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MICHELE FABRICIA TOLOTTI

PROTETORES SOLARES BASE DE FILTROS INORGNICOS: DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAO

GUARAPUAVA 2012

MICHELE FABRICIA TOLOTTI

PROTETORES SOLARES BASE DE FILTROS INORGNICOS: DESENVOLVIMENTO E CARACTERIZAO

Dissertao de Mestrado apresentada ao Programa de PsGraduao em Cincias Farmacuticas, da Universidade Estadual do Centro Oeste em Associao ampla com a Universidade Estadual de Ponta Grossa para obteno do Ttulo de Mestre em Cincias Farmacuticas

rea de concentrao: Desenvolvimento e Controle de Frmacos, Medicamentos e Correlatos.

Orientador: Prof. Dr. Daniel de Paula Co-Orientador: Prof.Dr. Pedro Pablo Gonzlez Borrero

GUARAPAUAVA 2012

FICHA CATALOGRFICA

FOLHA DE APROVAO

DEDICATRIA

Aos meus pais Alcides e Ivanir, pelo amor, carinho, dedicao, incentivo e apoio em todas as minhas escolhas e decises, por me permitirem chegar at onde cheguei e ser o que sou.

Me, muito obrigada pela incansvel batalha de AMAR, o que foi fundamental nesta jornada para realizao de mais este sonho.

A vocs, meus eternos professores, agradeo pelos ensinamentos desta grandiosa arte que viver.

Com todo meu reconhecimento e gratido a vitria desta dedico com todo meu amor, unicamente, a vocs meus amores eternos.

AGRADECIMENTOS

Agradeo sempre a DEUS, pois foi quem sempre me confortou e amparou durante todos os momentos difceis no decorrer do

desenvolvimento deste trabalho e dos demais momentos da minha vida, Nele, encontrei coragem e determinao para seguir adiante em busca dos meus objetivos.

Ao Professor Dr. Daniel de Paula, por ter idealizado e me orientado nesse estudo, possibilitando sua realizao, pela confiana, eficincia, valiosas ajudas dadas no decorrer do meu aprendizado, as quais me fizeram crescer profissionalmente meu carinho e reconhecimento.

Ao Professor Pedro Pablo pelos ensinamentos, ajuda inestimvel durante vrios passos da elaborao deste trabalho.

Aos

professores

da

Ps-Graduao

em

Cincias

Farmacuticas,

Emerson, Najeh, Rubiana, Marco Aurlio e Luiz Fernando pelos ensinamentos.

acadmica de Farmcia Dayane Cristina de Moraes, meu carinho pelo incentivo, amizade e parceria constantes. Agradeo todo o apoio recebido.

Ao acadmico de Fsica Edson Rafael Cardozo, pela importante ajuda nas anlises de fotoacstica e elaborao dos grficos, meu muito obrigada.

Aos professores membros da banca de qualificao Elisa e Ricardo, pelas importantes sugestes e essencial contribuio ao trabalho final.

Aos professores membros da banca de defesa Marcos e Weber pelo gentil aceite e valiosas consideraes.

s minhas colegas da Ps-Graduao Luciana farmacutica, Luciana veterinria, Lgia, Caroline, Thuane, e Sheila pela companhia nas disciplinas e carinho nos momentos de tenso.

Em especial, ao Joo Paulo, pela compreenso nos momentos de ausncia, pacincia nos momentos de crise, pelo apoio, carinho, confiana e pelos momentos felizes que temos compartilhado.

Quero agradecer de peito aberto e alma explosiva minha Me, que foi presena constante em cada fase deste trabalho, que esteve ao meu lado nas horas que chorei e nas horas que sorri nas horas que me lamentei e nas horas em que de uma forma ou de outra demonstrei total alegria. Quero lhe agradecer por todos seus sorrisos dirios, pelos meus dias de mau humor em que voc me suportou sem mgoas e ainda me deu colo, pelas doces palavras nos momentos amargos, por todas suas oraes e por milhares de outras coisas que ns duas sabemos, e dizer Me, que ACABOU!!!!

Enfim, a todos aqueles que de uma maneira ou de outra contriburam para que este percurso pudesse ser concludo. Muito obrigada!

O mais importante da vida no a situao em que estamos, mas a direo para a qual nos movemos. Oliver W. Holmes

RESUMO Os filtros solares inorgnicos, representados principalmente pelo dixido de titnio (TiO 2) e xido de zinco (ZnO), classificados como partculas inertes, so apontados como a melhor maneira de proteger a pele contra os efeito nocivos da radiao ultravioleta (UV). Porm, estudos recentes sugerem que estes apresentam problemas de estabilidade, podendo levar a um comprometimento da segurana e eficcia dos produtos fotoprotetores. Nesse sentido, a hidroxiapatita (HAP) tem sido investigada como alternativa formulao de fotoprotetores, agindo como filtro inorgnico. Visualizando a necessidade do desenvolvimento de protetores solares com baixo risco biolgico e alto fator de proteo solar (FPS) base de filtros inorgnicos, o presente trabalho visou investigar mecanismos de otimizao dos parmetros de formulao de fotoprotetor base de filtros inorgnicos. Dessa forma, avaliou-se a influncia do revestimento e tamanho de partcula na atividade fotocataltica do ZnO, TiO2 e HAP, frente s radiaes UVA, UVB e UVA/UVB por meio de anlise da taxa de degradao do substrato orgnico azul de metileno.Empregando-se microscopia ptica, foram investigadas possveis incompatibilidades entre os filtros inorgnicos e diferentes alfa hidroxicidos comumente empregados em produtos contendo FPS. Foram desenvolvidos fotoprotetores base de ZnO micronizado; TiO2 alumina; ZnO micronizado+TiO2 alumina e HAP, contendo 15% de filtro inorgnico. Os cremes base foram preparados na forma de emulso leo em gua (O/A) variando a concentrao e natureza dos agentes emolientes, coemulsionante no-inico e formador de filme. A influncia do mtodo de preparo nas propriedades fsico-qumicas dos fotoprotetores foi avaliada utilizando-se dois processos distintos: incorporao dos filtros solares ao veculo por meio de uma pr-disperso e pelo mtodo convencional. Com o intuito de avaliar o comportamento de componentes que podem interferir em aspectos da formulao, foram desenvolvidas pr-disperses acrescidas de manteiga de karit. As formulaes desenvolvidas foram caracterizadas fsico-quimicamente e submetidas a ensaios de estabilidade. O potencial zeta e o tamanho mdio das partculas foram determinados utilizando um Zetasizer 3000 HSa. Em um espectrofotmetro fotoacstico, foram realizadas anlises para avaliar a capacidade de absoro de luz UV dos protetores solares desenvolvidos. O estudo de fotocatlise sugeriu que o revestimento de filtros inorgnicos representa a melhor alternativa para inibir a atividade fotocataltica destas partculas. Os cidos gliclico e ltico apresentaram incompatibilidades apenas com o ZnO. Na anlise fotoacstica, verificou-se que os produtos apresentaram efetiva absoro UV, conforme caractersticas dos filtros inorgnicos. As anlises das caracterizaes fsicoqumicas e estabilidade propem que o mtodo de formulao a partir de uma pr-disperso o mais adequado para obteno de um produto estvel e seguro. As formulaes base de HAP, porm, representaram uma exceo, pois estas apresentaram-se estveis independente do mtodo de incorporao ao creme base. Os resultados apontam que, para a obteno de um protetor solar seguro e eficaz, de fundamental importncia atentarmos para os critrios de formulao, como a seleo adequada dos excipientes e tcnica de preparo. Palavras chave: dixido de titnio, xido de zinco, hidroxiapatita, protetor solar, estratgias de formulao.

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ABSTRACT The inorganic sunscreens represented mainly by titanium dioxide (TiO2) and Zinc Oxide (ZnO), were classified as inert particles, therefore, they are pointed out as the best way to protect the skin against the harmful effects of ultraviolet radiation (UV). However, recent studies suggest that these particles have several stability problems that may lead to a compromise of safety and efficacy of photoprotective products. In this sense, the hydroxyapatite (HAP) has been investigated as an alternative to sunscreen formulation, playing the role of inorganic filter. Viewing the need for the development of sunscreens with low biological risk and high sun protection factor (SPF) based on inorganic filters, the present work aimed to investigate optimization mechanisms of the sunscreen based inorganic filters formulation. Thus, were evaluated the influence of coating and particle size on the photocatalytic activity of ZnO, TiO2 and HAP in the presence to UVA, UVB and UVA/UVB radiation by analysis of the rate of degradation of the organic substrate methylene blue. Employing optical microscopy, were investigated possible incompatibilities between the inorganic filters and different alpha hydroxyacids commonly used in products containing SPF. Were developed sunscreens based on micronized ZnO, TiO2 alumina, ZnO + micronized TiO2 alumina and HAP containing 15% of inorganic filter. Were prepared oil-in-water (O/W) creams from the variation of the concentration and nature of emollient agents, nonionic coemulsifier and film-former. The influence of preparation method on the physicochemical properties of sunscreens was evaluated using two different methods: incorporation of inorganic filters to the vehicle by means of a pre-dispersion and the conventional method. In order to evaluate the behavior of components that can interfere with the SPF and stability aspects of the formulation, were developed pre-dispersions added of Shea Butter. All formulations developed were physicochemically characterized and subjected to stability tests. The zeta potential and average particle size was measured using a Zetasizer 3000 HSA. Using a photoacoustic spectrophotometer, were analyzed the ability of UV light absorption of the sunscreens developed. The photocatalytic study suggested that the coating inorganic filters represents the best alternative to inhibit the photocatalytic activity of these particles. Glycolic and lactic acids showed incompatibilities only with ZnO. In photoacoustic analysis, it was found that the products have an effective UV absorption, as inorganic filter characteristics The physicochemical characterization and stability analysis propose that the formulation method from a pre-dispersion is most suitable for obtaining a stable and secure sunscreen product. The HAP-based formulations, however, represented an exception, because they were stable regardless of the method of incorporation into the cream base. In summary, the results indicate that, to obtain a safe and effective sunscreen, is extremely important we focus on the formulation criteria, such as ideal choice of components and technical preparation. Key-words: titanium dioxide, zinc oxide, hydroxyapatite, sunscreen, formulating strategies.

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LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS UV - Radiao ultravioleta UV-VIS - Ultravioleta visvel ZnO- xido de zinco TiO2- Dixido de titnio HAP- Hidroxiapatita EROs Espcies Reativas de Oxignio FPS Fator de Proteo Solar OH Hidroxila AHAs - Alfa-Hidroxicidos BHAs Beta-Hidroxicidos O/A - leo em gua A/O gua em leo pH - Potencial Hidrogeninico h hora min - minutos nm nanmetro UVA Ultravioleta A UVB Ultravioleta B UVC - Ultravioleta C DNA - cido desoxirribonuclico g gravidade C grau Celsius g grama(s) W- Watts

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% - Percentual % (V/V) - Percentual volume / volume % (P/V) - Percentual peso / volume M - Molar (moles / litro) M/V - massa/volume cm centmetros W.cm2 - microwatts m - micrmetro(s) mL - Mililitro(s) g.mL-1 Microgramas por mililitro q.s.p - Quantidade suficiente para Abs.- Absorbncia oil free livre de leo NaCl Cloreto de sdio Zn2+ - ons Zinco Mg2+ - ons Magnsio Mn2+ - ons Mangans Fe3+ - ons Frrico trivalente Cr3+ - ons Cromo trivalente Ca2+ - ons Clcio C3 Carbono posio 3 C18 Carbono posio 18 Cpd com pr-disperso Spd sem pr-disperso

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LISTA DE TABELAS

Tabela 1 Filtros inorgnicos e suas concentraes de uso........................................ Tabela 2 Composio das pr-disperses contendo manteiga de karit................... Tabela 3 Composio final do creme base no-inico............................................. Tabela 4 Composio final das pr-disperses.........................................................

28 68 88 90

Tabela 5 Resultados de potencial zeta e tamanho de partculas em protetores solares com e sem pr-disperso.................................................................................. 95 Tabela 6 - Resultados de valores de pH das formulaes contendo Manteiga de karit antes e aps estresse trmico........................................................................ 104 Tabela 7 Valores de potencial zeta e tamanho de partculas das formulaes contendo manteiga de karit........................................................................................

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LISTA DE QUADROS

Quadro 1 Classes de tensoativos, co-tensoativos mais utilizados............................ 37 Quadro 2 Formulao 1 do creme base no inico.................................................. Quadro 3 Formulao 2 do creme base no inico.................................................. 85 86

Quadro 4 Formulao 3 do creme base no-inico.................................................. 87 Quadro 5 Formulao 4 do creme base no-inico.................................................. 87 Quadro 6 Caracterizao fsico-qumica dos fotoprotetores com e sem prdisperso...................................................................................................................... 93 Quadro 7 Produtos cosmticos/dermatolgicos disponveis no mercado contendo cidos orgnicos e filtros solares.................................................................

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Quadro 8 Caracterizao das formulaes de protetores solares base de ZnO e TiO2 contendo manteiga de karit.................................................................... 102 Quadro 9 Caracterizao das formulaes de protetores solares base de HAP contendo manteiga de karit..............................................................................

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1 Radiao Solar e seus efeitos sobre a pele.................................................

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Figura 2 Distribuio de partculas de TiO2 no organismo....................................... 31 Figura 3 Formao de radicais livres a partir da irradiao de TiO2 por UV................................................................................................................................ 32 Figura 4 - Instabilidade de emulses........................................................................... Figura 5 - Potencial zeta em funo da distncia........................................................ 45 53

Figura 6 - Estabilidade relacionada aos valores de potencial zeta............................... 55 Figura 7 Esquema das variveis analisadas no estudo de fotocatlise..................... Figura 8 Esquema do mtodo de obteno de cristais.............................................. Figura 9 Atividade fotocataltica do TiO2, ZnO e HAP........................................... Figura 10 Influncia do revestimento e tamanho de partcula na atividade fotocataltica do TiO2.................................................................................................. Figura 11 Influncia do tamanho de partcula na atividade fotocataltica do ZnO.............................................................................................................................. Figura 12 Incompatibilidade do ZnO com alfa-hidroxicidos................................. Figura 13 Esquema Reacional da polimerizao do cido ltico na presena de ZnO.............................................................................................................................. 64 66 75

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Figura 14 Atividade fotocataltica de ZnO com cristais de cido ltico e Gliclico....................................................................................................................... 82 Figura 15 Esquema das variveis analisadas no preparo de creme base.................. 84

Figura 16 Esquema das variveis analisadas na pr-disperso contendo ZnO......... 86

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Figura 17 Curvas de distribuio do tamanho de partculas do ZnO em fotoprotetores com e sem pr-disperso......................................................................

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Figura 18 - Microscopia tica de protetor solar........................................................... 99 Figura 19 Espectro fotoacstico de absoro dos filtros inorgnicos ZnO,TiO 2 alumina, HAP e do creme base.................................................................................... 106 Figura 20 - Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares desenvolvidos com pr-disperso........................................................................................................ 107 Figura 21 - Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares desenvolvidos com e sem pr-disperso..............................................................................................

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Figura 22 - Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares contendo cido gliclico e cido ltico....................................................................................... 110 Figura 23 Espectro de fotoacstico de absoro dos protetores solares contendo Manteiga de karit em diferentes concentraes......................................................... 113

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SUMRIO

1 INTRODUO ..........................................................................................................................................21

2 REFERENCIAL TERICO ......................................................................................................................25 2.1 FILTROS SOLARES INORGNICOS......................................................................................................26 2.2 TOXICIDADE DE FILTROS INORGNICOS .........................................................................................29 2.2.1 Atividade fotocataltica dos filtros inorgnicos ........................................................................................32 2.3 FORMULAO DE FILTROS INORGNICOS ......................................................................................34 2.3.1 Principais veculos ..................................................................................................................................35 2.3.1.1 Microemulses .....................................................................................................................................36 2.3.1.2 Nanoemulses ......................................................................................................................................37 2.3.2 Principais ingredientes ............................................................................................................................38 2.3.2.1 lcoois graxos .....................................................................................................................................38 2.3.2.2 steres de cidos graxos ......................................................................................................................39 2.3.2.3 steres de glicerol com cidos graxos ..................................................................................................39 2.3.2.4 Ceras ...................................................................................................................................................39 2.3.2.5 Tensoativos ..........................................................................................................................................40 2.3.2.6 Carbmeros .........................................................................................................................................41 2.3.2.7 Derivados de celulose ..........................................................................................................................42 2.3.2.8 Polissacardeos ....................................................................................................................................42 2.3.2.9 Derivados polivinlicos.........................................................................................................................43 2.3.2.10 Silicones ............................................................................................................................................43 2.4 ESTABILIDADE DAS EMULSES .........................................................................................................44 2.4.1 Estudo de Estabilidade ............................................................................................................................46 2.5 ESTRATGIAS DE FORMULAO .......................................................................................................47 2.5.1 Controle do tamanho de partcula ............................................................................................................47 2.5.2 Revestimento de partculas ......................................................................................................................48 2.5.3 Mtodos de incorporao ........................................................................................................................49 2.5.4 Nanoencapsulamento utilizando materiais lipdicos .................................................................................50

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2.6 CARACTERIZAO DE PROTETORES SOLARES ..............................................................................51 2.6.1 Anlise do tamanho de partcula ..............................................................................................................51 2.6.2 Potencial zeta ..........................................................................................................................................52 2.6.3 Espectroscopia fotoacstica .....................................................................................................................55 2.7 APLICAO DE NOVOS MATERIAIS COMO FILTRO SOLARES INORGNICOS:

HIDROXIAPATITA .......................................................................................................................................56

3 OBJETIVOS ...............................................................................................................................................60 3.1 OBJETIVO GERAL ..................................................................................................................................60 3.2 OBJETIVOS ESPECFICOS .....................................................................................................................60

4 MATERIAIS E MTODOS .......................................................................................................................62 4.1 REAGENTES............................................................................................................................................62 4.2 EQUIPAMENTOS E ACESSRIOS .........................................................................................................62 4.3 ESTUDO DE FOTOCATLISE................................................................................................................63 4.3.1 Anlises dos resultados ........................................................................................................................64 4.4 ESTUDO DE COMPATIBILIDADE DOS FILTROS SOLARES COM CIDOS ORGNICOS ...............65 4.5 DESENVOLVIMENTO DE FORMULAO ...........................................................................................66 4.5.1 Preparo do creme base no-inico ...........................................................................................................66 4.5.2 Avaliao da influncia do mtodo de preparo nas emulses ....................................................................67 4.5.2.1 Preparo de pr-disperses....................................................................................................................67 4.5.2.2 Mtodo de incorporao da pr-disperso de filtros inorgnicos ao creme base ...................................67 4.5.3 Avaliao dos excipientes que interferem no FPS ....................................................................................68 4.5.4 Avaliao de Excipientes que apresentam incompatibilidades com filtros inorgnicos ..............................68 4.6 MTODO DE INCORPORAO DOS FILTROS INORGNICOS EMULSO SEM A TCNICA DA PR-DISPERSO...........................................................................................................................................69 4.7 CARACTERIZAO FSICO-QUMICA DAS EMULSES DE FOTOPROTETORES OBTIDAS .........69 4.7.1 Determinao do valor de pH ..................................................................................................................69 4.7.2 Avaliao organolptica ..........................................................................................................................69 4.7.3 Anlise microscpica ..............................................................................................................................70 4.8 ESTUDO DE ESTABILIDADE ................................................................................................................70 4.8.1 Teste de centrfuga ..................................................................................................................................70

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4.8.2 Teste de estabilidade preliminar ..............................................................................................................70 4.9 DETERMINAO DE POTENCIAL ZETA E TAMANHO DE PARTCULA .........................................71 4.10 ESPECTROSCOPIA FOTOACSTICA..................................................................................................71

5 RESULTADOS E DISCUSSO .................................................................................................................74 5.1 ESTUDO DE FOTOCATLISE................................................................................................................74 5.2 ESTUDO DE COMPATIBILIDADE DE FILTROS INORGNICOS COM CIDOS ORGNICOS USADOS EM PRODUTOS COSMTICOS....................................................................................................79 5.2.1 Padronizao do mtodo para obteno de cristais de ZnO com cido gliclico e cido ltico ...................81 5.2.1.1 Estudo de fotocatlise com os cristais de ZnO ......................................................................................82 5.3 DESENVOLVIMENTO DE FORMULAO ...........................................................................................83 5.3.1 Influncia dos excipientes que interferem na estabilidade ......................................................................84 5.3.2 Influncia do mtodo de preparo .............................................................................................................90 5.4 CARACTERIZAO FSICO-QUMICA DOS PROTETORES SOLARES DESENVOLVIDOS .............90 5.4.1 Avaliao de estabilidade preliminar com pr-disperso e sem pr-disperso ...........................................94

5.5 AVALIAO DA ESTABILIDADE ATRAVS DE POTENCIAL ZETA E TAMANHO DE PARTCULA .................................................................................................................................................94

5.6 INFLUNCIA DOS CIDOS ORGNICOS NA ESTABILIDADE DAS FORMULAES DE PROTETORES SOLARES DESENVOLVIDAS .............................................................................................97 5.7 INFLUNCIA DE EXCIPIENTES QUE INTERFEREM NO FPS ........................................................... 101 5.8 AVALIAO DA ESTABILIDADE DAS FORMULAES CONTENDO MANTEIGA DE KARIT . 104 5.9 ESTUDO DE ESPECTROSCOPIA FOTOACSTICA............................................................................ 105

6 CONSIDERAES FINAIS .................................................................................................................... 112

7 REFERNCIAS ....................................................................................................................................... 114

8 APNDICE ............................................................................................................................................... 124

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INTRODUO

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1 INTRODUO

Os protetores solares so produtos cosmticos usados para proteger a pele contra a radiao solar, e esto entre as melhores medidas fotoprotetoras (GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008). Esses produtos permitem um maior tempo de exposio ao sol, sendo empregados para preveno do cncer de pele e do envelhecimento cutneo precoce (WOLF et al., 2001; RAMPAUL; PARKIN; CRAMER, 2007). Os fotoprotetores contm filtros solares capazes de diminuir a quantidade de radiao ultravioleta (UV) que atinge a pele humana. Os filtros solares podem ser divididos em orgnicos e inorgnicos, antes denominados qumicos e fsicos, respectivamente, de acordo com a sua capacidade de absoro ou reflexo da radiao (FORESTIER, 2008). Os filtros orgnicos absorvem a radiao UV e transformam-na em radiaes com energias menores e inofensivas ao ser humano (KULLAVANIJAYA; LIM, 2005). Estas molculas so, essencialmente, compostos aromticos com grupos carboxlicos. No geral, apresentam um grupo doador de eltrons, como uma amina ou um grupo metoxila na posio orto ou para do anel aromtico (FLOR; DAVOLOS; CORREA, 2007). Os filtros inorgnicos, representados principalmente pelo dixido de titnio (TiO 2) e xido de zinco (ZnO), so responsveis por refletir a radiao emitida a partir de diferentes comprimentos de onda na regio do UV. Estes filtros foram previamente classificados como partculas inertes e incapazes de sofrerem absoro percutnea (PALM; ODONOGHUE, 2007; JAIM, 2010). Sendo assim, alguns autores defendem que os filtros solares inorgnicos representam uma das melhores e mais efetivas estratgias para proteger a pele, devido ao seu baixo potencial de irritabilidade, e recomendam seu uso para as crianas e pessoas com pele sensvel (PALM; ODONOGHUE, 2007; SERPONE; DONDI; ALBINI, 2007; MORE 2007; JAIM, 2010; BURNETT; WANG, 2011). Em contrapartida, evidncias recentes demonstraram que partculas de tamanho reduzido (< 100 nm) podem ser absorvidas atravs da pele, transportadas aos demais rgos e causar danos aos rins, fgado, pulmes, bao e outros tecidos (BRAYNER, 2008; WU et al., 2009). Nesse sentido, os danos potenciais da aplicao epidrmica de nanopartculas em filtros solares tm sido alvo de constantes investigaes (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). Evidncias crescentes sugerem que a toxicidade do TiO2 no s depende do tamanho de partcula e portanto, da rea de superfcie, mas tambm varia com a metamorfose cristalina

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que influencia na atividade fotocataltica, revestimento de superfcie e tendncia de aglomerao, enfatizando assim que as caractersticas fsico-qumicas so fundamentais para a sua toxicidade (JOHNSTON et al., 2009; HOUGAARD et al., 2010). O TiO2 e o ZnO so xidos metlicos e semicondutores cristalinos que possuem a capacidade de gerar espcies reativas de oxignio, sendo sugerido que os xidos de metais fotoativos podem dar incio a eventos deletrios na pele (MITCHNICK; FAIRHURST; PINNELL, 1999). Na presena da luz UV, o TiO 2 ativado a produzir Espcies Reativas de Oxignio (EROs), tais como, radical hidroxila, nion superxido e oxignio singlete (NAKAGAWA et al., 1997; MITCHNICK; FAIRHURST; PINNELL, 1999; FUJISHIMA; RAO; TRYK, 2000). As partculas de TiO2, usadas em alguns protetores solares, so revestidas com materiais inertes, como silicones, possivelmente para diminuir os danos causados pela formao de radicais livres e interaes com outros componentes da formulao (GONZALEZ et al., 2007; GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008). No entanto, a maioria dos produtos fotoprotetores comercializados no indica que tipo de TiO2 usado em sua formulao (FORESTIER, 2008). Dados da literatura mostram que o ZnO individualmente, bem como em conjunto com o TiO2, extremamente fotoativo. A presena de ZnO, sob certas condies de radiao UV, pode aumentar a fotorreatividade do TiO2 e at mesmo produzir radicais livres por conta prpria (RAMPAUL; PARKIN; CRAMER, 2007). Os protetores solares fotoinstveis quando expostos luz ultravioleta emitem eltrons, que por sua vez, induzem a formao de perxidos e radicais livres. Essas espcies podem oxidar e degradar outros ingredientes na formulao, comprometendo a segurana do produto (GONZALEZ et al., 2007). A importncia da proteo contra radiao solar cada vez mais evidente. Junto com o apelo da fotoproteo cresce tambm o uso de cosmticos que buscam minimizar os efeitos causados pelo sol, como envelhecimento cutneo, manchas, espessamento da pele, entre outros. Com intuito de promover tratamento e proteo ao mesmo tempo, as indstrias cosmticas esto revolucionando o mercado de beleza com produtos multifuncionais de ampla atuao. A associao de cidos orgnicos, que ajudam a recuperar a pele dos danos do sol, e filtro solar tem sido amplamente empregada pela indstria cosmtica atual. (AVON, 2011; DERMAGE, 2011; LA ROCHE POSAY, 2011; THERASKIN, 2011; VALEANT, 2011; VICHY, 2011). Com a tendncia de aliar vrios produtos em um s e oferecer um cosmtico diferenciado, o qual solucionaria mais de uma necessidade do consumidor, tambm surgiram

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preocupaes com o possvel aumento de sensibilidade radiao ultravioleta aps o uso de produtos de cuidados da pele contendo cidos orgnicos e filtro solar inorgnico, bem como a possvel interferncia desta associao na formulao final (KORNHAUSER et al., 2009) podendo comprometer assim, a eficcia do produto. H atualmente 17 filtros solares aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) (SAMBANDAN; RATNER, 2011). Dentre estes, apenas dois inorgnicos, TiO 2 e ZnO, que so considerados como no sensibilizantes e, provavelmente por esse motivo, so amplamente utilizados. Todavia, as controvrsias acerca da segurana desses filtros tm gerado incansveis debates. Neste contexto, o segmento tem exigido pesquisas e desenvolvimento de novos filtros solares que possam ser usados em formulaes de fotoprotetores, oferecendo preparaes com maior eficincia de proteo e estabilidade fsico-qumica. A hidroxiapatita (HAP) um dos principais biomateriais cermicos utilizados para substituio ssea devido a sua excelente biocompatibilidade, ausncia de toxicidade e similaridade com a composio qumica da fase mineral dos tecidos calcificados e, nos ltimos anos, tm-se dado ateno s suas propriedades pticas, de absoro e espalhamento da radiao solar na faixa do UV, tornando este material um promissor substituto aos filtros inorgnicos atualmente utilizados. (ARAJO; SOUZA, 2008; BATISTA, 2010). Tambm a combinao racional de substncias contendo steres de cinamato, conhecidos por apresentarem capacidade de absoro de luz UV, com filtros solares inorgnicos tem demonstrado efeito sinrgico na absoro UV (NAHM, 2011) por mecanismos ainda no bem compreendidos e relatados (FREITAS et al., 2005). A ideia de utilizar novos materiais como filtros inorgnicos ou incorporar substncias fotoprotetoras, busca diminuir as caractersticas fotorreativas dos filtros, bem como promover atenuao dos raios UV visando segurana e eficcia dos protetores solares. A eficcia de um fotoprotetor no depende apenas dos tipos e quantidades de filtros solares envolvidos, mas sim das caractersticas do produto final. Com base nessa premissa, de fundamental importncia a seleo adequada de todos componentes da formulao, pois as propriedades finais esperadas para um protetor solar so dependentes de vrias caractersticas qumicas e fsicas dos compostos que o constituem. Assim, uma formulao bem elaborada colabora para a estabilidade e eficcia do filtro inorgnico incorporado.

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REFERENCIAL TERICO

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2 REFERENCIAL TERICO

A energia da radiao eletromagntica aumenta com a reduo do comprimento de onda. Assim a radiao UV a de menor comprimento de onda e, consequentemente, a mais energtica, ou seja, a mais propensa a induzir reaes fotoqumicas. Por esta razo, as radiaes UV so as mais preocupantes quando se pensa em fotoproteo (BATISTA, 2010). A radiao UV emitida pelo sol pode ser dividida em trs faixas: UVC (200-290 nm), UVB (290-320 nm), e UVA (320-400 nm) (FISCHER; SOUZA, 2004; FLOR; DAVOLOS; CORREA, 2007; SOUZA; SGARBI; CARMO; ROSA, 2007) (Figura 1).

Figura 1 - Radiao solar e seus efeitos sobre a pele.

Fonte: Adaptado de RIBEIRO,2010.

A radiao UVC totalmente absorvida pelo oznio atmosfrico, ou seja, no atinge a superfcie da Terra (SOUZA; FISCHER; SOUZA, 2004). Assim, a radiao UV de importncia para a sade humana consiste dos raios UVA e UVB (KULLAVANIJAYA; LIM, 2005). A radiao UVB predominante na superfcie terrestre no perodo entre 10 e 14 horas. Possui alta energia e, com grande frequncia, ocasiona queimaduras solares. Estas queimaduras aparecem de 3 a 4 horas aps a exposio e se intensificam de 12 a 24 horas. So acompanhadas por edemas, dores, prurido, pela formao de bolhas e espessamento da pele (KULLAVANIJAYA; LIM, 2005).

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A radiao UVB tambm responsvel pela transformao do ergosterol epidrmico em vitamina D, induo ao bronzeamento e causa o envelhecimento precoce das clulas com alteraes que induzem ao cncer cutneo (SOUZA; FISCHER; SOUZA, 2004; FLOR; DAVOLOS; CORREA, 2007). A radiao UVA possui uma energia mais baixa que UVB. Porm a radiao mais abundante na superfcie terrestre (95%) e de maior penetrao na pele. Os raios UVA, por serem mais penetrantes, so responsveis pelo bronzeado (SGARBI; CARMO; ROSA, 2007) e exercem efeitos indiretos sobre o DNA (cido desoxirribonucleico) via produo de EROs. As EROs podem causar envelhecimento precoce ou fotoenvelhecimento, desempenhando um papel importante na patognese do melanoma, uma vez que se apresentam como principais responsveis pelo dano solar causado a longo prazo (SIQUEIRA, 2008). A radiao UVA capaz de ativar agentes fotossensibilizantes endgenos (porfirina, riboflavina e quinonas), produzindo radicais livres de oxignio (ao direta no tecido conjuntivo). No absorvida diretamente por alvos biolgicos, mas altera drasticamente a funo celular (SGARBI; CARMO; ROSA, 2007; GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009): (1) Atravs de sua ao sobre as membranas celulares; (2) danificam a mitocndria, prejudicando a produo de energia; (3) interagem com as molculas de protena, danificando sistemas metablicos cruciais, e (4) fragmentam o DNA, provocando mutaes variadas e, muitas vezes, divises celulares descontroladas (CHOW, 2002). Logo, a exposio radiao UV parece ser o fator ambiental mais importante no surgimento do cncer de pele (ELBOURY et al., 2007). O propsito desta reviso abordar de maneira integrada as questes debatidas acerca dos aspectos referentes segurana, eficcia e desempenho dos filtros solares inorgnicos, agrupando as evidncias disponveis na literatura, fornecendo anlises relevantes em torno desses fatos, bem como apresentando as estratgias avanadas sobre formulao de protetores solares base de filtros inorgnicos.

2.1 FILTROS SOLARES INORGNICOS

Os filtros solares inorgnicos so representados por materiais minerais como caulim, sulfato de brio, mica e xido de ferro, talco, calamina, mas principalmente por dois xidos: ZnO e TiO2. Esses funcionam ao refletir e difundir raios ultravioletas que atingem a pele, em

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vez de envolver um processo de absoro da radiao emitida a partir dos diferentes comprimentos de onda, como fazem os filtros solares orgnicos (FORESTIER, 2008). Os filtros inorgnicos possuem uma capacidade reconhecida de bloquear as radiaes solares UVA e UVB, criando uma barreira para a passagem da radiao, ou seja, eles funcionam como refletores, e representam uma forma segura e eficaz para proteger a pele. Esses compostos so geralmente julgados mais seguros do que suas contrapartes orgnicas, sendo comumente considerados atxicos e estveis. So, por esse motivo, indicados para pacientes com histrico de alergias, pois na condio de partculas inertes, no quebram suas molculas ao longo do tempo (PALM; ODONOGHUE, 2007; JAIM, 2010). Em particular, ZnO e TiO2 esto na lista de ingredientes ativos seguros para uso em protetores solares, pois apresentam um baixo potencial de irritao, sendo inclusive, os filtros solares recomendados no preparo de fotoprotetores para uso infantil e pessoas com pele sensvel (PALM; ODONOGHUE, 2007). O tamanho das partculas dos filtros inorgnicos interfere no poder de reflexo, disperso ou absoro da radiao UV. Para haver reflexo, so necessrias partculas grandes que variam de 100 a 500 nm, que apresentam eficcia satisfatria. Mas por serem excessivamente opacas, no tm uma boa aceitao pelo usurio, pois possuem textura pastosa e deixam a pele com aspecto esbranquiado. Neste contexto, parmetros sensoriais tornaram-se cada vez mais importantes para a aprovao de um protetor solar (REETH, 2005). Com o intuito de contornar o problema esttico do ZnO e TiO 2, a inovao tecnolgica nos anos 90 desenvolveu verses micronizadas desses xidos, onde as partculas so reduzidas durante o processo de obteno a dimenses tais que no absorvam nem espalhem radiao visvel, mas absorvam e espalhem a radiao UV (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). As verses micronizadas representam um grande avano, uma vez que no deixam pelcula perceptvel sobre a pele. Assim o tamanho mdio da partcula de 10-50 nm, tendo 50-90% de reduo do tamanho da partcula original (GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009), constituindo cosmeticamente uma excelente opo para formulaes de protetores solares, pelo fato de no refletirem no espectro visvel, o que confere maior transparncia ao produto final e de certa forma, maior aceitabilidade (GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008). A diminuio no tamanho das partculas melhorou o apelo esttico dos xidos metlicos, permitindo formulaes de produtos personalizados que atendem aos desejos especficos dos consumidores. Usando partculas micronizadas de filtros inorgnicos em

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cosmticos geram-se produtos com uma melhor textura e mais transparente, uma vez que no refletem no espectro visvel (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). preciso ter cuidado na formulao com partculas micronizadas de filtros inorgnicos, pois, quanto menor seu tamanho, mais susceptvel ao processo de aglomerao, em que as partculas pequenas perdem propriedades dispersivas, diminuindo assim seu fator de proteo solar (FPS) (TANNER, 2006; GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009; RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010). Nesse sentido, o revestimento de partculas de filtros inorgnicos uma estratgia bastante utilizada para reduzir o potencial de agregao destas, o que, consequentemente, interfere positivamente na estabilidade fsica do produto, facilidade de incorporao e sensorial mais agradvel. Os revestimentos geralmente so base de slica, alumina e dimeticona, que estabilizam as molculas dos filtros solares e assim criam uma suspenso estvel (GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008; SCHILLING et al., 2010; BIC, 2011). As concentraes de uso dos filtros inorgnicos permitidos no Brasil esto descritas na Tabela 1. Tabela 1 Filtros inorgnicos e suas concentraes de uso no Brasil aprovado pela Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA). Substncias xido de Zinco Dixido de Titnio Subcarbonato de bismuto Subgalato de bismuto Subsalicilato de bismuto Estearato de magnsio Talco Fonte: BRASIL, 2006. Conc. de Uso (%) 5-25% 5-25% 5-10% 5-10% 5-10% 10-20% 10-20%

2.1.1 Dixido de Titnio O dixido de titnio ou titnia um xido metlico inorgnico extremamente verstil por possuir propriedades interessantes, como sua dureza acima da mdia dos materiais comuns, alto ndice de refrao luz visvel, baixa reatividade qumica e sua semicondutncia fotossensvel. um pigmento branco e brilhante muito utilizado em tintas brancas, papis,

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plsticos e cremes dentais, devido sua estabilidade qumica e mecnica. Possui trs estruturas cristalinas: rutilo (termodinamicamente mais estvel), anatsio e brookita (FILHO, 2007; UNICHEM, 2011). A forma rutilo apresenta maior eficcia na proteo contra os raios UV (SILVA; MAGALHES; SANSIVIERO, 2010). Quando dividido em partculas nanomtricas, o TiO2 torna-se transparente luz visvel, mas mantm suas propriedades de espalhamento e reflexo de raios UV, por isso largamente utilizado em protetores solares (FILHO, 2007).

2.1.2 xido de Zinco O xido de zinco um xido metlico amplamente utilizado na indstria farmacutica, alimentcia e cosmtica. Na indstria farmacutica empregado em aplicaes dermatolgicas, em unguentos e loes devido a sua ao protetora, adstringente e ausncia de toxicidade. Consiste em um pigmento branco, altamente opaco e com grande poder de reflexo da luz, o que justifica sua aplicao como agente protetor solar (COLEMAN; JAGADISH, 2006, UNICHEM, 2011;).

2.2 TOXICIDADE DE FILTROS INORGNICOS

A fotooxidao do produto na superfcie da pele, causada pela incidncia de radiao ultravioleta, produz radicais livres e leva o filtro solar a sofrer modificaes qumicas, sendo uma das causas de toxicidade e alteraes no FPS do produto. Assim, a instabilidade fotoqumica representa um problema significativo apresentado pelos protetores solares (HOJEROV; MEDOVCKOVE; MIKULA, 2011). Os efeitos toxicolgicos de partculas micronizadas de filtros inorgnicos ainda so pouco compreendidos, embora o conhecimento em algumas reas, principalmente inflamao e translocao de partculas, tenha apresentado avanos significativos (HOUGAARD et al., 2010). Evidncias crescentes sugerem que a toxicidade do TiO 2 no s depende do tamanho, mas tambm varia com a metamorfose cristalina, a forma de partculas e revestimento de superfcie. Recentemente, isto tem levantado algumas preocupaes, porque as micropartculas destes ativos so fotorreativas e produzem EROs, que podem causar estresse oxidativo nos tecidos ou danos ao DNA (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). O ZnO micronizado tambm pode sofrer as mesmas reaes fotoqumicas levando ao

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compromentimento de sua eficcia, desencadeando alteraes na homeostasia celular (GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008). A grande preocupao e o motivo de vrios estudos justificam-se em virtude da possvel penetrao destas partculas micronizadas na pele, onde a difuso atravs do estrato crneo normalmente um fator limitante para a taxa de absoro percutnea (GAMER; LEIBOLD; RAVENZWAAY, 2006). Admite-se que as micropartculas dos filtros inorgnicos apresentam propriedades qumicas, mecnicas, eltricas e pticas diferentes das dos seus homlogos maiores (BURNETT; WANG, 2011). Alguns estudos mostram que micropartculas de TiO2 ou de ZnO no penetram atravs do estrato crneo, visto que so grandes demais para um transporte passivo atravs da pele. Portanto, uma absoro drmica seria improvvel, pois suas propriedades de micropartculas nos sistemas biolgicos no so necessariamente diferentes das partculas maiores (GAMER; LEIBOLD; RAVENZWAAY, 2006; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009;

BARNARD, 2010; SCHILLING et al., 2010). No entanto, outros estudos mostram que h sim uma considervel penetrao destas partculas inclusive com distribuio significativa no organismo, o que reflete a necessidade de estudos continuados e aprofundados sobre o assunto (WU et al., 2009; HOUGAARD et al., 2010). A depurao de partculas de TiO2 por clulas fagocticas tem sido um foco particular de estudos, devido a capacidade dessas em remover as partculas dos locais de exposio, circulao ou locais-alvo secundrios. Clulas no fagocitrias tambm tm a propenso de internalizar partculas, tais aes podem aumentar a toxicidade do TiO2, devido

interferncia na fisiologia e funo celular normal. Os danos pele podem comprometer a principal funo do rgo que atuar como uma barreira a vrus, bactrias e substncias qumicas nocivas. Alm disso, alteraes celulares significativas em si podem ativar vias de cncer (ARAJO; LIMA, 2007; RAMPAUL; PARKIN; CRAMER, 2007; JOHNSTON et al., 2009) A Figura 2 mostra resultados obtidos por Wu et al.(2009), em estudo que avaliou a taxa de absoro e distribuio de partculas de TiO2 no organismo aps aplicao tpica em camundongos sem pelo. Pode-se notar que as micropartculas penetraram na pele e se acumularam em diversos rgos e tecidos, principalmente bao, fgado e msculo subcutneo, sendo encontrados vestgios insignificantes destas micropartculas no crebro e rins. O tamanho das partculas de TiO2 utilizadas neste estudo foram de 10, 25 e 60 nm, Degussa P25 (21 nm) e de tamanho normal 90 nm.

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Figura 2 Distribuio de partculas de TiO2 no organismo aps aplicao subcrnica tpica (60 dias) em camundongos sem plo. Formulao: 5% TiO 2 em emulso. Dose: 8 mg/cm2. Quantificao: espectroscopia de absoro atmica e microscopia eletrnica de transmisso (n = 6).

Fonte: Retirado e adaptado de WU, 2009.

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2.2.1 Atividade fotocataltica dos filtros inorgnicos

Um fotocatalisador um material que, ao ser sensibilizado pela luz ou alguma outra radiao eletromagntica, acelera processos de transformaes moleculares (FILHO, 2007). A molcula ativada pode interagir com outros ingredientes contidos no produto, oxignio do ambiente ou biomolculas da pele (protenas celulares, lipdeos) e, portanto, levar produo de espcies reativas indesejveis (FORESTIER, 2008). O ZnO e TiO2 so filtros inorgnicos que pertencem classe dos xidos metlicos e, assim so semicondutores que na presena de luz solar ou artificial, so ativados a produzir EROs, tais como os radicais livres nion superxido (O2-), o perxido de hidrognio (H2O2), o radical hidroxil (HO) e o oxignio singlete (1O2), de modo que podem levar destruio das membranas biolgicas (RAMPAUL; PARKIN; CRAMER, 2007; SERPONE; DONDI; ALBINI, 2007; NAKAGAWA et al., 1997; WOLF, 2001). A forma anatsio do TiO 2 aquela que apresenta maior atividade fotocataltica (FILHO, 2007; SILVA; MAGALHES; SANSIVIERO, 2010; UNICHEM, 2011). A capacidade fotocataltica do TiO2 muito interessante porque sua superfcie, em ambientes com alto grau de umidade relativa ou em meio aquoso, possui uma quantidade considervel de grupos hidroxila (HOFFMAN, 1995). Ao absorver energia eletromagntica, o TiO2 tem seus eltrons promovidos da banda de valncia banda de conduo (HOFFMAN, 2007; SIVALINGAM, 2003), como ilustrado na Figura 3. Figura 3 - Representao esquemtica de algumas possibilidades de formao de radicais livres a partir da irradiao de TiO2 por UV.

Fonte: NOGUEIRA et al, 1998. Essa transio gera um buraco positivo (h+) na banda de valncia. Este buraco h+ induz

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ao sequestro de um eltron da hidroxila, formando o radical hidroxila (HO ). Este radical, por sua vez, sequestra um eltron de uma molcula eletrodoadora, que pode sofrer ciso em fragmentos cada vez menores at recombinar-se com uma espcie eletroativa. De modo semelhante o eltron da banda condutora tambm induz a formao de radicais, como o radical superxido (O2-), reagindo com o O2 do meio, por exemplo. Este radical pode transferir um eltron excedente a molculas eletrorreceptoras, que tambm sofrem cises, at que esse eltron excedente seja recebido por uma espcie eletrodeficiente (RAJESHWAR; TACCONI; CHENTHAMARAKSHAN, 2001; SIVALINGAM et al., 2003; FILHO, 2007). O radical superxido (O2-) apesar de ser considerado pouco reativo em solues aquosas, tem sido observado em leses biolgicas secundria a sistemas geradores de radical superxido (O2-) (seja enzimtico, fagoctico ou qumico) (KEHRER; ROBERTSON; SMITH, 2010). O ZnO, por sua vez, um material semicondutor que h muito tempo vem atraindo ateno por sua potente ao fotocataltica. Assim como o TiO 2, capaz de eliminar poluentes da gua por degradao da matria orgnica, sendo que a formao de radical hidroxila fundamental para a ao fotocataltica do ZnO (JING et al., 2001). Danos ao DNA produzidos por radicais livres, mediados por filtros solares inorgnicos, tem sido observado desde 1997. Ao realizar estudos in vitro, Dunford et al (1997) demonstraram que todas as amostras analisadas de TiO 2 e ZnO extradas diretamente de protetores solares, quando iluminados com radiao UV, causaram rupturas na dupla fita de DNA tanto em plasmdios como em fibroblastos humanos por meio da formao de EROs. Desde ento, inmeras pesquisas tm sido desenvolvidas com o intuito de esclarecer os possveis efeitos nocivos s clulas humanas mediados por reaes fotocatalticas destes produtos de proteo solar em contato com radiao UV. Em 2004, Hirakawa et al., verificaram em ensaios in vitro, que partculas de TiO2, principalmente a forma anatsio, quando irradiadas com luz UV podem causar danos ao DNA celular agindo de maneira no especfica em diferentes stios nucleotdicos via gerao de radicais hidroxila livres, bem como agir em stios-alvos especficos no DNA ao induzir a produo de perxido de hidrognio (HIRAKAWA et al., 2004; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). Rampaul e colaboradores (2007), avaliaram os efeitos nocivos de partculas de TiO 2 nas formas cristalina e revestida, irradiadas com luz UVA sobre cultura de clulas epiteliais humanas e animais. Para verificar o desencadeamento de qualquer dano celular induzido por partculas de TiO2 ativadas por radiao UVA, os autores analisaram dois efeitos distintos:

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apoptose celular e ativao das vias de deteriorao do DNA. Foi relatado que, nas culturas de clulas do epitlio humano e animal tratadas com diferentes formas de TiO 2 ativadas por radiao UVA, algumas foram capazes de induzir o dobro de apoptose celular que a observada quando as linhagens celulares foram expostas apenas radiao UVA, sendo a mistura das formas anatsio e rutilo, revestidas com slica, a mais danosa. Por outro lado, ao que tudo indica, a forma rutilo revestida com alumina ou acrescida de um dopante (Mn, nesse caso), parece ter efeito protetor contra a apoptose celular. O mesmo foi observado em culturas celulares de outros animais. Em relao a danos causados ao DNA celular, na ausncia de luz UVA, todas as formas de TiO2 so inertes e no danosas aos nucleotdeos. Porm, quando tratadas com radiao UVA, as formas rutilo e anatsio, revestidas com dimeticona e organossilano, so capazes de ativar cerca de cinco vezes mais as vias de dano ao DNA do que a radiao UVA por si s. De fato, o potencial de dano celular desencadeado pela marcante atividade fotocataltica do TiO2, como tem sido demonstrado em vrios estudos, despertou o interesse de pesquisadores para a avaliao de uma possvel capacidade de destruio de clulas tumorais via ativao de EROs intermediada pelo TiO2. Assim, Zhang & Sun (2004) realizaram um estudo in vitro com o objetivo de investigar o efeito fotocataltico de micropartculas de TiO2 sobre linhagens celulares de carcinoma de clon humano (Ls-174-t). Os autores observaram que o efeito letal era mnimo quando as clulas carcinmicas foram expostas irradiao UVA sem a presena de TiO2. Todavia, uma vez adicionadas as micropartculas, as clulas da linhagem Ls-174-t apresentaram uma taxa de apoptose muito maior. Na presena de 1000 g.mL-1 de TiO2, 44% das clulas foram mortas aps 10 minutos sob irradiao UVA, e 88% destas foram destrudas aps 30 minutos em presena da mesma radiao (ZANG; SUN, 2004).

2.3 FORMULAO DE FILTROS INORGNICOS

Para disponibilizar um filtro solar ao consumidor necessrio que o mesmo esteja incorporado a um veculo. associao filtro solar/veculo denomina-se protetor solar ou fotoprotetor. Algumas caractersticas so exigidas para que os protetores solares sejam comercializados. Alm de fotoestveis, devem apresentar caractersticas como ser atxico; no ser sensibilizante, irritante ou mutagnico; no ser voltil; possuir caractersticas solveis apropriadas; no ser absorvido pela pele; no alterar sua cor; no manchar a pele e

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vestimentas; ser incolor; ser compatvel com a formulao e material de acondicionamento e, ser estvel em diferentes condies de armazenamento (GONZALZ; LORENTE; CALZADA, 2008). O desenvolvimento de um sistema eficaz e seguro se inicia com a escolha dos constituintes da formulao. Desta forma, essas matrias-primas devem ser cuidadosamente selecionadas para que seja alcanada uma tima formulao. Os formuladores de protetores solares podem escolher entre uma srie de formas de apresentao de seus produtos finais como leos, mousses, aerossis, pomadas, sticks e, principalmente, gis, gis-creme e emulses.

2.3.1 Principais veculos

As emulses so os veculos mais utilizados para a formulao de protetores solares devido sua facilidade de espalhamento sobre a pele. Uma emulso um sistema termodinamicamente instvel que necessita de energia para sua formao e consiste de ao menos um lquido imiscvel (fase interna descontnua) disperso em outro (fase externa contnua) em forma de pequenas gotas (BANKER; RHODES, 2002; AULTON, 2005). Os principais componentes de uma emulso so lipdios (compostos lipoflicos) e gua, a qual se mantm em um estado metaestvel pela ao de um emulsionante (BUCHMANN, 2001). Para viabilizar sua utilizao como veculo, necessrio que fatores envolvidos no processo de obteno e na estabilidade do sistema em disperso sejam criteriosamente estudados (BANKER; RHODES, 2002). As emulses gua/leo (A/O), em sua maioria, tornam o produto mais oleoso, fazendo com que este permanea por mais tempo protegendo o local aplicado; porm, as mais utilizadas nos ltimos anos tm sido as emulses leo/gua (O/A), que possibilitam a incorporao de filtros hidrossolveis atuando em sinergismo com os filtros lipossolveis presentes (REETH, 2005; AULTON, 2005; CHORILLI et al., 2007). A maioria das emulses cosmticas O/A porque esse tipo permite uma melhor espalhabilidade sobre a pele e tambm evita oleosidade excessiva. Formas mais sofisticada desses tradicionais sistemas, tais como emulses mltiplas e microemulses, tm sido introduzidas para melhorar a aparncia fsica e a eficcia do produto e promover liberao mais eficiente do princpio ativo (BANKER; RHODES, 2002; AULTON, 2005; MAHATO, 2007).

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2.3.1.1 Microemulses

As microemulses so sistemas transparentes, isotrpicos e termodinamicamente estveis, compostos por fase oleosa, aquosa, tensoativo e co-tensoativo. Diferem de emulses por serem sistemas transparentes ou translcidos, em decorrncia do diminuto tamanho das partculas da fase interna (20-150 nm), enquanto que emulses tm aspecto leitoso e as partculas da fase interna so maiores (KREILGAARD, 2002). As microemulses requerem adio de pequena quantidade de energia para sua formao. No entanto, estes sistemas necessitam uma grande quantidade de tensoativo e muitas vezes co-tensoativos para sua formao, o que pode gerar irritao cutnea (LAWRENCE; WARISNOICHAROEN, 2006). Diversos tensoativos, misturas de tensoativos e co-tensoativos podem ser utilizados para a preparao de microemulses. Misturas de Labrasol (polioxiglicerdeos de cido cprico e caprlico) com derivados de Plurol (steres de cido poliglicerlico), lcool graxo ligado ao polietilenoglicol (srie Brij) e polissorbatos (srie Tween) so exemplos de tensoativos no-inicos frequentemente utilizados, geralmente misturados a outros tensoativos ou a co-tensoativos. A exceo o Aerosol OT (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001) um tensoativo inico capaz de formar microemulses sem co-tensoativos. O miristato de isopropila um dos compostos mais usados como fase oleosa. Outros exemplos incluem cido olico e mentol, estes com a vantagem de apresentarem atividade como promotor de absoro. (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; FLORENCE; ATTWOOD, 2003) leos como o de canola e de uva, mono e diglicerdios de cadeia curta, mdia ou longa tambm podem ser utilizados como fase oleosa. No Quadro 1 esto representados alguns dos componentes mais comumente utilizados na preparao de microemulses.

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Quadro 1 - Classes de tensoativos e combinaes de tensoativos, co-tensoativos e leos mais utilizados para preparao de microemulses de uso tpico.
TENSOATIVO TENSOATIVO OU COTENSOATIVO USTILIZADO EM ASSOCIAO FASE OLEOSA

steres de polioxiglicerdios Labrasol Chremophor lcoois de polioxiglicerdios BRIJ steres de sorbitano Polissorbato 20, 40, 80, 85 (Srie Tween) Fosfolipdios Lecitina (de soja ou de ovo) Acares Laurato de sacarose Mono e di-laurato de sacarose dodecilglicosdios Tensoativos inicos AOT

Plurol isoestearique (steres de cido graxo e poliglicerol), etanol, transcutol, propilenoglicol Trascutol, etanol, poloxamer, propilenoglicol Isopropanol, propanol, butanol, propilenoglicol, monoglicerdios de cadeia mdia Etanol, propilenoglicol, sorbitol, poloxamer Propanol, etanol, propilenoglicol, isopropanol, sais biliares, Propilenoglicol lcool de cadeia mdia Cocoamido propilbetana Polissorbato

Oleato de etila, isoestearato de estearila, miristato de isopropila, cido olico, palmitato de isopropila Miristato de isopropila, cido olico leo de soja, migliol, decanol, leo de jojoba, monoglicerdios de cadeia mdia e longa. Miristato de isopropila, cido olico, silicone lquido, oleato de etila, monoglicerdios de cadeia longa Triglicerdeos, miristato de isopropila Miristato de isopropila, octanoato de octila octanoato de octila Miristato de isopropila Miristato de isopropila, octanol

Fonte: prprio autor.

2.3.1.2 Nanoemulses

Nanoemulses e microemulses so geralmente descritas de forma similar, isto , ambos so sistemas fluidos, compostos de partculas de dimetro inferior a 200 nm.

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Entretanto, nanoemulses so sistemas cineticamente (e no termodinamicamente) estveis e necessitam de uma maior quantidade de energia para sua formao, o que geralmente associado a aumento de custo e necessidade de equipamentos especializados. Por outro lado, estes sistemas requerem menores quantidades de tensoativo, e por isso podem causar menor grau de irritao cutnea (LAWRENCE; WARISNOICHAROEN, 2006).

2.3.2 Principais ingredientes

Atualmente, milhares de ingredientes com diversas classificaes e caractersticas peculiares so utilizados pela indstria para produo de cosmticos e produtos dermatolgicos em todo o mundo. Vrias caractersticas fundamentais direcionam a seleo de ingredientes a serem inseridos em uma formulao, como o nmero de tomos de carbono, tamanho da molcula e tipo de radicais orgnicos. As propriedades estruturais dos tipos de substncias com cadeia carbnica que influenciam o seu uso so: solubilidade, partio em sistemas bifsicos, ponto de fuso, turbidez e solidificao; se apresenta ao emoliente, espessante, emulsionante ou tensoativa; se promove formao de espuma; se altera as caractersticas sensoriais ou se apresenta efeito biolgico, como ao antimicrobiana e toxicidade, aos usurios de produto cosmtico a qual estejam presentes em uma formulao. Desta forma, o conhecimento prvio destas propriedades essencial para o desenvolvimento, produo e para a disponibilizao comercial de qualquer produto cosmtico/dermatolgico, como protetor solar. Em seguida, so abordados alguns ingredientes utilizados na formulao de emulses.

2.3.2.1 lcoois graxos

So substncias lipdicas, com pouca solubilidade em gua, formadas a partir da reduo do grupo cido da estrutura dos cidos graxos a grupos hidroxilas. Os compostos desta classe so encontrados em sua maioria na forma de ceras slidas, e alguns derivados como os lcoois mirstico, cetlico e estearlico so amplamente utilizados na formulao de emulses. Estes agentes possuem a propriedade de atuar como emolientes, agentes espessantes, estabilizadores de espuma e tambm como co-tensoativos em sistemas emulsionados. Outro ingrediente amplamente utilizado constitudo por lcoois graxos

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etoxilados obtidos pela reao de lcoois cetlico, cetoestearlico e olelico de origem natural com xido de eteno (EO), com diferentes graus de etoxilao. Em funo do grau de etoxilao e do lcool de partida, obtm-se produtos que exibem diferentes graus de lipofilicidade e estados fsicos, permitindo assim a escolha de um produto para cada aplicao (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001, MAPRIC, 2010).

2.3.2.2 steres de cidos graxos

So substncias sintticas derivados de cidos graxos de amplo emprego em indstria cosmtica. Apresentam propriedades interessantes como componentes de formulaes cosmticas, como a capacidade de solubilizar substncias lipoflicas e de penetrar na pele aplicada (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001, KREILGAARD, 2002). Um representante desta classe de compostos o hexanodioato de dibutila ou adipato de dibutila, um ster conhecido por Cetiol B. usado como emoliente para aplicao cosmtica, em particular para preparaes solares devido capacidade de solubilizar filtros UV cristalinos (SPECTRUM, 2011).

2.3.2.3 steres de glicerol com cidos graxos

Tambm denominados de glicerdeos, so produtos de esterificao obtidos a partir de cidos graxos diversos com o glicerol. Os monosteres de glicerol, constitudos por citrato, oleato, linoleato ou lactato, entre outros, so agentes emulsionantes, com ao em emulses leo/gua principalmente, e emolientes. Algumas destas substncias apresentam ao tensoativa (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; BANKER; RHODES, 2002). Outro representante desta classe de lipdios bastante utilizado o estearato de glicerol que possui a capacidade de reduzir a tenso superficial e ser auto-emulsionte. Os triglicrides do cido cprico/caprlico so triglicrides de cadeia mdia de cidos graxos saturados, altamente refinados e extremamente estveis, possuindo propriedades singulares de lubrificao e emolincia, alm de apresentar toque no oleoso e proporcionar uma sensao sedosa na pele (tipo oil free) (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001).

2.3.2.4 Ceras

As ceras so lipdeos slidos bastante utilizados em produtos cosmticos, tendo como

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representantes a manteiga de cacau, as ceras de carnaba, de abelha e a lanolina. A lanolina, material lipdico pastoso extrado da l de ovelhas, pode ser dividida em leo e cera de lanolina, e auxilia na formao de emulses e atua como emoliente para a pele. A manteiga de cacau um material ceroso formado principalmente por triglicerdeos, empregado como agente de consistncia em diversos produtos. A cera de abelhas apresenta diversas aplicaes com ao emoliente, suavizante e lubrificante da pele (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; BANKER; RHODES, 2002). A manteiga de karit, extrada dos frutos de Butyrospermum parkii (G. Don) Kotschy, Sapotaceae, composta por uma mistura de cidos graxos (cido oleico; cido esterico; cido palmtico; cido linoleico) e por uma frao insaponificvel composta por tocoferis, triterpenos, esteroides e hidrocarbonetos. Rica em cido cinmico, a manteiga de karit atua como um filtro solar natural, auxiliando na proteo da pele e dos cabelos contra a radiao UV. Ela ainda pode ser usada para potencializar o efeito de outros filtros. Por conter uma boa quantidade de tocoferis, a manteiga de karit tem propriedades antioxidantes e um excelente emoliente, e tal como as gorduras vegetais, exerce uma ao protetora sobre a pele, prevenindo contra o ressecamento. Alm dessas propriedades, a manteiga de karit melhora o aspecto e a consistncia das emulses e proporciona um toque aveludado e uma agradvel sensao de emolincia pele (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; SPECTRUM, 2011; MAPRIC, 2011).

2.3.2.5 Tensoativos

Os tensoativos so substncias de origem natural ou sinttica que apresentam estrutura qumica com pores hidroflicas e lipoflicas distintas, portanto compostos anfiflicos. Tendem a acumular-se na fronteira entre as fases leo e gua devido sua estrutura qumica, diminuindo a tenso interfacial entre essas, facilitando a formao de emulses, prevenindo assim fenmenos de instabilidade, e conseqentemente uma possvel separao de fases (MAPRIC, 2011). A interao das fases polar e apolar em uma emulso favorecida pela presena de tensoativos na formulao, uma vez que promovem uma reduo da energia livre do sistema no qual esto presentes. Os agentes tensoativos foram classificados de acordo com o equilbrio entre as regies hidro e lipoflica da molcula. Existem estudos que confirmam a contribuio do uso em conjunto de tensoativos com caractersticas de liofilia diferentes para obteno de emulses estveis (AULTON, 2005; MORAIS, 2008).

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As propriedades dos tensoativos so caractersticas da estrutura qumica de cada representante, onde se destacam a detergncia, a umectncia ou molhabilidade, a formao, estabilizao, quebra ou supresso de espuma, e a emulsificao. Alguns tensoativos apresentam a propriedade de detergncia a qual, quando presentes em soluo, refletem na habilidade de interagirem com substncias slidas, dispersas ou solubilizadas, dispostas em uma superfcie. A aplicao de tensoativos pode levar a inflamao induzida por interao direta da superfcie epidrmica com queratincitos, o que resulta na liberao de citocinas. Alm de seu potencial irritante, tensoativos tambm podem esgotar lipdeos intercelulares do estrato crneo, resultando em desidratao do mesmo. Os diferentes efeitos de tensoativos sobre a pele (inflamao, direta, efeitos citotxicos e extrao de lipdios) podem prejudicar a funo de barreira da pele, mas este efeito sobre a permeao cutnea depende do tipo e da concentrao dos mesmos (MAHATO, 2007; OTTO; PLESSIS; WIECHERS, 2009). Os tensoativos podem ser classificados de acordo com sua poro estrutural polar em aninicos, catinicos, no-inicos e anfteros. Os alquilsulfatos, alquilsulfonatos, as etanolaminas e os sarcosinatos so exemplos de tensoativos aninicos. Os principais representantes da classe dos tensoativos catinicos incluem os quaternrios de amnio, enquanto que os derivados de imidazolina e as betanas so os tensoativos anfteros mais utilizados pela indstria cosmtica. Dentro da classe dos no-inicos, destacam-se os steres de sorbitano, os steres de glicerol e de sacarose, as etanolaminas de cido graxo de coco, e os steres de polietilenoglicol (ZHANG; SUN, 2004; LAWRENCE; WARISNOICHAROEN, 2006). Uma classe importante de tensoativos no-inicos so os polissorbatos, tambm conhecidos pelo nome de Tween, tensoativos derivados dos steres de sorbitol e obtidos a partir da reao de esterificao entre cidos graxos, sorbitol e o xido de etileno (BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; MAPRIC, 2011).

2.3.2.6 Carbmeros Carbmero um termo utilizado para designar uma srie de polmeros (Carbopol 910, 934, 934P, 940, 941, 980 entre outros) formados por monmeros de cido acrlico e polisteres de polialquila ou divinilglicol com grande nmero de ligaes cruzadas moleculares, os quais diferem em peso e viscosidade. Estes polmeros inicos possuem capacidade de espessar e inibir a coalescncia da fase oleosa de emulses, auxiliam na suspenso de slidos insolveis em um lquido e no controle da consistncia e fluidez de cosmticos e produtos de higiene pessoal. utilizado tambm para fabricao de produtos em

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gel. Os carbmeros so sensveis a variaes de pH, adquirindo consistncia em pH neutro a alcalino (GODDARD; GRUBER, 1999; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; FLORENCE; ATTWOOD, 2003).

2.3.2.7 Derivados de celulose

Os polmeros derivados da celulose esterificada so substncias hidroflicas, tendo como representantes a metilcelulose, a hidroxietilcelulose (HEC), a hidroxipropilcelulose (HPC), a hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) e carboximetilcelulose (CMC). (GODDARD; GRUBER, 1999; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; FLORENCE; ATTWOOD, 2003). Quanto maior o comprimento da cadeia polimrica dos derivados de metilcelulose, maior a viscosidade proporcionada soluo da qual fazem parte. Estes ingredientes so substncias no inicas estveis em faixa de pH de 3,0 a 11,0; solveis, em sua maioria, em gua fria utilizadas na formao de gis, produzidos geralmente em temperatura aproximada de 50 oC. A hidroxietilcelulose, tambm conhecida como hidroxietilter de celulose ou Natrosol, possui grupos hidroxietila ligados s cadeias de celulose, sendo um dos polmeros mais utilizados para a fabricao de gis (COSMETIC INFO, 2011). A celulose microcristalina uma substncia composta de cristais de dimenses coloidais, dispersvel em gua, utilizada para a produo de gis e como agente dispersante geralmente em combinao com outros polmeros da celulose (GODDARD; GRUBER, 1999; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001; FLORENCE; ATTWOOD, 2003).

2.3.2.8 Polissacardeos

So polmeros formados por cadeias volumosas de sacardeos ligados entre si. Os principais agentes desta classe de substncias so o amido, a goma arbica, xantana, adragante e os alginatos. A goma arbica apresenta ao oclusiva, emoliente e adesiva e tem sido utilizada principalmente como agente espessante. frequentemente combinada a outros polissacardeos como o amido e a goma adragante. Os alginatos so polmeros lineares de massa molecular elevada, utilizados na forma de sais, que possuem ao suspensionante, com estabilidade em faixa de pH de 5,0 a 9,0 (GODDARD; GRUBER, 1999; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001 ; FLORENCE; ATTWOOD, 2003).

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2.3.2.9 Derivados polivinlicos

Os polivinillcoois so polmeros hidroflicos, constitudos por monmeros de vinillcool. Estes insumos so utilizados para aumentar a espessura da fase oleosa de emulses e para promover a formao de filme na superfcie aplicada. Nesta classe incluemse a polivinilpirrolidona (PVP) e os polietilenoglicis (PEG). O PVP um polmero noinico, linear, com alta polaridade, compatvel com uma srie de resinas e age como estabilizante de emulses em cremes e loes. Os PEGs so produtos de condensao de xido de etileno e uma molcula de glicol que apresentam variao de 1 a 185 subunidades monomricas em sua estrutura qumica. A maioria dos polmeros PEG so solveis em gua e as propriedades que permitem o seu uso so aumento de consistncia, umectncia e a habilidade de alguns PEG atuarem como tensoativos no-inicos (GODDARD; GRUBER, 1999; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001 ; FLORENCE; ATTWOOD, 2003).

2.3.2.10 Silicones

Os silicones so ingredientes compostos de silcio que possuem propriedades de lubrificao, umectao, condicionamento, e formao de filmes finos na superfcie aplicada. Estes polmeros apresentam cadeia com flexibilidade molecular acentuada e adquirindo conformaes espaciais que favorecem a insero de diversos grupos substituintes em sua molcula. A partir desta propriedade, possvel obter-se muitos compostos derivados, os quais apresentam diversas funes nas emulses (OLENICK, 2000; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001). Os dimetilsiloxanos, derivados polimricos do silicone, podem ser divididos de acordo com sua estrutura qumica em dimeticonas e em dimeticonis. As principais propriedades destas substncias envolvem a sua capacidade de serem fludos transparentes e incolores, o que permite o desenvolvimento de formulao de produtos transparentes, e a baixa tenso superficial, a qual promove espalhamento uniforme e resulta na formao de filmes finos. Outras propriedades relevantes dos dimetilsiloxanos so a permeabilidade a gases, a capacidade de gerar polmero hidrofbico, resistente a umidade, e, devido a esta caracterstica, a resistncia a lavagem por gua (OLENICK, 2000; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001). Os silicones fenil modificados, como a fenil trimeticona, so substncias transparentes

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derivadas dos dimetilsiloxanos, e diferem destes por apresentar radicais fenilados em sua estrutura qumica em lugar aos grupos metila. As principais propriedades destes tipos de silicones so o carter hidrofbico, o alto ndice de refrao, que pode resultar em aumento do brilho do produto, a emolincia na pele e cabelos, e a baixa tenso superficial, que promove espalhamento uniforme e formao de filme fino quando em contato com uma superfcie. Este tipo de silicone apresenta ainda volume molecular grande e ocorrncia de interaes intermoleculares reduzida, o que proporciona maior lubrificao no local onde aplicado (OLENICK, 2000; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001). Os silicones do tipo alquil-alcxi modificados se caracterizam por apresentar estado fsico lquido, como a lauril dimeticona, ou pastoso, em forma de cera, como a estearil dimeticona e a estearoxi dimeticona. As principais propriedades deste grupo de silicones so a hidrofobicidade, a capacidade de modificar as caractersticas reolgicas, o que aumenta a estabilidade do produto, e de causar hidratao por formar barreira oclusiva na pele (OLENICK, 2000; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001). As resinas so tipos de silicones que apresentam caractersticas de formar filmes resistentes gua e modificar as caractersticas reolgicas da formulao. Os elastmeros, como o cilcopentasiloxano copolmero cruzado de dimeticona/viniltrimetilsiloxisilicato, so utilizados como gel em dimeticona de secagem rpida ou instantnea. As suas propriedades principais so a capacidade de reduzir a viscosidade dos gis, serem translcidos e no emulsionveis, promover o espessamento da fase oleosa das emulses, proporcionarem resistncia a gua e aderncia aos ps e diluentes em p (OLENICK, 2000; BAREL; PAYE; MAIBACH, 2001).

2.4 ESTABILIDADE DAS EMULSES

As emulses so sistemas considerados metaestveis dada a tendncia natural das fases se separarem medida que as gotas dispersas comeam a se fundir (coalescncia) (PATRAVALE; MANDAWGADE, 2008). A estabilidade consiste em o sistema reter suas caractersticas iniciais, com as gotas dispersas permanecendo uniformemente distribudas por toda a fase contnua. A estabilidade controlada pelas propriedades do filme interfacial, formado entre a fase aquosa e oleosa, e pelas caractersticas fsico-qumicas da camada de adsoro formada na superfcie dos glbulos dispersos. Esse filme pode induzir a foras estricas e eletrostticas repulsivas entre glbulos prximos. A adio de tensoativos permite

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a formao de uma monocamada adsorvida interface de uma dupla camada inica, que pode ser formada ao redor dos glbulos (CAPEK, 2004). Uma emulso estvel quando o sistema retm suas caractersticas iniciais e permanecem uniformemente distribudos por toda a fase contnua. A separao de uma emulso em seus constituintes denominada quebra. Qualquer agente que destrua a filme interfacial quebrar a emulso. Fatores que desestabilizam uma emulso incluem adio de substncias incompatveis com o agente emulsificante, crescimento bacteriano, mudana de temperatura (acima de 70C) destri a maioria das emulses e o congelamento, pois rompido o filme interfacial que cerca as gotculas. (AULTON, 2005). As principais etapas do processo de instabilidade observado em emulses so: floculao, cremeao, coalescncia e inverso de fases. A floculao envolve a agregao das gotculas dispersas em agregados frouxos dentro da emulso, uma simples agitao pode reverter o processo O processo de cremeao ou creaming consiste na separao das duas fases da emulso em resposta ao da gravidade. Coalescncia, um processo irreversvel onde dois glbulos se unem tornando-se um nico glbulo. A inverso de fases ocorre quando um sistema O/A inverte para A/O ou vice-versa. (BUCHMANN, 2001; AULTON, 2005; MORAIS, 2008). A Figura 4 mostra as quatro formas de instabilidade das emulses.

Figura 4 - Sistema de ilustrao dos diferentes tipos de instabilidade de emulses

Fonte: Adaptado de MAHATO, 2007.

Cada componente, ativo ou no, pode afetar a estabilidade de um produto. Variveis relacionadas formulao, ao processo de fabricao, ao material de acondicionamento e s

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condies ambientais e de transporte tambm podem influenciar na estabilidade do produto (BRASIL b, 2004). Os aspectos considerados na estabilidade so fsicos, qumicos e microbiolgicos, pois necessrio garantir que qualquer sistema emulsionante usado seja fsica e quimicamente compatvel com a substncia ativa e os demais componentes da emulso (AULTON 2005; BRASIL a, 2007), e que caractersticas microbiolgicas sejam mantidas sob controle com uso de agentes conservantes.

2.4.1 Estudo de Estabilidade

O estudo de estabilidade uma ferramenta para garantir a segurana e eficcia de produtos, fornecendo informaes que indicam o grau de estabilidade relativa de um produto nas variadas condies a que possa estar sujeito, desde sua fabricao at o trmino da sua validade. Essa estabilidade relativa, pois varia com o tempo e em funo de fatores que aceleram ou retardam alteraes nos parmetros do produto (TADROS, 2004). As alteraes podem ser classificadas como extrnsecas, quando determinadas por fatores externos (tempo, temperatura, luz, oxignio, umidade, material de acondicionamento, micro-organismos, vibrao) ou intrnsecos, quando determinadas por fatores inerentes formulao (incompatibilidade fsica, incompatibilidade qumica) (BRASIL, 2004). As avaliaes fsico-qumicas so importantes para pesquisar alteraes na estrutura da formulao, e nem sempre so perceptveis visualmente. As sugeridas so: valor de pH, viscosidade, teor de gua, tamanho de partcula, centrifugao, densidade, granulometria, condutividade eltrica, umidade e teor de ativo (BRASIL, 2004) Quando necessrias diferentes tcnicas analticas podem ser utilizadas na determinao quantitativa dos componentes da formulao, tais como: ensaios de via mida (metodologias diversas), espectrofotometria no Ultravioleta-Visvel (UV-VIS) e infravermelho (IV), cromatografia (camada delgada, gasosa e lquida de alta eficincia), eletroforese capilar, entre outras, cabendo ao formulador avaliar a necessidade e adequao do produto a outra tcnica (BRASIL, 2004). O formulador deve avaliar a necessidade e caractersticas dos testes a serem realizados bem como interpretao dos dados obtidos durante o estudo de estabilidade. A compreenso dos processos de instabilidade em uma emulso em nvel molecular est longe de ser alcanado, para o qual necessrio desenvolver mtodos de avaliao de cada processo e tentar prever a estabilidade fsica das emulses em longo prazo (TADROS, 2004).

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Dentre as tcnicas convencionais de anlise em estudos de estabilidade temos: anlises macroscpicas e microscpicas, avaliao organolptica, centrifugao, potencial

hidrogeninico (pH) e teste de estabilidade preliminar. Em suma, ao final dos estudos, o produto dever manter a funo especfica para o qual designado. A conservao desta funo essencial para garantir a eficcia e segurana de um produto (ANSEL, 2000). Quase todos os materiais macroscpicos ou particulados em contato com um lquido adquirem uma carga eltrica em sua superfcie. Para predizer a estabilidade, o potencial zeta um indicador importante e til deste encargo, que pode ser usado para prever e controlar a estabilidade (MALVERN, 2005; LIAO; WU; LIAO, 2009). O tamanho da partcula e distribuio granulomtrica so, tambm, parmetros muitas vezes extremamente importantes e que podem ajudar a manter um produto mais estvel. Um controle cuidadoso do tamanho das partculas pode reduzir a necessidade de modificaes no processo e evitar o retrabalho (JEONG; KIM, 2001; MALVERN, 2005; LIAO; WU; LIAO, 2009).

2.5 ESTRATGIAS DE FORMULAO

As estratgias de formulao podem ser divididas em: controle do tamanho de partcula, revestimento de partculas, mtodos de incorporao e nanoencapsulamento por materiais lipdicos.

2.5.1 Controle do tamanho de partcula

At a dcada de 1990, os filtros inorgnicos, particularmente o xido de zinco e o dixido de titnio, no eram bem aceitos por problemas estticos e estavam longe de produzirem formulaes cosmeticamente atrativas, pois se encontravam disponveis apenas em pastas grossas coloridas ou brancas, em especial o xido de zinco (MITCHNICK; FAIRHURST; PINNELL, 1999; PALM; ODONOGHUE, 2007). Esses possuam partculas que variavam de 100 - 500 nm, muito eficazes, mas cosmeticamente, por serem excessivamente opacos, no tinham uma boa aceitao pelo usurio (GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). Parmetros sensoriais tornaram-se cada vez mais importante para a diferenciao do produto (REETH, 2005).

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Oportunamente, no incio de 1990, formas micronizadas de ambos os xidos metlicos foram desenvolvidas, com um tamanho mdio de partcula de 10-50 nm, tendo 50-90% de reduo do tamanho da partcula original (GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). A diminuio no tamanho das partculas, chamadas micronizadas ou ultrafinas, melhorou o apelo esttico dos xidos metlicos, sendo uma excelente opo para as formulaes, fazendo o novo produto mais transparente luz visvel, uma vez que no refletem no espectro. No entanto, esta mudana no tamanho tambm desloca a luz dos espectros de absoro do ZnO e TiO2 micronizados, parcialmente para fora da regio UV e ao invs de bloquear comprimentos de onda mais longos na faixa do visvel, a partcula micronizada causa atenuao de comprimentos de onda mais curtos a partir de UVA a UVB (PALM; ODONOGHUE, 2007). Por esse motivo, desde 1999, quando o FDA permitiu a utilizao de nanopartculas em protetores solares, houve uma controvrsia sobre a segurana da sua utilizao (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). Quando o tamanho da partcula menor, sua fotorreatividade aumenta, reforando a idia de que as propriedades de superfcie dos filtros inorgnicos influenciam diretamente na sua toxicidade (JING et al., 2001). preciso ter cuidado na formulao com partculas micronizadas de filtros inorgnicos, pois, quanto menor seu tamanho, mais susceptvel ser ao processo de aglomerao, em que as partculas pequenas perdem propriedades dispersivas (TANNER, 2006; GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009; RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010).

2.5.2 Revestimento de partculas

Partculas de TiO2 e ZnO revestidas so tipicamente utilizadas em formulaes de cosmticos e protetores solares. Esse processo de revestimento modifica todas as propriedades de superfcie, inibe ou reduz a gerao de EROs em resposta ao fotocataltica ativada pela exposio luz solar (SCHILLING et al., 2010; SAMBANDAN; RATNER, 2011). O revestimento permanece estvel mesmo sob condies de teste exagerado (SCHILLING et al., 2010), mas no se deve eliminar as preocupaes sobre a ativao dos filtros inorgnicos micronizados pela ao da luz solar. O revestimento de partculas de xidos de zinco e titnio com slica, por exemplo, permite-lhes coexistir em uma suspenso estvel em valores de pH que poderiam causar a precipitao das partculas no revestidas (TSUZUKI et al., 2009).

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2.5.3 Mtodos de incorporao

Devido s dificuldades de formulao de protetores solares base de filtros inorgnicos, tem-se procurado formas de otimizar a incorporao desses filtros ao veculo utilizado para que resultem em um sistema estvel e em um protetor solar de alto FPS. Sistemas pr-dispersos vm sendo usados para formular protetores solares com amplo espectro (UVA e UVB) e elevado FPS, permitindo uma formulao de protetores solares inorgnicos com caractersticas irritantes muito baixas, e que no exigem o uso de filtros orgnicos. Fornecem, ainda, alta transparncia e baixo efeito de branqueamento sobre a pele (ANTARIA, 2010). Estes sistemas consistem de uma disperso homognea de micropartculas de filtros inorgnicos com um revestimento hidrofbico. Podem ser incorporado aos veculos com excelente estabilidade contra floculao ou decantao. Por exemplo, ZinClear-IM, uma disperso de ZnO em veculo oleoso, geralmente deve ser usado 2% o que representa 1% de ZnO adicionado, quando incorporado formulao fornece cerca de 1,5 unidade de FPS, sendo que algumas formulaes podem aumentar at 2 unidade de FPS (ANTARIA, 2010). O fator-chave na produo de um protetor solar com FPS alto usando ZinClear -IM obter a formulao correta. Em formulaes que visam apenas proteo solar inorgnica necessrio usar entre 30-40% de ZinClear-IM (15-20% de ZnO) para resultar em um FPS 30+, dependendo da formulao. Nesta quantidade, se a formulao for adequada, no deve ser observado branqueamento da pele, que normalmente associado com partculas inorgnicas tais como dixido de titnio ou outros produtos com xido de zinco micronizado usados atualmente. Para aperfeioar a transparncia de ZinClear-IM aconselha-se comear a formulao com um sistema base de emulso que no vai deixar uma pelcula branca sobre a pele antes da adio de ZinClear-IM. A propriedade transparente de ZinClear -IM em formulaes melhor observada depois que o filme secar sobre a pele. Se houver branqueamento da pele, pode ter ocorrido a escolha e adio inadequada de emulsificante na formulao bsica. Pequenas quantidades de silicone podem ajudar a reduzir esse efeito. A escolha do emulsificante tambm importante porque formulaes no-inicas de protetores solares so compatveis com xido de zinco, mas alguns emulsificantes aninicos podem causar instabilidade devido s interaes com Zn2 +. Formulaes catinicas tambm so compatveis (ANTARIA, 2010). Como o ZinClear-M no penetra na pele como alguns filtros UV orgnicos, a

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formao de uma espessura consistente sobre os contornos da pele essencial para uma maior eficincia no FPS. A adio de produtos como o polietileno, cera de abelha, silicone e outros formadores de filme auxiliam na melhoria e desempenho do FPS do protetor solar final. Alguns espessantes e formadores de filme podem resultar em problemas de formulao. A maioria dos cidos carboxivinlicos (poliacrilatos de sdio) sensvel aos ons de zinco, formando complexos de zinco que perturbam a eficincia dos espessantes. Espessantes noinicos, como goma xantana, so geralmente estveis. Outras espcies que podem reagir com os ons de zinco, tais como o estearato de sdio, devem ser evitados, especialmente em formulaes de menor faixa de pH. Foi constatado que NaCl na fase aquosa pode ser usado para estabilizar a emulso causando menos problemas na formulao. Emulsionantes noinicos devem ser utilizados em vez de cido graxo solvel em sais e gua (ANTARIA, 2010).

2.5.4 Nanoencapsulamento utilizando materiais lipdicos

Recentemente, modernas abordagens, tais como o encapsulamento de nanopartculas, tm permitido o desenvolvimento de protetores solares inorgnicos de alta qualidade. Uma delas a combinao de TiO2 com cera de carnaba extrada das folhas de Copernicia prunifera (Mill) H.E. Moore, Arecaceae, a qual contm cinamatos que promovem uma ao sinrgica resultando em uma disperso estvel, de viscosidade ideal, e um aumento significativo no FPS. Alm disso, a cera de carnaba aumenta a proteo contra eritema UVA-induzido (VILLALOBOS; MULLER, 2005, VILLALOBOS; MULLER, 2006a; VILLALOBOS; MULLER, 2006b; VILLALOBOS; MULLER, 2007). Em 2005, Villalobos e Mller caracterizaram sistemas de veculos para atenuadores de radiao UV como o dixido de titnio, sulfato de brio e carbonato de estrncio, baseados em uma matriz composta de cera de carnaba e oleato de decila, utilizadas como cpsulas ou como veculos de acompanhamento para os pigmentos inorgnicos em disperses aquosas. A encapsulao de nanocristais inorgnicos carreados pelas matrizes lipdicas aumentou o FPS intrnseco das substncias inorgnicas testadas, sendo que o dixido de titnio foi particularmente favorecido por esse processo em virtude da sua capacidade de absoro UV, tendo sido observado um aumento no seu FPS at cerca de 50. As matrizes lipdicas de cera/leo favoreceram ainda a estabilidade da formulao, em todos os casos por aumentar a viscosidade do sistema (VILLALOBOS; MULLER, 2005). De acordo com estudos realizados por Villalobos e Mller (2006a), matrizes lipdicas

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de cera de carnaba/oleato de decila com menor carga de filtros inorgnicos so termodinamicamente mais estveis do que aquelas com maiores quantidades. Inclusive, o tamanho mdio de partcula e os ndices de polidisperso das nanosuspenses no se alteraram mesmo aps estoques de seis meses aos 20 e 40 C. A fim de caracterizar os mecanismos da interao sinrgica entre os cinamatos da cera de carnaba e o dixido de titnio que promovem um aumento do FPS, Villalobos e Mller (2006b) compararam a absoro UV e o FPS de um extrato etanlico da cera de carnaba e de uma soluo etanlica do cinamato de etil etila, um derivado de cinamato tpico, sozinhos e na presena de dixido de titnio (VILLALOBOS; MULLER, 2006b). As solues de cinamatos, bem como os cristais de TiO2, foram distribudos em uma matriz composta de cidos graxos saturados para simular a estrutura da cera de carnaba cristalizada. Foi observada uma forte absoro UV em suspenses diludas de dixido de titnio aps a adio de cinamatos, sendo que as matrizes de cidos graxos saturados provavelmente favoreceram a adsoro do cinamatos na superfcie de cristais de dixido de titnio, o que foi refletido por um aumento no FPS (VILLALOBOS; MULLER, 2006b).

2.6 CARACTERIZAO DE PROTETORES SOLARES

2.6.1 Anlise do tamanho de partcula

Tcnicas aperfeioadas recentemente so de extrema valia para caracterizao in vitro da estabilidade e eficcia de protetores solares base de sistemas emulsionados. Dentre estas tcnicas pode-se citar a anlise de tamanho de partcula, potencial zeta e espectroscopia fotoacstica. Tamanho da partcula uma caracterstica geomtrica geralmente atribuda a objetos materiais com tamanhos em escala de nanmetros para milmetros. O tamanho mdio das partculas de uma emulso determina a probabilidade da ocorrncia de fenmenos como floculao e coalescncia. Geralmente, quanto menor o tamanho das partculas dispersas, maior a estabilidade do sistema (JEONG; KIM, 2001). A ausncia de aglomerados evidncia de uma suspenso mais estvel, o que refletido normalmente em uma baixa viscosidade (CERRUTI, 2010). A intensidade do espalhamento tambm dependente do tamanho, diminuindo com o volume da partcula. Se o tamanho das partculas diminui, o ngulo espalhado aumenta

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logaritmicamente. Partculas grandes espalham a luz com ngulos pequenos e com alta intensidade, enquanto as pequenas partculas espalham a luz com ngulos maiores e com menor intensidade (KIPPAX, 2005). As ondas difratadas so espalhadas em diversas direes. A direo da disperso depende do tamanho e da forma da partcula. As partculas grandes e esfricas espalham geralmente na direo frontal, sendo que com tamanho menor, o espalhamento ocorre com um ngulo maior. O espalhamento um fenmeno complexo e influenciado pela natureza da luz incidente, propriedades ticas da partcula, rugosidade e superfcie (KIPPAX, 2005). A tcnica de espalhamento de luz dinmico (Dinamic Light Scattering- DLS) utilizada para medir o tamanho de partculas na faixa de nanmetros e micrmetros. O movimento aleatrio de pequenas partculas em um fluido, com consequentes choques das molculas do fluido nas partculas, conhecido como Movimento Browniano. Partculas maiores se movimentam mais lentamente que as menores se a temperatura a mesma. Quando uma fonte de luz monocromtica e coerente como um laser, com freqncia conhecida incidida sobre partculas em movimento, a luz espalhada, mas em uma freqncia diferente. Essa mudana de frequncia chamada de Efeito Dopller. Dessa forma, relaciona-se o tamanho das partculas com a mudana na frequncia da luz. Devido maior velocidade mdia de partculas menores, h uma maior mudana na frequncia comparada a partculas maiores e essa diferena que usada para caracterizar um histograma de distribuio de tamanho de partculas (MALVERN, 2005; DLS, 2008; MURDOCK, et al., 2008).

2.6.2 Potencial zeta

A carga eletrosttica de superfcie das partculas chamada de potencial zeta. O potencial zeta no pode ser medido diretamente, mas atravs do campo eltrico que se cria em torno da partcula. Assim, usa-se algum tipo de medida indireta, a partir da qual se calcula o potencial zeta. A medida de potencial zeta til, simples e rpida na avaliao da estabilidade, indicada para otimizao de formulaes de suspenses ou emulses, previso da estabilidade das formulaes e diminuio do tempo necessrio para triagem de formulaes. (MALVERN, 2005). Toda superfcie de partcula possui tendncia a adsorver cargas eltricas quando imersas em um fluido, pois ocorre uma srie de processos que faz com que a interface tornese eletricamente carregada. Estes processos levam produo de uma densidade de carga de

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superfcie, e a frao destas cargas eltricas adsorvidas medida em funo do potencial eltrico que surge na interface (MALVERN, 2005; CAI et al, 2006). O potencial zeta depende de vrios fatores, tais como a composio qumica da superfcie das partculas, a composio do solvente circundante, o valor do pH do ambiente e ons na suspenso (LIAO; WU; LIAO,2009). O potencial zeta ocorre a uma distncia da superfcie da partcula. medida em que aumenta a distncia entre as partculas, o potencial zeta decai exponencialmente (Figura 5).

Figura 5 - Aproximao de potencial zeta em funo da distncia entre a superfcie das partculas

Fonte: Adaptado de MALVERN, 2005.

A principal rea de aplicao do potencial zeta na compreenso da estabilidade e dos efeitos de floculao de emulses e suspenses. O modelo mais simples desses fenmenos surge com a teoria DLVO (Deryaguin-Landau-Verwey-Overbeek). Isto indica simplesmente que a estabilidade do coloide um equilbrio entre as foras de atrao de Van der Waals e da repulso eltrica, devido carga de superfcie. Se o potencial zeta cai abaixo de certo nvel, o coloide ir agregar, devido s foras atrativas. Por outro lado, um potencial zeta alto mantm um sistema estvel (CAI et al., 2006). Portanto, na determinao de resultados de potencial zeta, se o valor obtido for alto, indica que as partculas se repeliram, ou seja, h uma maior estabilidade da disperso. J casos de resultados com valores baixos, representam instabilidade na disperso, visto que as partculas se aproximaram umas das outras at se agregarem. O potencial eltrico, gerado pela dupla camada eltrica, dado em valores mdios positivos ou negativos (em mdulo) que

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significam maior quantidade de cargas de mesmo sinal sobre a superfcie das partculas, o que leva uma maior repulso eletrosttica entre as mesma e conseqentemente, maior estabilidade (MALVERN, 2005; MORAIS, 2009). Em outras palavras, a magnitude do potencial zeta d uma indicao do potencial de estabilidade do sistema coloidal. Todas as partculas de uma emulso tm uma carga positiva e uma negativa, se elas se repelem no h tendncia floculao; no entanto, se as partculas tm valores baixos de potencial zeta, ento no h fora para impedir que as partculas se unam e floculem (MORAIS, 2009). A concentrao dos componentes da formulao, a condutividade eltrica e o pH so os fatores que afetam o potecial zeta, mas dentre estes o fator mais importante o pH. Quanto mais alcalina a emulso, mais as partculas tendem a adquirir uma quantidade maior de cargas negativas. Se cido adicionado esta suspenso, um ponto ser alcanado onde a carga negativa neutralizada. Qualquer acrscimo adicional de cido pode causar um acmulo de carga positiva. Portanto, um potencial zeta versus a curva do pH ser positivo em pH baixo e negativo em pH alto (ELAKNESWARAN; NAWA; KURUMISAWA, 2009). A linha geral do potencial zeta divide-se em: suspenses estveis e instveis e geralmente tomada em cada 30 mV ou -30 mV. Partculas com potencial zeta mais positivo do que 30 mV ou mais negativas que -30 mV so normalmente consideradas estveis, como representado na Figura 6. Estudos demonstraram que a emulso em si, em um pH de 7,0 e baixa concentrao de eletrlitos, apresenta um potencial zeta de -40 a -50mV, o que suficiente para proporcionar adequada estabilidade e uma vida til de pelo menos 2 anos (MALVERN, 2005).

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Figura 6 - Representao esquemtica da estabilidade relacionada aos valores de potencial zeta.

Fonte: Adaptado de MALVERN, 2005.

2.6.3 Espectroscopia fotoacstica

A Espectroscopia Fotoacstica, em geral conhecida pela sigla PAS- Photo Acoustic Spectroscopy uma tcnica verstil que permite a obteno de espectros de absoro ptica de slidos, semi-slidos, lquidos e gases, possibilitando a anlise de amostras tanto opticamente opacas quanto transparentes. O efeito fotoacstico consiste na gerao de uma onda acstica, e pode ser observado quando a luz modulada absorvida por uma amostra dentro de uma clula fechada contendo gs, podendo ser o prprio ar, e que est acoplada a um microfone. A luz absorvida e transformada em energia trmica por processos de desexcitao no radioativos. O aquecimento peridico da amostra gera uma onda de presso no gs em contato com a mesma. Essa variao de presso detectada pelo microfone que resulta no sinal fotoacstico, e a intensidade do sinal gerado depender da freqncia de modulao da luz incidente. Os diferentes mecanismos pelos quais os pulsos de calor produzidos na amostra geram ondas acsticas no gs so: difuso trmica, expanso trmica, flexo trmica e efeito fotobrico. O modelo padro de clula fotoacstica, proposto por Rosencwaig e Gersho (modelo RG), consiste de uma pequena clula com gs, com uma amostra slida colocada dentro dela,

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a uma distncia lg de uma janela de vedao transparente. Atravs da janela incide-se um feixe de luz modulada. Nas paredes laterais da clula inserido um microfone capacitivo que capta as conseqentes flutuaes de presso no gs, provocada pela transferncia de calor oriundo do aquecimento peridico do slido. O que caracteriza a tcnica a obteno de espectros de absoro ptica gerados pelo sinal fotoacstico devido interao da matria com uma radiao modulada de comprimento de onda conhecido. A amplitude e a fase so os principais parmetros em medidas experimentais com a tcnica fotoacstica. A intensidade do sinal depende linearmente da potncia luminosa, relacionando-se com o inverso da temperatura no meio, com o inverso do comprimento da coluna de gs, e proporcional ao perfil de temperatura na interface amostrags. A intensidade relaciona-se diretamente com as propriedades de absoro, difuso e profundidade da amostra onde a radiao absorvida, j que o perfil de temperatura depende da quantidade de radiao transformada em calor . Na tcnica fotoacstica o sinal produzido depende da radiao efetivamente absorvida pela amostra sob estudo, desta forma sua aplicao em fotoprotetores torna-se interessante, pois permite a obteno do espectro de absoro UV do protetor solar.

2.7 APLICAO DE NOVOS MATERIAIS COMO FILTRO SOLARES INORGNICOS: HIDROXIAPATITA

As controvrsias existentes acerca da eficcia e segurana dos filtros solares tm motivado pesquisas em busca de abordagens que visem melhorar o desempenho dos fotoprotetores. A tendncia a procura por novos materiais que possam ser usados como filtros solares e que sejam adequados e seguros (SAATAH, 2006; ARAJO; SOUZA, SOUSA, 2010; SAMBANDAN; RATNER, 2011). No obstante, uma srie de novos agentes tm sido apontada como alternativa ao desenvolvimento de protetores solares (RAI; SRINIVAS, 2007). Em relao aos filtros inorgnicos, atualmente maior enfoque tem sido dado hidroxiapatita (HAP), conhecida por fazer parte de um grupo de minerais chamados apatitas. Possui frmula qumica Ca10(PO4)6(OH)2 (LIMA, 2006; MIYAHARA; GOUVA; TOFFOLI, 2007; BATISTA, 2010; LIMA, 2010). A hidroxiapatita um composto j presente no corpo humano, sendo o principal componente mineral no tecido sseo. De fato, 99% do clcio no corpo humano armazenado

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no tecido sseo, na forma de hidroxiapatita (RIGANO, 2010). Amplamente utilizada como material ortopdico e dental, devido sua alta estabilidade e inrcia (BATISTA, 2010; LIMA, 2010). A incorporao deste mineral a produtos cosmticos agindo como filtro solar fsico viabilizada pela sua biocompatibilidade e ausncia de toxicidade (LIMA, 2006; ARAJO; LIMA; VALRIO, 2007; BATISTA, 2010; RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010). Alm disso, seu limite de absoro UV pode ser modulado para absorver na faixa desejada da UVB (290-320 nm) UVA (320-400 nm), simplesmente pela introduo de um dopping (RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010; ARAJO; SOUZA, 2010). Dopantes representados pelos metais de transio, como o Zn2+, Mg2+, Mn2+, Fe3+ e Cr3+, por exemplo, tendem a substituir os ons Ca2+ da rede da HAP recobrindo os cristais (RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010; ARAJO; SOUZA, SOUSA, 2010). Rigano (2010) demonstrou que a presena de pelo menos um metal melhora a capacidade de triagem da hidroxiapatita contra os raios UV. O processo de substituio inica da HAP pode ser realizado ainda com os metais de transio sob a forma de um sal de cido ltico, carbnico, actico, benzico, tartrico, ctrico, 3-hidroxipropinico, mlico, succnico, mandlico, saliclico ou cidos graxos lineares (C3 a C18). Alm de corroborar para o aumento da capacidade de proteo da HAP contra os raios UV, os metais, na forma de sal, tambm melhoram a disperso desta nas formulaes cosmticas, bem como sua distribuio e absoro na pele. Protetores solares base de HAP formulados dessa maneira provaram ser extremamente estveis e compatveis com a pele (RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010). Em suma, a eficcia dos filtros solares inorgnicos na preveno do envelhecimento cutneo precoce e cncer de pele tem sido largamente documentada. No h dvidas de que os filtros inorgnicos apresentam marcante atividade fotocataltica. Por essa razo, medidas de carter inibitrio, tais como revestimento dessas partculas, foram desenvolvidas visando garantir a segurana dos filtros solares. O ponto crtico neste fato que ainda no h uma regulamentao que obrigue os fabricantes de protetores solares a especificar o tipo de filtro utilizado em seus produtos. Ainda assim, a anlise das evidncias de penetrao percutnea e toxicidade dos filtros solares requerem cautela, pois se deve considerar alguns fatores extremamente relevantes, como por exemplo, o tipo de estudo a partir do qual foram tiradas as concluses, pois sabe-se que diversos fatores intrnsecos ao ensaio (espcies usadas, via de exposio, durao do experimento, concentrao de partculas, condies de luz) podem influenciar nos resultados

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toxicolgicos. claramente perceptvel que os estudos analisados, invariavelmente, determinaram o grau de toxicidade do TiO2 e ZnO em pele ntegra de animais ou em experimentos in vitro. Faltam, portanto, pesquisas que esclaream os potenciais de risco em pele no saudvel in vivo. Embora haja preocupaes justificveis sobre a segurana a longo prazo dos filtros solares inorgnicos, acredita-se que os benefcios que estes trazem ao proteger a pele contra os indiscutveis efeitos malficos da radiao UV, superam claramente os riscos potenciais. Tambm, o desvelo na elaborao da formulao de fundamental importncia para a obteno de um protetor solar seguro e eficaz, sendo indispensvel o conhecimento aprofundado sobre o comportamento fsico-qumico, compatibilidade entre os componentes da formulao, concentraes ideais destes alm de bons mtodos para a incorporao dos filtros inorgnicos ao produto final. No entanto, questes importantes permanecem, e admitese que mais pesquisas so necessrias. Frente a estas discusses, com o crescente investimento em pesquisas na busca por novos materiais que podem potencialmente ser aplicados como filtros solares e o desenvolvimento de fotoprotetores cada vez mais sofisticados, no h dvidas de que a segurana desses produtos ser considerada cada vez mais um parmetro de importncia primria a ser avaliado.

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OBJETIVOS

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3 OBJETIVOS

3.1 OBJETIVO GERAL

Desenvolver e caracterizar protetores solares base de filtros inorgnicos, mais especificamente, xido de zinco, dixido de titnio e hidroxiapatita, a fim de se obter um produto com baixo potencial de risco biolgico e alta proteo. 3.2 OBJETIVOS ESPECFICOS Avaliar a atividade fotocataltica de filtros inorgnicos em funo do tamanho e revestimento das partculas; Avaliar a influncia de excipientes na formulao, mais especificamente, excipientes que interferem na (i) estabilidade da formulao, (ii) incompatibilidade com filtros inorgnicos e (iii) FPS; Avaliar a influncia do mtodo de preparo da formulao;

Realizar a caracterizao fsico-qumica das formulaes de protetores solares;

Avaliar a influncia dos parmetros de formulao e mtodos de preparo por meio de anlise organolptica, pH, tamanho de partcula, potencial zeta na estabilidade fsica das formulaes desenvolvidas; Avaliar a influncia dos parmetros de formulao e mtodo de preparo na absoro/reflexo UV das formulaes desenvolvidas, por espectroscopia fotoacstica.

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MATERIAIS E MTODOS

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4 MATERIAIS E MTODOS

4.1 REAGENTES

Dixido de titnio puro (Synth- Lote 114575); dixido de titnio M195 revestido com slica (UNICHEM - Lote 0725003); dixido de titnio M212 revestido com alumina (UNICHEM - Lote 0808002); dixido de titnio micronizado (DEG - Lote K92195011); xido de zinco (Dinmica-Lote 30414); xido de zinco ultrafino - Nanox 200 (Via Farma Lote 7BBN0924); cido benzico (Natural Pharma - Lote 24299); cido saliclico (Vetec Qumica Fina - Lote 042939); cido ascrbico; cido ctrico (Vetec Qumica Fina - Lote 0707276); cido ltico (Vetec Qumica Fina- Lote 048808); cido gliclico 2% (DEG - lote 06067670); azul de metileno (Nuclear-Lote 06030383); Polawax (DEG - Lote CN5700111); Tween 80, Tween 20 (Synth - Lote 109058 e 109096); silicone SF voltil (Ciclomethicone) (Natural Pharma Lote 0002169624); fenoxietanol (Sigma Lote 119082011378867); miristato de isopropila (Synth Lote 112928); Triglicrides de cido cprico/caprlico (Synth Lote 129054); propilenoglicol (Dinmica Lote 29018); lcool cetlico (DEG- lote 06277720); manteiga de karit (DEG: lote CN084-1010); EDTA; gua destilada. A hidroxiapatita foi sintetizada por Ricardo Yoshimitsu Miyahara- Departamento de Fsica- UNICENTRO.

4.2 EQUIPAMENTOS E ACESSRIOS

Centrfuga (Bioeng modelo BE-5100); Balana eletrnica (Bioprecisa modelo FA 2104N); Espectrofotmetro UV-VIS 600 Plus (Femto) e cubetas de vidro; Agitador magntico (Edulab); Cmara escura equipada com lmpada UVA 15 Watts (T8 350 BL Silvania

Blackligth) e lmpada UVB 15 Watts (T8 BLB Sylvania Granligth); Microscpio ptico (Bioval); Microscpio ptico modelo Axioplan 2 (Carl Zeiss AG, Alemanha) acoplado a Pipeta automtica Kacil (1000 L);

cmera digital Axiocan HRc (Carl Zeiss AG, Alemanha);

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(Instrutherm);

Placas de Petri (dimetro 6 cm); Bquer, tubos de ensaio, pipetas de vidro,

lminas e lamnulas, gral e pistilo, esptulas; frascos plsticos para armazenagem; Manta aquecedora (Edulab); pHmetro modelo mPA-210; Estufa modelo G4023D (Gehaka); Refrigerador (Consul); Medidor de Luz Ultravioleta Digital UVA e UVB Modelo MRU-201

Zetasizer 3000 HSa (Malvern Instruments, Alemanha); Espectrofotmetro fotoacstico.

4.3 ESTUDO DE FOTOCATLISE

As anlises foram realizadas com base no mtodo descrito por RAMPAUL; PARKIN; CRAMER, (2007). TiO2 , ZnO e HAP foram misturados com soluo de azul de metileno (1x10-4 M) na proporo de 1:100 (m/v). As suspenses formadas foram agitadas por 24 h, ao abrigo da luz, para permitir o equilbrio. Uma alquota da suspenso (10 mL) foi transferida para uma placa de petri (6 cm de dimetro). Em seguida, as amostras foram irradiadas com uma luz UVA de 15 Watts (intensidade de radiao de aproximadamente 970 W.cm2) com emisso mxima de 365 nm, e UVB de 15 Watts (intensidade de radiao de aproximadamente 478 W.cm2) com emisso mxima de 290 nm, a uma distncia de 15 cm a partir de superfcie de mistura de reao. As anlises foram realizadas primeiramente com luz UVA, logo UVB e por ltimo UVA e UVB juntas. A cada intervalos de 30 min as amostras foram retiradas da irradiao e centrifugadas (3500 g/5 min) para remoo dos slidos. Em seguida, a soluo remanescente foi analisada em espectrofotmetro UV-VIS a 660 nm para determinao da concentrao de azul de metileno remanescente. Previamente s anlises de espectrofotometria, as amostras foram apropriadamente diludas, ou seja, para leitura da absorbncia entre 0,1 e 1,0. O controle foi realizado com azul de metileno sem filtro solar. A Figura 7 apresenta as variveis investigadas no estudo de fotocatlise. Todas as anlises foram realizadas em triplicata. A anlise estatstica teve seus resultados expressos como mdia desvio padro da

mdia (D.P.M.). A diferena entre dois grupos foi determinada por meio de teste t nopareado e entre vrios grupos pela anlise de varincia de uma-via (ANOVA). As anlises

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estatsticas foram realizadas com o programa Prism GraphPad. Um valor de P<0.05 foi considerado estatisticamente significativo.

Figura 7 Esquema das variveis analisadas no estudo de fotocatlise

4.3.1 Anlises dos resultados Os resultados foram expressos na forma de grfico tendo no eixo y a concentrao de azul de metileno no tempo t (C) dividida pela concentrao de azul de metileno no tempo 0 min. (C0), ou seja, C/C0, em funo do tempo de reao no eixo x. As concentraes de azul de metileno na presena dos filtros solares foram normalizadas pelas medidas realizadas com o azul de metileno, nas mesmas condies, porm, na ausncia dos xidos, com incidncia de luz UVA, UVB e UVA/UVB. O decrscimo na concentrao de azul de metileno est associado atividade fotocataltica dos compostos em questo.

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4.4 ESTUDO DE COMPATIBILIDADE DOS FILTROS SOLARES COM CIDOS ORGNICOS

Para verificar a compatibilidade com diferentes cidos orgnicos (cido benzico, saliclico, ctrico, ltico e gliclico, ascrbico) usados em produtos cosmticos, o ZnO, TiO2 e HAP foram colocados em contato com estas substncias em lmina/lamnula e observado em microscpio ptico acoplado a cmera digital com sistema de vdeo e aquisio automtica de imagem. O cido gliclico e ltico foram utilizados na forma pura por encontrarem-se no estado lquido. Solues saturadas dos cidos benzico, ctrico e saliclico foram previamente preparadas em meio aquoso conforme suas solubilidades e, em seguida, foram colocadas em contato com os xidos para verificar a formao de cristais. As solues saturadas foram preparadas com excesso de soluto agitado em gua por 24 h para atingir o equilbrio. Em seguida, as solues foram filtradas em papel de filtro para eliminar o excesso de soluto. As anlises foram realizadas a 25C. Os compostos que apresentaram incompatibilidades tambm foram testados para este fim (formao de cristais) no produto final, ou seja, em sistema emulsionado. Para avaliar a influncia das incompatibilidades na atividade fotocataltica dos filtros solares, foi necessria a padronizao de um mtodo de obteno dos cristais em maior escala. Os mtodos testados foram: precipitao seguida de filtrao pela variao de pH e adio de solvente (etanol), solubilizao e precipitao por evaporao de solvente. Neste ltimo, em um bquer, foi adicionado 1g de ZnO, 25 mL de gua e 4 ml de cido ltico. O mesmo foi feito para o cido gliclico. Foi mantido sob agitao com o auxlio de um agitador magntico at que a soluo passasse de turva a transparente. Distriburam-se as solues em placas de Petri e levou-se estufa pr-aquecida a 60C. Assim a gua evaporou e permaneceram na placa os cristais que anteriormente haviam sido solubilizados. (Figura 8). As placas de Petri contendo a soluo permaneceram na estufa por no mnimo 2 horas.

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Figura 8 - Esquema do mtodo para obteno de cristais.

4.5 DESENVOLVIMENTO DE FORMULAO

Os protetores solares foram desenvolvidos na forma de emulses O/A base de emulsionantes no inicos que possuem boa compatibilidade com a maioria das matriasprimas utilizadas em cosmticos e alto poder de reduo da tenso superficial e interfacial.

Foram desenvolvidas emulses de fotoprotetores pela metodologia convencional e formulaes a partir de uma pr-disperso de filtros inorgnicos em veculo oleoso que foram incorporadas posteriormente ao creme-base, para avaliao da influncia do mtodo de preparo nas caractersticas sensoriais, organolpticas, e estabilidade do produto final. Formulaes contendo manteiga de karit foram preparadas a fim de avaliar uma possvel sinergia com filtros inorgnicos que pudesse promover o aumento do FPS. Formulaes desenvolvidas com ZnO foram acrescidas de cido gliclico e cido ltico ao final para estudo de incompatibilidades.

4.5.1 Preparo do creme base no-inico

O creme base foi obtido pelo mtodo de clssico de emulsificao, mediante disperso de fase oleosa em fase aquosa fundidas separadamente uma temperatura entre 80-85C e 7580C, respectivamente. Posteriormente, a fase aquosa foi vertida sobre a oleosa, mantendo-se

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o sistema sob agitao constante e vigorosa at que atingisse o arrefecimento temperatura ambiente (25C) e adquirisse consistncia viscosa. O agente formador de filme foi adicionado aps resfriamento da emulso. As variveis de fase oleosa da formulao do creme base investigadas foram: Agente co-emulsionante no-inico, emoliente e formador de filme. A escolha dos componentes do creme base foi definida aps preparo de diversas formulaes, onde a variao dos excipientes e suas respectivas quantidades foram de fundamental importncia at ser selecionado o creme base final.

4.5.2 Avaliao da influncia do mtodo de preparo nas emulses

4.5.2.1 Preparo de pr-disperses

Os componentes foram pesados em balana analtica, na sequncia: agente veculo, seguido do agente molhante e transferido para um gral, sendo homogeneizados com o pistilo, em temperatura ambiente (25C). Logo, adicionou-se lentamente o filtro inorgnico seguido do agente formador de filme sob homogeneizao contnua at completa incorporao dos ingredientes. As pr-disperses foram desenvolvidas a base de ZnO micronizado, TiO 2 revestido com alumina, ZnO micronizado associado ao TiO 2 alumina, e por fim com hidroxiapatita. As variveis investigadas foram: veculo, agente molhante e agente formador de filme.

4.5.2.2 Mtodo de incorporao da pr-disperso de filtros inorgnicos ao creme base

A preparao dos fotoprotetores, incorporando ao creme-base diferentes concentraes de pr-disperso, teve como objetivo encontrar a concentrao mxima de filtros que apresentasse melhor resultado sensorial, fsico-qumicos e microscpicos sem causar perda de estabilidade do produto final. A incorporao se deu adicionando-se uma quantidade de pr-disperso em diferentes concentraes: 30, 35, 40% a um gral contendo o creme-base, com a ajuda de um pistilo para a homogeneizao. A escolha da maior concentrao de pr-disperso a ser utilizada foi definida aps estudo de estabilidade por teste de centrfuga. Foram ento preparados 30g de protetor solar para cada filtro, cada qual com 9 g de pr-disperso e 21g de creme base.

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4.5.3 Avaliao dos excipientes que interferem no FPS

Semelhante ao mtodo descrito no item 4.5.2.1, foram desenvolvidas pr-disperses contendo um segundo agente emoliente representado pela manteiga de karit (MK), em duas concentraes diferentes (1:1 e 1:2) em relao ao veculo (MK: veculo), a fim de averiguar sua influncia sobre os aspectos fsico-qumicos, bem como na estabilidade do fotoprotetor. A MK foi incorporada a frio nas formulaes, seguida do veculo, agente molhante, e por fim o agente formador de filme. A Tabela 2 apresenta a composio das pr-disperses contendo manteiga de karit.

Tabela 2 - Composio das pr-disperses contendo Manteiga de Karit e suas respectivas quantidades. PR-DISPERSES (M/M)
COMPOSIO

1:1( karit:miristato)
ZnO micronizado TiO2 alumina Hidroxiapatita

1:2 (karit:miristato)
ZnO micronizado TiO2 alumina Hidroxiapatita

Miristato de isopropila Tween 80 Silicone SF voltil Manteigade Karit

24,5% 0,5% 0,5% 24,5%

24,5% 0,5% 0,5% 24,5%

24,5% 0,5% 0,5% 24,5%

32,6% 0,5% 0,5% 16,4%

32,6% 0,5% 0,5% 16,4%

32,6% 0,5% 0,5% 16,4%

4.5.4 Avaliao de Excipientes que apresentam incompatibilidades com filtros inorgnicos

Obteve-se duas formulaes contendo ZnO e acrescentou-se 2% de cido gliclico em uma e em outra 2% de cido ltico, para analisar possveis modificaes na formulao.

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4.6 MTODO DE INCORPORAO DOS FILTROS INORGNICOS EMULSO SEM A TCNICA DA PR-DISPERSO

Em um gral adicionou-se o creme base previamente preparado conforme item 4.5.1, seguido dos componentes da pr-disperso sem o filtro, e homogeneizou-se com auxlio de pistilo. Aps todos os ingredientes j estarem homogeneizados acrescentou-se o filtro inorgnico lentamente e agitou-se at incorporao emulso. Foi preparada uma formulao contendo ZnO micronizado, TiO2 revestido com alumina, ZnO micronizado associado ao TiO2 alumina, e por fim com hidroxiapatita. O grupo controle no contm filtro.

4.7 CARACTERIZAO FSICO-QUMICA DAS EMULSES DE FOTOPROTETORES OBTIDAS

A avaliao das emulses de fotoprotetores foi realizada logo aps preparao, 24 h aps preparo e aps teste de estabilidade preliminar. As amostras aps o preparo foram acondicionadas em embalagem plstica com tampa. Cada determinao foi realizada em triplicata.

4.7.1 Determinao do valor de pH

A medida foi determinada com pHmetro. Utilizou-se 1,0% (p/p) da amostra diluda em gua destilada (BRASIL, 2007).

4.7.2 Avaliao organolptica

As anlises foram realizadas de acordo com o Guia de Controle de Qualidade de Produtos Cosmticos (BRASIL, 2007). Aspecto: foi realizada uma avaliao visual das formulaes e as mesmas foram deixadas em repouso por 24 horas, e posteriormente analisadas macroscopicamente, a fim de avaliar se existiu separao aparente de fases, viscosidade da formulao, grumos, formao de sobrenadante e aparncia geral das formulaes. Esta anlise foi realizada para o creme base, pr-disperses e formulao final de todas

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as amostras, como uma prvia para os ensaios organolpticos. Neste momento observou-se cor, odor, presena de precipitados ou separao de fases, sob luz natural. Cor: a anlise da cor (colorimetria) foi realizada por meio visual. Nesta anlise comparou-se a cor da amostra com a de um padro armazenado em frasco da mesma especificao (creme base e pr-disperso isolada). A anlise foi realizada sob condies de luz branca artificial. Odor: a amostra e o padro de referncia, acondicionados no mesmo material de embalagem, tiveram seu odor comparado diretamente atravs do olfato.

4.7.3 Anlise microscpica

Com o auxlio de microscpio ptico foram observadas lminas preparadas com amostra dos protetores solares formulados, atentando-se para o tamanho, forma e distribuio das partculas, se homogneas ou no; presena de aglomerados, grumos, e seus tamanhos, presena de bolhas de ar e gotculas de leo. A anlise foi realizada em triplicata.

4.8 ESTUDO DE ESTABILIDADE

A avaliao da estabilidade dos protetores solares foi realizada de acordo com o Guia de Estabilidade de Produtos Cosmticos (BRASIL, 2004). As amostras armazenadas em temperatura ambiente foram monitoradas por 30 dias.

4.8.1 Teste de centrfuga

Logo aps o preparo das formulaes, aproximadamente 5,0 g de cada amostra foram pesados e submetidos centrifugao em ciclos de 1000 g durante 30 minutos a temperatura ambiente (25C). Em seguida, foi realizada a avaliao visual e/ou microscpica (BRASIL, 2007). Cada teste foi efetuado em triplicata.

4.8.2 Teste de estabilidade preliminar

Trinta gramas (30,0g) das formulaes desenvolvidas foram acondicionadas em frascos plsticos fechados e submetidas condies variveis de temperatura em ciclos

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alternados (estresse trmico). As amostras foram submetidas s temperaturas de 5 2C por 24 horas e 45 2 C por mais 24 horas, completando assim um ciclo (BRASIL, 2004). As leituras dos parmetros de estabilidade foram realizadas antes do incio do teste, 24 horas aps preparo, e ao final do 6 ciclo consecutivo (12 dia), e posteriormente comparadas com as amostras padro, que foram mantidas em temperatura ambiente, ao abrigo da luz. As amostras foram avaliadas macroscopicamente a cada mudana de temperatura durante a realizao do teste e ao final foram avaliadas as caractersticas organolpticas (aspecto, cor, odor), pH, e separao de fases, alm do teste de centrfuga.

4.9 DETERMINAO DE POTENCIAL ZETA E TAMANHO DE PARTCULA

O potencial zeta e o tamanho das partculas das formulaes recentemente preparadas foram determinados a 25 C usando-se medidas de espalhamento dinmico de luz em equipamento Zetasizer 3000 HSa (Malvern Instruments, Alemanha) e lazer de HeNe operando a 10 mW e a 633 nm com ngulo de incidncia de 90. Normalmente, este valor est dentro da faixa de + / - 100 mV para a maioria dos sistemas imersos em meio aquoso. Medidas do dimetro interno das partculas, bem como a distribuio, representada pelo ndice de polidispersividade (PDI) foram obtidas a partir da presente anlise. As amostras foram diludas 10X, 50X ou 100X para adequao da anlise. As anlises foram realizadas na Faculdade de Cincias Farmacuticas de Ribeiro Preto da Universidade de So Paulo FCFRP/USP.

4.10 ESPECTROSCOPIA FOTOACSTICA

As anlises de espectroscopia fotoacstica foram realizadas com o objetivo de verificar a influncia dos parmetros estudados na capacidade de absoro de luz UV dos protetores solares desenvolvidos. As amostras utilizadas no estudo foram preparadas 24 h antes das leituras. Os espectros de absoro foram obtidos para a regio espectral do ultravioleta ao visvel. A potncia da fonte foi de 700 W e a freqncia de modulao da luz de 20 Hz. No sistema utilizado a fonte de luz uma lmpada de arco de Xennio da marca Oriel, com potncia de 1000 W, e emisso no intervalo entre 180 e 4000 nm. O monocromador,

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modelo 77250 (1/8 m) da Oriel, foi utilizado com fendas de entrada e sada, ajustadas em 3,16 mm ou 1,56 mm. A freqncia de modulao da luz controlada por um modulador mecnico, modelo SR 540 da Stanford Research Systems que fornece um sinal de referncia para o Lock-in (amplificador sincronizado). As lentes da montagem devem fazer com que a amostra seja excitada na regio do foco do feixe de luz, para que esta receba o mximo de intensidade possvel. A luz atinge o interior da clula fotoacstica aps ser transmitida atravs de uma janela de quartzo, j que este material transparente na regio espectral de emisso da lmpada. O microfone acoplado clula fotoacstica da marca Brel & Kjaer, modelo BK 4943, e est conectado a um pramplificador e a uma fonte de alimentao, modelo 2690. O sinal do microfone transferido para o Lock-in (amplificador sincronizado) modelo SR830 da marca Stanford Research Systems. O Lock-in fornece a intensidade e a fase do sinal fotoacstico que so transferidos para um microcomputador (ROSENCWAIG; GERSHO, 1975; ROSENCWAIG; GERSH, 1976)

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RESULTADOS E DISCUSSO

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RESULTADOS E DISCUSSO

Nesta seo so apresentados os resultados obtidos do estudo sobre a influncia da atividade fotocataltica em funo do tamanho e revestimento das partculas de filtros, influncia dos excipientes na estabilidade da formulao e sua interferncia no FPS, influncia do mtodo de preparo das formulaes na sua estabilidade final, caracterizao das amostras de protetores solares, bem como a influncia que o mtodo de preparo exerce sobre a absoro/reflexo UV das formulaes desenvolvidas.

5.1 ESTUDO DE FOTOCATLISE A Figura 9 apresenta os resultados da atividade fotocataltica dos filtros inorgnicos TiO2, ZnO, TiO2 + ZnO e HAP na sua forma convencional, a qual apresenta tamanho de partculas de aproximadamente 200 a 500 nm, sob a ao da radiao UVA, UVB e UVA/UVB. A HAP apresenta tamanho de partculas de aproximadamente 1m. Utilizou-se o azul de metileno nos experimentos substituindo material biolgico e indicador da atividade fotocataltica, assim, os resultados foram avaliados por meio da fotodecomposio do azul de metileno por irradiao UV, o que representa a intensidade do potencial fotocataltico de cada agente exposto. Pode-se observar que o ZnO apresenta atividade fotocataltica mais intensa que o TiO2, independente do tipo de radiao a que as partculas foram expostas. O TiO2 apresentou a menor atividade fotocataltica sob a radiao UVB, em torno de 10% aps 120 min, mostrando resultados similares para as radiaes UVA e UVA/UVB, sendo 25% e 23% de reduo na concentrao de azul de metileno, respectivamente. J o ZnO exibiu intensa atividade em todas as radiaes testadas, ficando em torno de 60% para a luz UVA e UVB e acima de 80% para a luz UVA/UVB aps 120 min. Ao contrrio dos resultados divulgados por Rampaul et al.,(2007), no observou-se potencializao da atividade fotocataltica do ZnO e TiO2 quando expostos em conjunto radiao UV. A Figura 9 mostra que, em at 60 min aps incio dos experimentos a HAP se manteve-se extremamente estvel. E nos 60 min seguintes apresentou um aumento no significativo da concentrao de azul de metileno.

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Figura 9 - Atividade fotocataltica do dixido de titnio (TiO2), xido de zinco ( ZnO), hidroxiapatita (HAP) em diferentes radiaes ultravioleta (UVA; UVB e UVA+UVB). Os valores representam a mdia + desvio padro. n = 3. (*) significa diferena estatstica (P<0,05) em relao ao tempo zero.

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Se comparada com a atividade fotocataltica do ZnO e TiO 2 possvel notar que a diferena entre as atividades bastante considervel, s afirmando o potencial de degradao dos filtros inorgnicos ZnO e TiO2, e estabilidade da hidroxiapatita como j foi referido. Assim, sem ser fotoativada por luz UV, acredita-se que no seja gerado EROs e consequentemente danos ao DNA e outros. Em virtude da natureza da hidroxiapatita, e por ser j conhecida como biocompatvel, acredita-se que diante da estabilidade que apresentou frente s radiaes que foi submetida, esta possua uma boa tolerncia cutnea e seja isenta de possveis riscos. A Figura 10 mostra a influncia do tamanho de partcula e do revestimento na atividade fotocataltica do TiO2 exposto radiao UVA, UVB e UVA/UVB. Devido ao aumento da rea superficial e, consequentemente na rea de contato, causada pela reduo do tamanho de partcula, supunha-se que o TiO2 micronizado (10 a 50 nm) apresentasse maior atividade fotocataltica em relao forma convencional. No entanto, os resultados mostraram que o tamanho de partcula no influenciou no potencial fotocataltico do TiO 2, sendo que a forma micronizada apresentou resultados similares forma convencional independente do tipo de radiao UV.O revestimento de partcula de filtros inorgnicos uma estratgia bastante utilizada para reduzir o potencial de agregao entre elas, o que, consequentemente, reflete na estabilidade fsica do produto, facilidade de incorporao e sensorial mais agradvel. Conforme mostra a Figura 10, o revestimento das partculas de TiO 2 com slica e alumina reduz de forma considervel a atividade fotocataltica deste filtro inorgnico quando exposto radiao UV. O revestimento com alumina praticamente inibiu a atividade fotocataltica do TiO2 na luz UVA e UVB, enquanto que o revestimento com slica inibiu a ao do TiO2 em todas as radiaes testadas, inclusive UVA/UVB. O fato do revestimento com slica ter apresentado um efeito inibitrio maior que a alumina na atividade fotocataltica do TiO2 pode ser explicado pelo fato de que as partculas de TiO 2 revestidas com slica apresentarem-se mais hidrofbicas, impedindo o contato do TiO2 com a soluo de azul de metileno e, conseqentemente, diminuindo a formao de radicais hidroxila.

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Figura 10 - Influncia do revestimento e tamanho de partcula na atividade fotocataltica do Dixido de Titnio (TiO2) em diferentes radiaes ultravioleta (UVA; UVB e UVA+UVB). Os valores representam a mdia desvio padro. n = 3. (*) significa diferena estatstica (P<0,05) dos grupos slica, alumina e micronizado em relao ao TiO 2 puro, quando comparado ao mesmo tempo de experimentao.

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A influncia do tamanho de partcula sobre a atividade fotocataltica do ZnO mostrada na Figura 11. Pode-se observar que o ZnO micronizado (10 a 50 nm) apresenta aumento significativo (P<0,05) na atividade fotocataltica frente radiao UVA e UVB e ligeira, porm significativa variao quando exposto radiao UVA/UVB. Esta variao situa-se em torno de 14% para a luz UVA e 17% para a luz UVB aps um perodo de 120 min.

Figura 11 - Influncia do tamanho de partcula na atividade fotocataltica do xido de zinco (ZnO) em diferentes radiaes ultravioleta (UVA; UVB e UVA+UVB). Os valores representam a mdia + desvio padro. n = 3. (*) significa diferena estatstica (P<0,05) do ZnO micronizado em relao ao ZnO normal.

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A fotorreatividade relacionada a tamanho de partculas tem levantado algumas preocupaes, porque se sugere que as micropartculas destes ativos so mais fotorreativas que suas contrapartes e desta forma produzem EROs que podem causar estresse oxidativo nos tecidos ou danos ao DNA (JING, 2001; NEWMAN, 2009). At agora, ensaios in vitro tem demonstrado que micropartculas de filtro solar permanecem na superfcie da pele e no estrato crneo entre as clulas de queratina, e no chegam s clulas subjacentes (BARNARD, 2010). No entanto, como a pele humana imperfeita, no uma barreira impenetrvel, estudos experimentais tambm influenciam nos resultados toxicolgicos, de modo que as espcies (ou modelo) usadas, via de exposio, a durao do experimento, concentrao de partculas e condies de luz so capazes de influenciar os resultados das pesquisas (JOHNSTON, 2009).

5.2 ESTUDO DE COMPATIBILIDADE DE FILTROS INORGNICOS COM CIDOS ORGNICOS USADOS EM PRODUTOS COSMTICOS

A Figura 12 apresenta cristais formados pelo ZnO na presena de cidos orgnicos comumente usados em produtos cosmticos, mais especificamente, cido ltico e cido gliclico. Apesar de ambos os cidos apresentarem diversas aplicaes em produtos cosmticos faciais, inclusive em produtos com FPS, raros so os relatos

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de interao entre o ZnO e estes componentes. Tanto o ZnO como o TiO 2, na forma convencional, revestida ou micronizada, no apresentaram outros tipos de incompatibilidades qumica com cido benzico, cido ctrico, cido saliclico e bases nos testes realizados.

Figura 12 -. Incompatibilidade do ZnO com alfa-hidroxicidos observada por microscopia tica (A) ZnO + cido ltico; (B) ZnO + cido gliclico. Aumento: 100X.

Acredita-se que os cristais formados so polmeros base de cido ltico e cido gliclico. De acordo com a literatura (SCHWACH et al., 1998), assume-se que a rota principal de sntese destes polmeros ocorre por meio da polimerizao por abertura de anel de monmeros cclicos, os quais, na verdade, so dmeros de lactdeos e/ou glicoldeo, conforme mostra a Figura 13. Porm, a literatura sobre a formao de cristais de cido ltico e gliclico na presena de ZnO escassa. Mais estudos so necessrios para elucidar a participao do ZnO na formao destes cristais, isto , se o ZnO participa na formao de um novo composto ou se o ZnO atua como um catalisador de reao na qual ocorre a polimerizao dos cidos ltico/gliclico.

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Figura 13 - Esquema reacional da polimerizao do cido ltico na presena de ZnO

Fonte: SCHWACH et al., 1998.

5.2.1 Padronizao do mtodo para obteno de cristais de ZnO com cido gliclico e cido ltico Os estudos apresentados no item 5.2 demonstram que ZnO na presena de cidos orgnicos comumente usados em produtos cosmticos, mais especificamente, cido ltico e cido gliclico, forma cristais e raros so os relatos de interao entre estes componentes. O desenvolvimento e padronizao da tcnica para obteno dos cristais foi prpria, por meio de tentativas, a fim de obter uma quantidade suficiente de cristais para poder submet-los ao estudo de fotocatlise. Obteve-se a quantia de 1 g de cristais de cido ltico e cido gliclico, o que era o

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necessrio e suficiente para nossos estudos. 5.2.1.1 Estudo de fotocatlise com os cristais de ZnO Os cristais obtidos foram submetidos ao estudo de fotocatlise a fim de saber se o ZnO participa na formao de um novo composto ou se ZnO atua como um catalizador de reao. A formao de cristais com cido ltico e gliclico inibe a atividade fotocataltica do ZnO em todas as radiaes UV e por todo o tempo que foi exposto, (Figura 14). Porm, a formao desses cristais pode causar interferncia nas formulaes alterando sua estabilidade, conforme explicitado no item 5.6.

Figura 14 -. Atividade fotocataltica do xido de zinco (ZnO) com cristais de cido ltico (A) e cido gliclico (B) em diferentes radiaes ultravioleta (UVA; UVB e UVA+UVB). Os valores representam a mdia desvio padro. n = 3. (*) significa diferena estatstica (P<0,05) dos grupos contendo cido ltico e cido gliclico em relao ao ZnO puro quando comparado ao mesmo tempo de experimentao.

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5.3 DESENVOLVIMENTO DE FORMULAO Os protetores solares foram desenvolvidos na forma de emulses O/A base de emulsionantes no inicos que possuem boa compatibilidade com a maioria das matriasprimas utilizadas em cosmticos e alto poder de reduo da tenso superficial e interfacial. Emulses O/A permitem uma melhor espalhabilidade sobre a pele e tambm evitam a caracterstica gordurosa das emulses A/O que no agradam o usurio (SPAULDING, 2009). O produto formulado para fotoproteo deve ser de fcil espalhabilidade, mas viscoso o suficiente para formar um filme coerente sobre a pele. Deve-se levar sempre em conta durante a formulao de um produto de uso externo, a sua textura e sensao ao tato. O ideal que as emulses tenham propriedades reolgicas de plasticidade/pseudoplasticidade e tixotropia (AULTON, 2005), ou seja, em repouso sua viscosidade aumentada e sob agitao diminuda. Assim, foram desenvolvidos fotoprotetores atravs da metodologia convencional e a partir de uma pr-disperso de filtros inorgnicos em veculo oleoso que foram incorporados posteriormente ao creme-base, para avaliao da influncia do mtodo de preparo nas caractersticas sensoriais, organolpticas, e estabilidade do produto final. Aps eleito o

creme base (Tabela 3), utilizou-se a formulao base da melhor pr-disperso e apenas

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variou-se os filtros. Desta forma, 5 novas pr-disperses foram obtidas dando origem a cinco formulaes de fotoprotetor. Formulaes contendo manteiga de karit foram preparadas a fim de avaliar sua sinergia sobre os filtros inorgnicos levando a um aumento possvel de FPS. Formulaes desenvolvidas com ZnO foram acrescidas de cido gliclico e cido ltico ao final para estudo de incompatibilidades.

5.3.1 Influncia dos excipientes que interferem na estabilidade

A escolha dos componentes do creme base foi definida aps preparo de diversas formulaes, onde se procurou identificar qual dentre estas apresentavam melhores caracterstica fsico-qumicas, a fim de que pudesse ser alcanada uma maior estabilidade e melhor aspecto na formulao final do protetor solar, aps a incorporao das pr-disperses. A Figura 15 apresenta as variveis analisadas at ser definido a composio do creme base final. A primeira formulao do creme base desenvolvida apresentada no Quadro 2.

Figura 15 - Esquema das variveis analisadas no preparo do creme base.

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Quadro 2 - Formulao 1 do creme base no-inico Fase Oleosa COMPONENTE Polawax Alcool cetlico Silicone SF Miristato de isopropila Fase Aquosa COMPONENTE EDTA Propilenoglicol Fenoxietanol gua destilada q.s.p INCI NAME Emulsifying Wax NF Cetyl Alcohol Cyclomethicone Isopropyl Myristate CONCENTRAO (m/m) 10% 2% 2% 2%

INCI NAME Disodium EDTA Propylene Glycol Phenoxyethanol Aqua

CONCENTRAO (m/m) 0,01% 10% 0,25% 100%

Aps pronto creme base e pr-disperses, preparou-se a formulao de protetor solar incorporando 40% (m/m) destas pr-disperses ao creme base. Foram preparados 30,0 g de protetor solar, quantidade suficiente para realizao ensaios de pH, microscopia, macroscopia, organolpticos e teste de centrfuga. A incorporao de 40% de pr-disperso representa 20% de filtro inorgnico no produto final, posto que permitido a utilizao de at 25% de ZnO e TiO2 (BRASIL, 2006). Nesta primeira fase do preparo das pr-disperses utilizou-se apenas o ZnO como filtro. Aps definir a melhor formulao tomou-se esta como base para incorporar o TiO2 e HAP. Tambm foram avaliadas variveis na pr-disperso obtendo-se oito pr-disperses, conforme mostrado na Figura 16. Posteriormente, preparou-se uma segunda formulao (Quadro 3) de creme base noinico, de acordo com mtodo descrito no item 4.4.1. Na formulao 2, o lcool cetlico foi substitudo por tween 80,

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Figura 16 Esquema da composio das pr-disperses contendo ZnO como filtro inorgnico e suas variveis analisadas.

Quadro 3 - Formulao 2 do creme base no-inico Fase Oleosa COMPONENTE Polawax Tween 80 Silicone SF Miristato de isopropila Fase Aquosa COMPONENTE EDTA Propilenoglicol Fenoxietanol gua destilada INCI NAME Emulsifying Wax NF Polysorbate 80 Cyclomethicone Isopropyl Myristate CONCENTRAO (m/m) 10% 2% 2% 4%

INCI NAME Disodium EDTA Propylene Glycol Phenoxyethanol Aqua

CONCENTRAO (m/m) 0,01% 10% 0,25% q.s.p.

Todas as oito pr-disperses foram incorporadas esta segunda formulao de creme base, seguindo o mesmo procedimento de incorporao descrito anteriormente (item 4.4.2.2). Logo, foram submetidas aos ensaios de pH, microscopia, macroscopia, organolpticos e teste de centrfuga. Com o objetivo de diminuir a fase oleosa, foram desenvolvidas uma terceira e quarta formulao de creme base (Quadro 4 e 5).

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Quadro 4 - Formulao 3 do creme base no-inico Fase Oleosa COMPONENTE Polawax Tween 80 Silicone SF Miristato de isopropila Alcool cetlico Fase Aquosa COMPONENTE EDTA Propilenoglicol Fenoxietanol gua destilada INCI NAME Emulsifying Wax NF Polysorbate 80 Cyclomethicone Isopropyl Myristate Cetyl Alcohol CONCENTRAO (m/m) 10% 2% 1% 2% 2%

INCI NAME Disodium EDTA Propylene Glycol Phenoxyethanol Aqua

CONCENTRAO (m/m) 0,01% 10% 0,25% q.s.p.

Quadro 5 - Formulao 4 do creme base no-inico Fase oleosa: COMPONENTE Polawax Tween 80 Silicone SF Miristato de isopropila Fase aquosa: COMPONENTE EDTA Propilenoglicol Fenoxietanol gua destilada INCI NAME Emulsifying Wax NF Polysorbate 80 Cyclomethicone Isopropyl Myristate CONCENTRAO (m/m) 12% 4% 1% 2%

INCI NAME Disodium EDTA Propylene Glycol Phenoxyethanol Aqua

CONCENTRAO (m/m) 0,01% 10% 0,25% q.s.p.

Todas os fotoprotetores desenvolvidos com as formulaes apresentadas nos Quadros 2, 3, 4 e 5, foram submetidas a ensaios de pH, microscopia, macroscopia, organolpticos e teste de centrfuga. Desta forma, pode-se selecionar a melhor pr-disperso e o melhor creme base, obtendo-se uma formulao final estvel e com boas caractersticas. Aps eleito o creme base ideal, utilizamos a formulao base da melhor pr-disperso e apenas variou-se os filtros. Desta forma, 5 novas pr-disperses finais foram obtidas. A Tabela 3 apresenta a formulao do creme base final e a Tabela 4 a composio final das pr-disperses.

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Tabela 3 Composio do creme base final e suas respectivas quantidades e funes dos ingredientes
COMPONENTES INCI NAME QUANTIDADE (%) FUNO

Fase Oleosa Polawax Tween 80 Silicone SF voltil Miristato de isopropila Fase Aquosa EDTA Propilenoglicol Fenoxietanol gua destilada

Emulsifying Wax NF Polysorbate 80 Cyclomethicone Isopropyl Myristate

12% 4% 1% 2%

Cera auto emulsionante Co-emulsionante noinico Formador de filme Emoliente

Disodium EDTA Propylene Glycol Phenoxyethanol Aqua

0,01% 10% 0,25% q.s.p.

Quelante Umectante Conservante Veculo

O creme-base final preparado resultou em uma emulso O/A de aspecto homogneo, brilhante, branco e pouco oleoso. Tambm apresentou espalhabilidade na pele e viscosidade adequadas, o que essencial para que o produto forme um filme uniforme sobre a superfcie da pele. A eficincia de um filtro solar incorporado numa emulso influenciada principalmente pelo emulsionante e pelos componentes graxos. Os emulsionantes so capazes de afetar o comportamento da tenso superficial durante a fase de formao da pelcula. Freqentemente, o emulsionante o nico fator que controla o comportamento reolgico da emulso e, conseqentemente, a distribuio homognea e completa do sistema de transporte sobre a pele. Essa cobertura uniforme da pele resulta de um perfil reolgico ideal alcanado atravs da escolha correta dos componentes na formulao do creme-base. Os emolientes melhoram a espalhabilidade da formulao na pele e influenciam na capacidade de penetrao de fotoprotetores no estrato crneo cuja topografia bastante irregular. Eles podem modificar a permeabilidade da pele, fazendo com que os filtros solares possam fixar-se melhor, dessa forma, pode-se aumentar a resistncia da emulso gua. Alm de conferir hidratao e emolincia pele, os emolientes so excelentes solubilizantes dos filtros solares orgnicos e podem assegurar a estabilidade do perfil espectrofotomtrico dos filtros, principalmente daqueles que atuam na faixa do UVB (FLOR; DAVOLOS; CORREA, 2007; CHORILLI et al., 2007).

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Existem agentes, que embora destitudos de efeito fotoprotetor intrnseco, determinam o aumento do desempenho das formulaes contendo filtros solares. A incluso de silicones confere formulao um diferencial nos produtos. Eles potencializam o efeito de fotoproteo da pele por possurem a capacidade de formarem filmes resistentes gua, alem de apresentar extrema afinidade pela pele e baixssima toxicidade, no serem gordurosos, no deixarem resduos oleosos, fornecendo sensao sedosa e suave pele, conferindo um toque seco ao produto e apresentando baixa aderncia. A concentrao geralmente empregda em cosmticos de 0,1% a 50%, no apresentando problemas de toxicidade ou irritabilidade (OLENICK, 2000). O Tween 80 um tensoativo hidroflico etoxilado, geralmente solvel ou dispersvel em gua, utilizado para emulses leo em gua e solubilizao de leo entre outras funes e possui um EHL (equilbrio hidrfilo-lipfilo) diferente do Tween 20. Como agente coemulsionante, o Tween 80 promoveu uma melhor reduo da tenso interfacial entre os componentes da formulao permitindo a obteno de uma emulso mais estvel (BAREL, 2001; FLORENCE, 2003 MAPRIC, 2010). O preparo da pr-disperso de ZnO micronizado, TiO2 alumina, ZnO micronizado + TiO2 alumina e Hidroxiapatita (Tabela 4) resultou em uma disperso de aspecto viscoso, branco leitoso e inodoro e de fcil incorporao, que teve como finalidade diminuir a agregao das partculas dos filtros inorgnicos. A seleo destes filtros micronizados ao invs da forma convencional se deu por estes produzirem formulaes cosmeticamente mais atrativas devido ao menor efeito de branqueamento da pele e sensorial mais agradvel. A escolha pelo revestimento com alumina foi definido pela sua capacidade de inibio fotocataltica dos filtros testados e melhor facilidade de incorporao emulso. O miristato de isopropila exerce ao emoliente influenciando na espalhabilidade. O revestimento de partculas de filtros inorgnicos uma estratgia bastante utilizada para reduzir o potencial de agregao das partculas, o que, conseqentemente, reflete na estabilidade fsica do produto, facilidade de incorporao e sensorial mais agradvel (BIC, 2001; GONZLEZ, 2008; SCHILLING et al., 2010).

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Tabela 4 - Composio final das pr-disperses com suas respectivas quantidades de ingredientes PR-DISPERSES
ZnO micronizado TiO2 alumina ZnO micronizado + TiO2 alumina

Hidroxiapatita

COMPOSIO

Miristato de isopropila Tween 80 Silicone SF voltil Filtros

49% 0,5% 0,5% 50%

49% 0,5% 0,5% 50%

49% 0,5% 0,5% 50% *

49% 0,5% 0,5% 50%

* 25% ZnO e 25% TiO2 alumina

5.3.2 Influncia do mtodo de preparo

As partculas de filtros inorgnicos, quando incorporadas diretamente emulso sem a tcnica da pr-disperso formaram vrios grumos detectados no microscpio ptico, indicando que a sua disperso no foi eficaz. Alm disso, houve uma considervel instabilidade fsica do produto observada aps o teste de centrfuga. Os aglomerados (grumos) formados pelos filtros inorgnicos contriburam ainda para o branqueamento da pele aps a aplicao do fotoprotetor. Estas partculas grandes so menos transparentes e absorvem UV de forma menos eficaz (TSUZUKI, 2010). A modificao na tcnica de preparo minimizou a formao de aglomerados de filtros inorgnicos resultando em uma disperso mais estvel.

5.4

CARACTERIZAO

FSICO-QUMICA

DOS

PROTETORES

SOLARES

DESENVOLVIDOS

O desenvolvimento de disperses de filtros inorgnicos consiste em trs etapas distintas: molhagem, desaglomerao e estabilizao. O processo de molhagem fundamental

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para alcanar uma disperso estvel mais tarde. Se o slido resiste molhagem, este passo pode requerer tensoativos em maior quantidade para reduzir a tenso superficial do lquido. Por isso, o uso de uma pr-disperso melhora o processo de fabricao de forma geral, pois facilita o processo de molhagem e desaglomerao (BIC, 2011). Conforme mostra a Quadro 6, as formulaes preparadas a partir de uma pr-disperso de filtros inorgnicos em veculo oleoso, e incorporadas posteriormente ao creme-base, tiveram uma melhor incorporao das partculas dos filtros do que quando essas foram acrescentadas diretamente na emulso. Foram testadas diversas concentraes de filtros que pudessem ser incorporadas formulao sem desestabiliz-la. Ao final, a formulao contendo 30% de pr-disperso, que corresponde a 15% de filtro apresentou resultados sensoriais, fsico-qumicos e microscpicos melhores que maiores concentraes testadas em estudos anteriores. Ficou evidente que o aumento da concentrao do metal desestabiliza a formulao, exigindo modificaes de outros componentes empregados. Conforme mostrado o Quadro 6, as partculas de filtros, quando incorporadas diretamente na emulso, formaram vrios grumos detectados no microscpio ptico, indicando que a sua disperso no foi eficaz. Alm disso, houve uma considervel instabilidade fsica do produto, demonstrada atravs da separao de fases, detectada no teste de centrfuga. Os agregados contriburam, ainda, para o branqueamento da pele aps a aplicao do fotoprotetor. Os protetores solares em que foi realizada a pr-disperso apresentaram maior estabilidade, melhor sensao na pele e menor incidncia de grumos. Este resultado pode ser explicado porque o xido de zinco em um produto solar tpico no existe como cristais individuais (partculas primrias), mas sim agregados de partculas: grupos de duas ou mais partculas primrias que esto unidas de forma irreversvel em conjunto durante o processo de fabricao. As partculas primrias no fazem mais do que uma pequena frao do xido de zinco presente, enquanto que os agregados predominam em uma disperso quando bem preparados. Um ponto negativo na utilizao de filtros inorgnicos como o ZnO a tendncia em deixar uma pelcula branca sobre a pele, que pode ser esteticamente desagradvel. As partculas micronizadas melhoraram o apelo esttico das formulaes, fazendo o novo produto mais transparente luz visvel, uma vez que no refletem no espectro visvel (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). Mas preciso ter cuidado na formulao com partculas micronizadas de filtros inorgnicos, pois quanto menor seu tamanho mais

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susceptvel ao processo de aglomerao (TANNER, 2006; GONTIJO; PUGLIESI; ARAJO, 2009; NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009; RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010). Estes aglomerados (grumos) fazem com que as partculas pequenas percam suas propriedades dispersivas sendo menos eficazes na proteo (RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010; BIC, 2011) alm de contriburem para o maior branqueamento da pele aps a aplicao do fotoprotetor (NEWMAN; STOTLAND; JEFFREY, 2009). A tcnica da pr-disperso apenas modifica o processo de fabricao, uma vez que se a disperso no for preparada corretamente, pode haver formao de grupos de agregados que podem ficar juntos para formar aglomerados de partculas, e os aglomerados so menos transparentes que os agregados, inclusive sendo menos eficazes na proteo UV (TSUZUKI, 2010; BIC, 2011), alm de que este fato constitui um inconveniente antiesttico. No entanto, pr-disperses no garantem a estabilidade da frmula final, mas com base nos resultados obtidos, melhora o processo geral de fabricao do produto. Os resultados foram favorveis com a tcnica de pr-disperso, obtendo protetores mais estveis, com menos efeito de branqueamento, melhor sensao na pele e com menor incidncia de grumos que tendem a formar aglomerados, os quais levam o fotoprotetor a apresentar menor proteo UV. O pH manteve-se estvel, na faixa de 7,0 a 8,0 em todas as formulaes. As amostras se mantiveram estveis at 60 dias aps sua manipulao.

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Quadro 6 - Caracterizao das diferentes formulaes de protetor solar base de filtros inorgnicos com pr-disperso e sem pr-disperso antes do teste de estabilidade preliminar

+++ timo; ++ Bom; + Regular; - Ruim

94

5.4.1 Avaliao de estabilidade preliminar com pr-disperso e sem pr-disperso

As amostras com pr-disperso e sem pr-disperso foram avaliadas ao final do teste de estresse trmico quanto as suas caractersticas macroscpicas, microscpicas, organolpticas (aspecto, cor, odor), pH e teste de centrfuga. Concluiu-se que as

caractersticas das emulses preparadas a partir de pr-disperses permaneceram inalteradas sendo consideradas estveis perante estes parmetros, e as formulaes sem pr-disperso aps teste de centrfuga apresentaram separao de fases maior que a descrita no Quadro 6, salvo a formulao contendo hidroxiapatita que se mostrou estvel nos dois mtodos de incorporao. Na centrifugao, a fora da gravidade atua sobre a amostra fazendo com que suas partculas se movam no seu interior. O teste de centrifuga produz estresse na amostra, simulando um aumento na fora de gravidade, aumentando a mobilidade das partculas e antecipando possveis instabilidades. Essas podero ser observadas na forma de precipitao, separao de fases, coalescncia entre outras. Esse teste uma ferramenta que permite avaliar, em curto espao de tempo, possveis instabilidades fsico-qumicas da formulao (MORAIS, 2006). Assim pode-se constatar rapidamente a separao das fases sugerindo-nos uma falta de estabilidade nestas formulaes.

5.5 AVALIAO DA ESTABILIDADE ATRAVS DE POTENCIAL ZETA E TAMANHO DE PARTCULA

Em sequncia, as emulses recentemetnte preparadas dos fotoprotetores foram caracterizadas quanto aos valores de potencial zeta e tamanho de partculas (Tabela 5). Conhecer a estabilidade dos produtos com os quais se trabalha um parmetro extremamente importante, pois gera dados confiveis a fim de garantir a segurana e eficcia do produto. Ao medir parmetros de disperso que afetam a estabilidade como potencial zeta e tamanho de partcula, os formuladores podem identificar etapas crticas e adequ-las s necessidades e s exigncias do produto e do consumidor. Para um sistema de suspenso, o potencial zeta um ndice importante que reflete a intensidade da fora de repulso entre as partculas e a estabilidade da disperso. Sua medida crucial nos controles de estabilidade (LIAO, 2009). As mudanas na carga das partculas podem ser detectadas atravs da anlise deste parmetro. Quanto maior o potencial zeta, em

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mdulo, maior a estabilidade do sistema disperso. Alteraes no valor do potencial so relevantes apenas quando h mudanas na composio da formulao ou na obteno da mesma (MORAIS, 2009).

Tabela 5 - Resultado de valores de potencial zeta (pz) e tamanho de partculas de fotoprotetores produzidos com pr-disperso e sem pr-disperso (mdia e desvio padro, n=3).

Onde: pz = potencial zeta, mV= milivolts, m= micrmetros, * Perfil bimodal

Valores de potencial zeta obtidos, entre -30 e -60 mV (em mdulo - positivo ou negativo) ou maior indicam equilbrio eletrosttico entre as partculas, sugerindo assim boa estabilidade do sistema e possivelmente uma menor probabilidade de ocorrer o fenmeno da floculao, que envolve a agregao das gotculas dispersas em aglomerados frouxos, dentro da formulao, podendo desestabilizar as mesmas (BUCHMANN, 2001; AULTON, 2005; MORAIS, 2008). A mudana no potencial zeta resulta de uma alterao na carga de superfcie ou de adsoro de ons nas superfcies das partculas (ELAKNESWARAN, 2009). As formulaes desenvolvidas a partir de pr-disperso apresentaram valores de potencial zeta significativamente maiores (em mdulo) do que aquelas onde o filtro inorgnico foi incorporado sem uma pr-disperso. Entretanto, na formulao contendo hidroxiapatita, no houve alterao expressiva do valor de potencial zeta, sugerindo que o material possui boa estabilidade, como j referido (RIGANO, 2010). Isso demonstra que o mtodo de preparo tem pouca influncia sobre seu comportamento dentro de um sistema emulsionando. Assim, observou-se atravs das medidas do potencial zeta que a tcnica de prdisperso favoreceu grandemente a estabilidade das formulaes.

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Valores de potencial zeta so alterados em funo do pH. Este ltimo, por sua vez, geralmente modificado em razo da adio de eletrlitos e tensoativos inicos emulso. Como no foi alterada a composio e sim a maneira de dispersar as substncias, no houve alterao de pH e os valores foram iguais aos descritos no Quadro 6. O tamanho das partculas de um a emulso determina a probabilidade da ocorrncia de fenmenos como floculao e coalescncia, o qual proporciona ao sistema uma desestabilizao (TADROS, 2004), geralmente quanto menor o tamanho dos glbulos, maior a estabilidade do sistema (JEONG; KIM, 2001; MALVERN, 2005; MORAIS 2008). Tamanho da partcula uma varivel de grande interesse para os fabricantes de revestimentos, devido ao impacto direto sobre a qualidade do produto acabado. Propriedades pticas, tais como opacidade, tom, aparncia da pelcula, e resistncia a intempries, bem como propriedades de massa, incluindo a disperso e floculao caractersticas, e viscosidade, so, at certo ponto, uma funo do tamanho das partculas (KIPAXX, 2005). Os resultados apresentados na Tabela 5 indicam que o mtodo de pr-disperso foi capaz de produzir emulses mais estveis, com partculas bem dispersas, de dimetros satisfatrios, sendo um resultado favorvel, indicando que no houve floculao. A caracterizao do tamanho de partculas mostrou que os protetores solares produzidos a partir de uma pr-disperso apresentaram um perfil bimodal de distribuio, aparecendo como picos de concentrao distintos, sugerindo a presena de duas classes de partculas, as finamente divididas e as maiores. Estas ltimas podem ser resultado de um pequeno grau de agregao ocorrido, formando aglomerados com tamanhos mdios inferiores a 100 m, os quais foram detectados pela anlise de tamanho de partcula. Nos casos dos protetores sem pr-disperso, os agregados formados apresentaram dimenses muito maiores, conforme comparado pela microscopia tica, e os quais no puderam ser detectados pelo espalhamento de luz, isto , agregados maiores que 100 m. (Figura 17). Desse modo, conclui-se que a tcnica de pr-disperso foi essencial para reduo do tamanho das partculas dispersas dos filtros em questo.

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Figura 17 Curvas de distribuio do tamanho de partcula. Caractersticas do ZnO micronizado incorporado ao creme base com e sem pr-disperso.

perfil bimodal, - - - perfil monomodal.

Vale ressaltar que, diferentemente de uma distribuio monomodal em que todos os pontos centrais se equivalem, numa distribuio bimodal a mdia, a mediana e a moda so dadas pela soma ponderada dos valores obtidos nos dois picos, gerando um parmetro bimodal. Dessa forma, assumem um valor arbitrrio no representativo, sendo necessria a interpretao independente de cada uma das fraes da distribuio, originando dois valores mdios, como apresentados na Tabela 5.

5.6

INFLUNCIA

DOS

CIDOS

ORGNICOS

NA

ESTABILIDADE

DAS

FORMULAES DE PROTETORES SOLARES DESENVOLVIDAS

Os cidos orgnicos aplicados para fins dermato-cosmetolgicos so os alfahidroxicidos (AHAs) e o beta- hidroxicidos (BHAs), que so cidos no txicos, geralmente fracos e obtidos de fontes naturais. Os AHAs costumam ser mais fortes em atuao do que os BHAs vistos que esto mais prximos da cadeia principal do cido (VELASCO, et al, 2004; BURGUESS, 2005) Os AHAs ocorrem naturalmente em frutas, cana-de-acar e iogurte e incluem o

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cido gliclico, o cido ltico, o cido mlico, o cido tartrico e o cido ctrico. Existem outros AHAs como o cido glicrico (cido di-hidrxi-propinico), cido tartrnico (cido hidrxi-propanodiico), cido ascrbico, cido glucnico, cido mandlico e cido benzlico. Destes, os mais freqentemente utilizados em cosmticos so o cido gliclico e o cido ltico (VELASCO, et al, 2004; BURGUESS, 2005; CHOI, et al, 2006; GAO, et al, 2008). O cido gliclico pode ser usado como um cuidado dirio da pele em produtos de baixas concentraes de 5% a 15%. Maiores concentraes (30% a 70%) so produtos qumicos utilizados para o peeling no tratamento de pele spera, acne, manchas e envelhecimento. (NICOLETTI, 2002). O cido ltico tem sua origem pela fermentao lctea, elimina as clulas mortas da epiderme, faz parte do fator natural de hidratao da pele (NMF) que eleva o contedo de gua na epiderme e retarda sua perda para o ambiente, elevando assim sua hidratao, atua como regulador do pH em formulaes cosmticas, possui ao clareadora da pele o que o torna muito til e bastante utilizado como ingrediente ativo (VIEIRA, 2008). Nos estudos dos excipientes incompatveis com filtros inorgnicos notou-se em microscopia a presena de cristais decorrentes da interao ZnO com cido ltico e com cido gliclico. Nas formulaes a base de ZnO a qual acrescentamos 2% de cido gliclico, houve a formao de cristais observados por adicionado 2% de cido ltico. Uma considerao muito importante nas formulaes com filtros inorgnicos o pH. Ele vai afetar principalmente o nvel de ons de zinco na fase aquosa de uma emulso que contenha xido de zinco e vai se tornar pouco solvel em pH abaixo de 7,5 com um aumento acentuado em pH abaixo de 7,0. Operaes em baixo pH (pH <7) se possvel devem ser evitadas pois podem causar o espessamento e /ou instabilidade da emulso (SPAULDING, 2009). O pH da fase aquosa pode aumentar durante a formulao. O tamponamento do sistema pode ser freqentemente realizado durante o preparo da formulao, utilizando o cido ctrico, cido ltico e outros cidos orgnicos. A adio destes cidos fase aquosa antes da emulsificao pode ajudar a estabilizar a emulso, mas cuidados devem ser tomados para no reduzir o pH abaixo de 7, pois a quantidade de ons de zinco na fase aquosa pode aumentar (SPAULDING, 2009). Porm, como mostra a Figura 18 a adio de cido ltico mostrou-se incompatvel com ZnO onde observa-se que a formao de cristais ocorreu devido incompatibilidade do ZnO com cido ltico utilizado para correo do pH da formulao e ausncia destes para o protetor solar em pH = 7, apresentando somente grumos. microscopia, bem como na formulao que foi

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Figura 18 - (A) Microscopia tica do protetor solar contendo 15% de ZnO. (B) Microscopia tica do protetor solar contendo 15% de ZnO com cido ltico. Aumento: 100X.

A incompatibilidade com cido gliclico chamou ateno devido existncia de produtos cosmticos e dermatolgicos disponveis no mercado contendo tal substncia associada com filtro solar (Quadro 7). Estes produtos so utilizados para clareamento da pele e devido importncia da proteo solar para a eficcia de diversos tratamentos, filtros solares, preferencialmente inorgnicos, esto sendo includo cada vez mais nestes produtos faciais. Por isso pode levar a incompatibilidades de diversas naturezas com comprometimento da segurana e eficcia do produto, conforme observado nos resultados obtidos.

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Quadro 7 - Produtos cosmticos/dermatolgicos disponveis no mercado Brasileiro contendo cidos orgnicos e filtros solares.
Nome Comercial Funo Ativos Fabricante

BI- WHITE

Diminui a concentrao de melanina nas clulas, reduzindo as manchas escuras

cido kjico 3% + LHA+ FPS 18

Vichy

NEOVADIOL

Indicado para flacidez excessiva e perda do contorno do rosto e manchas. Ao ultrahidratante com filtro solar.

Pro-Xylane concentrado,+ Isobioline + Ceramida White+ LHA e cido Kjico+ gua Termal de Vichy.+ FPS 15 cido kjico + LHA + FPS 15

Vichy

MELANI-D

Creme despigmentante e nutritivo, para resolver desordens pigmentares por excesso de sol.

La Roche Posay

RENEW CLINICAL LUMINOSITY PRO

Creme clareador para as mos.

cido L-asprtico + FPS 15

Avon

KLASSIS

Creme clareador Facial Base corretiva que ajuda a controlar a oleosidade natural da pele
Clareamento gradual de hiperpigmentao da pele, tais como cloasma, melasma, sarda, lentigo senil e outras reas com hiperpigmentao

cido gliclico+ cido ltico+ cido kjico+ Arbutin+ FPS 18 cido saliclico+ FPS 15

Theraskin

BASE NATURAL LIFTING

Dermage

GLYQUIN XM

Hidroquinona + cidoGliclico + Filtros solares

Valeant

Fonte: Avon, Dermage, La Roche Posay, Theraskin, Valeant,Vichy

101

5.7 INFLUNCIA DE EXCIPIENTES QUE INTERFEREM NO FPS A fim de desenvolver um produto que apresentasse FPS potencializado e com base no conhecimento de estudos j realizados com ativos que possuem esta capacidade, como o caso da cera de carnaba (VILLALOBOS, 2006). Forma desenvolvidas formulaes adicionando manteiga de karit, a qual formada basicamente por triglicrides de cidos graxos e potencialmente usada na indstria cosmtica para os cuidados com a pele devido ao seu poder altamente hidratante e emoliente, alm de concentrar steres de cido cinmico, que possuem a capacidade de absorver radiao UVB, tornando o produto mais potente, resistente a gua e estvel (FREITAS 2005). As formulaes contendo manteiga de karit foram desenvolvidas segundo o mtodo descrito no item 4.4.3 e os resultados da caracterizao fsico-qumica (Quadro 8 e 9) apresentaram anlises sensoriais satisfatrias, mas houve uma considervel separao de fases no teste de centrfuga, indicando desestabilizao da formulao. A fim de corrigir este inconveniente, foram preparadas novas formulaes com menor quantidade de manteiga de karit; a separao de fases ocorreu, mas de forma menos significativa.

102

Quadro 8 Caracterizao das formulaes de protetor solar base de ZnO eTiO2 alumina contendo manteiga de karit em diferentes concentraes antes do teste de estabilidade preliminar

FORMULAES COM MANTEIGA DE KARIT

ZnO micronizado
ANLISES

TiO 2 alumina
24,5% 0%
Branco, homogneo, com grumos Muitos grumos Poucas bolhas de ar,muitas gotculas de leo 7,5 No houve separao de fases +++ ++ ++ +++

0%
Branco, homogneo, com grumos Poucos grumos Poucas bolhas de ar e gotculas de leo 7,5 No houve separao de fases +++ ++ ++ +++

16,4%
Branco, homogneo, com grumos Poucos grumos Poucas bolhas de ar e gotculas de leo 7,8 Formao de sobrenadante de 1mm ++ ++ + +

16,4%
Branco, homogneo, com grumos Muitos grumos Poucas bolhas de ar,muitas gotculas de leo 4,9 Houve separao de fases (4)

24,5%
Branco, no homogneo, sem grumos Muitos grumos Poucas bolhas de ar e gotculas de leo 7,0 Houve separao de fases (4)

Macroscpico

Aspecto

Branco homogneo, sem grumos Muitos grumos Poucas bolhas de ar, muitas gotculas de leo 7,5 Houve separao de fases (4) sobrenadante de 3mm +++ +++ ++ +++

Microscpico

pH

Teste de centrfuga

Anlise sensorial

Espalhabilide Absoro Sensao psaplicao Branqueamento

+++ +++ +++ +++

+++ +++ +++ ++

+++ timo; ++ Bom; + Regular; - Ruim

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Quadro 9 Caracterizao das formulaes de protetor solar base de filtros hidroxiapatita contendo manteiga de karit em diferentes concentraes antes do teste de estabilidade preliminar
FORMULAES COM MANTEIGA DE KARIT

Hidroxiapatita
ANLISES

0% Branco, homogneo, com grumos Poucos grumos Poucas bolhas de ar e gotculas de leo 7,5 No houve separao de fases +++ ++ ++ +++

16,4% Branco, homogneo, com grumos Poucos grumos Poucas bolhas de ar e gotculas de leo 9,0 Houve separao de fases com formao de sobrenadante de 2mm ++ ++ ++ ++

24,5% Branco homogneo, sem grumos Poucos grumos Poucas bolhas de ar e pequenas gotculas de leo 8,0 Houve separao de fases, sobrenadante de 2mm +++ +++ +++ +++

Macroscpico

Aspecto

Microscpico

pH Teste de centrfuga

Espalhabilide

sensorial

Anlise

Absoro Sensao psaplicao Branqueamento

+++ timo; ++ Bom; + Regular; - Ruim

104

5.8

AVALIAO

DA

ESTABILIDADE

DAS

FORMULAES

CONTENDO

MANTEIGA DE KARIT

Todas as anlises de caracterizao fisico-qumica foram repetidas aps teste de estabilidade preliminar. As caractersticas macroscpicas das formulaes contendo manteiga de karit foram alteradas antes de completar os 12 dias de estresse trmico e comprovadas com o teste de centrfuga O acompanhamento dos valores de pH durante o estudo de estabilidade fornece informaes a respeito da estabilidade qumica da formulao, ou seja, decrscimos desses valores podem estar relacionados oxidao da fase oleosa com a formao de cadeias oxidadas ou ainda a hidrlise de triglicerdeos, manifestada pela formao de cidos graxos livres (VELASCO, 2002). Foi encontrada diferena nos valores de pH antes e aps estresse trmico principalmente nas formulaes que continham maiores quantidades de manteiga de karit. (Tabela 6)

Tabela 6 - Resultados dos valores de pH, antes e aps o teste de estabilidade preliminar das formulaes contendo manteiga de karit em diferentes concentraes.

Se o pH da disperso abaixo de 4 ou acima de 8 no h carga suficiente para conferir estabilidade. No entanto, se o pH do sistema entre 4 e 8 a disperso pode ser instvel. Isso mais provvel ser o caso em torno de pH 6 (ELAKNESWARAN; NAWA; KURUMISAWA, 2009; LIAO; WU; LIAO, 2009) Potencial zeta e tamanho de partculas foram medidos nas formulaes contendo manteiga de karit a fim de complementar o estudo de estabilidade. Os resultados

105

apresentados na Tabela 7 mostram que de uma maneira geral as formulaes contendo manteiga de karit, principalmente as que continham 16,4% da substncia apresentaram valores de potencial zeta satisfatrios (entre -30 e -60 mV) principalmente se comparados com o controle que no continha manteiga de karit. O tamanho das partculas diminuiu com a menor quantidade de manteiga de karit, demonstrando que nesta concentrao as amostras se mantiveram mais estveis. Entretanto, como as emulses no so definidas como estveis ou instveis apenas com estes dados e sim com outras caractersticas fsico-qumicas (Quadro 8 e 9), que indiquem que h ou no desestabilizao do sistema emulsionado, os estudos apresentados de estabilidade demonstraram instabilidade do sistema emulsionado provavelmente devido a sua composio ser em grande parte por cidos graxos livres, podendo sofrer degradao de cadeia longa de cidos graxos durante o processamento resultando em uma instabilidade do sistema (BAIL, 2009).

Tabela 7 - Resultado de valores de potencial zeta e tamanho de partculas de fotoprotetores produzidos com manteiga de karit.
ZnO micronizado Manteiga de Karit 0% 16,4% (controle) TiO2 Alumina Hidroxiapatita

24,5%

0% 0% 16,4% 24,5% 16,4% (controle) (controle)

24,5%

pz (mV) Tamanho Partcula (m)

-27,2

-56,9

-46,2

36,0

-5,42

14,3

-84,2

-75,0

-67,3

3,2

16,12

25,55

13,5

13,95 13,77

6,2

29,42

32,34

5.9 ESTUDO DE ESPECTROSCOPIA FOTOACSTICA

A tcnica fotoacstica permite o uso de propriedades pticas e trmicas de materiais atravs da anlise do sinal produzido pela absoro de luz modulada por uma amostra (ROSENCWAIG; GERSH, 1976).

106

Neste estudo foram realizadas medidas preliminares (Figura 19) para obteno do espectro fotoacstico de absoro dos filtros solares ZnO micronizado, TiO 2 revestido com alumina e HAP, bem como do creme base. Observa-se na Figura 18 que os filtros inorgnicos medidos absorvem na faixa desejada do UVB (290-320 nm) a UVA (320-400 nm), sendo o TiO2 alumina o filtro que produz maior intensidade de sinal fotoacstico, indicando maior absoro da luz UV por este material quando comparado com ZnO micronizado. A HAP apresentou um baixo sinal fotoacstico, o que possivelmente confirma a necessidade de insero de pelo menos um metal que possa melhorar esta absoro da luz UV pela HAP (RIGANO; GAZZANIGA; RASTRELLI, 2010). O creme base no apresentou sinal fotoacstico.

Figura 19 Espectro fotoacstico de absoro dos filtros inorgnicos ZnO, TiO 2 alumina, HAP e do creme base.

A Figura 20 apresenta o espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares desenvolvidos a partir de uma pr-disperso de filtros inorgnicos. O espectro mostra que os protetores desenvolvidos foram eficazes num amplo intervalo de comprimento de onda, incluindo UVB e UVA, e somente apresentam queda a partir de 400 nm. Esta proteo ampla caracterstica dos filtros inorgnicos. O fotoprotetor desenvolvido com TiO2 alumina

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apresentou melhor resultado quanto absoro de radiao, e a associao do TiO 2 e ZnO no potencializou a absoro de UV. Figura 20 Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares desenvolvidos com prdisperso.

A Figura 21 apresenta os espectros fotoacsticos de absoro dos protetores solares desenvolvidos com os filtros inorgnicos j mencionados, e que foram preparados a partir de uma pr-disperso e pelo mtodo convencional. Observa-se na Figura 21 (A) que o fotoprotetor base de ZnO apresentou melhor resultado de absoro UV quando desenvolvido a partir de uma pr-disperso do que a amostra preparada pelo mtodo convencional, apoiando a idia de que a tcnica da pr-disperso contribui para melhores resultados do produto final. Por outro lado, o mesmo no ocorre para o TiO 2, o qual apresenta um decrscimo de absorbncia com a tcnica de pr-disperso. Como mostra a Figura 21 (D) a absoro da radiao tem um declnio, conforme aumenta o comprimento de onda, absorvendo pouco ou quase nada na regio do UVA (320400 nm).

108

Figura 21 Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares desenvolvidos com (cpd) e sem pr-disperso (spd). A) ZnO micronizado; B) TiO2 alumina; C) ZnO+TiO2; D) HAP.

A presena de cidos orgnicos (gliclico e ltico) nas formulaes de fotoprotetores a base de ZnO diminuiu a capacidade de absoro da luz UV como demonstra a Figura 22, corroborando a incompatibilidade descrita nos resultados anteriores, afetando, dessa forma, no s a estabilidade, bem como a eficcia do produto.

109

Figura 22 Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares contendo cido gliclico e cido ltico.

A Figura 23(A) e 23(B) mostra que a presena da manteiga de karit nas formulaes no contribuiu para o aumento de aboro da radiao UV. O fotoprotetor base de HAP contendo manteiga de karit tambm no apresentou resultados satisfatrios em relao a absoro de radiao tendo um declnio, conforme aumenta o comprimento de onda, absorvendo melhor na regio do UVC (100-280nm). Este resultado pode ser explicado pela desestabilizao do sistema, causada pela manteiga de karit, principalmente pelo aumento no tamanho de partculas.

110

Figura 23 Espectro fotoacstico de absoro dos protetores solares contendo Manteiga de karit em diferentes concentraes. A) ZnO micronizado; B) TiO2 Alumina; C) Hidroxiapatita.

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CONSIDERAES FINAIS

112

CONSIDERAES FINAIS

Os resultados obtidos no presente trabalho permitiram as seguintes concluses: Os filtros inorgnicos apresentaram atividade fotocataltica distintas, dependendo da radiao UV utilizada. Dentre os filtros estudados, a HAP foi a que apresentou o menor risco biolgico em termos de atividade fotocataltica. Comprovando a hiptese estabelecida, alguns cidos orgnicos utilizados em formulaes cosmticas e dermatolgicas, mais especificamente os cidos ltico e gliclico, apresentaram incompatibilidades com o ZnO. Por meio dos estudos de potencial zeta, tamanho de partcula, microscopia e estabilidade, foi possvel comprovar que, no s os excipientes, mas tambm o mtodo de preparo so de fundamental importncia para obteno de formulaes fsico quimicamente estveis. A HAP apresentou caractersticas promissoras quanto sua aplicao em produtos fotoprotetores, devido sua baixa reatividade e estabilidade fsica. A tcnica fotoacstica permitiu a obteno do espectro de absoro dos protetores solares desenvolvidos, onde foi possvel verificar que os produtos apresentaram absoro efetiva na regio do UVB e UVA conforme caractersticas dos filtros inorgnicos. Tambm foi possvel concluir que a a absoro da luz UV pelo ZnO favorecida pela tcnica da pr- disperso, seguido do TiO2 e por ltimo a HAP. Ressalta-se a importncia da continuao dos estudos nesta linha de pesquisa, pois parmetros como mtodo de incorporao dos princpios ativos, seleo adequada dos componentes de formulao, estabilidade e segurana do produto devem ser constantemente aprimorados, posto que diariamente so lanados no mercado novos componentes farmacotcnicos, exigindo-se assim o conhecimento aprofundado das caractersticas fsicoqumicas de uma extensa gama de matrias-primas, alm do aperfeioamento das tcnicas de preparo dos sistemas emulsionados, a fim de se obter, acima de tudo, um produto com baixo potencial de risco biolgico e alto FPS.

113

REFERNCIAS

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7 REFERNCIAS
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APNDICE

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8 APNDICE
Resumo e abstract do artigo submetido