FESURV UNIVERSIDADE DE RIO VERDE FACULDADE DE MEDICINA VETERINRIA

HEMOPARASITOSES EM CES E GATOS

JESSICA BACHION CERIBELI Orientadora: Prof. KARINA DE BARROS

Trabalho de Concluso de Curso apresentado Faculdade de Medicina Veterinria da Fesurv Universidade de Rio Verde, resultante de Estgio Curricular Supervisionado como parte das exigncias para obteno do ttulo de Mdica Veterinria.

RIO VERDE GOIS 2010

JESSICA BACHION CERIBELI

HEMOPARASITOSES EM CES E GATOS

Trabalho de Concluso de Curso apresentado Faculdade de Medicina Veterinria da Fesurv Universidade de Rio Verde, resultante de Estgio Curricular Supervisonado como parte das exigncias para obteno do ttulo de Mdica Veterinria.

Aprovado em: 01/12/2010

_______________________________________ PROF. ESP. CRISTIANE RAQUEL DIAS FRANCISCHINI

_______________________________________ RENATTA PEREIRA PACHECO

____________________________ PROF. KARINA DE BARROS (Orientadora)

RIO VERDE - GOIS 2010

DEDICATRIA Dedico este trabalho aos meus pais Rogrio e Maria Cludia, aos meus irmos Harrison e Kevin, por estarem sempre ao meu lado sendo a segurana e a direo dos meus passos e aos Mdicos Veterinrios Karina de Barros, Bruno Machado Thevenard e Luana Campos Penido, por terem contribudo incansavelmente para que esta realizao se tornasse possvel.

AGRADECIMENTOS Agradeo primeiramente ao meu irmo Harrison, por estar sempre ao meu lado sendo para mim um exemplo de pessoa e profissional, e motivo pelo qual procuro sempre alcanar da melhor forma possvel, meus objetivos. Ao meu irmo Kevin, por tambm ser um exemplo de pessoa e de profissional em formao, se dedicando em tudo o que faz, sendo motivo de orgulho para mim. Aos meus pais Rogrio e Maria Cludia, pelo amor incondicional que tm por mim, estando sempre presentes em minha vida. Aos meus avs e avs Dirce, Iolanda, Lenidas e Jos Maria, por nunca me deixarem desistir de nada e pelo amor que me dedicam mesmo estando fisicamente distantes. Aos donos do Animallab, Angelita e Djalma, e ao Bioqumico Jaeder por terem me acolhido durante o estgio obrigatrio, permitindo que eu adquirisse conhecimentos para me tornar uma boa profissional. Lusa Marchetto, por ter seu lugar especial em minha vida, sendo tambm parte da famlia. Mdica Veterinria Karina de Barros, por ter feito parte deste trabalho me auxiliando na construo do mesmo, fazendo mais uma vez, parte do meu crescimento profissional e pessoal. Mdica Veterinria Luana Campos Penido, pela pacincia e amizade dedicadas e sabedoria e auxlio concedidos durante o estgio obrigatrio. Tendo se tornado um dos meus exemplos. Ao Mdico Veterinrio Bruno Machado Thevenard, pela amizade, pacincia e inmeras vezes em que me ajudou. Aos Mdicos Veterinrios Tarcsio Vione e Carlos Christo, por terem feito parte da minha aquisio de conhecimentos profissionais. professora Raquel e Mdica Veterinria Renatta por terem aceitado compor minha banca examinadora.

Aos meus amigos Pamela Souza, Cristiane Loiolla, Patrcia Beirigo Ramos, Matheus Imperatriz, Carlos Christo, Pedro Gustavo Montini e Alberto Fernandes por fazerem parte da minha vida de maneira especial. Aos meus primos Mariana, Leonardo e Guilherme Ceribeli, Marina e Gilia Mastrelli, e Matheus Barbanti, por serem incrveis em tudo. Ana Paula Ceribeli, por ser minha tia, prima, amiga e irm por escolha. Por fim, agradeo a Felipe Olympio, por estar ao meu lado e em pouco tempo, ter se tornado to importante.

RESUMO

CERIBELI, J.B. Hemoparasitoses em ces e gatos. 2010. 48 f. Trabalho de concluso de curso (graduao em Medicina Veterinria) FESURV Universidade de Rio Verde, Rio Verde, 2010.1 O seguinte trabalho contm atividades desenvolvidas durante o Estgio Curricular Supervisionado em Medicina Veterinria no Animallab Laboratrio Veterinrio, localizado no municpio de Vila Velha Esprito Santo, na rea de anlises clnicas laboratoriais. Compondo o quadro de atividades desenvolvidas esto: recebimento em laboratrio e realizao de amostras na rea hematolgica, bioqumica, parasitolgica, microbiolgica e imunolgica, e discusso de resultados encontrados. Dos diversos achados laboratoriais durante o estgio realizado, Ehrlichia canis, por apresentar maior casustica no dia a dia, foi escolhido para discusso tambm em relato de caso. O diagnstico clnico laboratorial, quando realizado precocemente, permite a realizao do tratamento adequado mais cedo e evita que determinadas enfermidades se agravem por teraputica tardia. PALAVRAS CHAVE:

Anaplasmose, Erliquiose, Micoplasmose

Banca Examinadora: Prof. Karina de Barros (Orientadora). Prof. Esp. Cristiane Raquel Dias Francischini (Fesurv- Universidade de Rio Verde); Mdica Veterinria Renatta Pereira Pacheco.

ABSTRACT CERIBELI, J. B. Hemoparasitoses in dogs and cats. 2010. 48 f. Completion of course work (graduate in Veterinary Medicine) - FESURV - University of Rio Verde, Rio Verde, 2010.2

The work contains the following activities during the Supervised Practices in Veterinary Medicine in Animallab Veterinary Laboratory, located in Vila Velha - Esprito Santo, in the area of clinical analysis laboratory. Compounding the framework of activities is: receiving and conducting laboratory samples in the area hematological, biochemical, parasitological, microbiological and immunological responses, and discussion of results. Of the various laboratory findings made during the internship, Ehrlichia canis, due to a higher incidence in the day to day, also was chosen for discussion in a case report. The clinical laboratory diagnosis, when performed early, allows the realization of adequate early treatment and prevents certain illnesses from getting worse by delayed therapy.

KEY WORDS:

Anaplasmosis, Ehrlichiosis, Mycoplasmosis

Board of examiners: Prof. Karina de Barros (Advisor). Prof. Esp. Cristiane Raquel Dias Francischini (Fesurv - University of Rio Verde).; Veterinary Medical Renatta Pereira Pacheco.

LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1 Mquina para hemograma animal.................................................................. FIGURA 2 Kit comercial para Cinomose......................................................................... FIGURA 3 Girdia e Ovo de Eimeria sp..........................................................................

17 18 20

FIGURA 4 Ehrlichia canis em moncito, vista por microscopia, em lmina de esfregao sanguneo........................................................................................................... 23 FIGURA 5 Vetor do agente etiolgico Ehrlichia canis, Rhipicephalus sanguineus........ 24

FIGURA 6 Neutrfilo segmentado infectado por Ehrlichia canis, visualizada durante o ESO, em esfregao sanguneo, corado com corante Wright............................................. 26 FIGURA 7 Esfregao sanguneo contendo Anaplasma platys em plaqueta de co.......... 31

FIGURA 8 Alta infeco por Mycoplasma haemofelis encontrada em hemcias vistas atravs de esfregao sanguneo.......................................................................................... 34 FIGURA 9 Ehrlichia canis em citoplasma de neutrfilo segmentado.............................. 42

LISTA DE QUADROS

QUADRO 1 Resultados obtidos pelo hemograma realizado em 14/10/2010 no Animallab e valores referenciais normais de hemograma canino.................................... 41 QUADRO 2 Valores relativos e absolutos em contagem de leuccitos padro para ces sadios e valores encontrados na leitura da lmina de esfregao sanguneo do animal................................................................................................................................ 41

LISTA DE TABELAS

TABELA 1 Anlises realizadas durante o estgio supervisionado obrigatrio, na rea de anlises clnicas veterinrias, no Animallab no perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010........................................................................................................... 16 TABELA 2 Categorias de exames oferecidos pelo Animallab Laboratrio Veterinrio com suas respectivas anlises especficas....................................................................... 19 TABELA 3 Anlises bioqumicas realizadas e suas respectivas quantidades no perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010..................................................... 20 TABELA 4 Parasitos encontrados em amostras de fezes de diferentes espcies animais, submetidos exame coproparasitolgico durante o perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010 no Laboratrio Veterinrio Animallab................................. 21

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

AAG - Alfa 1 cido Glicoprotenas AIF - Anemina Infecciosa Felina ALT - Alanina Aminotransferase A. platys - Anaplasma platys AST - Aspartato Aminotransferase Bpm - Batimentos Por Minuto CRP - Protenas C-Reativas E. canis - Ehrlichia canis EDTA - cido Etilenodiaminotetractico ELISA - Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay EMC - Erliquiose Monoctica Canina ES - Esprito Santo ESO - Estgio Supervisionado Obrigatrio ETC - Erliquiose Tromboctica Canina FA - Fosfatase Alcalina FeLV - Vrus da Leucemia Felina GGT - Gama Glutamil Transpeptidade CHGM - Concentrao de hemoglobina globular mdia HE - Hemlise Extravascular HGM - Hemoglobina Globular Mdia HI - Hemlise Intravascular II - Imunofluorescncia Indireta Kg - Quilogramas LDH - Lactato Desidrogenase (Lipoprotenas de Alta Densidade) M. haemofelis - Mycoplasma haemofelis MHF - Micoplasmose Hemotrpica Felina Mpm - Movimentos Por Minuto

PCR - Reao de Polimerizao em Cadeia Rpm - Rotaes Por Minuto TP - Tempo de Protrombina TPPA - Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada VGM - Volume Globular Mdio

SUMRIO

INTRODUO................................................................................................................ 1 ATIVIDADES DESENVOLVIDAS............................................................................ 2 REVISO DE LITERATURA..................................................................................... 2.1 Introduo................................................................................................................... 2.1.1 Erliquiose monoctica canina (EMC)...................................................................... 2.1.2 Agente etiolgico e epidemiologia.......................................................................... 2.1.3 Patogenia................................................................................................................. 2.1.4 Sinais clnicos.......................................................................................................... 2.1.5 Diagnstico.............................................................................................................. 2.1.6 Tratamento............................................................................................................... 2.1.7 Prognstico.............................................................................................................. 2.1.8 Profilaxia................................................................................................................. 2.2 Erliquiose tromboctica canina (ETC)........................................................................ 2.2.1 Agente etiolgico.................................................................................................... 2.2.2 Aspectos epidemiolgicos....................................................................................... 2.2.3 Patogenia................................................................................................................. 2.2.4 Sinais clnicos.......................................................................................................... 2.2.5 Diagnstico.............................................................................................................. 2.2.6 Tratamento............................................................................................................... 2.2.7 Prognstico.............................................................................................................. 2.2.8 Profilaxia................................................................................................................. 2.3 Micoplasmose hemotrpica felina (MHF)................................................................. 2.3.1 Agente etiolgico e epidemiologia.......................................................................... 2.3.2 Patogenia................................................................................................................. 2.3.3 Sinais clnicos......................................................................................................... 2.3.4 Diagnstico............................................................................................................. 2.3.5 Tratamento.............................................................................................................. 2.3.6 Prognstico.............................................................................................................. 2.3.7 Profilaxia................................................................................................................. 3 RELATO DE CASO..................................................................................................... 3.1 Descrio de caso...................................................................................................... 3.2 Discusso.................................................................................................................... 4 CONCLUSO............................................................................................................... REFERNCIAS...............................................................................................................

14 16 22 22 23 23 25 25 26 28 29 29 30 31 32 32 32 33 33 33 34 34 35 36 36 37 38 39 39 40 40 42 44 45

INTRODUO Durante o perodo de 6 de setembro at 30 de novembro de 2010, foi realizado o estgio curricular obrigatrio em Medicina Veterinria no Laboratrio Veterinrio Animallab. A rea de atuao foi anlises clnicas laboratoriais, com atividades totalizando 410 horas, sob orientao da Mdica Veterinria Luana Campos Penido. O laboratrio de anlises clnicas veterinrias Animallab localiza-se na Av. Champagnat, n 501, sala 607, Praia da Costa, no municpio de Vila Velha ES, tendo como funes a realizao de anlises clnicas exclusivamente na rea veterinria, sendo estas, anlises hematolgicas, bioqumicas, microbiolgicas, parasitolgicas e toxicolgicas, os demais tipos de anlises como dosagens hormonais, histopatolgicos, imunolgicos, dentre outros, so terceirizados. A estrutura dividida em duas reas principais: rea de recepo de amostras e rea para armazenamento e realizao de anlises requisitadas. Alm da estrutura fsica, o Animallab conta com um auxiliar administrativo e uma equipe de profissionais, sendo uma biloga, dois farmacuticos bioqumicos, uma mdica veterinria, todos responsveis pela realizao das anlises de todas as amostras enviadas. composto por uma sala de recepo, onde cada amostra encaminhada ao laboratrio tem sua ficha de requisio (composta por Logotipo do laboratrio veterinrio, numerao seqencial nica, espao para o nome da entidade veterinria (clnica, consultrio), nome do paciente, espcie, raa, sexo, idade, data e hora da coleta, nome do responsvel pelo paciente, material enviado, espao para o preenchimento dos dados clnicos mais importantes, espao para anotao do carimbo e assinatura do Mdico Veterinrio, categoria dos exames solicitados verificada e cadastrados no software especfico de gerenciamento do laboratrio). Possui tambm uma rea com chuveiro e lava olhos, e uma sala ampla dividida por tipo de anlise efetuada (hematolgica, parasitolgica, microbiolgica, bioqumica, imunolgica e toxicolgica) contando ainda com uma rea especfica para limpeza e esterilizao de material, e descarte de contaminantes. O laboratrio veterinrio Animallab foi selecionado para realizao do estgio curricular obrigatrio por apresentar uma variedade considervel de anlises clnicas

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oferecidas e por possuir profissionais qualificados e experientes nesta rea, que com seriedade contriburam para o aprendizado. Durante a realizao do estgio foram acompanhados procedimentos laboratoriais diversificados, como a preparao de lminas para coproparasitolgico, leitura de esfregaos sanguneos, culturas microbiolgicas, dentre outros. Encontraram-se em maior quantidade amostras com Demodex canis (em pesquisa direta de sarna e fungos), Ancylostoma sp. (em pesquisa coproparasitolgica), Ehrlichia canis (em pesquisa hematolgica). Sendo outros achados um pouco menos freqentes, porm, no menos importantes. Sabe-se que na atualidade, a Erliquiose Canina trata-se de uma enfermidade freqente, apresentando sinais clnicos de leves a severos, dependendo do estgio em que a doena se encontra. Deste modo, optou-se por discorrer no presente trabalho com mais profundidade sobre este tema por ter apresentado na rotina laboratorial um nmero maior de diagnsticos positivos para as suspeitas recebidas juntamente com as amostras. Como complemento a Erliquiose canina, incluiu-se tambm a Erliquiose Tromboctica Canina (cuja importncia na clnica tambm relevante, apesar de ser de mais difcil diagnstico) e ainda a Micoplasmose Hemotrpica Felina, que mesmo sendo menos comum, tem sua importncia ao ser diagnosticada precocemente.

1 ATIVIDADES DESENVOLVIDAS

O Estgio Supervisionado Obrigatrio (ESO) foi realizado no Animallab, laboratrio veterinrio, no perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010, sob a orientao da professora Karina de Barros e superviso local da Mdica Veterinria Luana Campos Penido. Fizeram parte das atividades do ESO e execuo de anlises hematolgicas, parasitolgicas, urinlises, imunolgicas, microbiolgicas e bioqumicas de amostras encaminhadas por clnicas e consultrios veterinrios localizados no estado do Esprito Santo, totalizando assim, 410 horas. Durante esse perodo, foram realizadas no total 568 anlises, sendo 250 hematolgicas, 260 bioqumicas, 6 microbiolgicas, 10 urinlises, 4 imunolgicas, 31 parasitolgicas e 7 micolgicas (Tabela 1). TABELA 1 Anlises realizadas durante o estgio supervisionado obrigatrio, na rea de anlises clnicas veterinrias, no Animallab no perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010.

Tipo de Anlise Hematolgica Bioqumica Microbiolgica Urinlise Imunolgica Parasitolgica Micolgica TOTAL

Quantidade 250 260 6 10 4 31 7 568

Porcentagem 44,02% 45,77% 1,06% 1,76% 0,70% 5,46% 1,23% 100%

As anlises hematolgicas (44,02%) acompanhadas e realizadas durante o ESO consistiam em identificao e homogeneizao da amostra (durante 5 minutos), passagem

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pela mquina automtica para hemograma animal (Figura 1), confeco de esfregao sanguneo submetendo-o posteriormente ao corante Wright e soluo tampo (durante 6 minutos e 15 segundos) e acompanhamento da leitura de lmina (contagem diferencial leucocitria, verificao de populao plaquetria, anlise de presena ou ausncia de diferentes graus de hipocromia, policromasia, microcitose, granulaes txicas em neutrfilos, macroplaquetas e hematozorios).

FIGURA 1 - Mquina para hemograma animal.

Fonte: Arquivo Pessoal (2010).

No total de 45,77% das atividades desenvolvidas, as anlises bioqumicas eram compostas por identificao da amostra, centrifugao (a 4 rpm por 10 minutos) para obteno de soro, preparao das solues utilizadas como reagentes pela mquina bioqumica, passagem pela mquina bioqumica e por fim, leitura e anotao dos resultados. Quanto s anlises microbiolgicas (1,06%), aps recebimento e identificao de amostra, de acordo com o tipo de exame microbiolgico requisitado, eram semeadas as culturas mediante padres asspticos como: uso de materiais estreis, ato de flambar a ala de inoculao, inocular em rea segura e armazenar culturas em temperatura adequada na estufa. Aps prazo definido por tipo de cultura, a leitura de resultados era executada. Em relao s urinlises (1,76%), ao serem recebidas as amostras eram identificadas, tendo sua cor, aspecto e volume anotados e em seguida, parte de cada amostra era reservada para uso da fita reagente. Feita a leitura das fitas, prosseguia-se as anlises com a centrifugao do restante das amostras para obteno do sedimento urinrio, aps este procedimento o sobrenadante era desprezado, podendo-se ento preparar cada lmina com os sedimentos a serem analisados via microscpio, com obteno de resultados a serem lidos adequadamente.

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As anlises imunolgicas so realizadas, no Animallab, apenas para diagnstico de cinomose. Foram realizadas 4 amostras (0,70%). A realizao do teste de cinomose inicia-se com a identificao da amostra e preparo do Kit para deteco de Cinomose (Teste para deteco do vrus da cinomose Ag canino: Mtodo para diagnstico veterinrio imunocromatogrfico (Figura 2) gerando em seguida, resultado preciso para positividade ou negatividade cinomose.

FIGURA 2 - Kit comercial para Cinomose.

Fonte: Arquivo Pessoal (2010).

Ainda

entre

as

anlises

clnicas

veterinrias

realizadas,

encontram-se

as

parasitolgicas realizadas com identificao de amostras recebidas, preparo das mesmas para as trs diferentes tcnicas (Sedimentao Simples ou Hoffman, Mtodo Direto e Mtodo de Willis.) e aps leitura de lmina, obteno de resultados. Foram realizadas 31 anlises, correspondentes a 5,46% do total de anlises realizadas durante o estgio. Anlises micolgicas, compondo 1,29% do total de anlises realizadas no Animallab, eram feitas por mtodo de pesquisa direta em lmina e microscpio ptico, a partir de raspados de pele profundos e procura de fungos. Outros tipo de anlises realizadas como dosagens hormonais, necropsias, sorologia para raiva e anlises histopatolgicas no foram listadas nem contabilizadas pois as amostras que so recebidas pelo Animallab, so terceirizadas em seguida. O laboratrio veterinrio Animallab oferece uma lista extensa de anlises, porm, durante o ESO, algumas anlises destacaram-se e puderam ser realizadas frequentemente como hemograma completo, pesquisa de hematozorios, mensurao de enzimas como ALT, AST, FA e outros parmetros listados nas Tabelas 2 e 3.

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TABELA 2 - Categorias de exames oferecidos pelo Animallab Laboratrio Veterinrio com suas respectivas anlises especficas. Categoria Hematologia Anlise Especfica Hemograma Completo Hemograma Completo + Pesquisa de Hematozorios Hemograma Completo + Contagem de Reticulcitos Hematimetria Leucometria Plaquetometria Hematcrito VHS Hemograma Completo + Protenas Totais Bioqumica Bilirrubina Total e Fraes Creatinina Fosfatase Alcalina GGT Glicose Protena Total e Fraes AST (TGO) ALT (TGP) Triglicrides Uria Microbiologia Cultura e Antibiograma Cultura para Fungos Urinlise (EAS) Fita Reagente (Mtodo Colorimtrico) Sedimentoscopia Imunologia Parasitologia Cinomose (Kit rpido 97.99% AG.) Exame de fezes direto comum Exame de fezes por trs mtodos diferentes Pesquisa direta de sarna

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TABELA 3 Anlises bioqumicas realizadas e suas respectivas quantidades no perodo de 6 de setembro a 30 de novembro de 2010. Bioqumica Albumina ALT (TGP) AST (TGO) Bilirrubina Direta Bilirrubina Total Creatinina Fosfatase Alcalina GGT Glicose Protena Total Uria TOTAL Quantidade 04 63 18 05 04 64 14 08 12 05 49 248 Porcentagem 1,61% 25,39% 7,26% 2,02% 1,61% 25,80% 5,65% 3,23% 4,84% 2,02% 19,76% 100%

Na rea parasitolgica, atravs de exame de fezes direto ou ainda por sedimentao, parasitos como Eimeria sp (Figura 3), Ascaris sp. e Paragonimus westermani foram identificados em animais de diferentes espcies como demonstrados na Tabela 4.

FIGURA 3 Girdia e Ovo de Eimeria sp. Fonte: Arquivo Pessoal (2010).

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TABELA 4 Parasitos encontrados em amostras de fezes de diferentes espcies animais submetidos exame coproparasitolgico durante o perodo de 6 de setembro a 30 de novembro no laboratrio veterinrio Animallab. Espcie Animal Golfinho (Sotalia guianensis) Parasitos Encontrados Paragonimus westermani Diphyllobothrium sp Ascaris sp Contracaeum pelagicus Pinguim (Spheniscus magellani) Co Ascaris sp Ancylostoma sp. Isospora sp. Albatroz (Albatroz sp) Calopsita Ascaris sp Eimeria sp Capillaria sp. Girdia sp.

2 REVISO DE LITERATURA

2.1 Introduo Na Medicina Veterinria, encontram-se algumas hemoparasitoses causadoras de enfermidades relevantes que acometem diversas espcies como equinos, bovinos, animais silvestres e ces e gatos domsticos. Os principais agentes etiolgicos, sendo mais comumente encontrados em ces e gatos domsticos so a Ricketisia: Ehrlichia spp, as Mycoplasmaceas: Mycoplasma haemocanis (Haemobartonella canis) e Mycoplasma haemofelis

(Haemobartonella felis) e os protozorios: Babesia sp e Hepatozoon sp (THRALL et al, 2006; MUNDIM et al, 2008). A transmisso ocorre atravs da picada de artrpodes hematfagos ou ainda, por transfuso sangunea. O que permite frequncia consideravelmente elevada de casos mesmo com tratamentos clnicos institudos, a no realizao de controles funcionais para combate de vetores (Pulgas, carrapatos e piolhos) no ambiente em que ces e gatos domsticos se encontram habitualmente (RISTOW et al, 2007). Segundo Duarte (2010), os carrapatos, vetores destes agentes etiolgicos, concentram-se com maior intensidade em regies de clima tropical e subtropical. Como principais manifestaes clnicas de animais infectados, podem-se observar pirexia, anemia e apatia, tornando difcil seu diagnstico clnico por serem estes sinais clnicos comuns a diversas afeces (RISTOW et al, 2007). Determinados microorganismos que parasitam diretamente as hemcias podem provocar hemlise intravascular (HI) ou hemlise extravascular (HE), entretanto, alguns deles podem no provocar anemia hemoltica. Para que se possa diagnosticar laboratorialmente a presena de hemoparasitoses, utiliza-se da pesquisa de hematozorios em esfregaos sanguneos. Porm, h tambm o mtodo de PCR que pode ser utilizado para diagnstico mais preciso, at mesmo antes da manifestao de sinais clnicos, por ser um mtodo altamente sensvel na deteco de pequena quantidade do microorganismo. A maior parte dos hemoparasitas leva a um quadro de anemia devido HE imunomediada, com exceo da

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Babesia sp e Theileria. Anticorpos contra os microorganismos, complexos imunes ou complemento se ligam s hemcias, levando a fagocitose por macrfagos (THRALL et al, 2006).

2.1.1 Erliquiose Monoctica Canina

Por Erliquiose canina entende-se uma enfermidade de grande importncia na clnica mdica de pequenos animais e tambm sade pblica, sendo responsvel por diversos casos de morbidade e bitos em ces, sendo capaz de tambm acometer seres humanos, sendo considerada desse modo, como uma zoonose (DAGNONE, 2001; DUARTE, 2010).

2.1.2 Agente Etiolgico e Epidemiologia

Ricktsias so microorganismos intracelulares obrigatrios, pleomrficos, Gram negativos que parasitam principalmente moncitos (Figura 4), linfcitos, macrfagos e neutrfilos segmentados ou bastonetes. Tais microorganismos so transmitidos por artrpodes, principalmente pelo Rhipicephalus sanguineus (tambm conhecido como carrapato marrom). A Erliquiose canina, tambm conhecida como Erliquiose canina monoctica apresentou-se como enfermidade pela primeira vez no Brasil no estado de Minas Gerais em Belo Horizonte, os agentes causadores desta patologia so Ehrlichia canis que se manifesta provocando distrbios monocitrios e Ehrlichia platys, atualmente nomeada Anaplasma platys que aparece provocando trombocitopenia cclica nos animais acometidos (DAGNONE, 2006; MUNDIM et al., 2008; LIBERATI et al., 2009; SILVA, 2009).

FIGURA 4 - Ehrlichia canis em moncito, vista por microscopia, em lmina de esfregao sanguneo.
Fonte: ANDEREG, (1999).

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Reconhecido como o principal vetor da Ehrlichia canis, o Rhipicephalus sanguineus (Figura 5) pertence famlia Ixodidae sendo composta por carrapatos de tegumentos duros, caracterizados por possurem aparato bucal composto por quelceras, maxilipalpos e hipostoma que permite uma slida e tenaz fixao na pele do hospedeiro (LIBERATI et al., 2009).

FIGURA 5 Vetor do agente etiolgico Ehrlichia canis, Rhipicephalus sanguineus.

Fonte: SILVA (2010).

Ao realizar o repasto, o vetor Rhipicephalus sanguineus, j portador do agente Ehrlichia canis, ir inocul-lo na circulao sangunea do animal do qual estar se alimentando, desta forma, constituindo fase varivel com durao de duas a quatro semanas, com caractersticas leves a severas (SALGADO, 2006; GALVO, 2009). Alm de transmitir o agente para o co, atuando como vetor, o carrapato pode atuar como reservatrio primrio de E. canis transmitindo por at 155 dias a bactria em qualquer estgio de desenvolvimento (PEDROSO, 2006). No carrapato, a Ehrlichia canis se multiplica nos hemcitos e nas clulas da glndula salivar, permitindo a transmisso transestadial. A transmisso transovariana provavelmente no ocorre (STORTI, 2006). Aps serem transmitidos pela saliva do vetor, os corpsculos penetram nas clulas monocticas do hospedeiro por fagocitose e desenvolvem-se no interior das mesmas formando mrulas (Aps 7-12 dias) podendo-se encontrar ento, mais de uma mrula por clula infectada. Aps lise ou exocitose celular, as mrulas so liberadas e contaminam novas clulas (ESTEVES, 2007).

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2.1.3 Patogenia Segundo Sousa (2006), quando h poucas clulas infectadas por E. canis, o organismo do hospedeiro consegue combater a infeco por si s, no manifestando sinais clnicos da doena. Porm, quando h grande quantidade destes organismos patognicos no animal, no h necessidade de ocorrer lise de clulas j infectadas para que a Ehrlichia se multiplique, pois pode tambm causar infeco via exocitose atravs da fuso da membrana do vacolo com a membrana plasmtica. A doena em questo divide-se em trs fases, aguda, subclnica e crnica. Na fase aguda (manifesta-se de uma a trs semanas aps a contaminao pelo agente e apresenta durao de 2 a 4 semanas), E. canis prolifera-se em rgos do Sistema Mononuclear Fagocitrio (fgado,bao e linfonodos), gerando hiperplasia dessa mesma linhagem celular e organomegalia (linfoadenopatia, esplenomegalia e hepatomegalia). Nesta mesma fase de proliferao comumente depara-se com trombocitopenia, com ou sem anemia e leucopenia., apresentando tambm dores musculares, anemia arregenerativa num quadro que vai do leve ao moderado, seguindo com replicao do agente. (GALVO, 2009). Em relao fase subclnica, tem-se durabilidade de semanas a meses e caracterizao por persistncia do agente no hospedeiro promovendo altos ttulos de anticorpos mesmo com aparente melhora da fase aguda, tornando-o deste modo, portador do agente etiolgico. Posteriormente, entra-se na fase crnica da doena, onde h perda da competncia imunolgica do co, tornando os sinais clnicos mais intensos pelo aparecimento de hipoplasia medular, anemia aplsica, monocitose, linfocitose e leucopenia (DAGNONE, 2001; GALVO, 2009). Ainda como manifestaes clnicas da Erliquiose canina, podem-se ter meningites e doenas oculares devido predileo do agente por clulas encontradas na micro-circulao dos pulmes, rins e meninges dos ces (ESTEVES, 2007).

2.1.4 Sinais Clnicos

Na Erliquiose, os sinais clnicos mais observados em ces infectados so apatia, anorexia e emaciao (MENESES, 2008). Os sinais clnicos variam de acordo com o estgio da doena. Na fase aguda, pode-se observar frequentemente hipertermia, perda de peso, depresso e astenia. Tambm pode-se notar com menos probabilidade, secreo nasal, anorexia, petquias hemorrgicas, epistaxe, hematria, ou ainda edema de membros, vmitos, sinais pulmonares e insuficincia

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hepato-renal. Quando o animal entra na fase subclnica, geralmente fica assintomtico, mas pode vir a manifestar sinais de depresso, hemorragias, edema de membros, perda de apetite e palidez de mucosas. Na ltima fase, o animal encontra-se no estgio crnico da enfermidade, devendo possivelmente apresentar perda de peso, pirexia, sangramento espontneo, palidez devido anemia, linfadenopatia generalizada, hepatoesplenomegalia, uvete anterior ou posterior, sinais neurolgicos causados por meningoencefalomielite e edema de membro intermitente (STORTI, 2006).

2.1.5 Diagnstico

As chances de cura esto relacionadas diretamente a precocidade do diagnstico. Em casos onde se manifestam anemia regenerativa na fase aguda da doena, devido perda de sangue pela vasculite ou ainda anemia arregenerativa na fase crnica devido supresso da medula ssea; faz-se fundamental um diagnstico rpido para que se recupere o animal o mais rpido possvel a fim de evitar que ele venha a bito (FERNANDES, 2008; GALVO, 2009). Realizando-se mtodo direto para pesquisa (Figura 6), ou seja, via microscpio e esfregao sanguneo, as lminas a serem analisadas podero ser coradas com preparaes com base Romanovsky, como Giemsa, Wright, Leishman, Rosenfeld ou Pantico (DUARTE, 2010).

FIGURA 6 Neutrfilo segmentado infectado por Ehrlichia canis, visualizada durante o ESO, em esfregao sanguneo, corado com corante a base de glicerol e metanol absoluto.
Fonte: Arquivo Pessoal (2010).

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O diagnstico de erliquiose canina pode-se dar por pesquisa de incluses como mrulas em esfregaos sanguneos e exame da capa leucocitria, que so mtodos de diagnstico rpidos e baratos que podem gerar resposta precoce ao decorrer da enfermidade permitindo o tratamento ainda em estgio subclnico, a fim de se tentar evitar que o animal manifeste a forma clnica. Tambm se pode fazer deteco pelo isolamento do agente por cultivo celular, por tcnicas sorolgicas como imunofluorescncia indireta, ensaio de imunoadsoro enzimtica (ELISA), western bloting e, recentemente por tcnicas moleculares como PCR (SALGADO, 2006; MENESES, 2008; RAMOS, 2009). Deve-se avaliar como um conjunto as evidncias hematolgicas apresentadas perante exames laboratoriais aonde atravs destes, juntamente com a clnica, poder-se- chega a uma estimativa de qual estgio da doena o animal se encontra. Na fase aguda, percebe-se (atravs da visualizao em esfregao sanguneo) que as plaquetas encontram-se arredondadas, aglutinadas e vazadas, devido inibio da migrao plaquetria causada pelos linfcitos ativados, no permitindo que a mesma possa desenvolver seus pseudpodes. Devido tambm ao processo inflamatrio, tem-se diminuio do nmero de clulas vermelhas. Na fase sub-clnica, encontra-se elevado ttulo de anticorpos, trombocitopenia e anemia arregenerativa. Por fim, na fase crnica, fica evidente a pancitopenia, associada aos sinais clnicos que alm do convencional, tambm pode apresentar sintomatologia nervosa (ESTEVES, 2007). Segundo Xavier (2009), pode-se encontrar tambm trombocitose, mesmo em fase de infeco desta doena, pois mesmo havendo seqestro esplnico das plaquetas, a medula pode apresentar boa capacidade regenerativa, levando ao aumento na quantidade de plaquetas do animal infectado por E. canis. A deteco de corpsculos de incluso ou mrulas pode ser realizada tambm por anlise de lquido cefalorraquidiano, lquido sinovial, aspirados de medula ssea e bao, sendo obtidos resultados positivos para a Erliquiose mesmo quando em esfregaos sanguneos apenas resultados negativos foram alcanados (DAGNONE, 2001). Em relao bioqumica, observa-se hipoalbuminemia, Fosfatase Alcalina, Alanina Amino Transferase, Lactato Desidrogenase, Creatinina e Uria com atividades e concentraes elevadas (ESTEVES, 2007; FERNANDES, 2008). Ao testar-se tempo de Tempo de Protrombina (TP) e Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (TTPA), pode-se observar que no existem alteraes muito relevantes, o que no poderia ser utilizado como mtodo diagnstico, pois, um animal que apresente CID, ter seus tempos de TP e TTPA alterados (XAVIER, 2009).

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Ainda pode-se encontrar em realizao de anlises bioqumicas, aumento de protenas C-reativas (CRP), Alfa 1 cido glicoprotenas (AAG) e aumento da bilirrubina total (PEDROSO, 2006). Segundo Dagnone (2001), por testes de Imunofluorescncia Indireta, para deteco de anticorpos sricos no se obtm resultados satisfatrios, pois h tambm deteco de anticorpos contra outros tipos de Ehrlichia, alm da canis. Atravs da utilizao do mtodo de PCR, por identificao via primers especficos (seleo de regies especficas de um determinado organismo) tem-se deteco da infeco por perodos estendidos, mas h uma deficincia nessa deteco pelo sangue quando ocorre clearence com as clulas sanguneas contaminadas. Mesmo assim, o PCR apresenta-se como eficiente mtodo de diagnstico na avaliao de pacientes tratados anteriormente para verificao de possvel melhoria e diminuio de infeco (DAGNONE, 2001; ESTEVES, 2007, DUARTE, 2010). Em relao ao Western blotting, tem-se que um teste complementar a Imunofluorescncia, sendo ento menos preciso para confirmao de diagnstico quando a infeco ainda est no incio (DAGNONE, 2001).

2.1.6 Tratamento

Segundo Dagnone (2001), encontra-se certo grau de dificuldade no sucesso com tratamentos a base de antibiticos, pois alguns microorganismos encontram-se localizados no interior das clulas, entre as drogas para possvel tratamento encontram-se tetraciclinas (mais eficazes que o cloranfenicol) e seus derivados, como a Doxiciclina, apresentando maior probabilidade de eliminar o agente. A enrofloxacina no apresentou ao efetiva. Aguiar (2006) afirma que se realizando antibioticoterapia a base de Doxiciclina (10mg/kg) e Imidocarb (5mg/Kg) diariamente por vinte e um dias, pode-se obter resultado satisfatrio no combate a infeco, porm, como o tratamento institudo no capaz de gerar imunidade efetiva e duradoura pode-se ainda observar reinfeco mesmo aps cura. Apesar de ser considerado como bom tratamento, este se torna ineficaz quando no seguidas s orientaes do mdico veterinrio responsvel. J Galvo (2009), defende como melhor tratamento antibioticoterapia com doxiciclina (2,5 a 5mg/Kg) via oral a cada oito horas por duas a trs semanas. Drogas como minociclina, doxiciclina e tetraciclinas em geral tem sido de eleio para praticamente todos os casos manifestados, porm, alm da antibioticoterapia, deve-se

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realizar tratamento suporte medida que for necessrio, como quando o pacientel encontra-se com anemia e em infeces que ameaam sua vida (DUARTE, 2007). H ainda a possibilidade de uso do Levamisol (1 mg/Kg) via subcutnea, dose nica, como complemento a antibioticoterapia, aumentando o nmero de leuccitos perifricos, linfcitos e moncitos. O uso de corticosterides tambm pode ser feito para manter a integridade vascular ou da funo plaquetria em especial na fase crnica e mais grave da enfermidade (SOUZA, 2010). Como tratamento suporte, deve-se corrigir a desidratao com fluidoterapia e as hemorragias devem ser corrigidas por transfuso sangnea. Terapia a base de glicocorticides (por 2 a 3 dias) e antibiticos pode tambm ser utilizada nos casos em que a trombocitopenia for acentuada e nos casos de infeces bacterianas secundrias, respectivamente. Em pacientes anorxicos, podem-se utilizar vitaminas do complexo B como estimulantes do apetite ou diazepam (intravenoso ou oral) antes de oferecer o alimento. Hormnios andrognicos de uso humano como o Stanozolol (metilandrostenol) e o Oxymethalone (hidrxi-metil diostrano) podem ser utilizados para estimular a medula ssea (STORTI, 2006). A resposta ao tratamento institudo, normalmente apresenta-se positiva, exceto quando o co acometido est no estgio crnico grave da doena. Mesmo quando o animal for submetido a tratamento, o microorganismo pode permanecer no hospedeiro, tornando o mesmo portador crnico (GALVO, 2009; SOUZA, 2010).

2.1.7 Prognstico

Segundo Storti (2006) e Galvo (2009), o prognstico depende da fase em que a doena for diagnosticada e do tratamento institudo. Quando se faz um tratamento eficaz, h excelente prognstico, exceto quando a medula apresentar hiperplasia severa. O prognstico reservado d-se quando h hemorragias severas.

2.1.8 Profilaxia

Parte importante em relao ao conhecimento e erradicao da doena em questo, Erliquiose, a profilaxia, que quando feita adequadamente, promove menos condies de possvel proliferao do vetor. Por no existir vacina contra a erliquiose, devemse tratar os animais j acometidos e controlar ento o carrapato Rhipicephalus sanguineus

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com utilizao de acaricidas no ambiente e nos animais. Tambm h relatos de que a utilizao de doses pequenas de doxiciclina (2mg/Kg) oral a cada 24 horas, durante a estao dos carrapatos possa ser efetiva na preveno (GALVO, 2009). Determinando-se a melhor escolha do ectoparasiticida, esto caractersticas como a velocidade de eliminao do carrapato, inocuidade ao paciente tratado e ainda a durao do efeito sobre o mesmo. Apresentando bom resultado nestas questes, tem-se o fipronil (depois de aplicado armazena-se na camada adiposa subcutnea do animal) evitando que ele fique infestado por carrapatos de outras espcies alm do Rhipicephalus sanguineus, evitando outras patologias transmitidas por outros carrapatos (BRANDO, 2005). Salgado (2006) expe tambm a importncia de evitar aglomeraes de animais por facilitar a disseminao e tambm evitar situaes de estresse caso contrrio, tero sua imunidade diminuda, abrindo portas para infeces secundrias. Deve-se tambm manter um padro higinico sanitrio no ambiente e nos animais (SILVA, 2010). Ainda como manejo adequado profiltico, STORTI (2006) sugere que ces que forem adentrar em canis sejam mantidos em quarentena e tratados para carrapatos, e quando com a doena, devidamente tratados antes de introduzidos junto ao convvio com outros ces. Criando-se tambm um controle de quais animais so soro positivos evita-se que em fase de portadores fiquem juntos aos outros animais e seres humanos, j que a Erliquiose trata-se de uma zoonose.

2.2 Erliquiose Tromboctica Canina (ETC)

Doena causada pelo Anaplasma platys (Figura 7), a ETC pode variar sua intensidade de manifestao de leve a severa. Promove trombocitopenia cclica com parasitemia inicial onde grande nmero de plaquetas encontra-se parasitadas. Pouco tempo aps a infeco h brusca diminuio na quantidade total de plaquetas e ausncia do A. platys. Dentro de quatro dias, as plaquetas anteriormente em valor diminuto, retornam a sua quantidade corriqueira. Porm, como o prprio nome sugere, a ETC ocorre em ciclos, sendo que a cada uma ou duas semanas, diagnostica-se via laboratrio a trombocitopenia e parasitemia (DAGNONE, 2001; AZEVEDO, 2007).

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FIGURA 7 Esfregao sanguneo contendo Anaplasma platys em plaqueta de co.

Fonte: MAR A VISTA MEDICAL CENTER (2008).

2.2.1 Agente Etiolgico

Responsvel pela ETC, o Anaplasma platys (bactria gram negativa), antiga Erlichia platys, se encontra infectando exclusivamente plaquetas de ces, porm tambm com a capacidade de infectar leuccitos. Pode ser visualizado como incluses no interior de plaquetas em esfregaos. Como vetor conhecido, tem-se o Rhipicephalus sanguineus (DAGNONE, 2001; ACETTA, 2008). Como caractersticas morfolgicas possuem membrana dupla, apresenta colorao basoflica em esfregaos corados por Giemsa, com dimenses entre 0,4 a 1,2 microlitros e ainda pode possuir formas distintas como achatada, arredondada ou ainda ovalada. Divide-se por fisso binria (ESTEVES, 2007). Sousa (2006) acrescenta que existem trs estgios de infeco por A. platys, sendo que se tem primeiro o estgio inicial, onde h presena de corpo pequeno com uma membrana espessa e protoplasma moderadamente eletrodenso. No estgio intermedirio, h condensao do material associado com o DNA na zona central do microorganismo. No estgio final, h caracterizao do A. platys por uma rea central eletro-lucente com fibrilas de DNA, e uma substncia granular eletro-densa perifrica, formada de ribossomos. O A. platys pode manifestar-se isoladamente, em pares ou ainda em grupos, dentro de vacolos. Formam mrulas medindo de 350 1250 nm de dimetro, onde cada plaqueta pode apresentar de um a trs vacolos com um a oito microorganismos em cada (VELHO, 2007).

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2.2.2 Aspectos Epidemiolgicos

Estudos sobre a epidemiologia desta enfermidade ainda encontram-se escassos, porm, acredita-se que sua distribuio geogrfica compreenda todo o territrio Brasileiro, mesmo que em baixa escala. Como vetor deste agente, est o Rhipicephalus sanguineus, que propaga o Anaplasma via inoculao de sangue contaminado (FERREIRA, 2008).

2.2.3 Patogenia

Como mecanismo prejudicial ao animal, o A. platys provoca trombocitopenia acentuada, tornando-se branda fase aguda ou at mesmo normalizando valores aps trs a quatro dias. Deve-se tomar cuidado especial, pois situaes que estressam o animal como cirurgias, doenas concomitantes, nutrio inadequada e prenhez podem levar a doena sub clnica tornar-se clnica (ESTEVES, 2007). A patogenia desta enfermidade caracteriza-se de acordo com as fases que manifesta, sendo que na fase aguda, apresenta parasitemia cclica em associao com linfadenopatia e trombocitopenia generalizadas. Apesar da trombocitopenia, raramente os ces apresentam hemorragias. Pode-se ainda observar hiperplasia megacarioctica e ainda hiperproliferao nas outras linhagens celulares. H diminuio na capacidade de fixao do ferro (ESTEVES, 2007).

2.2.4 Sinais Clnicos

Como sinais clnicos, na maioria das vezes, apesar de no patognomnicos, sinais digestivos, anorexia e distrbios hemostticos podem se manifestar com graus de intensidade variados, aps um perodo de incubao de oito a quinze dias (ACETTA, 2008). Pode-se ainda observar discreta hipertermia durante a fase de parasitemia inicial e um pouco de sangue nas fezes em animais trombocitopnicos (VELHO, 2007). Tambm se pode encontrar discreta anemia normoctica normocrmica arregenerativa e leucopenia. (SOUSA, 2006).

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2.2.5 Diagnstico

O diagnstico da ETC no o que se atribui como simples, pois apesar do mtodo de pesquisa em esfregao sanguneo ser muito utilizado, no completamente eficaz, pois h diminuio na plaquetometria, o que dificulta visualizao do microorganismo. Em infeces por E. canis h tambm a presena de incluses em plaquetas e ocorrncia de granulaes por ativao plaquetria, desse modo, pode-se ocorrer falhas na deteco e diferenciao. Para auxiliar o diagnstico, h tambm deteco de anticorpos por imunofluorescncia indireta, ou ainda, PCR (FERREIRA, 2008). Na identificao de infeco via PCR, deve-se utilizar primers da sequncia do gene RNA Ribossomal 16S (SOUSA, 2006). Segundo Esteves (2007) e Ristow et al. (2007), o teste de imunofluorescncia demonstra resultados satisfatrios, pois a A. platys no est entre microorganismos que produzem reaes cruzadas to facilmente. Por outro lado, os anticorpos apenas so detectados durante curto perodo de tempo aps o aparecimento de plaquetas parasitadas. Ao avaliar-se a bioqumica, tm-se como evidncias hipoalbuminemia, elevao da FA, ALT, LDH, creatinina e uria (ESTEVES, 2007). Ferreira (2008), defende que o melhor teste a ser feito para confirmao de diagnstico, o PCR, porm, informa ainda que a presena de anticorpos contra A. platys no implica em infeco clnica, apenas induz ao fato do paciente ter sido exposto ao agente.

2.2.6 Tratamento

Antibiticos da classe das tetraciclinas tm sido eleitos como melhor tratamento. Por apresentarem excelente absoro, doxiciclina e monociclina so as drogas mais utilizadas atualmente. Alm da antibioticoterapia, devem-se realizar quando necessrios tratamentos suporte. Acredita-se ainda que curtos tratamentos com doxiciclina possam negativar o PCR de amostras sanguneas, eliminando completamente o agente causador da infeco (ESTEVES, 2007).

2.2.7 Prognstico

Por anteriormente ser classificada como Ricketsia, associam-se os prognsticos pelos sinais clnicos e evoluo das enfermidades serem similiares (Ehrlichia canis e

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Ehrlichia platys), onde o prognstico depende do estgio em que a doena se encontra e ainda de quando o tratamento foi ou ser institudo, variando entre excelente, moderado e reservado (STORTI, 2006; GALVO 2009).

2.2.8 Profilaxia

Deve-se sempre realizar o combate para evitar infestao por Rhipicephalus sanguineus nos ambientes principalmente onde haja animais domsticos. Pode-se ainda utilizar doses de manuteno mais baixas nos animais com tetraciclinas nos perodos de maior infestao do ano (ACETTA, 2008).

2.3 Micoplasmose Hemotrpica Felina (MHF)

O felino domstico tem sido cada vez mais adotado pela praticidade em cuidados rotineiros, no demandar de muito espao, ser de fcil adaptao a condies de meio. Atualmente responsvel por grande parte de atendimentos clnicos e tambm de realizao de exames laboratoriais, apesar de que em menor escala que os caninos (MACIEIRA, 2008). Como principal hemoparasito em felinos, tem-se o Mycoplasma haemofelis (Figura 8) (Antigamente conhecido como Haemobartonella felis), micoplasma causador da Micoplasmose Hemotrpica Felina, ou Anemia Infecciosa Felina (THRALL et al, 2006; HORA, 2008).

FIGURA 8 Alta infeco por Mycoplasma haemofelis encontrada em hemcias vistas atravs de esfregao sanguneo.
Fonte: FELINE ADVISORY BUREAU (2008).

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2.3.1 Agente Etiolgico e Epidemiologia

Mycoplasma haemofelis, parasitas obrigatrios de hemcias, so encontrados como pequenos bastonetes ou em formato de cocos ou anis cor azul-escuro, gram-negativos, na superfcie destas clulas, sendo mais comumente vistos na cauda do esfregao sanguneo onde as hemcias podem ser observadas achatadas. Por serem altamente patognicos, podem provocar grave anemia hemoltica. Estes agentes podem ser transmitidos pela mordida de gatos contaminados, por artrpodes (pulga Ctenocephalides felis, pela gata gestante via tero, ao nascimento ou aleitamento. Ainda possivelmente por exposio iatrognica. So de ocorrncia cosmopolita (URQUHART, 1998; THRALL et al, 2006; HORA, 2008; MACIEIRA, 2008). Este agente portador de DNA e RNA no possui parede celular, nem flagelo, resistente a penicilina e seus anlogos, porm, sucumbe s tetraciclinas. Por no ser cultivvel em meios microbiolgicos, foi desvencilhado da espcie Bartonella (WANDER, 2009). Segundo Hora (2008), a infeco causada pelo M. haemofelis, oportunista (pode tambm ser encontrado em animais hgidos), desse modo, em condies de estresse juntamente com infeces concomitantes, gera-se a anemia intensa por parasitismo celular, e imunossupresso com morte do hospedeiro. A disseminao destes microorganismos se d por diviso binria ou brotamento na superfcie eritrocitria. Quanto transmisso dos mesmos, apesar de ainda no completamente elucidada, pode-se evidenciar contendo possvel papel como vetor a pulga, pois, M. haemofelis j foi detectado nela (contaminao iatrognica do co sadio) e tambm em suas fezes (HORA, 2008). A replicao do M. haemofelis pode-se dar tambm quando se administram glicocorticides a gatas que estejam amamentando devido possvel imunossupresso causada (ROSA, 2008). Gatos machos possuem maior probabilidade de manifestarem a doena, sendo que h relatos de ocorrncia mundial (exceto na regio Antrtida) (MACIEIRA, 2008). Wander (2009), relata que animais j infectados por FeLV (Anemia Infecciosa Felina), possuem propenso a infeco tambm por M. haemofelis.

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2.3.2 Patogenia

A infeco comea a ocorrer a partir do momento em que o agente se instala na superfcie dos eritrcitos do animal infectado. O microorganismo se adere superfcie do eritrcito por fibrilas delicadas e provoca ento a exposio de antgenos da prpria clula ao sistema imune, ou ainda, promove alteraes nos antgenos eritrocitrios, levando a produo de anticorpos antieritrocitrios. Outra forma de leso a produo de anticorpos contra apenas o agente instalado na clula. Apesar de este processo ocorrer, existe ainda baixo grau de hemlise intravascular, sendo ento, o processo de eliminao extravascular o causador do maior dano em relao a anemia, pois a captura dos eritrcitos infectados para realizao de fagocitose em grande escala pelo bao, principalmente (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008). Segundo Miranda (2008), o M. haemofelis pode provocar dano qumico ou fsico no eritrcito do hospedeiro, aumento a fragilidade osmtica e reduzindo, consequentemente a meia vida dele. Conforme a doena evolui, ocorre diminuio na concentrao lipdica das hemcias, durante a fase inicial (11 a 17%) e fosfolipdeos (8 a 14%) e durante a fase severa da doena onde o colesterol diminui de 27 a 28% e os fosfolipdeos de 19 a 21%. Desse modo, pode-se sugerir que o agente utiliza-se dos lipdeos eritrocitrios para sua prpria multiplicao. Em relao s fases da doena, so divididas em quatro, sendo estas: Fase prparasitmica, que dura entre 2-7 dias e inclui da inoculao do agente at a primeira parasitemia; Fase aguda, que dura entre a primeira e ltima parasitemia, compreendendo sinais clnicos; Fase de recuperao, que consiste do tempo da ltima parasitemia at a recuperao do VGM em 30%; e por fim, a fase crnica ou de portador, que perdura at o momento em que o animal for considerado livre da presena do parasito (MACIEIRA, 2008). Como observao ainda tem-se que a meia vida dos eritrcitos infectados passe de 8,5 a 9,0 dias para 4,2 a 4,4 dias (MIRANDA, 2008).

2.3.3 Sinais Clnicos

Alguns felinos podem apresentar sinais que vo desde unicamente discreta anemia, at anemia grave juntamente com depresso acentuada, resultando em bito. Como alteraes mais comuns tm-se anorexia, perda de peso, depresso, taquicardia, taquipnia e desidratao. Durante a fase aguda da infeco verifica-se hipertermia, porm, em estgio um pouco mais avanado, instala-se a hipotermia (HORA, 2008).

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Comumente, na fase aguda, os sinais clnicos mais aparentes nos animais acometidos compreendem: letargia, fraqueza, palidez, febre intermitente e ainda linfadenopatia, alm dos citados anteriormente (MACIEIRA, 2008). Rosa (2008), acrescenta que sinais como membranas mucosas plidas e dores articulares podem ser observadas. Ainda pode-se manifestar sopro cardaco sistlico suave (WANDER, 2009). Na fase crnica da doena, encontram-se hematria, corrimento nasal, epistaxe, petquias, diarria, alopecia e aumento da presso intraocular, alm dos sinais clnicos mais comuns (MIRANDA, 2008).

2.3.4 Diagnstico

uma doena de diagnstico complicado, pois a deteco do M. haemofelis difcil via esfregao sanguneo, desse modo, deve-se realizar preferencialmente o PCR (THRALL et al, 2006). Outro item que se manifesta dificultando o diagnstico o no crescimento do agente em meios de cultivo microbiolgico, porm ao realizarem-se exames fsicos do animal acometido, encontram-se evidncias (no patognomnicas) como esplenomegalia (devido hematopoese extramedular), hepatomegalia, murmrios cardacos e ainda, ictercia. Testes como o PCR e de Coombs ainda podem ser eficazes (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008). Hora (2008), em concordncia com Macieira (2008) e Rosa (2008), cita que pode comumente haver a auto-aglutinao da amostra sangunea quando esta em temperatura abaixo da corprea do animal. Pode haver presena de esfercitos e ainda presena elevada de precursores eritrides nucleados, sendo estes, metarrubrcitos e rubrcitos. O plasma estar ictrico e menos comumente avermelhado. Para melhor visualizao do agente nas hemcias, deve-se dar preferncia a confeco de esfregao com sangue fresco, sem EDTA para que o agente no se desprenda do eritrcito (WANDER, 2009). Ao realizarem-se exames laboratoriais, detectada a anemia regenerativa (discreta ou ausente caso o animal tambm se encontre com infeces secundrias), onde h presena de macrocitose e normocromia (observadas no esfregao sanguneo), o hematcrito gera valores menores que 10% na maioria dos casos iniciais da doena, porm, o mesmo pode manter-se varivel, pois h seqestro dos eritrcitos pelo bao para promover a retirada do agente etiolgico de suas superfcies, e em seguida, so devolvidos na circulao, no

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havendo a reticulocitose, porm, o aumento do hematcrito (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008). Segundo Macieira (2008), ao observar-se o hemograma, encontra-se baixa no VGM (Volume Globular Mdio), isto ocorre em torno de duas semanas aps a infeco se instalar, so nesses picos de diminuio do VGM, que se encontra maior infestao parasitmica. H ainda anisocitose, policromasia, aumento no nmero absoluto de reticulcitos, Cospsculos de Howell-Jolly, e presena de hemcias nucleadas. Consegue-se visualizar tambm eritrofagocitose. A contagem leucocitria e plaquetria no so bases altamente relevantes como auxlio diagnstico, pois dificilmente ocorre neutropenia e neutrofilia. Atualmente o esfregao e o PCR, apresentam-se como fonte diagnstica para M. haemofelis, podendo este apresentar falso negativo pelo carter cclico da parasitemia (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008; ROSA, 2008). Hora (2008) e Wander (2009), defendem que como alteraes bioqumicas tm-se o aumento da atividade srica da ALT e AST (devido hipxia), e ainda observa-se azotemia pr-renal (pela desidratao) e hiperproteinemia. MACIEIRA (2008), acrescenta que raramente encontra-se hiperbilirrubinemia (principalmente na frao no conjugada) raramente manifestam-se tambm hiperfosfatemia e hipoalbuminemia. Pode haver aumento de Uria e Creatinina devido a ao txica que a hemoglobina exerce nos nfrons (WANDER, 2009). Como mtodo diagnstico, h ainda a Imunofluorescncia Indireta (II), podendo detectar o agente aps 21 dias de infeco, porm, como no h meios at ento para o cultivo do agente, torna-se complexa a elaborao de meios para a utilizao da mesma (MACIEIRA, 2008). O PCR em tempo real, at ento, pode ser considerado o mtodo mais preciso para deteco de hemoplasmas felinos e avaliao de terapia instituda (MACIEIRA, 2008).

2.3.5 Tratamento

Como eficaz tratamento, pode-se instituir o uso de tetraciclinas (inibidoras da sntese protica dos procariontes), sendo a doxiciclina (5,0 mg/Kg V.O. juntamente com gua ou alimento; a cada 24h durante 21 dias), medicao de escolha por no gerar efeitos colaterais to intensos ou significantes ao animal. Pode-se tambm utilizar enrofloxacina (5,0 a 10,0 mg/Kg, V.O. a cada 12 horas por 15 dias). Concomitantemente a terapia

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medicamentosa, deve-se instituir terapia suporte caso o animal encontre-se debilitado, incluindo na mesma, fluidoterapia e transfuso sangunea (HORA, 2008). Segundo Rosa (2008), tambm se podem administrar glicocorticides

(predinisolona 1-2mg/Kg a cada 12 horas, V.O.) para reduo de anemia e tambm complexo b 20 ml (2 gotas a cada 12h, V.O.) como fortificante revigorante de tnus muscular e estimulante para o sistema circulatrio. Com o uso da doxiciclina, efeitos colaterais que podem aparecer comportam irritao da mucosa gastrointestinal e formao de estenose esofgica (WANDER, 2009). Miranda (2008), cita como eficaz o seguinte protocolo: Administrao de Tetraciclina 40 mg (1 cpsula a cada 8 horas, 60 cpsulas), Complexo B 20 ml ( 2 gotas a cada 2 horas V.O), Cetoprofeno 200 ml (2 gotas a cada 12 horas) e Glicocorticide sinttico 5 mg (1/4 a cada 12 horas).

2.3.6 Prognstico

Sem tratamento, torna-se ruim, pois ao progredir a doena, a anemia se intensifica, levando o animal a bito em pouco tempo, por outro lado, quando corretamente se realiza o tratamento, regenerando-se a anemia instalada, o animal apesar de se tornar portador do agente, melhora e se estabiliza (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008; MIRANDA, 2008; ROSA, 2008; WANDER, 2009).

2.3.7 Profilaxia

Deve-se manter certo controle do acesso rua pelos gatos, pois se tem relatos de que seja este um dos veculos geradores da contaminao pelo agente. Caso o felino apresente artrpodes (possveis vetores), deve-se fazer a erradicao destes. Deve-se ainda realizar sempre testes moleculares em animais doadores de sangue (HORA, 2008; MACIEIRA, 2008; ROSA, 2008). Cuidados como evitar a aglomerao de felinos em lugares diversos, evitar contato entre felinos agressivos, tambm so eficazes no combate a possvel transmisso do agente (MACIEIRA, 2008).

3 RELATO DE CASO Ehrlichia canis

3.1 Descrio do caso Em 14/10/2010 foi levado consulta particular em Vila Velha - ES, um co macho da raa Akita, com oito anos de idade e pesando 22kg, apresentando queixa pelo proprietrio de que o animal vinha manifestando diminuio de apetite e queda no peso h quinze dias. Previamente consulta veterinria, a proprietria fez aplicao de carrapaticida pour on a base de fipronil e S-metopreno para eliminar estes ectoparasitos observados no animal. A aplicao se deu a um ms antes do aparecimento dos sinais clnicos. Como observaes complementares obtiveram-se que as vacinas e os vermfugos encontravam-se em dia e que a proprietrio no possua outros animais convivendo com o animal em questo. Ao submeter o animal a exame clnico, pode-se observar que o mesmo apresentava hipertermia (39,9C), apatia, mucosas plidas, linfonodos mandibulares aumentados, perda de peso evidente, plos opacos e sem brilho, e ainda frequncia respiratria de 25 mpm e frequncia cardaca de 110 bpm. De acordo com os sinais apresentados, suspeitou-se de Erliquiose, desse modo, houve solicitao e realizao de exames laboratoriais para confirmao diagnstica, sendo estes: Hemograma completo com pesquisa de hematozorios e Plaquetograma. O material recebido para realizao destes exames foram dois ml de sangue total coletados e armazenados em tubo com EDTA. A amostra colhida foi identificada ao ser recebida no Animallab, sendo feita ficha de entrada para o animal, contendo todos os dados do mesmo. Aps ser dada entrada, a amostra foi submetida realizao de hemograma completo, sendo colocada no homogeneizador e aps 4 minutos em movimento, passada na mquina de hemograma animal, gerando os seguintes resultados conforme o quadro

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QUADRO 1 Resultados obtidos pelo hemograma realizado do animal, em 14/10/2010 no Animallab e valores referenciais normais de hemograma canino. PARMETRO Hemcias Hemoglobina Hematcrito VGM HGM CHGM Plaquetas Leuccitos
* Fonte: VIANA (2003).

VALORES DE REFERNCIA * 5.5 a 8.5 (x106/L) 12 a 18 (g/dL) 37 a 55 (%) 60,0 - 75,0 (fl) 19,0 - 23,0 (pq) 31,0 37,0 (g/dL) 200.000 a 500.000 (n/mm) 6.000 a 17.000 (clulas/L)

VALORES ENCONTRADOS 3,5 (x106/L) 6,9 (g/dL) 21 (%) 60,0 (fl) 19,71 (pq) 32,85 (g/dL) 86.000 (n/mm) 4.000 (clulas/L)

Como passo seguinte, realizou-se preparo de esfregao sanguneo com uma pipeta de 10 L, corando a lmina com corante a base de glicerol e metanol absoluto por 2 minutos e 15 segundos, acrescentando-se em seguida soluo tampo e deixando agir por mais 4 minutos e 15 segundos. Aps completos os 6 minutos e 30 segundos, fez-se a retirada do excesso de corante com soluo tampo, e secagem da lmina naturalmente, para leitura em microscpio ptico. Ao observar-se o esfregao, foram constatados os valores relativos para leuccitos apresentados no quadro abaixo. QUADRO 2 Valores relativos e absolutos em contagem de leuccitos padro para ces sadios e valores encontrados na leitura da lmina de esfregao sanguneo do animal. PARMETROS CES Segmentados Bastonetes Eosinfilos Basfilos Linfcitos Moncitos VALORES REFERENCIAIS VALORES ENCONTRADOS RELATIVOS E ABSOLUTOS RELATIVOS E ABSOLUTOS n/l * n/l 60 77 % 3.000 a 11.400 /mm 67 % 2.680 /mm 03% 2 10 % 00% 12 30 % 3 10 % 0 a 300 /mm 100 a 750 /mm 0 /mm 1.000 a 4.800 /mm 150 a 1.350 /mm 2% 4% 0% 24 % 3% 80 /mm 160 /mm 0 /mm 960 /mm 120 /mm

* Fonte: HENDRIX (2005).

A presena de Eritroblastos e metamielcitos no foi constatada.

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Em pesquisa de hematozorios realizada na parte mais fina do esfregao, foram encontrados segmentados contendo mrulas de Ehrlichia canis (Figura 9), tornando positivo o diagnstico para a doena.

FIGURA 9 - Ehrlichia canis em citoplasma de neutrfilo segmentado.

Fonte: Arquivo pessoal (2010).

Aps confirmao diagnstica para Erliquiose, foi iniciado o tratamento com Doxiciclina/100mg (dois comprimidos a cada 12 horas, por 21 dias) e terapia suporte. O agendamento de retorno foi feito para o dia 03/11/2010 sendo este, o dia da finalizao da medicao prescrita.

3.2 Discusso

Aps realizao de exame fsico no qual houve a deteco do carrapato Rhipicephalus sanguineus, vetor da Ehrlichia canis (o que gerou indcios de que o animal em questo poderia estar com a doena Erliquiose Monoctica Canina) e a execuo tambm de hemograma completo com pesquisa de hematozorios, em laboratrio veterinrio, pode-se confirmar a suspeita diagnstica ao serem encontradas mrulas de Ehrlichia canis no citoplasma de alguns neutrfilos segmentados da amostra analisada, concordando desta maneira, com ACETTA (2008). Corroborando com Acetta (2008), Fernandes (2008) e Garcia Filho (2010), o baixo valor encontrado no hemograma para hemcias e hematcrito juntamente com os valores padres encontrados para VGM, HGM e CHGM, indicaram a presena de anemia

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normoctica normocrmica, provavelmente instalada devido a pequenas hemorragias recorrentes em conseqncia da EMC. A presena de neutrfilos bastonetes indica que a medula do animal apresenta boa atividade recuperativa. Em anlise srie branca da amostra sangunea em questo, obteve-se leucopenia, provavelmente devido fagocitose dos neutrfilos infectados e ainda devido destruio celular pelo rompimento da membrana, sendo este um dos mtodos utilizados pelo agente para se espalhar pelo organismo do animal acometido (ACETTA, 2008). Ainda como parte importante e compondo o diagnstico para Erliquiose Monoctica Canina, tem-se a trombocitopenia presente. Este fato pode ter ocorrido por diversos fatores como o aumento no consumo de plaquetas pelas alteraes inflamatrias promovidas no endotlio dos vasos pela presena do agente E. canis, por seqestro de plaquetas pelo bao, por destruio ou leso imunomediada ( a E. canis induz a produo do fator de inibio da migrao plaquetria, modificando a superfcie das plaquetas, levando ao aumento da vulnerabilidade das mesmas (DAGNONE, 2001; ESTEVES, 2007; ACETTA, 2008). Devido aos sinais clnicos apresentados (hipertermia, apatia, mucosas plidas, linfonodos mandibulares aumentados, perda de peso evidente e plos opacos e sem brilho), em concordncia com Esteves (2007), Acetta (2008), Fernandes (2008), e Garcia Filho (2010), so estes sinais clnicos mais caractersticos da fase aguda da doena. O diagnstico via observao de mrulas em esfregao sanguneo pode ser considerado eficaz (LIBERATI, 2009) apesar de no terem sido realizadas anlises bioqumicas, biolgicas ou sorolgicas, como recomendam Aguiar (2006), Esteves (2007), Acetta (2008) e Fernandes (2008). Segundo Esteves (2007), Acetta (2008), Fernandes (2008), Galvo (2009) e Garcia Filho (2010), o tratamento institudo deveria ser feito com doxiciclina a 2,5 mg/Kg, via oral, a cada 12 horas, por 21 dias apresentando eficcia, porm, o tratamento institudo com doxiciclina a 10mg/kg, via oral, a cada 12 horas, por 21 dias gerou a melhoria esperada no animal. Tambm instituiu-se terapia suporte para complementar a antibioticoterapia.

4 CONCLUSO

Conclui-se que o objetivo do estgio supervisionado obrigatrio foi alcanado, tendo-se colocado em prtica o ensino adquirido durante os cinco anos do curso de Medicina Veterinria. A convivncia diria com uma Mdica Veterinria experiente trouxe a confiana necessria para satisfatria realizao das atividades de estgio, obtendo o mximo de conhecimentos possveis na rea escolhida, contribuindo tambm para a formao de um bom profissional. Tem-se que um laboratrio bem estruturado, com aparelhos modernos e boas prticas, permite que se faa diagnsticos com preciso, auxiliando assim, a clnica veterinria. A Erliquiose monoctica canina, Erliquiose tromboctica canina e Micoplasmose haemotrpica felina, assim como outras enfermidades, necessitam que se faa um diagnstico precoce para que seja possvel evitar prognsticos ruins aos pacientes. Como mais frequentemente encontrada, a Erliquiose monoctica canina, quando diagnosticada precocemente, na fase aguda, permite melhoria na vida do paciente, tornando mais satisfatrios os resultados dos tratamentos realizados.

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