+


Anexo C
Hikita and Kikukawa
33
:

(C.43)

E
L
en [m
2
/s], D
T
es el dimetro del tanque en [m],
s
es la velocidad del gas en [m/s] y
L

en mPa.s


Lehrer [29], recoge las siguientes expresiones:


(C.44)



(C.45)

y propone:


(C.46)



33
HIKITA, H. and KIKUKAWA, H. Chem. Eng. J. Vol. 8, P 191, 1974
12 , 0
L
25 , 1
T
77 , 0
s L
) / 1 ( D 69 , 0 15 , 0 E +
2 / 1
s
4 , 0 3 , 0
ag
T
2 , 0
6 , 0 2 , 0
ag
2 , 0
L
) Q (
Q N
D g 168 , 0
tanh Q N g 3134 , 1 E

,
_

3 / 1
s T T L
)) 235 , 0 ( H ( D 9 , 0 E
3 , 0
s
4 , 1
T
L
D 678 , 0 E
Anexo D
Anexo D
Solucin Analtica del Balance de Materia para el Burbujeo en Agua





Sistema de ecuaciones diferenciales no homogneo lineal con coeficientes constantes:


(D.1)



(D.2)

Derivando (D.1) con respecto al tiempo:

(D.3)

Reemplazando con la ecuacin (D.2):


(D.4)


Agrupando trminos obtenemos la ecuacin diferencial ordinaria lineal no homognea con
coeficientes constantes de segundo orden:

(D.5)

El discriminante de la ecuacin (D.5) es:


(D.6)

Ecuacin auxiliar de la homognea asociada:

(D.7)
b L
o o
V NV
y Q
A
b
L
b L
1
HNV
aRT k
V NV
Q
B +
LM b
L
P NV
aRT k
D
LM
L
P
H
a k
E
a k F
L

) t ( c F ) t ( y E c
.

. .
c D y B y +
..
) t ( c D ) t ( y B A y
.
+
1
]
1

,
_

+ +
,
_

By A y
D
F
y E D y B y
. . ..
( ) ( ) AF y ED BF y ) F B ( y
.
+ + +
..
( ) ED 4 F B
2
+
0 ) ED BF ( ) F B (
2
+ + +
Anexo D
Resolviendo para una ecuacin de segundo orden:

(D.8)

Haciendo
T = (B + F)

As se tendrn los valores propios:


(D.9)


Solucin complementaria:

(D.10)

Solucin particular para el Mtodo de Variacin de los Parmetros (MVP):

k ) t ( y
p
sea solucin

Por lo tanto: 0 ) t ( y 0 ) t ( y
p p
.

..



Hallo la constante k :


Solucin particular constante:



Como la solucin general es:
y(t) = yp(t) + yc(t)







(D.11)
2
) F B ( t +

2
T
y
2
T
2 1


+

t 2 t 1
c
e e ) t ( y

+
) ED BF (
AF
e e ) t ( y
t 2 t 1

+ +

) ED BF (
AF
k

AF k ) ED BF (
k e e ) t ( y
t 2 t 1
+ +

Anexo D
Derivando la anterior expresin:

(D.12)

Condiciones iniciales (Estado inicial de las variables) para las ecuaciones (D.11) y (D.12):

(D.13)


(D.14)

Reorganizando se tiene que:





Al reemplazar los trminos de (D.9):





Despejando:


(D.15)


Donde de la ecuacin (D.1) para t = 0 se tiene:




Y de la ecuacin (D.13):

(D.16)

Retomando la ecuacin (D.1) y reemplazando con las ecuaciones (D.11) y (D.12):





t
2
2
t
1
1
e e ) t ( y
.

+
k ) 0 ( y + +
2 1
) 0 ( y
.
+
( ) ) 0 ( y k ) 0 ( y
.
2 2 1 2

) 0 ( y k ) 0 ( y
2
2
.
2 2

,
_

+

) 0 ( y ) 0 ( y k
2 2
.
) 0 ( c D ) 0 ( y B A ) 0 ( y
.
+
k ) 0 ( y
D
) t ( y B A ) t ( y
) t ( c
.
+

Anexo D





Agrupando trminos semejantes:


(D.17)



(D.18)

S:

(D.19)


La solucin nica ser:

(D.20)



(D.21)



( ) ( )
D
k e e B A e e
) t ( c
t
2
t
1
t
2
2
t
1
1
+ + + +

( ) ( )
D
Bk A
e
D
B
e
D
B
) t ( c
t
2 2 t
1
1
+
+
+
+
+

k e e ) t ( y
t
2
t
1
+ +

( )
D
B
QQ
1
+

( )
D
B
RR
2
+

D
BK A
SS
+

SS exp RR exp QQ ) t ( c
t 2 t 1
+ +

k exp exp ) t ( y
t 2 t 1
+ +

Anexo E

Anexo E
Lista de Smbolos

Smbolo Definicin Unidades SI
a
rea interfacial por unidad de volumen del
reactor
[ m
2
/ m
3
]
a

rea superficial de burbuja por volumen de
burbuja = a /(V
b
.N)
[ m
2
/ m
3
]
a.V
L
rea total para la transferencia de materia [ m
2
]
A rea de la seccin transversal del tanque [ m
2
]
A
i
ancho de la pala del rodete [ m

]
Bo nmero adimensional de Bond
c
i
concentracin molar de la especie inica [ mol / L ]
C
A
solubilidad de A en la fase lquida [ mol A / m
3
]
C
L
*
concentracin de la fase lquida cuando est en
equilibrio con el seno de la fase gaseosa
[ mol O
2
/ m
3
]
C
O
2
,in

concentracin de oxgeno inicial en la fase
lquida
[ mol O
2
/ m
3
]
C
O
2

concentracin de oxgeno en la fase lquida [ mol O
2
/ m
3
]
d dimetro interior en el modelo de circulacin [ m ]
d
B
dimetro de la burbuja [ m ]
d
Be
dimetro de la burbuja en el equilibrio [ m ]
d
Bo
dimetro de la burbuja en el orificio [ m ]
d
e
dimetro de burbuja equivalente mximo [ m ]
d
o
dimetro del orificio [ m ]
d
s
dimetro promedio de la burbuja (dimetro
Sauter)
[ m ]
D
i
dimetro del impulsor [ m ]
D
O
2

difusividad del oxgeno [ m
2
/ s ]
Anexo E
D
T
dimetro del tanque [ m ]
E
L
coeficiente de dispersin axial [ m
2
/ s ]
E
O
nmero adimensional de Eotvos
f factor de friccin
f
T
frecuencia de formacin de la burbuja [ s
-1
]
F fuerza de viscosidad [ N ]
F flujo de alimentacin al medio [ m
3
/ s ]
Fr

nmero adimensional de Froude
Fr
o
nmero adimensional de Froude en el orificio
g aceleracin gravitacional [ m / s
2
]
Ga nmero adimensional de Galileo
H

constante de la ley de Henry [ atm . m
3
/ mol aire ]
H
i
constante inica especifica de sales [ L / mol ]
H

altura de la regin [ m ]
H
L
altura del nivel del lquido en el tanque [ m ]
H
T
altura del tanque [ m ]
I
i
fuerza inica atribuible a un solo in
J
A
flujo molar de la especie A [ mol A / (m
2
.s) ]
k
G
coeficiente de transferencia de masa en la fase
gaseosa
[ mol aire / (atm . m
3
.s) ]
k
i

constante de proporcionalidad en funcin del
tipo de impulsor

k
L
coeficiente de transferencia de masa en la
pelcula lquida
[ m / s ]
k
L
a

coeficiente global de transferencia de masa [ s
-1
]
K ndice de consistencia o rigidez [ N . s
n
/ m
2
]
K
G
coeficiente global de transferencia de masa en
la pelcula gaseosa = k
L
/H
[ mol aire / (atm . m
2
.s) ]
Anexo E
K
i

constante de Sechenov para compuestos
orgnicos
[ L / g ]
K
P

constante de velocidad para formacin de
producto
[ g
producto
/ (g
clulas
. h) ]
K
s
constante del sustrato [ kg
sustrato
/ m
3
]
K
S
constante de Sechenov para sales [ L / mol ]
m
s
coeficiente de mantenimiento del sustrato [ kg / (kg .s) ]
M coeficiente de distribucin
M
B
peso molecular del solvente B [ g / mol ]
M
O
nmero adimensional de Morton
n ndice de la ley de potencia
N nmero de burbujas por volumen de lquido [ m
-3
]
N
ag
velocidad del impulsor [ s
-1
]
N
O
2

flujo molar de oxgeno [ mol de O
2
/ (m
2
. s) ]
N
o
nmero de orificios
N
p
nmero de potencia del impulsor
P concentracin de producto [ kg
producto
/ m
3
]
P
A
presin parcial de A en la fase gaseosa [ atm ]
Pe nmero adimensional de Pclet
P
g

consumo de potencia en tanques aireados y
agitados
[ W ]
P
I
presin total referida al subndice [ atm ]
P
LM

diferencia de presin media logartmica entre la
cima y el fondo del tanque
[ atm ]
P
o

consumo de potencia sin aireacin del agitador
mecnico
[ W ]
P
O
2

presin parcial del oxgeno en la fase gaseosa [ atm ]
P
w
potencia de entrada de aire [ W ]
Anexo E
(P/ V)
potencia de entrada de aire por unidad de
volumen de lquido
[ W / m
3
]
Q, Q
o

flujo volumtrico molar del gas alimentado al
tanque
[ m
3
/ s ]
Q
1

flujo volumtrico molar del gas referido a la
salida del tanque
[ m
3
/ s ]
Q
M
velocidad volumtrica media del gas [ m
3
/ s ]
Q
T
flujo de transicin de la burbuja [ m
3
/ s ]
r
relacin entre la longitud (H
T
) y el dimetro (D
T
)
de la columna de burbujeo

r
A
radio de la molcula de soluto A [ cm ]
r
O
2

velocidad volumtrica de consumo de oxgeno
= X/Y
O
2

[ mol O
2
/ ( m
3
.

s ) ]
r
P
velocidad de formacin de producto [ g
producto
/ h ]
R
constante universal de los gases cuyo valor es
de 8,2056 * 10
-5

[ atm. m
3
/ (mol aire . K) ]
Re
B

nmero adimensional de Reynolds para la
burbuja

Re
i
nmero adimensional de Reynolds del impulsor
Re
o
nmero adimensional de Reynolds en el orificio
Re
oL
nmero modificado de Reynolds en el orificio
S
a
concentracin de sustrato alimentado [ kg
sustrato
/ m
3
]
S
o
concentracin inicial de sustrato [ kg
sustrato
/ m
3
]
S concentracin de sustrato [ kg
sustrato
/ m
3
]
Sc nmero adimensional de Schmidt
Sh nmero adimensional de Sherwood
t tiempo [ s ]
t
exp

tiempo de la fase exponencial o fase de
crecimiento
[ s ]
t
lag
tiempo de la fase de adaptacin o latencia [ s ]
t
G
tiempo de residencia de las burbujas [ s ]
Anexo E
T temperatura absoluta del proceso [ K ]

L
velocidad promedio del lquido [ m / s ]
U
B
velocidad de ascensin de la burbuja [ m / s ]
V
A

velocidad promedio de lquido en el rea anular
para el modelo de circulacin
[ m / s ]
V
A

volumen molar del soluto A en el punto de
ebullicin a presin normal
[ cm
3
/ mol ]
V
A,crt
volumen molar crtico del soluto A [ cm
3
/ mol ]
V
b
volumen de burbuja [ m
3
]
V
G
volumen total del gas = NV
L
V
b
= Q.H
T
/U
B
[ m
3
]
V

velocidad promedio de lquido en el rea interior
para el modelo de circulacin
[ m / s ]
V
L
volumen de lquido [ m
3
]
x parmetro de asociacin del solvente
x
i
nmero de iones de tipo i
X
o

concentracin de biomasa al terminar la fase de
latencia
[ kg
biomasa
/ m
3
]
X concentracin de biomasa [ kg
biomasa
/ m
3
]
y
o

fraccin molar de oxgeno inicial en la fase
gaseosa
[ mol O
2
/ mol aire ]
y fraccin molar de oxgeno en la fase gaseosa [ mol O
2
/ mol aire ]

fraccin molar promedio de oxgeno en la fase
gaseosa
[ mol O
2
/ mol aire ]
Y
O
2

rendimiento de biomasa por oxgeno consumido [ kg
biomasa
/ mol O
2
]
Y
P/S
rendimiento de sustrato en producto [ kg
producto
/ kg
sustrato
]
Y
P/X
rendimiento de biomasa en producto [ kg
producto
/ kg
biomasa
]
Y
X/S
rendimiento de biomasa por sustrato [ kg
biomasa
/ kg
sustrato
]
z parmetro de posicin axial en la columna [ m ]
z
i
carga de la isima especie de sal
Anexo E
Smbolos griegos:


coeficiente de Bunsen para el gas en la
solucin de electrolitos

o
coeficiente de Bunsen en agua pura
retencin del gas
parmetro cintico
constante de velocidad mxima de reaccin [ s
-1
]

i
viscosidad referida al subndice [ N . s / m
2
]
tasa de crecimiento especfico [ s
-1
]

max
tasa mxima de crecimiento especfico [ s
-1
]

s
velocidad superficial del gas [ m / s ]

i
densidad referida al subndice [ kg / m
3
]
tensin superficial [ N / m ]

yx
esfuerzo cortante [ N / m
2
]

Subndices:

1 fondo del tanque
2 cima del tanque
app valor aparente de la fase lquida
A regin anular en el modelo de circulacin
G fase gaseosa
regin interior en el modelo de circulacin
L fase lquida
o valor inicial