Biologia dos Tempos Modernos:

A regulao do ciclo celular

e os centrolos.
Zita Santos
UAAAUUUU! Adoro centrolos!!

Ep, tens de vir ao IGC!! Estou a assistir a uma aula bu interessante!!

Filipe Leal

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- A clula animal e o citoesqueleto

- Ciclo e Diviso celular

- Centrolos, Centrossomas e Clios/flagelos - Importncia dos Centrossomas na diviso celular - Organismos Modelo

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As diferenas entre uma clula animal e uma clula vegetal - recapitulao

O citosqueleto e a sua importncia na clula

Filamentos proteicos que conferem rigidez clula: Trfego intracelular Posicionamento de organelos Contraco muscular Movimento do esperma ...

Os diferentes componentes do citosqueleto

Actina

Microtbulos

Filamentos intermdios

A coexistncia dos trs componentes em clulas

Actina Microtbulos ADN

Microtbulos

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Clulas e o seu ciclo de vida: o ciclo celular

O ciclo celular um processo atravs do qual uma clula consegue gerar todas as condies para se multiplicar em duas novas clulas idnticas progenitora (mitose) ou quatro se for o caso da linha germinal que d origem aos gmetas para a reproduo sexual (meiose).

Constituio do ciclo celular

Constituio do ciclo celular

Constituio do ciclo celular

A dinmica do ciclo celular em geral

A dinmica do ciclo celular numa fase em particular: o exemplo da mitose

A importncia da regulao do ciclo celular: checkpoints

Spindle assembly checkpoint

O Spindle Assembly Checkpoint como exemplo de ponto de controlo

Consequncias de um ciclo celular anormal

A diviso celular um processo crtico: necessrio a sua ocorrncia, mas um ciclo celular defectivo pode ter consequncias extremas, como o cancro. Caritipo normal

Caritipo alterado

Consequncias de um ciclo celular defectivo

Diviso normal Diviso defectiva

Andrew Duncan et al 2010

(Godinho et al, 2010)

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Os centrolos vistos ao vivo por microscopia electrnica

Fuso mittico Centrolos

Centrolos/ Centrossoma

ADN

Citoesqueleto
ADN Citoesqueleto Centrolos

A dupla identidade dos centrolos

(Paintrand et al, 1992)

Formao de centrolos: Coordenao com o ciclo celular

(Cunha-Ferreira I, et al 2010; Hatch EF, et al 2010)

Duplicao e Alongamento dos pro-centrolos

Separao dos centrossomas

Muitas protenas controlam a formao dos centrolos

POC1 SAS4

SAK

Asl POC5

SAS6 SAS4

(Cunha-Ferreira I, et al 2010)

A dupla identidade dos centrolos

(Bettencourt-Dias & Glover, 2007; Paintrand et al, 1992)

Formao de clios em coordenao com o ciclo celular

Formao do clio primrio

Clulas com clio primrio (clios imveis)

Clulas multiciliadas (clios mveis)

Centrolos/clios e motilidade celular

Propulso da clula

Paramecium (organismo unicelular)

Espermatozides de ratinho

Motilidade em clulas fixas

Clulas ependimais (K. Lechtreck)

Centrolos/clios e perceo do ambiente

(Sfakianos, 2007) (Schermer and Benzing)

Clio primrio

- Sentir fluxo de fluidos ou compostos qumicos - Determinar assimetria nos rgos - Perceo e transduo da luz em input nervoso

Qin Liu & Eric A. Pierce

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Centrossoma ESSENCIAL para a diviso celular?

Meiose Feminina
Drosophila

Plantas

(Cullen CF et al, 2005)

(Khodjakov A , Rieder C L J, 2001)

Clulas humanas

Nucleao de microtbulos, com ou sem centrossomas???

No mesmo organismo existem mecanismos de nucleao de microtbulos dependentes e no dependentes de centrossomas

(Rebollo et al, 2004)

Nucleao de microtbulos a partir do DNA

Esferas de cromatina e tubulina so suficientes para formar

um fuso mittico em extratos de ovos de Xenopus!!!

(Dinarina et al, 2009 )

Formao do fuso mittico com participao dos centrossomas e dos cromossomas

(Walczak and Heald, 2008)

Centrossomas e divises celulares assimtricas

(Gonczy, 2008; Cheeks et al 2004)

Embrio de C. elegans

Neuroblastos de Drosophila

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Organismos modelo
Permitem desvendar os mecanismos moleculares e celulares

A mosca da fruta: Drosophila melanogaster

Thomas Hunt Morgan, 1900
Geneticamente manipulvel Tempo de gerao reduzido Fcil de manter em laboratrio Diferentes sistemas teis no estudo do ciclo celular

O que podemos aprender com Drosophila...

Drosophila sob o
efeito de cocana

Agressividade em Drosophila

Sero as descobertas feitas em mosca relevantes para os humanos?

Enzimas presentes em mosca esto igualmente presentes em humanos
(Manning et al, 2002)

Desenvolvimento de inibidores:
Polo e Aurora enzimas mitticas essenciais

(David Glovers lab)

Estas enzimas esto sobre expressas em diversos tumores

Polo Fase 1 de
ensaios clnicos

Aurora -

desenvolvimento prclnico (AstraZeneca AZD1152)

Late 80s-90s

Late 90s-

2000-

Mnica Bettencourt Dias group

YIP & Installation Grant & Fellowships

O meu projeto de investigao

Observao: Centrolos e flagelos so importantes para a motilidade do esperma. A protena BLD10 essencial para a construo do flagelo do esperma. Mutantes de mosca da fruta que no contm esta protena tem flagelos sem o par de microtbulos central que essencial para a motilidade.

Pergunta: Qual a funo da protena BLD10 na construo do flagelo?

Hiptese: Uma vez que o flagelo composto por microtbulos, a BLD10 pode estar envolvida na formao destes microtbulos.

O meu projeto de investigao

Resultados: A BLD10 tem a capacidade de ligar-se e estabilizar microtbulos.

Concluso: Durante a formao do esperma, a BLD10 tem uma funo essencial ligando-se e estabilizando o par central de microtbulos.

O meu projeto de investigao

Observao: a formao de centrolos um processo muito regulado. Sabemos que existe uma protena essencial para a sua duplicao, denominada SAK/PLK4. Na sua ausncia no se formam centrolos e se estiver a mais formam-se demasiados.

Pergunta: Podemos utilizar os ovos de sapo como sistema para perceber melhor as
funes desta enzima?

Hiptese: nos ovos de sapo, a SAK/PLK4 tem a capacidade de formar centrolos como noutros sistemas j descritos.

O meu projeto de investigao: Resultados

O meu projeto de investigao: Resultados

Microtbulos

Microtbulos

O meu projeto de investigao: Resultados

Amostra

1 um

1 um

Controlo

Artigos cientficos
Artigo de investigao Artigo de reviso

Artigos cientficos Journal Club

Objetivos:
- qual o tema de estudo da investigao; - como foi conduzida a investigao;

- quais as principais descobertas e a sua contextualizao na rea

?
Summary Introduction Discussion

Results
Material and Methods

Descoordenao (clios sensoriais) Esterilidade masculina (flagelos)

Mutantes de SAS4 Defeitos nas divises assimtricas