Universidad nacional autnoma de honduras

Escuela de microbiologa

Bioqumica clnica II

PROGESTERONE Anlisis ELISA para determinacin cuantitativa de progesterona en suero o plasma humano

Dra. Milena Vanegas

Grupo: Oscar David Amaya Noelia Florencia Chiessa Sara Alejandra Pino Marisabel Bueso

Fecha: 16 de mayo de 2012

Una paciente de 29 aos, casada desde hace 5 aos tiene problemas para embarazarse. El medico indica varios exmenes para evaluar su situacin clnica. El Dr. Prescribe niveles de progesterona, la paciente asiste al laboratorio para realizarse el examen. Realice el inmunoensayo cuantitativo con la muestra que se le brindara en el laboratorio y conteste las siguientes preguntas: 1. La progesterona es: a. carbohidratos b. enzima c. esteroide d. protenas e. amina

2. Quien (s) sintetiza (n) la progesterona, como es regulada? R// La biosntesis de progesterona se lleca acabo a partir de colesterol siguiendo la ruta colesterol-pregnenolona (por p450) y de pregnenolona progesterona (OHesteroidesdeshidrogenasa) , es regulada por LH y FSH por retroalimentacin.

3. Porque el medico indica medir progesterona en la paciente? Que sospecha? R// para ver si los niveles de progesterona estn elevados, al estar elevados hay sospechas de que puede padecer Sindrome de ovarios poliquisticos.

4. Cual es la utilidad clnica de la medicin de esta hormona? R// brindar un tratamiento oportuno.

5. mencione otras condiciones clnicas que se asocian a resultados elevados de la progesterona R// insuficiencia lutea, dismenorrea, cncer de mama

6. el inmunoensayo usado es (circule las respuestas necesarias) a. no competitivo b. competitivo c. heterogneo d. homogneo e. indirecto f. directo g. quimioluminiscente h. radiomtrico i. fluorescente

8. describa el principio del test. Incluya cual es el antgeno y cual es el anticuerpo, el tipo de inmunoensayo y que ocurre en una reaccin positiva R// interaccin competitiva de progesterona de la muestra y un conjunto enzimtico-hormonal por una cantidad limitada de anticuerpos (conejo) anti-progesterona inmovilizados. La progesterona es el antgeno y el conjugado enzimtico hormonal, en reaccin positiva es la cantidad de conjugado hormonal-enzimtico que es inversamente proporcional a la concentracin de progesterona enla muestra. 9. Una ves que usted a finalizado el test, como se valida la prueba? R// se valida si cumplen los siguientes criterios: Absorbencia mxima (cal A) A 1.0 El control debe analizarse en 3 concentraciones: Concentraciones de progesterona a 80% A max = 0.17 0.5 ng/ml Concentraciones de progesterona a 50% A max = 0.82 3.8 ng/ml Concentraciones de progesterona a 20% A max = 8.0 28.0 ng/ml

10. Cual es la composicin del conjugado? R//conjugado progesterona HRP BSA TRIS/MOPS buffer NaCl pH 6.9 0.2 0.5 % 0.05 mol/l 0.1 mol/l

11. Porque es critico el proceso de lavado? R// un lavado insuficiente producir una mala precisin o absorbencias falsamente elevadas.

12. Cual es el objetivo de uso de calibradores R// usar concentraciones estndar al momento de determinar la concentracin de la muestra 13. Cuales son los valores de referencia de este marcador tumoral. Porque hay intervalos diferenciados? R//

Valores de progesterona Mujeres normales: Fase folicular Fase luteal Menopausia Hombres normales: 0.2 1.4 ng/ml 4 25 ng/ml 0.1 1 ng/ml 0.1 1 ng/ml

Porque cada laboratorio determina sus propios rangos de referencia utilizando los instrumentos/equipos , mtodos de coleccin de sangre y tcnicas de anlisis usuales empleados normalmente en dicho laboratorio.