ITRACONAZOL

Perspectiva Histrica Itraconazol (Figura 1) ou [4-[4-[4-[4-[[cis-2-(2,4-diclorofenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-ilmetil)-1,3-dioxolan4-il]-metoxi]fenil]-1-piperazinil]-fenil]-2-[(1RS)-1-metilpropil]-2,4-di-hidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona, segundo a IUPAC (The International Union of Pure and Applied Chemistry), foi sintetizado pela primeira vez por Jan Heeres e Leo Backx ambos da Janssen Pharmaceutica, submetendo a molcula a patente em 1980. [1, 2] Pertence classe dos antifngicos, sendo um derivado imidazlico de 3 gerao (anel triazlico) bastante potente, reservando-se o seu uso para infeces fngicas da mucosa oral e esfago em doentes imunodeprimidos. [3] O anel triazol possu trs tomos de azoto num total de cinco tomos presentes no anel azlico. Isto representa uma inovao relativamente aos derivados imidazlicos de 1 e 2 geraes, o que culminou num alargamento do espectro de aco e favoreceu a selectividade para o citocromo P-450 da clula fngica. O itraconazol foi sintetizado em 1980 e comeou a ganhar importncia devido aos vrios estudos feitos desde ento, que comprovaram a sua eficcia. [4]

Caractersticas Fsico-Qumicas De acordo com a Farmacopeia Portuguesa VII, o itraconazol apresenta um aspecto de p branco ou quase branco. O itraconazol possui as seguintes caractersticas: [1, 5] Frmula qumica: Peso molecular: Massa volmica: Ponto de fuso: Solubilidade: LogP: pKa C35H38CI2N8O4 705,63g/mol 1,4 g/cm
3

166C a 170C Muito pouco solvel em gua 5,66 3,7

Classificao O itraconazol um anti-fngico, ou seja, um medicamento utilizado para tratar infeces causadas por fungos. [6]

Mtodos de Obteno A sntese do itraconazol (Figura 2), proposta por Heeres e Backx, comea pela cetalisao da 2,4dicloroacetofenona com glicerina sobre condies acdicas em refluxo com benzeno. O produto formado depois brominado a 40C. O lcool primrio sofre proteco, transformando-se em benzoato atravs do uso de cloreto de benzoilo em piridina. A molcula formada transformada

em sal e sofre posterior tratamento com brometo de sdio em DMSO a 130C, formando-se uma mistura regioisomrica, a qual saponificada usando-se uma mistura aquosa de hidrxido de sdio e dioxano. Os ismeros so ento separados por cromatografia, em que o produto principal (aproximadamente 10:1) o produto desejado, ou seja, o ismero substitudo na posio 1. Segue-se a activao do lcool, atravs da reaco com cloreto de metanosulfunilo (mesyl chloride) em piridina (rendimento de 87%), dando-se tambm um segundo ataque nucleoflico com o sal sdico de N-acetil-4-hidroxifenilpiperazina a 80C, originando um anlogo triazlico do cetoconazol. Posteriormente, procede-se a uma diacetilao finalizada com a introduo do anel fenlico por substituio aromtica nucleoflica usando 4-cloronitrobenzeno em meio bsico em DMSO a 120C. A reaco seguinte uma hidrogenao, catalisada por platina, a 50C, originando derivados de anilina pouco solveis, o que exige o aquecimento da mistura para evitar a reteno de produto por filtrao. O derivado da anilina reage com fenilcloroformato numa mistura de clorofrmio e piridina, originando um carbamato activado, que tratado com hidrazina. J numa fase final da produo do composto, ocorre uma condensao da semicarbazida com acetato de formamidina em DMF a 130C durante 3h originando uma triazolona cclica. A ltima reaco desta srie sinttica uma alquilao com 2bromobutano, originando-se itraconazol na forma de slido cristalino. [7]

Mecanismos de Aco O itraconazol, um triazol, tem um mecanismo de aco idntico ao dos imidazois. O azoto no envolvido na aromaticidade do anel azlico compete com o oxignio pela ligao ao ferro hmico cataltico do citocromo P-450. A inibio desta enzima impede a sntese de ergosterol na membrana celular dos fungos, atravs da limitao da desmetilao em C14 do lanosterol, que um precursor do ergosterol (Figura 3). O dfice de ergosterol provoca alteraes na fluidez da membrana, nas relaes estricas de outras enzimas associadas membrana e resulta tambm numa acumulao de fosfolpidos e cidos gordos insaturados no interior das clulas fngicas. O itraconazol liga-se muito fracamente ao citocromo P-450 dos mamferos, sendo a sua afinidade muito mais elevada para o citocromo P-450 dos fungos. [10]

Relao Estrutura-Actividade O itraconazol s foi sintetizado cerca de 30 anos aps a descoberta do cetoconazol. Estvamos na dcada de 80 e o desenvolvimento do primeiro antifngico de largo espectro e de administrao oral foi uma revoluo. Estudos de relao estrutura actividade com anlogos do itraconazol no demonstraram resultados muito concordantes entre as experincias in vitro e in vivo, o que se pode ficar a dever fraca solubilidade destes compostos no meio escolhido para os testes. No entanto e apesar do referido anteriormente, o itraconazol (composto 68 das Tabelas 1 e 2) demonstrou ser, de um modo geral, o composto mais eficaz, demonstrando a melhor razo cura/infectado para doses mais baixas (Tabela 2). [8] O anel triazol, embora no indispensvel para a aco (podamos ter um anel imidazol), mostrou-se fundamental para o alargamento do espectro de aco e para o aumento da selectividade.

Entretanto j passaram mais 30 anos desde a descoberta do itraconazol e muitos estudos de relao estrutura-actividade (SAR) foram desenvolvidos com vista descoberta de novos frmacos. Os principais aspectos que se pretendem ver melhorados so: maior eficcia, menor toxicidade, menor resistncia, melhor farmacocintica e menor ocorrncia de interaces com outros frmacos. Para se atingir todos estes objectivos, equaciona-se o desenvolvimento de novos antifngicos com mecanismos de aco diferentes do referido acima [9] Os estudos mais recentes foram ento direccionados para novos alvos, nomeadamente para a Nmyristoyltransferase (Nmt), uma enzima citoplasmtica envolvida em processos de transduo de sinal e apoptose, que se demonstrou ser essencial para a viabilidade de alguns dos mais importantes agentes patognicos.

Perfil Farmacocintico O frmaco deve ser administrado s refeies.[11] Os anticidos, antagonistas H2, inibidores da bomba de protes e sucralfato bem como a didanosina reduzem a absoro de itraconazol em cerca de 50%. A toma do frmaco com bebidas cidas recupera os valores normais de absoro.[12, 13] Itraconazol potencia o efeito anticoagulante da varfarina e de outros cumarnicos bem como os efeitos de muitos outros frmacos que so metabolizados pelo CYP3A4, com potencial desenvolvimento de toxicidade. So, neste contexto, clinicamente relevantes as interaces com: alprazolam, midazolam e triazolam; digoxina; sulfonilureias (com risco importante de ocorrncia de hipoglicemia); estatinas, nomeadamente a lovastatina e sinvastatina; felodipina; ciclosporina e tacrolmus. O itraconazol, tambm por inibio do seu metabolismo, aumenta significativamente as concentraes plasmticas da terfenadina e do astemizol, com risco de prolongar o intervalo QT e de causar arritmias graves. A co-administrao do itraconazol com os inibidores da protease, indinavir ou ritonavir, afecta as concentraes plasmticas de ambos os frmacos. A carbamazepina, fenitona e fenobarbital, e a rifampicina e isoniazida induzem o metabolismo do itraconazol podendo comprometer a sua eficcia teraputica. [14]

Usos Teraputicos O itraconazol pode ser administrado por via oral ou parentrica, e est indicado para o tratamento de Candidase vulvovaginal, Candidase oral, Dermatomicoses (ex.: tinha corporal, tinha nas pernas, tinha nos ps, tinha nas mos), Onicomicoses (micoses das unhas), Pitirase versicolor, Esporotricose linfocutnea, paracoccidioidomicose, blastomicose (em doentes com imunidade) e Histoplasmose. O Itraconazol pode ser usado em doentes que sofram de aspergilose invasiva, refractrios ou intolerantes Anfotericina B.[5] Estudos recentes efectuados em modelos animais com cancro induzido demonstraram a eficcia teraputica dos antifngicos azlicos no tratamento de diversos cancros. [15]

Mtodos de Controlo (Farmacopeia Portuguesa VII) [16] Definio: [4-[4-[4-[4-[[cis-2-(2,4-diclorofenil)-2-(1H-1,2,4-triazol-1-ilmetil)-1,3-dioxolan-4-il]-metoxi]fenil]-1piperazinil]-fenil]-2-[(1RS)-1-metilpropil]-2,4-di-hidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona. Teor: 98,5 por cento a 101,5 por cento (substncia seca). Identificao: Primeira srie: B Segunda Srie: A, C e D. A. Ponto de fuso: 166C a 170C B. Espectrofotometria de absoro no infravermelho Preparao: discos. Comparao: itraconazol SQR. C. Cromatografia em camada fina Soluo problema. Dissolva 30mg da amostra numa mistura de volumes iguais de cloreto de metileno R e metanol R e complete 5 ml com a mesma mistura de solventes. Soluo padro (a). Dissolva 30mg de itraconazol SQR mistura de volumes iguais de cloreto de metileno R e metanol R e complete 5 ml com a mesma mistura de solventes. Soluo padro (b). Dissolva 30mg de itraconazol SQR e 30mg de cetoconazol SQR mistura de volumes iguais de cloreto de metileno R e metanol R e complete 5 ml com a mesma mistura de solventes. Fase estacionria: gel de slica octadecilsililada apropriada. Fase mvel: soluo de acetato de amnio R, dioxano R, metanol R (20:40:40 V/V/V). Aplicao: 5 l Desenvolvimento: percurso de 10 cm, numa cmara no saturada. Secagem: corrente de ar quente durante 15 min.. Deteco: vapores de iodo. Examine luz do dia. Conformidade do sistema: o ensaio s vlido se o cromatograma obtido com a soluo padro (b) apresentar 2 manchas nitidamente separadas. Resultado: a mancha principal do cromotograma obtido com soluo problema semelhante, quanto posio, colorao e dimenses, mancha principal do cromotograma obtido com a soluo padro (a). D. Num cadinho de porcelana introduza cerca de 30 mg da amostra e junte 0,3 g de carbonato de sdio anidro R. Aquea a fogo directo durante 10 min. Deixe arrefecer. Tome o resduo com 5 ml de cido ntrico diludo R e filtre. A 1 ml do filtrado junte 1 ml de gua R. A soluo d a reaco (a) dos cloretos. Ensaio Soluo S. Dissolva 2,0 g da amostra em cloreto de metileno R e complete 20,0 ml com o mesmo solvente. Aspecto da soluo. A soluo S lmpida e no mais corada que a soluo de referncia Ac6. Substncias Aparentadas. Cromatografia Lquida. Soluo problema. Dissolva 0,100 g da amostra numa mistura de volumes iguais de metanol R e tetra-hidrofurano R e complete 10,0 ml com a mesma mistura de solventes.

Soluo padro (a). Dissolva 5,0 mg de itraconazol SQR e5,0 mg de miconazol SQR numa mistura de volumes iguais de metanol R e tetra-hidrofurano R e complete 100,0 ml com a mesma mistura de solventes. Soluo Padro (b). Tome 1,0 ml da soluo problema e complete 100,0ml com uma mistura de volumes iguais de metanol R e tetra-hidrofurano R. Tome 5,0 ml da soluo e complete 10,0 ml com a mesma mistura de solventes. Branco: Mistura de volumes iguais de metanol R e tetra-hidrofurano R. Coluna: Dimenses: l= 0,1 m; =4,0 mm, Fase estacionria: gel de slica octadecilsililada para cromatografia, desactivada por tratamento bsico R (3m). Fase mvel: gradiente seguinte:(Tabela 3) Fase mvel A. Soluo de hidrogenossulfato de tetrabutilamnio R a 27,2 g/l, Fase mvel B. Acetonitrilo R. Dbito: 1,5 ml/min. Deteco: espectrofotmetro em 225nm. Injeco: 10l. Sensibilidade: soluo padro (b). Conformidade do sistema: - resoluo: no mnimo, 2,0 entre os picos correspondentes ao miconazol e ao itraconazol. - tempos de reteno: miconazol = 10,5 min, itraconazol = 11 min, no cromatograma obtido com a soluo padro (a). Limites: - qualquer impureza: no mximo, a rea do pico principal do cromatograma obtido com a soluo padro (b) (0,5 por cento), - total: no mximo, 2,5 vezes a rea do pico principal do cromatograma obtido com a soluo padro (b) (1,25 por cento). - limite de excluso: 0,1 vezes a rea do pico principal do cromatograma obtido com a soluo padro (b). No considere o pico devido ao branco. Perda por secagem: no mximo, 0,5 por cento, determinada em 1,000 g da amostra na estufa a 100105C, durante 4 h. Cinzas Sulfricas: no mximo, 0,1 por cento, em 1,00 g amostra. Doseamento Titulao potenciomtrica. Dissolva 0,300 g da amostra em 70 ml de uma mistura de 1 volume de cido actico glacial R e 7 volumes de metiletilcetona R. Titule com cido perclrico 0,1 M. Determine o ponto de equivalncia no segundo ponto de inflexo. 1ml de cido perclrico 0,1 M corresponde a 35,3 mg de C35H38Cl2N8O4. Conservao Ao abrigo da luz. Impurezas (Figura 4)

Referncias Bibliogrficas
th

[1] Merck Index, 14 edition, USA [2] http://www.patents.com/us-4267179.html [3] Soares, M. A., Medicamentos No Prescritos: Aconselhamento Farmacutico, 2 edio, ANF [4] Jain, S., Sehgal, V.N., Itraconazol: un antifngico oral eficaz frente a la onicomicosis International Journal of Dermatology 2001; 40: 1-5 [5] http://www.wolframalpha.com/input/?i=itraconazole [6] http://www.infarmed.pt/infomed/download_ficheiro.php?med_id=40478&tipo_doc=fi [7] Bell, A. S., in: Johnson, D. S., Li, J. J., (Eds) The Art of Drug Synthesis, John Wiley & Son, New Jersey, 2007 (Cap. 5 Triazole Antifungals) [8] Heeres, J., Backx, J. J., Van Cutsem, J., Antimycotic Azoles. 7. Synthesis and Antifungal Properties of a Series of Novel Triazol-3-ones. Journal of Medicinal Chemistry, 1984, vol. 27, 894-900. [9] Sheng, C., Zhu, J. et al., 3D-QSAR and molecular docking studies on benzothiazole derivatives as Candida albicans N-myristoyltransferase inhibitors. European Journal of Medicinal Chemistry, 2007, 42(4): 477-486. [10] Karel, D. B. Itraconazole: pharmacology, clinical experience and future development. International Journal of Antimicrobial Agents, 1996, 6(3): 175-181. [11] Heykants, J. et al. The clinical pharmacokinetics of itraconazole: an overview Mycoses, 1989; 32(1):67-88. [12] Hardin J. et al. The effect of a Cola beverage on the bioavailability of itraconazole in the presence of H2 blockers, Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1994, P39, 34th [13] http://www.infarmed.pt/prontuario/navegavalores.php?id=89&edcipt=1&flag=1 [14] Infarmed, Pronturio Teraputico 9, Maro de 2010, Ministrio da Sade [15] Korashy, H. M., Brocks, D. R., et al. Induction of the NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1 by ketoconazole and itraconazole: A mechanism of cancer chemoprotection. Cancer Letters 2007 258(1): 135-143. [16] Farmacopeia Portuguesa VII, Infarmed e Ministrio da Sade

Anexos

Figura 1 Estrutura qumica do itraconazol

Figura 2 Esquema das reaces envolvidas na sntese do itraconazol (representado por um 1 na figura).

Figura 3 Esquema do mecanismo de aco do itraconazol na inibio da sntese de ergosterol, na clula fngica. Dada a selectividade do frmaco, a sntese de colesterol, nos mamferos, quase no afectada.

Figura 4 Estrutura das principais impurezas do itraconazol, descritas na Farmacopeia Portuguesa VII.

Tabela 1 Vrios anlogos do itraconazol usados num estudo de relao estrutura actividade. O composto 68 corresponde ao itraconazol.

Tabela 2 Resultados in vitro para diferentes espcies de fungos e resultados in vivo relacionando-se com a dose mnima necessria.

Tabela 3 Esquema da mistura de eluentes usada no ensaio de substncias aparentadas. So apresentados os intervalos e as propores de cada uma das fases mveis.